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乳腺癌患者超声造影参数与癌组织PI3K、AKT mRNA表达的相关性分析
1
作者 任丹凤 霍红梅 马忠丽 《临床医学工程》 2025年第6期671-674,共4页
目的分析乳腺癌患者超声造影参数与癌组织PI3K、AKT mRNA表达的相关性。方法选取2021年4月至2024年9月黄河水利委员会黄河中心医院收治的87例乳腺癌患者作为研究组,另选取同期医院收治的60例良性乳腺肿瘤患者作为对照组。对两组患者进... 目的分析乳腺癌患者超声造影参数与癌组织PI3K、AKT mRNA表达的相关性。方法选取2021年4月至2024年9月黄河水利委员会黄河中心医院收治的87例乳腺癌患者作为研究组,另选取同期医院收治的60例良性乳腺肿瘤患者作为对照组。对两组患者进行超声造影检查,记录相关参数,包括峰值强度(PI)、达峰时间(TTP)、上升支斜率(WIS)、梯度(Grad);采用RT-qPCR法检测两组患者肿瘤组织PI3K、AKT mRNA表达情况。比较研究组和对照组、研究组中不同分期乳腺癌患者的超声造影参数,并比较研究组和对照组、研究组中不同分期乳腺癌患者肿瘤组织PI3K、AKT mRNA表达情况,分析乳腺癌患者中癌组织PI3K、AKT mRNA表达量与超声造影参数的相关性。结果研究组患者超声造影参数PI、WIS、Grad显著高于对照组(P<0.05),TTP显著低于对照组(P<0.05)。研究组癌组织PI3K mRNA及AKT mRNA表达量均显著高于对照组肿瘤组织(P<0.05)。TNM分期Ⅱ~Ⅲ期乳腺癌患者PI、WIS、Grad显著高于Ⅰ期患者(P<0.05),TTP显著低于Ⅰ期患者(P<0.05)。Ⅱ~Ⅲ期乳腺癌患者癌组织PI3K、AKT mRNA表达量显著高于Ⅰ期患者(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,乳腺癌患者癌组织PI3K、AKT mRNA表达量与PI、WIS、Grad呈显著正相关(P<0.05),与TTP呈显著负相关(P<0.05)。结论乳腺癌患者超声造影参数与癌组织PI3K、AKT mRNA表达具有显著相关性,通过超声造影检查有助于了解乳腺癌疾病进展情况,对于乳腺癌的早期诊断及病情判断具有重要价值。 展开更多
关键词 乳腺癌 超声造影 癌组织 PI3K mrna akt mrna 相关性
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黄芪皂苷对化疗贫血小鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路相关基因mRNA表达的影响 被引量:16
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作者 乔铁 梁可 +3 位作者 马进 林蔗茹 郑冰元 张立德 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第20期3828-3832,共5页
探讨黄芪皂苷对化疗贫血小鼠PI3K/Akt/mTOR相关基因mRNA表达的影响。选取6~7周龄BALB/c小鼠48只,雄性,随机分为空白组、模型组、皂苷组、甲苷组,每组12只。采用环磷酰胺建立化疗贫血模型,灌胃治疗14 d后,摘眼球取血,QPCR法检测脾脏中Akt... 探讨黄芪皂苷对化疗贫血小鼠PI3K/Akt/mTOR相关基因mRNA表达的影响。选取6~7周龄BALB/c小鼠48只,雄性,随机分为空白组、模型组、皂苷组、甲苷组,每组12只。采用环磷酰胺建立化疗贫血模型,灌胃治疗14 d后,摘眼球取血,QPCR法检测脾脏中Akt,PI3K,BCL-xl,bad,Fox O,mTOR,PTEN的mRNA水平。结果表明,模型组血红细胞计数,血红蛋白含量与空白组、皂苷组和甲苷组比较,明显降低(P〈0.05)。与空白组、皂苷组、甲苷组相比,模型组Akt,PI3K,BCL-xl,bad,mTOR水平明显降低(P〈0.05或P〈0.01);皂苷组这5种基因水平均较空白组无明显差别;除PI3K外的4种基因,甲苷组较空白组有明显差别(P〈0.05或P〈0.01);而皂苷组与甲苷组水平也有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。模型组与空白组、皂苷组相比,Fox O,PTEN水平明显升高(P〈0.05或P〈0.01),较甲苷组无明显差异;甲苷组这2种基因水平均较空白组升高显著(P〈0.05);而皂苷组的Fox O高于空白组(P〈0.05),皂苷组的PTEN与空白组无明显差异;皂苷组Fox O,PTEN水平与甲苷组无统计学意义。因此,该研究结果显示黄芪皂苷能提高Akt,PI3K,BCL-xl,bad,mTOR水平(P〈0.01),降低Fox O,PTEN水平(P〈0.05)。黄芪皂苷可有效改善环磷酰胺所造成的贫血,其机制可能与影响PI3K/Akt/mTOR信号通路相关基因有关。 展开更多
