目的采用微阵列化学发光免疫检测方法建立热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE的检测方法并评估其性能。方法筛选2022年3月-2023年3月海南省妇女儿童医学中心就诊的68例疑似热带无爪螨过敏患者及30名健康体检者,通过优化试剂浓...目的采用微阵列化学发光免疫检测方法建立热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE的检测方法并评估其性能。方法筛选2022年3月-2023年3月海南省妇女儿童医学中心就诊的68例疑似热带无爪螨过敏患者及30名健康体检者,通过优化试剂浓度和反应条件,评估特异性IgE微阵列化学发光免疫检测Blo t 5、Blo t 21sIgE的各项性能指标。检测受试者血清Blo t 5、Blo t 21水平,以德国敏筛检测系统测定结果为对照进行一致性比较。结果抗原最佳浓度为50.0μg/mL。使用2%牛血清白蛋白封闭12 h的信噪比最高。酶标二抗最佳稀释梯度为2.5μg/mL。血清与芯片反应20 min结合酶标二抗反应20 min为最佳反应时间组合。微阵列化学发光免疫检测方法的最低检出限<0.01 IU/mL,线性范围0.20~100.00 IU/mL,批内、批间精密度分别小于8%、10%,Blo t 5和Blo t 21的交叉污染率分别为0.20%和0.31%。与德国敏筛过敏原检测系统测定结果相比,特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法的Blo t 5组分受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.880,灵敏度为76.5%(52/68),特异性为90.0%(27/30);Blo t 21组分ROC曲线下面积为0.797,灵敏度为63.2%(43/68),特异性为90.0%(27/30),一致性均较好(P<0.001)。结论本研究成功建立了热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法,该方法各项性能指标评估良好,与德国敏筛过敏原检测系统有较好的一致性。展开更多
食品安全已成为一个重要的公共卫生问题,快速、准确地监测和检测食源性致病菌是控制和预防人类食源性疾病的最有效方法之一。由于食品基质的复杂性、细菌的多样性及不同生长和复制特性,给食源性致病菌检测带来了重大挑战。传统微生物检...食品安全已成为一个重要的公共卫生问题,快速、准确地监测和检测食源性致病菌是控制和预防人类食源性疾病的最有效方法之一。由于食品基质的复杂性、细菌的多样性及不同生长和复制特性,给食源性致病菌检测带来了重大挑战。传统微生物检测方法耗时费力,不足以满足不可培养活菌细胞和现场快速食品检测的要求。因此,近年来针对食源性致病菌开发了各种免疫检测技术,比传统方法更加灵敏、简单和高效,具有广阔的应用前景。该文结合食源性致病菌亚致死损伤、活的不可培养(viable but non-culturable,VBNC)和休眠3种代谢状态的生物学特征及抗体的类型和特点,综述了当前用于食源性致病菌常见的免疫技术的检测原理、优缺点和应用,并对现有方法的局限性和未来发展方向进行讨论,以期为食源性致病菌免疫检测技术的开发和利用提供参考。展开更多
文摘目的采用微阵列化学发光免疫检测方法建立热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE的检测方法并评估其性能。方法筛选2022年3月-2023年3月海南省妇女儿童医学中心就诊的68例疑似热带无爪螨过敏患者及30名健康体检者,通过优化试剂浓度和反应条件,评估特异性IgE微阵列化学发光免疫检测Blo t 5、Blo t 21sIgE的各项性能指标。检测受试者血清Blo t 5、Blo t 21水平,以德国敏筛检测系统测定结果为对照进行一致性比较。结果抗原最佳浓度为50.0μg/mL。使用2%牛血清白蛋白封闭12 h的信噪比最高。酶标二抗最佳稀释梯度为2.5μg/mL。血清与芯片反应20 min结合酶标二抗反应20 min为最佳反应时间组合。微阵列化学发光免疫检测方法的最低检出限<0.01 IU/mL,线性范围0.20~100.00 IU/mL,批内、批间精密度分别小于8%、10%,Blo t 5和Blo t 21的交叉污染率分别为0.20%和0.31%。与德国敏筛过敏原检测系统测定结果相比,特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法的Blo t 5组分受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.880,灵敏度为76.5%(52/68),特异性为90.0%(27/30);Blo t 21组分ROC曲线下面积为0.797,灵敏度为63.2%(43/68),特异性为90.0%(27/30),一致性均较好(P<0.001)。结论本研究成功建立了热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法,该方法各项性能指标评估良好,与德国敏筛过敏原检测系统有较好的一致性。
文摘食品安全已成为一个重要的公共卫生问题,快速、准确地监测和检测食源性致病菌是控制和预防人类食源性疾病的最有效方法之一。由于食品基质的复杂性、细菌的多样性及不同生长和复制特性,给食源性致病菌检测带来了重大挑战。传统微生物检测方法耗时费力,不足以满足不可培养活菌细胞和现场快速食品检测的要求。因此,近年来针对食源性致病菌开发了各种免疫检测技术,比传统方法更加灵敏、简单和高效,具有广阔的应用前景。该文结合食源性致病菌亚致死损伤、活的不可培养(viable but non-culturable,VBNC)和休眠3种代谢状态的生物学特征及抗体的类型和特点,综述了当前用于食源性致病菌常见的免疫技术的检测原理、优缺点和应用,并对现有方法的局限性和未来发展方向进行讨论,以期为食源性致病菌免疫检测技术的开发和利用提供参考。
