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RAW264.7吞噬模型的建立与灵芝香菇水提物复配样品对巨噬细胞吞噬活性的影响
1
作者 何星璐 文奥美 +5 位作者 贾薇 刘艳芳 刘利平 张美彦 张劲松 汪雯翰 《食用菌学报》 北大核心 2026年第1期46-56,共11页
以细胞和荧光微球密度、荧光微球孵育时间和温度、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用质量浓度和时间为评价指标,优化评价食用菌免疫活性的RAW264.7吞噬模型最佳条件,并以此模型测定20个灵芝(Ganoderma lucidum)水提物样品(LZ1~20)和1... 以细胞和荧光微球密度、荧光微球孵育时间和温度、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用质量浓度和时间为评价指标,优化评价食用菌免疫活性的RAW264.7吞噬模型最佳条件,并以此模型测定20个灵芝(Ganoderma lucidum)水提物样品(LZ1~20)和12个香菇(Lentinula edodes)水提物样品(XG1~12)及66个两两复配样品对RAW264.7细胞吞噬活性的影响。结果表明:RAW264.7吞噬模型的最佳条件为细胞、荧光微球密度每毫升1×10^(6)个、1×10^(8)个,荧光微球孵育时间、温度为1 h、37℃,LPS作用质量浓度、时间为10μg·mL^(-1)、48 h;XG2与XG7的复配样品可将吞噬率提高到26.98%,明显高于香菇水提物单品中活性最好的XG10(吞噬率为15.2%);XG2与LZ18的复配样品吞噬率可达24.43%,明显高于XG10和灵芝水提物单品中活性最好的LZ7(吞噬率为14.25%)。研究结果可为评价食用菌样品的免疫活性以及开发食用菌功能性产品的复配配方提供参考。 展开更多
关键词 香菇 灵芝 流式细胞术 吞噬率
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血液灌流治疗对有机磷化合物中毒后中性粒细胞吞噬和代谢活性以及促炎细胞因子产生的影响
2
作者 宋诗源 刘慧 +2 位作者 付龙 屠淑敏 于梦龙 《罕少疾病杂志》 2026年第2期152-154,共3页
目的探讨血液灌流治疗对有机磷化合物中毒后中性粒细胞吞噬和代谢活性以及促炎细胞因子产生的影响。方法选取2021年4月至2024年4月在我院治疗的68例有机磷化合物中毒患者作为研究对象,随机分为观察组(n=34例)和对照组(n=34例),其中观察... 目的探讨血液灌流治疗对有机磷化合物中毒后中性粒细胞吞噬和代谢活性以及促炎细胞因子产生的影响。方法选取2021年4月至2024年4月在我院治疗的68例有机磷化合物中毒患者作为研究对象,随机分为观察组(n=34例)和对照组(n=34例),其中观察组患者接受血液灌流治疗,对照组患者给与常规治疗。比较两组患者临床恢复情况,治疗前后中性粒细胞吞噬率、吞噬指数、活性氧代谢水平和促炎细胞因子水平。结果观察组患者治疗后CNS样症状消失时间、自主意识恢复时间、胆碱酯酶活力提高时间、住院时间、促炎细胞因子IL-8和TNF-α水平均低于对照组(P<0.05);观察组患者中性粒细胞吞噬率、吞噬指数、活性氧代谢水平均高于对照组(P<0.05)。结论血液灌流治疗可有效治疗有机磷化合物中毒,促进中性粒细胞吞噬和代谢活性,抑制促炎因子的产生。 展开更多
关键词 血液灌流 有机磷化合物中毒 中性粒细胞吞噬 代谢活性 促炎细胞因子
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一种路径-吞噬拓扑优化新方法 被引量：1
3
作者 林家辉 李壮壮 +1 位作者 李学霖 李军 《中国机械工程》 北大核心 2025年第3期504-514,共11页
针对复杂工程结构优化过程中数学模型建立和求解困难的问题,建立了一种载荷传递路径理论与吞噬算法相结合的拓扑优化方法。利用载荷传递路径理论求解结构的主传递路径和次传递路径,并根据结构中应力相对高的区域多分配材料、应力相对低... 针对复杂工程结构优化过程中数学模型建立和求解困难的问题,建立了一种载荷传递路径理论与吞噬算法相结合的拓扑优化方法。利用载荷传递路径理论求解结构的主传递路径和次传递路径,并根据结构中应力相对高的区域多分配材料、应力相对低的区域少分配材料的原则,提出吞噬算法对材料进行最优分配。以悬臂梁和薄板结构为例,将所提路径-吞噬方法与变密度法进行仿真和试验对比,结果表明,所提方法提高了结构的刚度和强度,减小了结构质量,证明该方法对结构优化是准确有效的。该方法无需建立和求解复杂的数学模型,且考虑了光滑边界处理,优化后的结构可直接用于制造,尤其适合工程应用。 展开更多
关键词 拓扑优化 路径-吞噬方法 载荷传递路径理论 吞噬算法 变密度法
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基于巨噬细胞吞噬功能探讨六味地黄丸、二至丸、左归丸预防乳腺癌发生的机制 被引量：1
4
作者 郑里翔 陈奕杉 +2 位作者 权威 钟友宝 郭子锋 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第10期10-17,共8页
