高危型HPV阳性宫颈癌组织中ALKBH5和PAK5的表达水平及临床意义 被引量：1

1

作者 王彩丽 王蕊 郭丽宁 《天津医药》 2025年第4期355-359,共5页

目的分析高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)阳性宫颈癌组织中RNA脱甲基酶ALKB同源物5(ALKBH5)、p21活化激酶5(PAK5)的表达,并探讨两者的临床意义。方法选取96例HR-HPV阳性宫颈癌患者为研究对象,采用实时荧光定量PCR、免疫组化染色及Western b... 目的分析高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)阳性宫颈癌组织中RNA脱甲基酶ALKB同源物5(ALKBH5)、p21活化激酶5(PAK5)的表达,并探讨两者的临床意义。方法选取96例HR-HPV阳性宫颈癌患者为研究对象,采用实时荧光定量PCR、免疫组化染色及Western blot分析癌组织和癌旁组织中ALKBH5、PAK5 mRNA和蛋白表达。比较不同临床病理特征HR-HPV阳性宫颈癌患者ALKBH5、PAK5蛋白表达差异。多因素Cox回归分析HR-HPV阳性宫颈癌患者死亡的影响因素。Kaplan-Meier曲线分析ALKBH5、PAK5蛋白表达对患者5年生存率的影响。结果实时荧光定量PCR、免疫组化染色及Western blot结果显示HR-HPV阳性宫颈癌患者癌组织ALKBH5、PAK5 mRNA和蛋白表达水平均高于癌旁组织(P<0.05)。FIGO分期ⅡA期、淋巴结转移的HR-HPV阳性宫颈癌患者癌组织中ALKBH5、PAK5阳性表达率升高(P<0.05)。Cox回归分析结果显示ALKBH5阳性(HR=1.467,95%CI:1.104~1.949)、PAK5阳性(HR=1.435,95%CI:1.093~1.884)、FIGO分期ⅡA期(HR=1.435,95%CI:1.065~1.933)、淋巴结转移(HR=1.652,95%CI:1.053~2.593)是影响HR-HPV阳性宫颈癌患者预后的危险因素。ALKBH5阳性组5年累积生存率[72.58%(45/62)vs.91.18%(31/34)]低于阴性组(Log-rankχ^(2)=4.481,P=0.034)。PAK5阳性组5年累积生存率[71.67%(43/60)vs.91.67%(33/36)]低于阴性组(Log-rankχ^(2)=4.153,P=0.043)。结论ALKBH5、PAK5在HR-HPV阳性宫颈癌中表达显著上调,两者均与患者不良临床病理特征有关,有助于评估患者的预后。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 宫颈肿瘤 危险因素 预后 alkb同源蛋白5 RNA脱甲基酶 p21活化激酶类

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ALKBH5靶向调控Titin基因介导Wnt/β-catenin信号通路参与宫颈癌生物学行为的机制研究 被引量：1

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作者 胡益飞 吴淋淋 郑顺杰 《浙江医学》 2025年第1期32-39,共8页

目的探讨ALKB同源物5(ALKBH5)靶向调控肌联蛋白(Titin)基因表达,并介导无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族蛋白(Wnt)/β-连锁蛋白(β-catenin)信号通路参与宫颈癌生物学行为的相关机制。方法回顾性选取2022年10月至2023年10月经金华市... 目的探讨ALKB同源物5(ALKBH5)靶向调控肌联蛋白(Titin)基因表达,并介导无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族蛋白(Wnt)/β-连锁蛋白(β-catenin)信号通路参与宫颈癌生物学行为的相关机制。方法回顾性选取2022年10月至2023年10月经金华市中心医院病理诊断为宫颈良性肿瘤、上皮不典型增生以及浸润性癌患者各30例并收集其手术切除获取的新鲜宫颈组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ALKBH5和Titin mRNA表达水平。体外选择宫颈癌细胞株Hela并分为5组,即正常对照(NC)组、ALKBH5-小干扰RNA(siRNA)组、ALKBH5-NC组、ALKBH5-siRNA+Titin-模拟物(mimic)组和ALKBH5-siRNA+Titin-NC组;连续培养72 h,分别采用四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞术、划痕实验、Transwell法检测细胞增殖率、凋亡率、迁移率以及侵袭细胞数,蛋白质印迹法检测上皮间质转化相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)以及Wnt、β-catenin蛋白表达水平,qRT-PCR检测细胞ALKBH5和Titin m RNA表达水平。采用荧光素酶法检测ALKBH5与Titin基因的靶向作用。结果与宫颈良性肿瘤组织、上皮不典型增生组织相比,浸润性癌组织中ALKBH5和Titin mRNA表达水平均明显升高(均P<0.01)。与NC组、ALKBH5-NC组相比,ALKBH5-siRNA组细胞增殖率、迁移率均下降(均P<0.05),侵袭细胞数均减少(均P<0.05),凋亡率均升高(均P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平均上调(均P<0.05),Vimentin、N-cadherin、Wnt、β-catenin蛋白表达水平以及ALKBH5、Titin mRNA表达水平均下调(均P<0.05);与ALKBH5-siRNA组、ALKBH5-siRNA+Titin-NC组相比,ALKBH5-siRNA+Titin-mimic组细胞增殖率、迁移率均升高(均P<0.05),侵袭细胞数均增加(均P<0.05),凋亡率均下降(均P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平均下调(均P<0.05),Vimentin、N-cadherin、Wnt、β-catenin蛋白表达水平以及Titin mRNA表达水平均上调(均P<0.05)。荧光素酶报告显示了ALKBH5与Titin基因的靶向作用位点(225-231位点),并且ALKBH5与Titin-野生型的相对荧光强度高于Titin-突变型(P<0.001)。结论ALKBH5能靶向上调Titin基因表达,并激活Wnt/β-catenin信号通路促进宫颈癌的发生以及恶性肿瘤生物学行为。 展开更多

