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基于生物信息学分析细胞分裂周期蛋白25B基因与肾透明细胞癌患者预后及免疫细胞浸润的关系
1
作者 李书珍 薛雯 +2 位作者 吴润强 陈洁晶 周献青 《广西医学》 2025年第5期727-733,共7页
目的基于生物信息学方法探讨细胞分裂周期蛋白25B(CDC25B)基因与肾透明细胞癌(KIRC)患者预后及免疫细胞浸润的关系。方法在TCGA数据库下载33种癌症的RNAseq数据及KIRC患者的临床病理参数数据。使用R语言软件分析CDC25B mRNA在泛癌和KIR... 目的基于生物信息学方法探讨细胞分裂周期蛋白25B(CDC25B)基因与肾透明细胞癌(KIRC)患者预后及免疫细胞浸润的关系。方法在TCGA数据库下载33种癌症的RNAseq数据及KIRC患者的临床病理参数数据。使用R语言软件分析CDC25B mRNA在泛癌和KIRC组织中的表达水平及其与KIRC患者临床病理参数的关系。采用Kaplan-Meier法分析CDC25B mRNA表达水平与KIRC患者总生存期、疾病特异性生存期及无进展间隔期的关系。绘制受试者工作特征曲线分析CDC25B mRNA表达水平在KIRC患者中的诊断效能。利用单因素及多因素COX回归模型分析CDC25B mRNA对KIRC患者预后的预测价值,构建诺莫图。采用Spearman相关性系数分析CDC25B mRNA表达水平与免疫检查点基因表达水平及免疫细胞浸润丰度的相关性。结果CDC25B mRNA在KIRC、乳腺浸润癌、膀胱尿路上皮癌、食管癌和肝细胞癌等多种癌症中表达上调,其表达水平与KIRC患者T分期、M分期、临床分期及病理分级相关(P<0.05)。与CDC25B mRNA低表达组相比,CDC25B mRNA高表达组患者的总生存期、疾病特异性生存期及无进展间隔期较短(P<0.05)。CDC25B mRNA表达水平诊断KIRC的曲线下面积为0.759。年龄、M分期、病理分级、CDC25B mRNA表达水平与KIRC患者总生存期相关(P<0.05),基于这些参数构建的诺莫图模型对KIRC患者1年、2年、3年总生存率的预测概率与实际观测概率有较好的一致性。CDC25B mRNA与CD274、PDCD1、CTLA4、LAG3、CD276等免疫检查点基因表达水平呈正相关,与KIRC组织中活化的CD4+T淋巴细胞、活化的CD8+T淋巴细胞、活化的B淋巴细胞、巨噬细胞、髓源性抑制细胞和Treg细胞浸润丰度呈正相关(P<0.05)。结论CDC25B mRNA在KIRC组织中显著上调,与患者不良预后有关,还与KIRC组织免疫细胞浸润有关,可以作为预测KIRC患者预后的独立因子。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 细胞分裂周期蛋白25b TCGA数据库 预后
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Al、Ti、B元素对ML25B螺栓钢淬透性及组织的影响
2
作者 余德明 张先鸣 +1 位作者 姜建鸿 张琴 《机电产品开发与创新》 2025年第1期157-160,共4页
GB/T 3098.1—2010、 GB/T 3098.23—2020标准,对机械性能8.8级以上的高强度螺栓材料,要求最大限度地提高淬硬性,增加有效的淬透性。ML25B是GB/T 6478—2015标准中的牌号,从淬火显微组织表明,Al和硼钢中的Ti将对钢的奥氏体晶粒度产生影... GB/T 3098.1—2010、 GB/T 3098.23—2020标准,对机械性能8.8级以上的高强度螺栓材料,要求最大限度地提高淬硬性,增加有效的淬透性。ML25B是GB/T 6478—2015标准中的牌号,从淬火显微组织表明,Al和硼钢中的Ti将对钢的奥氏体晶粒度产生影响,同时起细化晶粒的作用。钢中的添加Al质量分数控制在0.025%~0.035%;添加Ti质量分数在≥0.03%时,淬透性效果最佳。热轧线材可以直接拉拔和冷镦加工,不需要预先球化退火处理,用于制造8.8级D≤24mm螺栓和8级D≤30mm螺母,节约了紧固件的制造成本。 展开更多
关键词 ML25b 螺栓钢 热处理 淬透性 组织
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CyclinD1、细胞分裂周期蛋白C25B与胃癌的相关性 被引量：10
3
作者 王军 赵醒 +4 位作者 赵宇阳 赵杨 刘成一 申兴斌 李春辉 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第6期1456-1458,共3页
目的研究细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞分裂周期蛋白(CDC)25B与胃癌的相关性。方法收集胃癌及对应正常胃黏膜标本各42例,应用Western印迹及RT-PCR方法检测Cyclin D1,CDC25B在各组的表达情况,并结合临床资料进行分析。结果 Cyclin D1,CDC... 目的研究细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞分裂周期蛋白(CDC)25B与胃癌的相关性。方法收集胃癌及对应正常胃黏膜标本各42例,应用Western印迹及RT-PCR方法检测Cyclin D1,CDC25B在各组的表达情况,并结合临床资料进行分析。结果 Cyclin D1,CDC25B mRNA及蛋白在正常胃黏膜组织中的相对表达量均显著低于胃癌组织(P<0.05),且其表达在淋巴结转移阳性组均显著增高(P<0.05)。结论 Cyclin D1,CDC25B在胃癌中高表达,可能与胃癌的发生、发展及浸润转移有关。 展开更多
