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Establishment of Event-specific Qualitative PCR Method for Genetically Modified Soybean MON 89788 被引量:4
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作者 李飞武 李葱葱 +2 位作者 董立明 邢珍娟 张明 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2010年第3期82-86,共5页
[Objective] The aim was to establish an event-specific qualitative PCR method for transgenic soybean MON89788.[Method] Firstly,the 3′-junction sequence between host plant DNA and integrated DNA of transgenic MON89788... [Objective] The aim was to establish an event-specific qualitative PCR method for transgenic soybean MON89788.[Method] Firstly,the 3′-junction sequence between host plant DNA and integrated DNA of transgenic MON89788 soybean was isolated using thermal asymmetric interlaced-PCR (TAIL-PCR),and the specific PCR primers were designed based on the 3′-junction sequence.Secondly,the specificity and sensitivity of the qualitative PCR detection methods employing these primers were tested.[Result] 1 142-bp 3′-junction sequence was obtained.According to the sequence,event-specific qualitative PCR method was established,amplifying a 170-bp product specifically from MON89788 event,and the limit of detection was 0.05%,approximately 40 initial template copies.[Conclusion] The method was highly specific,sensitive,and suitable for detection of MON89788 event. 展开更多
关键词 Transgenic soybean MON89788 event qualitative pcr 3′-junction sequence
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转基因玉米Bt11特异性定性PCR检测方法的建立
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作者 田锦 高芳瑞 +6 位作者 李玲 陈子言 陈一帆 张华 陈红 王颢潜 梁晋刚 《生物技术进展》 2025年第6期1031-1039,共9页
研究旨在建立一套用于精准检测转基因抗虫玉米Bt11的特异性定性PCR检测方法,以满足转基因生物安全管理的需求,确保转基因玉米产品的安全性和真实性。采用QIAGEN DNeasy^(®)Plant Maxi kit提取Bt11基因组DNA,基于Bt11外源基因插入... 研究旨在建立一套用于精准检测转基因抗虫玉米Bt11的特异性定性PCR检测方法,以满足转基因生物安全管理的需求,确保转基因玉米产品的安全性和真实性。采用QIAGEN DNeasy^(®)Plant Maxi kit提取Bt11基因组DNA,基于Bt11外源基因插入片段侧翼序列设计并筛选特异性引物。通过调整退火温度和引物浓度,进行特异性、检出限和再现性测试,优化检测条件。最终选择Bt11-RB-F3/R3引物组合,确定退火温度为60℃,引物浓度为0.4μmol·L^(-1)。该引物组合能特异性扩增260 bp的目标片段,且无非特异性扩增。在拷贝数比值为0.1%的样品中,该方法可稳定检出Bt11转化体,检出限为0.1%。再现性测试表明,不同操作人员、不同时间段和不同PCR仪的检测结果一致,符合预期。研究成功建立了一种科学、可靠的Bt11转基因玉米检测方法,能够精准、高效地检测Bt11转化体,为转基因生物安全管理机构提供了强有力的技术支持,对加强转基因生物安全监管体系具有重要意义。 展开更多
关键词 转基因玉米 Bt11 定性pcr技术 特异性检测
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转基因耐除草剂大豆LP012-1转化体普通PCR定性检测方法的研究
