期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到973篇文章
< 1 2 … 49 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
数字PCR技术对HEK293细胞系基因组DNA的定量 被引量：1
1
作者 毕华 问芬芬 +5 位作者 陶磊 魏玲慧 杨靖清 卢宁 秦玺 梁成罡 《中国生物制品学杂志》 2025年第2期190-196,203,共8页
目的通过微流体芯片式数字PCR技术对HEK293细胞基因组DNA进行定量研究,为更加准确地定量基因以及基因组DNA相关检测提供新思路。方法首先通过柱提法获得HEK293细胞DNA,经琼脂糖凝胶电泳进行鉴定及纯度分析,再采用传统分光光度法、Qubit... 目的通过微流体芯片式数字PCR技术对HEK293细胞基因组DNA进行定量研究,为更加准确地定量基因以及基因组DNA相关检测提供新思路。方法首先通过柱提法获得HEK293细胞DNA,经琼脂糖凝胶电泳进行鉴定及纯度分析,再采用传统分光光度法、Qubit法和微流体芯片式数字PCR技术分别对HEK293细胞基因组DNA进行定量并进行统计分析。结果分光光度法测定HEK293细胞基因组DNA浓度为100.08 ng/μL,Qubit法测定值为93.98 ng/μL,数字PCR法检测拷贝数为29722.81 copies/μL,按照1个人类单拷贝基因组约3.3 pg粗略回算,分光光度和Qubit法换算的拷贝数分别约为30327和28479 copies/μL,数字PCR法测定值与分光光度法测定值的偏差仅为2%,而与Qubit法测定值的偏差仅为4%。结论本研究通过数字PCR、分光光度和Qubit法对HEK293细胞基因组进行DNA测定并比较,为DNA的定量提供了一种新的测定方法及思路,同时也为其他核酸类物质的定量提供了参考。 展开更多
关键词 HEK293细胞 数字PCR 宿主DNA DNA定量
原文传递
女贞子抗氧化肽对HEK293细胞氧化应激损伤保护作用研究 被引量：1
2
作者 徐倩 毛绍云 柏倩 《食品与发酵科技》 2025年第4期44-54,共11页
利用H2O2处理HEK293细胞构建细胞氧化损伤模型,研究4条女贞子抗氧化肽(LMVGLT、VPYPHLM、NRDDMRER、ANQLDQFSR)作用于模型细胞,检验其对氧化应激细胞的保护作用。结果表明,400μmol/L的H2O2处理HEK293细胞12h,细胞存活率为(61.34±0... 利用H2O2处理HEK293细胞构建细胞氧化损伤模型,研究4条女贞子抗氧化肽(LMVGLT、VPYPHLM、NRDDMRER、ANQLDQFSR)作用于模型细胞,检验其对氧化应激细胞的保护作用。结果表明,400μmol/L的H2O2处理HEK293细胞12h,细胞存活率为(61.34±0.57)%,此条件下构建了最佳的细胞氧化损伤模型;与维生素C(VC)作为对照组进行体外抗氧化能力测验,VC对DPPH自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除率显著高于女贞子抗氧化肽,而抗氧化肽对亚铁离子及铜离子螯合率显著高于VC;细胞毒性试验表明,4条抗氧化肽对HEK293细胞无毒性抑制性,也无促进增殖作用;其中肽2(VPYPHLM)在浓度为240μmol/mL时,HEK293细胞存活率达到了98.98%。细胞中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的酶活和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量及GSH/GSSG比值比阳性对照组明显上升,丙二醛(MDA)含量明显下降。研究结果显示女贞子抗氧化肽对氧化损伤细胞具有显著的保护作用,为女贞子抗氧化肽在医药和食品领域高值化开发利用提供了有力的理论依据和试验支撑。 展开更多
关键词 女贞子 抗氧化肽 氧化损伤 HEK293细胞 保护作用
暂未订购
HEK293细胞悬浮培养技术及其应用研究进展
3
作者 岳欣豫 吉雯娜 +7 位作者 周锦鱼 靳莉武 杨迪 刘振斌 孙娜 乔自林 马忠仁 王家敏 《生物技术通报》 北大核心 2025年第8期82-91,共10页