关键词 胃癌 CYCLIN D1 CDC25b WESTERN印迹 RT-PCR
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新型含咔唑环酰腙衍生物的合成及Cdc25B/PTP1B抑制活性评价 被引量：8
4
作者 李英俊 王思远 +5 位作者 靳焜 高立信 盛丽 张楠 刘季红 李佳 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第2期491-499,共9页
以咔唑和4-氰基氯化苄为初始原料,经多步反应合成出了一系列新型含咔唑基团的酰腙衍生物6,并利用IR、^1H NMR、^13C NMR和元素分析对其进行了结构表征.对目标化合物进行了Cdc25B/PTP1B抑制活性评价,结果显示,目标化合物6对Cdc25B/PTP1B... 以咔唑和4-氰基氯化苄为初始原料,经多步反应合成出了一系列新型含咔唑基团的酰腙衍生物6,并利用IR、^1H NMR、^13C NMR和元素分析对其进行了结构表征.对目标化合物进行了Cdc25B/PTP1B抑制活性评价,结果显示,目标化合物6对Cdc25B/PTP1B均具有较高的抑制活性,其中4-[(咔唑-9-基)甲基]-N'-(2-羟基-1-萘亚甲基)苯甲酰肼(6g)对Cdc25B和PTP1B的抑制活性最高,IC50值分别为(2.16±0.38)和(1.06±0.23)μg/mL.对化合物6g进行分子对接的研究结果表明,6g能与Cdc25B/PTP1B酶形成稳定的复合物,形成氢键和疏水等相互作用. 展开更多
关键词 酰腙 咔唑 合成 Cdc25b和PTP1B抑制剂 分子对接
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CyclinD1、CDC25B和p27在胃癌组织中的表达 被引量：7
5
作者 王军 赵醒 +4 位作者 赵宇阳 赵杨 刘成一 申兴斌 李春辉 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第10期1495-1498,共4页
目的探讨Cyclin D1、CDC25B和p27与胃腺癌发生发展及预后的关系。方法应用免疫组织化学法及Western blot方法检测42例胃腺癌组织,42例癌旁组织及42例正常胃黏膜组织中Cyclin D1、CDC25B和p27的表达,分析各蛋白与临床病理学指标之间的关... 目的探讨Cyclin D1、CDC25B和p27与胃腺癌发生发展及预后的关系。方法应用免疫组织化学法及Western blot方法检测42例胃腺癌组织,42例癌旁组织及42例正常胃黏膜组织中Cyclin D1、CDC25B和p27的表达,分析各蛋白与临床病理学指标之间的关系及各指标之间的相互关系。结果 Cyclin D1在正常黏膜、癌旁及胃腺癌组织中表达差异无统计学意义(P>0.05),CDC25B在胃腺癌组织表达与正常黏膜、癌旁组织表达比较明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),p27在胃腺癌组织中表达与正常黏膜、癌旁组织表达比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Cyclin D1及CDC25B在胃癌组织的表达与淋巴结转移相关,p27在胃癌组织的表达与组织学分级、浸润深度及淋巴结转移均相关,Cyclin D1、CDC25B在胃癌组织中表达呈正相关(r=0.392,P<0.05),Cyclin D1与p27表达无显著相关性(r=-0.062,P>0.05)。结论联合检测Cyclin D1、CDC25B和p27基因蛋白表达有望作为评估胃癌生物学行为和预后的新的参考指标。 展开更多
关键词 胃癌 CYCLIND1 CDC25b P27 免疫组织化学 WESTERN BLOT
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蛋白激酶A对CDC25B蛋白S149与S321位点磷酸化的修饰抑制小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂 被引量：4
6
作者 肖建英 刘超 +1 位作者 孙小涵 于秉治 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期33-40,共8页