目的:研究左归丸(ZGW)、六味地黄丸(LWDHW)、二至丸(EZW)3种补肾阴方对乳腺癌发生的预防,并从巨噬细胞的吞噬功能探讨其预防的机制。方法:将10月龄雌性小鼠繁殖后种鼠随机分为空白组、大豆异黄酮组(0.13 g·kg^(-1)·d^(-1),掺... 目的:研究左归丸(ZGW)、六味地黄丸(LWDHW)、二至丸(EZW)3种补肾阴方对乳腺癌发生的预防,并从巨噬细胞的吞噬功能探讨其预防的机制。方法:将10月龄雌性小鼠繁殖后种鼠随机分为空白组、大豆异黄酮组(0.13 g·kg^(-1)·d^(-1),掺入饲料)、ZGW组(2.34 g·kg^(-1)·d^(-1),灌胃)、LWDHW组(0.56 g·kg^(-1)·d^(-1),灌胃)、EZW组(4.68 g·kg^(-1)·d^(-1),灌胃),每3 d触诊1次,直至鼠龄18个月,经苏木素-伊红(HE)染色确诊并计算小鼠乳腺癌发生率。SPF级雌性SD大鼠40只随机分为空白血清组及ZGW、LWDHW、EZW含药血清组,分别予以生理盐水、ZGW(16.20 g·kg^(-1)·d^(-1))、LWDHW(3.89 g·kg^(-1)·d^(-1))、EZW(32.40 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,3次/d,连续5 d,末次灌胃1 h后进行腹主动脉采血制备含药血清。采用细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测不同浓度含药血清对RAW264.7细胞活力的影响。以20%浓度的含药血清为研究对象,通过免疫荧光(IF)观察其对RAW264.7细胞表面主要组织相容性复合物-Ⅱ(MHC-Ⅱ)、CD80、CD86表达水平的影响;流式细胞术检测其对RAW264.7细胞吞噬功能的影响;酶联免疫吸附测定法(ELISA)及Griess法检测其在4T1细胞的条件培养基(CM)共培养体系中对RAW264.7细胞白细胞介素(IL)-6与一氧化氮(NO)水平的影响。结果:预防给药后,肿瘤发生率大豆异黄酮组(4%)、ZGW组(4%)、LWDHW组(4%)和EZW组(6%)均低于空白组(8%)。与空白血清组比较,3种补肾阴方含药血清可增强RAW264.7细胞表面MHC-Ⅱ、CD80、CD86表达水平,增强其对肿瘤细胞的吞噬能力,并降低IL-6含量、提高NO含量(P<0.05,P<0.01)。结论:3种补肾阴方均可降低小鼠的肿瘤发生率,其机制可能与活化RAW264.7细胞,增加其对乳腺癌细胞的吞噬能力,调节IL-6、NO的分泌有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 预防 左归丸 六味地黄丸 二至丸 巨噬细胞吞噬 蛋白表达
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巨噬细胞吞噬实验跨学科混合式教学模式的探索与实践 被引量：1
5
作者 李奇志 张耀文 +4 位作者 袁雅燕 刘亚丰 周爱文 阮晶 雷敏 《中国细胞生物学学报》 2025年第4期867-879,共13页
吞噬实验是细胞生物学、免疫学和微生物学的经典实验,但当前的实验教学在内容设计上既缺乏学科之间的融合,又鲜有把虚拟实验应用在吞噬实验教学中。笔者所在教学团队以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为实验对象,荧光标记的大肠杆菌BL21(pET-28a... 吞噬实验是细胞生物学、免疫学和微生物学的经典实验,但当前的实验教学在内容设计上既缺乏学科之间的融合,又鲜有把虚拟实验应用在吞噬实验教学中。笔者所在教学团队以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为实验对象,荧光标记的大肠杆菌BL21(pET-28a-mCherry)为示踪物,探讨巨噬细胞经典活化前后细胞形态与吞噬功能的改变。根据授课学生的知识领域特点,设计以细胞生物学为主线内容,免疫学和微生物学等学科作为辅助和补充,借助线上学习平台和学院优质的虚拟实验平台,为学生提供与线下教学紧密联系的线上学习内容。同时采用传统经典课堂教学结合半开放实验教学的多元化混合式教学模式,并建立多维的考核评价体系。通过这些教学改革举措的实施,把与吞噬作用相关的细胞生物学、免疫学和微生物学等学科知识点有机地融合在一起,旨在使学生能够更深入全面地理解吞噬作用这一生命活动,有效地激发了学生创新和探索的意识,同时也拓展了实验教学模式。 展开更多
关键词 细胞生物学实验 教学改革 巨噬细胞RAW264.7 吞噬作用 混合式教学
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降低血小板活性氧生成对减少冷藏血小板被吞噬的作用
6
作者 谢如锋 王志成 +2 位作者 孙洁 杨懿铭 杨洁 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第1期123-129,共7页
目的探究N-乙酰半胱氨酸(NAC)的添加在血小板冷藏保存期间对活性氧(ROS)异常增加的影响,进而防止血小板被巨噬细胞和肝细胞识别并清除的作用。方法将浓缩血小板分成室温组(22C组)、冷藏组(4C组)和NAC添加组;NAC添加组为冷藏血小板中分... 目的探究N-乙酰半胱氨酸(NAC)的添加在血小板冷藏保存期间对活性氧(ROS)异常增加的影响,进而防止血小板被巨噬细胞和肝细胞识别并清除的作用。方法将浓缩血小板分成室温组(22C组)、冷藏组(4C组)和NAC添加组;NAC添加组为冷藏血小板中分别添加5 mmol/L(N5组)和25 mmol/L(N25组)的NAC;各组血小板保存5 d后,流式细胞仪检测血小板ROS、活化等指标。佛波酯诱导的THP-1细胞或原代培养的HepG2细胞用于检测对各组血小板的吞噬作用。结果保存5 d后,4C组血小板ROS水平较22C组升高(P<0.05);加入NAC后,ROS水平则降低(P<0.05)。与4C组相比,N5组血小板CD62P、磷脂酰丝氨酸(PS)的表达以及β-N-乙酰萄糖胺(β-GlcNAc)的暴露程度均降低(P<0.05)。THP-1和HepG2对N5组血小板的吞噬率也低于4C组(P<0.05)。但添加5 mmol/L NAC对冷藏5 d血小板的计数、pH值、CD42b表达、β-半乳糖(β-Gal)暴露和血小板凝血功能无显著影响。结论冷藏血小板添加NAC可显著降低血小板ROS水平,有效减少冷藏血小板被细胞吞噬,提示NAC能防止血小板回输体内后被吞噬清除。 展开更多