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作者 张月秋 傅芳奇 +8 位作者 赵桐桐 陈子言 裴欣瑶 高芳瑞 李佳岢 李辉 江晓丹 王颢潜 陈红 《生物技术进展》 2025年第3期466-475,共10页
转基因耐除草剂大豆LP012-1转化体由我国企业自主研发,具有广阔的生物育种产业化应用前景。通过建立LP012-1转化体的定性检测方法,可为标识管理和安全监管提供有力支撑。基于此,从优化DNA提取方法、设计转化体特异性引物并优化引物浓度... 转基因耐除草剂大豆LP012-1转化体由我国企业自主研发,具有广阔的生物育种产业化应用前景。通过建立LP012-1转化体的定性检测方法,可为标识管理和安全监管提供有力支撑。基于此,从优化DNA提取方法、设计转化体特异性引物并优化引物浓度和退火温度、验证方法特异性、测试检出限以及其稳健性等方面构建LP012-1转化体的普通PCR定性检测方法。研究建立了灵敏度高、特异性好的LP012-1转化体检测方法,填补了该转化体定性检测方法的空白,可为后期的规范管理和推广应用提供支持。 展开更多
关键词 转基因耐除草剂大豆 pcr定性检测 LP012-1转化体
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转基因大豆MON89788转化体特异性定性PCR检测 被引量:18
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作者 李飞武 李葱葱 +2 位作者 董立明 邢珍娟 张明 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第13期6679-6682,共4页
[目的]建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法。[方法]利用TAIL-PCR技术分离MON89788大豆的3′端旁侧序列,据此序列设计特异性引物进行PCR检测,并对该方法的特异性和灵敏度进行测试。[结果]获得了1142bp的3′端旁侧序列;依据该... [目的]建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法。[方法]利用TAIL-PCR技术分离MON89788大豆的3′端旁侧序列,据此序列设计特异性引物进行PCR检测,并对该方法的特异性和灵敏度进行测试。[结果]获得了1142bp的3′端旁侧序列;依据该序列建立的PCR检测方法能特异性从MON89788大豆中扩增出170bp的产物,检测灵敏度达到0.05%,约为40个起始模板拷贝。[结论]该研究建立的方法特异性强、灵敏度高,可适用于MON89788大豆检测。 展开更多
关键词 转基因大豆 MON89788转化体 定性pcr
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转Cry1Ab基因水稻分子特征及其特异性PCR检测方法 被引量:8
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作者 汪小福 陈笑芸 +5 位作者 张小明 周育 张焕春 缪青梅 方敬 徐俊锋 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期208-214,共7页
转Cry1Ab基因水稻Bt01为一种新型的转基因水稻,文章首先利用Southern blotting验证了外源基因Cry1Ab转入了Bt01中,且为单拷贝,再利用TAIL-PCR方法获得了其插入位点信息,根据获得的Bt01的5′端插入位点序列,设计了相应的定性与定量PCR检... 转Cry1Ab基因水稻Bt01为一种新型的转基因水稻,文章首先利用Southern blotting验证了外源基因Cry1Ab转入了Bt01中,且为单拷贝,再利用TAIL-PCR方法获得了其插入位点信息,根据获得的Bt01的5′端插入位点序列,设计了相应的定性与定量PCR检测体系的引物及探针,实验结果显示,定性PCR检测体系的最低检测极限(LOD)为10个拷贝,定量PCR检测体系的LOD为5拷贝,最低定量极限(LOQ)为10拷贝。同时为了验证建立的定量PCR体系的准确性,利用该体系检测已知转基因水稻Bt01含量分别为3%和0.5%的样品,定量结果分别为2.7%和0.47%。研究结果表明,该转化体特异性定性与定量检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因水稻Bt01的身份识别和检测提供了有效的方法。 展开更多
关键词 分子特征 转基因 CRY1AB 定性与定量pcr 特异性检测
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转基因玉米MON88017旁侧序列分析及定性PCR检测 被引量:17
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作者 袁磊 孙红炜 +3 位作者 杨崇良 尚佑芬 路兴波 赵蕾 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期361-364,共4页
采用基因组步移法和巢式PCR方法研究转基因玉米MON88017外源基因插入位点旁侧序列特征,获得了外源基因插入位点的左边界旁侧序列504bp,包括336bp的插入载体序列和168bp的玉米基因组序列。根据此旁侧序列,设计MON88017转化事件特异性引... 采用基因组步移法和巢式PCR方法研究转基因玉米MON88017外源基因插入位点旁侧序列特征,获得了外源基因插入位点的左边界旁侧序列504bp,包括336bp的插入载体序列和168bp的玉米基因组序列。根据此旁侧序列,设计MON88017转化事件特异性引物并进行定性PCR扩增,扩增片段为446bp,建立了转基因玉米MON88017转化体特异性检测方法。该方法特异性强、灵敏度高(0.1%),为转基因玉米品种MON88017进出口检测和标识检测提供了技术基础。 展开更多
