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外泌体源性miR-23a-3p介导ITGB8/TGF-β1信号通路改善矽肺大鼠肺纤维化
1
作者 陆芳 徐宁 +1 位作者 张峰 蒋贝尔 《工业卫生与职业病》 2026年第1期14-19,33,共7页
目的研究外泌体源性miR-23a-3p对矽肺大鼠肺纤维化的影响。方法50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、外泌体组、外泌体+抑制剂对照组和外泌体+miR-23a-3p抑制剂组,每组10只。通过口鼻暴露法吸入二氧化硅建立矽肺大鼠模型。RT-qPCR检测骨... 目的研究外泌体源性miR-23a-3p对矽肺大鼠肺纤维化的影响。方法50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、外泌体组、外泌体+抑制剂对照组和外泌体+miR-23a-3p抑制剂组,每组10只。通过口鼻暴露法吸入二氧化硅建立矽肺大鼠模型。RT-qPCR检测骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-Exos)中miR-23a-3p表达;采用HE染色和Masson染色评估肺组织病理形态变化和纤维化;采用免疫荧光检测肺组织Col-Ⅰ和Col-Ⅲ表达;Western blot用于检测BMSCs-Exos中CD9、CD63、TSG101和Calnexin蛋白以及肺组织中ITGB8和TGF-β1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验用于验证miR-23a-3p与ITGB8结合。结果BMSCsExos改善矽肺大鼠肺损伤和肺纤维化,抑制miR-23a-3p后BMSCs-Exos处理的矽肺大鼠肺损伤和肺纤维化加重。与对照组(28.84±2.84、16.82±1.52、0.32±0.04、0.30±0.03)相比,模型组(175.92±9.84、144.28±13.92、0.63±0.05、0.67±0.08)大鼠肺组织中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、ITGB8和TGF-β1蛋白表达显著升高(F=81.623,62.561,46.675,41.942,P<0.05);与模型组相比,外泌体组(68.92±5.92、59.82±6.19、0.42±0.05、0.46±0.04)和外泌体+抑制剂对照组(75.15±9.82、52.91±6.21、0.42±0.04、0.48±0.06)大鼠肺组织中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、ITGB8和TGF-β1蛋白表达显著降低(F=81.623,62.561,46.675,41.942,P<0.05;);与外泌体组或外泌体+抑制剂对照组相比,外泌体+miR-23a-3p抑制剂组(132.82±9.85、11.94±10.62、0.54±0.04、0.58±0.06)大鼠肺组织中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、ITGB8和TGF-β1蛋白表达升高(P<0.05)。与mimics NC+ITGB8-WT组相比,miR-23a-3p mimics+ITGB8-WT组HEK-293T细胞的相对荧光素酶活性显著降低(F=36.723,P<0.05);与mimics NC+ITGB8-MUT组相比,miR-23a-3p mimics+ITGB8-MUT组HEK-293T细胞的相对荧光素酶活性无显著差异(P>0.05)。结论外泌体源性miR-23a-3p可能通过抑制ITGB8/TGF-β1信号通路改善矽肺大鼠肺纤维化。 展开更多
关键词 矽肺 外泌体 miR-23a-3p 肺纤维化
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西格列汀联合驻春胶囊治疗糖尿病性骨质疏松的疗效及其对血清网膜素-1、IGF-1、miRNA-23a水平的影响 被引量：1
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作者 卢红霞 邢茜 +1 位作者 孙彦平 李承锦 《临床和实验医学杂志》 2025年第13期1410-1414,共5页
目的分析西格列汀联合驻春胶囊治疗糖尿病性骨质疏松(DOP)的疗效,以及其对患者血清网膜素-1、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、微小核糖核酸-23a(miRNA-23a)水平的影响。方法回顾性收集2022年10月至2024年10月期间河北省第七人民医院收治的10... 目的分析西格列汀联合驻春胶囊治疗糖尿病性骨质疏松(DOP)的疗效,以及其对患者血清网膜素-1、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、微小核糖核酸-23a(miRNA-23a)水平的影响。方法回顾性收集2022年10月至2024年10月期间河北省第七人民医院收治的102例DOP患者的资料,根据患者的入院时间将其分为对照组(n=49)和联合组(n=53)。对照组采用常规西药治疗,联合组采用西格列汀联合驻春胶囊治疗。对比两组疗效、糖脂代谢[空腹血糖、糖化血红蛋白(GHb)、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、腰椎骨密度、骨钙素以及血清网膜素-1、IGF-1、miRNA-23a水平。结果联合组总有效率为92.45%,高于对照组(77.55%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,两组空腹血糖、GHb、总胆固醇、LDL-C水平均较治疗前明显下降,且联合组空腹血糖、GHb、总胆固醇、LDL-C水平分别为(6.57±1.15)mmol/L、(6.34±1.62)%、(4.65±0.73)mmol/L、(2.24±0.57)mmol/L,均低于对照组[(7.24±1.22)mmol/L、(7.15±2.01)%、(5.21±0.84)mmol/L、(2.61±0.68)mmol/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,两组腰椎骨密度、骨钙素水平均较治疗前明显升高,且联合组腰椎骨密度、骨钙素水平分别为(0.92±0.07)g/cm^(2)、(17.87±3.25)ng/mL,均高于对照组[(0.87±0.08)g/cm^(2)、(15.93±3.04)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,两组血清网膜素-1、IGF-1水平均较治疗前明显上升,miRNA-23a水平均较治疗前下降,且联合组血清网膜素-1、IGF-1水平分别为(38.92±4.05)μg/L、(206.48±22.54)ng/mL,均高于对照组[(36.76±4.12)μg/L、(195.31±21.71)ng/mL],联合组miRNA-23a水平为1.02±0.26,低于对照组(1.15±0.35),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论DOP患者应用西格列汀联合驻春胶囊治疗能调节其糖脂和骨代谢,改善骨密度,上调血清网膜素-1、IGF-1并降低miRNA-23a水平,提升临床疗效。 展开更多