在小鼠1-细胞期受精卵,蛋白激酶A（protein kinase A,PKA）可通过磷酸化细胞分裂周期25B（cell division cycle25B,CDC25B）的321位Ser引起受精卵分裂阻滞。本文旨在研究PKA对CDC25B149位点Ser的磷酸化对小鼠受精卵发育的影响,及其与32... 在小鼠1-细胞期受精卵,蛋白激酶A（protein kinase A,PKA）可通过磷酸化细胞分裂周期25B（cell division cycle25B,CDC25B）的321位Ser引起受精卵分裂阻滞。本文旨在研究PKA对CDC25B149位点Ser的磷酸化对小鼠受精卵发育的影响,及其与321位点的关系。质粒pBSK-CDC25B-WT（野生型）、pBSK-CDC25B-S149A（149位Ser突变成Ala）、pBSK-CDC25B-S321A（321位Ser突变成Ala）、pBSK-CDC25B-S149A/S321A（149位和321位Ser联合突变成Ala）体外转录成mRNAs;显微注射入小鼠S期受精卵中,在PKA抑制剂H-89预处理的M16培养基中培养,观察其对受精卵发育、有丝分裂成熟促进因子（matu-ration promoting factor,MPF）活性及CDC2-Tyr15磷酸化状态的影响。结果显示,H-89呈剂量（0~50μmol/L）依赖性的方式加速小鼠受精卵卵裂。然后选择卵裂率接近100%、H-89（40μmol/L）培养的小鼠受精卵,与对照组相比,CDC25B各种mRNAs注射组受精卵卵裂率明显增高,MPF活性提前达到高峰;CDC2-Tyr15磷酸化状态和MPF活性变化相一致,以上结果说明,CDC25B蛋白的149位Ser也是PKA在体内调控CDC25B的重要靶点。因此在小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程中,PKA对小鼠CDC25B蛋白S149位点与S321位点的磷酸化修饰可能是控制受精卵G2/M转换的重要方式。 展开更多
关键词 细胞分裂周期25b 蛋白激酶A 有丝分裂成熟促进因子 H-89 小鼠受精卵
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新型酰基硫脲衍生物的合成及细胞分裂周期25B磷酸酶和蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制活性研究 被引量：5
7
作者 李英俊 王思远 +6 位作者 靳焜 高立信 盛丽 张楠 杨凯栋 赵月 李佳 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1242-1250,共9页
采用超声波辐射与固-液相转移催化联用技术合成出了一系列新型含咔唑基团的酰基硫脲衍生物3,利用IR、~1H NMR、^(13)C NMR和元素分析对其进行了结构表征.该合成方法具有反应时间短、操作简便、产率高等优点.对所合成的目标化合物进行了... 采用超声波辐射与固-液相转移催化联用技术合成出了一系列新型含咔唑基团的酰基硫脲衍生物3,利用IR、~1H NMR、^(13)C NMR和元素分析对其进行了结构表征.该合成方法具有反应时间短、操作简便、产率高等优点.对所合成的目标化合物进行了细胞分裂周期25B磷酸酶(Cdc25B)和蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)抑制活性筛选,实验结果显示,目标化合物3对Cdc25B均具有良好的抑制活性,部分化合物对PTP1B也表现出良好的抑制活性.其中1-(4-硝基苯甲酰基)-3-(9-乙基-咔唑-3-基)硫脲(3n)对Cdc25B的抑制活性最高[IC50=(0.49±0.12)mg/mL],1-(2-硝基苯甲酰基)-3-(9-乙基-咔唑-3-基)硫脲(3l)对PTP1B的抑制活性最高[IC50=(3.59±1.15)mg/m L].值得注意的是,化合物3n对Cdc25B和PTP1B均具有较高的抑制活性.分子对接的初步研究结果揭示了此类抑制剂的结构-活性关系.这些活性目标化合物是潜在的Cdc25B和PTP1B抑制剂,在癌症和糖尿病治疗方面具有很好的应用前景. 展开更多
关键词 酰基硫脲 咔唑 合成 Cdc25b和PTP1B抑制剂 分子对接
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新型3,6-二取代三唑并噻二唑衍生物的合成及细胞分裂周期25B磷酸酶和蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制活性研究 被引量：5
8
作者 李英俊 李继阳 +6 位作者 彭立娜 高立信 靳焜 盛丽 张楠 王思远 李佳 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第2期485-495,共11页
以邻苯二胺和一氯乙酸为初始原料,经多步反应,合成了一系列新型含苯并咪唑环和芳磺酰基的3,6-二取代三唑并噻二唑衍生物7a^7y.利用~1H NMR、IR和元素分析对新的中间体化合物3、4、6及目标产物7进行了结构表征.对所合成的目标化合物进行... 以邻苯二胺和一氯乙酸为初始原料,经多步反应,合成了一系列新型含苯并咪唑环和芳磺酰基的3,6-二取代三唑并噻二唑衍生物7a^7y.利用~1H NMR、IR和元素分析对新的中间体化合物3、4、6及目标产物7进行了结构表征.对所合成的目标化合物进行了细胞分裂周期25B磷酸酶(Cdc25B)和蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)抑制活性筛选,实验结果显示,部分目标化合物对Cdc25B和PTP1B显示出良好的抑制活性,其中目标化合物7d对Cdc25B的抑制活性最高[IC50=(7.72±0.73)mg/m L],7u对PTP1B的抑制活性最高[IC50=(3.31±0.57)mg/m L].值得注意的是,化合物7b、7d、7l、7t和7u对Cdc25B和PTP1B均具有抑制活性.这些活性的目标化合物是潜在的Cdc25B和PTP1B抑制剂,在癌症和糖尿病治疗方面具有很好的应用前景. 展开更多
