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Avibacterium paragallinarum: an emerging birds pathogen in Qinling wildlife conservation center, China
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作者 Honglin Xie Hui Li +8 位作者 Chenfei Yu Yongqiang Miao Yaping Wu Ruoyi Jia Qiang Zhang Guanglin Pan Qingyi Ma Kangsheng Jia Xinglong Wang 《Animal Diseases》 CAS 2023年第3期225-230,共6页
The bacterium Avibacterium paragallinarum,previously known as Haemophilus paragallinarum,is responsible for caus-ing infectious coryza(IC)in chickens and other avian species.In this case report,an outbreak of Avibacte... The bacterium Avibacterium paragallinarum,previously known as Haemophilus paragallinarum,is responsible for caus-ing infectious coryza(IC)in chickens and other avian species.In this case report,an outbreak of Avibacterium paragal-linarum occurred in the Qinling area of China,resulting in clinical symptoms of facial swelling in several bird species,including Golden pheasant,Temminck's tragopan,and Peafowls,and three Golden pheasants died due to prolonged infection.Specific PCR results confrmed the presence of the pathogen in the infected birds.The report describes the clinical symptoms and pathological changes observed in the affected birds,as well as the isolation and identification of Avibacterium paragallinarum.Whole-genome sequencing and phylogenetic anal sis y were performed,and this is the frst report of inter-and intra-species transmission of infectious coryza among wild birds in China. 展开更多
关键词 Infectious coryza avibacterium paragallinarum Avian diseases PATHOGEN Wlidlife Case report
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副鸡禽杆菌TonB转座子插入突变株的生物学特性
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作者 范冰冰 邵艳 +6 位作者 张权 黎璐璐 路静雯 卢淑淇 徐维维 孙卫东 蒋蔚 《微生物学报》 北大核心 2025年第10期4528-4536,共9页
【目的】探究生物被膜形成能力减弱的转座子插入突变株对副鸡禽杆菌生物学特性的调控作用。【方法】以野生株JZIC-005和转座子突变株Tn-1504(从突变库中筛选获得,生物被膜形成能力减弱)为研究对象,进行插入位点鉴定及生物学特性分析。... 【目的】探究生物被膜形成能力减弱的转座子插入突变株对副鸡禽杆菌生物学特性的调控作用。【方法】以野生株JZIC-005和转座子突变株Tn-1504(从突变库中筛选获得,生物被膜形成能力减弱)为研究对象,进行插入位点鉴定及生物学特性分析。【结果】PCR验证显示转座子特异性插入副鸡禽杆菌TonB基因中。与野生株相比,突变株Tn-1504的增殖能力未发生显著改变(P>0.05),但对DF-1细胞的黏附率降低46.57%,侵袭率下降77.61%,细胞毒性减弱34.97%。上述表型差异均具有统计学意义(P<0.01)。【结论】本研究证实TonB基因失活可特异性削弱副鸡禽杆菌的宿主黏附、侵袭及毒性特征,为解析该病原致病机制及抗毒力策略开发提供了关键靶点。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 转座子 生物学特性 TONB