关键词 糖尿病 骨质疏松 西格列汀 驻春胶囊 网膜素-1 胰岛素样生长因子1 微小RNA-23a
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LINC00261通过靶向miR-23a-3p/ZNF292轴抑制食管鳞状细胞癌的增殖、侵袭与转移
3
作者 米源 李旭哲 +4 位作者 王占鹏 刘延杰 宋春涛 王澜涛 王雷 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第10期2118-2125,共8页
目的探讨长链非编码RNA LINC00261对食管鳞状细胞的增殖、侵袭及转移等生物学行为的影响。方法通过GEO数据库中GSE149612数据集分析食管鳞状细胞癌中的差异分子。收集临床食管鳞状细胞癌及正常食管组织样本及多种食管鳞状细胞癌细胞系... 目的探讨长链非编码RNA LINC00261对食管鳞状细胞的增殖、侵袭及转移等生物学行为的影响。方法通过GEO数据库中GSE149612数据集分析食管鳞状细胞癌中的差异分子。收集临床食管鳞状细胞癌及正常食管组织样本及多种食管鳞状细胞癌细胞系细胞和正常食管上皮细胞HEEC细胞,通过PCR技术检测LINC00261的表达变化。过表达LINC00261再分为pcDNA组和pcDNA-LINC00261组,CCK-8、克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell和流式细胞术分析其对细胞侵袭转移和凋亡的影响。ENCORI等相关生物信息学网站对LINC00261的靶点进行预测,双荧光素酶实验及Western blotting实验进行验证,裸鼠皮下移植瘤实验验证了LINC00261对食管鳞状细胞癌的影响。结果LINC00261在食管鳞状细胞癌中显著低表达,并且在临床食管鳞状细胞癌样本及细胞系中同样表达量明显降低(P<0.05);通过过表达LINC00261,发现其明显抑制了食管鳞状细胞癌的增殖、侵袭和转移并促进了肿瘤细胞的凋亡(P<0.05)。通过生物信息学网站的预测和双荧光素酶报告基因测定,验证了LINC00261靶向miR-23a-3p/ZNF292的关系。裸鼠皮下移植瘤实验发现通过过表达LINC00261可以明显抑制食管鳞状细胞癌的增殖和转移(P<0.0001)。结论LINC00261可以通过靶向miR-23a-3p/ZNF292抑制人食管鳞状细胞癌的增殖、侵袭和转移,为食管鳞状细胞癌的治疗提供新的依据。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 LINC00261 miR-23a-3p ZNF292
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外泌体传递lncRNA RPL23AP82促进胰腺导管腺癌吉西他滨耐药 被引量：1
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作者 孙运鹏 吴欢欢 +3 位作者 庄磊 陈浩然 徐博 黄侠鸣 《武汉大学学报(医学版)》 2025年第7期850-856,905,共8页
目的:探究外泌体传递lncRNA RPL23AP82促进胰腺导管腺癌(PDAC)吉西他滨(GEM)耐药。方法:(1)构建lncRNA RPL23AP82过表达载体并转染至SW1990细胞中后用GEM进行干扰、分组,对比细胞增殖活性、细胞凋亡。(2)SW1990细胞系转染shRNA‑RPL23AP8... 目的:探究外泌体传递lncRNA RPL23AP82促进胰腺导管腺癌(PDAC)吉西他滨(GEM)耐药。方法:(1)构建lncRNA RPL23AP82过表达载体并转染至SW1990细胞中后用GEM进行干扰、分组,对比细胞增殖活性、细胞凋亡。(2)SW1990细胞系转染shRNA‑RPL23AP82并分组,对比miR‑129、PFTK1 mRNA与PFTK1蛋白表达;SW1990细胞系转染miR‑129 mimics或miR‑129 inhibitor,对比PFTK1 mRNA、PFTK1蛋白表达。(3)SW1990细胞系诱导构建GEM耐受型PDAC细胞(SW1990‑GR)并提取外泌体与亲本细胞孵育,分别根据加入GEM、转染sh‑NC或sh‑RPL23AP82、转染sh‑NC或外泌体抑制剂GW4869,对比lncRNA RPL23AP82表达、GEM敏感性变化、细胞凋亡、细胞增殖活性。结果:(1)对比LV‑NC组,LV‑RPL23AP82组RPL23AP82相对表达量、细胞增殖活性更高且细胞凋亡更低,LV‑NC+GEM组细胞增殖活性更低,LV‑RPL23AP82+GEM组细胞增殖活性低于LV‑RPL23AP82组(均P<0.05)。(2)sh‑RPL23AP82组中RPL23AP82相对表达量低于sh‑NC组,对比sh‑NC组,sh‑RPL23AP82组miR‑129表达升高且PFTK1 mRNA、PFTK1蛋白均下降(均P<0.05);对比NC mimics组,miR‑129 mimics组miR‑129表达升高且miR‑129 inhibitor组miR‑129表达降低,miR‑129 mimics组PFTK1 mRNA和PFTK1蛋白水平降低,而miR‑129 inhibitor组PFTK1 mRNA和PFTK1蛋白水平升高(均P<0.05)。(3)SW1990‑GR组lncRNA RPL23AP82表达、SW1990‑GR组细胞增殖活性升高,对比SW1990‑GR组,SW1990‑GR+GEM组细胞增殖活性下调且细胞凋亡升高,耐药细胞SW1990‑GR与GEM共干扰后细胞凋亡下降(均P<0.05);敲低RPL23AP82后细胞增殖活性下调;GW4869抑制外泌体分泌后GW4869降低,抑制细胞增殖活性;抑制剂GW4869处理细胞增殖活性下降,细胞凋亡上升(均P<0.05)。结论:外泌体上调lncRNA RPL23AP82可降低miR‑129表达并通过刺激PFTK1表达促进吉西他滨耐药。 展开更多
关键词 胰腺导管癌 细胞周期蛋白依赖性激酶14 长链非编码RNA RPL23aP82 微小非编码RNA‑129 细胞增殖 细胞凋亡 吉西他滨 耐药
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糖尿病视网膜病变患者血清circHOMER1,miR-23a-3p水平表达与临床分期以及氧化应激的相关性
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作者 王敏 韩悠 +4 位作者 赵军波 崔翠 李佳佳 霍楠 李杏 《现代检验医学杂志》 2025年第6期104-109,共6页
