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鹿茸提取物的药理作用及对A30P线虫干预情况探究
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作者 燕金霞 红岩 《实用中医内科杂志》 2025年第9期126-129,共4页
目的 探究鹿茸提取物对A30P线虫干预效果及其药理作用。方法 购买A30P线虫,按照鹿茸提取物不同浓度分为0、0.4、1、2.5、5 mg/mL组,分析不同浓度下鹿茸提取物对A30P线虫生存率、生长发育、生殖能力、抗氧化能力,并且通过分析同浓度下鹿... 目的 探究鹿茸提取物对A30P线虫干预效果及其药理作用。方法 购买A30P线虫,按照鹿茸提取物不同浓度分为0、0.4、1、2.5、5 mg/mL组,分析不同浓度下鹿茸提取物对A30P线虫生存率、生长发育、生殖能力、抗氧化能力,并且通过分析同浓度下鹿茸提取物对A30P线虫运动行为、树突恢复情况来评价鹿茸提取物的药理作用。结果 与0 mg/mL组相比,1.0 mg/mL组、2.5 mg/mL组线虫平均寿命以及死亡率无差异(P>0.05);与0 mg/mL组相比,0.4 mg/mL组、5 mg/mL组线虫平均寿命以及死亡率均有所下降(P<0.05);各组间A30P线虫生长发育相比无差异(P>0.05);与0 mg/mL组相比,1.0 mg/mL组、2.5 mg/mL组线虫排卵量无差异(P>0.05),与0 mg/mL组相比,0.4 mg/mL组、5 mg/mL组线虫排卵量有所下降(P<0.05);与0 mg/mL组相比,0.4 mg/mL组、5 mg/mL组线虫gst-4、gst-7、Skn-1、hsp-16.2基因水平无差异(P>0.05);与0 mg/mL组相比,1.0 mg/mL组、2.5 mg/mL组线虫gst-4、gst-7、Skn-1、hsp-16.2基因水平有所上升(P<0.05);与0 mg/mL组相比,0.4 mg/mL组、5 mg/mL组线虫弯曲次数无差异(P>0.05);与0 mg/mL组相比,1.0 mg/mL组、2.5 mg/mL组线虫弯曲次数有所上升(P<0.05);相较于与0 mg/mL组,0.4 mg/mL组、1.0 mg/mL组、2.5 mg/mL组、5 mg/mL组树突计分以及树突恢复比率均有所上升,其中树突计分以2.5 mg/mL组最优,树突恢复比率以5 mg/mL组最优(P<0.05)。结论 通过对A30P线虫应用鹿茸提取物发现,1.0 mg/mL、2.5 mg/mL两种剂量对A30P线虫生存率、生长发育、生殖能力、树突计分、抗氧化能力的能力较好,而5 mg/mL剂量下对A30P线虫树突恢复比率的效果最优。 展开更多
关键词 鹿茸提取物 药理 a30p线虫 生长发育
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建立人α突触核蛋白A30P突变的帕金森病大鼠模型 被引量:2
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作者 宋娜 王海军 +9 位作者 李宏彬 邵明龙 张伟 谷腾腾 胡庆 余建 张景航 苏蔚 赵铁锁 李雨姗 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期567-573,共7页
目的建立人α-突触核蛋白(α-synuclein,α-SYN)A30P突变型转基因大鼠的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型。方法利用慢病毒系统构建过表达野生型α-SYN载体pLKO-CMV-α-SYN-WT-P2A-GFP及α-SYN A30P突变载体pLKO-CMV-α-SYN-A30P-... 目的建立人α-突触核蛋白(α-synuclein,α-SYN)A30P突变型转基因大鼠的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型。方法利用慢病毒系统构建过表达野生型α-SYN载体pLKO-CMV-α-SYN-WT-P2A-GFP及α-SYN A30P突变载体pLKO-CMV-α-SYN-A30P-P2A-GFP,分别转染293FT细胞,瞬时转染24 h后WB检测α-SYN的表达水平。之后经慢病毒包装、浓缩,利用立体定位技术分别对大鼠中脑黑质致密部注射病毒稀释液,过表达α-SYN野生型和A30P突变型的慢病毒颗粒。免疫荧光染色检测α-SYN和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)的分布情况,并观察中脑黑质致密部多巴胺能神经元数量的变化。Rotating rod实验评价注射A30P慢病毒大鼠的行为改变情况。结果野生型和突变型A30P的基因表达载体在293FT细胞内能够高表达α-SYN蛋白。TH免疫荧光结果显示:与病毒稀释液组相比,过表达α-SYN野生型和A30P突变型大鼠均能导致中脑黑质致密部多巴胺能神经元数量的减少,而α-SYN A30P慢病毒注射组的中脑黑质神经元缺失的更多,具有显著性差异。对A30P转基因大鼠脑部神经元缺失部位进行免疫荧光发现,该区域TH染色几乎呈阴性,α-SYN蛋白出现大量聚集,该结果表明脑部神经元的消失同时伴随着α-SYN蛋白的聚集及TH表达的剧烈减少,进一步揭示过表达α-SYN A30P可以导致多巴胺能神经元数量的减少和退化。此外,rotating rod实验结果显示过表达α-SYN A30P大鼠表现出明显的进行性运动能力障碍。结论通过慢病毒系统建立了人α-SYN A30P突变型转基因大鼠的PD模型,为PD发病机制的研究及药物开发奠定基础。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 a30p 慢病毒表达载体 帕金森病 大鼠
