人胰岛素基因杆状病毒表达载体的构建及其在Sf_9细胞中的表达 被引量：5

1

作者 李华 刘维全 +5 位作者 王吉贵 江禹 王本旭 王萍 齐顺章 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期258-262,共5页

对人胰岛素基因组基因真核表达载体 ( p CMA/m INS)进行 Xho 酶切 ,回收的含人胰岛素基因组基因的 1 60 8bp片段与线性化的杆状病毒载体 p Fast Bac 进行连接 ,获得重组载体 p Fast/m INS。将该重组载体转化 DH1 0 Bac感受态细菌 ,在体... 对人胰岛素基因组基因真核表达载体 ( p CMA/m INS)进行 Xho 酶切 ,回收的含人胰岛素基因组基因的 1 60 8bp片段与线性化的杆状病毒载体 p Fast Bac 进行连接 ,获得重组载体 p Fast/m INS。将该重组载体转化 DH1 0 Bac感受态细菌 ,在体内进行重组 ,并经 2次抗性与蓝白斑筛选 ,得到杆状病毒重组载体 Bacmid/m INS。将该载体转染 Sf9细胞 ,获得了重组杆状病毒 ,经 Tricine-SDS-PAGE和 Western-blotting检测 ,重组杆状病毒在 Sf9细胞中的表达产物是胰岛素原 。 展开更多

关键词 人胰岛素基因 杆状病毒表达系统 表达载体 SF9细胞 基因表达

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慢性肾炎患者输注红细胞前后血清Ferritin、MMP-2和MMP-9检测的临床意义 被引量：1

2

作者 袁海涛 李新华 何浩明 《放射免疫学杂志》 CAS 2010年第5期506-508,共3页

目的:探讨了慢性肾炎患者在输注红细胞前后Ferritin、MMP-2和MMP-9水平的变化。方法:应用放射免疫分析和酶联法对32例慢性肾炎患者进行了输注红细胞前后Ferritin、MMP-2和MMP-9检测,并与35名正常人组作比较。结果:慢性肾炎患者在输注红... 目的:探讨了慢性肾炎患者在输注红细胞前后Ferritin、MMP-2和MMP-9水平的变化。方法:应用放射免疫分析和酶联法对32例慢性肾炎患者进行了输注红细胞前后Ferritin、MMP-2和MMP-9检测,并与35名正常人组作比较。结果:慢性肾炎患者在输注红细胞前血清Ferritin和MMP-9水平非常显著地低于正常人组(P<0.01),而MMP-2水平则显著地高于正常人组(P<0.01)。经2周输注红细胞后则与正常人组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:检测慢性肾炎患者输注红细胞治疗前后血清Ferritin、MMP-2和MMP-9水平的变化对其病情的发展和预后的判断均具有重要的临床价值。 展开更多

关键词 慢性肾炎 血清铁蛋白 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9

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草地贪夜蛾细胞株Sf 9生测杀虫剂毒力的方法探索 被引量：1

3

作者 李春娜 张伟琪 +2 位作者 任豆豆 董兆克 张志勇 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1279-1286,共8页

【目的】为适应杀虫剂新产品研发和害虫抗药性监测对快速生物测定的需要,本文探索细胞生测与试虫生测的关联情况。【方法】分别测定草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢细胞株(Sf 9细胞)和小菜蛾Plutellaxyllostella敏感品系对不同类... 【目的】为适应杀虫剂新产品研发和害虫抗药性监测对快速生物测定的需要,本文探索细胞生测与试虫生测的关联情况。【方法】分别测定草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢细胞株(Sf 9细胞)和小菜蛾Plutellaxyllostella敏感品系对不同类型的杀虫剂的毒力,并在此基础上进行了细胞活力抑制率与活体昆虫致死率的关联性分析。【结果】3种不同机理杀虫剂毒力在2种生测体系中均表现出阿维菌素>吡虫啉>高效氯氰菊酯的一致规律;同一类型(有机磷类)5种杀虫剂毒力在2种生测体系中均表现出马拉硫磷>敌敌畏>辛硫磷>丙硫磷>敌百虫的一致规律;同一种类(5%阿维菌素)3种剂型杀虫剂毒力在2种生测体系中均表现出了微乳剂>乳油>水乳剂的一致规律。细胞生测和试虫生测之间存在高度相关性,据此建立不同杀虫剂细胞8 h生测和试虫48 h生测剂量之间的线性回归方程。【结论】建立了不同杀虫剂处理Sf9细胞8h与处理小菜蛾幼虫48h的线性相关模型,可根据细胞生物测定结果反映试虫生物测定的结果,为今后新型农药的筛选、毒力测定等提供便利的条件。 展开更多

