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FOXD2-AS1通过EZH2调控LATS1表达影响肾癌细胞的增殖与迁移
1
作者 向威 吕磊 +1 位作者 郑福鑫 袁敬东 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第2期161-168,共8页
目的:探索lncRNA FOXD2-AS1通过EZH2调控LATS1表达影响肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖与迁移的作用机理。方法:采用GEPIA 2软件在线分析TCGA数据库中FOXD2-AS1在ccRCC组织中的表达水平,评估其与患者总体生存率之间的关系。用qPCR法检测肾... 目的:探索lncRNA FOXD2-AS1通过EZH2调控LATS1表达影响肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖与迁移的作用机理。方法:采用GEPIA 2软件在线分析TCGA数据库中FOXD2-AS1在ccRCC组织中的表达水平,评估其与患者总体生存率之间的关系。用qPCR法检测肾癌细胞及临床收集的26例ccRCC组织中FOXD2-AS1表达水平,用CCK-8法和Transwell小室实验观察敲减FOXD2-AS1表达对肾癌细胞增殖与迁移的影响;用qPCR与WB法检测敲减FOXD2-AS1表达对肾癌细胞LATS1 mRNA与蛋白表达的影响。用RNA免疫沉淀(RIP)和染色质免疫沉淀(ChIP)法分析FOXD2-AS1与EZH2及LATS1之间的作用。结果:GEPIA 2软件分析结果显示,FOXD2-AS1在ccRCC组织中呈明显高表达(P<0.01),FOXD2-AS1高表达患者的总体生存率较低(P<0.05)。qPCR法检测结果显示,相较癌旁组织,FOXD2-AS1在26例ccRCC组织中呈显著高表达(P<0.01)。相较永生化肾小管上皮细胞HK-2,FOXD2-AS1在肾癌786-O、ACHN及SN12-PM6细胞中均显著高表达(均P<0.01)。敲减FOXD2-AS1表达,均可显著降低肾癌细胞的增殖与迁移能力(均P<0.05),并明显上调LATS1的mRNA与蛋白表达水平(均P<0.01)。RIP与ChIP实验证实,FOXD2-AS1可结合并招募EZH2至LATS1启动子区域而发挥作用。挽救实验显示,敲减LATS1或过表达EZH2可部分逆转敲减FOXD2-AS1对肾癌细胞增殖与迁移的抑制作用。结论:FOXD2-AS1在ccRCC中高表达,其通过募集EZH2至LATS1基因启动子区域而负性调控LATS1的表达,进而促进肾癌细胞的增殖与迁移。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 FOXD2-aS1 EZH2 LATS1
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INKA2-AS1促进肝细胞癌迁移、侵袭和巨噬细胞相关免疫抑制机制研究
2
作者 何秀堂 胡鹏 刘茂年 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第17期2039-2052,共14页
目的探究INKA2-AS1促进肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)迁移、侵袭和巨噬细胞相关免疫抑制的机制。方法对癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas Program,TCGA)-HCC数据和健康组织基因表达数据(Genotype-Tissue Expression,GT... 目的探究INKA2-AS1促进肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)迁移、侵袭和巨噬细胞相关免疫抑制的机制。方法对癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas Program,TCGA)-HCC数据和健康组织基因表达数据(Genotype-Tissue Expression,GTEx)数据库中374例HCC组织和160例正常肝组织中的基因表达水平进行差异分析。通过生存分析研究INKA2-AS1与HCC患者预后的关系,并对INKA2-AS1进行Cox回归分析。通过肿瘤免疫估计资源数据库分析INKA2-AS1与HCC组织免疫浸润的关系。于2019年1月至2021年1月收集在重庆海吉亚医院肝胆外科接受治疗的90例HCC患者的HCC组织和癌旁正常组织。将HCC细胞Hepa1-6分为NC、INKA2-AS1、siNC和siINKA2-AS1组。通过转染来过表达和沉默INKA2-AS1。分别通过CCK-8、EdU、TUNEL染色、划痕愈合和Transwell实验检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭情况。将各组Hepa 1-6细胞分别与巨噬细胞共培养分析其对巨噬细胞的影响。将20只4周龄SPF级裸鼠(体质量15~19 g,雌雄各半)通过随机数字表法分为4组(n=5):NC、INKA2-AS1、siNC和siINKA2-AS1组,分别通过皮下注射2×106个INKA2-AS1沉默和过表达的Hepa 1-6细胞构建荷瘤裸鼠模型,检测INKA2-AS1对肿瘤体积、质量的影响。通过Western blot检测肿瘤组织中IL-10和FAP蛋白表达水平来分析肿瘤相关巨噬细胞水平。结果HCC组织中INKA2-AS1的水平显著高于正常组织(P<0.001)。INKA2-AS1与HCC的组织学分级、病理分期有关(P<0.05)。NKA2-AS1高表达的HCC患者的生存率(P=0.001)、疾病特异性生存期(P=0.036)和无进展间期(P=0.024)显著低于INKA2-AS1低表达患者。Cox回归分析显示INKA2-AS1是HCC患者OS的独立预测因素(P=0.005)。INKA2-AS1的表达与T辅助细胞、巨噬细胞等免疫细胞相关。HCC组织中INKA2-AS1水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。siINKA2-AS1组的增殖、迁移、侵袭能力低于siNC组(P<0.05),凋亡率显著高于siNC组(P<0.05),抑制与其共培养的巨噬细胞中IL-10和FAP mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。INKA2-AS1组的增殖、迁移、侵袭能力高于NC组(P<0.05),凋亡率显著低于NC组(P<0.05),促进与其共培养的巨噬细胞中IL-10和FAP mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。siINKA2-AS1组的肿瘤体积和质量显著低于siNC组(P<0.05),而INKA2-AS1组的肿瘤体积(P<0.05)和质量显著高于NC组(P<0.01)。siINKA2-AS1组肿瘤组织中IL-10和FAP蛋白水平显著低于siNC组(P<0.05),INKA2-AS1组肿瘤组织中IL-10和FAP蛋白水平显著高于NC组(P<0.05)。结论INKA2-AS1升高与HCC患者的预后不良有关,INKA2-AS1促进HCC细胞的增殖和转移,并诱导肿瘤相关巨噬细胞的转化。 展开更多
关键词 肝细胞癌 INKA2-aS1 肿瘤免疫 巨噬细胞
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宫颈癌患者血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1表达水平与预后的关系 被引量：2
3
作者 肖献花 郭丽娜 +4 位作者 呼慧军 张伟伟 冀娜娜 段敬梅 高翔 《安徽医学》 2025年第1期22-27,共6页