关键词 三唑并噻二唑 苯并咪唑 芳磺酰基 合成 Cdc25b和PTP1B抑制剂
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CDC25B与恶性肿瘤研究进展 被引量：11
9
作者 成静 付强 伍钢 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第11期872-875,共4页
CDC25(A、B和C)是双特异性蛋白磷酸酶,在细胞周期中充当重要的角色。CDC25B是CDC25激酶家族的最重要成员,贯穿细胞周期的各阶段,在不同时期存在于细胞内不同的位置,其在细胞周期各期转换中起关键作用,在细胞有丝分裂过程中发挥重要作用... CDC25(A、B和C)是双特异性蛋白磷酸酶,在细胞周期中充当重要的角色。CDC25B是CDC25激酶家族的最重要成员,贯穿细胞周期的各阶段,在不同时期存在于细胞内不同的位置,其在细胞周期各期转换中起关键作用,在细胞有丝分裂过程中发挥重要作用。肩负激活CDK1(cyclin dependent kinases-1)-cyclinB的重大责任,是早期有丝分裂的启动因子,同时也是卵母细胞恢复减数分裂的核心调控因子。CDC25B是磷酸化蛋白,其活性的调节是通过磷酸化和去磷酸化进行的,其编码基因定位于20p13,编码酪氨酸磷酸酶,已被认为是一种新的癌基因。过量CDC25B可促进肿瘤生长和细胞恶性转化。其基因过度表达可能发生在恶性肿瘤的早期阶段,进而引起CDC25B基因表达异常紊乱,发生肿瘤改变。CDC25B在多种肿瘤中如结肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌和非霍奇金氏淋巴瘤等均有过度表达,并且与患者预后相关,为恶性肿瘤预后不良的危险因素。CDC25B基因已成为恶性肿瘤治疗的新靶点,近年来已有研究并合成了CDC25B抑制剂,有望成为防治恶性肿瘤的可行途径之一。 展开更多
关键词 肿瘤 CDC25b磷酸酶 细胞周期 综述文献
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14-3-3ε和Cdc25B在小鼠卵母细胞生发泡期阻滞中的作用 被引量：4
10
作者 孟峻 侯艳军 +2 位作者 张永梅 呼格吉乐 韩艳秋 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期215-220,共6页
目的:研究14-3-3ε和Cdc25B对小鼠卵母细胞生发泡(GV)期阻滞作用的影响,为阐明蛋白激酶A/Cdc25B/14-3-3ε通路在小鼠卵母细胞GV期阻滞中发育调控机制奠定基础。方法:在体外将表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA14-3-3ε、pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-WT、... 目的:研究14-3-3ε和Cdc25B对小鼠卵母细胞生发泡(GV)期阻滞作用的影响,为阐明蛋白激酶A/Cdc25B/14-3-3ε通路在小鼠卵母细胞GV期阻滞中发育调控机制奠定基础。方法:在体外将表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA14-3-3ε、pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-WT、pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-S321A和pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-S321D转录成mRNA。超排卵方法获得小鼠GV期卵母细胞,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组、14-3-3εmRNA单独注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-WT(野生型)mRNA共注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321D(模拟磷酸化型)mRNA共注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321A(突变型)mRNA共注射组,收集各组母卵细胞后采用Western blotting法检测外源性14-3-3ε和Cdc25B蛋白表达及Cdc2-Tyr15的磷酸化状态;相差显微镜观察卵母细胞的形态学变化并计数生发泡破裂(GVBD)率。结果:未注射组、TE缓冲液注射组、14-3-3εmRNA单独注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-WT(野生型)mRNA共注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321D(模拟磷酸化型)mRNA共注射组在显微注射后20h均未发生GVBD(P>0.05);14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321A(突变型)mRNA共注射组在显微注射后1、2和3h卵母细胞的GVBD率分别为(5.00±0.68)%、(62.00±3.56)%和(100.00±0.00)%,显微注射后20h到达第2次减数分裂中期(MII)的比例为(79.00±2.80)%,与未注射组和TE缓冲液注射组比较,GVBD率和到达MII的比例均显著升高(P<0.01)。结论:14-3-3ε通过Cdc25B的321位丝氨酸磷酸化和脱磷酸化调控卵母细胞由GV期向GVBD的过渡。 展开更多