生物制药产品的生产主要依赖于哺乳动物细胞,尤其是在制造复杂的蛋白质药物,因为其能够进行复杂的翻译后修饰(post-translational modifications, PTMs),对于蛋白质的功能和稳定性至关重要,一些生物制药商品如重组治疗蛋白、疫苗、抗癌... 生物制药产品的生产主要依赖于哺乳动物细胞,尤其是在制造复杂的蛋白质药物,因为其能够进行复杂的翻译后修饰(post-translational modifications, PTMs),对于蛋白质的功能和稳定性至关重要,一些生物制药商品如重组治疗蛋白、疫苗、抗癌药物和其他临床相关药物等大多数都是利用了哺乳动物细胞平台生产。HEK293细胞(human embryonic kidney 293 cells)是所有人类细胞系中最常用的宿主细胞之一,但由于贴壁细胞在生产应用中的高投资成本,以及血清添加有可能携带的外源风险等问题,导致其最初在生产应用方面受到限制,而HEK293悬浮细胞相比于贴壁细胞更具优势,其不仅生产成本大大降低,没有血清的添加更增加了生产生物制品的安全性。目前,HEK293悬浮细胞已广泛应用于多个领域,并已成为生产蛋白质、疫苗和基因治疗药物的强大载体和新平台。本文综述了HEK293细胞的来源及其衍生细胞系,总结目前贴壁细胞的悬浮驯化技术以及用于HEK293细胞的无血清培养基,并描述目前HEK293细胞在疫苗生产、基因治疗药物生产以及实验室基础研究方面的应用进展,讨论了HEK293细胞大规模生产的意义及存在的问题,最后对未来HEK293细胞的研究方向以及大规模生产的应用前景进行展望。 展开更多
关键词 HEK293细胞 悬浮驯化 生物制药
在线阅读 下载PDF
千金子制霜前后提取物对HEK293和IEC-6细胞自噬和线粒体动力学的影响
4
作者 姜明瑞 马思媛 +7 位作者 朱海婷 张俊丽 王晓宇 陈文静 毛易凡 徐鹏 张新宁 王英姿 《中草药》 北大核心 2025年第21期7829-7839,共11页
目的从细胞自噬和线粒体动力学途径探究千金子制霜前后提取物对人胚胎肾细胞(HEK293)和大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)的影响。方法将HEK293和IEC-6细胞分为对照组及千金子生品提取物(100、200、400μg/mL)组和千金子霜品提取物(100、200、400... 目的从细胞自噬和线粒体动力学途径探究千金子制霜前后提取物对人胚胎肾细胞(HEK293)和大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)的影响。方法将HEK293和IEC-6细胞分为对照组及千金子生品提取物(100、200、400μg/mL)组和千金子霜品提取物(100、200、400μg/mL)组,分别采用MTT法和流式细胞术测定细胞活力、细胞凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和线粒体膜电位;使用丹酰尸胺(dansylcadaverine,MDC)染色法观察细胞自噬囊泡数量;利用Western blotting检测细胞中微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein1 light chain 3,LC3)、p62、线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn2)、视神经萎缩蛋白1(optic atrophic protein 1,OPA1)、动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,Drp1)的表达。结果与对照组比较,千金子制霜前后提取物作用于HEK293细胞、IEC-6细胞后存活率显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.05、0.01),自噬囊泡显著增多(P<0.01),细胞内ROS水平显著升高(P<0.01),线粒体膜电位显著降低(P<0.05、0.01),p62、Mfn2、OPA1蛋白表达水平显著降低(P<0.01),LC3-II/I、Drp1蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与相同剂量的生品比较,千金子制霜后细胞存活率升高(P<0.01),诱导HEK293和IEC-6细胞凋亡的能力减弱(P<0.01),细胞自噬囊泡的数量减少(P<0.01),线粒体膜电位升高(P<0.05、0.01),ROS水平降低(P<0.05、0.01),并能减弱对p62、Mfn2、OPA1蛋白表达的下调作用及LC3-II/I、Drp1蛋白表达的上调作用(P<0.05、0.01)。结论千金子制霜减毒的作用机制可能与通过调控细胞自噬途径和线粒体动力学平衡、影响细胞增殖及凋亡有关。 展开更多
关键词 千金子 制霜减毒 细胞自噬 线粒体动力学 HEK293细胞 IEC-6细胞 千金子素L1
原文传递
重组人凝血因子X在HEK293细胞中的表达及活性检测
5
作者 冯佳宁 邹森 +3 位作者 赵泽林 李肖肖 张志斐 杨兆勇 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第9期1583-1590,共8页