关键词 血小板 冷藏保存 活性氧 N-乙酰半胱氨酸 吞噬 冷藏损伤
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一种靶向人类表皮生长因子受体2的抗体偶联药物抗体依赖性细胞吞噬作用的评价方法 被引量：1
7
作者 陈颖 王灿 +5 位作者 赵沁 王鸣人 李甜甜 董闪闪 邵泓 徐伟东 《生物工程学报》 北大核心 2025年第8期3122-3130,共9页
为了建立基于报告基因法的靶向人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)的抗体偶联药物(antibody drug conjugate,ADC)的抗体依赖性细胞吞噬作用(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis,ADCP)... 为了建立基于报告基因法的靶向人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)的抗体偶联药物(antibody drug conjugate,ADC)的抗体依赖性细胞吞噬作用(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis,ADCP)活性检测方法,本研究以Jurkat/NFAT/FcγRIIa稳转细胞株作为效应细胞,BT474作为靶细胞,运用实验设计(design of experiment,DOE)方法对靶细胞密度、效应细胞与靶细胞密度比值(效靶比)、靶细胞贴壁时间、加药诱导时间和加入效应细胞后的诱导时间进行优化,建立抗HER2 ADC的ADCP生物学活性检测方法。该方法呈现显著的量效关系,符合四参数曲线:y=(A–D)/[1+(x/C)B]+D。关键参数的耐用性范围为:靶细胞密度为(2.5–4.0)×10^(5)个/mL,效靶比为3–5,靶细胞贴壁时间为1.0–2.0 h,加药孵育时间为0 h,加入效应细胞后的诱导时间为5.0–6.0 h。经方法学验证,线性结果为y=1.1068 x-0.0116,r=0.9692,相对准确度结果在-6.59%–2.98%之间,中间精密度结果均小于11%,符合要求的效价水平范围为64%–156%,方法具有靶点专属性。将该方法应用于靶向HER2 ADC的ADCP生物学活性测定,结果为(103.5±5.7)%。本研究建立的靶向HER2 ADC的ADCP报告基因检测方法变异度小、重复性好,为该品种ADC的ADCP效应评价提供了高效可靠的检测技术,也为其他类型ADC的Fc段效应功能表征提供了可参考的技术方案。 展开更多
关键词 抗HER2抗体偶联药物 抗体依赖性细胞吞噬作用 生物学活性 报告基因法 实验设计
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吞噬凋亡细胞研究新进展
8
作者 许铭炎 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 2002年第5期439-442,共4页
从线虫到哺乳动物 ,吞噬细胞对凋亡细胞的识别与吞噬具有进化保守性 ,目前发现 ,有 7种吞噬基因编码吞噬蛋白参与这一过程的主动调控。吞噬基因的突变可以改变细胞凋亡的进程 ,甚至可以逃避吞噬而存活 。
关键词 凋亡细胞 吞噬细胞 吞噬基因 吞噬蛋白 吞噬作用
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银杏叶多糖的分离、分析及其对小鼠腹腔吞噬细胞的影响 被引量：22
9
作者 陈群 陈永红 《淮南师范学院学报》 2002年第2期32-33,共2页
热水提取、乙醇沉淀法得银杏叶多糖提取物 (GBLP) ,得率为 2 .4 %。碘 -碘化钾反应、Molish反应、茚三酮反应及紫外、红外光谱分析表明该提取物主要成分为不含淀粉和核酸 ,含少量结合蛋白的多糖 ,多糖含量达 90 .2 %。小鼠体内实验表明 ... 热水提取、乙醇沉淀法得银杏叶多糖提取物 (GBLP) ,得率为 2 .4 %。碘 -碘化钾反应、Molish反应、茚三酮反应及紫外、红外光谱分析表明该提取物主要成分为不含淀粉和核酸 ,含少量结合蛋白的多糖 ,多糖含量达 90 .2 %。小鼠体内实验表明 :GBLP可显著激活腹腔吞噬细胞 ,提高酸性磷酸酶活性 ; 展开更多
关键词 小鼠 腹腔吞噬细胞 银杏叶 多糖 分离 酸性磷酸酶 吞噬百分率 吞噬指数 药理研究
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吞噬凋亡细胞的机制 被引量：1
10
作者 许铭炎 徐小虎 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期855-859,共5页
被吞噬细胞吞噬是多数凋亡细胞的命运 .凋亡细胞表面膜磷脂酰丝氨酸的暴露、膜碳水化合物的改变及表面糖蛋白的重新分布和聚集导致被吞噬细胞识别与摄取 .吞噬细胞的多种受体参与吞噬过程 ,有些受体参与栓系凋亡细胞 ,有些激发巨吞饮的... 被吞噬细胞吞噬是多数凋亡细胞的命运 .凋亡细胞表面膜磷脂酰丝氨酸的暴露、膜碳水化合物的改变及表面糖蛋白的重新分布和聚集导致被吞噬细胞识别与摄取 .吞噬细胞的多种受体参与吞噬过程 ,有些受体参与栓系凋亡细胞 ,有些激发巨吞饮的摄取机制 .吞噬的摄取过程因吞噬细胞和凋亡细胞的类型差异而不同 .至少有 7种线虫吞噬基因及其哺乳动物同源物组成两条部分重叠而又平行的摄取信息传导通路 .吞噬基因的突变可以改变凋亡细胞的进程 . 展开更多
