AS1.398中性蛋白酶固定化条件的初步研究 被引量：15

1

作者 李泰明 徐秀兰 +3 位作者 李伟 蒋企洲 王旻 吴梧桐 《药物生物技术》 CAS CSCD 1998年第4期214-218,共5页

考察壳聚糖、卡拉胶、海藻酸钠、琼脂等固定化载体对 AS1 .398中性蛋白酶固定化的影响。确定 0 .3%戊二醛在 30℃ ,p H8.0的条件下处理壳聚糖 8～ 1 0 h,加酶液 ,固定 8h,酶活力回收约为 77% ,固定化酶最适作用温度为 55℃ ,最适作用 p ... 考察壳聚糖、卡拉胶、海藻酸钠、琼脂等固定化载体对 AS1 .398中性蛋白酶固定化的影响。确定 0 .3%戊二醛在 30℃ ,p H8.0的条件下处理壳聚糖 8～ 1 0 h,加酶液 ,固定 8h,酶活力回收约为 77% ,固定化酶最适作用温度为 55℃ ,最适作用 p H为 8.0 ; 展开更多

关键词 as1.398 中性蛋白酶 固定化 载体 交联剂

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枯草芽孢杆菌AS1.398中性蛋白酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达 被引量：16

2

作者 许波 黄遵锡 +2 位作者 陈金全 杨云娟 刘海燕 《云南师范大学学报（自然科学版）》 2005年第3期51-56,共6页

将编码枯草芽孢杆菌AS1.398 的中性蛋白酶功能区和包含前导区序列(“pro”序列)在内的全长基因克隆到酵母整合型质粒pPIC9K中,电转化His4 缺陷型巴斯德毕赤酵母SMD1168,通过MD-G418平板、PCR方法筛选和鉴定重组子。重组子发酵液经SDS-P... 将编码枯草芽孢杆菌AS1.398 的中性蛋白酶功能区和包含前导区序列(“pro”序列)在内的全长基因克隆到酵母整合型质粒pPIC9K中,电转化His4 缺陷型巴斯德毕赤酵母SMD1168,通过MD-G418平板、PCR方法筛选和鉴定重组子。重组子发酵液经SDS-PAGE分析和酶活测定表明,枯草芽孢杆菌AS1.398的全长中性蛋白酶基因在毕赤酵母中获得了高效表达,表达产物分泌至培养基中,分子量约为43kD。经甲醇诱导培养后,发酵液中的中性蛋白酶活力达20000 U/mL。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 as1.398 中性蛋白酶 毕赤酵母 表达 pro-序列

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AS1.398和2709混合蛋白酶脱毛对猪皮蛋白的水解 被引量：6

3

作者 张伟娟 廖隆理 +3 位作者 谭国业 陈敏 但卫华 李志强 《皮革科学与工程》 CAS 2002年第5期22-26,共5页

制革中猪皮有温有浴酶脱毛工艺大多是采用单一酶 :AS1.3 98或 2 70 9进行脱毛 ,在酶脱毛过程中同时使用两种酶的则很少 ,本文将AS1.3 98与 2 70 9按不同的比例定量 (5 0 0酶活单位 / g皮 )混合 ,在相同的温度、不同的 pH值、不同时间下... 制革中猪皮有温有浴酶脱毛工艺大多是采用单一酶 :AS1.3 98或 2 70 9进行脱毛 ,在酶脱毛过程中同时使用两种酶的则很少 ,本文将AS1.3 98与 2 70 9按不同的比例定量 (5 0 0酶活单位 / g皮 )混合 ,在相同的温度、不同的 pH值、不同时间下进行脱毛 ,从而得出了最佳的脱毛条件 ,在该条件下 ,脱毛废液中总蛋白含量稍高 ,而胶原蛋白损失仅为单一酶的 1/ 4到 1/ 3 ,从而为克服有温有浴猪皮酶脱毛易产生松面和在我国牛皮和羊皮有温有浴酶脱毛并没有真正推向工业化生产等不足 。 展开更多