关键词 Sf 9细胞 小菜蛾 杀虫剂 生物测定 LC50

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截短的丙型肝炎病毒核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因在Sf9细胞中的融合表达

4

作者 沈剑平 朱诗应 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期267-269,共3页

目的构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性。方法用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重... 目的构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性。方法用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重组表达载体pFastCt-EGFP,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒穿梭质粒BacmidCt-EGFP,转染昆虫Sf 9细胞。结果SDS-PAGE和western blot鉴定表明成功表达了分子量约40 000的融合蛋白。以ELISA法检测发现该融合蛋白能与28份抗HCV抗体阳性血清中的15份发生反应,阳性率为53.6%。结论该融合蛋白在昆虫Sf 9细胞中成功表达并具有一定的抗原性。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 截短的核心蛋白 绿色荧光蛋白 昆虫Sf9细胞

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哺乳动物性别决定的研究进展 被引量：4

5

作者 张勇 陈淳 +1 位作者 顾建新 徐晋麟 《生物工程进展》 CSCD 2001年第3期26-29,12,共4页

近年来 ,人们对与哺乳动物性别决定相关的SRY、SOX 9、SF - 1、WT1和DAX - 1基因的结构、功能和产物之间的相互作用进行了一系列的研究 ,使人们对哺乳动物的性别决定分子机制的探索又向前推进了一步 ,这将对发育生物学和性别决定的进化... 近年来 ,人们对与哺乳动物性别决定相关的SRY、SOX 9、SF - 1、WT1和DAX - 1基因的结构、功能和产物之间的相互作用进行了一系列的研究 ,使人们对哺乳动物的性别决定分子机制的探索又向前推进了一步 ,这将对发育生物学和性别决定的进化研究起到推动作用。 展开更多

关键词 性别决定 哺乳动物 SRY SOX9 SF-1 WT1 DAX-1 基因表达

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庚型肝炎病毒NS3蛋白在杆状病毒载体中的表达及其抗原性研究 被引量：3

6

作者 朱分禄 任浩 +4 位作者 朱诗应 谢南 潘卫 董辉 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期849-852,共4页

目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。 方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4... 目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。 方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4h使发生转座 ,用抗生素平皿筛选重组 bacmid。脂质体介导转染 Sf9昆虫细胞 ,待细胞形态明显改变后收获细胞和培养上清液 ,将上清液再次感染 Sf9细胞以大量表达 HGV NS3重组蛋白。利用 SDS- PAGE和 Western- blotting方法分析重组蛋白。结果 :SDS- PAGE分析发现表达产物在 Mr43810处有一条明显的蛋白带 ,占细胞总蛋白量的 30 %以上 ;应用 Ni- NTA亲和层析柱获得了纯化的重组蛋白 ;Western- blotting显示该抗原可与 HGV RNA阳性血清发生特异反应。 结论 :获得了昆虫细胞内表达的 HGV NS3重组蛋白 ,并证明该蛋白有可能用于 HGV感染的抗体检测。 展开更多

关键词 免疫原性 杆状病毒载体 庚型肝炎 NS3蛋白

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免疫组化在肝癌诊断中的应用 被引量：2

7

作者 郭晓东 李珊珊 +3 位作者 张苧月 熊璐 周光德 赵雨来 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第29期5669-5671,共3页

目的:探讨免疫组化在肝癌诊断中的作用。方法:遴选我院178例肝癌患者,其中PHC组90例,继发性肝癌组88例和90例健康人作为对照。测定每组AFP、AFU、SF和CA19-9的检测水平以及各项标志物联检的水平。结果:PHC组各项值明显呈阳性,正常对照... 目的:探讨免疫组化在肝癌诊断中的作用。方法:遴选我院178例肝癌患者,其中PHC组90例,继发性肝癌组88例和90例健康人作为对照。测定每组AFP、AFU、SF和CA19-9的检测水平以及各项标志物联检的水平。结果:PHC组各项值明显呈阳性,正常对照组均呈阴性,继发性肝癌组居中。PHC组AFP的阳性检出率为78.89%,AFU的阳性检出率为65.56%,SF的阳性检出率为53.33%,CA19-9的阳性检出率为58.89%,各项联检的阳性检出率为95.56%。结论:AFP、AFU、SF和CA19-9联合检测能大大提高肝癌的检出率,有助于PHC的早期诊断和治疗。 展开更多