关键词 吞噬细胞 吞噬作用 吞噬基因 凋亡细胞 信息传导 机制
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前列腺素D_(2)对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞中细胞因子分泌及吞噬杀伤功能的影响
11
作者 龚鹏飞 杨效林 +6 位作者 郭莉莉 王钰 吴敬泽 张双翼 刘博 毛伟 曹金山 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第1期107-114,共8页
为了研究前列腺素D_(2)(prostaglandin D_(2),PGD_(2))对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞的影响,以体外培养的奶牛骨髓源巨噬细胞为研究对象,分析内源性和外源性PGD_(2)对大肠杆菌诱导的巨噬细胞促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α... 为了研究前列腺素D_(2)(prostaglandin D_(2),PGD_(2))对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞的影响,以体外培养的奶牛骨髓源巨噬细胞为研究对象,分析内源性和外源性PGD_(2)对大肠杆菌诱导的巨噬细胞促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌和吞噬杀伤功能的影响。结果显示,由大肠杆菌诱导的巨噬细胞中PGD_(2)的合成依赖于天然模式识别受体TLR2、TLR4和NLRP3。抑制内源性PGD_(2)能够下调大肠杆菌诱导的巨噬细胞中促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌(P<0.001),并可以在一定程度上增强巨噬细胞的杀伤功能(P<0.01)。此外,外源性PGD_(2)能够上调大肠杆菌刺激后巨噬细胞中促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌(P<0.01),一定浓度范围内的外源性PGD_(2)能够减弱巨噬细胞的杀伤功能(P<0.01)。结果表明,PGD_(2)对大肠杆菌诱导的巨噬细胞细胞因子的分泌和吞噬杀伤功能均具有一定的影响。 展开更多
关键词 大肠杆菌 前列腺素D_(2) 奶牛骨髓源巨噬细胞 模式识别受体 吞噬杀伤
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TLR2对伪结核棒状杆菌感染巨噬细胞炎性反应和吞噬杀伤的影响
12
作者 秦少杰 巩志国 +6 位作者 刘博 张双翼 赵佳敏 乌仁塔娜 王宇胜 贾军 毛伟 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第6期1210-1217,共8页
伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis)是一类胞内革兰阳性细菌,可引起人畜共患病。本研究对伪结核棒状杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞后炎症介质分泌及吞噬杀伤功能的相关机制进行探究。首先,通过转录组学测序筛选伪结核棒状... 伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis)是一类胞内革兰阳性细菌,可引起人畜共患病。本研究对伪结核棒状杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞后炎症介质分泌及吞噬杀伤功能的相关机制进行探究。首先,通过转录组学测序筛选伪结核棒状杆菌感染巨噬细胞后具有关键作用的基因。随后,使用基因敲除小鼠,分别通过ELISA、Western blot和免疫荧光法探究该关键基因对伪结核棒状杆菌感染巨噬细胞后炎症介质分泌,炎症信号通路激活和吞噬杀伤功能的影响。并进一步通过转录组测序筛选下游关键基因。伪结核棒状杆菌感染巨噬细胞后对差异性基因进行GO富集分析并从中筛选出TLR2作为研究重点。使用伪结核棒状杆菌分别感染C57BL/6J和TLR2基因敲除(TLR2^(-/-))小鼠腹腔巨噬细胞。ELISA结果表明,在伪结核棒状杆菌感染TLR2^(-/-)小鼠巨噬细胞后,相比于C57BL/6J小鼠巨噬细胞TNF-α,IL-1β和IL-10的分泌水平发生显著下调。Western blot结果表明,在TLR2缺失情况下,伪结核棒状杆菌感染诱导MAPK(p38和ERK)信号通路的磷酸化水平显著降低。免疫荧光结果表明,伪结核棒状杆菌感染后,TLR2^(-/-)小鼠巨噬细胞的吞噬率显著高于C57BL/6J小鼠巨噬细胞。此后,对伪结核棒状杆菌感染后的C57BL/6J和TLR2^(-/-)小鼠巨噬细胞进行转录组分析,对差异性基因进行GO富集分析,筛选出的差异基因分别为IL-36a,Cx3cr1,TLR1和TLR2。TLR2在伪结核棒状杆菌感染诱导小鼠炎症反应中发挥重要作用,具体而言其可通过炎症介质分泌,信号通路激活及细胞吞噬杀伤,进而影响炎症反应进度和宿主结局,且IL-36a和Cx3cr1是下游关键因子。 展开更多
关键词 伪结核棒状杆菌 转录组测序 巨噬细胞 炎症反应 吞噬杀伤