关键词 混合蛋白酶 猪皮蛋白 水解 酶脱毛 as1.398蛋白酶 2709蛋白酶 胶原

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AS1.398中性蛋白酶制备水解明胶(Ⅱ)——酶的固定化研究 被引量：7

4

作者 黄雅钦 冷延国 黄明智 《化学工业与工程》 CAS 2001年第2期75-78,114,共5页

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂 ,探讨了影响AS1 398中性蛋白酶的固定的因素。确定了固定化酶制备的适宜条件 :温度为 30℃～ 45℃ ,pH值为 6 5 ,时间为1 0h ,戊二醛含量为 0 1 2 % (质量分数 )和固定化酶中的酶的含量为 2 % (质量... 以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂 ,探讨了影响AS1 398中性蛋白酶的固定的因素。确定了固定化酶制备的适宜条件 :温度为 30℃～ 45℃ ,pH值为 6 5 ,时间为1 0h ,戊二醛含量为 0 1 2 % (质量分数 )和固定化酶中的酶的含量为 2 % (质量分数 )。 展开更多

关键词 固定化酶 壳聚糖 as1.398中性蛋白酶 水解明胶 制备

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羧甲基壳聚糖微球固定化AS1.398中性蛋白酶的制备和性质研究 被引量：2

5

作者 晋治涛 陈国华 +3 位作者 刘晓云 赵育 陈尧 高从堦 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期97-101,共5页

以戊二醛为交联剂,制备羧甲基壳聚糖微球固定AS1．398中性蛋白酶。研究了羧甲基壳聚糖固定化酶微球的制备条件、固定化酶的适宜温度、pH、米氏常数和储存稳定性等性质。结果表明。在pH=7．0的中性环境下；交联剂与羧甲基壳聚糖摩尔比为0... 以戊二醛为交联剂,制备羧甲基壳聚糖微球固定AS1．398中性蛋白酶。研究了羧甲基壳聚糖固定化酶微球的制备条件、固定化酶的适宜温度、pH、米氏常数和储存稳定性等性质。结果表明。在pH=7．0的中性环境下；交联剂与羧甲基壳聚糖摩尔比为0．4：1；干酶与羧甲基壳聚糖的质量比为0．125：1；在室温下交联至少4h。便可得到活力相对较高的固定化酶。自由酶和固定化酶的最适宜温度分别为40℃和65℃。在70℃下，固定化酶的热稳定性比自由酶要好。自由酶和固定化酶的最佳pH分别为7．0和6．0，固定化酶具有较宽的酸碱稳定性，在pH6～8都保持较高活力。固定化酶在5℃和35℃下储存1周后酶相对活力分别为97．6％和85．1％，而没有被固定的自由酶在5℃下储存1周酶相对活力仅为61．3％。自由酶和固定化酶的Km分别为5．66g／L和1．04g／L。 展开更多

关键词 固定化酶 as1.398中性蛋白酶 羧甲基壳聚糖 戊二醛

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中性蛋白酶生产菌种AS1.398的多相复核鉴定 被引量：2

6

作者 张欣 刘勇 +1 位作者 李金霞 程池 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期54-58,共5页

采用形态学观察、API生化鉴定系统、16S rRNA基因序列分析及gyr A、gyr B基因序列分析等相结合的微生物多相分类鉴定技术,对以中性蛋白酶生产菌种AS1.398枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)CICC 10888进行了复核鉴定,发现其分类学地位为... 采用形态学观察、API生化鉴定系统、16S rRNA基因序列分析及gyr A、gyr B基因序列分析等相结合的微生物多相分类鉴定技术,对以中性蛋白酶生产菌种AS1.398枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)CICC 10888进行了复核鉴定,发现其分类学地位为解淀粉芽胞杆菌植物亚种(Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum)。鉴于我国对生产菌种规范管理的要求和AS1.398中性蛋白酶生产菌种的广泛应用,建议将其分类学名称更名为解淀粉芽胞杆菌植物亚种(Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum)。 展开更多

