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慢性髓性白血病红系分化相关miRNA-mRNA网络的构建与分析
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作者 王静艳 杨玉 +5 位作者 张涛 彭琳茜 迟睿 高吴陆怡 孙晓航 商宇 《黑龙江医学》 2025年第5期515-519,共5页
目的:确定慢性髓性白血病(CML)红系分化过程中起关键作用的微小核糖核酸(miRNA)和信使核糖核酸(mRNA),并揭示它们之间的网络调控关系以及其对信号通路的影响。方法:利用GEO数据库筛选出CML红系分化后表达显著改变的miRNA与mRNA,并通过DI... 目的:确定慢性髓性白血病(CML)红系分化过程中起关键作用的微小核糖核酸(miRNA)和信使核糖核酸(mRNA),并揭示它们之间的网络调控关系以及其对信号通路的影响。方法:利用GEO数据库筛选出CML红系分化后表达显著改变的miRNA与mRNA,并通过DIANA tools分析平台的TarBase v.8工具与Cytoscape软件构建miRNA-mRNA调控网络,进一步筛选出发挥关键作用的枢纽miRNA。使用DIANA tools分析平台的mirPath v.3工具与Metascape分析平台分别对miRNA与mRNA的进行KEGG信号通路富集分析。最后,通过实时荧光定量PCR的方法验证红系分化对CML细胞枢纽miRNA表达的影响。结果:共筛选出表达显著差异的4281个mRNA与475个miRNA,其中差异最为显著的基因包括ATP2A3、CXCL8、hsa-miR-219a-5p和hsa-miR-154-5p等。miRNA-mRNA网络分析发现,hsa-miR-520c-3p等4个miRNA是表达显著降低miRNA的网络枢纽,而hsa-miR-128-3p等11个miRNA是表达显著升高miRNA的网络枢纽。信号通路富集分析发现差异表达miRNA与mRNA主要富集于PI3K-Akt信号通路等。体外实验结果显示,在氯化血红素处理的K562细胞中,hsa-miR-520c-3p的相对表达量显著减少,而hsa-miR-128-3p的相对表达量则显著增加。结论:通过构建miRNA-mRNA网络全面探讨了CML红系分化过程中miRNA与mRNA之间的调控作用,揭示了发挥关键作用的miRNA与信号通路,为理解CML红系分化的调控机制提供了新视角,并为CML治疗提供了潜在靶标。 展开更多
关键词 慢性髓性白血病 红系分化 miRNA-mRNA网络
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假基因GTF3AP2参与调控造血干祖细胞向红系分化
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作者 夏澜 荣誉 +2 位作者 夏洪恺 马艳妮 余佳 《基础医学与临床》 2025年第6期735-740,共6页
目的 探究假基因GTF3AP2对红系分化的影响。方法 通过高通量转录组测序鉴定可能在红系分化中发挥作用的功能性假基因GTF3AP2,在CD34+造血干祖细胞中通过shRNA抑制GTF3AP2内源表达,利用集落形成实验检测造血干细胞的集落形成能力以及流... 目的 探究假基因GTF3AP2对红系分化的影响。方法 通过高通量转录组测序鉴定可能在红系分化中发挥作用的功能性假基因GTF3AP2,在CD34+造血干祖细胞中通过shRNA抑制GTF3AP2内源表达,利用集落形成实验检测造血干细胞的集落形成能力以及流式分析检测红系/巨核系祖细胞的比例变化,并通过转录组测序确定其在红系分化中的作用,揭示体外敲降GTF3PAP2后细胞分子水平的变化。结果 抑制GTF3AP2的内源表达后,细胞的扩增能力显著增强,其中红系集落数目明显增多(P<0.001),CD71+CD235a+红细胞前体细胞比例显著增加(P<0.01),而CD71-CD235a+成熟红细胞比例减少(P<0.05),同时红系分化相关基因如KLF1、HBB、GYPA、EPOR、TFRC等表达显著下降。结论 敲降GTF3AP2促进红系前体细胞扩增,抑制红细胞成熟,提示GTF3AP2可能在红系分化过程中发挥调控作用。 展开更多
关键词 假基因 红系分化 转录组测序 GTF3AP2
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转录因子PU.1调控红系分化的分子机制及其在血液疾病中的作用
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作者 杨子江 胡丹 张秀娟 《生理学报》 北大核心 2025年第5期855-866,共12页