目的探究宫颈癌(CC)患者血清中长链非编码RNA(LncRNA)表面活性剂相关1假基因(SFTA1P)和UBE2R2-AS1表达水平及其与预后的关系。方法选取2018年4月至2021年4月邯郸市妇幼保健院收治的108例CC患者为CC组,100例同期健康体检者为健康组。用... 目的探究宫颈癌(CC)患者血清中长链非编码RNA(LncRNA)表面活性剂相关1假基因(SFTA1P)和UBE2R2-AS1表达水平及其与预后的关系。方法选取2018年4月至2021年4月邯郸市妇幼保健院收治的108例CC患者为CC组,100例同期健康体检者为健康组。用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1对CC的诊断价值;Kaplan-Meier法分析血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1表达水平与CC患者预后的关系;Cox回归分析CC患者预后的影响因素。结果与健康组相比,CC患者血清LncRNA SFTA1P表达水平升高(P<0.05),LncRNA UBE2R2-AS1表达水平降低(P<0.05),且其水平与FIGO分期、淋巴结转移、肌层浸润深度有关(P<0.05);血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1单独及联合诊断CC发生的曲线下面积分别为0.863、0.817和0.915,联合优于单独诊断(Z_(二者联合-LncRNA SFTA1P)=3.057、P=0.002,Z_(二者联合-LncRNA UBE2R2-AS1)=3.564、P<0.001);血清LncRNA SFTA1P高表达组患者3年生存率低于低表达组患者(64.91%比80.39%,χ^(2)=4.443,P=0.035),LncRNA UBE2R2-AS1高表达组患者3年生存率高于低表达组患者(82.00%比63.79%,χ^(2)=5.938,P=0.015);FIGO分期Ⅱb~Ⅲc期、淋巴结转移、肌层浸润深度≥1/2、LncRNA SFTA1P表达水平升高及LncRNA UBE2R2-AS1表达水平降低均为CC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论CC患者血清中LncRNA SFTA1P表达上调,LncRNA UBE2R2-AS1表达下调,其表达水平与肿瘤FIGO分期、淋巴结转移、肌层浸润深度有关,且与患者预后生存密切相关。 展开更多
关键词 宫颈癌 长链非编码RNA SFTA1P 长链非编码RNA UBE2R2-aS1 临床病理特征 预后
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甘蓝型油菜LPAT2-A07基因调控种子含油量和脂肪酸组成
4
作者 秦艺 刘勇 熊兴华 《华北农学报》 北大核心 2025年第1期45-52,共8页
为探究甘蓝型油菜溶血磷脂酸酰基转移酶2(LPAT2)基因的功能,从甘蓝型油菜中PCR同源克隆了BnaLPAT2的一个拷贝(A07),将其构建过表达载体p35S∷BnaLPAT2-A07和种子特异表达载体pNapin∷BnaLPAT2-A07,利用农杆菌介导法遗传转化甘蓝型油菜中... 为探究甘蓝型油菜溶血磷脂酸酰基转移酶2(LPAT2)基因的功能,从甘蓝型油菜中PCR同源克隆了BnaLPAT2的一个拷贝(A07),将其构建过表达载体p35S∷BnaLPAT2-A07和种子特异表达载体pNapin∷BnaLPAT2-A07,利用农杆菌介导法遗传转化甘蓝型油菜中双6号,通过转化植株的PCR检测,分别获得15株和11株转基因阳性植株。经实时荧光定量(Real-time Quantitative PCR,qRT-PCR)检测,过表达T3油菜多数组织中BnaLPAT2-A07基因的表达量较野生型均有显著提升;而种子特异性表达的T3油菜各组织中BnaLPAT2-A07基因都集中在种子的发育与成熟期超强表达。索氏抽提法检测到由35S启动子或Napin启动子驱动的BnaLPAT2-A07转基因油菜种子中的含油量较野生型分别提升1.39,2.36百分点。气相色谱法检测转基因油菜的脂肪酸组分结果显示,亚麻酸的含量较野生型分别提升3.13,1.47百分点。研究结果表明,BnaLPAT2-A07基因具有促进甘蓝型油菜种子油脂合成的功能,但BnaLPAT2-A07对亚麻酸特异选择性功能还需进一步验证。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 过表达 BnaLPAT2-a07 脂肪酸分析 含油量
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沉默AGAP2-AS1通过有氧糖酵解抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移
5
作者 张春利 蔡徐山 +2 位作者 齐结华 席芳 宦宇 《中国优生与遗传杂志》 2025年第2期280-285,共6页
目的探讨长链非编码RNA lnc-AGAP2-AS1对人宫颈癌细胞系HeLa增殖和迁移能力的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人永生化表皮细胞Hacat及宫颈癌细胞HeLa中AGAP2-AS1的表达水平;RT-qPCR验证转染si-AGAP2-AS1后对HeLa细胞AGAP2-AS1... 目的探讨长链非编码RNA lnc-AGAP2-AS1对人宫颈癌细胞系HeLa增殖和迁移能力的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人永生化表皮细胞Hacat及宫颈癌细胞HeLa中AGAP2-AS1的表达水平;RT-qPCR验证转染si-AGAP2-AS1后对HeLa细胞AGAP2-AS1的沉默效率;CCK-8检测沉默AGAP2-AS1对HeLa增殖的影响;划痕实验和Transwell实验法检测沉默AGAP2-AS1对HeLa迁移的影响;酶联免疫吸附试验(ELISA)用于检测细胞培养上清液中葡萄糖和乳酸的水平;Western blot实验检测上皮-间质转化(EMT)和有氧糖酵解中有关蛋白水平差异。结果宫颈癌细胞HeLa中AGAP2-AS1表达高于Hacat(P<0.05);si-AGAP2-AS1可以有效地降低HeLa细胞中AGAP2-AS1的表达(P<0.05);沉默AGAP2-AS1后,HeLa细胞的增殖能力下降(P<0.05),迁移能力也下降(P<0.05);EMT相关蛋白N-cadherin、vimentin及snail水平降低,E-cadherin升高(P<0.05);HeLa细胞摄入葡萄糖及生成乳酸均减少(P<0.05);糖酵解过程重要酶包括己糖激酶(HK2)、磷酸果糖激酶-1(PFK1)、丙酮酸激酶(PKM2)、乳酸脱氢酶(LDHA)和葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)均有所降低(P<0.05)。结论沉默lnc-AGAP2-AS1可能通过抑制有氧糖酵解途径抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 AGAP2-aS1 宫颈癌 糖酵解 增殖 迁移
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长链非编码RNA SRRM2-AS介导肌球蛋白轻链激酶调控鼻咽癌发生进程的机制研究
6
作者 胡明斌 谢萍 +3 位作者 李怡 阳华 章杰 陈少卿 《江西医药》 2025年第4期307-312,共6页