关键词 as1.398 中性蛋白酶 生产菌种 多相鉴定 枯草芽胞杆菌 解淀粉芽胞杆菌植物亚种

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反胶束中中性蛋白酶AS1.398反应机理 被引量：2

7

作者 杨宏顺 陈复生 李云飞 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期963-966,共4页

枯草杆菌中性蛋白酶AS1 398可用于反胶束萃取全脂豆粉分离大豆蛋白和油脂 揭示酶的催化作用机理可用于优化萃取条件 .以大豆分离蛋白为底物 ,研究了AS1 398在AOT/异辛烷反胶束体系中的反应机理 由于底物分子在反胶束中呈泊松分布 ,... 枯草杆菌中性蛋白酶AS1 398可用于反胶束萃取全脂豆粉分离大豆蛋白和油脂 揭示酶的催化作用机理可用于优化萃取条件 .以大豆分离蛋白为底物 ,研究了AS1 398在AOT/异辛烷反胶束体系中的反应机理 由于底物分子在反胶束中呈泊松分布 ,通过计算底物和酶分子数比例 ,推算出酶催化为单底物反应的概率占绝对优势 借鉴水相酶反应模型 ,考虑反胶束中分子交换作用 ,提出了反胶束中酶的单底物分子反应的作用模型 ,模型推导出水相的米氏常数比反胶束相的大 1个数量级 实验测定酶在水相和反胶束相的米氏常数分别为 3 2× 1 0 -3 g·ml-1和 4 2× 1 0 -4g·ml-1 .两者比值与模型推导出的关系较吻合 ,表明此模型可用来表示反胶束中AS1 展开更多

关键词 反胶束 萃取 中性蛋白酶as1.398 反应机理 催化 分子交换作用 作用模型

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AS1.398中性蛋白酶制备水解明胶(Ⅰ)——反应规律的研究 被引量：1

8

作者 黄雅钦 冷延国 黄明智 《化学工业与工程》 CAS 2001年第2期71-74,共4页

本文考察了游离AS1 398中性蛋白酶催化明胶水解反应时 ,不同温度、pH值、水解时间及酶用量等反应条件对该反应的影响规律 ,探讨了AS1 398中性蛋白酶应用于制备水解明胶工艺的可能性。

关键词 as1.398中性蛋白酶 水解明胶 明胶 反应规律

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枯草杆菌AS1.398蛋白酶中胶原水解酶的研究 被引量：2

9

作者 李志强 尹晓瑜 +3 位作者 张年书 楼敏 赵艳秋 何先祺 《皮革科学与工程》 CAS 1991年第3期16-21,共6页

枯草杆菌AS1.398蛋白酶制剂广泛用于制革工业中的脱毛和软化。本研究采用铬皮粉亲和层析等方法分离纯化了其中的胶原水解酶,比活力达到380U/mg。初步确定其分子量<10000,等电点<3.5,最佳反应条件为pH10,T=50℃,Zn^(2+)为必需离子... 枯草杆菌AS1.398蛋白酶制剂广泛用于制革工业中的脱毛和软化。本研究采用铬皮粉亲和层析等方法分离纯化了其中的胶原水解酶,比活力达到380U/mg。初步确定其分子量<10000,等电点<3.5,最佳反应条件为pH10,T=50℃,Zn^(2+)为必需离子,可被EDTA完全抑制,对胶原的水解作用显著地表现为纤维组织的溶解,对变性胶原的水解速度为天然胶原的10倍以上。 展开更多

关键词 as1.398酶 胶原水解酶 脱毛酶制剂

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应用响应面法优化AS1.398中性蛋白酶的双水相萃取条件 被引量：7