转录因子PU.1作为ETS家族的核心成员,在造血干细胞的多谱系分化中扮演着至关重要的角色,尤其在调控红系分化过程中具有关键作用。PU.1通过调控红系分化相关分子的转录,并与其他关键转录因子相互作用,精细调控造血干细胞向红系细胞的分... 转录因子PU.1作为ETS家族的核心成员,在造血干细胞的多谱系分化中扮演着至关重要的角色,尤其在调控红系分化过程中具有关键作用。PU.1通过调控红系分化相关分子的转录,并与其他关键转录因子相互作用,精细调控造血干细胞向红系细胞的分化过程。PU.1在红细胞的发育和功能中发挥着不可替代的作用,其表达的异常与多种血液疾病的发生和进展紧密相关,包括白血病、骨髓增生异常综合征和各类贫血症。本文综合分析了PU.1在红系分化各阶段的功能及其作用机制,并探讨了其在相关血液疾病中的潜在作用;不仅深化了对PU.1调控红系分化分子机制的认识,而且为基于PU.1的血液疾病治疗策略提供了理论依据。 展开更多
关键词 PU.1 红系分化 转录因子 细胞生成
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miR-520c-3p/CXCL8信号轴在慢性髓系白血病细胞红系分化中的调控作用
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作者 杨玉 商宇 +4 位作者 倪蕾 宫梓琳 王然 王丹 王静艳 《癌变·畸变·突变》 CAS 2024年第6期438-443,共6页
目的:探讨miR-520c-3p/CXCL8信号轴在慢性髓系白血病(CML)细胞红系分化中的作用及其机制。方法:用氯化血红素诱导人CML细胞系K562细胞红系分化,逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测CXCL8 mRNA的表达水平。用不同浓度CXCL8(0、20、40... 目的:探讨miR-520c-3p/CXCL8信号轴在慢性髓系白血病(CML)细胞红系分化中的作用及其机制。方法:用氯化血红素诱导人CML细胞系K562细胞红系分化,逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测CXCL8 mRNA的表达水平。用不同浓度CXCL8(0、20、40、60、80和100 ng/mL)处理K562细胞72 h,RT-qPCR实验检测γ-globin mRNA的表达情况,据此分析CXCL8对K562细胞红系分化的影响。将miR-520c-3p模拟物和inhibitor转染到K562细胞以增强或抑制miR-520c-3p的功能,RT-qPCR法检测γ-globin mRNA的表达水平,分析miR-520c-3p对K562细胞红系分化的影响。分别采用Western blot和RT-qPCR实验检测CXCL8 mRNA和蛋白的表达水平,观察miR-520c-3p对CXCL8表达的影响。细胞分为实验组(共转染miR-520c-3p模拟物与CXCL8 3′-UTR)和对照组(共转染模拟物对照与CXCL8 3′-UTR),用双荧光素酶报告基因实验检测miR-520c-3p是否靶向CXCL8的3′-UTR。结果:与对照组相比,氯化血红素诱导分化处理后,K562细胞中CXCL8 mRNA的表达水平升高(P<0.01)。与未处理组相比,不同剂量CXCL8处理组K562细胞中γ-globin mRNA的表达水平均明显升高(P<0.01)。与阴性对照组细胞相比,miR-520c-3p模拟物转染组K562细胞中γ-globin mRNA的表达水平、CXCL8 mRNA和蛋白表达水平均下降(均为P<0.01);miR-520c-3p抑制物转染组细胞中γ-globin mRNA表达水平、CXCL8 mRNA和蛋白表达水平均上升(均为P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验检测发现,与对照组相比,实验组的相对荧光素酶活性明显下降(P<0.01)。结论:本研究揭示了miR-520c-3p/CXCL8信号轴在CML细胞红系分化中的关键作用。miR-520c-3p通过靶向调控CXCL8的表达,在K562细胞的红系分化过程中发挥抑制效应。 展开更多
关键词 慢性髓白血病 miR-520c-3p CXCL8 红系分化
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白藜芦醇对血虚证小鼠模型的改善作用及诱导红系分化机制研究 被引量:2
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作者 李佳奇 何睿 +2 位作者 张一童 刘海静 王嫦鹤 《中南药学》 CAS 2024年第6期1505-1511,共7页
目的 以血虚证小鼠模型和K562细胞为对象,研究白藜芦醇促进骨髓造血恢复及诱导红系分化的作用机制。方法 采用环磷酰胺诱导血虚证小鼠模型,BALB/c小鼠随机分为对照组,模型组,白藜芦醇低、中、高剂量组(50、100、200 mg·kg^(-1)),每... 目的 以血虚证小鼠模型和K562细胞为对象,研究白藜芦醇促进骨髓造血恢复及诱导红系分化的作用机制。方法 采用环磷酰胺诱导血虚证小鼠模型,BALB/c小鼠随机分为对照组,模型组,白藜芦醇低、中、高剂量组(50、100、200 mg·kg^(-1)),每组8只,连续给药10 d后,采用全自动血细胞分析仪检测小鼠外周血血常规;采用酶联免疫法(ELISA)分析小鼠血浆中白细胞介素-6(IL-6)、促红细胞生成素(EPO)浓度;流式细胞术检测不同浓度白藜芦醇对K562细胞凋亡、周期分布及细胞表面红系标志蛋白(CD71、CD235a)的影响;RT-qPCR检测红系分化相关基因(CD235a,CD71,GATA1,γ-globin,HBA1,HBB 和 ZFPM1)的表达,Western blot法检测JNK1/2/3和ERK1/2表达。