目的探究长链非编码RNA(lncRNA)SRRM2-AS介导肌球蛋白轻链激酶(MYLK)调控鼻咽癌(NPC)发生进程的具体机制。方法将NPC细胞进行转染处理后分离出人NPC高放射敏感性细胞株(CNE2),并分为空白对照组、lncRNA SRRM2-AS敲减组、lncRNA SRRM2-A... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)SRRM2-AS介导肌球蛋白轻链激酶(MYLK)调控鼻咽癌(NPC)发生进程的具体机制。方法将NPC细胞进行转染处理后分离出人NPC高放射敏感性细胞株(CNE2),并分为空白对照组、lncRNA SRRM2-AS敲减组、lncRNA SRRM2-AS过表达组。采用CCK-8方法测评CNE2活性,利用细胞划痕试验来观测细胞迁移能力,通过Transwell实验来定量评估细胞的侵袭特性,并运用蛋白质印迹技术探究与凋亡特征相关的蛋白、下游蛋白MYLK及环磷酸鸟苷-蛋白激酶G(c GMP-PKG)通路表达变化。结果与空白对照组相比,过表达lncRNA SRRM2-AS可以显著上调CNE2的增殖、迁移、侵袭能力,敲减lncRNA SRRM2-AS可以显著下调CNE2的增殖、迁移、侵袭能力,并进一步调控表型功能蛋白水平。对于深入的机制,lncRNA SRRM2-AS可以负向调控MYLK进而抑制其对cGMP-PKG通路的激活,促进NPC的发生发展。结论lncRNA SRRM2-AS可调控NPC细胞增殖、迁移、侵袭,是未来NPC靶向治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 鼻咽癌 长链非编码RNA SRRM2-aS 肌球蛋白轻链激酶 环磷酸鸟苷-蛋白激酶G通路
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血清LncRNA MAGI2-AS3、miR-374b-5p表达水平与前列腺癌患者Gleason分级评分的相关性研究 被引量：2
7
作者 杨林 梁想 邓晋超 《中国中西医结合外科杂志》 2025年第1期70-74,共5页
目的:探讨血清LncRNA MAGI2-AS3、miR-374b-5p表达水平与前列腺癌患者Gleason分级评分的相关性。方法:选取2021年11月—2023年11月于本院接受治疗的前列腺癌患者(n=110)作为前列腺癌组,另选取同期在本院体检的良性前列腺疾病患者(n=110... 目的:探讨血清LncRNA MAGI2-AS3、miR-374b-5p表达水平与前列腺癌患者Gleason分级评分的相关性。方法:选取2021年11月—2023年11月于本院接受治疗的前列腺癌患者(n=110)作为前列腺癌组,另选取同期在本院体检的良性前列腺疾病患者(n=110)作为对照组。采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清中LncRNA MAGI2-AS3、miR-374b-5p表达;采用Spearman法分析血清LncRNA MAGI2-AS3、miR-374b-5p与Gleason分级评分的相关性;采用Pearson法分析血清LncRNA MAGI2-AS3与miR-374b-5p的关系;采用多因素Logistic回归分析影响前列腺癌发生的因素。结果:与对照组相比,前列腺癌组患者血清LncRNA MAGI2-AS3表达水平降低(P <0.05),miR-374b-5p表达水平升高(P <0.05)。前列腺癌患者血清LncRNA MAGI2-AS3与miR-374b-5p表达水平呈负相关(r=-0.673,P <0.05)。多因素Logistic回归分析显示LncRNA MAGI2-AS3高水平是影响前列腺癌发生的保护因素(P <0.05),miR-374b-5p高水平是影响前列腺癌发生的危险因素(P <0.05)。与低危组相比,中危组、高危组血清LncRNA MAGI2-AS3表达水平依次降低(P <0.05),miR-374b-5p表达水平依次升高(P <0.05)。前列腺癌患者血清LncRNA MAGI2-AS3与Gleason分级评分呈负相关(r_(s)=-0.497,P <0.05),miR-374b-5p表达水平与Gleason分级评分呈正相关(r_(s)=0.456,P <0.05)。结论:前列腺癌患者血清LncRNA MAGI2-AS3表达水平显著降低,miR-374b-5p表达水平显著升高,与Gleason分级评分有关。 展开更多
关键词 LncRNA MAGI2-aS3 miR-374b-5p 前列腺癌 Gleason分级评分 相关性
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长链非编码RNA SBF2-AS1在肝癌临床诊疗一体化中的应用价值
8
作者 向冬云 赵莲 +2 位作者 吴惠仪 孙昊 邓敬桓 《武警医学》 2025年第8期668-673,共6页
目的 分析肝癌组织中长链非编码RNA SBF2-AS1(LncRNA SBF2-AS1)的表达及临床意义,探讨其在肝癌诊疗一体化中的应用价值。方法 选取2021~2022年被广西医科大学第一附属医院收治的原发性肝细胞癌54例患者作为研究对象,收集术后切除的肝癌... 目的 分析肝癌组织中长链非编码RNA SBF2-AS1(LncRNA SBF2-AS1)的表达及临床意义,探讨其在肝癌诊疗一体化中的应用价值。方法 选取2021~2022年被广西医科大学第一附属医院收治的原发性肝细胞癌54例患者作为研究对象,收集术后切除的肝癌组织和癌旁组织标本,采集患者的病理组织、临床检验诊断和治疗方式等多项临床治疗资料,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测组织标本中的LncRNA SBF2-AS1表达水平,并利用生物统计方法分析其与临床诊断和治疗指标的相关性,运用生物数据库信息分析LncRNA SBF2-AS1对肝癌的诊断价值。结果 肝癌组织中的LncRNA SBF2-AS1的相对表达量(10.656)明显高于癌旁(1.000),差异有统计学意义(Z=-5.675,P<0.001);LncRNA SBF2-AS1的表达与谷丙转氨酶(r=0.297,P<0.05)、中性粒细胞(r=0.275,P<0.05)水平、不同治疗方式(r=0.332,P<0.05)呈正相关性;根据LncRNA SBF2-AS1表达中位值(M=3.649)将患者分为高表达组(27例)和低表达组(27例),LncRNA SBF2-AS1的表达水平与谷丙转氨酶有关(P<0.05)。通过TCGA数据库获取371例肝癌组织及50例癌旁组织的LncRNA SBF2-AS1相对表达量,ROC曲线下面积(AUC)为0.9122,特异度和灵敏度各为94.00%、79.51%。结论 LncRNA SBF2-AS1在肝癌组织中高表达,与谷丙转氨酶、中性粒细胞和治疗方式有关,可成为肝癌诊断及炎性损伤监测的标志物,具有临床诊疗一体化的应用价值。 展开更多
关键词 肝癌 诊疗一体化 长链非编码RNA SBF2-aS1 应用价值
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LncRNA MAGI2-AS3调节miR-143-3p/PTP4A1轴对宫颈癌细胞的影响
9
作者 李晓雪 高月月 +1 位作者 左慧 张萍 《激光生物学报》 2025年第4期365-373,共9页