关键词 原发性肝癌 血清甲胎蛋白 Α-L-岩藻糖苷酶 血清铁蛋白CA19-9

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重组截短型人角质细胞生长因子1在昆虫细胞中的表达 被引量：2

8

作者 薛萍 朱小静 +4 位作者 刘孝菊 李一兰 南佳 姜潮 李校堃 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期633-639,共7页

目的:探讨重组截短型人角质细胞生长因子1(rhKGF1D23)蛋白在昆虫细胞中表达的可行性,为rhKGF1D23蛋白的生产提供新的途径。方法:PCR法扩增昆虫偏爱密码子优化截短序列kgf1d23亚克隆到pFastbac载体。在辅助质粒的作用下,pFastBac-kgf1d2... 目的:探讨重组截短型人角质细胞生长因子1(rhKGF1D23)蛋白在昆虫细胞中表达的可行性,为rhKGF1D23蛋白的生产提供新的途径。方法:PCR法扩增昆虫偏爱密码子优化截短序列kgf1d23亚克隆到pFastbac载体。在辅助质粒的作用下,pFastBac-kgf1d23载体Tn7片段转座到Bacmid中mini-attTn7位点,得到穿梭载体Bacmid-kgf1d23,并通过脂质体法转染sf-9细胞得到杆状病毒P1。继续转染细胞扩增病毒并提高病毒滴度,蛋白表达分析从P3代病毒转染细胞开始,收集细胞超声裂解后进行纯化,MTT法检测纯化后目的蛋白生物活性。结果:昆虫偏好密码子改造的kgf1d23基因构建进转移载体pFastBac-kgf1d23和穿梭载体Bacmid-kgf1d23载体中。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白在60h后开始大量表达,优化的收获蛋白时间在84～96h;利用肝素亲和层析和SP阳离子交换层析可以去除90%以上的杂蛋白。纯化的rhKGF1D23蛋白在0.3～25.0μg.L-1时,随浓度的增加HaCat细胞的促有丝分裂能力增强,在25.0μg.L-1时达到平台期。结论:重组截短型角质细胞生长因子rhKGF1D23蛋白在昆虫细胞中得到表达,保持其特有的肝素亲和特性,并具有免疫原性及细胞生物学活性。 展开更多

关键词 角质细胞生长因子1 截短突变 sf-9细胞 杆状病毒系统

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联合检测血清肿瘤标志物对肺癌的诊断价值 被引量：2

9

作者 刘晓芳 张沪生 《首都医科大学学报》 CAS 2005年第4期464-466,共3页

目的评价5项血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和铁蛋白(SF)联合检测对提高肺癌临床诊断的价值。方法采用多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统分别测定73例肺癌患者、21例... 目的评价5项血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和铁蛋白(SF)联合检测对提高肺癌临床诊断的价值。方法采用多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统分别测定73例肺癌患者、21例良性肺病患者以及16例健康人血清中CEA、CA125、CA19-9、NSE和SF的水平,比较3组间的差异。结果肺癌组患者血清中CEA、CA125、CA19-9、NSE和SF的水平均显著高于良性肺病组及健康组(P<0.01)。其中CEA、CA125、CA19-9、NSE和SF诊断肺癌的灵敏度分别为79.5%、56.2%、56.2%、52.1%和57.5%;而诊断特异性分别达到81.0%、100%、85.7%、90.5%和80.9%。5项标志物联合检测的灵敏度和特异性则更高。结论CEA、CA125、CA19-9、NSE和SF对非小细胞肺癌(NSCLC)具有较高的辅助诊断价值,5项标志物联合检测可显著提高肺癌诊断的灵敏度和特异性。 展开更多

关键词 肺肿瘤诊断 癌胚抗原 糖类抗原125 糖类抗原19—9 神经特异性烯醇化酶 铁蛋白

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MPB64在杆状病毒系统中的表达纯化及免疫原性鉴定 被引量：1