10

作者 朱建星 王红艳 +1 位作者 张万忠 孟玲 《沈阳化工学院学报》 2007年第4期252-256,313,共6页

选择PEG-柠檬酸钠双水相体系对AS1.398中性蛋白酶粗酶液进行萃取纯化研究,考察粗酶质量浓度、pH值、相比、离子强度等因素对酶分配的影响,并进一步采用响应面分析优化实验条件.结果表明:采用响应面方法可以有效地对系统进行选择和设计,... 选择PEG-柠檬酸钠双水相体系对AS1.398中性蛋白酶粗酶液进行萃取纯化研究,考察粗酶质量浓度、pH值、相比、离子强度等因素对酶分配的影响,并进一步采用响应面分析优化实验条件.结果表明:采用响应面方法可以有效地对系统进行选择和设计,大大方便了研究工作.选择PEG1000-柠檬酸钠体系,在粗酶质量浓度5.2 g/L、相比2、pH=7.1条件下,AS1.398中性蛋白酶的纯化倍数达3.6以上. 展开更多

关键词 双水相萃取 响应面分析 PEG 柠檬酸钠 as1.398中性蛋白酶

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膨化大豆纤维固定化AS1.398中性蛋白酶 被引量：2

11

作者 程霜 曹怡梅 《四川粮油科技》 2002年第4期43-46,共4页

以膨化大豆纤维为载体 ,采用吸附 交联法固定化AS1 398中性蛋白酶 ,酶活力回收率为 4 5 % ,固定化容量为 182mg蛋白酶 / g载体 ,比活力为 90 0U /mg ,与自由酶相比较有显著提高 ,固定化酶的最适 pH由 7 0碱移至 7 5 ,最适温度由原酶的 ... 以膨化大豆纤维为载体 ,采用吸附 交联法固定化AS1 398中性蛋白酶 ,酶活力回收率为 4 5 % ,固定化容量为 182mg蛋白酶 / g载体 ,比活力为 90 0U /mg ,与自由酶相比较有显著提高 ,固定化酶的最适 pH由 7 0碱移至 7 5 ,最适温度由原酶的 5 0℃拓宽至 5 0～ 65℃ ,固定化酶与底物的亲和力较自由酶有所下降 ,米氏常数由自由酶的 0 0 6%变为 0 1%酪蛋白 。 展开更多

关键词 膨化大豆纤维 as1.398中性蛋白酶 固定化 吸附交联法

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壳聚糖固定化As1.398中性蛋白酶稳定性的研究

12

作者 万洪善 《山西化工》 2004年第2期23-24,47,共3页

研究了以中空球形壳聚糖固定 As1.398中性蛋白酶的方法 ,分析了戊二醛浓度、给酶量对固定化的影响 ,并对固定化酶的性质进行了讨论。实验结果显示 :戊二醛质量浓度为 4 %、每克载体给酶量 2 5 mg时 ,酶活力回收为 6 5 .4 % ,固定化酶的... 研究了以中空球形壳聚糖固定 As1.398中性蛋白酶的方法 ,分析了戊二醛浓度、给酶量对固定化的影响 ,并对固定化酶的性质进行了讨论。实验结果显示 :戊二醛质量浓度为 4 %、每克载体给酶量 2 5 mg时 ,酶活力回收为 6 5 .4 % ,固定化酶的热稳定性、p H稳定性及乙醇的稳定性均高于游离酶。 展开更多

关键词 球形壳聚糖 戊二醛 固定化 as1.398蛋白酶

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枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶在蟹壳几丁质上的固定化作用 被引量：12

13

作者 申炳华 冯涛 刘鸿铭 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS 1986年第1期67-71,共5页

1.蟹壳通过酸碱处理后,可制得白色的比较纯净的几丁质。2.用戊二醛把枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶共价结合到几丁质上,并探索了固定化条件。3.固定化的枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶和天然酶比较,最适温度向高温方向移动约3℃。最适pH基本上... 1.蟹壳通过酸碱处理后,可制得白色的比较纯净的几丁质。2.用戊二醛把枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶共价结合到几丁质上,并探索了固定化条件。3.固定化的枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶和天然酶比较,最适温度向高温方向移动约3℃。最适pH基本上没有变化。底物为酪蛋白时的K_m值略变小。热稳定性和贮存稳定性明显增加,尤其在底物和Ca~存在条件下,这种稳定性更为加强。 展开更多