关键词 14-3-3ε CDC25b 卵母细胞 生发泡 生发泡破裂 显微注射
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CDC25B在肾癌细胞中的作用 被引量：8
11
作者 于秀月 孔垂泽 +1 位作者 张哲 李振华 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第8期1782-1785,共4页
目的:探讨CDC25B在肾癌组织和细胞中的表达状况及对肾癌细胞凋亡、运动以及侵袭力的影响。方法:免疫组化检测肾癌组织中CDC25B的表达,Western blot和RT-PCR检测CDC25B蛋白在肾癌769-P和ACHN细胞中的表达。挑选表达量大的细胞系转染CDC25... 目的:探讨CDC25B在肾癌组织和细胞中的表达状况及对肾癌细胞凋亡、运动以及侵袭力的影响。方法:免疫组化检测肾癌组织中CDC25B的表达,Western blot和RT-PCR检测CDC25B蛋白在肾癌769-P和ACHN细胞中的表达。挑选表达量大的细胞系转染CDC25B shRNA。MTT法检测细胞增殖能力。Annexin V-FITC/PI-FCM实验检测肾癌细胞凋亡。Transwell检测肾癌细胞侵袭力。结果:CDC25B在肾癌组织中高表达。CDC25B在肾癌769-P和ACHN细胞中均表达,ACHN的恶性度高于769-P,CDC25B在ACHN中表达高于769-P。CDC25B蛋白被干扰后,随着时间的延长,肾癌ACHN细胞的增殖能力显著降低,各时间组与浓度组之间差异具有统计学意义。CDC25B蛋白被干扰后,肾癌ACHN细胞的凋亡增加。体外运动减弱。小室侵袭实验表明,干扰组的细胞数低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。干扰后降低了肿瘤细胞的侵袭能力。结论:CDC25B在肾癌中的表现为原癌基因的作用,CDC25B与肾癌的恶性程度呈正相关。CDC25B可能成为肾癌潜在的诊断标记和新的判定肿瘤恶性度的指标。 展开更多
关键词 CDC25b 肾细胞癌 ACHN 769-P
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食管癌组织CDC25B的表达与临床病理参数及放疗敏感性的关系研究 被引量：3
12
作者 王亮 王明 +3 位作者 李兴德 朱中成 何翔 刘春燕 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第19期3761-3765,共5页
目的:探讨食管癌组织中细胞分裂周期蛋白25B(CDC25B)表达特点,分析其与食管癌临床病理参数和放疗敏感性的关系。方法:选择2015年1月至2018年1月我院收集的60例食管癌患者癌组织、癌旁组织的石蜡标本,采用免疫组化法检测食管癌组织和癌... 目的:探讨食管癌组织中细胞分裂周期蛋白25B(CDC25B)表达特点,分析其与食管癌临床病理参数和放疗敏感性的关系。方法:选择2015年1月至2018年1月我院收集的60例食管癌患者癌组织、癌旁组织的石蜡标本,采用免疫组化法检测食管癌组织和癌旁组织中CDC25B表达,分析CDC25B表达与食管癌临床病理参数的关系。所有患者均接受放疗或放化疗治疗,观察不同疗效患者CDC25B表达差异,分析CDC25B对食管癌放疗敏感性的预测价值。结果:食管癌组织中CDC25B阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。CDC25B阳性表达与食管癌分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。放疗敏感组CDC25B阳性表达率低于放疗抗拒组(P<0.05)。CDC25B预测食管癌放疗敏感性的曲线下面积(AUC)为0.718(95%CI:0.580~0.856),灵敏度为60%,特异度为68%。结论:食管癌患者CDC25B表达上调,CDC25B阳性表达与食管癌分化程度、TNM分期、淋巴结转移恶性侵袭行为有关,CDC25B可作为食管癌放疗敏感性评估的辅助指标。 展开更多
关键词 食管癌 细胞分裂周期蛋白25b 临床病理参数 放疗 敏感 抗拒
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胃癌组织中CyclinD1、CDC25B的表达变化及意义 被引量：3
13
作者 王军 赵醒 +4 位作者 赵宇阳 赵杨 刘成一 申兴斌 李春辉 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第25期49-51,共3页