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人α-突触核蛋白A30P突变对小鼠嗅球神经发生的影响 被引量:1
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作者 孙艺学 王爱兵 +2 位作者 车冠宇 李子义 张学明 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期74-77,I0002,共5页
目的:探讨人α-突触核蛋白(SNCA)点突变A30P对成体小鼠嗅球(OB)中神经发生的影响,阐明其在退行性神经疾病发生中的作用。方法:以C57BL/6正常小鼠(C57BL)、内源性SNCA敲除小鼠(SNCA-/-)、内源性SNCA敲除与人SNCA A30P点突变敲入小鼠(A30P... 目的:探讨人α-突触核蛋白(SNCA)点突变A30P对成体小鼠嗅球(OB)中神经发生的影响,阐明其在退行性神经疾病发生中的作用。方法:以C57BL/6正常小鼠(C57BL)、内源性SNCA敲除小鼠(SNCA-/-)、内源性SNCA敲除与人SNCA A30P点突变敲入小鼠(A30PSNCA-/-)为实验动物,分为C57BL、SNCA-/-和A30PSNCA-/-3组,取小鼠OB冠状冰冻切片,进行形态学观察及磷酸化组蛋白3(PH3)、双皮质素(Dcx)、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)免疫荧光染色,分析PH3+细胞数、Dcx+细胞的荧光强度以及DAPI染色后的细胞密度。结果:SNCA-/-和A30PSNCA-/-组小鼠OB突触球层(GL)的细胞密度轻微降低,A30PSNCA-/-组小鼠OB轻度变形,其PH3+增殖性神经元也较其他2组显著减少(P<0.05);SNCA-/-和A30PSNCA-/-组小鼠OB中神经母细胞的Dcx荧光强度轻微增加,3组小鼠OB中DAPI染色后的细胞密度未见明显变化。结论:人SNCA A30P突变能减弱成体小鼠大脑OB中的神经细胞增殖,对成体OB中的神经发生有一定抑制作用。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 a30p点突变 神经发生 嗅球
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四环素调控A30P突变α-synuclein转基因小鼠的构建
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作者 胡伟东 杨亚萍 +5 位作者 程言博 钱进军 李莉 张萍 石际俊 刘春风 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期64-70,共7页
为了构建四环素调控的人A30P突变α-synuclein转基因小鼠模型,将外源基因pTRE2-syn和pBC-rtTA同时显微注射到FVB小鼠(Mus muscculus)受精卵的雄原核中,将注射后存活的受精卵移植到同期发情的假孕受体鼠输卵管中,出生个体经PCR检测,获得r... 为了构建四环素调控的人A30P突变α-synuclein转基因小鼠模型,将外源基因pTRE2-syn和pBC-rtTA同时显微注射到FVB小鼠(Mus muscculus)受精卵的雄原核中,将注射后存活的受精卵移植到同期发情的假孕受体鼠输卵管中,出生个体经PCR检测,获得rtTA和A30P突变α-synuclein双阳性转基因雌鼠1只,A30P单基因阳性雄鼠13只并传代。强力霉素诱导后双阳性后代脑区各部分A30P突变α-synucleinmRNA均有表达,而在诱导满4周后,脑干α-synuclein蛋白表达明显增加,8周后增加更明显。结果表明,通过强力霉素诱导后,可在小鼠小脑、脑干、海马、皮层检测到A30P mRNA表达,脑干α-synuclein表达量显著增加。 展开更多
关键词 四环素 a30p Α-SYNUCLEIN 转基因 构建
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A30Pα-synuclein原核表达载体的构建及表达
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作者 周英泽 王桂芬 +2 位作者 刘江月 张代娟 刘同美 《济宁医学院学报》 2012年第2期97-99,共3页