关键词 黄芪 PI3K/akt/MTOR mrna 化疗贫血
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抗纤灵水煎剂对慢性肾衰模型小鼠PI3K-AKT-mTOR mRNA表达的影响 被引量:10
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作者 麻志恒 钟利平 +2 位作者 余柯娜 王颖 何立群 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第20期96-100,共5页
目的:探讨不同剂量的抗纤灵水煎剂对慢性肾衰模型小鼠磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸及苏氨酸蛋白激酶(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(m TOR)mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法:C57BL/6J小鼠50只采用5/6肾切除制备慢性肾脏纤维化小鼠模型,同... 目的:探讨不同剂量的抗纤灵水煎剂对慢性肾衰模型小鼠磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸及苏氨酸蛋白激酶(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(m TOR)mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法:C57BL/6J小鼠50只采用5/6肾切除制备慢性肾脏纤维化小鼠模型,同时设立假手术组10只,造模成功的小鼠随机分为模型组,雷帕霉素组(0.8 mg·kg^(-1)),抗纤灵水煎液低、中、高剂量组(10,20,40 g·kg^(-1)),连续ig 8周后处死小鼠,苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)检测PI3K-AKT-m TOR mRNA表达的含量。结果:与假手术组比较,模型组小鼠肾组织纤维化组织增多,肾损伤评分明显升高,PI3K-AKT-m TOR mRNA表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,雷帕霉素组和抗纤灵各剂量组肾组织纤维化减轻,PI3K-AKT-m TOR mRNA表达明显下降(P<0.05,P<0.01);与雷帕霉素组比较,抗纤灵水煎液中、高剂量与雷帕霉素组间无显著性差异,低剂量组疗效差于雷帕霉素(P<0.05),高、中、低剂量组比较,低剂量组与高、中剂量组之间有明显差异(P<0.05),高、中剂量组之间无显著性差异。结论:抗纤灵水煎液可降模型小鼠表达PI3K-AKT-m TOR mRNA的表达,减轻肾脏纤维化纤维化,抗纤灵水煎液中、高剂量与和雷帕霉素等同。 展开更多
关键词 抗纤灵 慢性肾衰 磷酯酰肌醇3激酶/丝氨酸及苏氨酸蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白mrna 肾组织病理学
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参芪复方对糖尿病大血管病变GK大鼠PI3-K/Akt信号通路的影响 被引量:13
4
作者 高泓 谢春光 +2 位作者 刘桠 陈敏 庄灿 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2011年第1期49-53,共5页
目的探讨参芪复方防治糖尿病大血管病变的作用机制。方法以Wistar大鼠18只作为空白组,73只GK大鼠随机分为4组:GK组18只、模型组19只、阿托伐他汀组18只、参芪复方组18只。模型组、阿托伐他汀组、参芪复方组给予一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L... 目的探讨参芪复方防治糖尿病大血管病变的作用机制。方法以Wistar大鼠18只作为空白组,73只GK大鼠随机分为4组:GK组18只、模型组19只、阿托伐他汀组18只、参芪复方组18只。模型组、阿托伐他汀组、参芪复方组给予一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME0.1mg/(ml.d),加入饮用水中进行糖尿病大血管病变造模,造模同时开始给药。35天后观测主动脉形态,检测血清C反应蛋白(CRP)含量和腹主动脉PI3-KP85a、AktmRNA表达量变化情况。结果参芪复方中药可减轻模型大鼠动脉粥样硬化的病理改变程度,降低血清CRP水平(P<0.01);参芪复方组PI3-KP85amRNA表达水平低于模型组,但无统计学意义;与模型组比较,参芪复方组能明显降低腹主动脉血管壁AktmRNA表达水平(P<0.01)。结论参芪复方可有效防治糖尿病大血管病变的发生发展,其机制可能与抑制糖尿病GK大鼠主动脉血管壁AktmRNA表达量,抑制PI3-K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 参芪复方 糖尿病大血管病变 P13 K/akt信号通路 akt mrna表达量