关键词 宫颈癌 alkb同源物5 肌联蛋白 无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族蛋白/β-连锁蛋白信号通路 增殖 凋亡 迁移 侵袭 上皮间质转化

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ALKBH5在肿瘤和肿瘤免疫中的调控作用及相关药物研究进展

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作者 高雨雨 熊心怡 +1 位作者 陶怀 何迎春 《生命科学研究》 2025年第2期104-114,共11页

RNA去甲基化酶alkB同源物5(alkB homolog 5,ALKBH5)介导的N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)去甲基化通过影响RNA代谢的多个途径调节基因的表达。研究发现,ALKBH5在许多恶性肿瘤的进程中以m6A依赖性方式发挥关键调控作用。因此,探究A... RNA去甲基化酶alkB同源物5(alkB homolog 5,ALKBH5)介导的N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)去甲基化通过影响RNA代谢的多个途径调节基因的表达。研究发现,ALKBH5在许多恶性肿瘤的进程中以m6A依赖性方式发挥关键调控作用。因此,探究ALKBH5在肿瘤中发挥的生物学功能和机制,对攻克人类恶性肿瘤和研发相关靶向药物具有重要意义。本综述重点阐述了ALKBH5在肿瘤中发挥各种生物学功能的分子机制和其在肿瘤相关免疫中的作用,并且讨论了靶向ALKBH5的肿瘤治疗策略及临床意义,以期为ALKBH5介导肿瘤发生发展分子机制的深入研究和相关防治药物的研发提供新的思路和见解。 展开更多

关键词 alkb同源物5(alkbH5) N6-甲基腺苷(m6A) 肿瘤 肿瘤免疫 治疗策略 药物研发

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ALKBH5在甲状腺癌患者中的表达及其临床意义

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作者 武安琪 温思妮 +6 位作者 韩菲 王鑫 王淑君 朱小年 张小英 谭盛葵 张慧霞 《黑龙江医学》 2025年第17期2068-2071,共4页

目的:明确N6-甲基腺苷(m6A)去甲基化酶AlkB同源物5(ALKBH5)在甲状腺癌组织及血液中的表达及其与临床病理特征和预后的关系,为甲状腺癌的防治提供科学依据。方法:采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测人群外周血ALKBH5 m... 目的:明确N6-甲基腺苷(m6A)去甲基化酶AlkB同源物5(ALKBH5)在甲状腺癌组织及血液中的表达及其与临床病理特征和预后的关系,为甲状腺癌的防治提供科学依据。方法:采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测人群外周血ALKBH5 mRNA的表达;采用免疫组化实验检测58对甲状腺癌组织与癌旁组织中ALKBH5蛋白的表达情况;采用生物信息学方法,利用Kaplan Meier plotter在线数据库分析ALKBH5表达对新发甲状腺癌患者预后的影响。结果:qRT-PCR实验结果显示,甲状腺癌患者血液中ALKBH5 mRNA表达水平明显上调,差异有统计学意义(t=2.719,P<0.05)。免疫组化结果显示,ALKBH5高表达在甲状腺癌组织中占96.55%,高于在癌旁组织的12.07%,差异有统计学意义(χ^(2)=52.841,P<0.05);logistic回归分析显示,在甲状腺癌患者中,ALKBH5高表达与年龄、TNM分期、临床分期有关(χ^(2)=14.550、4.852、4.580,P<0.05);ALKBH5高表达的新发甲状腺癌患者的生存率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:与癌旁组织相比,ALKBH5在甲状腺癌组织与血液中表达明显升高,且与患者年龄、TNM分期、临床分期和生存时间有关。ALKBH5高表达的新发甲状腺癌患者生存率较差。 展开更多

关键词 N6-甲基腺苷 alkb同源物5 甲状腺癌 机制研究

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CD44^(+)胶质瘤中PTK7、ALKBH5表达水平与临床预后的关系

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作者 张翼 张小眯 +1 位作者 党少辉 赵征 《中外医药研究》 2025年第9期79-81,共3页