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副鸡禽杆菌A、B、C血清型疫苗候选菌株的免疫原性 被引量:1
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作者 朱晨浩 侯晓岚 +4 位作者 吕虹雨 王增元 徐丽丽 蔡晴霞 徐宏军 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2025年第1期100-105,共6页
为了研究副鸡禽杆菌(Apg)3种血清型疫苗候选菌株的免疫原性,本试验制备Apg疫苗候选菌株LY株(A型)、HB株(B型)和KM(C型)抗原含量分别为4.0×10^(8)、5.0×10^(8)和8.0×10^(8)CFU/mL的单价灭活疫苗,对4~6周龄SPF鸡进行免疫,... 为了研究副鸡禽杆菌(Apg)3种血清型疫苗候选菌株的免疫原性,本试验制备Apg疫苗候选菌株LY株(A型)、HB株(B型)和KM(C型)抗原含量分别为4.0×10^(8)、5.0×10^(8)和8.0×10^(8)CFU/mL的单价灭活疫苗,对4~6周龄SPF鸡进行免疫,并在免疫后28 d使用相对应血清型菌株对试验鸡只进行攻毒,依据攻毒结果确定各血清型菌株的最小免疫量,评价其免疫原性。结果显示,鸡只免疫后28 d进行攻毒,在LY株试验中,各免疫组免疫保护率分别为8/10、9/10和10/10;在HB株试验中,各免疫组免疫保护率分别为6/10、8/10和8/10;在KM株试验中,各免疫组免疫保护率分别为2/10、5/10和8/10。3种血清型菌株攻毒对照组发病率分别为9/10、10/10和10/10,均不低于发病标准(8/10),攻毒试验成立。LY株抗原含量分别为4.0×10^(8)、5.0×10^(8)和8.0×10^(8)CFU/mL,HB株抗原含量分别为5.0×10^(8)和8.0×10^(8)CFU/mL,KM株抗原含量为8.0×10^(8)CFU/mL时攻毒保护率均达到8/10及以上,符合免疫保护标准(8/10)。通过结果得出LY株、HB株和KM株的最小免疫量分别为2.0×10^(8)、2.5×10^(8)和4.0×10^(8)CFU/羽份,可以按该标准检验疫苗候选菌株的免疫原性,为后续开发鸡传染性鼻炎(IC)三价灭活疫苗提供参考。 展开更多
关键词 鸡传染性鼻炎 副鸡禽杆菌 疫苗 最小免疫量
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63株副鸡禽杆菌分离鉴定及HMTp210基因序列分析方法在血清型鉴定中的应用
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作者 霍现格 赵晓东 +4 位作者 范晶鑫 刘武杰 郑念军 栗绍文 张欣 《中国家禽》 北大核心 2025年第7期32-39,共8页
为了解我国鸡传染性鼻炎(Infectious coryza,IC)流行情况,同时建立基因分型方法对副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)的血清型进行分型,研究对2021—2024年从全国16个省份采集的292份疑似病料进行病原分离鉴定,并对分离株进行... 为了解我国鸡传染性鼻炎(Infectious coryza,IC)流行情况,同时建立基因分型方法对副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)的血清型进行分型,研究对2021—2024年从全国16个省份采集的292份疑似病料进行病原分离鉴定,并对分离株进行HMTp210基因测序比对。结果显示:共分离到63株副鸡禽杆菌,阳性率为21.5%(63/292),分别为31株血清A型,3株血清B型和29株血清C型,不同地区血清型分布存在差异;基于HMTp210基因比对分析,可以将分离株分为3种Page血清型,与平板凝集血清型鉴定结果符合度为100%;根据与参考株遗传进化距离,可以将63株分离株、13株GenBank上传株与52株参考株分为9种Kume血清型;HMTp210基因同源性比对结果显示,相同Kume血清型的分离株与参考株之间同源性高于与其他Kume血清型分离株和不同型参考株的同源性,证明通过HMTp210基因比对分析对血清型分型可靠性高。研究表明,监测地区Apg流行血清型主要以A和C型为主,建立的HMTp210基因序列比对分析鉴定血清型方法可以对Apg分离株进行Page血清型和Kume血清型快速、准确地分型,为科学有效防控IC提供依据。 展开更多