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海藻玉壶汤加减海藻甘草反药组合对甲状腺肿大大鼠PI3K/Akt通路相关基因表达的影响 被引量:7
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作者 王鑫 葛超冉 +9 位作者 钟赣生 霍敏 贺佳 李娜 陈丰 柳海艳 修琳琳 陈绍红 许皖 范盎然 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期800-804,共5页
目的:探讨海藻、生甘草剂量为2015年版《中华人民共和国药典》规定高限剂量的2倍条件下,海藻玉壶汤加减海藻甘草反药组合对甲状腺肿大大鼠PI3K/Akt通路相关基因表达的影响。方法:84只大鼠按体质量分为空白组、模型组、阳性药组、全方组... 目的:探讨海藻、生甘草剂量为2015年版《中华人民共和国药典》规定高限剂量的2倍条件下,海藻玉壶汤加减海藻甘草反药组合对甲状腺肿大大鼠PI3K/Akt通路相关基因表达的影响。方法:84只大鼠按体质量分为空白组、模型组、阳性药组、全方组、去海藻组、去甘草组、去藻草组,每组12只。用丙硫氧嘧啶复制甲状腺肿大动物模型,然后给予相应药液灌胃治疗。采用TUNEL检测细胞凋亡,计算凋亡指数,采用实时定量PCR和Western Blot检测PI3K、Akt、Cyclin D1、Bcl-2 mRNA和Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果:与模型组比较,全方组凋亡指数显著升高(P<0.05),各中药给药组PI3K、Cyclin D1和Bcl-2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01,P<0.05),全方组和去藻草组Akt mRNA表达显著降低(P<0.05),各中药给药组p-Akt、p-Akt/Akt蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论:海藻玉壶汤加减海藻甘草对丙硫氧嘧啶所致甲状腺肿大大鼠有显著治疗作用,通过作用于PI3K/Akt信号通路,下调Cyclin D1和Bcl-2等mRNA的表达,对细胞增殖和细胞凋亡两方面进行调控,起到治疗甲状腺肿大的作用。 展开更多
关键词 海藻玉壶汤 甲状腺肿大 TUNEL凋亡检测 PI3K/akt信号通路 mrna 海藻甘草反药组合 动物模型
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AKT反馈激活拮抗4EGI-1对黑素瘤A375细胞的抑制作用
6
作者 陈兰 邓仁远 +3 位作者 涂云华 叶振源 薛月萃 曹煜 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期438-442,共5页
目的:探索4EGI-1对黑素瘤A375细胞中AKT通路的激活作用及后者对4EGI-1抑制A375细胞增殖的影响。方法:用20、40、60μmol/L的4EGI-1处理黑素瘤A375细胞12、24 h,Western boltting检测4EGI-1对A375细胞中AKT磷酸化的影响;A375细胞分别受4E... 目的:探索4EGI-1对黑素瘤A375细胞中AKT通路的激活作用及后者对4EGI-1抑制A375细胞增殖的影响。方法:用20、40、60μmol/L的4EGI-1处理黑素瘤A375细胞12、24 h,Western boltting检测4EGI-1对A375细胞中AKT磷酸化的影响;A375细胞分别受4EGI-1(40μmol/L)、BEZ235(5μmol/L)、4EGI-1(40μmol/L)+BEZ235(5μmol/L)联合处理,CCK-8实验和流式细胞术分别检测4EGI-1、BEZ235单独或联合处理对A375细胞增殖和细胞周期的影响,Western boltting检测对细胞周期相关蛋白Cyclin D1表达的影响。结果:4EGI-1促进A375细胞中AKT的磷酸化,且具有剂量依赖性;而BEZ235能够拮抗4EGI-1对AKT的促磷酸化作用。与4EGI-1组和BEZ235组相比,联合组的A375细胞增殖抑制率显著升高[24 h时,4EGI-1组和BEZ235组抑制率分别为(7.6±1.2)%和(2.4±3.1)%,而联合组抑制率为(19.8±4.3)%;P<0.05],S期细胞比例显著降低(4EGI-1组和BEZ235组S期细胞比例分别为25.65%和25.82%,联合处理组细胞S期为13.08%;P<0.05),Cyclin D1表达显著降低(4EGI-1组和BEZ235组Cyclin D1相对表达值为0.81±0.04和0.76±0.04,联合处理组细胞Cyclin D1相对表达值为0.25±0.03;P<0.05)。结论:AKT反馈激活拮抗4EGI-1对黑素瘤A375细胞的抑制作用,联合使用AKT抑制药物能够增强4EGI-1对A375细胞的生长抑制作用。 展开更多