为探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)MAGI2-AS3调节miR-143-3p/PTP4A1轴对宫颈癌(CC)细胞的影响,通过RT-qPCR检测54例CC患者术中切除的CC组织及癌旁组织中MAGI2-AS3、miR-143-3p、PTP4A1的表达。将HeLa细胞随机分为对照组、sh-NC组、sh-MA... 为探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)MAGI2-AS3调节miR-143-3p/PTP4A1轴对宫颈癌(CC)细胞的影响,通过RT-qPCR检测54例CC患者术中切除的CC组织及癌旁组织中MAGI2-AS3、miR-143-3p、PTP4A1的表达。将HeLa细胞随机分为对照组、sh-NC组、sh-MAGI2-AS3组、sh-MAGI2-AS3+anti-NC组、sh-MAGI2-AS3+antimiR-143-3p组,测定各组细胞中MAGI2-AS3、miR-143-3p、PTP4A1的表达;检测细胞的增殖、迁移、侵袭情况及PTP4A1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达。利用动物试验验证敲除MAGI2-AS3对CC肿瘤生长及PTP4A1表达的影响。结果显示:CC组织MAGI2-AS3、PTP4A1 mRNA的表达量分别为1.97±0.35、1.73±0.34,高于癌旁组织(1.02±0.33、0.98±0.31),miR-143-3p表达量为0.48±0.14,低于癌旁组织(1.01±0.16)(P<0.05)。相较于sh-NC组和对照组,sh-MAGI2-AS3组HeLa细胞中的A490 nm值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率、侵袭数以及MAGI2-AS3、PTP4A1 mRNA的表达量和PCNA、PTP4A1、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均降低,miR-143-3p mRNA的表达量升高(P<0.05)。相较于sh-MAGI2-AS3组、sh-MAGI2-AS3+anti-NC组,shMAGI2-AS3+anti-miR-143-3p组miR-143-3p mRNA的表达量降低,A490 nm值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率、侵袭数以及PTP4A1 mRNA的表达量和PCNA、PTP4A1、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平升高(P<0.05)。相较于sh-NC组,sh-MAGI2-AS3组移植瘤的质量、体积、Ki-67阳性率、PTP4A1阳性率均降低(P<0.05)。综上所述,MAGI2-AS3靶向负调控mi R-143-3p,mi R-143-3p靶向负调控PTP4A1。敲除MAGI2-AS3可能抑制CC细胞的侵袭、迁移和增殖,可能是通过调节mi R-143-3p/PTP4A1轴实现的。本研究可能为CC的靶向治疗研究提供新的靶点。 展开更多
关键词 LncRNA MAGI2-aS3 miR-143-3p/PTP4A1轴 宫颈癌 迁移 侵袭
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LncRNA IGF2-AS表达上调促进结直肠癌的进展
10
作者 崔丽娇 吴秀 +2 位作者 顾志伟 周宇 喻才元 《基础医学与临床》 2025年第3期323-330,共8页
目的了解lncRNA IGF2-AS在结直肠癌中的表达及临床意义;验证胰岛素样生长因子2反义链(IGF2-AS)在细胞中的生物学功能;筛选受IGF2-AS调控的蛋白分子。方法利用生物信息学预测IGF2-AS在结直肠癌中的表达和临床意义;运用RT-qPCR检测IGF2-AS... 目的了解lncRNA IGF2-AS在结直肠癌中的表达及临床意义;验证胰岛素样生长因子2反义链(IGF2-AS)在细胞中的生物学功能;筛选受IGF2-AS调控的蛋白分子。方法利用生物信息学预测IGF2-AS在结直肠癌中的表达和临床意义;运用RT-qPCR检测IGF2-AS mRNA的表达;运用小干扰RNA敲低IGF2-AS;运用CCK8法、Transwell小室法和流式细胞测量术分别检测细胞的增殖、迁移和凋亡;利用Label-free定量蛋白质组学筛选受IGF2-AS调控的相关因子;运用GenCards、OMIM、TTD等数据库结合蛋白质组学结果筛选出结直肠癌中受IGF2-AS调控的核心靶点。结果生物信息分析表明,IGF2-AS在结直肠癌中显著上调(P<0.001),且其表达可能与肿瘤TNM分期(P<0.01)及有无淋巴结转移(P<0.001)相关;RT-qPCR结果表明,与对照组相比IGF2-AS mRNA在结直肠癌组织和大多数结肠癌细胞中的表达显著上调(P<0.01);临床资料表明,IGF2-AS的表达可能与淋巴结转移(P<0.05)相关;生物学功能实验结果表明,IGF2-AS siRNA转染组结直肠癌细胞增殖率及迁移率均显著减低(P<0.0001),凋亡率显著增加(P<0.05);KRAS、TCF7L2、CASP3等13个蛋白可能是受IGF2-AS调控的核心靶点。结论IGF2-AS在结直肠癌中表达显著上调,可能发挥促癌作用。 展开更多
关键词 结直肠癌 长链非编码RNA 胰岛素样生长因子2反义链(IGF2-aS)
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lncRNA USP2-AS1调节miR-299-3p/MMP2轴对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响
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作者 舒德军 沈玉光 +2 位作者 周维富 卢勋 唐激杨 《现代免疫学》 2025年第2期125-133,共9页
为探究lncRNA USP2-AS1调节miR-299-3p/基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP2)轴对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响,将si-N... 为探究lncRNA USP2-AS1调节miR-299-3p/基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP2)轴对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响,将si-NC、 si-USP2-AS1、 si-USP2-AS1+inhibitor NC和si-USP2-AS1+miR-299-3p inhibitor分别转染至A549细胞并分别命名为相应组别,未做任何处理的A549细胞记为NC组。qRT-PCR检测正常人肺上皮细胞系BEAS-2B及A549细胞中lncRNA USP2-AS1、 miR-299-3p的表达;CCK-8法检测A549细胞的增殖活性;流式细胞术检测A549细胞的凋亡率;Transwell法检测A549细胞的侵袭、迁移数量;Western blotting检测A549细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin, E-cad)、 N-cad、波形蛋白和MMP2的蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因法验证lncRNA USP2-AS1、 miR-299-3p及MMP2的关系;裸鼠异种移植试验检测肿瘤细胞的在体生长情况。结果显示,与BEAS-2B细胞相比,A549细胞lncRNA USP2-AS1、 MMP2表达量显著上调(均P<0.05), miR-299-3p表达显著下调(P<0.05)。与NC组、 si-NC组相比,si-USP2-AS1组A549细胞增殖活性,迁移、侵袭细胞数量,lncRNA USP2-AS1表达量,N-cad、波形蛋白表达量均显著下调(均P<0.05), A549细胞凋亡率、 miR-299-3p表达、 E-cad蛋白表达量均显著上调(均P<0.05);与NC组、 sh-NC组相比,sh-USP2-AS1组移植瘤体积、质量均显著下降(均P<0.05),而抑制miR-299-3p表达减弱了沉默lncRNA USP2-AS1抑制A549细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤生长及促进凋亡的效应;lncRNA USP2-AS1负向调控miR-299-3p/MMP2轴。由此,沉默lncRNA USP2-AS1可能通过上调miR-299-3p下调MMP2表达,进而对A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭以及EMT产生影响。 展开更多
关键词 长链非编码核糖核酸USP2-aS1 微小核糖核酸299-3p/基质金属蛋白酶2轴 非小细胞肺癌 增殖 凋亡 上皮间质转化