目的构建A30Pα-synuclein基因的原核表达载体,分析其在大肠杆菌中的表达。方法酶切质粒pcDNA3.0-A30Pα-synuclein,获得A30Pα-synuclein基因的目的片段,克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,转化大肠杆菌BL21。IPTG诱导后,经考马斯亮蓝染色... 目的构建A30Pα-synuclein基因的原核表达载体,分析其在大肠杆菌中的表达。方法酶切质粒pcDNA3.0-A30Pα-synuclein,获得A30Pα-synuclein基因的目的片段,克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,转化大肠杆菌BL21。IPTG诱导后,经考马斯亮蓝染色和Western-blot分析目的蛋白的表达。结果 A30Pα-synuclein基因克隆至pGEX-6P-1载体中,考马斯亮蓝染色及Western-blot检测到A30Pα-synuclein蛋白在BL21中的表达。结论成功构建A30Pα-synuclein的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达了A30Pα-synuclein融合蛋白,为进一步研究A30Pα-synuclein在帕金森病中的作用奠定了良好基础。 展开更多
关键词 a30pα-synuclein 帕金森病 GST-融合蛋白
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α-突触核蛋白A30P突变对小鼠海马齿状回神经发生的影响 被引量:2
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作者 蔡宁宁 姜禹 +2 位作者 朱文倩 杨蕊 张学明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期748-753,共6页
α-突触核蛋白(α-synuclein,SNCA)A30P点突变是帕金森病(Parkinson disease,PD)的主要标志之一。已知PD的发生发展与大脑海马齿状回(dentate gyrus,DG)的神经紊乱有密切关系,但尚不清楚该突变对成体DG神经发生有何直接影响。本研究以C5... α-突触核蛋白(α-synuclein,SNCA)A30P点突变是帕金森病(Parkinson disease,PD)的主要标志之一。已知PD的发生发展与大脑海马齿状回(dentate gyrus,DG)的神经紊乱有密切关系,但尚不清楚该突变对成体DG神经发生有何直接影响。本研究以C57BL/6正常小鼠(C57BL)、内源性SNCA敲除鼠(SNCA-/-)、SNCA-/-+人SNCA A30P突变基因敲入鼠(A30P SNCA-/-)为实验动物(每组4只),经灌流固定、冰冻切片和免疫荧光组织化学染色,观察分析其DG形态学变化及磷酸化组蛋白3(PH3,增殖标记)、双皮质素(Dcx,神经母细胞标记)、Sox2(干细胞标记)阳性细胞数。结果显示,各组小鼠DG的形态、大小及细胞密度等无明显差异;与C57BL小鼠相比,SNCA-/-和A30P SNCA-/-组小鼠DG中PH3+和Dcx+细胞数量显著减少,而Sox2+细胞数无明显差异。以上结果表明,内源性SNCA的正常表达是DG神经发生所必需的,SNCA-/-和A30P SNCA-/-均能显著减弱或抑制小鼠DG细胞增殖、分化等神经发生活动,但有关其详细分子机制仍需后续进一步研究。 展开更多
关键词 帕金森病 人α-突触核蛋白 a30p点突变 神经发生 海马齿状回 小鼠
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A30P突变体α-突触核蛋白表达体系的构建及其对蛋白质降解系统的影响
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作者 闫加庆 苑玉和 +5 位作者 楚世峰 刘敏 张元 曹秀萍 李国辉 陈乃宏 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期2071-2075,共5页
目的研究A30P突变体α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)对自噬溶酶体途径和泛素蛋白酶体系统的影响。方法构建稳定表达A30P突变体α-syn的PC12细胞株,通过Western blot、RT-PCR等方法检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62的含量变化... 目的研究A30P突变体α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)对自噬溶酶体途径和泛素蛋白酶体系统的影响。方法构建稳定表达A30P突变体α-syn的PC12细胞株,通过Western blot、RT-PCR等方法检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62的含量变化,并观察细胞内泛素化蛋白的改变。最后,通过MTT法检测A30P突变体α-syn对正常和应激条件下细胞活力的影响。结果成功构建稳定表达A30P突变体α-syn的PC12细胞株。过表达A30P突变体α-syn可降低自噬相关蛋白LC3-Ⅱ含量,提高自噬底物p62水平,并能促进泛素化蛋白质的聚集。此外,表达A30P突变体α-syn对细胞活力没有显著影响,但在血清剥夺或神经毒剂鱼藤酮刺激下,表达A30P突变体α-syn的细胞活力较空载体组显著降低。结论过表达A30P突变体α-syn可导致蛋白质降解系统障碍,并提高细胞对外界刺激的敏感性。 展开更多