关键词 黑素瘤 A375细胞 akt 帽子依赖翻译 4EGI-1
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白血病细胞PTEN表达与AKT磷酸化水平相关性研究 被引量:5
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作者 张媛玉 刘霆 孟文彤 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1109-1113,共5页
本研究探讨各型白血病pten mRNA及蛋白表达与AKT磷酸化水平的关系及其在白血病发病中的作用,为今后PI3K/AKT通路抑制剂的使用提供依据。128例初发的白血病患者纳入研究,其中AML 61例,ALL 27例,CML24例,CLL16例。正常对照21例。采用RT-PC... 本研究探讨各型白血病pten mRNA及蛋白表达与AKT磷酸化水平的关系及其在白血病发病中的作用,为今后PI3K/AKT通路抑制剂的使用提供依据。128例初发的白血病患者纳入研究,其中AML 61例,ALL 27例,CML24例,CLL16例。正常对照21例。采用RT-PCR和Western blot分别检测Jurkat细胞株、白血病患者骨髓单个核细胞pten mRNA表达,PTEN蛋白及P-AKT蛋白的表达。结果表明:Jurkat细胞株pten mRNA表达和PTEN蛋白表达水平均较正常对照组低。AML组pten mRNA表达量虽低于正常对照组,但差异无统计学意义(p=0.274);ALL、CML、CLL各组患者pten mRNA表达量低于正常对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。AML、ALL、CML、CLL各组PTEN蛋白表达量均低于正常对照组,P-AKT蛋白表达量均高于正常对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:PTEN的低表达及P-AKT高表达在白血病的发生中可能有重要的作用,PTEN的失活主要发生在蛋白质翻译水平。 展开更多
关键词 白血病 PTEN基因 PTEN蛋白 akt磷酸化
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Fluspirilene下调Akt抗肝癌的分子机制研究 被引量:2
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作者 石西南 张荣平 +7 位作者 解宇环 孟卓然 吴施国 陈嵘 万伟萍 张珊 陈伟 王健 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期356-361,共6页
目的探索小分子化合物Fluspirilene下调Akt抗肝癌的分子机制。方法细胞实验:经不同浓度Fluspirilene处理肝癌细胞HepG2和Huh7后,通过mRNA转录组筛查检测差异表达;Western blot实验检测蛋白表达水平。动物实验:经不同浓度Fluspirilene处... 目的探索小分子化合物Fluspirilene下调Akt抗肝癌的分子机制。方法细胞实验:经不同浓度Fluspirilene处理肝癌细胞HepG2和Huh7后,通过mRNA转录组筛查检测差异表达;Western blot实验检测蛋白表达水平。动物实验:经不同浓度Fluspirilene处理肝癌移植瘤模型小鼠21 d后取肿瘤组织,通过免疫组化检测蛋白水平的表达。结果与对照之间相比,Fluspirilene处理组mRNA转录组筛查显示Akt呈现3.07倍低表达(P<0.01)。免疫组化蛋白检测Fluspirilene治疗肝癌移植瘤小鼠组,其组织p-Akt蛋白水平呈现浓度依赖性低表达(P<0.05)。Western blot蛋白水平检测结果:p-Akt、p-CDK2及p-Rb蛋白水平呈现浓度依赖性低表达(P<0.05)。结论通过体内外生物分子实验推测Fluspirilene通过调控Akt激酶,降低细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2、Rb的活性发挥抗肝癌作用。 展开更多
关键词 Fluspirilene akt 肝癌 转录组筛查 细胞周期 CDK2
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三硝基苯磺酸/乙醇灌肠液诱导大鼠溃疡性结肠炎TLR4/NF-κB和PI3K/AKT/NF-κB信号通路的表达及电针的干预作用 被引量:27
9
作者 张超贤 郭李柯 郭晓凤 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期263-270,共8页