关键词 as1.398 中性蛋白酶 蟹壳 天然酶 固定化条件 最适温度 贮存稳定性 酶固定 酸碱处理 酶分子

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AS1.398中性蛋白酶的固定化研究 被引量：2

14

作者 孟玲 赵宏庆 马君兰 《辽宁化工》 CAS 2004年第12期685-687,705,共4页

利用壳聚糖为载体 ,戊二醛为交联剂 ,对AS1.398中性蛋白酶进行了固定化研究 ,固定化反应的最佳条件是采用 1%的戊二醛浓度 ,壳聚糖和戊二醛的交联反应时间为 4h ,加入酶固定化反应12h ,固定化酶的最适温度 35℃ ,最适pH值 8.0。得到的... 利用壳聚糖为载体 ,戊二醛为交联剂 ,对AS1.398中性蛋白酶进行了固定化研究 ,固定化反应的最佳条件是采用 1%的戊二醛浓度 ,壳聚糖和戊二醛的交联反应时间为 4h ,加入酶固定化反应12h ,固定化酶的最适温度 35℃ ,最适pH值 8.0。得到的固定化酶的活力回收平均为 82 .5 % 。 展开更多

关键词 AS2.398中性蛋白酶 壳聚糖 戊二醛 酶的固定化

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As1.398中性蛋白酶在球形壳聚糖上的固定化研究 被引量：10

15

作者 江龙法 范莽 桑占池 《淮海工学院学报（自然科学版）》 CAS 2000年第2期47-49,共3页

研究了以中空球形壳聚糖固定化 As1 .398中性蛋白酶的方法 ,分析了戊二醛浓度、给酶量对固定化的影响 ,并对固定化酶的性质进行了讨论。实验结果显示 ,戊二醛质量浓度为 4% ,每克载体给酶量 2 5mg时 ,酶活力回收为 65.4% ,固定化酶的热... 研究了以中空球形壳聚糖固定化 As1 .398中性蛋白酶的方法 ,分析了戊二醛浓度、给酶量对固定化的影响 ,并对固定化酶的性质进行了讨论。实验结果显示 ,戊二醛质量浓度为 4% ,每克载体给酶量 2 5mg时 ,酶活力回收为 65.4% ,固定化酶的热稳定性、p H稳定性及乙醇的稳定性均高于游离酶。 展开更多

关键词 球形壳聚糖 固经 水解酶 中性蛋白酶

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多胺化壳聚糖微球固定化AS1.398中性蛋白酶 被引量：1

16

作者 王红艳 朱建星 《沈阳化工大学学报》 CAS 2012年第4期327-330,349,共5页

从自制的单分散微米级壳聚糖微球出发,经C2氨基苯甲醛保护、C6羟基环氧化后接枝亲水性多胺,进一步制备多胺化壳聚糖载体,采用该载体对AS1.398中性蛋白酶进行固定化.结果表明:制备的固定化酶活力回收率达49%以上,是采用未改性壳聚糖微球... 从自制的单分散微米级壳聚糖微球出发,经C2氨基苯甲醛保护、C6羟基环氧化后接枝亲水性多胺,进一步制备多胺化壳聚糖载体,采用该载体对AS1.398中性蛋白酶进行固定化.结果表明:制备的固定化酶活力回收率达49%以上,是采用未改性壳聚糖微球固定化的2.7倍.固定化酶连续重复使用9批次后仍保留有原活力的一半. 展开更多

关键词 壳聚糖 四乙烯五胺 固定化载体 微球 AS1 398中性蛋白酶

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壳聚糖固定化As1.398中性蛋白酶稳定性的研究 被引量：3

17

作者 万洪善 《连云港师范高等专科学校学报》 2002年第2期83-85,共3页

研究了以中空球形壳聚糖固定As1 .398中性蛋白酶的方法 ,分析了戊二醛浓度、给酶量对固定化的影响 ,并对固定化酶的性质进行了讨论 ,实验结果显示 ,戊二醛质量浓度为 4 % ,每克载体给酶量 2 5mg时 ,酶活力回收为 65 .4% ,固定化酶的热... 研究了以中空球形壳聚糖固定As1 .398中性蛋白酶的方法 ,分析了戊二醛浓度、给酶量对固定化的影响 ,并对固定化酶的性质进行了讨论 ,实验结果显示 ,戊二醛质量浓度为 4 % ,每克载体给酶量 2 5mg时 ,酶活力回收为 65 .4% ,固定化酶的热稳定性。 展开更多