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巨噬细胞吞噬检查点阻断在抗肿瘤免疫治疗中的应用 被引量：1
13
作者 郑文静 张瀚 +2 位作者 霍毅 张向前 王涛 《空军军医大学学报》 2025年第7期961-966,共6页
巨噬细胞是重要的固有免疫细胞,可直接吞噬肿瘤细胞或在吞噬活化后通过分泌细胞因子和抗原提呈活化T细胞等方式清除肿瘤细胞,在抗肿瘤免疫应答中发挥关键作用。然而,肿瘤细胞常常通过高表达CD47、PD-L1或CD24等吞噬检查点分子作用于巨... 巨噬细胞是重要的固有免疫细胞,可直接吞噬肿瘤细胞或在吞噬活化后通过分泌细胞因子和抗原提呈活化T细胞等方式清除肿瘤细胞,在抗肿瘤免疫应答中发挥关键作用。然而,肿瘤细胞常常通过高表达CD47、PD-L1或CD24等吞噬检查点分子作用于巨噬细胞并传递抑制性信号,抑制巨噬细胞的吞噬作用,从而逃避巨噬细胞的攻击,实现免疫逃逸。阻断巨噬细胞吞噬检查点信号,恢复巨噬细胞对肿瘤细胞的清除能力,已成为提高肿瘤免疫治疗效果的重要策略,并在临床试验中体现了其应用价值。本文主要综述了目前已发现的巨噬细胞吞噬检查点分子以及阻断这些吞噬检查点信号在抗肿瘤免疫治疗中的应用,并对巨噬细胞吞噬检查点阻断在未来抗肿瘤免疫治疗中的发展进行了展望。 展开更多
关键词 肿瘤 巨噬细胞 吞噬检查点 免疫逃逸 免疫治疗
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SOCE调控亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的研究
14
作者 李思瑶 季子崴 +6 位作者 李蕾 张靖淇 岳柏晨 尹玉凤 徐闯 杨威 张冰冰 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3907-3917,共11页
[目的]探究钙池操控的钙内流(store operated Ca^(2+) entry,SOCE)对奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的影响。[方法]采集健康奶牛(对照,Con)及亚临床低钙血症奶牛(hypocalcemia,Hyp)外周血液,利用磁珠法分离并体外培养CD14~+单核巨噬细... [目的]探究钙池操控的钙内流(store operated Ca^(2+) entry,SOCE)对奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的影响。[方法]采集健康奶牛(对照,Con)及亚临床低钙血症奶牛(hypocalcemia,Hyp)外周血液,利用磁珠法分离并体外培养CD14~+单核巨噬细胞。取亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞分为3组,分别为Hyp、毒胡萝卜素(thapsigarsin,TG)处理组(Hyp+TG)和2-氨基乙基联苯基硼酸酯(2-aminoethyl diphenylborinate,2-APB)处理组(Hyp+2-APB组)。通过流式细胞术检测细胞内Ca^(2+)水平,利用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测SOCE相关因子mRNA和蛋白表达量;通过激光共聚焦和免疫荧光检测单核巨噬细胞吞噬和黏附情况,并检测单核巨噬细胞吞噬和黏附因子的表达。[结果]流式细胞术检测结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平极显著降低(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞中钙离子释放激活的钙通道蛋白1 (calcium release activated calcium modulator 1,ORAI1)、基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)、STIM2、选择素L(selectin L,SELL)、ORA I2、ORAI3以及吞噬因子髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)基因表达量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。Western blotting结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞中ORAI2、ORAI3、STIM2、ORAI1和STIM1蛋白表达量极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。同时,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞吞噬和黏附能力显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01)。TG处理后,与Hyp组相比,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞中ORAI1、ORAI2、MPO、ORAI3、STIM1、STIM2和SELL基因表达量显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),ORAI1、ORAI3、STIM1、STIM2和ORAI2蛋白表达水平显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01);细胞吞噬、黏附能力均显著或极显著增强(P<0.05;P<0.01)。