目的观察胃癌组织中Cyclin D1、CDC25B mRNA及蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法收集手术切除胃癌组织标本42例份,同时取距肿瘤边缘>5 cm处作为正常黏膜组织。采用RT-PCR法检测胃癌及正常胃黏膜组织中Cyclin D1、CDC25B mRNA表达,采... 目的观察胃癌组织中Cyclin D1、CDC25B mRNA及蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法收集手术切除胃癌组织标本42例份,同时取距肿瘤边缘>5 cm处作为正常黏膜组织。采用RT-PCR法检测胃癌及正常胃黏膜组织中Cyclin D1、CDC25B mRNA表达,采用Western blotting法检测胃癌及正常胃黏膜组织中Cyclin D1、CDC25B蛋白表达,分析Cyclin D1、CDC25B表达与胃癌患者临床病理特征的关系。结果 Cyclin D1、CDC25B mRNA及蛋白在正常胃黏膜组织中的相对表达量均显著低于胃癌组织(P均<0.05),Cyclin D1、CDC25B蛋白表达与胃癌淋巴结转移有关(P均<0.05),胃癌组织中Cyclin D1、CDC25B蛋白表达呈正相关(r=0.513,P<0.05)。结论胃癌组织中Cyclin D1、CDC25B呈高表达,且与胃癌淋巴结转移有关;检测二者水平有助于胃癌预后判断。 展开更多
关键词 胃肿瘤 CYCLIND1基因 CDC25b基因
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CDC25B蛋白亚细胞定位调控小鼠1-细胞期受精卵发育 被引量：3
14
作者 肖建英 刘超 +1 位作者 孙小涵 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期33-41,共9页
为探讨小鼠细胞分裂周期25B(CDC25B)蛋白149位丝氨酸磷酸化状态对小鼠1-细胞期受精卵中CDC25B的亚细胞定位和发育的影响,应用定制的CDC25B-pS149位的磷酸化和非磷酸化抗体检测小鼠1-细胞期受精卵各细胞时期的磷酸化和非磷酸化状态;应用... 为探讨小鼠细胞分裂周期25B(CDC25B)蛋白149位丝氨酸磷酸化状态对小鼠1-细胞期受精卵中CDC25B的亚细胞定位和发育的影响,应用定制的CDC25B-pS149位的磷酸化和非磷酸化抗体检测小鼠1-细胞期受精卵各细胞时期的磷酸化和非磷酸化状态;应用免疫荧光观察各期受精卵中CDC25B蛋白的定位情况;将质粒pEGFP-CDC25B-WT、pEGFP-CDC25B-S149A和pEGFP-CDC25B-S149D融合质粒及空载体质粒显微注射入G1期受精卵中,观察不同显微注射组小鼠1-细胞期受精卵中外源性CDC25B蛋白亚细胞定位.结果显示,CDC25B-S149位丝氨酸在G1和S期被磷酸化,在G2和M期去磷酸化.1-细胞期受精卵从G2向M期的转换过程中,发生了CDC25B向细胞核区的移位,到2-细胞初期,部分CDC25B蛋白又从细胞核回到细胞浆.实验结果提示,小鼠1-细胞期受精卵G2/M期转换过程中,CDC25B的S149位点磷酸化修饰可能是对CDC25B细胞内定位及其活性的精确调节方式. 展开更多
关键词 细胞分裂周期25b 亚细胞定位 有丝分裂 点突变 小鼠受精卵
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3,6-二取代三唑并噻二唑衍生物的合成及其对细胞分裂周期25B磷酸酶和蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制活性评价 被引量：2
15
作者 李英俊 杨鸿境 +6 位作者 曹欣 高立信 靳焜 盛丽 刘季红 刘雪洁 李佳 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期994-1002,共9页
合成出了一系列含苯并咪唑/芳氧甲基骨架的3,6-二取代三唑并噻二唑衍生物3a^3l,其结构经傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)、核磁共振波谱仪(NMR)和元素分析得以确认。评价了它们对细胞分裂周期25B磷酸酶(Cdc25B)/蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)... 合成出了一系列含苯并咪唑/芳氧甲基骨架的3,6-二取代三唑并噻二唑衍生物3a^3l,其结构经傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)、核磁共振波谱仪(NMR)和元素分析得以确认。评价了它们对细胞分裂周期25B磷酸酶(Cdc25B)/蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的抑制活性,讨论了构效关系。生物活性测试结果显示,化合物3a对Cdc25B和PTP1B的抑制活性最高,其半数抑制浓度(IC 50)值分别为(0.46±0.02)μg/mL和(1.77±0.40)μg/mL。所得研究结果为开发新型Cdc25B/PTP1B抑制剂提供了参考依据。 展开更多
关键词 三唑并噻二唑 苯并咪唑 芳氧乙酸 细胞分裂周期25b磷酸酶抑制剂 蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制剂