10

作者 徐丹 姜潮 +3 位作者 陈昱 艾君 王晓艳 李校堃 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期921-926,共6页

目的：在杆状病毒昆虫细胞表达系统中表达结核分枝杆菌蛋白MPB64，并鉴定其免疫原性。方法：目的基因MPB64连接到pFastBac载体，获得pFastBac-MPB64质粒转化DH10 Bac感受态，通过Tn7转座片段将目的基因转座到Bacmid中，得到Bacmid-MPB6... 目的：在杆状病毒昆虫细胞表达系统中表达结核分枝杆菌蛋白MPB64，并鉴定其免疫原性。方法：目的基因MPB64连接到pFastBac载体，获得pFastBac-MPB64质粒转化DH10 Bac感受态，通过Tn7转座片段将目的基因转座到Bacmid中，得到Bacmid-MPB64穿梭载体，脂质体包被后转染Sf 9细胞收获P1代病毒，重复转染Sf 9细胞三次获得高滴度的P4代病毒，收集细胞上清通过Q Sepharose FF和Ni亲和层析柱两步层析纯化得到目的蛋白MPB64。纯化的蛋白免疫BALB／c小鼠并检测血清中抗体滴度，ELISA检测MPB64蛋白刺激脾脏细胞产生IFN-γ的浓度，MTT法检测目的蛋白对免疫后小鼠脾脏细胞的增殖作用。结果：MPB64在昆虫细胞中成功表达，纯化后蛋白纯度达90％以上，蛋白产量为35 mg／L，纯化蛋白能有效刺激BALB／c小鼠产生抗体，提高小鼠脾脏细胞培养基中IFN-γ的含量，目的蛋白在0.2～100μg／ml之间对脾脏细胞有明显的促增殖作用。结论：成功在杆状病毒昆虫细胞表达系统中表达了具有免疫原性的MPB64蛋白，为生产结核病疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 MPB64 杆状病毒表达系统 Sf 9细胞 结核分枝杆菌

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HCV核心和截短的包膜蛋白E2基因在昆虫细胞中的表达及其抗原性 被引量：1

11

作者 朱诗应 赵平 +2 位作者 任浩 赵兰娟 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期962-965,共4页

目的 :构建含 HCV全长核心基因和截短的包膜蛋白 E2基因的重组杆状病毒表达载体 ,研究其表达和抗原性。 方法 :以含 HCV全长 c DNA克隆的 p GEM- HCJ4质粒为模板 ,PCR扩增全长的 HCV核心抗原基因和截短的 E2基因片段 ,插入转座载体 p Fa... 目的 :构建含 HCV全长核心基因和截短的包膜蛋白 E2基因的重组杆状病毒表达载体 ,研究其表达和抗原性。 方法 :以含 HCV全长 c DNA克隆的 p GEM- HCJ4质粒为模板 ,PCR扩增全长的 HCV核心抗原基因和截短的 E2基因片段 ,插入转座载体 p Fast Bac HTa构建重组转座质粒 p FB- CE2 t,转化 DH10 Bac大肠杆菌 ,获得重组杆状病毒穿梭质粒 Bacmid- CE2 t,以之转染昆虫 Sf9细胞进行外源基因的表达 ,并对其抗原性进行 EL ISA检测。 结果 :SDS- PAGE和 Western blot分析表明Bacmid- CE2 t在 Sf9细胞表达了 HCV C- E2蛋白 ,并能利用细胞内蛋白酶将其裂解为单独的 C蛋白和截短的 E2蛋白。纯化后的蛋白能分别与 HCV C蛋白、E2蛋白单抗以及慢性丙型肝炎患者血清反应。 结论 :HCV核心蛋白和截短的 展开更多

关键词 肝炎病毒 丙型 核心蛋白 截短的E2蛋白 昆虫Sf 9细胞

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草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞在生物反应器中培养条件初探

12

作者 余泽华 姚汉超 +3 位作者 陈曲侯 庞义 邓日强 龙綮新 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期408-411,共4页