关键词 转基因生物 事件特异性检测 定性pcr MON88017转化事件 左边界旁侧序列
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特异性检测植物乳杆菌的多重PCR方法 被引量:7
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作者 陈臣 周方方 +2 位作者 任婧 刘振民 陈卫 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1076-1080,共5页
【目的】建立特异性检测植物乳杆菌的方法,排除近缘菌的干扰。【方法】利用SMM系统筛选植物乳杆菌种特异序列,根据特异序列设计引物进行不同乳制品的多重PCR检测。【结果】设计的7对引物具有良好的种特异性,其中3对引物可以排除戊糖乳... 【目的】建立特异性检测植物乳杆菌的方法,排除近缘菌的干扰。【方法】利用SMM系统筛选植物乳杆菌种特异序列,根据特异序列设计引物进行不同乳制品的多重PCR检测。【结果】设计的7对引物具有良好的种特异性,其中3对引物可以排除戊糖乳杆菌和副植物乳杆菌的干扰,可扩增获得植物乳杆菌的特异条带101bp(引物LP-1和LP-2)、189bp(引物LP-5和LP-6)、378bp(引物LP-9和LP-10)。该方法的检测限为2.2×10CFU/mL。采用多重PCR检测与琼脂糖凝胶电泳图谱分析对自制含有各种乳酸菌酸奶产品、自然发酵产品及市售酸乳产品中植物乳杆菌进行定性检测,可以特异性检测出植物乳杆菌,准确区分植物乳杆菌的近缘菌株。【结论】该多重PCR方法成本低、步骤简单、耗时短、灵敏度高,具有特异性,可作为快速检测植物乳杆菌种的方法在生产中使用。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 SMM系统 多重pcr 定性检测
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转Cry1Ab水稻纯合体快速准确的PCR鉴定方法 被引量:7
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作者 张焕春 汪小福 +3 位作者 李玥莹 陈笑芸 缪青梅 徐俊锋 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期549-554,共6页
转Cry1Ab基因水稻Bt22为一种新型的转基因抗虫水稻,本研究介绍了一种筛选纯合转基因植株Bt22的PCR方法。根据外源序列在Bt22中插入位点的两侧旁邻序列设计引物,建立了转基因抗虫水稻Bt22品系特异的定性PCR检测方法,该方法灵敏度可达0.01... 转Cry1Ab基因水稻Bt22为一种新型的转基因抗虫水稻,本研究介绍了一种筛选纯合转基因植株Bt22的PCR方法。根据外源序列在Bt22中插入位点的两侧旁邻序列设计引物,建立了转基因抗虫水稻Bt22品系特异的定性PCR检测方法,该方法灵敏度可达0.01 ng,在此基础上组合各引物建立了筛选转基因水稻Bt22纯合体的多重PCR方法,结果表明该方法简单高效,便于操作。 展开更多
关键词 转基因水稻 特异性定性pcr 多重pcr 纯合性检测
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转基因玉米ND207转化事件特异性定性PCR检测方法及其标准化 被引量:5
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作者 常丽娟 梁晋刚 +6 位作者 宋君 刘文娟 付成平 代晓航 王东 魏超 熊梅 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1818-1828,共11页
转基因玉米ND207是中国农业大学研发的转mCry1Ab和mCry2Ab基因的抗虫玉米,本研究的目的是建立ND207转化事件特异性定性PCR检测方法。根据研发者提供的引物进行PCR扩增,PCR产物测序分析,获得了5’端旁侧序列262 bp,包括109 bp的载体序列... 转基因玉米ND207是中国农业大学研发的转mCry1Ab和mCry2Ab基因的抗虫玉米,本研究的目的是建立ND207转化事件特异性定性PCR检测方法。根据研发者提供的引物进行PCR扩增,PCR产物测序分析,获得了5’端旁侧序列262 bp,包括109 bp的载体序列和153 bp的玉米基因组序列, 3’端旁侧序列316 bp,包括76 bp的载体序列和240bp的玉米基因组序列。针对两端旁侧序列设计14条引物,组成25对引物组合进行引物筛选,选中3’端一对最佳引物优化PCR反应体系及反应条件,建立ND207的转化事件特异性定性PCR检测方法, PCR产物片段大小为166 bp。经过测试,该方法的检出限为0.1%,相当于20个拷贝的ND207特异分子片段。国内8家转基因生物安全检测机构对本方法进行了特异性测试、检出限测试和再现性测试,循环验证报告显示:该方法符合国家标准方法的各项要求,可在检测行业推广应用。ND207转化事件特异性定性PCR检测方法的建立,为我国ND207及其衍生品系的安全监管提供技术支撑。 展开更多