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lncR FOXD2-AS1调控miR-145-5p对非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响 被引量：2
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作者 王巍 王志武 +3 位作者 于镓锐 董量 曹博 李剑锋 《山东医药》 CAS 2024年第10期45-48,共4页
目的 探讨长链非编码RNA(lncR)FOXD2-AS1调控微小RNA(miR)-145-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)等生物学特性的影响。方法 体外培养人NSCLC细胞系A549、H1299、SK-MES-1及人正常肺支气管上皮细胞系16H... 目的 探讨长链非编码RNA(lncR)FOXD2-AS1调控微小RNA(miR)-145-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)等生物学特性的影响。方法 体外培养人NSCLC细胞系A549、H1299、SK-MES-1及人正常肺支气管上皮细胞系16HBE,应用RT-qPCR检测各细胞系中lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p表达。选取lncR-FOXD2-AS1相对高表达的SK-MES-1作为敲低实验的研究对象,将SK-MES-1细胞按照转染处理的不同分为NC组(转染si-NC)和si-FOXD2-AS1组(转染si-FOXD2-AS1),转染后,RT-qPCR检测细胞中lncR-FOXD2-AS1、miR-145-5p表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Fibronectin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p的相互关系。结果 与16HBE细胞相比,lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中高表达(P<0.05),miR-145-5p在NSCLC细胞系中低表达(P均<0.05)。与NC组比较,si-FOXD2-AS1组细胞miR-145-5p表达升高(P<0.05),0、24、48 h时OD值降低(P均<0.05),迁移及侵袭穿膜细胞数减少(P均<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),N-cadherin、Fibronectin蛋白表达降低(P均<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-145-5p是lncR-FOXD2-AS1的靶基因。结论 lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中表达升高,敲低lncR-FOXD2-AS1通过靶向调控miR-145-5p抑制NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT进程。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA-FOXD2-aS1 微小RNA-145-5p 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 上皮-间质转化
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LncRNA ZEB2-AS1联合亲本基因ZEB2在卵巢癌SKOV3细胞中的作用及其机制研究 被引量：1
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作者 董辉 王晶 +1 位作者 杨丹 丁永慧 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第13期28-40,共13页
目的探索LncRNA ZEB2-AS1联合亲本基因ZEB2在卵巢癌SKOV3细胞中的功能及可能的机制。方法原位杂交和免疫组织化学分别检测ZEB2-AS1和ZEB2在卵巢癌组织中的表达;建立ZEB2-AS1的过表达和沉默SKOV3细胞模型;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式... 目的探索LncRNA ZEB2-AS1联合亲本基因ZEB2在卵巢癌SKOV3细胞中的功能及可能的机制。方法原位杂交和免疫组织化学分别检测ZEB2-AS1和ZEB2在卵巢癌组织中的表达;建立ZEB2-AS1的过表达和沉默SKOV3细胞模型;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡和周期;细胞免疫荧光和Western blotting检测上皮-间充质相互作用(EMT)相关蛋白的表达;双萤光素酶基因报告实验检测ZEB2-AS1与ZEB2、microRNA-145(miR-145)的结合关系。结果ZEB2-AS1和ZEB2均表达于卵巢癌组织中的细胞质和细胞核;相比SKOV3细胞,ZEB2-AS1过表达的SKOV3细胞增殖能力增强(P<0.05),凋亡能力减弱(P<0.05),侵袭和迁移能力增强(P<0.05),S期细胞数增加(P<0.05),G1期细胞数减少(P<0.05);EMT相关蛋白E-cadherin相对表达量降低(P<0.05),N-cadherin和Vimentin相对表达量升高(P<0.05);而ZEB2-AS1沉默的SKOV3细胞则相反。双萤光素酶报告实验结果证实,ZEB2-AS1和miR-145具有结合关系,ZEB2-AS1与ZEB2 mRNA具有结合关系。结论LncRNA ZEB2-AS1联合亲本基因ZEB2在卵巢癌SKOV3细胞中发挥促EMT的功能作用。 展开更多
关键词 卵巢癌 LncRNA ZEB2-aS1 ZEB2 上皮-间充质相互作用
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lncRNA MAGI2-AS3调节miR-218-5p/KDM2A轴对宫颈癌细胞活性和上皮间质转化的影响 被引量：1
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作者 贲崴 李扬 +1 位作者 罗佳玲 单铁虎 《中国优生与遗传杂志》 2024年第8期1545-1551,共7页
目的探讨lncRNA MAGI2-AS3调节miR-218-5p/赖氨酸去甲基化酶2A(KDM2A)轴对宫颈癌(CC细胞活性)和上皮间质转化(EMT)的影响。方法将体外培养的CaSki细胞分为NC组、si-NC组、si-MAGI2-AS3组、miR-NC组、miR-218-5p mimic组、si-MAGI2-AS3+i... 目的探讨lncRNA MAGI2-AS3调节miR-218-5p/赖氨酸去甲基化酶2A(KDM2A)轴对宫颈癌(CC细胞活性)和上皮间质转化(EMT)的影响。方法将体外培养的CaSki细胞分为NC组、si-NC组、si-MAGI2-AS3组、miR-NC组、miR-218-5p mimic组、si-MAGI2-AS3+inhibitor NC组、si-MAGI2-AS3+miR-218-5p inhibitor组。检测MAGI2-AS3、miR-218-5p、KDM2AmRNA在CC组织、不同细胞及各组CaSki细胞中的表达水平;检测CaSki细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡、Bax、Bcl-2及EMT相关蛋白表达;双荧光素酶实验验证miR-218-5p与MAGI2-AS3、KDM2A的关系。结果CC组织中MAGI2-AS3、KDM2AmRNA表达高于癌旁组织,miR-218-5p低于癌旁组织(P<0.05)。