目的探讨三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠液诱导大鼠溃疡性结肠炎TLR4/NF-κB和PI3K/AKT/NF-κB信号通路的表达及电针的干预作用。方法雄性Wistar大鼠240只,随机分为正常对照组、模型组、电针组、TLR4单克隆抗体(TLR4mAb)组、LY294002组和T... 目的探讨三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠液诱导大鼠溃疡性结肠炎TLR4/NF-κB和PI3K/AKT/NF-κB信号通路的表达及电针的干预作用。方法雄性Wistar大鼠240只,随机分为正常对照组、模型组、电针组、TLR4单克隆抗体(TLR4mAb)组、LY294002组和TLR4mAb-LY294002联合治疗(T&L)组。以TNBS/乙醇溶液灌肠诱导大鼠溃疡性结肠炎模型,电针组造模同时给予电针足三里穴治疗,TLR4mAb组给予TLR4mAb腹腔注射,LY294002组则予LY294002注射液腹腔注射,T&L组则同时给与上述TLR4mAb和LY294002腹腔注射,共4周,每日行疾病活动指数(DAI)评分。造模4周后处死大鼠取结肠组织标本,评价结肠黏膜损伤指数(CMDI)和组织学损伤指数(TDI);免疫印迹法测定结肠黏膜磷酸化AKT(P-AKT)和活化NF-κB含量;RT-PCR法检测结肠组织中TLR4mRNA、PI3K mRNA、AKT mRNA、NF-κB mRNA、TNF-αmRNA及IL-1βmRNA表达。结果与正常对照组比较,模型组结肠组织TLR4mRNA、PI3K mRNA、P-AKT、活化NF-κB、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA表达和DAI、CMDI及TDI均显著升高(P<0.01);与模型组比较,TLR4mAb组TLR4mRNA表达显著下降(P<0.01),LY294002组PI3K mRNA、P-AKT表达显著下降(P<0.01),而在电针组和T&L组TLR4mRNA、PI3K mRNA及P-AKT表达均明显降低(P<0.01);与上述变化相对应,与模型组相比,各治疗组活化NF-κB、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA表达和DAI、CMDI及TDI均明显降低(P<0.05或P<0.01),电针组和T&L组上述6指标优于TLR4mAb组和LY294002组,活化NF-κB与TNF-αmRNA及IL-1βmRNA表达呈正相关(r1=0.579,P<0.05;r2=0.561,P<0.05)。结论电针足三里穴能显著降低实验性溃疡性结肠炎大鼠的NF-κB活性及TNF-αmRNA、IL-1βmRNA表达,从而减轻结肠组织损害程度,这与其阻断TLR4/NF-κB和PI3K/AKT/NF-κB信号通路有密切关系。 展开更多
关键词 电针 溃疡性结肠炎 toll样受体4(TLR4)NF-xB信号通路 PI3K/akt/NF-xB信号通路 活化核转录因子-KB 肿瘤坏死因子-a mrna IL-1β mrna
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ALI时MicroRNA-21通过PTEN调控PI3KAKT途径影响MSC存活的研究 被引量:1
10
作者 邵建平 蔡施霞 +3 位作者 孙运波 方巍 刘冰 李连弟 《中国卫生标准管理》 2021年第14期125-129,共5页
目的观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时miRNA-21通过磷酸酯酶一张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)调控PI13K/AKT信号通路途径影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)存活情况。方法选择体外通过H2O2/S... 目的观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时miRNA-21通过磷酸酯酶一张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)调控PI13K/AKT信号通路途径影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)存活情况。方法选择体外通过H2O2/SD刺激MSC,观察MSC凋亡和增殖情况,然后通过转染上调和下调MSC的miR-21表达,观察miR-21靶基因PTEN及信号通路分子PI3K/Akt、Bcl-2表达的改变,以及对MSC凋亡和增殖的影响,明确miR-21对ALI时MSC凋亡和增殖的调节及其作用机制;将转染后高表达miR-21的MSC注入LPS诱导的ALI小鼠体内,观察转染后的MSC在体内凋亡及增殖,miR-21靶基因及相关信号通路分子表达的改变,及修复肺损伤和保护肺功能的作用。