关键词 鸡传染性鼻炎 副鸡禽杆菌 血清型 HMTp210基因 基因型
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一株A型副鸡禽杆菌的分离与鉴定 被引量:1
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作者 殷梦玉 李枫 +6 位作者 郭云清 张腾飞 张文婷 胡巧 卢琴 翟新国 罗青平 《湖北农业科学》 2024年第11期134-140,共7页
对湖北省某规模化养鸡场中肿头肿脸病料进行病原菌分离,对分离菌株进行分子生物学、生化特性、血清型和耐药性鉴定,并测定了分离菌株基因组序列,通过动物回归试验验证菌株致病性。结果表明,从病料中分离出白色圆形、边缘光滑、半透明露... 对湖北省某规模化养鸡场中肿头肿脸病料进行病原菌分离,对分离菌株进行分子生物学、生化特性、血清型和耐药性鉴定,并测定了分离菌株基因组序列,通过动物回归试验验证菌株致病性。结果表明,从病料中分离出白色圆形、边缘光滑、半透明露珠样的菌落,革兰氏染色为阴性短杆菌,卫星试验中呈典型的“卫星”现象,分离菌株的16S rRNA与已报道的副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum)高度同源,血清型鉴定为A型;药敏试验结果显示分离株对甲氧苄胺嘧啶、林可霉素和阿米卡星耐药,对强力霉素、大观霉素等多种抗生素敏感;动物回归试验显示,分离菌株引起雏鸡典型的肿头肿脸症状,病理切片显示菌株造成雏鸡的肺脏、肝脏以及脾脏出现明显的病变。分离株二代全基因组测序结果显示分离株有53个耐药基因和121个毒力基因。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌(avibacterium paragallinarum) 生化特性 致病力 基因组
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三型副鸡禽杆菌对SPF鸡的致病力试验 被引量:11
6
作者 龚玉梅 张培君 +2 位作者 孙惠玲 王宏俊 贺云霞 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第2期33-36,共4页
为探讨3株A型C-Hpg 8(CVCC254)、B型(BJ-05株)和C型(668)副鸡禽杆菌对SPF鸡的致病力,用120只57日龄SPF鸡进行了此3个菌株的致病力试验,分别眶下窦内接种1.5×104cfu/0.2 mL.只-1~400×104cfu/(0.2 mL/只-1)C-Hpg 8、BJ-05株和... 为探讨3株A型C-Hpg 8(CVCC254)、B型(BJ-05株)和C型(668)副鸡禽杆菌对SPF鸡的致病力,用120只57日龄SPF鸡进行了此3个菌株的致病力试验,分别眶下窦内接种1.5×104cfu/0.2 mL.只-1~400×104cfu/(0.2 mL/只-1)C-Hpg 8、BJ-05株和668株,每个剂量攻击5只鸡,攻毒后观察7 d,结果除1只鸡未发病外,119只鸡均呈现典型的鸡传染性鼻炎症状。结果表明,C-Hpg 8、BJ-05株和668株副鸡禽杆菌对SPF鸡均有很强的致病力。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 SPF鸡 致病力 血清型
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B型副鸡禽杆菌安徽株的分离与鉴定 被引量:15
7
作者 路迎迎 路明华 +3 位作者 陈小玲 张培君 龚玉梅 王宏俊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第1期122-125,共4页
2012年12月,安徽某些蛋鸡养殖场出现大量鼻炎症状的病鸡,主要表现为眼结膜发炎,眼睑肿胀、流泪,一侧或两则颜面肿胀,产蛋鸡产蛋量明显下降。为探索该病病因及制定有效防治措施,对病鸡样品进行了细菌学检验。通过细菌分离、PCR、平板凝... 2012年12月,安徽某些蛋鸡养殖场出现大量鼻炎症状的病鸡,主要表现为眼结膜发炎,眼睑肿胀、流泪,一侧或两则颜面肿胀,产蛋鸡产蛋量明显下降。为探索该病病因及制定有效防治措施,对病鸡样品进行了细菌学检验。通过细菌分离、PCR、平板凝集及血清型检测等方法,鉴定出4株副鸡禽杆菌,该分离株感染试验鸡能复制出与临床表现一致的病例。经实验室检验确认,引起该病的病原体是B型副鸡禽杆菌。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 B型 分离 鉴定
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副鸡禽杆菌外膜蛋白GcbG的表达及免疫效果研究 被引量:6