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dbcAMP通过Cdc25B蛋白调控小鼠1-细胞期受精卵发育 被引量：3
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作者 刘超 肖建英 +1 位作者 孙小涵 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期925-932,共8页
为了研究PKA激活剂dbcAMP通过调控小鼠Cdc25B蛋白S149和S321位点磷酸化状态影响小鼠1-细胞期受精卵的发育,将质粒pBSK-Cdc25B-WT、pBSK-Cdc25B-S149A、pBSK-Cdc25B-S321A和pBSK-Cdc25B-S149A/S321A体外转录成mRNA;显微注射入S期受精卵中... 为了研究PKA激活剂dbcAMP通过调控小鼠Cdc25B蛋白S149和S321位点磷酸化状态影响小鼠1-细胞期受精卵的发育,将质粒pBSK-Cdc25B-WT、pBSK-Cdc25B-S149A、pBSK-Cdc25B-S321A和pBSK-Cdc25B-S149A/S321A体外转录成mRNA;显微注射入S期受精卵中,在2 mmol/LdbcAMP的M16培养基中培养,观察其对受精卵发育、MPF活性及CDC2-pTyr15磷酸化状态的影响.结果显示,在有dbcAMP存在时,各组受精卵卵裂时间延迟,但Cdc25B-S/A-mRNAs注射组受精卵卵裂率明显高于Cdc25B-WT-mRNA注射组,MPF活性提前达到高峰;CDC2-pTyr15磷酸化状态和MPF活性变化相一致.因此,在小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程中,PKA对小鼠Cdc25B蛋白S149位点与S321位点的磷酸化修饰是控制受精卵G2/M转换的重要方式. 展开更多
关键词 细胞分裂周期25b蛋白 蛋白激酶A 有丝分裂促进因子 二丁酰环磷酸腺苷 小鼠受精卵
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小鼠Cdc25B融合蛋白构建和表达 被引量：3
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作者 赵鸿梅 滕秋艳 +1 位作者 张哲 于秉治 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期976-977,共2页
目的研究小鼠N末端缺失286氨基酸的野生型Cdc25B原核表达载体的构建和表达。方法应用Primer5.0软件分析并设计小鼠Cdc25B5′及3′端引物(N末端缺失286氨基酶),化学合成并用聚合酶链反就(PCR)方法扩增,经限制性内切酶酶切后连接原核表达... 目的研究小鼠N末端缺失286氨基酸的野生型Cdc25B原核表达载体的构建和表达。方法应用Primer5.0软件分析并设计小鼠Cdc25B5′及3′端引物(N末端缺失286氨基酶),化学合成并用聚合酶链反就(PCR)方法扩增,经限制性内切酶酶切后连接原核表达载体PGEX4T-2,构建成PGEX4T-2-Cdc25B融合表达载体,转化大肠埃希菌BL21后,通过异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导进行目的蛋白表达。结果通过双酶切、电泳分析及测序证明成功构建了Cdc25B融合表达载体,融合蛋白产物经蛋白印迹(Westernblot)显示,相对分子量为53KD的蛋白谱带,与预期一致。结论成功构建并表达了Cdc25B-N末端缺失的基因,并在原核细胞中获得较高水平的表达,为近一步研究Cdc25B的功能提供基础依据。 展开更多
关键词 CDC25b 基因表达 谷胱甘肽转移酶(GST) 聚合酶链式反应
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CDC25B在大肠肿瘤中的表达及意义 被引量：2
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作者 刘光军 张丹 +5 位作者 张力 王继红 姜彦多 高红 刘丹 金成兰 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第5期1057-1060,共4页
目的:探讨CDC25B(cell division cycle 25B,细胞分裂周期蛋白25B)在大肠肿瘤中的表达及临床意义. 方法:应用半定量的RT-PCR及免疫组化染色(S-P法)方法检测该基因在大肠癌(RT-PCR法,n=24;S-P法,n=168), 大肠腺瘤(RT-PCR法,n=62;S-P法,n=... 目的:探讨CDC25B(cell division cycle 25B,细胞分裂周期蛋白25B)在大肠肿瘤中的表达及临床意义. 方法:应用半定量的RT-PCR及免疫组化染色(S-P法)方法检测该基因在大肠癌(RT-PCR法,n=24;S-P法,n=168), 大肠腺瘤(RT-PCR法,n=62;S-P法,n=25)及大肠正常黏膜(RT-PCR法,n=10;S-P法,n=20)中的表达. 结果:CDC25B mRNA在大肠癌及大肠腺瘤中的相对含量明显高于正常大肠黏膜(1.41±0.07,1.32±0.17 vs 0.62±0.02,P<0.01),在大肠腺瘤伴轻-中-重度不典型增生组织中的相对含量逐渐增高(1.25±0.21,1.36±0.19和1.40±0.07,P<0.01);CDC25B基因翻译蛋白在正常大肠黏膜、腺瘤中未见表达,在大肠癌中以细胞核表达为主, 其表达与大肠癌有无远处脏器转移相关(2/46 vs 14/106, P<0.05);经随访发现CDC25B蛋白阳性表达者,5 a生存率明显降低(25/31 VS 42/82,P<0.05). 结论:CDC25B可能参与了大肠腺瘤到大肠癌的转变过程, 其在大肠癌发展中可能起一定作用,为大肠癌预后不良的危险因素. 展开更多