结果 ALI组、MSC处理组的PTEN、PI3K、Akt、Bcl2基因和蛋白表达高于空白对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);MSC处理组的PTEN、PI3K、Akt、Bcl2基因表达低于ALI组,差异具有统计学意义(P <0.05);LY294002处理的miR-21-MSC标记细胞、沉默PTEN的miR-21-MSC标记细胞的MSC存留率、MSC移植后细胞存活率高于miR-21-MSC、野生型MSC细胞,肺湿/干重比低于miR-21-MSC、野生型MSC细胞,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论探讨ALI时调节MSC凋亡、增殖相关的miRNAs及其作用机制有助于为增加移植后的细胞存活率找到新的治疗靶点。 展开更多
关键词 急性肺损伤 间充质干细胞 PI3K/akt信号通路 PTEN 蛋白表达 mrna-21
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PI3K/AKT/GSK-3β信号通路在转录后水平调控ICAM-1的表达
11
作者 韩婷婷 史家欣 +3 位作者 周婷 卓荦 陈晓兵 李小民 《徐州医科大学学报》 CAS 2018年第8期491-498,共8页
目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PBK)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路调控脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及其机制。方法①LPS(10mg/L)刺激HUVEC... 目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PBK)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路调控脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及其机制。方法①LPS(10mg/L)刺激HUVEC0、6、12、24h或者0、4、8、12h或者0、30、60、120min后,Western blot检测ICAM-1、PI3K、P—PI3K、AKT、P—AKT、GSK-3β和P—GSK-3β的表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测ICAM-1 mRNA的表达。②将P13K、AKT和GSK-3B的siRNA分别转染HUVEC,转染浓度梯度为40、80和100nmol/L,对照组转染control siRNA,Western blot检测P13K、AKT和GSK-3①总蛋白的表达。③将PI3K、AKT和GSK-3β的siRNA分别转染HUVEC,对照组转染control siRNA,LPS刺激细胞30min、1h、8h和12h,Westernblot检测P—AKT、P—GSK-3B和ICAM-1的表达,qPCR检测ICAM-1mRNA的表达。④转染方法同上,LPS刺激HUVEC8h后加入放线菌素D(ActD)5ms/L抑制转录,于0、1、2、5和4h收集细胞,qPCR检测ICAM—lmRNA的表达并计算mRNA的半衰期。结果①LPS刺激HUVEC后ICAM-1的表达12h达高峰,与其他时间点有显著差异(P〈0.05或P〈0.01);LPS刺激HUVEC后ICAM-1mRNA的表达8h达高峰,与其他时间点有显著差异(P〈0.05或P〈0.01);LPS刺激HUVEC后PI3K、AKT和GSK-3B蛋白的磷酸化水平分别在刺激30min、1h和1h后达高峰。②PI3K、AKT和GSK-3B转染组的最适转染浓度为100nmol/L。③PI3K转染组的P—AKT和P—GSK-3β表达显著下降(P〈0.01),AKT转染组P—GSK-3β表达显著下降(P〈0.01);PBK和AKT转染组的ICAM-1的蛋白和mRNA表达均显著升高(P〈0.05或P〈0.01),相反GSK-3β转染组ICAM-1的蛋白和mRNA表达均显著下降(P〈0.01)。④PI3K、AKT的沉默表达显著延长ICAM-1的mRNA半衰期(P〈0.01),相反GSK-3B的沉默表达显著缩短ICAM-1的mRNA半衰期(P〈0.01)。结论LPS通过激活PI3K/AKT/GSK-3β信号通路负向调控HUVEC表达ICAM-1。PBK、AKT和GSK-3B在转录后水平调控ICAM-1mRNA的稳定性。 展开更多
关键词 PI3K/akt/GSK-3β信号通路 脂多糖 人脐静脉血管内皮细胞 细胞间黏附分子-1 mrna稳定性
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芪桂益脉灵对急性心肌缺血再灌注损伤保护机制的研究 被引量:5