关键词 转基因玉米 ND207 旁侧序列 转化事件特异性 定性pcr
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植酸酶基因定性PCR检测方法及阳性质粒分子的构建 被引量:5
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作者 李俊 刘信 +5 位作者 曹应龙 武玉花 厉建萌 吴刚 张丽 卢长明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期639-647,共9页
植酸酶基因在农业生产中具有很高的应用价值,正被广泛用于农作物的基因工程研究。为了满足转植酸酶基因作物安全监管的需要,通过优化PCR检测条件,建立了植酸酶基因特异性定性PCR检测方法。该方法具有良好的扩增特异性和检测灵敏度,可以... 植酸酶基因在农业生产中具有很高的应用价值,正被广泛用于农作物的基因工程研究。为了满足转植酸酶基因作物安全监管的需要,通过优化PCR检测条件,建立了植酸酶基因特异性定性PCR检测方法。该方法具有良好的扩增特异性和检测灵敏度,可以满足我国植酸酶转基因作物监管需要。此外,我们将6种主要农作物(小麦、水稻、棉花、大豆、玉米和油菜)的内标准基因和植酸酶基因克隆到同一载体上,构建成了阳性质粒分子pBS Endogenous-phytase。该质粒分子适用于这6种作物中植酸酶基因的筛查检测。本研究为转植酸酶基因作物的安全监管提供了阳性材料和检测方法。 展开更多
关键词 转基因检测 植酸酶基因 定性pcr 阳性质粒分子
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抗病转基因水稻M12及其产品成分的定性、定量PCR检测方法 被引量:2
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作者 李鹏 张琳 +4 位作者 叶吉妮 贺诗瑶 贾军伟 潘爱虎 唐雪明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期949-955,共7页
通过定性PCR扩增了转基因水稻M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段,将PCR产物酶切连接后构建到T载体,得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子p M12,建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法。定性PCR结果表明,本方法... 通过定性PCR扩增了转基因水稻M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段,将PCR产物酶切连接后构建到T载体,得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子p M12,建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法。定性PCR结果表明,本方法可特异性检测出M12,检测限可达100拷贝单倍体水稻基因组;定量PCR结果表明,M12和sps定量PCR标准曲线R2为0.998和0.997,扩增效率为95.3%和108.4%,重复性分析标准偏差范围为0.043~0.276,定量极限和检测极限可达100和10拷贝。对转基因含量为1.0%的混合样品定量结果的相对偏差在8.0%以内。本研究建立的方法可用于转基因水稻M12及其加工产品成分的检测。 展开更多
关键词 品系特异性 定性pcr 定量pcr M12
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食品中马源性成分的实时荧光PCR检测 被引量:7
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作者 王玮 吕青骎 +4 位作者 朱卢玺 李春保 陈颖 葛毅强 周光宏 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期961-964,共4页
针对马线粒体DNA细胞色素b基因设计特异性引物和探针,建立食品中马源性成分实时荧光PCR检测方法,并经特异性和灵敏度试验验证其可行性。结果表明:该体系可扩增马DNA片段,长度为127 bp,其他常见畜、禽肉成分均无法正常扩增。该体系的检... 针对马线粒体DNA细胞色素b基因设计特异性引物和探针,建立食品中马源性成分实时荧光PCR检测方法,并经特异性和灵敏度试验验证其可行性。结果表明:该体系可扩增马DNA片段,长度为127 bp,其他常见畜、禽肉成分均无法正常扩增。该体系的检测灵敏度为1.25 pg马DNA和质量分数0.001%马肉粉。经市售食品的检测验证,表明所建立的马引物探针体系具有特异性好、灵敏度高、快速、高效等优点,可用于对食品中马源性成分的掺假鉴别检测。 展开更多
关键词 马线粒体DNA细胞色素b基因 实时荧光pcr方法 定性检测
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定性PCR技术及卡那霉素对8个番茄品种的转基因检测 被引量:2
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作者 许爽 褚云霞 +2 位作者 张辉 朱龙英 朱为民 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期765-769,共5页