2-APB处理后,与Hyp组相比,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞中ORAI1、ORAI2、MPO、ORAI3、STIM1、STIM2和SELL基因表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),ORAI2、STIM2、ORAI1、ORAI3和STIM1蛋白表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);细胞吞噬、黏附能力极显著或显著减弱(P<0.01;P<0.05)。[结论]TG激活SOCE后,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平升高,细胞吞噬和黏附能力增强;2-APB抑制SOCE后,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平降低,细胞的吞噬和黏附功能减弱,表明SOCE参与调控单核巨噬细胞的吞噬和黏附作用。 展开更多
关键词 钙池操控的钙内流(SOCE) 单核巨噬细胞 吞噬 黏附
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美拉德反应对RAW264.7细胞氧化-还原状态和吞噬功能的影响
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作者 丁亚男 高观祯 +3 位作者 汪惠勤 王瑞阳 周建武 饶平凡 《中国食品学报》 北大核心 2025年第7期12-20,共9页
目的:探究不同反应程度的葡萄糖-精氨酸模式美拉德反应产物对RAW264.7巨噬细胞氧化-还原状态和吞噬功能的影响。方法:通过水浴和油浴制备不同反应程度的模式美拉德反应产物,采用肌红蛋白保护率评估其对不同自由基的抗氧化能力。通过细... 目的:探究不同反应程度的葡萄糖-精氨酸模式美拉德反应产物对RAW264.7巨噬细胞氧化-还原状态和吞噬功能的影响。方法:通过水浴和油浴制备不同反应程度的模式美拉德反应产物,采用肌红蛋白保护率评估其对不同自由基的抗氧化能力。通过细胞自由基水平、胞内抗氧化能力研究模式美拉德反应产物对RAW264.7巨噬细胞氧化-还原状态的影响及其对细胞吞噬功能的影响。结果:油浴加速美拉德反应,加热6 h的产物对过氧自由基和羟基自由基的肌红蛋白保护率分别达到(80.83±1.48)%和(60.12±1.84)%,显著高于水浴组(P<0.05)。然而,该产物可使RAW264.7细胞活力降至44.38%,而水浴组几乎无毒。美拉德反应产物具有胞内自由基调节能力,胞内抗氧化活性呈先升后降的趋势:水浴6 h产物的胞内抗氧化值为102.36±5.17,而油浴6 h产物仅为51.63±3.70。此外,水浴4 h和6 h产物可使AAPH氧化损伤的FITC-葡聚糖内吞率从(18.45±6.57)%分别提高至(44.60±18.53)%和(56.35±8.98)%,水浴和油浴2 h和4 h产物亦可保护中性红吞噬率。结论:水浴制备的美拉德反应产物能更好的调节RAW264.7巨噬细胞的氧化还原状态,且能有效提高巨噬细胞的吞噬功能,而油浴产生的中后期美拉德反应产物对细胞氧化还原状态和吞噬功能的调节能力减弱。 展开更多
关键词 美拉德反应产物 肌红蛋白保护率 胞内抗氧化 巨噬细胞 吞噬功能
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异质性荧光染色的巨噬细胞功能研究I．异质性荧光染色的巨噬细胞吞噬活性
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作者 任怡敏 许屏 +2 位作者 梁玉 梁从云 王世忠 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1994年第4期384-388,402,共6页
利用淀粉多糖和免疫促进剂（白喉类毒素和卡介苗）诱导和活化小鼠腹腔巨噬细胞，观察了四种异质性荧光染色的巨噬细胞非特异性和特异性吞噬活性。实验证明，深蓝色和淡蓝色荧光的巨噬细胞是分化程度低的幼稚细胞，非特异性吞噬功能较弱... 利用淀粉多糖和免疫促进剂（白喉类毒素和卡介苗）诱导和活化小鼠腹腔巨噬细胞，观察了四种异质性荧光染色的巨噬细胞非特异性和特异性吞噬活性。实验证明，深蓝色和淡蓝色荧光的巨噬细胞是分化程度低的幼稚细胞，非特异性吞噬功能较弱，但在特异性吞噬过程中呈现了活跃的吞噬活性，特别是在免疫促进剂的活化下，它们的特异性吞噬功能显著增强、淡蓝绿色荧光的巨噬细胞是分化程度较高、非特异性和特异性吞噬功能最旺盛的巨噬细胞，而黄色荧光的巨噬细胞是分化程度最高、特异性吞噬功能较减退的巨噬细胞。 展开更多
关键词 异质性荧光染色 巨噬细胞 吞噬活性 非特异性吞噬 特异性吞噬
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汽油发动机尾气对大鼠原代肺泡巨噬细胞吞噬功能和炎症细胞因子分泌的影响
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作者 晋瑜 裴梦娟 +6 位作者 李国梁 鱼涛 张雪艳 赵玮 郑敏 李斌 宾萍 《环境卫生学杂志》 2025年第5期380-388,421,共10页