关键词 稳定性 球形壳聚糖 戊二醛 固定化 Asl.398中性蛋白酶

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酶解大豆分离蛋白乳化特性的研究 被引量：24

18

作者 赵国华 明建 陈宗道 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第2期48-50,共3页

利用枯草芽孢杆菌AS1.398中性蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解,并利用浊度法测定了不同水解度、不同pH条件下酶解大豆分离蛋白的乳化特性,结果表明:AS1.398蛋白酶对大豆分离蛋白的最大水解度为36％,水解度为9％时乳化活性最大,水解度为3... 利用枯草芽孢杆菌AS1.398中性蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解,并利用浊度法测定了不同水解度、不同pH条件下酶解大豆分离蛋白的乳化特性,结果表明:AS1.398蛋白酶对大豆分离蛋白的最大水解度为36％,水解度为9％时乳化活性最大,水解度为3％是乳化稳定性最好。同一水解度时,pH越高,蛋白质的乳化特性越好。水解度为3％、9％、15％的大豆分离蛋白在pH等于或高于5.0时的乳化活性明显地高于原蛋白质,且水解度为3％时乳化稳定性也明显地高于原蛋白质。 展开更多

关键词 酶解 大豆分离蛋白 as1.398中性蛋白酶 乳化特性

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液态发酵法生产花生抗氧化肽和中性蛋白酶的工艺优化 被引量：7

19

作者 刘红梅 师广波 +2 位作者 马艳芳 李向东 孙中涛 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第18期175-179,共5页

以花生粕为原料,采用枯草芽孢杆菌AS1.398进行液态发酵生产抗氧化肽的过程中,可以积累大量的副产物——中性蛋白酶。单因素和中心组合实验结果表明,同时生产抗氧化肽和中性蛋白酶的最佳工艺条件为接种量1%(v/v),pH自然,发酵温度34℃,发... 以花生粕为原料,采用枯草芽孢杆菌AS1.398进行液态发酵生产抗氧化肽的过程中,可以积累大量的副产物——中性蛋白酶。单因素和中心组合实验结果表明,同时生产抗氧化肽和中性蛋白酶的最佳工艺条件为接种量1%(v/v),pH自然,发酵温度34℃,发酵时间71h,在此条件下,发酵液的理论DPPH自由基清除率为81.51%,中性蛋白酶活力为600U/mL。 展开更多

关键词 花生粕 抗氧化肽 枯草芽孢杆菌as1.398 液态发酵 中性蛋白酶 中心组合实验

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豆天蛾幼虫水解试验研究 被引量：8

20

作者 吴胜军 江龙法 陈绍军 《淮海工学院学报（自然科学版）》 CAS 2002年第1期52-55,共4页

以豆天蛾幼虫为原料 ,用 AS1 .3 98中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和复合风味蛋白酶为水解酶 ,分别研究其水解特性 ,最后确定复合风味蛋白酶为最优水解酶 ,其最优水解方案 :温度为 5 0℃、p H=6 .5、时间 1 0 h、加酶量为 40 LAPU/ g。按此方... 以豆天蛾幼虫为原料 ,用 AS1 .3 98中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和复合风味蛋白酶为水解酶 ,分别研究其水解特性 ,最后确定复合风味蛋白酶为最优水解酶 ,其最优水解方案 :温度为 5 0℃、p H=6 .5、时间 1 0 h、加酶量为 40 LAPU/ g。按此方案进行水解 ,重复 3次 ,得到平均水解率为 3 2 .5 4 % ,蛋白质利用率为 82 .3 6 % 。 展开更多

关键词 豆天蛾 as1.398中性蛋白酶 木瓜蛋白酶 复合风味蛋白酶 水解率 幼虫 蛋白水解性能

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