目的瞬时转染重组人凝血因子X(rhFX)到HEK293细胞,优化转染条件,体外构建高效表达rhFX的方法,检测rhFX活性。方法pcDNA3.1-EGFP与F10基因构建真核表达载体pcDNA3.1-EGFP-FX并转染HEK293细胞,验证转染系统的有效性。pcDNA3.1与F10基因片... 目的瞬时转染重组人凝血因子X(rhFX)到HEK293细胞,优化转染条件,体外构建高效表达rhFX的方法,检测rhFX活性。方法pcDNA3.1-EGFP与F10基因构建真核表达载体pcDNA3.1-EGFP-FX并转染HEK293细胞,验证转染系统的有效性。pcDNA3.1与F10基因片段构建重组表达载体pcDNA3.1-FX,脂质体方法转染HEK293细胞,Western blot和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测细胞上清液中rhFX的表达。优化转染条件,ELISA测定rhFX的浓度;凝血酶原时间(PT)和发色底物法测定rhFX凝血生物活性。结果在HEK293细胞上清液中成功表达rhFX。在细胞密度80%,质粒DNA与聚乙烯亚胺(PEI)的比例为1∶2,转染后第3天,rhFX表达量最高。ELISA检测3次上清液表达量最高为5.20 ng/mL。与对照组pcDNA3.1空载体转染收集的上清液相比,实验组rhFX的PT时间更短(P<0.0001),基于rhFX的发色底物法测得依度沙班的半数抑制浓度(IC_(50))为1.449 nmol/L,与文献报导的0.78 nmol/L处于同一数量级。结论使用HEK293细胞成功表达出具有生物活性的rhFX蛋白,为进一步推动rhFX药物的研发奠定基础。 展开更多
关键词 重组人凝血因子X 瞬时表达 表达优化 HEK293细胞 凝血因子X缺乏症 凝血酶原时间
暂未订购
利用CRISPR/Cas9在HEK293T细胞实现γ珠蛋白上调
6
作者 黄献娟 赖永榕 李静 《广西医科大学学报》 2025年第2期241-246,共6页
目的:采用CRISPR/Cas9技术编辑HEK293T细胞的γ珠蛋白启动子上调γ珠蛋白,探索基因编辑技术治疗β地中海贫血方法的可行性。方法:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在γ珠蛋白转录起始位点(TSS)区前420 bp设计2条sgRNA序列,通过脂质体转染CR... 目的:采用CRISPR/Cas9技术编辑HEK293T细胞的γ珠蛋白启动子上调γ珠蛋白,探索基因编辑技术治疗β地中海贫血方法的可行性。方法:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在γ珠蛋白转录起始位点(TSS)区前420 bp设计2条sgRNA序列,通过脂质体转染CRISPR/Cas9质粒诱导HEK293T细胞血红蛋白γ(HBG)基因启动子切割,经阳性克隆筛选、Sanger测序验证、TIDE分析编辑效率、RT-qPCR和western blotting检测γ珠蛋白基因表达量。结果:2条sgRNA序列均能对γ珠蛋白进行基因切割且切割活性分别为44.20%(sgRNA1)、32.90%(sgRNA2),RT-qPCR和western blotting结果显示,与对照组(NCs组,转染空载PX459质粒)相比,sgRNA2组γ珠蛋白基因表达量升高(P<0.05)。结论:CRISPR/Cas9基因编辑技术可在γ珠蛋白启动子上实现有效编辑,从而上调γ珠蛋白。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9编辑 Γ珠蛋白 HEK293T细胞 基因编辑
暂未订购
逆转座子LINE-1对293T细胞增殖及细胞形态的影响
7
作者 李丹 刘红梅 张鹏 《中国生物工程杂志》 北大核心 2025年第7期1-10,共10页
目的:探索逆转座子LINE-1(long interspersed nuclear elements-1)编码的ORF-1p在维持293T细胞增殖和形态中的作用。方法:利用核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术,构建LINE-1 ORF-1p表达量下调的293T细胞系,通过qPCR(quantitative... 目的:探索逆转座子LINE-1(long interspersed nuclear elements-1)编码的ORF-1p在维持293T细胞增殖和形态中的作用。方法:利用核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术,构建LINE-1 ORF-1p表达量下调的293T细胞系,通过qPCR(quantitative polymerase chain reaction)和Western blot验证干扰效率,通过免疫荧光染色检测ORF-1p的表达和定位,通过细胞计数和克隆形成实验检测细胞增殖能力,通过鬼笔环肽和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色分析细胞形态。结果:成功构建两种LINE-1敲低的293T细胞系,通过免疫荧光染色观察ORF-1p的表达定位,显示ORF-1p主要分布在细胞质,干扰LINE-1后ORF-1p表达减少;通过细胞计数和集落形成实验,发现下调ORF-1p后细胞的增殖能力和克隆形成能力显著降低(P<0.05);通过鬼笔环肽标记细胞骨架,DAPI标记细胞核,相差显微镜和共聚焦显微镜观察干扰LINE-1后细胞形态,结果显示,下调ORF-1p后shL1-749细胞面积减小,细胞圆润度增加(P<0.05)。结论:成功构建了LINE-1敲低的293T细胞系,发现下调ORF-1p蛋白能够抑制293T细胞的生长,改变细胞形态,为进一步了解LINE-1在细胞增殖和调控中的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 LINE-1 ORF-1p RNAI 293T 细胞增殖 细胞形态