HcerEpic细胞、C-33A细胞、CaSki细胞中MAGI2-AS3、KDM2A mRNA表达均依次升高,miR-218-5p依次降低(P<0.05)。si-MAGI2-AS3组MAGI2-AS3、KDM2AmRNA表达、CaSki细胞增殖率、迁移率、侵袭细胞数、Bcl-2、Vimentin表达均低于NC组和si-NC组,miR-218-5p表达、CaSki细胞凋亡率、Bax、E-cadherin表达均高于NC组和si-NC组(P<0.05);miR-218-5pmimic组KDM2AmRNA表达、CaSki细胞增殖率、迁移率、侵袭细胞数、Bcl-2、Vimentin表达均低于miR-NC组,miR-218-5p表达、CaSki细胞凋亡率、Bax、E-cadherin表达均高于miR-NC组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示miR-218-5p和MAGI2-AS3、KDM2A均存在靶向调控关系(P<0.05)。结论MAGI2-AS3在CC细胞中呈高表达,下调MAGI2-AS3可调节miR-218-5p/KDM2A轴抑制CaSki细胞恶性生物学行为,诱导其凋亡。 展开更多
关键词 MAGI2-aS3 miR-218-5p 赖氨酸去甲基化酶2A 宫颈癌 上皮间质转化
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咪达唑仑通过调控LncRNA NR2F2-AS1对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响
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作者 周宇 曹钦钰 刘蕾 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期1257-1260,共4页
目的 探讨咪达唑仑对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人肾癌细胞786-O,随机分组:咪达唑仑0、20、40、60μmol/L组、si-NC组、si-核受体亚家族2组F成员反义RNA(NR2F2-AS)1组、咪达唑仑+pcDNA组、咪... 目的 探讨咪达唑仑对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人肾癌细胞786-O,随机分组:咪达唑仑0、20、40、60μmol/L组、si-NC组、si-核受体亚家族2组F成员反义RNA(NR2F2-AS)1组、咪达唑仑+pcDNA组、咪达唑仑+pcDNA-NR2F2-AS1组;CCK-8法、流式细胞术与Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡及迁移;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LncRNA NR2F2-AS1表达量;Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关蛋白(Bax)表达量。结果 与咪达唑仑0μmol/L组比较,咪达唑仑20、40、60μmol/L组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bax蛋白水平明显升高,迁移细胞数和Bcl-2蛋白水平明显降低,长链非编码(Lnc)RNA NR2F2-AS1表达量明显降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);转染si-NR2F2-AS1可明显抑制细胞增殖及迁移,并可明显提高细胞凋亡率(P<0.05);与咪达唑仑+pcDNA组比较,咪达唑仑+pcDNA-NR2F2-AS1组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bax蛋白水平明显降低,迁移细胞数和Bcl-2蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论 咪达唑仑可通过抑制LncRNA NR2F2-AS1表达而减弱肾癌细胞增殖及迁移能力,并可诱导肾癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 肾癌 咪达唑仑 LncRNA核受体亚家族2组F成员反义RNA(NR2F2-aS)1 细胞增殖 凋亡 迁移
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lncRNA RRAS2-AS1在LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞炎症中的功能 被引量：2
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作者 王晋鹏 罗仍卓么 +5 位作者 李彦霞 冯芬 王正兴 潘传英 蓝贤勇 王兴平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第14期2874-2888,I0011-I0013,共18页
【背景】奶牛乳腺炎是奶牛中危害最严重的疾病之一,严重影响乳品质,不仅造成经济损失,甚至危及人类健康。已有研究表明,lncRNAs广泛参与人和动物的炎症和免疫调节。lncRNA RRAS2-AS1是我们在前期研究中新发现的差异表达lncRNA,其表达模... 【背景】奶牛乳腺炎是奶牛中危害最严重的疾病之一,严重影响乳品质,不仅造成经济损失,甚至危及人类健康。已有研究表明,lncRNAs广泛参与人和动物的炎症和免疫调节。lncRNA RRAS2-AS1是我们在前期研究中新发现的差异表达lncRNA,其表达模式和功能尚不清楚。【目的】通过探究lncRNA RRAS2-AS1在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)炎症反应中的作用机制,为奶牛乳腺炎的分子调控机制解析和抗乳腺炎分子选育提供理论依据。【方法】利用RT-PCR和RACE等技术进行了lncRNA RRAS2-AS1的克隆,并通过生物信息学方法进行lncRNA RRAS2-AS1的靶基因预测及功能富集分析;利用细胞免疫荧光技术鉴定bMECs,利用细胞核质分离及半定量PCR技术检测了lncRNA RRAS2-AS1的亚细胞定位情况;采用qRT-PCR检测了lncRNA RRAS2-AS1在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导bMECs炎症反应和乳腺炎奶牛乳腺组织中的表达模式;利用LPS诱导bMECs构建了炎症细胞模型,在此基础上,通过lncRNA超表达、qRT-PCR和ELISA等技术研究了lncRNA RRAS2-AS1对炎性bMECs内的促炎细胞因子基因、增殖相关基因和凋亡相关基因在mRNA和(或)蛋白质水平表达的影响,同时采用EdU、CCK-8和流式细胞术进一步验证了lncRNA RRAS2-AS1对bMECs增殖、活力和凋亡的影响。【结果】lncRNA RRAS2-AS1基因的长度为363 bp,主要定位于细胞质中。表达量检测结果表明,与对照组相比,lncRNA RRAS2-AS1在LPS诱导炎症的bMECs和乳腺炎组织中的表达量显著下调(P<0.05);lncRNA RRAS2-AS1超表达试验结果表明,与对照组相比,lncRNA RRAS2-AS1超表达组的炎症信号通路关键基因(TLR4和NF-κB1)、促炎细胞因子基因(IL-1β、IL-6和IL-8)、促凋亡基因(BAD、CASP3和BAX等)的表达量显著下调(P<0.01),而增殖标志基因(CDK2、CDK4和PCNA)的表达量显著上调(P<0.05)。此外,lncRNA RRAS2-AS1超表达组的细胞活力显著增加(P<0.05),而bMECs的凋亡率极显著降低(P<0.01)。【结论】lncRNA RRAS2-AS1在LPS诱导bMECs的炎症反应和乳腺炎奶牛的乳腺组织中均显著下调;超表达lncRNA RRAS2-AS1可下调促炎细胞因子IL-6、IL-8和IL-1β在mRNA和蛋白质水平的表达,并促进细胞活力和增殖、抑制细胞凋亡,从而减轻LPS诱导的bMECs炎症反应,该结果可为解析奶牛乳腺炎的分子调控网络奠定了基础。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺炎 lncRNA RRAS2-aS1 细胞增殖 细胞凋亡