目的应用气-液界面(air-liquid interface,ALI)染毒方式研究汽油发动机尾气(gasoline engine exhaust,GEE)对大鼠原代肺泡巨噬细胞(primary alveolar macrophage,PAM)吞噬功能和炎症细胞因子分泌的影响。方法利用原位肺泡灌洗技术获取大... 目的应用气-液界面(air-liquid interface,ALI)染毒方式研究汽油发动机尾气(gasoline engine exhaust,GEE)对大鼠原代肺泡巨噬细胞(primary alveolar macrophage,PAM)吞噬功能和炎症细胞因子分泌的影响。方法利用原位肺泡灌洗技术获取大鼠PAM,通过免疫荧光和瑞氏染色鉴定细胞。以摩托车尾气作为GEE染毒物质,实验分为空白对照组、洁净空气组、1∶10稀释尾气组(1∶10 GEE组)、1∶5稀释尾气组(1∶5 GEE组)和纯尾气组(纯GEE组)。PAM接种在Transwell 6孔板小室内,利用ALI细胞暴露系统以10 mL/min为暴露流量持续染毒1 h。染毒结束后,用瑞氏染色法在显微镜下观察细胞状态;CCK-8法(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测PAM相对存活率;流式细胞术和荧光酶标仪检测PAM吞噬功能;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)浓度。结果通过原位肺泡灌洗提取到大鼠PAM数量为1.1×10^(6)~1.6×10^(6)个/只大鼠,纯度可达到96.40%;镜下观察瑞氏染色后的PAM具有明显的巨噬细胞样特征。ALI暴露GEE后,瑞氏染色镜下观察PAM,与洁净空气组相比,1∶5 GEE组和纯GEE组细胞碎片和脱核细胞明显增多;PAM的相对存活率随着GEE稀释比例减小而下降,呈现良好的剂量依赖效应(F=18.84,P<0.001);流式细胞术检测发现PAM吞噬率随着尾气浓度升高而显著增加,组间差异具有统计学意义(F=103.80,P<0.001);使用荧光酶标仪检测的结果发现,与洁净空气组相比,1∶5 GEE组和纯GEE组的吞噬功能显著增强(P<0.05)。PAM染毒后培养上清液中炎症因子TNF-α、IL-1β分泌水平在1∶10 GEE组和1∶5 GEE组出现促进作用,在纯GEE组则分泌水平均显著降低,且组间差异具有统计学意义(F值分别为6.18和3.55,P<0.05);纯GEE组PAM分泌抗炎因子IL-4和IL-10增加,其中IL-4显著高于空白对照组和1∶10 GEE组,且组间差异有统计学意义(F=5.72,P=0.002)。结论ALI暴露GEE整体组分可显著影响PAM的吞噬功能,可能与PAM促炎/抗炎细胞因子分泌有关。 展开更多
关键词 汽油发动机尾气 原代肺泡巨噬细胞 吞噬功能 细胞因子
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支架蛋白PDLIM 5增强小胶质细胞吞噬及其在多发性硬化中作用的研究
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作者 陈海莲 王玉鸽 +2 位作者 崔宇 平苏宁 陈元 《中山大学学报(医学科学版)》 北大核心 2025年第2期179-185,共7页
【目的】探究支架蛋白PDLIM5在多发性硬化(MS)患者及小鼠小胶质细胞系BV2中的表达情况并探讨其对小胶质细胞吞噬功能的影响。【方法】共收集24例MS患者的外周血和6例健康志愿者的样本作为对照,通过实时荧光定量PCR检测PDLIM5的表达水平... 【目的】探究支架蛋白PDLIM5在多发性硬化(MS)患者及小鼠小胶质细胞系BV2中的表达情况并探讨其对小胶质细胞吞噬功能的影响。【方法】共收集24例MS患者的外周血和6例健康志愿者的样本作为对照,通过实时荧光定量PCR检测PDLIM5的表达水平;使用脂多糖(LPS,1μg/mL)处理小鼠小胶质细胞系BV2建立神经炎症细胞模型,通过蛋白免疫印迹法检测PDLIM5的表达水平;通过BV2细胞转染PDLIM5 shRNA质粒或PDLIM5过表达质粒,分析PDLIM5的表达对细胞吞噬功能的影响。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,与健康对照组相比,MS患者的单核细胞[2.78(0.70~6.86)vs.0.54(0.39~1.51),P=0.036]和淋巴细胞[1.62(0.90~2.26)vs.0.11(0.05~0.21),P<0.001]中PDLIM5表达水平显著升高;蛋白免疫印迹结果显示,LPS刺激BV2后PDLIM5表达水平显著升高(P<0.05);质粒转染实验结果显示,敲低PDLIM5后抑制BV2对台盼蓝的吞噬能力(P<0.05),而过表达PDLIM5增强BV2对台盼蓝的吞噬能力(P<0.001)。【结论】神经炎症状态下,PDLIM5表达水平升高,可促进小胶质细胞的吞噬功能。 展开更多
关键词 PDLIM5 多发性硬化 小胶质细胞 细胞吞噬 神经炎症
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补饲过瘤胃谷氨酰胺对围产期奶牛代谢及中性粒细胞吞噬功能的影响 被引量：1
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作者 李智勇 姜尚 +1 位作者 宋玉祥 冯海华 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第6期1288-1295,共8页