原文传递
磷酸化TauS214对HT22细胞和HEK293T细胞焦亡及炎症的影响
8
作者 陈慧琳 操蓉 +3 位作者 文亿 王能琴 齐晓岚 唐智 《贵州医科大学学报》 2025年第8期1093-1105,1119,共14页
目的构建阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)Tau蛋白异常磷酸化体外模型,探究磷酸化TauS214对细胞焦亡及炎症的影响。方法以NCBI中人源Tau40(h-Tau40)基因序列为模板设计突变引物,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)... 目的构建阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)Tau蛋白异常磷酸化体外模型,探究磷酸化TauS214对细胞焦亡及炎症的影响。方法以NCBI中人源Tau40(h-Tau40)基因序列为模板设计突变引物,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增目的基因,经限制性内切酶(restriction endonuclease,RE)BglⅡ和EcoR I双酶切后定向克隆到载体pEGFP-C1中,构建Tau突变体(TauS214E、TauS214A、TauP301L),测序鉴定正确后将质粒瞬时转染至HEK293T和HT22细胞,免疫荧光法检测重组Tau蛋白定位情况,蛋白质印迹法检测pTauS214、pTauS404和Tau5的表达,检测NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin D N端片段(GSDMD-N)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果成功构建Tau蛋白重组质粒并在两种细胞中稳定表达;Tau40和TauP301L组中pS214表达显著降低,pS404表达升高(P<0.05),NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18、IL-6表达显著增加(P<0.05);TauS214E与Tau40相比,pS214表达显著升高,pS404表达显著降低(P<0.05),NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18、IL-6表达显著降低(P<0.05)。结论Tau40和TauP301L通过调节Tau蛋白磷酸化水平显著促进细胞焦亡和炎症反应,而TauS214E位点抑制炎性小体激活或阻断细胞焦亡。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 TAU蛋白 质粒 细胞焦亡 炎症 HT22 HEK293T
暂未订购
高葡萄糖诱导对293T细胞类二十烷酸代谢的影响
9
作者 曹洋 柏聪颖 +5 位作者 王文倩 李浩 杜佳欣 郑柏诚 李捷 魏利莎 《湖北农业科学》 2025年第4期171-175,共5页
采用高葡萄糖(50 mmol/L)诱导293T细胞,通过CCK-8试剂盒检测细胞在1~4 d的增殖情况,利用荧光实时定量PCR技术分析细胞中类二十烷酸代谢相关基因及炎症相关基因的mRNA表达水平。结果表明,与正常葡萄糖(25 mmol/L)相比,高葡萄糖刺激后,293... 采用高葡萄糖(50 mmol/L)诱导293T细胞,通过CCK-8试剂盒检测细胞在1~4 d的增殖情况,利用荧光实时定量PCR技术分析细胞中类二十烷酸代谢相关基因及炎症相关基因的mRNA表达水平。结果表明,与正常葡萄糖(25 mmol/L)相比,高葡萄糖刺激后,293T细胞内类二十烷酸代谢相关基因的mRNA表达水平未发生显著变化,仅COX1基因在第5代时出现短暂下调,随后恢复至正常水平。高葡萄糖刺激还导致293T细胞内炎症因子IL-1β的mRNA水平在第11代时显著升高,表明长期高葡萄糖刺激可能诱发293T细胞产生轻度炎症反应。 展开更多
关键词 高葡萄糖 诱导 类二十烷酸代谢 293T细胞
暂未订购
稳定分泌表达猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白的HEK293T细胞系的构建及鉴定
