采用不同的方法纯化相思子毒素单抗,寻求一种效果好、操作简便的纯化方法。采用硫酸铵沉淀法、辛酸-硫酸铵法和硫酸铵-蛋白A亲和层析法三种方法分离纯化相思子毒素单抗,并采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、BCA蛋白检测...采用不同的方法纯化相思子毒素单抗,寻求一种效果好、操作简便的纯化方法。采用硫酸铵沉淀法、辛酸-硫酸铵法和硫酸铵-蛋白A亲和层析法三种方法分离纯化相思子毒素单抗,并采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、BCA蛋白检测试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)对纯化产物进行相对分子质量、浓度、纯度、回收率及免疫活性的鉴定。结果表明,纯化后单抗的回收率以硫酸铵沉淀法及辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵-蛋白A亲和层析法较低;产物纯度以硫酸铵-蛋白A亲和层析法和辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵沉淀法较差;不同方法纯化后的单抗活性未见降低。展开更多
应用高效液相色谱法（HPLC）定性和定量检测加标香肠和水样品中相思子毒素-a（abrin-a）。在固定相为Shodex Protein KW-802．5色谱柱，流动相为0．5mol／L的磷酸盐缓冲液（PB，pH7．3），流速为1mL／min，柱温为25℃，检测波长为280lli...应用高效液相色谱法（HPLC）定性和定量检测加标香肠和水样品中相思子毒素-a（abrin-a）。在固定相为Shodex Protein KW-802．5色谱柱，流动相为0．5mol／L的磷酸盐缓冲液（PB，pH7．3），流速为1mL／min，柱温为25℃，检测波长为280llin等条件下，测定结果：abrin-a保留时间（9．80±O．02）min（n=25）；浓度与峰面积呈良好的线性关系，线性范围11．765—941．200μg/ml；最低检测限44ng；加标香肠和水样品中abrin-a回收率分别为104．6％和97．9％。测定结果表明，该方法简便、快速、灵敏度较高、重现性好。展开更多
文摘采用不同的方法纯化相思子毒素单抗,寻求一种效果好、操作简便的纯化方法。采用硫酸铵沉淀法、辛酸-硫酸铵法和硫酸铵-蛋白A亲和层析法三种方法分离纯化相思子毒素单抗,并采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、BCA蛋白检测试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)对纯化产物进行相对分子质量、浓度、纯度、回收率及免疫活性的鉴定。结果表明,纯化后单抗的回收率以硫酸铵沉淀法及辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵-蛋白A亲和层析法较低;产物纯度以硫酸铵-蛋白A亲和层析法和辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵沉淀法较差;不同方法纯化后的单抗活性未见降低。
文摘应用高效液相色谱法（HPLC）定性和定量检测加标香肠和水样品中相思子毒素-a（abrin-a）。在固定相为Shodex Protein KW-802．5色谱柱，流动相为0．5mol／L的磷酸盐缓冲液（PB，pH7．3），流速为1mL／min，柱温为25℃，检测波长为280llin等条件下，测定结果：abrin-a保留时间（9．80±O．02）min（n=25）；浓度与峰面积呈良好的线性关系，线性范围11．765—941．200μg/ml；最低检测限44ng；加标香肠和水样品中abrin-a回收率分别为104．6％和97．9％。测定结果表明，该方法简便、快速、灵敏度较高、重现性好。