结果 与模型组比较,白藜芦醇可不同程度提高模型组小鼠外周血中白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、网织红细胞(RET)数量与血红蛋白(HGB)浓度(P<0.05),升高血浆中的IL-6、EPO浓度(P<0.05)。流式细胞术结果表明,白藜芦醇能够通过S期阻滞抑制K562细胞增殖,诱导其凋亡;与对照组相比,白藜芦醇能显著增加红系标志抗原CD71、CD235a阳性表达率,且存在浓度依赖性(P<0.05)。RT-qPCR结果表明,白藜芦醇可呈剂量依赖性上调CD235a、CD71、GATA1、γ-globin、HBA1、HBB等红系分化相关基因的表达(P<0.05)。Western blot结果表明,白藜芦醇可上调ERK1/2和JNK1/2/3蛋白的磷酸化水平。结论 白藜芦醇能够通过调节JNK通路和ERK通路,增加细胞表面抗原CD71、CD235a阳性表达,增加红系分化关键基因的表达,诱导K562细胞红系分化,并能改善小鼠由环磷酰胺所致的血虚证症状,为白藜芦醇促进造血的作用机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 白藜芦醇 血虚证 K562细胞 红系分化 ERK通路 JNK通路
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全反式维甲酸调控K562细胞红系分化的表观遗传机制
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作者 刘春亚 贾炳豪 +2 位作者 唐琴 孙元田 任立成 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1441-1452,共12页
全反式维甲酸(ATRA)是早幼粒细胞分化的有效诱导剂,其对红系分化过程的作用尚不完全清楚。为研究ATRA在红系分化进程中的作用及其表观遗传调控机制,本文以诱导白血病细胞K562向红系分化为模型,对ATRA干扰红系分化过程的调控机制进行研... 全反式维甲酸(ATRA)是早幼粒细胞分化的有效诱导剂,其对红系分化过程的作用尚不完全清楚。为研究ATRA在红系分化进程中的作用及其表观遗传调控机制,本文以诱导白血病细胞K562向红系分化为模型,对ATRA干扰红系分化过程的调控机制进行研究。首先利用血红素(he-min)诱导K562细胞向红系分化;流式细胞术结果显示,ATRA影响细胞向红系分化过程中的谱系变化,阻滞细胞分化进程;ATRA处理分化中的细胞后,红系分化相关基因表达水平降低;而通过3C、FAIRE和ChIP技术对其中的表观遗传机制进行探究发现,ATRA处理细胞后,β-珠蛋白家族基因座位内的染色质可及性降低,LCR与其靶基因启动子之间的相互作用频率降低;而基因座位染色质可及性降低导致了红系相关转录因子GATA1、LDB1、LMO2和TAL1在LCR及珠蛋白家族基因座位的启动子区的富集频率降低。上述结果表明,ATRA处理分化中的细胞导致红系分化相关基因的染色质可及性降低,更加封闭的染色质结构阻碍了LCR招募转录因子与基因启动子区的结合,进而抑制β-珠蛋白家族基因表达,这种动态的变化过程阐明了ATRA调控红系分化的表观遗传机制。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 红系分化 染色质构象捕获 染色质免疫沉淀 基因表达调控
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KLFs对珠蛋白基因表达和红系分化的调控作用 被引量:9
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作者 熊倩 张昭军 方向东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期693-699,共7页
Krüppel样因子(Krüppel-like factors,KLFs)是一组与真核基因转录调控密切相关的锌指蛋白.KLFs高度保守的羧基末端含3个串联的Cys2His2型锌指结构,用于结合GC盒和CACCC盒等DNA序列.红细胞中特异表达的珠蛋白基因和许多红系调... Krüppel样因子(Krüppel-like factors,KLFs)是一组与真核基因转录调控密切相关的锌指蛋白.KLFs高度保守的羧基末端含3个串联的Cys2His2型锌指结构,用于结合GC盒和CACCC盒等DNA序列.红细胞中特异表达的珠蛋白基因和许多红系调控因子中都含有CACCC盒.已有研究发现,多个KLFs通过结合CACCC盒参与调控珠蛋白基因表达和红系分化,例如,KLF1通过结合β-珠蛋白启动子和位点控制区(locus control region,LCR),促进β-珠蛋白的表达、γ-向β-珠蛋白基因的转换和红系分化;KLF2、KLF11和KLF13分别促进ε-和γ-珠蛋白基因的表达;KLF4促进α-和γ-珠蛋白基因的表达;KLF3和KLF8则抑制ε-和γ-珠蛋白基因的表达.本文综述了KLFs调控珠蛋白基因表达和红系分化的研究进展. 展开更多