10
作者 颜仁和 万鹏飞 +2 位作者 刘蕾 楚电峰 毛莹莹 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第3期453-457,共5页
目的构建一种高效、稳定表达分泌型猪瘟病毒E2蛋白的HEK-293T细胞株。方法利用分子克隆技术将含有信号肽的猪瘟病毒E2基因插入到慢病毒表达质粒,获得重组慢病毒载体pLV-CMV-E2。通过三质粒转染法包装重组慢病毒并感染HEK-293T细胞,采用... 目的构建一种高效、稳定表达分泌型猪瘟病毒E2蛋白的HEK-293T细胞株。方法利用分子克隆技术将含有信号肽的猪瘟病毒E2基因插入到慢病毒表达质粒,获得重组慢病毒载体pLV-CMV-E2。通过三质粒转染法包装重组慢病毒并感染HEK-293T细胞,采用有限稀释法获得稳定表达分泌性E2蛋白的重组单克隆细胞系。结果重组质粒酶切及PCR鉴定结果可见约1050条带,与CSFV E2基因大小相符;包装慢病毒LV-CSFV E2检测滴度为1×10^(8) copies/mL。慢病毒感染HEK-293T后,经Dot blot和有限稀释法筛选得到7个细胞形态均一、长势良好且E2蛋白表达水平较高的克隆(A4,A5,C1,D1,D2,E1,E2);重组细胞系经PCR及Western blot方法检测到E2基因及蛋白所对应特异性条带。将重组细胞系连续传至70代,E2蛋白表达水平稳定不变;免疫学实验结果显示,重组E2蛋白能够与猪瘟阳性血清发生特异性反应。结论本研究成功建立了一种稳定高效地表达分泌性重组E2蛋白的真核表达系统,为研究猪瘟E2亚单位疫苗及血清学诊断方法等奠定基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2囊膜蛋白 慢病毒载体 HEK-293T细胞
在线阅读 下载PDF
Tet-off调控bcr/abl基因表达的细胞系293pT2-P210的建立
11
作者 黄文荣 鲁茁壮 +5 位作者 王立生 王华 段海峰 李庆芳 高春记 达万明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期224-228,共5页
慢性髓系白血病(CML)是一种以髓系细胞受累为主的克隆性疾病。目前认为CML的主要分子发病基础为:位于9q34的abl基因与位于22q11的bcr基因相互易位形成bcr/abl融合基因,并编码具有很强蛋白酪氨酸激酶活性的P210bcr/abl融合蛋白,该蛋白通... 慢性髓系白血病(CML)是一种以髓系细胞受累为主的克隆性疾病。目前认为CML的主要分子发病基础为:位于9q34的abl基因与位于22q11的bcr基因相互易位形成bcr/abl融合基因,并编码具有很强蛋白酪氨酸激酶活性的P210bcr/abl融合蛋白,该蛋白通过多种信号通路抑制细胞凋亡而导致细胞转化。本研究为构建能由Tet-off诱导表达系统调控bcr/abl融合基因表达的细胞系,为深入研究bcr/abl融合基因功能及其调控机制提供一种有价值的细胞模型。将bcr/abl融合基因亚克隆到pTRE2hyg载体构建重组质粒pT2-P210,同时将Tet-off质粒转染293细胞并筛选出单克隆,然后进一步转染pTRE2hyg-LUC质粒,通过荧光素酶活性检测选出能有效诱导目的基因表达的293Tet-off细胞,然后将重组质粒pT2-P210转染到293Tet-off细胞中。结果表明:筛选出了bcr/abl融合基因能被强力霉素有效调控的293pT2-P210单克隆细胞。结论:本研究筛选的293pT2-P210细胞为bcr/abl基因表达能被Tet-off诱导表达系统调控的细胞系,它们适用于bcr/abl融合基因功能及其信号调控机制的深入研究。 展开更多
关键词 BCR/ABL融合基因 Tet-off诱导表达系统 293pT2-P210细胞系 293细胞
暂未订购
茶多酚和维生素C对人胚肾293细胞缺糖缺氧损伤保护作用的比较 被引量：9
12
作者 吕勇 金越 +3 位作者 韩国柱 周琴 孙慧君 李楠 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1370-1372,共3页
目的从细胞水平研究茶多酚(TP)对人胚肾293细胞缺糖缺氧性损伤的保护作用,并与抗氧化剂维生素C(VC)进行比较。方法采用缺糖培养基并以连二亚硫酸钠消除培养基中的氧,诱导产生缺氧缺糖损伤模型,测定细胞的存活率、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧... 目的从细胞水平研究茶多酚(TP)对人胚肾293细胞缺糖缺氧性损伤的保护作用,并与抗氧化剂维生素C(VC)进行比较。方法采用缺糖培养基并以连二亚硫酸钠消除培养基中的氧,诱导产生缺氧缺糖损伤模型,测定细胞的存活率、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及总抗氧化能力,并计算IC50。结果在细胞损伤模型中,TP和VC均表现出极强的抗氧化能力,TP能显著提高细胞的存活率、SOD活性和总抗氧化能力并抑制LDH的活性,TP的作用均大于VC。结论TP和VC体外具有强大的自由基清除作用,且呈现明显的剂量依赖性,TP在细胞损伤模型中的抗自由基作用均大于VC。 展开更多