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作者 张超越 赵龙 徐京育 《吉林中医药》 2017年第1期67-71,共5页
目的通过测定ICAM-1、VCAM-1、PI-3Kp85am RNA和AKT2m RNA的表达,探讨芪桂益脉灵对急性心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法随机将50只SD大鼠分为5组,每组10只,每日清晨空腹灌胃1次,连续灌服7 d。空白对照组(灌服生理盐水)开胸暴露左冠... 目的通过测定ICAM-1、VCAM-1、PI-3Kp85am RNA和AKT2m RNA的表达,探讨芪桂益脉灵对急性心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法随机将50只SD大鼠分为5组,每组10只,每日清晨空腹灌胃1次,连续灌服7 d。空白对照组(灌服生理盐水)开胸暴露左冠状动脉后不做任何处理,假手术组(灌服生理盐水)开胸暴露左冠状动脉后穿线并结扎,单纯缺血再灌注组(灌服生理盐水)、芪桂益脉灵低剂量组(0.6 g/kg)和芪桂益脉灵高剂量组(1.2g/kg)结扎左冠状动脉前降支造成急性心肌梗死(AMI)模型。再灌注后腹主动脉采血5 m L,离心后将上层血清用双抗体夹心法酶联免疫测定ICAM-1和VCAM-1的表达;取大鼠心尖部缺血组织,采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)方法来测定PI-3Kp85am RNA、AKT2m RNA的表达。结果芪桂益脉灵组与单纯缺血再灌注组比较,ICAM-1和VCAM-1表达均下降(P<0.05),PI3Kp85am RNA、AKT2m RNA水平明显升高(P<0.05),其中高剂量组的效果更加显著。结论芪桂益脉灵可减轻心肌缺血再灌注后的炎症反应,并且可激活再灌注损伤挽救激酶信号通路,从而保护血管内皮和受损心肌组织。 展开更多
关键词 芪桂益脉灵 心肌缺血再灌注 ICAM-1 VCAM-1 PI3Kp85amrna akt2mrna
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胰岛素的抗炎作用及其机制的研究 被引量:8
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作者 董倩兰 寇小妮 朱本章 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期156-160,共5页
目的观察不同浓度胰岛素干预对脂多糖刺激的单个核细胞核因子抑制蛋白(IκB)、核转录因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的影响,同时在细胞水平对PI3K/Akt信号通路上关键分子P-Akt进行监测,探讨胰岛素的抗炎作用及可能机制。... 目的观察不同浓度胰岛素干预对脂多糖刺激的单个核细胞核因子抑制蛋白(IκB)、核转录因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的影响,同时在细胞水平对PI3K/Akt信号通路上关键分子P-Akt进行监测,探讨胰岛素的抗炎作用及可能机制。方法收集30例T2DM患者外周血各10ml,密度梯度法分离单核细胞,随机分5组进行干预培养,对照(Con)组、低浓度胰岛素100mU/L(L-Ins)组、低浓度胰岛素联合LY-294002 10μmol/L(L-Ins+LY)组、高浓度胰岛素1000mU/L(H-Ins)组、高浓度胰岛素联合LY-294002 10μmol/L(H-Ins+LY)组,每组设两个亚组。24h后加脂多糖100ng/ml继续培养,其中一个亚组采用Western blot测定P-Akt、IκBα、NF-κB蛋白的表达情况,另一亚组采用RT-PCR检测TNF-αmRNA水平。结果 L-Ins组、H-Ins组与Con组比较,P-Akt、IκB含量增加,NF-κB、TNF-αmRNA水平下降(P<0.05);H-Ins组较L-Ins组作用更明显(P<0.05);L-Ins组较低浓度L-Ins+LY组、H-Ins组较H-Ins+LY组P-Akt、IκB含量升高,NF-κB、TNF-αmRNA降低(P<0.05);L-Ins+LY组、H-Ins+LY组与Con组P-Akt、IκB、NF-κB比较,差异无统计学意义(P>0.05),TNF-αmRNA水平高(P<0.05),L-Ins+LY组和H-Ins+LY组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论胰岛素有直接抗炎作用,其效应呈剂量相关性;胰岛素可能通过激活PI3K/Akt通路,增加IκB,影响NF-κB的状态,从而对炎性因子合成和分泌进行调节;在PI3K/Akt通路受阻时,胰岛素可能通过其他通路增加炎症因子的合成和分泌。 展开更多