目的探究糖尿病视网膜病变(DR)患者血清环状核糖核酸HOMER1(circHOMER1)、微小核糖核酸(miR)-23a-3p水平与临床分期以及氧化应激的相关性。方法选取2023年1月~2024年7月邯郸市中心医院眼科诊治的75例DR患者为DR组,根据DR临床分期分为非... 目的探究糖尿病视网膜病变(DR)患者血清环状核糖核酸HOMER1(circHOMER1)、微小核糖核酸(miR)-23a-3p水平与临床分期以及氧化应激的相关性。方法选取2023年1月~2024年7月邯郸市中心医院眼科诊治的75例DR患者为DR组,根据DR临床分期分为非增生型DR(NPDR组,n=43)和增生型DR(PDR组,n=32)。另选取同期就诊的75例单纯2型糖尿病患者为非DR组。检测血清circHOMER1,miR-23a-3p,丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平,收集受试者临床资料,利用TargetScan网站预测circHOMER1,miR-23a-3p的靶向关系。采用Pearson分析血清circHOMER1,miR-23a-3p之间及其与MDA,SOD,GSH的相关性;采用单因素和多因素Logistic回归分析2型糖尿病患者进展为DR的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circHOMER1,miR-23a-3p对2型糖尿病患者进展为DR的预测价值。结果circHOMER1与miR-23a-3p之间存在靶向关系。DR组血清MDA(28.66±4.52ng/ml),circHOMER1(1.24±0.16)高于非DR组(16.95±3.27ng/ml,1.02±0.11),SOD(45.39±7.84U/L),GSH(135.82±21.23μg/ml),miR-23a-3p(0.88±0.07)低于非DR组(81.65±11.47U/L,207.44±25.95μg/ml,1.01±0.09),差异具有统计学意义(t=9.813~22.602,均P<0.001)。PDR组血清MDA(33.28±4.96ng/ml),circHOMER1(1.36±0.20)高于NPDR组(25.23±3.58ng/ml,1.15±0.17),SOD(34.39±7.15U/L),GSH(113.50±20.17μg/ml),miR-23a-3p(0.79±0.07)低于NPDR组(53.27±8.44U/L,152.43±23.99μg/ml,0.94±0.08),差异具有统计学意义(t=4.906~10.376,均P<0.001)。Spearman法分析显示,血清MDA,circHOMER1与DR严重程度呈正相关(r=0.533,0.473,均P<0.001),SOD,GSH,miR-23a-3p与DR严重程度呈负相关(r=-0.552,-0.515,-0.529,均P<0.001)。Pearson法分析显示,血清circHOMER1与SOD,GSH,miR-23a-3p呈负相关(r=-0.475,-0.460,-0.455,均P<0.001),与MDA呈正相关(r=0.462,P<0.001);血清miR-23a-3p与SOD,GSH呈正相关,与MDA呈负相关(r=0.428,0.437,-0.439,均P<0.001)。Logistic回归法分析显示,高MDA,低SOD,低GSH,高circHOMER1,低miR-23a-3p,高FPG和高HbA1c是2型糖尿病患者进展为DR的危险因素(OR=0.214~3.556,均P<0.05)。ROC分析显示,血清circHOMER1,miR-23a-3p单独预测和联合预测2型糖尿病患者进展为DR的曲线下面积(AUC)分别为0.751,0.797,0.903,联合预测高于单独预测(Z=3.179,2.335,均P<0.05)。结论DR患者血清MDA,circHOMER1水平较高,血清SOD,GSH,miR-23a-3p水平较低,血清circHOMER1,miR-23a-3p表达异常与DR进展和氧化应激有关,联合检测血清circHOMER1,miR-23a-3p对2型糖尿病患者进展为DR具有预测价值。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 环状核糖核酸HOMER1 微小核糖核酸23a-3p 临床分期 氧化应激
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miR-23a过表达调控C3H10T1/2细胞成软骨分化与肥大分化的作用研究
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作者 闫继红 高函微 于睿 《实用骨科杂志》 2025年第7期609-614,共6页
目的本研究探索过表达微小RNA-23a(miR-23a)在小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2细胞成软骨分化和肥大分化中的作用,为利用干细胞治疗骨关节炎和软骨损伤修复提供新的思路。方法构建过表达miR-23a慢病毒载体并感染C3H10T1/2细胞(miR-23a组)... 目的本研究探索过表达微小RNA-23a(miR-23a)在小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2细胞成软骨分化和肥大分化中的作用,为利用干细胞治疗骨关节炎和软骨损伤修复提供新的思路。方法构建过表达miR-23a慢病毒载体并感染C3H10T1/2细胞(miR-23a组),感染miR-NC作为对照组(miR-NC组)。采用转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β3诱导不同感染组的C3H10T1/2细胞成软骨分化。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法、蛋白质免疫印迹法(western blot)、番红O染色和免疫组织化学染色检测C3H10T1/2细胞成软骨分化过程中软骨标志物SRY-盒转录因子9(SRY-related high mobility group-box gene 9,SOX9)、聚集蛋白聚糖(aggrecan,ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白alpha-1链(collagen typeⅡalpha 1 chain,COL2A1)及肥大标志物X型胶原蛋白α链[collagen alpha-1(X)chain,COL10A1]蛋白的表达。结果在诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化早期14 d内,miR-23a的表达持续升高(P<0.05),且在第10天达到顶峰。在诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化过程中,miR-23a组软骨标志物表达高于miR-NC组(P<0.05),而肥大标志物表达低于miR-NC组(P<0.05)。进一步研究发现过表达miR-23a后,Runt相关转录因子2(Runt related transcription factor 2,Runx2)表达降低。结论miR-23a在C3H10T1/2细胞成软骨分化早期高表达。过表达miR-23a促进其成软骨分化并抑制肥大分化,其机制可能通过抑制肥大化转录因子Runx2而抑制其肥大分化。 展开更多
关键词 微小RNA-23a C3H10T1/2细胞 成软骨分化 肥大分化
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miR-23a对脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎症的影响 被引量：4
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作者 李柳杨 韩小红 +3 位作者 钱文洁 姚颖 余志鹏 樊江峰 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第4期235-238,243,共5页