关键词 茶多酚(TP) 维生素C(VC) 自由基 缺氧缺糖性损伤 人胚肾293细胞
暂未订购
水稻新品种丰优293抗倒超高产栽培技术研究 被引量：13
13
作者 严志 张丛合 +6 位作者 陈金节 申广勒 周桂香 石英尧 陈琳 刘兴江 张云虎 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第15期6918-6919,共2页
[目的]为丰优293的大面积推广提供技术指导。[方法]以水稻品种丰优293和II838(对照)为材料,研究不同施肥水平(施纯氮2251、507、5 kg/hm2)对2品种抗倒性(株高、重心高度、节间壁厚和倒伏指数)和产量及产量构成因素的影响。并总结了丰优... [目的]为丰优293的大面积推广提供技术指导。[方法]以水稻品种丰优293和II838(对照)为材料,研究不同施肥水平(施纯氮2251、507、5 kg/hm2)对2品种抗倒性(株高、重心高度、节间壁厚和倒伏指数)和产量及产量构成因素的影响。并总结了丰优293的高产栽培技术要点。[结果]3种肥力水平下,丰优293的倒伏指数、株高、重心高度均低于II838,而基部3个节间的厚度明显厚于II838;3种肥力水平下,丰优293的穴穗数低于II838,但其穗粒数、结实率、千粒重、理论产量和实际产量均高于II838。[结论]相同肥力水平下,丰优293的抗倒性和产量均优于II838。丰优293的最适播期为4月中下旬,最适移栽时间为5月中下旬,秧田用种量和扦插密度分别为180kg/hm2和16.5 cm×23.1 cm。 展开更多
关键词 丰优293 施肥水平 抗倒性 产量
在线阅读 下载PDF
镉诱导HEK293细胞胞内钙稳态的失调引发细胞凋亡 被引量：17
14
作者 毛伟平 许锋 +1 位作者 石晓娟 邹晓实 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期103-108,共6页
目的　研究镉诱导HEK2 93细胞钙稳态失调及其引发细胞凋亡的机制。方法　通过吖啶橙 /溴乙锭双荧光染色法检测细胞凋亡 ,并通过MTT法检测细胞生长抑制 ;以Fluo 3/AM和Fura 2 /AM为探针检测胞浆内游离钙离子浓度 ([Ca2 +]i)的变化 ;使用... 目的　研究镉诱导HEK2 93细胞钙稳态失调及其引发细胞凋亡的机制。方法　通过吖啶橙 /溴乙锭双荧光染色法检测细胞凋亡 ,并通过MTT法检测细胞生长抑制 ;以Fluo 3/AM和Fura 2 /AM为探针检测胞浆内游离钙离子浓度 ([Ca2 +]i)的变化 ;使用钙调磷酸酶试剂盒测定镉对钙调磷酸酶活性的影响。结果　镉诱导HEK2 93细胞的凋亡和生长抑制呈浓度依赖性 ;镉通过引发胞内钙库的释放后引起胞外钙离子内流 ;钙信号阻断剂能显著地抑制镉引起的细胞凋亡 ;镉使胞内钙调磷酸酶的活性显著增加。结论　 [Ca2 +]i 升高使钙调磷酸酶活化可能在镉引发细胞凋亡过程中起重要作用。 展开更多
关键词 镉 细胞 HEK293 凋亡 钙 稳态
暂未订购
镉诱导HEK293细胞凋亡及其线粒体凋亡途径 被引量：13
15
作者 叶记林 毛伟平 +5 位作者 吴爱莲 赵洁明 张超 张娜娜 姜平 田婷 《分子细胞生物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期7-16,共10页
本课题研究了氯化镉(CdCl_2)诱导HEK293细胞(人胚胎肾细胞系)的凋亡,初步探讨了凋亡过程中Caspase-3、Bcl-2的变化和凋亡诱导因子(AIF)的转移以及它们的意义。MTT法检测CdCl_2对HEK293细胞增殖的抑制作用;通过倒置显微镜、电镜、琼脂糖... 本课题研究了氯化镉(CdCl_2)诱导HEK293细胞(人胚胎肾细胞系)的凋亡,初步探讨了凋亡过程中Caspase-3、Bcl-2的变化和凋亡诱导因子(AIF)的转移以及它们的意义。MTT法检测CdCl_2对HEK293细胞增殖的抑制作用;通过倒置显微镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、激光共聚焦观察细胞凋亡;应用Western blot法和荧光免疫法测定Caspase-3酶原、Bcl-2蛋白的变化以及检测AIF蛋白在细胞中的定位。结果显示:CdCl_2对HEK293细胞具有显著的生长抑制作用,并呈明显的剂量和时间依赖性。在琼脂糖凝胶电泳中,显示有凋亡细胞特有的DNA梯状条带,其中30μmol/L作用6-9h梯状条带最为清晰,时间过长或浓度过高则梯状条带逐渐模糊,表明镉浓度过高或处理时间过长,细胞有坏死。流式细胞仪检测也印证了这一结果。形态学观察可见明显的细胞凋亡特征。同时线粒体膜电位明显下降,发现Caspase-3酶原蛋白、Bcl-2蛋白含量减少,并具有时间依赖性;另外检测到线粒体AIF向细胞核转移。而Bcl-2转染后有一定的抑制凋亡作用。实验结果提示,CdCl_2能够诱导HEK293细胞凋亡,线粒体损伤导致AIF转移与细胞色素c释放,从而引发的非Caspases与Caspases凋亡途径可能在镉引发的细胞凋亡过程中起重要作用,而Caspase-3, Bcl-2起着重要的调控作用。 展开更多