本研究利用定性PCR技术对8个不同番茄品种中外源基因35S启动子、NPTⅡ基因和NOS终止子进行检测。实验结果表明,阳性对照可以稳定扩增到预期的大小片段,而待检测品种和阴性对照则没有扩增到预期产物。利用100mg/L的卡那霉素对8个不同番... 本研究利用定性PCR技术对8个不同番茄品种中外源基因35S启动子、NPTⅡ基因和NOS终止子进行检测。实验结果表明,阳性对照可以稳定扩增到预期的大小片段,而待检测品种和阴性对照则没有扩增到预期产物。利用100mg/L的卡那霉素对8个不同番茄品种的种子进行萌发试验,再用50mg/L的卡那霉素对番茄外植体(子叶和下胚轴)进行抗性验证,结果显示卡那霉素抗性筛选实验结果与定性PCR结果一致。本文通过对这两种检测方法的优缺点进行研究分析及比较,初步建立了一个对不同品种番茄进行转基因检测的体系。 展开更多
关键词 定性pcr 卡那霉素抗性 番茄 转基因检测
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荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA和乙肝病毒标志物检测的临床价值分析 被引量:6
14
作者 陈海雁 张桂花 +1 位作者 罗锦彬 黄舒婷 《实用临床医药杂志》 CAS 2014年第19期108-110,共3页
目的探讨荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)和乙肝病毒标志物(HBV-M)ELISA法检测的临床价值。方法选取本院收治的乙肝患者653例,先采用ELISA法对其血液标本进行HBV-M模式定性检测,再采用FQ-PCR法进行HBV-DNA定量检测,观察... 目的探讨荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)和乙肝病毒标志物(HBV-M)ELISA法检测的临床价值。方法选取本院收治的乙肝患者653例,先采用ELISA法对其血液标本进行HBV-M模式定性检测,再采用FQ-PCR法进行HBV-DNA定量检测,观察不同HBV-M模式检测结果。结果大三阳(1、3、5模式)和1、3模式的HBVDNA阳性率分别为97.97%和94.74%,显著高于其他模式(P<0.05)。大三阳(1、3、5模式)的HBV-DNA表达水平为(5.59×106±2.42×105),显著高于其他模式(P<0.05)。结论不同HBV-M模式的HBV-DNA表达水平及阳性率存在显著差异,联合HBV-M定性及HBV-DNA定量检测对临床早期诊断及用药具有重要指导价值。 展开更多
关键词 定性 荧光定量pcr HBV-M 乙肝病毒
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抗虫转CpTI基因植物定性PCR检测技术的建立 被引量:4
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作者 朱珠 王永 +4 位作者 兰青阔 赵新 余景会 郭永泽 程奕 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第5期56-60,共5页
为建立CpTI基因定性PCR检测方法,通过数据库查询和测序获得CpTI基因序列,设计特异性定性PCR引物,对引物、PCR反应条件和反应体系进行优化,并对检测方法的特异性、灵敏度等进行分析试验。结果表明,CpTI基因特异性定性PCR检测方法选择退... 为建立CpTI基因定性PCR检测方法,通过数据库查询和测序获得CpTI基因序列,设计特异性定性PCR引物,对引物、PCR反应条件和反应体系进行优化,并对检测方法的特异性、灵敏度等进行分析试验。结果表明,CpTI基因特异性定性PCR检测方法选择退火温度为58℃,引物浓度为0.4μmol/L较好,该方法能够特异性检测样品中CpTI基因,检测灵敏度达0.05%(质量比)。该方法符合农业转基因生物产品成分检测标准对特异性、灵敏度、重复性的要求,可为抗虫转CpTI基因植物生物安全管理提供技术支撑。 展开更多
关键词 豇豆胰蛋白酶抑制剂 基因特异性检测 定性pcr
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9种大豆制品中转基因成分定性PCR检测 被引量:6
16
作者 孙红炜 路兴波 +3 位作者 杨崇良 尚佑芬 赵玖华 王升吉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期234-237,共4页
本研究从豆粕、豆粉、豆腐等9种大豆产品中提取到高质量的DNA,在对内标准基因Lectin进行扩增的基础上,设计相应的特异性引物,建立了稳定的定性PCR反应体系,对35S启动子基因、外源目的基因Cp4-epsps基因进行了扩增,发现豆粕、豆奶粉、豆... 本研究从豆粕、豆粉、豆腐等9种大豆产品中提取到高质量的DNA,在对内标准基因Lectin进行扩增的基础上,设计相应的特异性引物,建立了稳定的定性PCR反应体系,对35S启动子基因、外源目的基因Cp4-epsps基因进行了扩增,发现豆粕、豆奶粉、豆腐、豆皮、豆豉中含有转基因成分,而其它产品中未发现转基因成分存在。 展开更多
关键词 大豆制品 转基因成分定性检测 Lectin基因 CaMV35S基因 Cp4-epsps基因
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实时定量PCR在植物真菌病原体定量检测中的应用 被引量:3