关键词 CDC25b 大肠肿瘤 基因表达 大肠黏膜
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小鼠受精卵微注射Cdc25b mRNA可提高卵裂率并促进受精卵发育 被引量：3
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作者 崔城 张哲 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期69-77,共9页
为了观察Cdc25B蛋白及PKA/Cdc25B信号途径在小鼠受精卵发育中的作用,将突变型和野生型Cdc25b转录成mRNA,显微注射到小鼠受精卵中,放入含有或不含有dbcAMP的M16中,相差显微镜下观察受精卵卵裂情况;用蛋白激酶活性测定方法检测MPF的活性;... 为了观察Cdc25B蛋白及PKA/Cdc25B信号途径在小鼠受精卵发育中的作用,将突变型和野生型Cdc25b转录成mRNA,显微注射到小鼠受精卵中,放入含有或不含有dbcAMP的M16中,相差显微镜下观察受精卵卵裂情况;用蛋白激酶活性测定方法检测MPF的活性;利用Western印迹检测Cdc2-Tyr15的磷酸化状态.结果显示,未加dbcAMP的Cdc25b-S321A mRNA注射组与Cdc25b-WT组相比,能够提前使受精卵发生G2/M期转变,导致卵裂,并明显提高卵裂率;MPF的活性测定和Cdc2-Tyr15磷酸化状态的检测结果也显示,Cdc25b-S321A组先于Cdc25b-WT组提前激活MPF.此外,Cdc25b-S321A mRNA注射组可以有效恢复由PKA引起的受精卵G2期阻滞,显著增加卵裂率;MPF的活性测定和Cdc2-Tyr15磷酸化状态的检测结果也显示,在PKA持续激活的情况下,对比于Cdc25b-WT组,Cdc25b-S321A组提前激活MPF.因此,在小鼠受精卵发育过程中PKA主要通过磷酸化Cdc25B的321位丝氨酸,从而调控MPF的激活与失活来控制有丝分裂进程. 展开更多
关键词 小鼠受精卵 蛋白激酶A 细胞分裂周期25b 有丝分裂促进因子
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CDC25B蛋白S149/S321位点突变对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响 被引量：2
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作者 刘超 肖建英 +2 位作者 孙小涵 徐晓燕 于秉治 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2012年第2期73-80,共8页
目的:研究小鼠CDC25B蛋白S149位点对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响及S149位点与S321位点的关系。方法:构建pBSK-CDC25B-S149A和pBSK-CDC25B-S149A/S321A突变体,体外转录成mRNA;采用小鼠超排卵技术取G1期受精卵,显微注射CDC25B-WT-mRNA... 目的:研究小鼠CDC25B蛋白S149位点对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响及S149位点与S321位点的关系。方法:构建pBSK-CDC25B-S149A和pBSK-CDC25B-S149A/S321A突变体,体外转录成mRNA;采用小鼠超排卵技术取G1期受精卵,显微注射CDC25B-WT-mRNA和突变CDC25B-S149A-mRNA、CDC25B-S149A/S321A-mRNA,观察其对受精卵发育、M期促进因子(MPF)活性及CDC2-pTyr15磷酸化状态的影响。结果:CDC25B-S149A-mRNA注射组受精卵卵裂率明显高于CDC25B-WT-mRNA注射组,MPF活性提前1 h达到高峰;而联合突变体CDC25B-S149A/S321A-mRNA注射组卵裂率又显著高于CDC25B-S149A-mRNA注射组。结论:在小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程中,蛋白激酶A(PKA)对小鼠CDC25B蛋白S149位点的磷酸化修饰是控制受精卵G2/M转换的重要方式,并且S149位点与S321位点可能具有协同作用。 展开更多
关键词 CDC25b蛋白 蛋白激酶A(PKA) M期促进因子(MPF) 小鼠受精卵
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