对草地贪夜蛾（ Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ） Ｓｆ９ 细胞在２ Ｌ Ｂｉｏｓｔａｔ Ｒ Ｍ Ｄ 型搅拌式生物反应器中进行了培养，并对细胞的生长状况、葡萄糖的消耗等进行了测定；对重组病毒的增殖、外源基因的... 对草地贪夜蛾（ Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ） Ｓｆ９ 细胞在２ Ｌ Ｂｉｏｓｔａｔ Ｒ Ｍ Ｄ 型搅拌式生物反应器中进行了培养，并对细胞的生长状况、葡萄糖的消耗等进行了测定；对重组病毒的增殖、外源基因的表达进行了初步探索．结果表明：细胞在该生物反应器中生长良好，细胞群体倍增时间３３．４ ｈ．病毒感染率大约在 ８９．８％ 以上。 展开更多

关键词 Sf-9昆虫细胞 生物反应器 细胞培养 草地贪夜蛾

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四项肿瘤标志物联合检测对胰腺癌的诊断价值 被引量：5

13

作者 尚志芳 朱玉群 杨昭徐 《疾病监测》 CAS 1996年第11期408-411,共4页

本文对２１例胰腺癌患者及５６例良性消化系疾患者测定癌抗原１９－９（ＣＡ１９－９）和癌抗原５０（ＣＡ５０），铁蛋白（ＳＦ）及癌胚抗原（ＣＥＡ），发现胰腺癌组四项指标的血浓度及检出率均高于对照组，具有统计学差异（Ｐ＜０．... 本文对２１例胰腺癌患者及５６例良性消化系疾患者测定癌抗原１９－９（ＣＡ１９－９）和癌抗原５０（ＣＡ５０），铁蛋白（ＳＦ）及癌胚抗原（ＣＥＡ），发现胰腺癌组四项指标的血浓度及检出率均高于对照组，具有统计学差异（Ｐ＜０．０１），其中以ＣＡ１９－９敏感性最高，为７６．１９％，其次为ＣＡ５０，二者均具较高的特异性及临床符合率。选择ＣＡ１９－９与其他肿瘤标志物联合检测，显示ＣＡ１９－９＋ＣＡ５０或ＳＦ，阳性率为８５．７１％，但与各单项标志物比较无明显差异，全部四项标志物同时检测，临床敏感性达１００％，与各单指标比较差异显著，但特异性有所降低。结果表明，ＣＡ１９－９和ＣＡ５０为胰腺癌诊断较为理想的标志物，若两者联合或与ＳＦ及ＣＥＡ组合检测，对提高胰腺癌诊断的敏感性，用于可疑患者的筛查具有较好的应用价值。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 癌 肿瘤标志物 诊断

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嵌合卵清蛋白-兔出血症VP60蛋白病毒样颗粒在杆状病毒表达系统中的表达及其鉴定 被引量：1

14

作者 谭晖 胡波 +4 位作者 陈萌萌 范志宇 魏后军 宋艳华 王芳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第2期352-358,共7页

利用卵清蛋白(OVA)第257～264位氨基酸替换兔出血症病毒的主要结构蛋白质VP60不同位置处相应数量的氨基酸,研究了氨基酸的替换对VP60蛋白表达及病毒样颗粒装配的影响。通过重叠延伸剪接术(SOE)法,OVA T-细胞表位(257～264位氨基酸)分别... 利用卵清蛋白(OVA)第257～264位氨基酸替换兔出血症病毒的主要结构蛋白质VP60不同位置处相应数量的氨基酸,研究了氨基酸的替换对VP60蛋白表达及病毒样颗粒装配的影响。通过重叠延伸剪接术(SOE)法,OVA T-细胞表位(257～264位氨基酸)分别取代VP60 3个区域(502～510位氨基酸、411～417位氨基酸、302～309位氨基酸),得到3种重组嵌合VP60基因。利用杆状病毒表达系统,得到3种重组穿梭载体Bacmid,分别命名为Bacmid-V-1、Bacmid-V-2、Bacmid-V-3。将重组阳性质粒转染Sf9昆虫细胞,得到3种重组病毒rBac-v-1、rBac-v-2、rBac-v-3,3组重组病毒感染Sf9细胞后表达的3种蛋白质分别命名为Z1、Z2和Z3。经RT-PCR、IFA、SDS-PAGE、Western blot等方法鉴定后,利用电镜观察此3种重组蛋白质病毒样颗粒的形成情况。3种重组嵌合VP60蛋白在Sf9昆虫细胞中得到表达,3种重组嵌合蛋白质均可以形成与VP60蛋白类似的病毒样颗粒。 展开更多