关键词 Krüppel样因子(KLFs) CACCC盒 珠蛋白 红系分化
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补肾益髓生血法AA大鼠含药血清对大鼠造血干细胞红系分化JAK2/STAT5信号通路的影响 被引量:7
8
作者 田晨 赵宗江 +5 位作者 张新雪 张丰丰 程明秀 王颖超 赵敬 吴志奎 《世界中医药》 CAS 2014年第6期713-716,721,共5页
目的:探讨补肾益髓生血法再生障碍性贫血(Aplastic Anemia,AA,简称再障)大鼠含药血清对大鼠骨髓造血干细胞红系分化JAK2/STAT5信号通路的影响。方法:在前期整体动物实验的基础上,体外培养正常大鼠造血干细胞,诱导其定向红系分化,分为空... 目的:探讨补肾益髓生血法再生障碍性贫血(Aplastic Anemia,AA,简称再障)大鼠含药血清对大鼠骨髓造血干细胞红系分化JAK2/STAT5信号通路的影响。方法:在前期整体动物实验的基础上,体外培养正常大鼠造血干细胞,诱导其定向红系分化,分为空白对照组、正常对照组、模型组、司坦唑醇组(康力龙组)、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组,在培养体系中加入含药血清干预4d后,提取红系细胞总RNA及蛋白,分别采用RT-PCR和Western blot检测细胞JAK2、STAT5mRNA及蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比,模型组细胞JAK2、STAT5mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.01);与模型组相比,各治疗组JAK2、STAT5mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01或P<0.05);滋肾生血组JAK2、STAT5mRNA及蛋白表达高于益髓生血组和温肾生血组(P<0.05)。结论:补肾益髓生血法能够增强JAK2、STAT5的表达,可能通过影响JAK2/STAT5信号通路来促进红系细胞的分化成熟,其中滋肾生血法优于益髓生血法和温肾生血法。 展开更多
关键词 补肾益髓生血法 再障 造血干细胞 红系分化 JAK2STAT5信号通路
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苦参碱上调K562细胞γ珠蛋白mRNA表达和诱导红系分化 被引量:11
9
作者 张翠梅 尹晓娟 封志纯 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期218-220,共3页
目的研究苦参碱对K562细胞γ珠蛋白mRNA表达及红系分化作用。方法不同水平苦参碱诱导K562细胞6d,应用台盼蓝拒染试验细胞计数、联苯胺染色、Wright-Gimesa染色进行红系分化的研究,同时应用荧光定量RT-PCR技术来相对定量研究药物诱导后G... 目的研究苦参碱对K562细胞γ珠蛋白mRNA表达及红系分化作用。方法不同水平苦参碱诱导K562细胞6d,应用台盼蓝拒染试验细胞计数、联苯胺染色、Wright-Gimesa染色进行红系分化的研究,同时应用荧光定量RT-PCR技术来相对定量研究药物诱导后Gγ、Aγ珠蛋白基因mRNA表达水平的变化。结果K562细胞增殖抑制程度随苦参碱水平增大而增加,联苯胺染色阳性细胞数由未诱导时的0.7%最高可上升至15.7%,且在形态上出现向红系分化的特征,同时伴有Gγ珠蛋白mRNA表达增加。结论苦参碱可引起K562细胞增殖抑制,在诱导其向红系方向分化中伴有Gγ珠蛋白mRNA表达被上调,为药物诱导治疗β珠蛋白基因缺陷性疾病提供实验依据。 展开更多
关键词 苦参碱 红系分化 γ珠蛋白基因 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应
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植物单宁对K562细胞诱导红系分化抑制作用 被引量:4
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作者 易宗春 张光垚 +2 位作者 孙艳 刘延泽 王钊 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期786-788,共3页