17
作者 李凤兰 李学湛 +4 位作者 闵凡祥 韩峰 魏琪 冯艳忠 郭梅 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期151-155,共5页
实时定量PCR(Real-time Quantitative PCR,RQ-PCR)凭借其特异性强、定量准确和速度快等优点已经成为快速检测和研究植物真菌病害的重要工具。文章就这项技术在植物真菌病原菌定性和定量检测、土壤栖息的植物真菌病原体和寄主组织中真菌... 实时定量PCR(Real-time Quantitative PCR,RQ-PCR)凭借其特异性强、定量准确和速度快等优点已经成为快速检测和研究植物真菌病害的重要工具。文章就这项技术在植物真菌病原菌定性和定量检测、土壤栖息的植物真菌病原体和寄主组织中真菌DNA的定量检测等方面的应用研究进行了综述。大量研究表明,快速发展的实时定量PCR技术正在开创一个植物真菌病害的诊断学、传染病学和寄主-病原体相互作用研究的新领域。 展开更多
关键词 实时定量pcr 定性和定量检测 植物真菌病害 土壤栖息真菌
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应用定性PCR技术对番茄品种转基因检测 被引量:2
18
作者 李建勇 王飞 李晓明 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2013年第22期52-54,共3页
研究应用定性PCR技术对山东菜区22个不同番茄品种和一个阳性对照、一个阴性对照中外源基因35S启动子、NPTⅡ基因和NOS终止子进行检测。实验结果表明,阳性对照可以稳定扩增到预期大小的片段,而21个待检测品种和阴性对照则没有扩增到195 b... 研究应用定性PCR技术对山东菜区22个不同番茄品种和一个阳性对照、一个阴性对照中外源基因35S启动子、NPTⅡ基因和NOS终止子进行检测。实验结果表明,阳性对照可以稳定扩增到预期大小的片段,而21个待检测品种和阴性对照则没有扩增到195 bp、180 bp特异片段。待检品种瑞芬扩增到195 bp、180 bp、263 bp和274 bp的特异片段,初步确定该品种含有可疑外源基因。 展开更多
关键词 定性pcr 番茄 转基因检测 生物安全
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定性PCR方法检测转基因玉米MON810转化事件的研究 被引量:5
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作者 易小平 贺萍萍 +5 位作者 夏启玉 肖苏生 谢翔 杨小亮 李美英 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第12期2384-2390,共7页
转基因玉米MON810(Yield Gard R)是孟山都公司通过DNA重组技术和微注射轰击研发的一种具有对欧洲玉米螟(ECB;Ostrinia nublialis)有特殊抗性的转基因玉米品系,目前在世界各地已经得到广泛种植,为加强对该品系玉米的安全管理,本研究旨在... 转基因玉米MON810(Yield Gard R)是孟山都公司通过DNA重组技术和微注射轰击研发的一种具有对欧洲玉米螟(ECB;Ostrinia nublialis)有特殊抗性的转基因玉米品系,目前在世界各地已经得到广泛种植,为加强对该品系玉米的安全管理,本研究旨在建立MON810品系玉米的转化事件特异性定性PCR检测方法。根据MON810的插入序列信息,在3′端的侧翼序列处设计定性PCR检测的引物,检测MON810在其他几种常见转基因作物混合样品的特异性。结果表明,该方法具有很好的特异性。同时检测该引物系统的扩增灵敏度,结果表明,检测引物的灵敏度可达0.1%。建立的MON810特异定性PCR检测方法经全国7家实验室的验证,进一步证实该方法能够特异地检测出样品中的MON810转化事件,检测方法的灵敏度可达0.1%,且检测结果具有良好的可重复性和可重现性。MON810转化事件定性PCR检测方法的建立可满足于抗虫转基因玉米MON810及其衍生品种生物安全管理的需要。 展开更多
关键词 转基因玉米MON810 定性pcr 灵敏度 特异性
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转基因玉米的定性PCR检测 被引量:6
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作者 袁磊 赵蕾 +2 位作者 孙红炜 颜世磊 路兴波 《山东农业科学》 2009年第11期8-10,共3页
根据玉米内参照基因zSSIIb和转基因玉米中常见的CaMV35S、NOS、Bt、hpt等基因的特异性结构,设计5对定性PCR引物,经定性PCR检测,可以准确地将转基因玉米的目的基因检出,说明这5对引物具有较高的特异性和准确性。由此建立了一套转基因玉... 根据玉米内参照基因zSSIIb和转基因玉米中常见的CaMV35S、NOS、Bt、hpt等基因的特异性结构,设计5对定性PCR引物,经定性PCR检测,可以准确地将转基因玉米的目的基因检出,说明这5对引物具有较高的特异性和准确性。由此建立了一套转基因玉米定性PCR检测方法,用于转基因玉米及其产品的筛查、抽检。 展开更多
关键词 转基因玉米 定性pcr zSSIIb基因 CaMV35S基因 NOS基因 BT基因 hpt基因
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