围产期奶牛常出现代谢紊乱和免疫抑制现象,而谷氨酰胺(GLN)被认为具有改善围产期奶牛能量负平衡(negative energy balance,NEB)及中性粒细胞(polymorphonuclear granulocyte,PMN)功能的潜在效果。本研究旨在探讨补饲过瘤胃GLN对围产期... 围产期奶牛常出现代谢紊乱和免疫抑制现象,而谷氨酰胺(GLN)被认为具有改善围产期奶牛能量负平衡(negative energy balance,NEB)及中性粒细胞(polymorphonuclear granulocyte,PMN)功能的潜在效果。本研究旨在探讨补饲过瘤胃GLN对围产期奶牛代谢及PMN吞噬功能的影响。选择20头年龄、胎次、体况评分及预产期相近的中国荷斯坦奶牛,将其分为对照组(CON,n=10,饲喂基础日粮)和实验组(GLN组,n=10,补饲180 g/d的过瘤胃GLN)。试验期为42 d,分别在-21、-14、-7、0、7、14和21 d采集血样,并记录7、14和21 d的产奶量。结果表明,围产期奶牛血清GLN浓度持续降低,至产后7 d升高,表明围产期奶牛的GLN可能处于不足状态。补饲GLN后,奶牛血清中GLN含量在-7~21 d显著升高(P<0.05),表明补饲效果良好。围产期奶牛血糖浓度在分娩当天升高,但在产后下降,血液中非酯化脂肪酸(nonesterified fatty acid,NEFA)与β-羟基丁酸(β-Hydroxybutyrate,BHBA)浓度在产后升高,表明围产期奶牛存在生理性NEB;补饲GLN后,奶牛血糖浓度在-7、14和21 d显著升高(P<0.01),血液中NEFA与BHBA浓度在产后显著降低(P<0.01),表明补饲GLN缓解了围产期奶牛的NEB。围产期奶牛血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度在分娩当天达到峰值,但在产后下降,总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)水平持续下降,至分娩当天后升高,表明围产期奶牛处于氧化应激状态。补饲GLN后,奶牛血清MDA浓度显著降低(P<0.05),血清T-AOC水平显著升高(P<0.05),表明补饲GLN提高了围产期奶牛的抗氧化能力。围产期奶牛血清促炎因子IL-1β浓度在分娩当天达到峰值后下降,TNF-α在14 d达到峰值后下降,抗炎因子IL-10浓度持续下降,表明围产期奶牛存在炎性反应;而补饲GLN后,奶牛分娩当天及产后IL-1β水平显著降低(P<0.01),产后TNF-α水平降低(P<0.05),整个围产期血清中IL-10水平显著升高(P<0.01),表明补饲GLN提高了围产期奶牛的抗炎能力。围产期奶牛的PMN吞噬功能在-14 d至分娩当天显著降低(P<0.01),补饲GLN后PMN吞噬功能在-14(P<0.05)、14和21 d(P<0.01)显著增强,表明补饲GLN增强了围产期奶牛的固有免疫功能。补饲GLN对奶牛产后3周的产奶量未见明显影响。综上所述,补饲过瘤胃GLN改善了围产期奶牛的NEB,缓解了围产期奶牛的系统性氧化应激和炎性反应,并增强了PMN的吞噬功能,具有一定的临床应用潜力。 展开更多
关键词 围产期奶牛 谷氨酰胺 代谢 中性粒细胞 吞噬作用
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BHB通过ROS-NLRP3途径抑制奶牛CD14^(+)单核细胞吞噬功能
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作者 程宛彤 迟杨 +1 位作者 孙旭东 徐闯 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第7期1493-1501,共9页
旨在探究β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHB)是否通过活性氧(reactive oxygen species,ROS)-NLRP3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3)途径抑制奶牛CD14^(+)单核细胞的吞噬功能。提取产后健康奶牛血液... 旨在探究β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHB)是否通过活性氧(reactive oxygen species,ROS)-NLRP3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3)途径抑制奶牛CD14^(+)单核细胞的吞噬功能。提取产后健康奶牛血液中CD14^(+)单核细胞进行培养,转染沉默NLRP3小干扰RNA后加入3 mmol/L的BHB;用10 nmol/L NLRP3抑制剂MCC950(CP-456773)或10 mmol/L的ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)预处理单核细胞后再添加3 mmol/L的BHB处理24 h。通过免疫印迹法检测NLRP3蛋白表达水平;采用流式细胞术和免疫荧光测定单核细胞的吞噬能力。结果显示,si-NLRP3+BHB处理组与si-Control+BHB组相比,单核细胞吞噬功能显著升高,而NLRP3蛋白表达量显著降低。与DMSO+BHB组相比,MCC950+BHB组的单核细胞吞噬功能明显升高。此外,与DMSO+BHB组相比,MCC950+BHB处理组单核细胞中的NLRP3蛋白表达显著降低。与PBS+BHB组相比,添加ROS清除剂NAC处理后,单核细胞吞噬能力明显升高,而NLRP3蛋白表达量显著降低。结果表明,BHB通过ROS-NLRP3途径抑制奶牛CD14^(+)单核细胞的吞噬功能。因此,调控NLRP3炎症小体的活化可能是改善围产期奶牛单核细胞吞噬功能障碍的有效方法。 展开更多
关键词 BHB NLRP3炎症小体 CD14^(+)单核细胞 吞噬功能 奶牛
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