目的研究可水解单宁诃子酸和特里马素I对氯化高铁血红素和丁酸钠诱导K562细胞红系分化的影响。方法四甲基偶氮噻唑蓝法分析诃子酸和特里马素I对K562细胞生长的影响,联苯胺染色法检测血红蛋白合成情况,应用免疫荧光和流式细胞术检测血型... 目的研究可水解单宁诃子酸和特里马素I对氯化高铁血红素和丁酸钠诱导K562细胞红系分化的影响。方法四甲基偶氮噻唑蓝法分析诃子酸和特里马素I对K562细胞生长的影响,联苯胺染色法检测血红蛋白合成情况,应用免疫荧光和流式细胞术检测血型糖蛋白A(GPA)在细胞表面的表达。结果诃子酸和特里马素I在0.04~0.09 mmol/L浓度下均可显著抑制K562细胞的生长增殖。2种单宁化合物(0.002~0.01 mmol/L)可显著抑制丁酸钠诱导的K562细胞血红蛋白合成,2种单宁化合物(0.01~0.05 mmol/L)还可显著抑制氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成,特里马素I(0.01 mmol/L)还抑制丁酸钠诱导的GPA在细胞表面表达。结论诃子酸和特里马素I对红系分化有抑制作用。 展开更多
关键词 诃子酸 红系分化 血型糖蛋白A 特里马素I
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铅离子对K562细胞红系分化的影响 被引量:4
11
作者 吴小荣 吕超 +3 位作者 李晓飞 韩庆玲 王杰 易宗春 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期442-444,共3页
目的探索金属离子铅对K562细胞红系分化能力的影响。方法应用胎盼蓝染色排除法分析铅离子对K562细胞的活性的影响;用联苯胺染色法检测铅离子作用下K562细胞的红系分化率;利用荧光标记抗体结合流式细胞技术分析铅离子处理K562细胞的细胞... 目的探索金属离子铅对K562细胞红系分化能力的影响。方法应用胎盼蓝染色排除法分析铅离子对K562细胞的活性的影响;用联苯胺染色法检测铅离子作用下K562细胞的红系分化率;利用荧光标记抗体结合流式细胞技术分析铅离子处理K562细胞的细胞表面转铁蛋白受体CD71的表达。结果铅离子(10~50μmol/L)分别作用24、48和72 h对K562细胞生长有浓度依赖性的抑制作用;铅离子(10~30μmol/L)作用48 h对氯化高铁血红素诱导的K562细胞血红蛋白合成表现出较为明显的浓度依赖性抑制;铅离子(30μmol/L)作用48 h可一定程度地上调CD71在细胞表面的表达。结论铅离子在一定的浓度作用下对K562细胞的诱导红系分化有抑制作用,为进一步应用K562细胞研究铅离子的红系血液毒性的细胞分子机制提供了一定的实验依据。 展开更多
关键词 毒性 红系分化
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miR-34a-5p抑制K562细胞红系分化 被引量:4
12
作者 赵华路 卜雯婧 +3 位作者 李玉霞 翟頔 温馨 余佳 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第2期167-173,共7页
目的探索miR-34a-5p对K562细胞红系分化的影响。方法分别用miR-34a-5p模拟物和反义抑制寡核苷酸转染K562细胞,用real-time PCR法检测过表达或干扰效率,并进一步用流式细胞术和联苯胺染色法检测K562细胞向红系的分化情况;通过Western blo... 目的探索miR-34a-5p对K562细胞红系分化的影响。方法分别用miR-34a-5p模拟物和反义抑制寡核苷酸转染K562细胞,用real-time PCR法检测过表达或干扰效率,并进一步用流式细胞术和联苯胺染色法检测K562细胞向红系的分化情况;通过Western blot方法检测miR-34a-5p的靶基因。结果 miR-34a-5p在K562细胞红系分化过程中呈现表达下降趋势;在K562细胞中过表达miR-34a-5p可抑制hemin诱导的红系分化(P<0.05);反之,干扰K562内源的miR-34a-5p表达会对K562红系分化产生促进作用(P<0.01);另一方面,miR-34a-5p通过靶向抑制c-MYB的表达抑制细胞向红系分化。结论 miR-34a-5p通过抑制c-MYB在K562细胞早期红系分化过程中发挥促进作用。 展开更多
关键词 miR-34a-5p K562 C-MYB 红系分化
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AQP1在维甲酸诱导红白血病细胞红系分化中的作用 被引量:2
13
作者 危敏 石嵘 +2 位作者 姜立 王妮莎 马文丽 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1689-1694,共6页