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作者 赵成全 路明华 +3 位作者 李淑芳 张培君 龚玉梅 王宏俊 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期58-63,共6页
为研究副鸡禽杆菌外膜蛋白GcbG的免疫原性,克隆了副鸡禽杆菌荚膜蛋白合成相关的编码基因gcbG,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-gcbG,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中进行诱导表达。结果表明,重组菌在28℃培养条件下经1mmol/L的IPTG... 为研究副鸡禽杆菌外膜蛋白GcbG的免疫原性,克隆了副鸡禽杆菌荚膜蛋白合成相关的编码基因gcbG,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-gcbG,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中进行诱导表达。结果表明,重组菌在28℃培养条件下经1mmol/L的IPTG诱导6h可分泌表达GcbG蛋白,且其表达量最高。Western-blot分析表明,所表达的蛋白能与副鸡禽杆菌阳性血清发生特异性免疫印迹反应,说明所表达的蛋白具有较好的反应原性。动物试验表明,所表达的蛋白能为鸡提供较好的保护力。上述试验结果为进一步研究荚膜蛋白的生物学特性及亚单位疫苗的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 gcbG基因 原核表达 动物试验
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副鸡禽杆菌抗原表位的筛选与鉴定 被引量:5
9
作者 王宏俊 龚玉梅 +2 位作者 高亚萍 柳川 张培君 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期587-592,共6页
用C型副鸡禽杆菌(Apg)单克隆抗体作为靶标,筛选噬菌体展示随机12肽库,从中获得与之特异性结合的噬菌体克隆,建立了一种筛选副鸡禽杆菌表位的方法。测序结果显示,第3轮筛选后,80%的噬菌体克隆具有氨基酸共同序列Y-P-Q(A)WW,含有上述共有... 用C型副鸡禽杆菌(Apg)单克隆抗体作为靶标,筛选噬菌体展示随机12肽库,从中获得与之特异性结合的噬菌体克隆,建立了一种筛选副鸡禽杆菌表位的方法。测序结果显示,第3轮筛选后,80%的噬菌体克隆具有氨基酸共同序列Y-P-Q(A)WW,含有上述共有序列的噬菌体克隆不仅可以与靶抗体特异结合,还可与C型Apg细菌竞争结合靶抗体;将编码YSPHQWWLSGAV的DNA片段插入质粒pFliTrx的多克隆位点,转化E.coliGI826并在鞭毛成功展示;该重组菌能与靶抗体特异结合;用重组菌免疫试验鸡能产生C型Apg细菌的特异性抗体;用C型668株Apg攻毒,免疫接种鸡获得37.5%保护。提示该表位肽用于研制鸡传染性鼻炎疫苗具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 表位 噬菌体展示
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副鸡禽杆菌3个血清型参考菌株生长曲线的测定和比较 被引量:7
10
作者 姚东璧 李复煌 +4 位作者 谢三磊 李桂萍 徐福州 房慧伶 孙惠玲 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第7期43-46,共4页
为探索副鸡禽杆菌生长特性,比较不同血清型菌株生长特性的差异,采用分光光度法和菌落计数法分别测定副鸡禽杆菌血清A型(221株)、血清B型(0222株)、血清C型(Modesto株)3个参考菌株的生长曲线,对两种方法测定的生长曲线进行比较。结果表明... 为探索副鸡禽杆菌生长特性,比较不同血清型菌株生长特性的差异,采用分光光度法和菌落计数法分别测定副鸡禽杆菌血清A型(221株)、血清B型(0222株)、血清C型(Modesto株)3个参考菌株的生长曲线,对两种方法测定的生长曲线进行比较。结果表明,两种方法绘制的生长曲线差异较大,对数生长期和稳定期菌液OD 600nm值与活菌数对数之间呈现一元二次多项式回归关系。另外,3个血清型菌株的生长稳定期都比较短暂,各型菌株达到生长高峰的时间和活菌数都有差异。该试验为副鸡禽杆菌生物学特性的比较研究及疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 生长曲线 生长特性
