很多未知功能结构域DUF(domain of unknown function)在植物生长发育中扮演着重要的角色,本研究以含有DUF1005结构域的基因为研究对象,通过CRISPR/Cas系统对拟南芥中AT1G10020进行基因编辑,在AT1G10020的第二外显子上设计sg RNA靶点序列...很多未知功能结构域DUF(domain of unknown function)在植物生长发育中扮演着重要的角色,本研究以含有DUF1005结构域的基因为研究对象,通过CRISPR/Cas系统对拟南芥中AT1G10020进行基因编辑,在AT1G10020的第二外显子上设计sg RNA靶点序列,构建重组质粒,获得CRISPR/Cas9-AT1G10020重组质粒,并采用农杆菌介导的花序浸染法转化至野生型拟南芥。结果分析发现,经抗性筛选和测序鉴定,共筛选获得6种不同的编辑类型,包括插入、缺失等;且拟南芥幼苗时期的根长发育表型观察显示,基因编辑株系与野生型比较,具有更短的初生根和更少的侧根。本研究获得了AT1G10020编辑纯合突变体,并为DUF1005的生物学功能的研究提供基础,也有助于对未知功能DUF新基因的挖掘和阐释。展开更多
The sequence of the flocculation gene (FLO1G) was determined. The result of sequcencing showed that:the cloned gene contains a large open reading frame (ORF) of 3936 bp and encodes for a protein of 1312 amino acid. Ac...The sequence of the flocculation gene (FLO1G) was determined. The result of sequcencing showed that:the cloned gene contains a large open reading frame (ORF) of 3936 bp and encodes for a protein of 1312 amino acid. According to the result of homologous analysis, the cloned gene is homologous to FLO1 but with 675 bp deletion in the ORF region. The missing part belongs to one of the four repeated sequence family of FLO1. Since the cloned DNA fragment can trigger strong flocculence to non-flocculent strain S.cerevisiae YS58, we concluded that the missing part is not the crutical part for the flocculent ability of the gene.展开更多
作为未来对于物体的识别技术,射频识别在人们生活中占有越来越重要的地位.这项技术将不断深入社会生活,在人们周围无处不在.由于这项技术的广泛应用,它的安全性以及涉及到个人生活的隐私问题不得不引起各界的关注.最初考虑到读卡器和标...作为未来对于物体的识别技术,射频识别在人们生活中占有越来越重要的地位.这项技术将不断深入社会生活,在人们周围无处不在.由于这项技术的广泛应用,它的安全性以及涉及到个人生活的隐私问题不得不引起各界的关注.最初考虑到读卡器和标签之间通讯的可视性以及因特网络潜在的诸多攻击,研究者主要针对读卡器和后端数据库的通讯安全问题,做出了很多的工作.随着UHF标签的推行,读卡器和射频标签通讯范围增大,它们之间的通讯不再安全.本文针对读卡器和标签之间通讯中可能受到的攻击进行分析,建立了一个保证它们通讯安全的模型,依据该模型对EPC C lass1 G en2(EPC C 1G 2)协议进行分析,指出了协议可能受到的攻击,并提出了具有身份验证功能的协议修改方案.展开更多
目的:探讨CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达的负调控作用。方法:设计合成包含CYP3A4*1G G或A等位基因的一系列基因片段(外显子10与内含子10交界处287和181 bp),构建CYP3A4*1G正向位于CYP3A4启动子上游的荧光素酶报告基因载体,与内参质粒pRL...目的:探讨CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达的负调控作用。方法:设计合成包含CYP3A4*1G G或A等位基因的一系列基因片段(外显子10与内含子10交界处287和181 bp),构建CYP3A4*1G正向位于CYP3A4启动子上游的荧光素酶报告基因载体,与内参质粒pRL-TK共转染Hep G2细胞,通过双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果:与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在287 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=795.575,P<0.001),且G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在181 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=23.218,P<0.001),而G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在CYP3A4内含子10与外显子10交界处CYP3A4*1G存在与CYP3A4*1G变异无关的CYP3A4启动子的抑制元件,该抑制元件对CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达起负调控作用。展开更多
文摘很多未知功能结构域DUF(domain of unknown function)在植物生长发育中扮演着重要的角色,本研究以含有DUF1005结构域的基因为研究对象,通过CRISPR/Cas系统对拟南芥中AT1G10020进行基因编辑,在AT1G10020的第二外显子上设计sg RNA靶点序列,构建重组质粒,获得CRISPR/Cas9-AT1G10020重组质粒,并采用农杆菌介导的花序浸染法转化至野生型拟南芥。结果分析发现,经抗性筛选和测序鉴定,共筛选获得6种不同的编辑类型,包括插入、缺失等;且拟南芥幼苗时期的根长发育表型观察显示,基因编辑株系与野生型比较,具有更短的初生根和更少的侧根。本研究获得了AT1G10020编辑纯合突变体,并为DUF1005的生物学功能的研究提供基础,也有助于对未知功能DUF新基因的挖掘和阐释。
文摘The sequence of the flocculation gene (FLO1G) was determined. The result of sequcencing showed that:the cloned gene contains a large open reading frame (ORF) of 3936 bp and encodes for a protein of 1312 amino acid. According to the result of homologous analysis, the cloned gene is homologous to FLO1 but with 675 bp deletion in the ORF region. The missing part belongs to one of the four repeated sequence family of FLO1. Since the cloned DNA fragment can trigger strong flocculence to non-flocculent strain S.cerevisiae YS58, we concluded that the missing part is not the crutical part for the flocculent ability of the gene.
文摘作为未来对于物体的识别技术,射频识别在人们生活中占有越来越重要的地位.这项技术将不断深入社会生活,在人们周围无处不在.由于这项技术的广泛应用,它的安全性以及涉及到个人生活的隐私问题不得不引起各界的关注.最初考虑到读卡器和标签之间通讯的可视性以及因特网络潜在的诸多攻击,研究者主要针对读卡器和后端数据库的通讯安全问题,做出了很多的工作.随着UHF标签的推行,读卡器和射频标签通讯范围增大,它们之间的通讯不再安全.本文针对读卡器和标签之间通讯中可能受到的攻击进行分析,建立了一个保证它们通讯安全的模型,依据该模型对EPC C lass1 G en2(EPC C 1G 2)协议进行分析,指出了协议可能受到的攻击,并提出了具有身份验证功能的协议修改方案.
文摘目的:探讨CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达的负调控作用。方法:设计合成包含CYP3A4*1G G或A等位基因的一系列基因片段(外显子10与内含子10交界处287和181 bp),构建CYP3A4*1G正向位于CYP3A4启动子上游的荧光素酶报告基因载体,与内参质粒pRL-TK共转染Hep G2细胞,通过双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果:与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在287 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=795.575,P<0.001),且G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在181 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=23.218,P<0.001),而G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在CYP3A4内含子10与外显子10交界处CYP3A4*1G存在与CYP3A4*1G变异无关的CYP3A4启动子的抑制元件,该抑制元件对CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达起负调控作用。
