目的探讨益气活血化浊解毒方调控KAT3B/STING轴介导的小胶质细胞极化对缺血性脑卒中大鼠神经功能的影响。方法复制缺血性脑卒中大鼠模型。将复制成功的60只大鼠分为缺血性脑卒中组、益气活血化浊解毒方低剂量组(低剂量组)、益气活血化...目的探讨益气活血化浊解毒方调控KAT3B/STING轴介导的小胶质细胞极化对缺血性脑卒中大鼠神经功能的影响。方法复制缺血性脑卒中大鼠模型。将复制成功的60只大鼠分为缺血性脑卒中组、益气活血化浊解毒方低剂量组(低剂量组)、益气活血化浊解毒方高剂量组(高剂量组)、益气活血化浊解毒方高剂量+2,5-己酮可可碱(DMXAA)组(高剂量+DMXAA组),每组15只。另取15只正常大鼠为Sham组。低剂量组大鼠灌胃0.2 mL 27.5 g/mL的益气活血化浊解毒方药液,高剂量组大鼠灌胃0.2 mL 55.0 g/mL的益气活血化浊解毒方药液,高剂量+DMXAA组大鼠灌胃0.2 mL 55.0 g/mL的益气活血化浊解毒方药液和25 mg/kg的DMXAA,Sham组和缺血性脑卒中组给予等体积生理盐水代替药物;除高剂量+DMXAA组外,其余组大鼠再给予等体积二甲基亚砜溶液灌胃,1 d/次,连续4周。Zea-Longa评分和网屏试验评分评估大鼠神经功能和神经行为学;检测大鼠脑组织含水量;TTC染色法检测大鼠脑梗死面积;酶联免疫吸附试验检测大鼠血清LDH和NGF水平和缺血侧皮层组织TNF-α、IL-6、IL-10水平;HE染色观察大鼠缺血侧皮层组织病理变化;Western blotting检测大鼠缺血侧皮层组织iNOS、Iba1、CD68、CD40、CD206、Arg-1、Cleaved caspase-3、KAT3B、STING蛋白表达。结果缺血性脑卒中组大鼠Zea-Longa评分和网屏试验评分、脑组织含水量、脑梗死面积百分比均高于Sham组(P<0.05),低剂量组和高剂量组大鼠Zea-Longa评分和网屏试验评分、脑组织含水量、脑梗死面积百分比均低于缺血性脑卒中组(P<0.05),高剂量+DMXAA组大鼠Zea-Longa评分和网屏试验评分、脑组织含水量、脑梗死面积百分比均高于高剂量组(P<0.05)。缺血性脑卒中组大鼠NGF和IL-10水平低于Sham组,LDH、TNF-α和IL-6水平高于Sham组(P<0.05);低剂量组和高剂量组大鼠NGF和IL-10水平高于缺血性脑卒中组,LDH、TNF-α和IL-6水平低于缺血性脑卒中组(P<0.05);高剂量+DMXAA组大鼠NGF和IL-10水平低于高剂量组,LDH、TNF-α和IL-6高于高剂量组(P<0.05)。与缺血性脑卒中组比较,低剂量组和高剂量组缺血侧皮层神经元形态有明显改善。缺血性脑卒中组大鼠缺血侧皮层组织中iNOS、Iba1、CD68和CD40蛋白相对表达量比Sham组高,CD206和Arg-1蛋白相对表达量比Sham组低(P<0.05);低剂量组和高剂量组大鼠缺血侧皮层组织中iNOS、Iba1、CD68和CD40蛋白相对表达量比缺血性脑卒中组低,CD206和Arg-1蛋白相对表达量比缺血性脑卒中组高(P<0.05);高剂量+DMXAA组大鼠缺血侧皮层组织中iNOS、Iba1、CD68和CD40蛋白相对表达量比高剂量组高,CD206和Arg-1蛋白相对表达量比高剂量组低(P<0.05)。结论益气活血化浊解毒方可调节缺血性脑卒中大鼠小胶质细胞极化,减轻神经炎症和神经损伤,改善神经功能,可能与抑制KAT3B/STING轴有关。展开更多
目的:探讨敲低小鼠胚胎腭突间充质细胞(mEPMCs)初级纤毛(PC)重要组件驱动蛋白家族成员3B(KIF3B)基因对细胞自噬水平的作用,并阐明其作用机制。方法:收集体外培养孕龄14.5 d C57BL/6J小鼠的mEPMCs,根据是否敲低KIF3B基因和使用平滑因子...目的:探讨敲低小鼠胚胎腭突间充质细胞(mEPMCs)初级纤毛(PC)重要组件驱动蛋白家族成员3B(KIF3B)基因对细胞自噬水平的作用,并阐明其作用机制。方法:收集体外培养孕龄14.5 d C57BL/6J小鼠的mEPMCs,根据是否敲低KIF3B基因和使用平滑因子受体激动剂(SAG)激活音猬因子(Shh)信号通路及其下游共受体Smo,分为对照组(给予生理盐水)、空载病毒转染细胞组(sh-NC组)(给予慢病毒转染)、敲低KIF3B组(sh-KIF3B组)(给予KIF3B基因敲低)、敲低KIF3B加入SAG组(sh-KIF3B+SAG组)(给予KIF3B基因敲低后加入SAG),每组5只大鼠。透射电镜观察各组mEPMCs中自噬小体/自噬溶酶体形态表现及数量,Western blotting法检测各组mEPMCs中自噬相关蛋白苄氯素1(Beclin-1)和p62及Shh信号通路中Shh和Smo蛋白表达水平。