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鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联灭活疫苗的研究 被引量:8
11
作者 龚玉梅 张培君 +4 位作者 朱文革 贺云霞 王宏俊 张瑜 邵庆红 《动物医学进展》 北大核心 2015年第1期40-44,共5页
利用Page A型、B型、C型副鸡禽杆菌和新城疫病毒La Sota株,研制鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联油乳剂灭活疫苗。用3个批次疫苗进行单剂量(0.5mL/次)3次接种和大剂量(2.0mL)单次接种的安全性试验、SPF鸡的免疫效力试验、商品鸡的... 利用Page A型、B型、C型副鸡禽杆菌和新城疫病毒La Sota株,研制鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联油乳剂灭活疫苗。用3个批次疫苗进行单剂量(0.5mL/次)3次接种和大剂量(2.0mL)单次接种的安全性试验、SPF鸡的免疫效力试验、商品鸡的免疫持续期试验和疫苗的保存期试验。结果表明,3批疫苗对试验鸡安全无副作用;免疫接种SPF鸡只30d后对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%,用20μL/只疫苗免疫接种SPF鸡21d后新城疫的平均HI抗体〉24;商品鸡42日龄首免,110日龄二免,二免后9个月对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,对新城疫病毒强毒100%保护;用4℃-8℃保存12个月和15个月的3批疫苗进行了SPF鸡的近期免疫效力试验,结果对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,用20μL/只疫苗免疫SPF鸡,免疫接种后21d新城疫病毒的平均HI抗体〉2^4,对新城疫病毒强毒的攻毒保护率〉70%。说明研制的疫苗安全有效。 展开更多
关键词 鸡传染性鼻炎 新城疫 三价 二联 灭活疫苗
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B型副鸡禽杆菌田间分离株的毒力及免疫原性研究 被引量:4
12
作者 王秀丽 于永 +5 位作者 于雷 李旭妮 蒋玉文 辛凌翔 张媛 李俊平 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第1期1-4,9,共5页
为探索分离自安徽省某大型白羽鸡场的1株B型副鸡禽杆菌的毒力及免疫原性,本试验测定了该菌对5~6胚龄SPF鸡胚及35~40日龄SPF鸡的毒力,并用该菌株制备免疫原,免疫35~40日龄SPF鸡,用攻毒的方法测定菌株的免疫原性,同时对本菌株制备的抗原... 为探索分离自安徽省某大型白羽鸡场的1株B型副鸡禽杆菌的毒力及免疫原性,本试验测定了该菌对5~6胚龄SPF鸡胚及35~40日龄SPF鸡的毒力,并用该菌株制备免疫原,免疫35~40日龄SPF鸡,用攻毒的方法测定菌株的免疫原性,同时对本菌株制备的抗原及目前国内、国外市场上销售的鸡传染性鼻炎A型、B型、C型三价或二价灭活疫苗的免疫效力进行比较。毒力试验结果显示,本菌株对SPF鸡胚的最小致死剂量为110 CFU,对SPF鸡的最小发病剂量为5.5×10^(3) CFU。免疫原性试验结果显示,本菌株制备的抗原免疫鸡能有效抵抗本菌株的攻击,说明本菌株的免疫原性良好,而市场上销售的鸡传染性鼻炎三价/二价灭活疫苗免疫鸡均无法抵抗本菌株的攻击,说明市场上销售的疫苗对本菌株的保护效果较差,B型菌疫苗间的交叉保护效果不理想。本试验为B型鸡传染性鼻炎疫苗的研究提供参考和物质基础。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 毒力 免疫原性 疫苗
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副鸡禽杆菌的指纹图谱分型 被引量:3
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作者 王雪敏 吕学泽 +4 位作者 梁玉荣 贺云霞 张培君 龚玉梅 王宏俊 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1140-1143,共4页
为了探索副鸡禽杆菌的新型分型方法,以肠杆菌基因间共有重复序列(ERIC)和随机核苷酸多态性片段(RAPD)为靶序列进行PCR扩增,对所得指纹图谱用POPGENE和MEGA4.0软件进行遗传距离的计算和聚类分析。结果显示,2种方法均能得到丰富﹑稳定的... 为了探索副鸡禽杆菌的新型分型方法,以肠杆菌基因间共有重复序列(ERIC)和随机核苷酸多态性片段(RAPD)为靶序列进行PCR扩增,对所得指纹图谱用POPGENE和MEGA4.0软件进行遗传距离的计算和聚类分析。结果显示,2种方法均能得到丰富﹑稳定的指纹图谱,其多态性为85.7%(18/21);10个国际标准株、血清C型疫苗株以及4个国内分离株可分为11个谱型,聚为4类。划分的11个谱型可以和现有分型方法中的不同亚型一一对应,提示这种方法可以区分不同血清亚型。表明指纹图谱技术可以有效地区分不同菌株,从而为分子流行病学调查和疫苗研制提供了参考。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 ERIC-PCR RAPD-PCR 聚类分析