关键词 突触核蛋白 a30p突变体 自噬溶酶体途径 泛素蛋白酶体系统
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Rotenone induces more serious learning and memory impairment than α-synuclein A30P does in Drosophila
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作者 俞淑 蒋萌 +2 位作者 夏莹 陈秋昱 文铁桥 《Journal of Shanghai University(English Edition)》 CAS 2011年第3期229-234,共6页
Parkinson’s disease (PD) is a heterogenous disease caused by multifactorial etiology. PD is characterized by the loss of dopaminergic (DA) neurons in the substantia nigra and the accumulation of Lewy bodies. In t... Parkinson’s disease (PD) is a heterogenous disease caused by multifactorial etiology. PD is characterized by the loss of dopaminergic (DA) neurons in the substantia nigra and the accumulation of Lewy bodies. In this study, two Drosophila PD models by exposing Drosophila to rotenone (sporadic PD models) are proposed, and the human α-synuclein A30P protein (family PD models) in Drosophila is expressed respectively. Both models recapitulated the main human PD symptoms including the loss of dopaminergic neurons in the brain and severe locomotor deficits. Our study finds that Rotenone induces more serious learning and memory impairment than α-synuclein A30P does. 展开更多
关键词 Parkinson’s disease (PD) ROTENONE α-synuclein a30p learning and memory
暂未订购
一个农药接触群发性帕金森病家系α-突触核蛋白基因的研究 被引量:1
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作者 侯健 姚亚妮 +1 位作者 罗琴 杨新玲 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1588-1590,共3页
目的 探讨α-突触核蛋白(SNCA)基因A53T位点突变、A30P位点突变与一个群发性帕金森病家系的关系,进而探讨该家系帕金森病的发病病因是否与遗传因素相关。方法 该家系病史特点其父为当地农药商人,他们共同特点有长期农药接触史(其中... 目的 探讨α-突触核蛋白(SNCA)基因A53T位点突变、A30P位点突变与一个群发性帕金森病家系的关系,进而探讨该家系帕金森病的发病病因是否与遗传因素相关。方法 该家系病史特点其父为当地农药商人,他们共同特点有长期农药接触史(其中包括百草枯和有机磷农药)。对该家系3例患者及3例正常成员进行系统的临床检查明确诊断原发性帕金森病后,提取该家族患者及健康人的静脉血,提取人类白细胞组DNA后,通过聚合酶链反应技术(PCR)对SNCA的4号外显子(Exon4)A53T位点及3号外显子(Exon3)上的A30P位点进行扩增,扩增后的产物经限制性内切酶反应多肽技术充分反应,限制性内切酶消化后的产物经紫外线凝胶电泳成像仪分析是否存在基因突变。结果 所有研究对象的SNCA基因Exon3经PCR扩增后的片段长度为192 bp,经特异性限制性内切酶MvaⅠ充分消化后,凝胶电泳成像结果为单一条带,即未发现A30P突变。SNCA基因Exon4经PCR扩增后的片段长度为216bp,经限制性内切酶Tsp45Ⅰ充分反应后,凝胶电泳成像结果为单一条带,即未发现A53T突变。结论 SNCA基因A30P、A53T点突变可能不是该家系患帕金森病的易感因素,而是与该家系长期接触农药相关,或与其他基因相互作用。 展开更多
关键词 群发性帕金森病 农药接触 α-突触核蛋白基因 A53T突变 a30p突变
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