目的建立稳定抑制水通道蛋白1(AQP1)表达的K562细胞株,探讨AQP1在维甲酸(RA)诱导红白血病细胞红系分化中的作用。方法 RA处理K562细胞,通过real-time PCR法检测γ-珠蛋白表达和分光光度法检测血红蛋白的含量研究RA对K562细胞红系分化的... 目的建立稳定抑制水通道蛋白1(AQP1)表达的K562细胞株,探讨AQP1在维甲酸(RA)诱导红白血病细胞红系分化中的作用。方法 RA处理K562细胞,通过real-time PCR法检测γ-珠蛋白表达和分光光度法检测血红蛋白的含量研究RA对K562细胞红系分化的影响。Real-time PCR法、蛋白质印迹法检测RA诱导后K562细胞AQP1转录和蛋白表达水平的变化。设计特异AQP1 shRNA序列,构建pSUPER-retro-puro重组质粒转染K562细胞,筛选建立稳定抑制AQP1基因表达的K562细胞株(K562-shAQP1);通过比较K562-shAQP1细胞株与对照组细胞在维甲酸诱导后γ-珠蛋白和血红蛋白的表达,研究AQP1在维甲酸诱导K562细胞红系分化中的作用。结果 RA处理K562细胞后红系分化指标γ-珠蛋白和血红蛋白的表达均明显增加,同时AQP1 mRNA及蛋白表达随RA作用时间显著增加(P<0.01)。pSUPER-retro-puro-shAQP1干扰载体转染K562细胞后AQP1基因在转录和蛋白水平上的表达均被抑制,差异有统计学意义(P<0.01);K562-shAQP1细胞与对照K562细胞相比,在RA诱导后γ-珠蛋白和血红蛋白表达受到不同程度的抑制,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 RA诱导K562细胞红系分化后AQP1表达显著增加,而抑制AQP1基因的表达可部分阻断RA诱导红系分化的作用,说明AQP1在RA诱导K562细胞红系分化过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 水通道蛋白1 维甲酸 红系分化 shRNA K562细胞
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CDK2促进K562细胞早期红系分化 被引量:4
14
作者 李均 岳瑞华 +1 位作者 沈钧乐 肖俊 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第5期561-564,共4页
目的探讨细胞周期调节蛋白CDK2对K562细胞红系分化的影响。方法分别用CDK2表达质粒和干扰RNA分子转染K562细胞,用Western blot法检测过表达或干扰效率,使用real-time PCR和联苯胺染色法检测K562细胞分化。结果 CDK2在K562细胞红系分化... 目的探讨细胞周期调节蛋白CDK2对K562细胞红系分化的影响。方法分别用CDK2表达质粒和干扰RNA分子转染K562细胞,用Western blot法检测过表达或干扰效率,使用real-time PCR和联苯胺染色法检测K562细胞分化。结果 CDK2在K562细胞红系分化早期呈现表达上升趋势;在K562细胞中过表达CDK2可促进hemin诱导的红系分化;反之,干扰K562内源的CDK2表达会对K562红系分化产生抑制作用。结论 CDK2在K562细胞早期红系分化过程中发挥促进作用。 展开更多
关键词 CDK2 K562 γ-珠蛋白 红系分化
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DLK1在急性白血病中的表达及其在K562细胞红系分化中的作用 被引量:2
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作者 唐雪元 龙潺 +1 位作者 王成红 肖广芬 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期886-891,共6页
目的:探讨急性白血病(acute leukemia,AL)患者骨髓单个核细胞DLK1基因的表达水平及其在K562细胞红系分化中的作用。方法:采用RT-PCR对65例AL患者及34例正常骨髓对照进行DLK1mRNA水平的检测,对其中20例AL患者及13例正常骨髓用Western印... 目的:探讨急性白血病(acute leukemia,AL)患者骨髓单个核细胞DLK1基因的表达水平及其在K562细胞红系分化中的作用。方法:采用RT-PCR对65例AL患者及34例正常骨髓对照进行DLK1mRNA水平的检测,对其中20例AL患者及13例正常骨髓用Western印迹法检测DLK1蛋白表达水平。培养K562细胞,用氯化高铁血红素(hemin)诱导其分化,观察DLK1在红系分化中的变化。结果:在AL患者和正常骨髓对照的骨髓单个核细胞中DLK1基因均存在明确表达。DLK1mRNA的表达水平AL组高于对照组,差异有统计学意义(P=0.018),但在ALL和ANLL之间DLK1mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05),且DLK1mRNA的表达水平与患者初诊时骨髓原始细胞数、外周血白细胞数及血小板数无关。对部分样品检测DLK1蛋白的表达,发现AL患者DLK1蛋白阳性表达率高于对照组,与mRNA表达趋势一致。在hemin诱导K562细胞向红系分化过程中,DLK1mRNA的表达水平逐渐下降。结论:DLK1基因可能参与了AL的发病过程,但DLK1mRNA的表达水平与AL患者某些临床特征无相关性。DLK1基因可能抑制K562细胞向红系分化。 展开更多
关键词 急性白血病 DLK1 基因表达 红系分化