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副鸡禽杆菌外膜蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量:4
14
作者 梅晨 李淑芳 +3 位作者 黄明明 孙爱华 龚玉梅 王宏俊 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期22-25,31,共5页
副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)是鸡传染性鼻炎的致病菌,可以引起急性呼吸道病,可导致蛋鸡产蛋率下降、从而造成严重的经济损失。副鸡禽杆菌引起的症状与鸡毒支原体等病原引起的其他上呼吸道传染病非常相似,本试验利用副... 副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)是鸡传染性鼻炎的致病菌,可以引起急性呼吸道病,可导致蛋鸡产蛋率下降、从而造成严重的经济损失。副鸡禽杆菌引起的症状与鸡毒支原体等病原引起的其他上呼吸道传染病非常相似,本试验利用副鸡禽杆菌外膜蛋白,建立间接 ELISA 抗体检测方法,用于血清抗体的检测。通过分析副鸡禽杆菌外膜蛋白HMTp210中较为保守的P9片段,将其进行原核表达并纯化,纯化的P9蛋白免疫鸡制备了抗血清。结果显示,P9蛋白分子量62Ku,纯度80%以上。以纯化的蛋白P9作为包被抗原,采用棋盘滴定法确定了抗原最佳包被浓度为1μg/Ml、血清样品最佳稀释度为1∶100,作用时间为 60min;酶标二抗的最佳稀释浓度为1∶10000,最佳作用时间为 30min;底物显色时间为15 min;阴、阳性的判定值为0.3。按上述条件建立的间接ELISA方法可以检测出P9蛋白免疫后的鸡血清及三种血清型副鸡禽杆菌的阳性鸡血清,与其他禽病病原体抗血清无交叉反应,本研究为检测副鸡禽杆菌血清抗体提供了一种新的方法。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 抗原蛋白 P9 间接 ELISA
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副鸡禽杆菌SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:3
15
作者 苗立中 王艳 +3 位作者 付强 孟霞 孙翠平 谢金文 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期57-62,共6页
根据GenBank公布的副鸡禽杆菌hagA基因序列设计特异性引物,经PCR扩增出了123bp的片段。产物经回收与pMD18-T Vector连接后转化到基因工程菌DH5α中,提取重组质粒,经PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线,... 根据GenBank公布的副鸡禽杆菌hagA基因序列设计特异性引物,经PCR扩增出了123bp的片段。产物经回收与pMD18-T Vector连接后转化到基因工程菌DH5α中,提取重组质粒,经PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线,并做敏感性试验、特异性试验、重复性试验和临床检测应用。结果显示,标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数R2=0.999 8;溶解曲线特异,产物Tm在81.3~81.5℃之间;最低检测限为0.18拷贝/μL,其敏感性比常规PCR至少高100倍;该方法不与其细菌发生交叉反应,呈现很好的特异性;重复性试验中,批内和批间变异系数均小于1%,说明该方法重复性很好;临床副鸡禽杆菌样本的检测结果表明所建立的荧光定量PCR方法的检测率明显高于常规PCR方法,为该病的早期快速诊断,并定量分析副鸡禽杆菌感染程度奠定了基础。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 SYBR Green I 实时荧光定量PCR 标准曲线
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1例副鸡禽杆菌和鼻气管鸟杆菌混合感染的诊断 被引量:6