目的:分析CD44^(+)胶质瘤中酪氨酸蛋白激酶-7(PTK7)、RNA去甲基化酶ALKB同源物5(ALKBH5)表达水平与临床预后的关系。方法:纳入2021年1月—2024年6月在邓州市中心医院(邓州市人民医院)收治的CD44^(+)胶质瘤患者65例,根据患者预后情况将... 目的:分析CD44^(+)胶质瘤中酪氨酸蛋白激酶-7(PTK7)、RNA去甲基化酶ALKB同源物5(ALKBH5)表达水平与临床预后的关系。方法:纳入2021年1月—2024年6月在邓州市中心医院(邓州市人民医院)收治的CD44^(+)胶质瘤患者65例,根据患者预后情况将其分为预后良好组(n=31,存活)和预后不良组(n=34,死亡)。比较两组患者胶质瘤组织中PTK7、ALKBH5表达水平。以多因素Cox回归分析评估CD44^(+)胶质瘤组织中PTK7、ALKBH5表达水平与临床预后的相关性。以受试者工作特征(ROC)曲线评估CD44^(+)胶质瘤组织中PTK7、ALKBH5表达水平对患者预后的预测价值。结果:相较于预后良好组,预后不良组胶质瘤组织中PTK7、ALKBH5表达水平明显更高(P<0.001)。经多因素Cox回归分析评估,胶质瘤组织中PTK7、ALKBH5表达水平与预后呈正相关(P<0.001)。ROC曲线显示,胶质瘤组织中PTK7、ALKBH5表达水平预测患者预后的曲线下面积分别为0.826、0.859,敏感度分别为61.29%、74.19%,特异度分别为88.24%、85.29%。结论:CD44^(+)胶质瘤患者胶质瘤组织中PTK7、ALKBH5表达水平与临床预后具有一定相关性,PTK7、ALKBH5表达水平越高,预示患者预后越差,可为临床治疗方案制定提供参考依据。 展开更多

关键词 胶质瘤 酪氨酸蛋白激酶-7 RNA去甲基化酶alkb同源物5 预后

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亚慢性铝暴露致大鼠认知障碍ALKBH5/PTEN/AKT信号通路机制

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作者 刘衍 张晓宇 +9 位作者 张伟涛 萧非凡 崔平 王彬鸿 陈薪茹 姜斌 陈欢 林立 张璟 李欢 《中国职业医学》 CAS 2024年第2期144-149,155,共7页

目的探讨麦芽酚铝暴露对miR-193a-3p、去甲基化酶AlkB同源蛋白5(ALKBH5)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)和蛋白激酶B(AKT)的影响,以及miR-193a-3p是否通过调控ALKBH5/PTEN/AKT信号通路参与铝致认知障碍的机制。... 目的探讨麦芽酚铝暴露对miR-193a-3p、去甲基化酶AlkB同源蛋白5(ALKBH5)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)和蛋白激酶B(AKT)的影响,以及miR-193a-3p是否通过调控ALKBH5/PTEN/AKT信号通路参与铝致认知障碍的机制。方法将无特定病原体级健康雄性SD大鼠随机分为对照组和低、中、高剂量组,每组8只。3个剂量组大鼠分别予浓度为10.00、20.00和40.00μmol/kg体质量的麦芽酚铝溶液腹腔注射染毒,对照组大鼠予等体积0.9%氯化钠溶液;每周连续染毒5 d,持续3个月。染毒结束后,以新物体识别实验检测大鼠学习记忆能力,以实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠海马组织中miR-193a-3p和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的mRNA相对表达水平,以蛋白质印迹法检测大鼠海马组织中ALKBH5、PTEN和AKT2蛋白的表达。结果高剂量组大鼠辨别指数和偏好指数分别低于对照组和低剂量组(P值均<0.05)。高剂量组大鼠海马组织中miR-193a-3p和Bcl-2 mRNA相对表达水平分别低于对照组和低剂量组(P值均<0.05),Bax mRNA相对表达水平分别高于对照组和低剂量组(P值均<0.05),Caspase-3 mRNA相对表达水平分别高于其他3组(P值均<0.05)。高剂量组大鼠海马组织中ALKBH5蛋白相对表达水平低于对照组(P<0.05),PTEN蛋白相对表达水高于对照组和低剂量组(P值均<0.05),AKT2蛋白相对表达水平低于对照组和低剂量组(P值均<0.05)。结论亚慢性铝暴露可抑制大鼠海马组织中miR-193a-3p的表达,从而破坏ALKBH5/PTEN/AKT通路,影响正常的神经元稳态和细胞功能;此机制可能在铝诱导的认知障碍过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 铝 miR-193a-3p 去甲基化酶alkb同源蛋白5 张力蛋白同源基因 蛋白激酶B 认知障碍 信号通路 大鼠

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m6A去甲基化酶ALKBH5在形觉剥夺性近视豚鼠中的表达变化及其意义

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作者 向小玲 廖萱 +3 位作者 孟茄玉 周桂梅 周红 周羡媚 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期315-321,共7页