乳腺炎是奶牛饲养过程中最常见的疾病,可显著降低乳腺的健康及乳产品的质量。为探究miR-23a在调节脂多糖(LPS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎症反应中的作用,本研究在构建奶牛乳腺上皮细胞炎症模型的基础上,采用RT-qPCR、ELISA和CCK8... 乳腺炎是奶牛饲养过程中最常见的疾病,可显著降低乳腺的健康及乳产品的质量。为探究miR-23a在调节脂多糖(LPS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎症反应中的作用,本研究在构建奶牛乳腺上皮细胞炎症模型的基础上,采用RT-qPCR、ELISA和CCK8试验对MAC-T中炎性因子白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达及细胞活性进行了检测,并通过对MAC-T中miR-23a的过表达和抑制,分析了miR-23a对LPS诱导的MAC-T炎症反应的影响。结果显示,100μg/mL LPS处理MAC-T6 h,细胞活性降低,炎症相关因子IL-6、IL-8和TNF-α表达也显著升高;在LPS诱导的MAC-T炎症模型中,miR-23a的表达极显著降低;miR-23a过表达可使LPS诱导的MAC-T中炎症因子IL-6、IL-8和TNF-α的表达显著下降,而抑制miR-23a则导致IL-6、IL-8和TNF-α表达显著升高。本研究结果表明,miR-23a可能具有抑制LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞发生炎症反应的作用。 展开更多
关键词 乳腺上皮细胞 脂多糖 miR-23a 炎性因子
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能谱CT结合血清miR-23a预测大面积急性心肌梗死患者主要心血管不良事件发生风险的价值 被引量：1
8
作者 宋冉 梁长华 李强 《海南医学》 2025年第4期528-533,共6页
目的探讨双源能谱CT(DECT)结合血清微小核糖核酸-23a(miR-23a)预测大面积急性心肌梗死(AMI)患者主要心血管不良事件(MACE)发生的风险,以期为临床防治工作提供参考。方法前瞻性选取2021年7月至2023年7月新乡医学院第一附属医院收治的198... 目的探讨双源能谱CT(DECT)结合血清微小核糖核酸-23a(miR-23a)预测大面积急性心肌梗死(AMI)患者主要心血管不良事件(MACE)发生的风险,以期为临床防治工作提供参考。方法前瞻性选取2021年7月至2023年7月新乡医学院第一附属医院收治的198例大面积AMI患者,随访1年,失访5例,统计MACE发生情况,根据随访结果分别纳入MACE组(42例)和非MACE组(151例)。比较两组患者的一般资料、DECT参数及血清mi R-23a水平,采用Spearman法分析DECT参数及血清mi R-23a水平与MACE发生情况的相关性,偏相关系数分析DECT参数及血清mi R-23a水平与MACE发生情况的偏相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线、重分类改善指标(NRI)、综合判别改善指数(IDI)分析DECT参数及血清mi R-23a水平对MACE发生的预测价值。结果两组患者的吸烟占比、糖尿病占比、病变血管≥3支占比、Killip分级及血清脑钠肽(BNP)、肌钙蛋白I(c Tn I)比较差异均有统计学意义(P<0.05);MACE组患者的动、静脉期碘基值(IC)、标准化碘浓度(NIC)、水基值(WC)值及血清mi R-23a水平明显高于非MACE组[MACE组动脉期:(1.05±0.34)100 mg/m L、(18.79±4.06)%、(386.49±50.47)100 mg/m L,静脉期:(2.64±0.52)100 mg/m L、(56.43±10.87)%、(413.64±55.21)100 mg/m L,1.54±0.37;非MACE组动脉期:(0.94±0.31)100 mg/m L、(16.15±3.28)%、(435.96±54.28)100 mg/mL,静脉期:(1.70±0.43)100 mg/mL、(47.57±9.36)%、(482.39±60.77)100 mg/mL,1.06±0.31],且静脉期高于动脉期,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示,动、静脉期IC(r=0.618、0.649)、NIC(r=0.653、0.702)、WC(r=0.665、0.708)值及血清miR-23a水平(r=0.719)均与大面积AMI患者MACE发生呈正相关(P<0.05);偏相关性分析显示,控制相关因素后,动、静脉期IC(偏相关系数=0.784、0.805)、NIC(偏相关系数=0.822、0.847)、WC(偏相关系数=0.819、0.858)值及血清miR-23a水平(偏相关系数=0.896)仍与大面积AMI患者MACE发生显著相关(P<0.05);ROC分析显示,动、静脉期IC、NIC、WC值及血清miR-23a联合预测大面积AMI患者发生MACE的曲线下面积(AUC)为0.932,优于各指标单独预测效能(P<0.05)。结论DECT参数动、静脉期IC、NIC、WC值及血清miR-23a水平均与大面积AMI患者MACE发生具有一定相关性,联合检测对MACE发生具有较高预测价值,可作为临床早期预测MACE发生风险的有效方案,并可指导临床防治工作。 展开更多
关键词 大面积急性心肌梗死 主要心血管不良事件 双源能谱CT 定量参数 微小核糖核酸-23a 预测价值
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妊娠期糖尿病患者血清miRNA-23a-3p、CXCL12的表达及临床意义 被引量：1
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作者 侯向娟 高佳丽 +1 位作者 孙云青 冷慧敏 《临床和实验医学杂志》 2025年第3期299-302,共4页
目的探索妊娠期糖尿病(GDM)患者血清微RNA(miRNA)-23a-3p、CXC类趋化因子配体12(CXCL12)的表达及临床意义。方法前瞻性选取2021年1月至2023年1月在邢台市中心医院分娩的GDM孕妇172例作为GDM组,同期165名健康分娩孕妇作为对照组。比较两... 目的探索妊娠期糖尿病(GDM)患者血清微RNA(miRNA)-23a-3p、CXC类趋化因子配体12(CXCL12)的表达及临床意义。方法前瞻性选取2021年1月至2023年1月在邢台市中心医院分娩的GDM孕妇172例作为GDM组,同期165名健康分娩孕妇作为对照组。比较两组血清miRNA-23a-3p、CXCL12水平;分析GDM患者血清miRNA-23a-3p与CXCL12水平的相关性;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清miRNA-23a-3p、CXCL12水平预测GDM发生的效能。结果GDM组血清miRNA-23a-3p水平为0.85±0.15,低于对照组(1.01±0.18),GDM组血清CXCL12水平为(4.43±0.89)ng/mL,高于对照组[(3.64±0.72)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。GDM组患者血清miRNA-23a-3p与CXCL12水平呈负相关(r=-0.514,P<0.001)。ROC曲线显示,以0.890为临界值,血清miRNA-23a-3p水平预测GDM发生的曲线下面积(AUC)为0.765,敏感度为60.47%,特异度为83.03%,以4.179 ng/mL为临界值,血清CXCL12水平预测GDM发生的AUC为0.775,敏感度为51.74%,特异度为92.73%,血清miRNA-23a-3p、CXCL12水平联合预测GDM发生的AUC为0.880,敏感度为81.40%,特异度为82.42%。结论GDM患者血清中miRNA-23a-3p水平降低,CXCL12水平升高,血清miRNA-23a-3p、CXCL12水平联合预测GDM发生的预测价值较好。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 微RNA-23a-3p CXC类趋化因子配体12 临床意义