结果:透射电镜观察,与对照组比较,sh-KIF3B组mEPMCs中自噬小体/自噬溶酶体数量明显增加(P<0.05);与sh-KIF3B组比较,sh-KIF3B+SAG组mEPMCs中自噬小体/自噬溶酶体数量明显减少(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,sh-KIF3B组mEPMCs中Beclin-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),KIF3B、p62、Shh和Smo蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与sh-KIF3B组比较,sh-KIF3B+SAG组mEPMCs中Shh、Smo和p62蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Beclin-1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:敲低KIF3B基因可促进mEPMCs自噬,其机制可能与其抑制Shh信号通路有关。展开更多
目的:分析剪接因子3B亚单位1(SF3B1)突变骨髓增生异常综合征(MDS)患者合并突变的数量与类型对临床特征及预后的影响。方法:回顾性分析2015年10月—2024年5月52例SF3B1突变MDS患者的合并突变、血常规、总生存(OS)时间等资料,比较不同数...目的:分析剪接因子3B亚单位1(SF3B1)突变骨髓增生异常综合征(MDS)患者合并突变的数量与类型对临床特征及预后的影响。方法:回顾性分析2015年10月—2024年5月52例SF3B1突变MDS患者的合并突变、血常规、总生存(OS)时间等资料,比较不同数量、不同类型的合并突变之间白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、OS的差异。结果:52例患者中42例(80.77%)存在合并突变,10例(19.23%)无合并突变。29例(55.77%)合并<2种突变,23例(44.23%)合并≥2种突变。最常见的合并突变为ASXL115例(28.85%)、TET213例(25.00%)。无合并突变与合并突变、合并<2种与≥2种突变者之间WBC、HGB、PLT水平差异无统计学意义(P>0.05)。无合并突变与有合并突变患者中位OS分别为28.93个月和37.53个月(P=0.85)。<2个突变与≥2个突变患者的中位OS分别为35.97个月和45.80个月(P=0.59)。ASXL1突变组WBC低于ASXL1野生组(中位值2.12×10~9/L vs 3.30×10^(9)/L,P=0.03),而HGB、PLT差异无统计学意义(P>0.05)。TET2突变组与TET2野生组之间WBC、HGB、PLT差异无统计学意义(P>0.05)。ASXL1突变组与ASXL1野生组中位OS分别为37.53个月和40.50个月(P=0.82)。TET2突变组与TET2野生组中位OS分别为61.77个月和37.53个月(P=0.85)。结论:SF3B1突变MDS患者合并ASXL1突变白细胞较低,而生存无影响;SF3B1合并突变是否小于2个、是否合并TET2突变对临床特征及总生存无影响。展开更多
文摘目的探讨益气活血化浊解毒方调控KAT3B/STING轴介导的小胶质细胞极化对缺血性脑卒中大鼠神经功能的影响。方法复制缺血性脑卒中大鼠模型。将复制成功的60只大鼠分为缺血性脑卒中组、益气活血化浊解毒方低剂量组(低剂量组)、益气活血化浊解毒方高剂量组(高剂量组)、益气活血化浊解毒方高剂量+2,5-己酮可可碱(DMXAA)组(高剂量+DMXAA组),每组15只。另取15只正常大鼠为Sham组。低剂量组大鼠灌胃0.2 mL 27.5 g/mL的益气活血化浊解毒方药液,高剂量组大鼠灌胃0.2 mL 55.0 g/mL的益气活血化浊解毒方药液,高剂量+DMXAA组大鼠灌胃0.2 mL 55.0 g/mL的益气活血化浊解毒方药液和25 mg/kg的DMXAA,Sham组和缺血性脑卒中组给予等体积生理盐水代替药物;除高剂量+DMXAA组外,其余组大鼠再给予等体积二甲基亚砜溶液灌胃,1 d/次,连续4周。Zea-Longa评分和网屏试验评分评估大鼠神经功能和神经行为学;检测大鼠脑组织含水量;TTC染色法检测大鼠脑梗死面积;酶联免疫吸附试验检测大鼠血清LDH和NGF水平和缺血侧皮层组织TNF-α、IL-6、IL-10水平;HE染色观察大鼠缺血侧皮层组织病理变化;Western blotting检测大鼠缺血侧皮层组织iNOS、Iba1、CD68、CD40、CD206、Arg-1、Cleaved caspase-3、KAT3B、STING蛋白表达。结果缺血性脑卒中组大鼠Zea-Longa评分和网屏试验评分、脑组织含水量、脑梗死面积百分比均高于Sham组(P<0.05),低剂量组和高剂量组大鼠Zea-Longa评分和网屏试验评分、脑组织含水量、脑梗死面积百分比均低于缺血性脑卒中组(P<0.05),高剂量+DMXAA组大鼠Zea-Longa评分和网屏试验评分、脑组织含水量、脑梗死面积百分比均高于高剂量组(P<0.05)。