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转录因子Sp1抑制K562细胞红系分化 被引量:2
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作者 马艳妮 巩蓓 +4 位作者 董贺 王斌 阎赟梦 张俊武 余佳 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第5期557-561,共5页
目的研究转录因子Sp1在K562细胞诱导向红系分化过程中的表达变化,并确定其对于红系分化及珠蛋白表达的影响。方法用定量PCR及Western blot的方法确定Sp1在红系分化过程中的表达情况。通过RNAi的方法抑制Sp1的表达,并通过联苯胺染色确定K... 目的研究转录因子Sp1在K562细胞诱导向红系分化过程中的表达变化,并确定其对于红系分化及珠蛋白表达的影响。方法用定量PCR及Western blot的方法确定Sp1在红系分化过程中的表达情况。通过RNAi的方法抑制Sp1的表达,并通过联苯胺染色确定K562细胞中血红蛋白的表达情况,同时定量PCR的方法分析红系分化相关基因的表达,流式细胞技术检测红系分化过程中表面标志蛋白的表达情况。结果在hemin诱导的K562细胞以及促红细胞生成素EPO诱导的造血干细胞向红系分化过程中,Sp1的mRNA及蛋白水平均呈明显下降,提示其可能负调节红系分化过程。在K562细胞中抑制Sp1的表达则可明显提高K562细胞中的血红蛋白含量,促进γ-,ε-珠蛋白,CD71,CD235a基因的表达,同时CD71,CD235a阳性细胞比例明显增加。结论以上结果说明转录因子Sp1负调节红系分化过程,抑制Sp1的表达可提高K562细胞中珠蛋白的表达,并促进K562细胞向红系分化。 展开更多
关键词 SP1 K562细胞 红系分化
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模拟微重力抑制K562细胞的红系分化 被引量:1
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作者 吴彬 郑磊 +5 位作者 胡秀梅 高雅 岳春燕 洪佳琼 宋洁 平宝红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1422-1427,共6页
目的探讨模拟微重力对K562细胞红系分化的影响及可能作用机制。方法利用第4代旋转细胞培养系统模拟微重力,联苯胺染色法检测细胞红系分化率;q RT-PCR分析GATA-1、GATA-2、Ets-1、F-actin、β-Tubulin、Vimentin基因表达水平;免疫荧光标... 目的探讨模拟微重力对K562细胞红系分化的影响及可能作用机制。方法利用第4代旋转细胞培养系统模拟微重力,联苯胺染色法检测细胞红系分化率;q RT-PCR分析GATA-1、GATA-2、Ets-1、F-actin、β-Tubulin、Vimentin基因表达水平;免疫荧光标记显示微丝、微管、中间纤维的荧光强度,Western blotting检测F-actin、β-Tubulin、Vimentin蛋白表达水平。结果联苯胺染色结果表明模拟微重力抑制K562细胞红系分化;q RT-PCR结果表明氯高铁血红素(Hemin)处理K562细胞后,调控红系分化的转录因子GATA-1表达上调,GATA-2、Ets-1表达下调;而模拟微重力处理细胞后GATA-1表达下调,GATA-2、Ets-1表达上调,细胞骨架F-actin、β-Tubulin、Vimentin表达下调;免疫荧光结果显示微丝、微管、中间纤维荧光强度减弱;免疫印迹分析结果显示Factin、β-Tubulin、Vimentin表达下调。结论模拟微重力能抑制K562细胞红系分化,其机制可能为模拟微重力破坏细胞骨架,影响GATA-1、GATA-2、Ets-1的基因表达。 展开更多
关键词 模拟微重力 K562细胞 转录因子 红系分化 细胞骨架
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益髓生血颗粒含药血清对K562细胞向红系分化的影响 被引量:1
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作者 程艳玲 马艳妮 +6 位作者 周亚丽 孙玉雯 方素萍 刘莉 褚娜利 张新华 吴志奎 《华南国防医学杂志》 CAS 2015年第11期807-809,813,共4页
目的探讨益髓生血颗粒含药血清对K562细胞向红系分化的影响。方法用SD大鼠制备益髓生血颗粒含药血清,分高、中、低和对照组,各组含药血清以20%终浓度添加到1640培养基中,并对K562细胞进行干预培养。采用联苯胺染色法观察各组血清干预K56... 目的探讨益髓生血颗粒含药血清对K562细胞向红系分化的影响。方法用SD大鼠制备益髓生血颗粒含药血清,分高、中、低和对照组,各组含药血清以20%终浓度添加到1640培养基中,并对K562细胞进行干预培养。采用联苯胺染色法观察各组血清干预K562细胞后,对蓝染细胞进行计数,计算细胞蓝染阳性率;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)方法观察益髓生血颗粒干预K562细胞后珠蛋白基因mRNA表达情况。结果联苯胺染色结果显示高、中、低、对照组与空白组比较均能够显著提高K562细胞蓝染率(P<0.0001);与对照组比较,益髓生血颗粒含药血清高、中剂量组K562细胞蓝染数量提高(P<0.001)。RT-PCR结果显示益髓生血颗粒含药血清,高剂量组与对照组比较,能够促进α和γ-珠蛋白基因表达(P<0.05)。结论益髓生血颗粒含药血清能够促进K562细胞向红系分化。 展开更多