目的探讨形觉剥夺性近视(FDM)豚鼠视网膜中m6A去甲基化酶AlkB同源蛋白5(ALKBH5)表达变化及其参与近视的作用机制。方法采用随机数字表法将30只健康SPF级3周龄三色豚鼠分为正常对照组和实验组,每组15只。实验组中眼罩遮盖右眼作为FDM组,... 目的探讨形觉剥夺性近视(FDM)豚鼠视网膜中m6A去甲基化酶AlkB同源蛋白5(ALKBH5)表达变化及其参与近视的作用机制。方法采用随机数字表法将30只健康SPF级3周龄三色豚鼠分为正常对照组和实验组,每组15只。实验组中眼罩遮盖右眼作为FDM组,暴露左眼为自身对照组。分别于实验前及实验1、2、3和4周时进行豚鼠眼生物学参数测量。采用带状光检影镜测量屈光度,采用A型超声仪测量眼轴长度。实验4周,通过免疫组织化学染色和免疫荧光染色检测ALKBH5在豚鼠视网膜中的表达分布。采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测豚鼠视网膜中ALKBH5 mRNA和蛋白表达情况。结果与正常对照组和自身对照组相比,实验2、3和4周,FDM组豚鼠近视屈光度明显增加,眼轴显著增长,差异均有统计学意义(均P<0.001)。免疫组织化学染色和免疫荧光染色显示,ALKBH5分布在视网膜神经纤维层、视锥视杆细胞层和视网膜色素上皮(RPE)层,其中以神经纤维层和RPE层为主。正常对照组、自身对照组和FDM组豚鼠ALKBH5蛋白相对荧光强度值分别为1.000±0.204、0.874±0.076和0.571±0.053,FDM组视网膜中ALKBH5蛋白荧光强度值明显小于正常对照组和自身对照组,差异均有统计学意义(t=4.069,P=0.006;t=5.176,P=0.014)。造模后4周,FDM组豚鼠视网膜中ALKBH5 mRNA和蛋白相对表达量明显低于正常对照组和自身对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论FDM组豚鼠视网膜中m6A去甲基化酶ALKBH5表达下降,ALKBH5及相关m6A甲基化修饰可能参与了近视的发生和发展。 展开更多

关键词 近视 豚鼠 alkb同源蛋白5 RNA去甲基酶 m6A甲基化 发病机制

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ALKBH5在甲状腺癌细胞中的生物学功能

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作者 王淑君 张慧霞 +7 位作者 温思妮 张磊 王鑫 武安琪 朱小年 张小英 谭盛葵 韩菲 《癌变·畸变·突变》 CAS 2024年第5期349-358,共10页

目的:探讨N6-甲基腺苷(m^(6)A)去甲基化酶ALKB同系物5(ALKBH5)在甲状腺癌发生发展过程中的作用及其生物学机制,为甲状腺癌的治疗提供科学依据。方法:将ALKBH5敲低质粒转染到甲状腺乳头状癌TPC-1细胞和甲状腺未分化癌8505C细胞后,采用m^(... 目的:探讨N6-甲基腺苷(m^(6)A)去甲基化酶ALKB同系物5(ALKBH5)在甲状腺癌发生发展过程中的作用及其生物学机制,为甲状腺癌的治疗提供科学依据。方法:将ALKBH5敲低质粒转染到甲状腺乳头状癌TPC-1细胞和甲状腺未分化癌8505C细胞后,采用m^(6)A甲基化定量检测试剂盒分析甲状腺癌细胞中m^(6)A甲基化修饰水平;分别采用平板集落形成试验、CCK-8试剂盒、平板划痕试验、Transwell实验分析甲状腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期分布,并通过Western blot实验检测PI3K/AKT信号通路蛋白的表达水平。结果:与未敲低ALKBH5的细胞系相比,ALKBH5敲低后甲状腺癌TPC-1细胞和8505C细胞的m^(6)A甲基化修饰水平升高,甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭数目均下降,细胞周期G2/M期阻滞(P<0.05)。Western blot实验结果显示,ALKBH5低表达时,甲状腺癌细胞PI3K/AKT信号通路中的P85、AKT、P-AKT和FAK蛋白表达水平降低,下游Cyclin通路中CDK4、CDK6、Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E1蛋白表达水平亦降低,而下游P53通路中,P53蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:在甲状腺癌细胞中,ALKBH5敲低后抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭,导致细胞周期阻滞,并通过PI3K/AKT/P53与PI3K/AKT/Cyclin轴抑制甲状腺癌的发生发展。 展开更多

关键词 N^(6)-甲基腺苷 alkb同系物5 甲状腺癌 PI3K/AKT信号通路

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CGRP通过ALKBH5/m6A抑制自噬促进缺氧/复氧心肌细胞增殖 被引量：2

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作者 耿志刚 刘红梅 《解剖学研究》 CAS 2024年第2期123-131,共9页