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作者 梅晨 王琪琎 +3 位作者 先宏 张雪 胡伟 王宏俊 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期61-64,I0006,共5页
2019年3月,北京某鸡场产蛋鸡群中出现大量面部、眼睑严重肿胀等急性病例,为探明其发病原因,本试验进行了病原菌分离鉴定、分离株16S rRNA测序、药敏试验、动物回归试验。结果显示,从病鸡体内分离到副鸡禽杆菌和鼻气管鸟杆菌2种致病菌。... 2019年3月,北京某鸡场产蛋鸡群中出现大量面部、眼睑严重肿胀等急性病例,为探明其发病原因,本试验进行了病原菌分离鉴定、分离株16S rRNA测序、药敏试验、动物回归试验。结果显示,从病鸡体内分离到副鸡禽杆菌和鼻气管鸟杆菌2种致病菌。血凝和血凝抑制试验结果表明,分离到的副鸡禽杆菌为A型;免疫琼扩试验结果显示,鼻气管鸟杆菌为A型。药敏试验显示,2株分离菌对氨苄西林、强力霉素等敏感,对链霉素及卡那霉素均不敏感。动物回归试验中,试验鸡单独感染副鸡禽杆菌分离株就会出现眼睑肿、浆液性鼻液、结膜炎等典型症状,单独感染鼻气管鸟杆菌的鸡也会发生流鼻液、呼吸紊乱等症状;混合感染的鸡发病症状比单独感染的鸡更为严重,病程加长。从人工感染发病鸡分泌物中可以成功分离出上述2种病原菌。本研究在国内首次发现副鸡禽杆菌和鼻气管鸟杆菌共感染的病例,为预防、控制和诊断鸡肿头综合征提供新思路。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 鼻气管鸟杆菌 分离鉴定 混合感染
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表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌的构建及其免疫原性研究 被引量:2
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作者 梅晨 李淑芳 +2 位作者 孙爱华 龚玉梅 王宏俊 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1388-1393,共6页
为构建表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌,本试验按照乳酸乳球菌表达的偏好性,优化合成副鸡禽杆菌外膜蛋白p9的编码碱基序列,将其接入表达载体pNZ8149的多克隆位点并导入食品级乳酸乳球菌NZ3900。将重组乳酸乳球菌灭活后经肌肉注... 为构建表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌,本试验按照乳酸乳球菌表达的偏好性,优化合成副鸡禽杆菌外膜蛋白p9的编码碱基序列,将其接入表达载体pNZ8149的多克隆位点并导入食品级乳酸乳球菌NZ3900。将重组乳酸乳球菌灭活后经肌肉注射免疫SPF鸡,免疫后攻毒测定乳酸乳球菌的保护效果,检测血清中IgG抗体和鼻黏膜sIgA抗体水平并检验免疫效果。PCR结果显示,成功构建了含p9片段的重组乳酸乳球菌,Western-blot检测显示,p9片段可在重组乳酸乳球菌内表达。重组菌最佳诱导表达条件:Nisin浓度为20 ng/mL、诱导时间为4 h。鸡肌肉注射免疫后可产生p9蛋白特异性的血清Ig G和鼻黏膜sIgA抗体。乳酸乳球菌重组疫苗免疫鸡对副鸡禽杆菌攻毒的保护率为60%-80%。结果表明,本研究成功构建了重组乳酸乳球菌pNZ8149-p9/NZ3900,该重组菌作为免疫原免疫鸡,对副鸡禽杆菌攻毒具有较好的免疫保护作用。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 重组乳酸乳球菌 IGG SIGA
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副鸡禽杆菌外膜囊泡提取及成分分析 被引量:3
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作者 梅晨 孙爱华 +2 位作者 李淑芳 龚玉梅 王宏俊 《动物医学进展》 北大核心 2019年第11期44-49,共6页
为研究副鸡禽杆菌外膜囊泡(OMVs)的构成,提取A型副鸡禽杆菌的OMVs,纯化并透射电镜观察其形态结构,检测其内毒素含量和DNA含量,分析其是否具有血凝活性,测定OMVs蛋白含量,并用质谱法分析了OMVs的蛋白组成成分。结果显示,副鸡禽杆菌的OMV... 为研究副鸡禽杆菌外膜囊泡(OMVs)的构成,提取A型副鸡禽杆菌的OMVs,纯化并透射电镜观察其形态结构,检测其内毒素含量和DNA含量,分析其是否具有血凝活性,测定OMVs蛋白含量,并用质谱法分析了OMVs的蛋白组成成分。结果显示,副鸡禽杆菌的OMVs呈球形、泡状,直径为20 nm^300 nm,含有内毒素和少量核酸物质。该OMVs不能凝集鸡红细胞,Western blot结果表明,OMVs蛋白与该菌外膜蛋白单克隆抗体有阳性反应,构成OMVs的蛋白分子质量大多集中于65 ku和13 ku处,蛋白成分主要有ATP依赖性RNA解旋酶等多种功能酶、铁链霉素B受体、膜蛋白等结构成分和一些未知功能的假定蛋白等,为进一步分析副鸡禽杆菌外膜囊泡在致病和免疫方面的作用奠定基础。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 外膜囊泡 质谱分析