关键词 K562细胞 益髓生血颗粒 含药血清 红系分化 实时荧光定量聚合酶链反应 基因mRNA RT-PCR 蛋白基因表达
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丁酸钠诱导K562细胞红系分化基因表达谱分析 被引量:1
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作者 杨敏 钱新华 +1 位作者 付素珍 赵丹华 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期174-177,共4页
目的分析丁酸钠(NaB)诱导K562细胞后的差异表达基因,筛选出与红系分化相关基因,探索NaB的作用机制。方法应用Affymetrix公司的人类全基因组HG-U133Plus2芯片,检测0.5mmol/LNaB诱导K562细胞48h的珠蛋白基因变化及差异表达基因,筛选出与... 目的分析丁酸钠(NaB)诱导K562细胞后的差异表达基因,筛选出与红系分化相关基因,探索NaB的作用机制。方法应用Affymetrix公司的人类全基因组HG-U133Plus2芯片,检测0.5mmol/LNaB诱导K562细胞48h的珠蛋白基因变化及差异表达基因,筛选出与红系分化相关基因。应用反转录(RT)-PCR检测ε、γ、β、δ4个珠蛋白基因及2个红系分化相关基因KLF1及KLF3的表达,验证基因芯片结果。结果表达谱基因芯片结果分析显示:总探针组54675个芯片中,阳性表达数23175(42.4%),阴性表达数30693(56.1%)。信号比对数值(SLR)结果显示,表达上调(SLR>1)433个,包含340个不同的基因;表达下调(SLR<-1)171个,包含144个不同的基因。生物学功能分类发现所涉及的基因主要包括参与细胞及大分子代谢、细胞信号、生物学调节、细胞发育及细胞增殖等。7个珠蛋白中ε、Aγ、Gγ、β、δ珠蛋白基因表达均上调,而α及ζ珠蛋白基因无明显改变;表达上调或下调且与红系分化相关的有ALAS2、EGR1、LMO2、RUNX1、KIT、GYPA、GATA-2、KLF1及KLF3等29个基因。RT-PCR验证基因芯片结果可靠。结论NaB诱导K562细胞向红系分化;NaB可能通过调节ALAS2、EGR1、LMO2、RUNX1、KIT、GYPA、GATA-2、KLF1及KLF3等与红系分化相关的基因调控γ珠蛋白合成。 展开更多
关键词 丁酸钠 表达谱基因芯片 K562细胞 红系分化
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EKLF转录激活miR-96在红系分化过程中表达 被引量:1
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作者 蒋凤兵 阎文婷 +4 位作者 朱勇 王斌 马艳妮 余佳 施琼 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第4期369-374,共6页
目的研究红系分化过程中,红系分化特异转录因子EKLF对miR-96的表达调控。方法氯化高铁血红素(Hemin)诱导人K562细胞(人红白血病细胞系)向红系分化,real-time PCR检测miR-96表达。生物信息学分析miR-96转录起始点上游可能的EKLF结合位点... 目的研究红系分化过程中,红系分化特异转录因子EKLF对miR-96的表达调控。方法氯化高铁血红素(Hemin)诱导人K562细胞(人红白血病细胞系)向红系分化,real-time PCR检测miR-96表达。生物信息学分析miR-96转录起始点上游可能的EKLF结合位点。并经染色质免疫共沉淀(ChIP)与双荧光报告基因实验验证EKLF与这些位点结合的生物学意义。结果 Hemin诱导K562细胞向红系分化过程中,miR-96表达显著升高,且在48 h表达最高(3.94±0.64,P<0.05)。生物信息学分析显示miR-96转录起始位点上游2.0 kb内含有多个EKLF结合位点。经ChIP验证这些位点有EKLF的结合,且EKLF与这些位点结合能募集RNA聚合酶Ⅱ(PolⅡ)结合,起始转录。进一步的双荧光报告基因实验也证明EKLF对miR-96转录起始点上游序列具有转录激活作用。结论 EKLF转录激活miR-96在红系分化过程中的表达。 展开更多
关键词 红系分化 EKLF miR-96 染色质免疫共沉淀
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