关键词 兔出血症病毒(RHDV) VP60蛋白 卵清蛋白 SF9细胞 病毒样颗粒(VLPs)

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肿瘤标志物测定在卵巢肿瘤诊断中的价值 被引量：3

15

作者 徐晶 金志军 《诊断学理论与实践》 2005年第5期400-402,共3页

目的:探讨肿瘤标志物在印巢肿瘤诊断中的价值。方法:随机抽取1999年1月-2002年12月我院收治的卵巢肿瘤患者105例,根据病理分类进行分组,回顾性分析其血清 AFP、CEA、血清铁蛋白(SF)、CA125、CA19-9、CA15-3水平,利用 SAS 统计分析系统... 目的:探讨肿瘤标志物在印巢肿瘤诊断中的价值。方法:随机抽取1999年1月-2002年12月我院收治的卵巢肿瘤患者105例,根据病理分类进行分组,回顾性分析其血清 AFP、CEA、血清铁蛋白(SF)、CA125、CA19-9、CA15-3水平,利用 SAS 统计分析系统分别评价其在卵巢肿瘤诊断中的价值。结果:①卵巢癌患者血清中 CA125、CA15-3、SF 含量明显高于良性肿瘤患者(P<0.01).恶性组 CA19-9含量明显高于良性组(P<0.05).AFP 和 CEA 含量在两组之间差异无显著性(P>0.05);②单项指标以 CA125的诊断性能最好,其次为 CA15-3、CA19-9、SF;③Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者血清中 CA125、CA15-3、SF 含量及阳性率均高于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者(P<0.01),CA19-9在两组患者中差异无显著性(P>0.05);④上皮性卵巢癌患者血清中 CA125的阳性率高于非上皮性印巢癌患者,差异具显著性(P<0.05),其余差异无显著性(P>0,05);⑤指标联合检测时,在全部不同指标组合中,以 CA125、CA15-3、CA19-9、SF 4项中任意2项阳性作为卵巢恶性肿瘤的判断有较好的诊断性能;在3项指标联合检测中,以 CA125、CA19-9、SF 指标组合诊断性能最好。结论:CA125、CA15-3、CA19-9和 SF 可以作为卵巢良恶性肿瘤的鉴别和恶性肿瘤预后判断的指标。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 肿瘤标志物 诊断

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重组杆状病毒感染悬浮昆虫细胞及重组蛋白表达策略的优化

16

作者 李文丽 刘霞 +2 位作者 刘在新 卢曾军 范朋举 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第8期118-122,共5页

为确定嵌合口蹄疫病毒(FMDV)中和表位的猪细小病毒(PPV)衣壳蛋白在昆虫细胞(Sf-9)中的最佳表达条件。通过对比悬浮培养和贴壁培养2种培养条件,探究Sf-9细胞的最佳培养方式;利用血球计数板每隔24 h进行细胞计数,绘制Sf-9细胞生长曲线;将P... 为确定嵌合口蹄疫病毒(FMDV)中和表位的猪细小病毒(PPV)衣壳蛋白在昆虫细胞(Sf-9)中的最佳表达条件。通过对比悬浮培养和贴壁培养2种培养条件,探究Sf-9细胞的最佳培养方式;利用血球计数板每隔24 h进行细胞计数,绘制Sf-9细胞生长曲线;将P1代重组病毒传代至P3代,提取重组病毒基因组DNA,进行PCR鉴定,检测插入目的基因的完整性;通过研究感染复数(MOI)和感染时间的关系来摸索重组病毒最佳感染条件,以获得高滴度的重组病毒;利用Western blot检测目的蛋白的表达量并探究重组蛋白的最佳表达条件。结果表明,悬浮培养的Sf-9细胞大小均一、边缘整齐,生长状态良好;PCR鉴定结果表明,插入的FMDV中和表位基因完整,可以进行重组蛋白的表达;Western blot结果显示,重组蛋白同时与FMDV阳性血清和PPV阳性血清产生特异性反应,进一步证明了插入的FMDV中和表位的存在;重组蛋白最佳表达条件是以10个MOI病毒液感染悬浮Sf-9细胞,在72 h时重组蛋白表达量最大。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 猪细小病毒 中和表位 杆状病毒载体表达系统 昆虫细胞