目的探讨CGRP通过ALKBH5/m6A调控自噬对缺氧/复氧心肌细胞增殖和凋亡的影响。方法将心肌细胞H9c2随机分为Control组(H9c2细胞正常培养基培养)、H/R组(制备缺氧/复氧H9c2细胞损伤模型组)、CGRP组(缺氧/复氧模型前加入1×10^(-1)mol/L... 目的探讨CGRP通过ALKBH5/m6A调控自噬对缺氧/复氧心肌细胞增殖和凋亡的影响。方法将心肌细胞H9c2随机分为Control组(H9c2细胞正常培养基培养)、H/R组(制备缺氧/复氧H9c2细胞损伤模型组)、CGRP组(缺氧/复氧模型前加入1×10^(-1)mol/L的CGRP作用20 min)和CGRP+sh-ALKBH5组(将sh-ALKBH5转染至H9c2细胞中,培养24 h后加入1×10^(-1)mol/L CGRP作用20 min,后制备缺氧/复氧模型)。采用CCK-8和EdU染色检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;检测心肌细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性;Dot blot检测m6A甲基化水平;蛋白质印迹法和RT-PCR检测细胞中ALKBH5、Beclin-1、p62、LC3Ⅱ、LC3Ι蛋白和m RNA表达。结果与Control组比较,H/R组细胞存活率[(46.27±4.09)%]、EdU阳性细胞率[(3.89±0.87)%]明显降低,细胞凋亡率[(13.62±1.27)%]、LDH浓度(276.32±25.14)、m6A相对表达量(2.46±0.18)明显增加(P<0.05);与H/R组比较,CGRP组细胞存活率[(87.31±6.24)%]、EdU阳性细胞率[(40.71±2.53)%]均明显增加,细胞凋亡率[(3.17±0.82)%]、LDH浓度(78.24±7.19)、m6A相对表达量(1.42±0.13)明显降低(P<0.05);CGRP+sh-ALKBH5组细胞存活率[(61.04±5.48)%]、EdU阳性细胞率[(8.76±1.24)%]均明显低于CGRP组,细胞凋亡率[(10.19±0.95)%]、LDH浓度(229.06±22.43)、m6A相对表达量(2.09±0.15)明显高于CGRP组(P<0.05)。与Control组比较,H/R组细胞中ALKBH5(0.34±0.03)、p62蛋白(0.32±0.04)和mRNA表达(0.21±0.04)明显降低,Beclin-1蛋白(0.97±0.13)及mRNA表达(2.14±0.17)和LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.64±0.08)明显升高(P<0.05);与H/R组比较,CGRP组细胞中ALKBH5(0.78±0.09)、p62蛋白(0.71±0.08)和m RNA(0.87±0.08)表达明显增加,Beclin-1蛋白(0.41±0.06)及mRNA表达(1.26±0.12)和LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.23±0.03)明显降低(P<0.05);与CGRP组比较,CGRP+sh-ALKBH5组细胞中ALKBH5(0.50±0.07)、p62蛋白(0.40±0.05)和mRNA表达(0.30±0.05)明显降低,Beclin-1蛋白(0.86±0.10)及mRNA表达(1.95±0.14)和LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.58±0.06)明显升高(P<0.05)。结论CGRP可能通过促进m6A去甲基酶ALKBH5的表达来发挥作用,抑制心肌细胞在缺氧/复氧条件下的自噬和凋亡,从而提高心肌细胞的存活率。 展开更多

关键词 心肌细胞 降钙素基因相关肽 alkb同源蛋白5/N6-甲基腺嘌呤 自噬 缺氧/复氧 增殖 凋亡

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重组体pET-28a-alkB/E.coli降解页岩油泥石油烃的功能研究

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作者 李雪菲 句泽林 +3 位作者 齐婷婷 郑乾璐 李喜梅 余丽芸 《山东化工》 CAS 2024年第19期239-243,共5页

为了降解页岩油泥中的石油烃,构建基因工程菌,表达石油烃降解关键酶以提高油泥的降解效果。以Pseudomonas qingdaonensis基因组为模板扩增alkB基因,连接至载体pET-28a,转化至E.coli BL21(DE3)中,SDS-PAGE和Western-blot鉴定表达的外源... 为了降解页岩油泥中的石油烃,构建基因工程菌,表达石油烃降解关键酶以提高油泥的降解效果。以Pseudomonas qingdaonensis基因组为模板扩增alkB基因,连接至载体pET-28a,转化至E.coli BL21(DE3)中,SDS-PAGE和Western-blot鉴定表达的外源蛋白。pET-28a-alkB/E.coli处理原油和页岩油泥,采用气相色谱法评估降解效果。发现alkB基因在大肠杆菌中能表达外源蛋白,且14 d原油及页岩油泥的降解率分别为47.5%和47.1%,表明重组体pET-28a-alkB/E.coli具备降解页岩油泥石油烃的功能。 展开更多

关键词 烷烃单加氧酶alkb 生物降解 E.coli BL21(DE3) 页岩油污泥 气相色谱法

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ALKBH5及其在肿瘤发生发展中作用的研究进展

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作者 尹峰 史振宇 +6 位作者 汤雨盈 王雨婷 刘慧 谈晶 丁昊 陈文刚 程峰 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第20期3999-4004,共6页

ALKBH5(AlkB homolog 5)是m 6A去甲基转移酶蛋白,能去除RNA上的腺嘌呤(A)第6号位氮原子的甲基化。随着科技的进展,越来越多的研究表明,ALKBH5介导的m 6A去甲基化修饰在肿瘤的发生发展中起着重要作用。该文主要介绍了ALKBH5的结构,与其... ALKBH5(AlkB homolog 5)是m 6A去甲基转移酶蛋白,能去除RNA上的腺嘌呤(A)第6号位氮原子的甲基化。随着科技的进展,越来越多的研究表明,ALKBH5介导的m 6A去甲基化修饰在肿瘤的发生发展中起着重要作用。该文主要介绍了ALKBH5的结构,与其作为癌基因与抑癌基因在各种肿瘤发生发展中所起到的作用,以及ALKBH5表达及功能的调控,旨在为基础及临床医学中对m 6A修饰的研究提供新的研究思路和治疗靶点。 展开更多

关键词 alkb同源蛋白5 N 6-甲基腺苷 肿瘤

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叶酸对胃癌细胞生物学特征以及alkB基因表达的影响 被引量：7

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作者 高玮 李雷佳 +1 位作者 许平 陈胜良 《胃肠病学》 2010年第9期540-543,共4页