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枸杞多糖通过下调miR-23a减轻顺铂诱导的颗粒细胞损伤
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作者 刘柳青 王坤 +1 位作者 王雪晴 杜冰心 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第11期2340-2349,共10页
目的 研究枸杞多糖(LBP)对顺铂损伤的卵巢颗粒细胞的保护作用及其潜在机制。方法 采用顺铂(2.5μg/mL,24 h)诱导人颗粒细胞样肿瘤细胞系(KGN)建立KGN损伤模型,采用不同浓度LBP(100、500、1000 mg/L)干预受损KGN,各组细胞分别用细胞计数... 目的 研究枸杞多糖(LBP)对顺铂损伤的卵巢颗粒细胞的保护作用及其潜在机制。方法 采用顺铂(2.5μg/mL,24 h)诱导人颗粒细胞样肿瘤细胞系(KGN)建立KGN损伤模型,采用不同浓度LBP(100、500、1000 mg/L)干预受损KGN,各组细胞分别用细胞计数试剂盒-8检测细胞活力,流式细胞术检测凋亡率,ELISA法检测抗苗勒管激素(AMH)水平,透射电镜观察超微结构,Western blotting检测凋亡相关蛋白(Bax、caspase-3、Bcl-2)及PI3K/AKT信号通路的表达情况,RT-qPCR法检测微小RNA(miR)-23a表达情况。通过慢病毒转染构建miR-23a过表达/敲低模型,验证LBP的作用机制。结果 顺铂抑制KGN活力(P<0.01),诱导凋亡(P<0.01),降低AMH水平(P<0.01),造成染色质凝聚、细胞核固缩、细胞质空泡化等超微结构异常,并增加促凋亡基因Bax、caspase-3的表达(P<0.01),减少抑凋亡基因Bcl-2的表达(P<0.05),下调PI3K/AKT信号通路的表达与活化(P<0.01),上调miR-23a的含量(P<0.01)。LBP干预可不同程度地逆转上述损伤,中剂量LBP作用24 h可改善KGN细胞活力、凋亡率、内分泌功能和超微结构(P<0.01)。中剂量LBP通过下调miR-23a(P<0.01)激活PI3K/AKT通路(P<0.01),抑制Bax、caspase-3(P<0.01),上调Bcl-2(P<0.05)。miR-23a过表达削弱LBP的保护作用,而敲低miR-23a则增强其疗效(P<0.01)。结论 LBP通过抑制miR-23a表达,激活PI3K/AKT通路,抑制顺铂诱导的KGN凋亡,为保护卵巢功能提供了潜在治疗策略。 展开更多
关键词 枸杞多糖 miR-23a KGN 细胞凋亡 PI3K/AKT信号通路
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血清miR-23a、25(OH)D3及FeNO水平变化对MP感染合并哮喘儿童肺功能的影响
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作者 卓艳霞 李瑞士 孙明华 《河南医学高等专科学校学报》 2025年第4期369-373,382,共6页
目的探讨肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)感染合并哮喘患儿的微小RNA-23a(miR-23a)、血清25(OH)D3、呼出气一氧化氮(FeNO)的变化与肺功能的关系。方法选取80例MP感染合并哮喘患儿作为病例组,80例MP感染不伴哮喘的患儿作为MP组,80... 目的探讨肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)感染合并哮喘患儿的微小RNA-23a(miR-23a)、血清25(OH)D3、呼出气一氧化氮(FeNO)的变化与肺功能的关系。方法选取80例MP感染合并哮喘患儿作为病例组,80例MP感染不伴哮喘的患儿作为MP组,80例体检健康儿童作为对照组,检测3组儿童的血清miR-23a、25(OH)D3、FeNO、肺功能指标[最大呼气峰值流速(PEF)、第一秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)]、炎症因子[白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)]以及免疫球蛋白(IgE、IgM、IgG)水平,并分析miR-23a、25(OH)D3、FeNO与肺功能指标的相关性。结果病例组患儿miR-23a、FeNO水平高于MP组和对照组,25(OH)D3水平低于MP组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MP组miR-23a、FeNO水平高于对照组,25(OH)D3水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);病例组IL-10水平低于MP组和对照组,病例组IL-4、IFN-γ水平高于MP组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MP组患儿免疫球蛋白IgE、IgM、IgG指标水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);病例组患儿的肺功能(PEF、FEV_(1)、FVC占预计值的百分比)受损较MP组和对照组严重,差异有统计学意义(P<0.05);MP组患儿的PEF、FEV_(1)、FVC占预计值的百分比均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MP感染合并哮喘患儿miR-23a、FeNO与PEF、FEV_(1)、FVC均呈负相关关系(r值分别为-0.774、-0.729、-0.688、-0.670、-0.638、-0.652,均P<0.05),血清25(OH)D3与PEF、FEV_(1)、FVC均呈正相关关系(r值分别为0.677、0.620、0.598,均P<0.05)。结论MP感染合并哮喘患儿的miR-23a、FeNO水平显著增高,血清25(OH)D3水平显著降低,并且与患儿肺功能受损程度密切相关。提示哮喘合并MP感染患儿的肺功能损伤更为严重,在治疗哮喘的同时需要积极处理MP感染。另外,适当的补充维生素D可能对患儿的免疫调节和降低炎症反应起到积极作用。 展开更多