关键词 胰岛素 抗炎作用 细胞核因子抑制蛋白 核转录因子ΚB P-akt 肿瘤坏死因子αmrna PI3K/akt
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基于mRNA测序筛选氟暴露大鼠主动脉组织PI3K/Akt/eNOS的基因表达差异 被引量:1
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作者 孙洪娜 王腾 +3 位作者 邹宁 王乔雨 高彦辉 孙殿军 《中华地方病学杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期953-956,共4页
目的探索氟暴露对大鼠主动脉组织磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)基因表达的影响, 为地方性氟中毒致心血管系统损伤的机制研究提供理论基础。方法将40只雄性Wistar大鼠按体质量(80 ~ 100 g)采用随机数... 目的探索氟暴露对大鼠主动脉组织磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)基因表达的影响, 为地方性氟中毒致心血管系统损伤的机制研究提供理论基础。方法将40只雄性Wistar大鼠按体质量(80 ~ 100 g)采用随机数字表法分成4组, 每组10只, 分别为对照组(饮用蒸馏水), 低、中、高剂量组[饮用含50、100、150 mg/L氟化钠(NaF)蒸馏水], 大鼠自由饮水摄食, 喂养90 d后处死, 取主动脉组织。对照组、高剂量组各取3份主动脉组织样本进行mRNA测序, 筛选差异基因, 并对差异基因进行GO功能富集分析和KEGG功能富集分析。同时, 采用实时荧光定量PCR检测各组大鼠主动脉组织PI3K、Akt、eNOS mRNA表达水平。结果高剂量组与对照组相比, 差异基因有756个, 其中上调基因有654个, 下调基因有102个。这些差异基因主要与肌肉收缩、肌肉调节、肌肉组织发育、横纹肌细胞发育、肌细胞分化、血液循环调节和横纹肌组织发育等生物过程相关, 主要富集于环磷酸鸟苷(cGMP-PKG)信号通路、松弛素信号通路、PI3K/Akt信号通路等。与对照组相比, 低、中、高剂量组大鼠主动脉组织PI3K、eNOS mRNA表达水平均较低(P均<0.05);低剂量组Akt mRNA表达水平较高(P<0.05)。结论氟暴露对大鼠主动脉组织的功能发挥和基因表达等生物过程具有一定的影响, PI3K/Akt/eNOS信号通路可能在氟致大鼠主动脉组织损伤过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 mrna测序 主动脉 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶信号通路
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橄榄苦苷介导PI3K/AKT信号通路诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡的研究
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作者 叶彦 张玉珠 +2 位作者 杜崇涛 谢光洪 郑慧华 《中国兽医学报》 2025年第11期2466-2473,共8页
犬乳腺肿瘤(CMT)是母犬癌症相关死亡的最常见疾病因素之一,因其高复发性和转移性导致传统手术疗法面临挑战。天然化合物橄榄苦苷Ole与多种现象,如寿命延长、降低疾病发病率和死亡率密切相关,然而其对CMT的影响尚不清楚。因此,本研究开... 犬乳腺肿瘤(CMT)是母犬癌症相关死亡的最常见疾病因素之一,因其高复发性和转移性导致传统手术疗法面临挑战。天然化合物橄榄苦苷Ole与多种现象,如寿命延长、降低疾病发病率和死亡率密切相关,然而其对CMT的影响尚不清楚。因此,本研究开展了以下试验以探究Ole是否对犬乳腺肿瘤的发展产生影响:利用划痕试验、流式细胞术、RT-qPCR和蛋白免疫印迹等技术,检测不同浓度的Ole对CHMm细胞的活力、迁移能力、凋亡及相应蛋白Bax和BCL-2的表达水平和肿瘤相关基因mRNA的表达等情况的影响,同时探究其作用机制。结果显示,将Ole作用CMT细胞CHMm后,其激活了PI3K/AKT信号通路,诱导了相关蛋白的磷酸化,显著抑制了p-PI3K和p-AKT蛋白的表达水平。同时,Ole显著抑制了CMT细胞的存活、迁移和增殖能力。此外,与细胞凋亡密切相关的蛋白Bax和BCL-2的表达以及一些与肿瘤相关的基因mRNA的表达均受到了显著的调控,表明Ole介导PI3K/AKT信号通路有效诱导了CMT细胞的凋亡。这一研究提示Ole有望成为治疗乳腺癌的关键药物,同时为开发出针对CMT的有效治疗方法提供了关键的靶点。 展开更多
关键词 犬乳腺肿瘤 橄榄苦苷 细胞凋亡 肿瘤相关基因mrna表达 PI3K/akt信号通路
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