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Protection of Mice from Lethal Endotoxemia by Chimeric Human BPI-Fcγ1 Gene Delivery 被引量:7
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作者 Chen Li Jing Li +4 位作者 Zhe Lv Xinghua Guo Qinghua Chen Qingli Kong Yunqing An 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2006年第3期221-225,共5页
To evaluate the potentiality of applying gene therapy to endotoxemia in high-risk patients, we investigated the effects of transferring an adeno-associated virus serotype 2 (AAV2)-mediated BPI-Fcγ1 gene on protecti... To evaluate the potentiality of applying gene therapy to endotoxemia in high-risk patients, we investigated the effects of transferring an adeno-associated virus serotype 2 (AAV2)-mediated BPI-Fcγ1 gene on protecting mice from challenge of lethal endotoxin. The chimeric BPI-Fcγ1 gene consists of two parts, one encods functional N-terminus (1 to 199 amino acidic residues) of human BPI, which is a bactericidal/permeability-increasing protein, and the other encodes Fc segment of human immunoglobulin G1 (Fcγ1). Our results indicated that the target protein could be expressed and secreted into the serum of the gene-transferred mice. After lethal endotoxin challenge, the levels of endotoxin and TNF-a in the gene-transferred mice were decreased. The survival rate of the BPI-Fcγ1 gene-transferred mice was markedly increased. Our data suggest that AAV2-mediated chimeric BPI-Fcγ1 gene delivery can potentially be used clinically for the protection and treatment of endotoxemia and endotoxic shock in high-risk individuals. Cellular & Molecular Immunology. 2006;3(3):221-225. 展开更多
关键词 bpi-fcγ1 AAV2 gene therapy minimal lethal dose (MLD)
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重组BPI_(23)-Fcγ1融合蛋白在CHO细胞中的表达 被引量:6
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作者 徐俊杰 徐静 +1 位作者 童贻刚 王海涛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期587-589,共3页
The fusion gene of BPI 23 and human Fcγ1 was obtained by PCR method,and the expression plasmid was constructed to express recombinant BPI 23 \|Fcγ1 fusion protein in CHO cells.After transfection with the plasmid and... The fusion gene of BPI 23 and human Fcγ1 was obtained by PCR method,and the expression plasmid was constructed to express recombinant BPI 23 \|Fcγ1 fusion protein in CHO cells.After transfection with the plasmid and selection by methotrexate,the cell lines expressing the fusion protein were obtained.The recombinant protein was purified using cation\|exchange chromatography and its bioactivity was proved with bactericidal assays. 展开更多
关键词 杀菌/通透性增加蛋白 BPI23-Fcγ1融合蛋白 表达 CHO细胞 重组
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定点突变对BPI_(23)-Fcγ1重组抗菌蛋白表达和复性率的影响 被引量:4
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作者 安云庆 柯岩 +1 位作者 靖学芳 杨贵贞 《首都医科大学学报》 CAS 2002年第3期197-201,共5页
为提高BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白在原核表达系统中的表达和复性率 ,采用定点突变法改造 pBV BPI60 0 Fcγ1 70 0 重组表达载体 ,转化E .coliDH5α后 ,通过温控诱导表达。结果表明 :①突变后BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白表达量比突变前... 为提高BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白在原核表达系统中的表达和复性率 ,采用定点突变法改造 pBV BPI60 0 Fcγ1 70 0 重组表达载体 ,转化E .coliDH5α后 ,通过温控诱导表达。结果表明 :①突变后BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白表达量比突变前提高约 1 0 % ;②表达时间提前约 1h ;③抗菌活性未受影响 ; 展开更多
关键词 定点突变 pBV-BPI600-Fcγ1700重组表达载体 BPI23-Fcγ1重组抗菌蛋白
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BPI_(23)-Fcγ1重组融合蛋白在E.coli中的表达 被引量:3
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作者 柯岩 安云庆 杨贵贞 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期451-455,共5页
目的 构建pBV BPI60 0 Fcγ170 0 重组表达载体 ,转化E .coliDH5α诱导表达BPI2 3 Fcγ1抗菌重组蛋白。方法 采用RT PCR技术 ,从HL 6 0细胞和正常人白细胞mRNA中扩增编码BPI2 3 和IgG1Fc(Fcγ1)的基因 ;通过连接反应构建重组克隆载... 目的 构建pBV BPI60 0 Fcγ170 0 重组表达载体 ,转化E .coliDH5α诱导表达BPI2 3 Fcγ1抗菌重组蛋白。方法 采用RT PCR技术 ,从HL 6 0细胞和正常人白细胞mRNA中扩增编码BPI2 3 和IgG1Fc(Fcγ1)的基因 ;通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体 ;转化感受态E .coliDH5α细胞 ,通过温控诱导表达BPI2 3 Fcγ1重组蛋白。结果  (1)RT PCR获得预期的扩增产物BPI60 0bp和Fcγ170 0bp基因片段 ;(2 )成功构建pUC18 BPI180 、pUC18 BPI4 2 0 、pUC18 Fcγ170 0 重组克隆载体 ,DNA测序结果与文献报道一致 ;(3)成功构建pBV BPI60 0 Fcγ170 0 重组表达载体 ,酶切图谱分析与预期结果相符 ;(4 )转化感受态E .coliDH5α细胞 ,通过温控诱导表达BPI2 3 Fcγ1重组蛋白 ,表达量约占菌体蛋白总量的 2 0 %~ 30 % ;(5 )复性后重组蛋白具有抗菌活性和结合蛋白A的作用。结论 pBV BPI60 0 Fcγ170 0 重组表达载体构建成功 ;在E .coli中得到表达 ,获得具有抗菌活性的BPI2 3 展开更多
关键词 BPI23-Fcγ1重组蛋白 聚合酶链反应 抗菌蛋白
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