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子痫前期病人长链非编码RNA H19和长链非编码RNA HAND2-AS1表达水平与胰岛素抵抗的相关性研究 被引量：1
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作者 蒋天从 刘志明 +3 位作者 谷孝月 郭婉茹 石冲 戚桂杰 《安徽医药》 CAS 2024年第1期49-53,共5页
目的检测子痫前期病人胎盘组织、血清长链非编码RNA H19(LncRNA H19)与长链非编码RNAHAND2-AS1(Ln⁃cRNA HAND2-AS1)表达水平,并分析其与病人胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法将2021年1—12月在唐山市妇幼保健院建卡的子痫前期孕妇105例作... 目的检测子痫前期病人胎盘组织、血清长链非编码RNA H19(LncRNA H19)与长链非编码RNAHAND2-AS1(Ln⁃cRNA HAND2-AS1)表达水平,并分析其与病人胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法将2021年1—12月在唐山市妇幼保健院建卡的子痫前期孕妇105例作为子痫前期组,根据子痫前期孕妇严重程度分为轻度子痫前期组与重度子痫前期组,另选取同期孕周、年龄相符的健康孕妇97例作为对照组,收集所有孕妇身体质量指数(BMI)、孕周、收缩压、舒张压、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)等一般资料,并计算稳态模型的IR指数(HOMA-IR);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定孕妇血清、胎盘组织中LncRNA H19,LncRNA HAND2-AS1水平;比较对照组与子痫前期组、轻度子痫前期组与重度子痫前期组间血清、胎盘组织LncRNA H19、LncRNA HAND2-AS1水平;Pearson法分析子痫前期孕妇血清、胎盘组织LncRNA H19、LncRNA HAND2-AS1与HOMA-IR的相关性。结果子痫前期组病人收缩压、舒张压高于对照组(P<0.05),且重度子痫前期病人收缩压、舒张压高于轻度子痫前期病人,孕周低于轻度子痫前期病人(P<0.05);与对照组相比,子痫前期组孕妇24 h尿蛋白、FBG[(5.84±0.97)mmol/L比(4.22±0.70)mmol/L]、FINS[(13.37±2.23)mU/L比(7.52±1.25)mU/L]、HOMI-IR水平(3.47±0.57比1.41±0.23)升高(P<0.05),且重度子痫前期孕妇24 h尿蛋白、FBG[(6.90±1.15)mmol/L比(5.24±0.85)mmol/L]、FINS[(13.97±2.32)mU/L比(13.05±2.17)mU/L]、HOMI-IR水平(4.27±0.71比3.03±0.50)高于轻度子痫前期孕妇(P<0.05);与对照组相比,子痫前期组孕妇血清、胎盘组织Ln⁃cRNA H19(2.52±1.42比1.01±0.15,3.75±0.62比1.02±0.17)与LncRNA HAND2-AS1水平(1.98±0.33比1.01±0.15,2.87±0.47比1.02±0.17)升高(P<0.05),且重度子痫前期孕妇血清、胎盘组织LncRNA H19(2.84±0.47比2.34±0.39,4.28±0.71比3.45±0.57)与LncRNA HAND2-AS1水平(2.59±0.43比1.63±0.27,3.56±0.59比2.49±0.41)高于轻度子痫前期孕妇(P<0.05);子痫前期病人血清与胎盘组织间LncRNA H19水平呈正相关(r=0.55,P<0.05),血清与胎盘组织间LncRNA HAND2-AS1水平呈正相关性(r=0.65,P<0.05)。子痫前期孕妇血清、胎盘组织LncRNA H19水平分别与HOMI-IR呈正相关(r=0.53、0.59,P<0.05);血清、胎盘组织LncRNA HAND2-AS1水平分别与HOMI-IR呈正相关(r=0.60、0.61,P<0.05)。结论子痫前期病人血清、胎盘组织LncRNA H19、LncRNA HAND2-AS1高表达,二者与IR密切相关,可能通过影响IR参与子痫前期发生发展。 展开更多
关键词 先兆子痫 RNA 长链非编码 LncRNA H19 LncRNA HAND2-aS1 胰岛素抵抗
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长链非编码RNASUCLG2-AS1通过调节微小RNA-491-5p对非小细胞肺癌细胞增殖和免疫逃逸的影响 被引量：7
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作者 陈娟 郭金莲 +3 位作者 周慧会 刘琳 杨柳 张华 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第7期884-889,共6页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)SUCLG2-AS1对非小细胞肺癌细胞增殖和免疫逃逸的影响及对微小RNA-491-5p(miR-491-5p)的调节作用。方法:通过Cancer LncRNA Census数据库分析SUCLG2-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及SUCLG2-AS1表达量与... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)SUCLG2-AS1对非小细胞肺癌细胞增殖和免疫逃逸的影响及对微小RNA-491-5p(miR-491-5p)的调节作用。方法:通过Cancer LncRNA Census数据库分析SUCLG2-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及SUCLG2-AS1表达量与非小细胞肺癌患者生存期的关系。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SUCLG2-AS1在非小细胞肺癌株A549、PG49、H1975、H2170和人正常肺支气管上皮细胞BEAS-2B中表达量的变化。培养H1975细胞并分为si-NC组和si-SUCLG2-AS1组。集落实验和流式细胞术检测H1975细胞的增殖能力和细胞周期。蛋白质印迹(Western blot)检测H1975细胞免疫相关蛋白细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)和细胞周期相关蛋白细胞周期依赖性蛋白激酶3(Cdk3)、细胞周期蛋白C(Cyclin C)、细胞周期依赖性蛋白激酶2(Cdk2)的表达。LncRMap生物信息学软件预测SUCLG2-AS1可结合的微小RNA。RNA pull-down实验验证SUCLG2-AS1与miR-491-5p的直接结合。通过qRT-PCR检测SUCLG2-AS1对miR-491-5p表达的调节作用。结果:与正常肺组织比较,非小细胞肺癌组织中SUCLG2-AS1表达升高(P<0.01)。SUCLG2-AS1高表达的非小细胞肺癌患者生存期短于SUCLG2-AS1低表达患者(P<0.01)。与BEAS-2B细胞比较,非小细胞肺癌株中SUCLG2-AS1表达升高,H1975细胞中SUCLG2-AS1表达升高最明显(均P<0.05)。与si-NC组比较,si-SUCLG2-AS1组H1975细胞增殖能力降低,G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例减少,G2/M期细胞比例减少(均P<0.01)。与si-NC组比较,si-SUCLG2-AS1组H1975细胞中免疫相关蛋白PD-L1、RORγt表达减少,细胞周期相关蛋白Cdk3、Cyclin C、Cdk2表达减少(均P<0.01)。SUCLG2-AS1靶向直接结合miR-491-5p(均P<0.01)。与si-NC组比较,si-SUCLG2-AS1组H1975细胞中miR-491-5p表达上升(P<0.01)。结论:沉默SUCLG2-AS1可能通过上调miR-491-5p表达抑制非小细胞肺癌细胞的增殖和免疫逃逸。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 SUCLG2-aS1 微小RNA-491-5p 细胞增殖 细胞周期 免疫逃逸