关键词 肺炎支原体感染 哮喘 血清25(OH)D3 微小RNA-23a 呼出气一氧化氮
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miR-23a-3p通过PTEN促进肝星状细胞活化调控肝纤维化
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作者 李乃树 陈正民 +2 位作者 姚超 孙发缔 许兆龙 《包头医学院学报》 2025年第9期50-55,共6页
目的:探讨miR-23a-3p对人肝星状细胞(LX-2)活化的影响并探索其相关机制。方法:通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验和免疫蛋白印迹法(Western Blot),检测miR-23a-3p、PTEN基因、α-SMA和collagen I等蛋白表达水平;通过转染构建过表... 目的:探讨miR-23a-3p对人肝星状细胞(LX-2)活化的影响并探索其相关机制。方法:通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验和免疫蛋白印迹法(Western Blot),检测miR-23a-3p、PTEN基因、α-SMA和collagen I等蛋白表达水平;通过转染构建过表达miR-23a-3p和PTEN的LX-2细胞系;CCK-8实验检测miR-23a-3p对LX-2细胞增殖的影响;通过多个数据库筛选miR-23a-3p的可能靶点;用双萤光素酶报告基因实验检测miR-23a-3p和目标靶点的结合情况。结果:与正常LX-2细胞相比,过表达miR-23a-3p显著促进LX-2细胞增殖和α-SMA和collagen I蛋白的表达。miR-23a-3p可以靶向PTEN并抑制其表达。过表达PTEN能够逆转miR-23a-3p对LX-2细胞增殖和α-SMA和collagen I蛋白表达的影响。miR-23a-3p促进了TGF-β1诱导的PI3K、Akt和mTOR的磷酸化,同时过表达PTEN抑制了miR-23a-3p诱导的磷酸化。结论:miR-23a-3p通过调节PTEN促进肝星状细胞活化,从而调控肝纤维化。 展开更多
关键词 肝纤维化 miR-23a-3p PTEN 肝星状细胞活化
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退火温度对20Mn23AlV无磁结构钢的影响
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作者 狄彦军 平玲玲 +2 位作者 唐兴昌 张志坚 程刚虎 《钢铁研究学报》 北大核心 2025年第3期375-385,共11页
通过对无磁结构钢热轧板进行不同温度退火处理来研究不同温度下微观组织、力学性能和磁性能的变化。研究结果表明,随着退火温度增加,无磁结构钢热轧板的抗拉强度呈现下降趋势,伸长率缓慢上升。不同状态的无磁结构钢经过拉伸后奥氏体晶... 通过对无磁结构钢热轧板进行不同温度退火处理来研究不同温度下微观组织、力学性能和磁性能的变化。研究结果表明,随着退火温度增加,无磁结构钢热轧板的抗拉强度呈现下降趋势,伸长率缓慢上升。不同状态的无磁结构钢经过拉伸后奥氏体晶粒内部会产生大量的形变孪晶,这些形变孪晶能够阻碍位错运动和晶面滑移,增加了无磁结构钢的硬度。XRD分析结果显示无磁结构钢热轧板经过不同温度退火后并没有发生相转变。同时磁导率测试结果显示,相对磁导率在1.00218和1.00206之间浮动,符合无磁结构钢对磁性能要求。 展开更多
关键词 20Mn23alV无磁结构钢 退火 晶粒尺寸 相对磁导率 力学性能
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结直肠癌患者血清微小RNA-23a、癌胚抗原表达及其与临床特征和预后的关系研究
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作者 黄竹英 唐水娟 +2 位作者 王朝燕 杨英桃 金爱群 《实用临床医药杂志》 2025年第22期9-13,共5页
目的探讨结直肠癌患者血清微小RNA-23a(miR-23a)、癌胚抗原(CEA)表达情况及其与临床特征和预后的关系。方法回顾性选取200例结直肠癌患者作为观察组,另选取同期体检健康的50例志愿者作为对照组,比较2组血清miR-23a、CEA水平,并比较不同... 目的探讨结直肠癌患者血清微小RNA-23a(miR-23a)、癌胚抗原(CEA)表达情况及其与临床特征和预后的关系。方法回顾性选取200例结直肠癌患者作为观察组,另选取同期体检健康的50例志愿者作为对照组,比较2组血清miR-23a、CEA水平,并比较不同临床特征结直肠癌患者血清miR-23a、CEA水平。根据随访结局,将112例复发或死亡患者归为预后不良组,88例未复发患者归为预后良好组。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清miR-23a、CEA单独及联合检测对结直肠癌患者预后的预测效能。结果观察组血清miR-23a、CEA表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况患者的血清miR-23a表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况、肿瘤直径、浸润深度患者的血清CEA水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组血清miR-23a、CEA表达水平更高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,miR-23a、CEA联合预测结直肠癌患者预后的敏感度为86.63%,特异度为85.31%,曲线下面积为0.812,预测效能高于两者单独预测。结论结直肠癌患者血清miR-23a、CEA表达显著升高,其异常表达与患者临床病理特征密切相关。miR-23a、CEA表达对结直肠癌患者预后有一定预测价值,且联合检测预测价值更高。 展开更多
关键词 结直肠癌 微小RNA-23a 癌胚抗原 肿瘤分化程度 预后 TNM分期 生物标记物 淋巴结转移
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帕金森病患者血清miR-21、miR-23a水平与认知功能、炎症反应的相关性
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作者 韩志萍 陈静 +2 位作者 马涛 王少兰 吕建东 《昆明医科大学学报》 2025年第11期116-121,共6页