背景:抑癌基因启动子区DNA超甲基化是胃癌发生的重要机制之一。alkB基因可修复甲基化损伤,而叶酸对胃癌的发生起有预防作用;但叶酸的作用是否与alkB基因表达相关尚不清楚。目的:探讨叶酸对胃癌细胞生物学特征以及alkB基因表达的影响。方... 背景:抑癌基因启动子区DNA超甲基化是胃癌发生的重要机制之一。alkB基因可修复甲基化损伤,而叶酸对胃癌的发生起有预防作用;但叶酸的作用是否与alkB基因表达相关尚不清楚。目的:探讨叶酸对胃癌细胞生物学特征以及alkB基因表达的影响。方法:培养人胃癌细胞株SGC7901,分别以0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.8mg/L、1.0mg/L和2.0mg/L浓度叶酸进行干预。以CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞术分析细胞周期,实时定量RT-PCR法检测alkB基因mRNA表达。结果:与空白对照组相比,0.2mg/L、0.4mg/L浓度叶酸能明显抑制胃癌细胞增殖活力,G0/G1期细胞百分比显著减少;alkB基因mRNA表达明显上调。结论:叶酸干预可抑制胃癌细胞增殖,同时上调alkB基因表达,推测alkB基因表达改变或许参与叶酸抑制胃癌细胞增殖的作用机制。 展开更多

关键词 叶酸 胃肿瘤 alkb基因 DNA甲基化 细胞增殖

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长链烷烃降解菌alkB片段的分离和鉴定 被引量：3

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作者 刘晔 李辉 +1 位作者 牟伯中 刘洪来 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期562-565,共4页

分离并鉴定了长链烷烃降解菌Pseudomonasaeruginosa1785和P.marginata766烃羟化酶基因alkB片段.根据烃羟化酶的保守氨基酸序列,设计兼并引物,扩增P.aeruginosa1785和P.marginata766的alkB片段,获得了目标产物.经DNA测序和氨基酸序列分析... 分离并鉴定了长链烷烃降解菌Pseudomonasaeruginosa1785和P.marginata766烃羟化酶基因alkB片段.根据烃羟化酶的保守氨基酸序列,设计兼并引物,扩增P.aeruginosa1785和P.marginata766的alkB片段,获得了目标产物.经DNA测序和氨基酸序列分析,证实目标片段编码的肽段含有烃羟化酶的特征基序.由此确认采用该方法分离到了长链烷烃降解基因的alkB同源体片段.DNA序列比对结果表明,P.aeruginosa1785和P.marginata766的alkB片段与P.aeruginosaPAO1的alkB1和alkB2的相似性分别达到95.7%和94.8%.这些alkB片段可用于分析烃降解微生物群落结构. 展开更多

关键词 长链烷烃降解菌 alkb片段 PCR扩增

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alkB基因在胃癌和萎缩性胃炎黏膜组织中的表达改变 被引量：2

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作者 陈胜良 李雷佳 +2 位作者 童菊芳 房静远 萧树东 《胃肠病学》 2007年第7期401-404,共4页

背景:DNA或RNA分子异常甲基化导致的抑癌基因沉默、突变或其他功能性障碍是胃癌发生的关键机制之一。最近研究发现alkB基因产物具有修复DNA和mRNA碱基异常甲基化、纠正基因突变、复制转录障碍等功能,但对其在胃癌及其癌前病变组织中的... 背景:DNA或RNA分子异常甲基化导致的抑癌基因沉默、突变或其他功能性障碍是胃癌发生的关键机制之一。最近研究发现alkB基因产物具有修复DNA和mRNA碱基异常甲基化、纠正基因突变、复制转录障碍等功能,但对其在胃癌及其癌前病变组织中的表达情况尚不了解。目的:探讨alkB基因在胃癌及其癌前病变组织中的表达改变。方法:收集11例胃癌、癌旁和远离癌灶正常黏膜组织以及107例慢性萎缩性胃炎和121例非萎缩性胃炎患者的内镜活检黏膜,应用基因表达谱芯片实验评估alkB基因在各组织中的表达。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检验上述结果。结果:与远离癌灶正常黏膜组织相比,alkB基因在胃癌中的表达降低(Ratio值为0.208);与非萎缩性胃炎黏膜组织相比,alkB基因在萎缩性胃炎黏膜组织中的表达降低(Ratio值为0.378);而alkB基因在癌旁和远离癌灶正常黏膜组织中的表达无显著差异(Ratio值为0.726)。结论:alkB基因在胃癌和萎缩性胃炎黏膜组织中的表达下调,可能参与了胃癌发生过程中基因甲基化紊乱的机制。alkB基因是有潜在研究价值的分子靶标。 展开更多

关键词 基因 alkb 胃肿瘤 胃炎 萎缩性 寡核苷酸序列分析 DNA甲基化

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METTL3和ALKBH5在甲状腺癌中的表达 被引量：2

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作者 谭屾 崔爱民 +2 位作者 柏楠 查晔军 卢帅 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第2期185-188,196,共5页