缺血性脑卒中组大鼠NGF和IL-10水平低于Sham组,LDH、TNF-α和IL-6水平高于Sham组(P<0.05);低剂量组和高剂量组大鼠NGF和IL-10水平高于缺血性脑卒中组,LDH、TNF-α和IL-6水平低于缺血性脑卒中组(P<0.05);高剂量+DMXAA组大鼠NGF和IL-10水平低于高剂量组,LDH、TNF-α和IL-6高于高剂量组(P<0.05)。与缺血性脑卒中组比较,低剂量组和高剂量组缺血侧皮层神经元形态有明显改善。缺血性脑卒中组大鼠缺血侧皮层组织中iNOS、Iba1、CD68和CD40蛋白相对表达量比Sham组高,CD206和Arg-1蛋白相对表达量比Sham组低(P<0.05);低剂量组和高剂量组大鼠缺血侧皮层组织中iNOS、Iba1、CD68和CD40蛋白相对表达量比缺血性脑卒中组低,CD206和Arg-1蛋白相对表达量比缺血性脑卒中组高(P<0.05);高剂量+DMXAA组大鼠缺血侧皮层组织中iNOS、Iba1、CD68和CD40蛋白相对表达量比高剂量组高,CD206和Arg-1蛋白相对表达量比高剂量组低(P<0.05)。结论益气活血化浊解毒方可调节缺血性脑卒中大鼠小胶质细胞极化,减轻神经炎症和神经损伤,改善神经功能,可能与抑制KAT3B/STING轴有关。
文摘目的:探讨敲低小鼠胚胎腭突间充质细胞(mEPMCs)初级纤毛(PC)重要组件驱动蛋白家族成员3B(KIF3B)基因对细胞自噬水平的作用,并阐明其作用机制。方法:收集体外培养孕龄14.5 d C57BL/6J小鼠的mEPMCs,根据是否敲低KIF3B基因和使用平滑因子受体激动剂(SAG)激活音猬因子(Shh)信号通路及其下游共受体Smo,分为对照组(给予生理盐水)、空载病毒转染细胞组(sh-NC组)(给予慢病毒转染)、敲低KIF3B组(sh-KIF3B组)(给予KIF3B基因敲低)、敲低KIF3B加入SAG组(sh-KIF3B+SAG组)(给予KIF3B基因敲低后加入SAG),每组5只大鼠。透射电镜观察各组mEPMCs中自噬小体/自噬溶酶体形态表现及数量,Western blotting法检测各组mEPMCs中自噬相关蛋白苄氯素1(Beclin-1)和p62及Shh信号通路中Shh和Smo蛋白表达水平。结果:透射电镜观察,与对照组比较,sh-KIF3B组mEPMCs中自噬小体/自噬溶酶体数量明显增加(P<0.05);与sh-KIF3B组比较,sh-KIF3B+SAG组mEPMCs中自噬小体/自噬溶酶体数量明显减少(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,sh-KIF3B组mEPMCs中Beclin-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),KIF3B、p62、Shh和Smo蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与sh-KIF3B组比较,sh-KIF3B+SAG组mEPMCs中Shh、Smo和p62蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Beclin-1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:敲低KIF3B基因可促进mEPMCs自噬,其机制可能与其抑制Shh信号通路有关。
文摘目的:分析剪接因子3B亚单位1(SF3B1)突变骨髓增生异常综合征(MDS)患者合并突变的数量与类型对临床特征及预后的影响。方法:回顾性分析2015年10月—2024年5月52例SF3B1突变MDS患者的合并突变、血常规、总生存(OS)时间等资料,比较不同数量、不同类型的合并突变之间白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、OS的差异。结果:52例患者中42例(80.77%)存在合并突变,10例(19.23%)无合并突变。29例(55.77%)合并<2种突变,23例(44.23%)合并≥2种突变。最常见的合并突变为ASXL115例(28.85%)、TET213例(25.00%)。无合并突变与合并突变、合并<2种与≥2种突变者之间WBC、HGB、PLT水平差异无统计学意义(P>0.05)。无合并突变与有合并突变患者中位OS分别为28.93个月和37.53个月(P=0.85)。<2个突变与≥2个突变患者的中位OS分别为35.97个月和45.80个月(P=0.59)。ASXL1突变组WBC低于ASXL1野生组(中位值2.12×10~9/L vs 3.30×10^(9)/L,P=0.03),而HGB、PLT差异无统计学意义(P>0.05)。TET2突变组与TET2野生组之间WBC、HGB、PLT差异无统计学意义(P>0.05)。ASXL1突变组与ASXL1野生组中位OS分别为37.53个月和40.50个月(P=0.82)。TET2突变组与TET2野生组中位OS分别为61.77个月和37.53个月(P=0.85)。结论:SF3B1突变MDS患者合并ASXL1突变白细胞较低,而生存无影响;SF3B1合并突变是否小于2个、是否合并TET2突变对临床特征及总生存无影响。