目的探讨帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血清微小RNA-21(miR-21)和微小RNA-23a(miR-23a)的表达水平及其与认知功能和炎症反应的关系。方法选取2019年12月至2022年1月河北北方学院附属第二医院收治的PD患者120例及同期健康体... 目的探讨帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血清微小RNA-21(miR-21)和微小RNA-23a(miR-23a)的表达水平及其与认知功能和炎症反应的关系。方法选取2019年12月至2022年1月河北北方学院附属第二医院收治的PD患者120例及同期健康体检者115例为对照。采用实时荧光定量PCR检测血清miR-21、miR-23a表达,ELISA法测定血清IL-6、CRP、TNF-α的表达水平。依据简易精神状态量表(MMSE)将PD患者分为认知功能障碍组(MMSE<26,n=72)和认知正常组(MMSE≥26,n=48)。比较两组一般资料及相关指标水平,采用Spearman分析miR-21、miR-23a与MMSE的相关性,多因素Logistic回归分析认知功能障碍的影响因素,并以ROC曲线评估miR-21、miR-23a预测价值。结果与对照组相比,PD组血清miR-21、miR-23a、IL-6、CRP、TNF-α水平均显著升高(P<0.01)。认知功能障碍组的miR-21、miR-23a、炎症因子水平均高于认知正常组(P<0.01)。相关分析显示,miR-21、miR-23a与MMSE评分呈显著负相关(r=-0.472、-0.514,P<0.001),与IL-6、CRP、TNF-α水平均呈正相关(P<0.001)。多因素Logistic回归分析表明,miR-21、miR-23a高表达及UPDRS评分升高为PD患者认知功能障碍的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-21与miR-23a联合预测认知功能障碍的AUC显著高于单一指标(P<0.05)。结论PD患者血清miR-21和miR-23a表达上调,与认知功能和炎症反应相关,联合检测可较好预测认知功能障碍。 展开更多
关键词 帕金森病 微小RNA-21 微小RNA-23a 认知功能 炎症反应
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脂肪干细胞介导miR-23a-3p调节JAZF1促进糖尿病足溃疡大鼠创面愈合
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作者 杨玲玲 孙强 +1 位作者 黄悦 周大鹏 《解剖科学进展》 2025年第5期597-601,共5页
目的探究脂肪干细胞(ADSCs)对糖尿病足溃疡大鼠创面愈合的影响及机制。方法将40只糖尿病足溃疡Wistar大鼠随机分为模型组、ADSCs组、ADSCs+antagomiR-NC组和ADSCs+antagomiR-23a-3p组,每组10只,计算大鼠创面愈合率,RT-qPCR检测大鼠创面... 目的探究脂肪干细胞(ADSCs)对糖尿病足溃疡大鼠创面愈合的影响及机制。方法将40只糖尿病足溃疡Wistar大鼠随机分为模型组、ADSCs组、ADSCs+antagomiR-NC组和ADSCs+antagomiR-23a-3p组,每组10只,计算大鼠创面愈合率,RT-qPCR检测大鼠创面组织中miR-23a-3p和JAZF1 mRNA表达;Masson染色检测大鼠创面组织中胶原纤维含量;免疫荧光检测大鼠创面组织中VEGFA表达;Western blot检测大鼠创面组织中JAZF1蛋白表达,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-23a-3p与JAZF1靶向关系。结果ADSCs移植增加DFUs大鼠创面愈合率以及创面组织中胶原沉积和VEGFA表达,降低大鼠创面组织中JAZF1表达;抑制miR-23a-3p部分逆转ADSCs移植对DFUs大鼠创面愈合和胶原沉积的促进作用以及VEGFA表达的上调作用,并部分逆转ADSCs移植对DFUs大鼠创面组织中JAZF1表达的下调作用。结论ADSCs移植通过分泌miR-23a-3p促进DFUs大鼠创面愈合,其机制可能与靶向抑制JAZF1表达有关。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 糖尿病足溃疡 创面愈合 miR-23a-3p JAZF1 大鼠
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子宫内膜癌组织miR-23a、APAF-1表达与病理特征和预后的关系
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作者 郑晓玲 梁远秋 +1 位作者 张丽君 徐咏强 《国际检验医学杂志》 2025年第15期1901-1905,共5页
目的探讨子宫内膜癌(EC)组织微小RNA-23a(miR-23a)、凋亡蛋白酶活化因子-1(APAF-1)表达与临床病理特征的关系,分析其在EC预后评估中的价值。方法选择2019年1月至2021年8月该院收治的65例EC患者为研究对象,所有患者均接受手术切除,获取E... 目的探讨子宫内膜癌(EC)组织微小RNA-23a(miR-23a)、凋亡蛋白酶活化因子-1(APAF-1)表达与临床病理特征的关系,分析其在EC预后评估中的价值。方法选择2019年1月至2021年8月该院收治的65例EC患者为研究对象,所有患者均接受手术切除,获取EC组织及其癌旁组织,比较EC组织、癌旁组织miR-23a、APAF-1表达情况,并比较不同临床病理特征EC患者miR-23a、APAF-1表达情况,分析EC组织中miR-23a、APAF-1表达与患者预后的关系,并分析EC患者预后不良的影响因素,绘制受试者工作特征曲线分析miR-23a、APAF-1对EC患者预后不良的预测价值。结果EC组织miR-23a表达高于癌旁组织(P<0.01),APAF-1表达低于癌旁组织(P<0.01),EC组织miR-23a表达与APAF-1呈负相关(r=-0.422,P<0.001);miR-23a高表达组、APAF-1低表达组FIGO分期、分化程度、淋巴结转移情况分别与miR-23a低表达组、APAF-1高表达组比较,差异有统计学意义(P<0.01);miR-23a高表达组3年生存率低于miR-23a低表达组,APAF-1高表达组3年生存率高于APAF-1低表达组;多因素Cox回归分析显示miR-23a、APAF-1、FIGO分期、分化程度、淋巴结转移均为EC患者预后不良的影响因素;miR-23a联合APAF-1预测EC患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.928(95%CI:0.890~0.994),灵敏度和特异度分别为92.46%、80.35%,联合检测的AUC大于miR-23a、APAF-1单独检测(Z=2.671、2.694,P=0.016、0.012)。结论EC组织中miR-23a、APAF-1均呈异常表达,二者与患者临床病理特征密切相关,二者联合应用在患者预后评估中具有较高的临床价值。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 微小RNA-23a 凋亡蛋白酶活化因子-1 临床病理特征 预后
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共转染miRNA-23a对提高重组蛋白类药物产率的影响研究
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作者 方小燕 陈长明 《广东化工》 2025年第4期52-56,共5页