目的 探讨甲基转移酶样3(METTL3)和alkB同系物5(ALKBH5)在甲状腺癌(TC)中的水平及意义。方法 选取2014年3月至2015年9月于北京积水潭医院住院治疗的116例TC患者癌组织作为TC组,选取其相应癌旁组织作为对照组。检测组织METTL3、ALKBH5 m... 目的 探讨甲基转移酶样3(METTL3)和alkB同系物5(ALKBH5)在甲状腺癌(TC)中的水平及意义。方法 选取2014年3月至2015年9月于北京积水潭医院住院治疗的116例TC患者癌组织作为TC组,选取其相应癌旁组织作为对照组。检测组织METTL3、ALKBH5 mRNA水平;分析METTL3、ALKBH5 mRNA水平与患者临床病理特征的关系;分析METTL3 mRNA与ALKBH5 mRNA表达的相关性;以Kaplan-Meier法分析TC组织中METTL3、ALKBH5表达与患者五年内总生存率的关系;采用多因素Cox回归分析TC预后的影响因素。结果 TC组METTL3 mRNA水平高于对照组,ALKBH5mRNA水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。METTL3高表达组患者TNMⅢ期、淋巴结转移比例高于低表达组,ALKBH5低表达组TNMⅢ期、淋巴结转移比例高于高表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。TC组织中METTL3 m RNA与ALKBH5 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.589,P<0.05)。METTL3高表达组五年总生存率低于METTL3低表达组,ALKBH5低表达组五年内总生存率低于ALKBH5高表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移及METTL3高表达、ALKBH5低表达是影响TC预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 TC中METTL3呈高表达、ALKBH5呈低表达,均可作为TC患者的独立预后因素。 展开更多

关键词 甲状腺癌 甲基转移酶样3 alkb同系物5

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ALKBH5调控GEFT的m6A修饰对胆管癌转移及EMT的实验研究 被引量：2

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作者 王希方 郑伟 +5 位作者 马东瑞 何莉 孙晶莹 孙杨 孟莲 孙超 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第4期1-7,21,共8页

目的探究alkB同源蛋白5(ALKBH5)调控鸟嘌呤核苷酸交换因子T(guanine nucleotide exchange factors T,GEFT)的m6A修饰对胆管癌转移和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法将HuCCT1细胞按照转染类别分为Con... 目的探究alkB同源蛋白5(ALKBH5)调控鸟嘌呤核苷酸交换因子T(guanine nucleotide exchange factors T,GEFT)的m6A修饰对胆管癌转移和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法将HuCCT1细胞按照转染类别分为Control组,NC-sh组、ALKBH5-sh组、NC-LV组、ALKBH5-LV组、ALKBH5-LV+NC-sh组和ALKBH5-LV+GEFT-sh组。Control组细胞不进行转染,使用Lipofectamine 2000对其他组细胞分别转染相应的慢病毒。采用MTT法检测细胞增殖水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭水平。采用RT-qPCR分析HuCCT1细胞中的ALKBH5,GEFT,Bax,Bcl-2,MMP2,MMP9,E-cadherin,N-cadherin和Vimentin的mRNA水平。采用Western blot分析HuCCT1细胞中的ALKBH5和GEFT蛋白水平。采用MeRIP-qPCR分析HuCCT1细胞中GEFT m6A甲基化水平。结果与Control组和NC-sh组比较,ALKBH5-sh组ALKBH5和GEFT的mRNA和蛋白水平降低,相对细胞活力降低,细胞凋亡率和Bax mRNA水平升高,Bcl-2 mRNA水平降低,迁移和侵袭细胞数量降低,MMP2和MMP9 mRNA水平降低,E-cadherin mRNA水平升高,N-cadherin和Vimentin水平降低,GEFT m6A甲基化水平升高,差异具有统计学意义(F=43.347~1995.868,均P<0.001)。与Control组和NC-LV组比较,ALKBH5-LV组ALKBH5和GEFT的mRNA和蛋白水平升高,相对细胞活力升高,细胞凋亡率和Bax mRNA水平降低,Bcl-2 mRNA水平升高,迁移和侵袭细胞数量升高,MMP2和MMP9 mRNA水平升高,E-cadherin mRNA水平降低,N-cadherin和Vimentin水平升高,GEFT m6A甲基化水平降低,差异具有统计学意义(F=42.421~720.275,均P<0.001)。与ALKBH5-LV+NC-sh组比较,ALKBH5-LV+GEFT-sh组GEFT的mRNA和蛋白水平降低,相对细胞活力降低,细胞凋亡率和Bax mRNA水平升高,Bcl-2 mRNA水平降低,迁移和侵袭细胞数量降低,MMP2和MMP9 mRNA水平降低,E-cadherinmRNA水平升高,N-cadherin和Vimentin水平降低,差异具有统计学意义(t=7.175~77.872,均P<0.001)。结论ALKBH5和GEFT均促进胆管癌细胞的生长和转移,ALKBH5可能通过调控GEFT m6A甲基化修饰来影响胆管癌的转移及EMT。 展开更多

关键词 胆管癌 m6A甲基化 alkb同源蛋白 鸟嘌呤核苷酸交换因子 上皮间充质转化

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RNA去甲基化酶ALKBH5对生物学功能调控作用的研究进展 被引量：2

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作者 吴亮 曹凯 《生理科学进展》 2022年第2期147-151,共5页

N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine, m^(6)A)是真核生物RNA最常见的一种转录后修饰,主要影响信使RNA(messenger RNA, mRNA)的可变剪接、翻译效率和稳定性等。研究发现,RNA去甲基化酶AlkB同源物5(human Alk B homolog 5, ALKBH5)... N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine, m^(6)A)是真核生物RNA最常见的一种转录后修饰,主要影响信使RNA(messenger RNA, mRNA)的可变剪接、翻译效率和稳定性等。研究发现,RNA去甲基化酶AlkB同源物5(human Alk B homolog 5, ALKBH5)是影响m;A修饰水平至关重要的酶,在精子形成、大脑发育,肿瘤发生等生命过程起着重要作用。现就ALKBH5的生物学功能调控作用进行综述,旨在为疾病的发生、发展机制和治疗寻找新方向。 展开更多