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长链非编码RNA IGF2BP2-AS1通过调控miR-375表达对喉癌细胞迁移及增殖的影响 被引量：1
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作者 王挺 张杨 +2 位作者 郭洁 范崇盛 刘亚芳 《国际医药卫生导报》 2024年第6期968-973,共6页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)-AS1通过调控微RNA-375(miR-375)表达对喉癌细胞迁移和增殖的影响。方法研究时间为2022年1月至2023年11月,研究地点为郑州大学附属洛阳中心医院中心实验室,研究... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)-AS1通过调控微RNA-375(miR-375)表达对喉癌细胞迁移和增殖的影响。方法研究时间为2022年1月至2023年11月,研究地点为郑州大学附属洛阳中心医院中心实验室,研究类型为基础研究。实时荧光定量PCR(qPCR)检测喉癌细胞系AMC-NH-8、TU159、TU138、TU686和支气管上皮细胞系16HBE中IGF2BP2-AS1的表达。以TU686细胞为研究对象,将TU686细胞分为si-NC组和si-IGF2BP2-AS1组,采用IGF2BP2-AS1小干扰RNA下调IGF2BP2-AS1表达水平。划痕愈合实验和CCK-8法分析敲降IGF2BP2-AS1对TU686细胞迁移及增殖的影响。双荧光素酶报告基因实验验证IGF2BP2-AS1与miR-375的靶向关系。qPCR检测敲降IGF2BP2-AS1对miR-375表达的影响。Western blotting检测细胞中迁移蛋白N-钙黏着蛋白(N-Cadherin)、叉头框蛋白C2(FOXC2)和增殖蛋白CDK2、细胞周期蛋白A(Cyclin A)的表达。统计学方法采用单因素方差分析、t检验。结果与16HBE细胞相比,IGF2BP2-AS1在喉癌细胞系中均高表达(F=37.42,P<0.01)。si-IGF2BP2-AS1组TU686细胞划痕愈合率低于si-NC组[(28.16±6.13)%比(65.08±3.82)%],差异有统计学意义(t=5.11,P<0.01)。在铺板后第2、3、4、5天,si-IGF2BP2-AS1组TU686细胞增殖能力均低于si-NC组(t=3.83、3.17、3.02、6.31,均P<0.01)。IGF2BP2-AS1-Wt中,miR-375组相对荧光素酶活性低于miR-NC组(t=8.95,P<0.01)。si-IGF2BP2-AS1组TU686细胞中miR-375表达高于si-NC组[(4.95±0.49)比(1.02±0.40)],差异有统计学意义(t=6.23,P<0.01)。敲降IGF2BP2-AS1后TU686细胞中迁移蛋白N-Cadherin、FOXC2表达与增殖蛋白CDK2、Cyclin A表达均低于si-NC组。结论IGF2BP2-AS1在喉癌细胞系中呈高表达,敲降IGF2BP2-AS1通过调控miR-375表达抑制喉癌TU686细胞的迁移及增殖能力。 展开更多
关键词 喉癌 长链非编码RNA IGF2BP2-aS1 miR-375 迁移 增殖
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LncRNA MAGI2-AS3通过靶向调控miR-1269a/PTEN/AKT通路增强非小细胞肺癌对顺铂化疗的敏感性 被引量：5
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作者 范喜瑞 戚之琳 +6 位作者 邓园洁 杨子晗 孙丽 李国豪 梁娟娟 吴菲 袁力文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2033-2043,共11页
目的研究lncRNA MAGI2-AS3对非小细胞肺癌顺铂耐药的影响及其分子机制。方法采用qRT-PCR检测MAGI2-AS3和miR-1269a在顺铂敏感细胞(A549,H1299)和顺铂耐药细胞(A549/DDP,H1299/DDP)中的表达差异。采用慢病毒敲低A549和H1299中的MAGI2-AS... 目的研究lncRNA MAGI2-AS3对非小细胞肺癌顺铂耐药的影响及其分子机制。方法采用qRT-PCR检测MAGI2-AS3和miR-1269a在顺铂敏感细胞(A549,H1299)和顺铂耐药细胞(A549/DDP,H1299/DDP)中的表达差异。采用慢病毒敲低A549和H1299中的MAGI2-AS3的表达,过表达A549/DDP和H1299/DDP中的MAGI2-AS3并加入20μmol/L顺铂(DDP)处理。A549/DDP和H1299/DDP细胞实验分组为:OE-NC组,OE-MAGI2-AS3组,OE-NC+DDP组,OE-MAGI2-AS3+DDP组,A549和H1299细胞实验分组为:sh-NC组,sh-MAGI2-AS3组,sh-NC+DDP组,sh-MAGI2-AS3+DDP组。CCK-8和细胞克隆形成实验检测细胞存活率,流式细胞术和Western blotting分别检测细胞凋亡率和蛋白表达量,划痕实验和Transwell检测细胞EMT变化。通过网站GEPIA、StarBase和miRDB预测MAGI2-AS3、miR-1269a和PTEN之间的靶向关系,并采用荧光素酶报告基因实验和RIP实验验证。采用miR-1269a mimic和pcDNA3.1-PTEN进行Rescue实验。结果MAGI2-AS3在肺癌组织中的表达显著低于正常癌旁组织(P<0.05)且与患者不良预后相关(P<0.05)。A549/DDP和H1299/DDP中的MAGI2-AS3表达量显著低于A549和H1299(P<0.01)。干扰MAGI2-AS3可以显著促进顺铂处理前、后A549和H1299细胞的存活及EMT进程(P<0.01),同时降低顺铂诱导的细胞凋亡(P<0.005)。过表达MAGI2-AS3可以显著抑制顺铂处理前、后A549/DDP和H1299/DDP细胞存活与EMT进程(P<0.01),同时提升顺铂诱导的细胞凋亡(P<0.005)。MAGI2-AS3与miR-1269a结合在一起,miR-1269a与PTEN 3'UTR结合。在A549/DDP细胞内MAGI2-AS3通过靶向吸附miR-1269a促进PTEN的表达并下调AKT磷酸化从而抑制顺铂刺激下细胞的EMT进程(P<0.01)、促进顺铂诱导的A549/DDP细胞凋亡(P<0.01)。结论LncRNA MAGI2-AS3通过靶向调控miR-1269a/PTEN/AKT信号轴增强非小细胞肺癌对顺铂化疗的敏感性。 展开更多
关键词 LncRNA MAGI2-aS3 miR-1269a 非小细胞肺癌 顺铂耐药
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