miRNA-23a是一种具有调节功能的非编码小分子RNA,大小约为19~24个核苷酸,广泛地参与细胞生长、分化、凋亡等重要生命过程。本研究将具有基因调控功能的miRNA-23a分子整合到质粒中,并与携带目的基因的质粒共转染到HCT116(Human Colon Tum... miRNA-23a是一种具有调节功能的非编码小分子RNA,大小约为19~24个核苷酸,广泛地参与细胞生长、分化、凋亡等重要生命过程。本研究将具有基因调控功能的miRNA-23a分子整合到质粒中,并与携带目的基因的质粒共转染到HCT116(Human Colon Tumor cell,人结肠癌细胞)细胞中。进入细胞后,这些miRNA-23a与靶mRNA特定序列互补结合,调控细胞活率与目的基因表达。实验结果表明,这种共转染策略不仅能通过共转染miRNA-23a辅助质粒来表达抗凋亡基因,提高细胞活率,还能显著提高目的蛋白的表达水平。这一发现不仅揭示了miRNA-23a可作为一种肿瘤细胞的细胞凋亡抑制剂,也为提高重组蛋白类药物的产率提供了新的策略和方法。 展开更多
关键词 miRNA-23a 共转染 基因表达调控 蛋白药物产率
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牙周基础治疗前后龈沟液miRNA-23a、miRNA-146a表达变化的临床意义
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作者 陆玉平 王倩倩 《河南医学研究》 2025年第7期1232-1237,共6页
目的探讨牙周基础治疗前后龈沟液miRNA-23a、miRNA-146a表达变化及临床意义。方法选取2019年10月至2022年4月郑州颐和医院收治的170例牙周炎患者以及同期68例健康体检者作为研究对象,分别作为研究组和对照组;并根据研究组患者牙周炎程... 目的探讨牙周基础治疗前后龈沟液miRNA-23a、miRNA-146a表达变化及临床意义。方法选取2019年10月至2022年4月郑州颐和医院收治的170例牙周炎患者以及同期68例健康体检者作为研究对象,分别作为研究组和对照组;并根据研究组患者牙周炎程度分为轻度患者65例、中度患者58例和重度患者47例。采用酶联免疫吸附试验法检测并比较治疗前和治疗6周后龈沟液中的白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、IL-4、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(INF-γ)表达水平;实时荧光定量PCR法检测并比较龈沟液miRNA-23a、miRNA-146a表达水平,同时分析miRNA-23a、miRNA-146a表达水平与牙周炎患者各炎症因子及临床指标之间的关系。结果研究组龈沟液中miRNA-23a、miRNA-146a以及促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)表达水平均高于对照组(P<0.05),研究组龈沟液中抗炎细胞因子IL-10、IL-4/INF-γ表达水平均低于对照组(P<0.05),且轻、中、重度3组上述因子差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后3组患者miRNA-23a、miRNA-146a以及临床指标[附着丧失(AL)、牙周探诊深度(PD)、探诊出血(BOP)阳性率]相比治疗前均下降(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示龈沟液中miRNA-23a、miRNA-146a表达水平与炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平以及AL、PD呈正相关,与IL-10表达水平呈负相关(P<0.05)。结论牙周炎患者龈沟液miRNA-23a、miRNA-146a存在显著高表达,且与患者牙周炎炎症因子表达水平存在显著相关性;牙周基础治疗可以通过降低miR-23a、miRNA-146a,改善牙周炎患者炎症反应程度。 展开更多
关键词 牙周炎 miRNA-23a miRNA-146a
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外泌体源性miR-23a-3p影响巨噬细胞极化并促进宫颈癌细胞迁移及侵袭
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作者 徐梦伟 吕单单 林晨 《温州医科大学学报》 2025年第8期628-637,共10页
目的:明确宫颈癌细胞分泌的外泌体源性miR-23a-3p对肿瘤相关巨噬细胞极化方向的影响,探究宫颈癌细胞迁移及侵袭行为的机制。方法:纳米颗粒跟踪分析、透射电镜观察和Western blot鉴定宫颈癌细胞分泌的外囊泡是否为外泌体。建立佛波酯(PMA... 目的:明确宫颈癌细胞分泌的外泌体源性miR-23a-3p对肿瘤相关巨噬细胞极化方向的影响,探究宫颈癌细胞迁移及侵袭行为的机制。方法:纳米颗粒跟踪分析、透射电镜观察和Western blot鉴定宫颈癌细胞分泌的外囊泡是否为外泌体。建立佛波酯(PMA)诱导急性单核细胞白血病细胞(THP-1)成巨噬细胞模型,免疫荧光检测巨噬细胞摄取外泌体情况。巨噬细胞添加SiHa/HeLa分泌的外泌体处理或转染miR-23a-3p mimics/miR-23a-3p inhibitors处理后,RT-qPCR、Western blot检测巨噬细胞标志物表达水平;荧光素酶报告基因验证miR-23a-3p与PTEN 3’-UTR的结合能力。宫颈癌细胞与巨噬细胞利用Transwell小室共培养,检测宫颈癌细胞的迁移及侵袭能力在SiHa/HeLa分泌的外泌体处理或转染miR-23a-3p mimics前后的差异。结果:经过纳米颗粒跟踪分析、透射电镜和Western blot检测外泌体标志蛋白后确认宫颈癌细胞分泌的外囊泡为外泌体,并且发现SiHa/HeLa分泌的外泌体源性miR-23a-3p表达较细胞内高。利用PMA诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞,通过免疫荧光观察到巨噬细胞能够摄取外泌体。RT-qPCR检测巨噬细胞摄取外泌体后,M2型标志物TGF-β、CD206、Argians-1表达较非摄取组明显升高(P<0.05),而M1标志物iNOS表达较之减少(P<0.05)。巨噬细胞转染miR-23a-3p mimics处理后,得到同样的结果。通过体外宫颈癌细胞和巨噬细胞共培养发现,肿瘤源性外泌体或转染miR-23a-3p mimics诱导的M2型巨噬细胞可使宫颈癌细胞迁移及侵袭增加(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测发现,外泌体源性miR-23a-3p能结合到巨噬细胞内PTEN的3’-UTR,影响PTEN表达。Western blot检测发现,巨噬细胞转染miR-23a-3p mimics后PTEN表达水平下降(P<0.05),且下游p-AKT增加(P<0.05);反之,转染miR-23a-3p inhibitors后PTEN表达增加(P<0.05),且p-AKT磷酸化降低(P<0.05)。结论:宫颈癌细胞分泌的外泌体源性miR-23a-3p诱导巨噬细胞M2型极化,通过下调M2型巨噬细胞PTEN激活AKT信号通路,从而增强宫颈癌细胞迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 宫颈癌 外泌体源性miR-23a-3p 巨噬细胞极化 磷酸酶与张力蛋白同源物 细胞迁移 细胞侵袭
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