关键词 N^(6)-甲基腺嘌呤 alkb同源物5 分子生物学功能 疾病

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N^(6)-甲基腺嘌呤去甲基化酶FTO和ALKBH5在肿瘤中的研究进展 被引量：1

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作者 何宜宸 陈依梦 吴昌平 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期280-295,共16页

N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)作为真核生物m RNA最常见的转录后修饰形式,对m RNA的可变剪接、5’和3’端加工、出核以及翻译等行为有着广泛的影响,并参与了多种机体的生理活动。随着m^(6)A去甲基化酶脂肪和肥胖相关... N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)作为真核生物m RNA最常见的转录后修饰形式,对m RNA的可变剪接、5’和3’端加工、出核以及翻译等行为有着广泛的影响,并参与了多种机体的生理活动。随着m^(6)A去甲基化酶脂肪和肥胖相关基因蛋白(fat mass and obesity-associated protein,F TO)以及Alk B同源蛋白5(AlkBhomologue5,ALKBH5)的发现,m^(6)A修饰调节被认为是动态可逆的。肿瘤中异常表达的F TO和ALKBH5蛋白往往导致m^(6)A修饰水平紊乱,这对肿瘤干细胞维持以及肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭乃至对放化疗的敏感性都有着重大影响。在大多数肿瘤中,异常表达的FTO和ALKBH5蛋白发挥着促癌效应,这使得对m^(6)A去甲基化酶抑制剂的探索成为了近年来的研究热点。然而,由于FTO和ALKBH5同属于Alk B双加氧酶家族,都有着保守的共同结构,这造成高特异性抑制剂的开发困难重重。本文将综述m^(6)A去甲基化酶在各种肿瘤中的作用机制以及生物学效应,同时还将概述当前m^(6)A去甲基化酶抑制剂的研究进展,以期全面了解m^(6)A去甲基化酶作为肿瘤诊断和预后生物标志物或是关键治疗靶点的可能性。 展开更多

关键词 肿瘤 alkb同源蛋白5 RNA脱甲基酶 FTO 酶抑制剂

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m^(6)A去甲基化酶ALKBH5与肿瘤发生、发展的研究进展 被引量：1

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作者 邓云洋 孙达欣 +1 位作者 梁万旺 黄丰泽 《医学综述》 CAS 2022年第13期2608-2613,共6页

N^(6)-甲基腺嘌呤(m^(6)A)修饰是指在腺苷酸6位的N原子上插入一个甲基取代基。m^(6)A修饰在甲基转移酶、去甲基化酶和解读器蛋白共同调控下完成,其修饰调控紊乱可影响基因的表达,进而通过调节肿瘤生物学过程(如增殖、迁移、侵袭、转移)... N^(6)-甲基腺嘌呤(m^(6)A)修饰是指在腺苷酸6位的N原子上插入一个甲基取代基。m^(6)A修饰在甲基转移酶、去甲基化酶和解读器蛋白共同调控下完成,其修饰调控紊乱可影响基因的表达,进而通过调节肿瘤生物学过程(如增殖、迁移、侵袭、转移)在多种肿瘤中发挥重要作用。ALKB同系物5作为m^(6)A修饰中的一种重要去甲基化酶,在不同肿瘤中的表达水平、目标基因以及发挥的作用均不同,且其作用机制尚未明确,未来仍需进一步阐明其具体机制,进而为肿瘤的分子靶向治疗提供新线索。 展开更多

关键词 肿瘤 N^(6)-甲基腺嘌呤修饰 alkb同系物5

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m^(6)A去甲基化酶ALKBH5——新的原癌基因 被引量：1

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作者 袁敏 周志刚 +4 位作者 杨萍 陈灵瑶 侯琳 翁若兰 涂剑 《生命的化学》 CAS 2022年第9期1722-1728,共7页

AlkB同源蛋白5(AlkB homolog 5,ALKBH5)属于AlkB家族,对N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladeno-sine,m^(6)A)具有高效的脱甲基活性,参与RNA的剪接、加工、出核和翻译等生物学过程。近年来研究发现,ALKBH5在卵巢癌、胃癌、肺癌和胶质母细胞... AlkB同源蛋白5(AlkB homolog 5,ALKBH5)属于AlkB家族,对N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladeno-sine,m^(6)A)具有高效的脱甲基活性,参与RNA的剪接、加工、出核和翻译等生物学过程。近年来研究发现,ALKBH5在卵巢癌、胃癌、肺癌和胶质母细胞瘤等生殖、消化、呼吸和神经系统恶性肿瘤中的表达异常升高,而且这种异常高表达往往密切关联癌细胞增殖、侵袭/迁移与耐药,预示ALKBH5可能成为一种新的原癌基因。因此,本文主要就ALKBH5在这些系统癌症中的促进作用及其机制作一综述,旨在明确新的癌症防治靶点并研发新药。 展开更多

关键词 m6A 去甲基化酶 alkb同源蛋白5 原癌基因

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