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蒙医温针治疗抑郁伴失眠的临床随机对照研究 被引量：8

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作者 阿茹娜 包青林 萨仁图雅 《中国民族医药杂志》 2022年第5期38-42,共5页

背景:抑郁症常伴有失眠,长期的失眠又会引发抑郁情绪恶化,形成恶性循环,严重影响工作生活及身心健康,目前缺少蒙医温针对抑郁失眠疗效的研究。目的:通过临床随机安慰对照研究,评价蒙医温针治疗抑郁症失眠的有效性及安全性。方法:纳入我... 背景:抑郁症常伴有失眠,长期的失眠又会引发抑郁情绪恶化,形成恶性循环,严重影响工作生活及身心健康,目前缺少蒙医温针对抑郁失眠疗效的研究。目的:通过临床随机安慰对照研究,评价蒙医温针治疗抑郁症失眠的有效性及安全性。方法:纳入我院针灸科及心理睡眠科志愿者,随机分为蒙医温针组、普通针灸组、米安色林组,每组30例,以PHQ-9以及PSQI量表为主要疗效评价指标,SF-36量表为次要疗效评价指标,分别在治疗前、治疗结束时、疗程结束后1个月进行评测,并随时记录研究过程中的不良反应进行安全性评估。结果:蒙医温针组与米安色林组比较,治疗结束、随访1个月时PHQ-9(P=0.000)、PSQI评分(P=0.000),差异有统计学意义;普通针灸组与米安色林组比较,PHQ-9(P=0.026)、PSQI评分(P=0.001),差异有统计学意义;蒙医温针组治疗后各时点SF-36生活质量8个维度评分均较治疗前上升(P<0.05);疗程结束时,蒙医温针组有效率为46.67%(14/30),普通针灸组为36.67%(11/30),米安色林组为20.00%(6/30),三组有效率两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:蒙医温针与普通针灸两种干预方案能降低PHQ-9以及PSQI量表评分,提高SF-36生活质量量表8个维度评分,有效改善抑郁、失眠症状及生活质量,蒙医温针在改善睡眠方面较普通针灸更有优势。 展开更多

关键词 蒙医温针 抑郁伴失眠 PHQ-9 PSQI SF-36

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禽流感病毒H5N1亚型HA蛋白在昆虫细胞中的表达、纯化及反应原性分析 被引量：2

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作者 仝晓丹 王玉娟 +6 位作者 杨仕标 盛东北 赵文华 黄晓静 谭菲菲 王同燕 田克恭 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期72-76,共5页

为了获得可溶性的禽流感病毒H5N1亚型HA蛋白,并将其用于单克隆抗体的制备和筛选,试验利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统进行HA蛋白的表达和纯化,以含全长HA基因的重组质粒为模板,经PCR扩增得到HA片段并克隆至pFastBac1载体,将鉴定正确的... 为了获得可溶性的禽流感病毒H5N1亚型HA蛋白,并将其用于单克隆抗体的制备和筛选,试验利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统进行HA蛋白的表达和纯化,以含全长HA基因的重组质粒为模板,经PCR扩增得到HA片段并克隆至pFastBac1载体,将鉴定正确的供体质粒转化至DH10Bac感受态细胞,获得Bacmid重组质粒,转染Sf 9细胞后获得重组杆状病毒。通过Western-blot和间接ELISA验证HA蛋白的表达情况和反应原性。结果表明:成功获得含有禽流感病毒H5N1亚型HA基因重组杆状病毒,HA蛋白可以分泌表达,大小约为63 ku,与预期大小一致,且能与H5N1标准阳性血清发生特异性反应;纯化的HA蛋白与免疫小鼠血清反应性良好。说明本研究成功表达并纯化获得了禽流感病毒H5N1亚型HA蛋白,并且具有良好的反应原性。 展开更多

关键词 禽流感病毒 血凝素蛋白 杆状病毒表达系统 蛋白纯化 免疫印迹分析 反应原性分析 Sf 9细胞

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高电压长时程脉冲射频治疗阴部神经痛的疗效观察 被引量：15

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作者 王成龙 宋涛 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期597-602,共6页