关键词 镉 HEK293细胞 细胞凋亡 线粒体 凋亡诱导因子(AIF) Caspase-3 Bcl-2
在线阅读 下载PDF
p16基因高表达对293细胞衰老的影响 被引量：4
16
作者 马珊珊 刘静 +6 位作者 姚宁 崔渊博 邢衢 王梦然 郭天宇 杨波 关方霞 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第5期622-625,共4页
目的:探讨p16基因高表达对293细胞衰老的影响。方法:实验设正常组、空质粒组和高表达组。RTPCR扩增人p16基因,构建p16基因高表达载体,利用脂质体将其转染293细胞。采用CCK-8法和流式细胞术检测p16基因高表达对293细胞增殖和细胞周期的影... 目的:探讨p16基因高表达对293细胞衰老的影响。方法:实验设正常组、空质粒组和高表达组。RTPCR扩增人p16基因,构建p16基因高表达载体,利用脂质体将其转染293细胞。采用CCK-8法和流式细胞术检测p16基因高表达对293细胞增殖和细胞周期的影响,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老状态,RT-PCR和Western blot法检测p16、p21 mRNA和蛋白的表达。结果:p16基因高表达可抑制293细胞的增殖,并将细胞阻滞在G0/G1期(F=158.057,P<0.001);高表达组细胞p16和p21在mRNA和蛋白水平的表达明显增加(F=73.467、54.988、9.923、44.060,P均<0.05),β-半乳糖苷酶阳性细胞率明显增加(F=137.266,P<0.001)。结论:p16基因高表达可抑制293细胞的增殖,将细胞阻滞在G0/G1期,提高细胞中p16和p21的表达,促进细胞衰老。 展开更多
关键词 P16 高表达 细胞衰老 调控 293细胞
在线阅读 下载PDF
氟康唑对豚鼠心室肌细胞I_K和在HEK-293细胞中表达的HERG钾通道的抑制作用 被引量：4
17
作者 韩圣娜 陈秋 +4 位作者 张雨 角灿武 毛讯 付润芳 张莉蓉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期861-866,共6页
目的研究氟康唑对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流(IK)和在HEK-293细胞中表达的HERG钾通道的抑制作用。方法应用酶解法消化豚鼠单个心室肌细胞,观察氟康唑对IK的影响;采用磷酸钙沉淀瞬时转染的方法将HERG基因表达于HEK-293细胞上,观察氟... 目的研究氟康唑对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流(IK)和在HEK-293细胞中表达的HERG钾通道的抑制作用。方法应用酶解法消化豚鼠单个心室肌细胞,观察氟康唑对IK的影响;采用磷酸钙沉淀瞬时转染的方法将HERG基因表达于HEK-293细胞上,观察氟康唑对野生型HERG钾通道电流、激活和失活曲线的影响,以及氟康唑对Y652A和F656C突变型HERG钾通道的作用;IK和HERG电流的记录均采用全细胞膜片钳技术。结果氟康唑(0.01、0.1、1、3、10、30、100、300和1 000μmol.L-1)浓度依赖性地抑制IK和HERG钾电流,其IC50值分别为(68.1±21.6)μmol.L-1和(48.2±9.4)μmol.L-1,对HERG钾通道的电压依赖性激活和失活曲线无影响;与野生型(WT)比较,Y652A和F656C突变型可减弱氟康唑对HERG通道的阻断作用。结论氟康唑能阻断IK和HERG通道,Y652和F656是氟康唑与HERG通道结合的关键位点。 展开更多
关键词 氟康唑 延迟整流钾电流 HERG钾通道 膜片钳技术 HEK-293细胞 心室肌细胞
暂未订购
稳定表达GlyRα1的HEK293细胞系的建立 被引量：5
18
作者 蒋玲琳 刘丽 +3 位作者 朱含章 杨青 范乐明 陈琪 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期647-650,共4页