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2017-2019年我国部分规模场副鸡禽杆菌的感染状况分析 被引量:7
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作者 马国明 尤永君 +4 位作者 牛山 冯敬敬 范莉莉 李春鹏 张国中 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期1-5,共5页
本试验在2017-2019年间从全国17个省市地区240个规模化养殖场鸡群采集1 403份临床样本,进行了副鸡禽杆菌(Apg)的分离鉴定、PCR检测和测序分析。结果显示,3年间临床疑似鸡传染性鼻炎(IC)发病鸡样品中Apg阳性率分别为38.1%、45.7%和36.4%... 本试验在2017-2019年间从全国17个省市地区240个规模化养殖场鸡群采集1 403份临床样本,进行了副鸡禽杆菌(Apg)的分离鉴定、PCR检测和测序分析。结果显示,3年间临床疑似鸡传染性鼻炎(IC)发病鸡样品中Apg阳性率分别为38.1%、45.7%和36.4%,场阳性率分别为45.9%、41.7%和56.1%。对119株分离菌株进行HMTp210基因测序,得到A型菌株56株,占比47.1%;B型菌株14株,占比11.8%;C型菌株49株,占比41.2%,表明IC在我国广泛流行,且A、B、C三种血清型Apg菌株同时存在。选择HMTp210基因测序分型得到的A、B型和C型菌株各10株,进一步通过血凝和血凝抑制试验对分型结果进行验证,显示HI血清型鉴定结果与HMTp210基因测序分型结果一致。本试验通过对发病鸡群不同类别、不同地区、不同日龄和不同月份的Apg检出率的调查,揭示了2017-2019年我国鸡群IC发病特点及不同血清型分布情况,为我国IC的防控提供数据支撑。同时本试验证明HMTp210基因测序分型与血清型分型有较高的一致性,可为确定Apg血清型分型提供一个简便快速经济的手段。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 HMTp210 流行菌株 血清学分型 测序分型
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副鸡禽杆菌LAMP检测方法的建立 被引量:2
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作者 梅晨 李淑芳 +3 位作者 徐玉智 张培君 龚玉梅 王宏俊 《动物医学进展》 北大核心 2018年第1期47-51,共5页
应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了快速特异的检测副鸡禽杆菌的方法。利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0,针对副鸡禽杆菌16SRNA基因序列设计两组LAMP引物,并对副鸡禽杆菌特异性DNA的扩增条件进行优化,评价所建立LAMP... 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了快速特异的检测副鸡禽杆菌的方法。利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0,针对副鸡禽杆菌16SRNA基因序列设计两组LAMP引物,并对副鸡禽杆菌特异性DNA的扩增条件进行优化,评价所建立LAMP的特异性和灵敏性。结果显示,优化后的反应条件为65℃恒温反应60min,内引物1.60pmol/μL、外引物0.20pmol/μL。该LAMP对13株副鸡禽杆菌均发生了扩增反应,而对大肠埃希菌、禽多杀性巴氏杆菌、空肠弯曲杆菌等14株其他病原微生物没有扩增反应;该LAMP最低检出量为0.17pg/反应,敏感性远高于常规PCR的56pg/反应。结果表明,所建立的副鸡禽杆菌LAMP具有快速、高效、方便操作等特点,适用于基层兽医部门进行副鸡禽杆菌的快速检测。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 16S RRNA 环介导等温扩增
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