目的:观察高电压长时程脉冲射频(pulsed radiofrequency,PRF)治疗阴部神经痛的有效性及安全性。方法:35例阴部神经痛的病人,CT引导下在患侧坐骨棘或坐骨结节水平阴部神经走行处给予高电压长时程脉冲射频治疗,记录病人治疗前、术后1周、... 目的:观察高电压长时程脉冲射频(pulsed radiofrequency,PRF)治疗阴部神经痛的有效性及安全性。方法:35例阴部神经痛的病人,CT引导下在患侧坐骨棘或坐骨结节水平阴部神经走行处给予高电压长时程脉冲射频治疗,记录病人治疗前、术后1周、术后1月、术后3月的视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、生活质量评分(SF-36 health survey questionnaire,SF-36)、抑郁量表评分(patient health questionnaire,PHQ-9)评分、并发症及术后不良反应的发生情况。结果:病人术后各时间点VAS评分明显降低(P<0.001),术后3个月有效率可达88.6%,术后各时间点生活质量(SF-36)评分较治疗前明显改善(P<0.001),抑郁量表(PHQ-9)评分较治疗前也明显降低(P<0.001),且整个治疗过程中无严重并发症发生。结论:高电压长时程脉冲射频术对阴部神经痛的治疗效果较好,可有效缓解病人的疼痛,改善生活质量及抑郁状态;并发症及不良反应较少,可安全用于临床。 展开更多

关键词 脉冲射频 阴部神经痛 视觉模拟评分 生活质量评分 抑郁量表评分

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老视矫正型人工晶状体植入术后中文视觉质量问卷优选

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作者 张彧 张佳晴 +3 位作者 林灏文 张一帆 谈旭华 罗莉霞 《中华眼视光学与视觉科学杂志(中英文)》 北大核心 2025年第10期767-777,共11页

目的:评估视功能相关生存质量量表-25(NEI VFQ-25)、视功能指数量表(VF-14)和白内障视功能相关生存质量简表(Catquest-9SF)在老视矫正型人工晶状体(PC-IOL)植入术后患者中的适用性。方法:调查研究。2024年6月30日在CNKI数据库和万方数... 目的:评估视功能相关生存质量量表-25(NEI VFQ-25)、视功能指数量表(VF-14)和白内障视功能相关生存质量简表(Catquest-9SF)在老视矫正型人工晶状体(PC-IOL)植入术后患者中的适用性。方法:调查研究。2024年6月30日在CNKI数据库和万方数据知识服务平台中检索"人工晶状体"和"问卷"或"量表"相关期刊和学位论文,并排除"ICL"相关条目。经去重和分析确定3份国人常用的白内障术后量表,设计包含量表条目、患者反馈及视觉检测的线上问卷,对2022年5月至2023年9月期间在中山眼科中心白内障科行PC-IOL植入术,术后随访时间≥6个月的178例患者进行调查。采用Pearson和Spearman相关分析评估量表间的关联性,通过响应率和普及率比较量表的患者反馈特性以及Cronbach's α、因子分析检验信效度等,Spearman相关分析评估量表维度得分对视觉的反映,并构建ROC曲线分析量表总分对戴镜率、光干扰及满意度的预测效能。结果:收回有效问卷156份,回收率93.3%,完成率94.0%。3份量表总分高度相关(r=0.80~0.90,均P<0.010)。患者反馈显示,VF-14在反映视觉质量(50.0%)和易理解性(58.3%)方面评分最优,12.8%的患者认为NEI VFQ-25过长。信效度分析中,3份量表总体Cronbach's α系数>0.9,VF-14近/中远视力维度内部一致性最高(α=0.86、0.92),探索性因子分析显示3份量表的结构效度俱佳。视觉检测方面,3份量表对戴镜率(AUC=0.70~0.73,均P<0.001)、光干扰(AUC=0.96~0.98,均P<0.001)及满意度(AUC=0.90~0.92,均P<0.001)均具高预测价值,3组间差异无统计学意义(P>0.05)。VF-14近视力维度与总体戴镜率及近戴镜率相关性最强(r=0.53、0.51,均P<0.001),驾驶困难维度与光干扰相关性最强(r=0.68,P<0.001);VF-14近视维度在非整体视力维度中与满意度相关性最高(r=0.48,P<0.001)。结论:VF-14量表在PC-IOL植入术后视觉质量量表评估中显示出简洁易理解,患者反馈佳,与术后视觉功能关联紧密。 展开更多

关键词 白内障 老视型矫正人工晶状体 患者报告结局工具 Catquest 9-sf VF-14 NEI VFQ-25

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