目的:建立稳定表达甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)真核表达载体的人胚肾细胞(HEK293)细胞系。方法:构建pcDNA3.1-GlyRα1真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞,再用G418筛选表达稳定的细胞系。真核细胞中GlyRα1... 目的:建立稳定表达甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)真核表达载体的人胚肾细胞(HEK293)细胞系。方法:构建pcDNA3.1-GlyRα1真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞,再用G418筛选表达稳定的细胞系。真核细胞中GlyRα1的表达分别用RT-PCR与Western blot方法检测。结果:在7株转染并经G418反复筛选的HEK293细胞系中,有4株细胞系明显表达GlyRα1的mRNA及其蛋白质,其余3株细胞表达较弱或者没有表达。结论:用pcDNA3.1-GlyRα1转染的HEK293细胞经G418筛选,可成功建立GlyRα1稳定表达系。 展开更多
关键词 甘氨酸受体 基因转染 HEK293细胞 稳定表达
在线阅读 下载PDF
HEK293细胞—— 一种研究受体Ca^(2+)调控功能的理想模型 被引量：7
19
作者 陶亮 关永源 +4 位作者 贺华 李劲梁 韩启德 张幼怡 孙家钧 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期220-223,共4页
目的了解ＨＥＫ２９３细胞Ｃａ２＋代谢的生物学特性。方法用Ｆｕｒａ－２荧光探针双波长测定细胞胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）方法，观察多种能改变细胞内Ｃａ２＋代谢的药物对天然的和转染了α１Ｂ肾上腺素受体ｃＤＮＡ的... 目的了解ＨＥＫ２９３细胞Ｃａ２＋代谢的生物学特性。方法用Ｆｕｒａ－２荧光探针双波长测定细胞胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）方法，观察多种能改变细胞内Ｃａ２＋代谢的药物对天然的和转染了α１Ｂ肾上腺素受体ｃＤＮＡ的ＨＥＫ２９３细胞［Ｃａ２＋］ｉ的影响。结果在含１．５ｍｍｏｌＬ－１ＣａＣｌ２的缓冲液中，ＫＣｌ５０ｍｍｏｌＬ－１和ＢａｙＫ８６４４１０μｍｏｌＬ－１不影响ＨＥＫ２９３细胞的［Ｃａ２＋］ｉ；ｃｙｃｌｏｐｉａｚｏｎｉｃａｃｉｄ（ＣＰＡ０．０１，０．１，１０μｍｏｌＬ－１）能浓度依赖性地引起ＨＥＫ２９３细胞的［Ｃａ２＋］ｉ呈双相升高，其中的Ｃａ２＋内流相不受ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ（１０μｍｏｌＬ－１）的影响；但可被１ｍｍｏｌＬ－１ＮｉＳＯ４完全抑制。在无Ｃａ２＋的缓冲液中，咖啡因２０ｍｍｏｌＬ－１和ｒｙａｎｏｄｉｎｅ１μｍｏｌＬ－１均不影响ＨＥＫ２９３细胞的［Ｃａ２＋］ｉ。先用ＣＰＡ（３０μｍｏｌＬ－１）耗竭ＨＥＫα１Ｂ细胞内Ｃａ２＋贮存池后，肾上腺素１０μｍｏｌＬ－１能进一步升高［Ｃａ２＋］ｉ。在有Ｃａ２＋或无Ｃａ２＋的缓冲液中，肾上腺素均可引起ＨＥＫα１Ｂ细胞［Ｃａ２＋］ｉ升高。结论ＨＥＫ２９３细胞? 展开更多
关键词 HEK293细胞 受体 钙 调控功能
暂未订购
基因治疗原发性高血压的新途径:内皮型一氧化氮合成酶CDNA腺病毒载体在人胎肾293细胞的表达 被引量：6
20
作者 江德文 吴可贵 +1 位作者 高丽真 芮红兵 《中国临床康复》 CAS CSCD 2003年第30期4062-4063,共2页
研究内皮型一氧化氮合成酶（endothelialnitric oxide synthase,eNOS)CDNA 腺病毒载体 PadRSVeNOSCDNA 导入在人胎肾 293细胞 ( )中的表达。方法:大量制备及纯化质粒 eNOSCDNA ,将纯化eNOSCDNA ... 研究内皮型一氧化氮合成酶（endothelialnitric oxide synthase,eNOS)CDNA 腺病毒载体 PadRSVeNOSCDNA 导入在人胎肾 293细胞 ( )中的表达。方法:大量制备及纯化质粒 eNOSCDNA ,将纯化eNOSCDNA 载体通过脂质体转染 293细胞48h 后,应用化学比色法测定293细胞提取物NOS 活性。结果:被转染 293细胞 NOS活性显著提高于未转染293细胞 NOS 活性犤( 0.62±0.03),(0.093±0.01)kU /L,P <0.001犦。结论:PA dRSVeNOSCDNA 导入人胎肾 293细胞是一种能使 NOS 活性显著升高的方法,为基因治疗原发性高血压及肾脏血管性疾病研究提供一条新的途径。 展开更多
关键词 基因治疗 原发性高血压 内皮型一氧化氮合成酶 CDNA腺病毒载体 肾 293细胞 胚胎
暂未订购
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 49 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部