目的:探讨钴铬钼(Co-Cr-Mo)颗粒对大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)成骨特异性转录因子cbfal(corebinding factor a l)mRNA的影响。方法:条件培养液(含0.00％、0.005％和0.001％的Co-Cr-Mo颗粒)干预第7d与第14d细胞,Annexin V法检测凋亡率、RT-...目的:探讨钴铬钼(Co-Cr-Mo)颗粒对大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)成骨特异性转录因子cbfal(corebinding factor a l)mRNA的影响。方法:条件培养液(含0.00％、0.005％和0.001％的Co-Cr-Mo颗粒)干预第7d与第14d细胞,Annexin V法检测凋亡率、RT-PCR和原位杂交检测cbfalmRNA变化,结果:随着培养时间延长和颗粒浓度增加,BMSC凋亡率增加,cbfalmRNA表达减少,与对照组显著差异(P<0.05),cbfalmRNA阳性细胞数目降低,与对照组显著差异(P<0.05)。结论:Co-Cr-Mo颗粒引起BMSC的cbfalmRNA减少,降低其成骨分化能力。展开更多
目的:探讨大鼠颅骨缝成骨细胞在张应力作用下Ets1和Cbfa1基因表达的变化,以揭示骨缝牵张成骨的分子机制。方法:分离培养新生大鼠颅缝成骨样细胞,应用四点弯曲细胞加力装置对其施加单一周期的机械张力,并通过SYBR G reen实时定量RT-PCR技...目的:探讨大鼠颅骨缝成骨细胞在张应力作用下Ets1和Cbfa1基因表达的变化,以揭示骨缝牵张成骨的分子机制。方法:分离培养新生大鼠颅缝成骨样细胞,应用四点弯曲细胞加力装置对其施加单一周期的机械张力,并通过SYBR G reen实时定量RT-PCR技术,对Ets1和Cbfa1的基因表达进行检测。结果:Ets1和Cbfa1的mRNA水平分别在机械张应力作用后6 h及12 h内显著增高,随后,mRNA水平逐渐恢复到对照组水平,Ets1先于Cbfa1表达,在加力后表达立即升高,并在0.5h达到最高水平,而Cbfa1则首先经历一个短暂的潜伏期,后表达逐渐升高,在6 h达到最高水平,Cbfa1的最高表达水平约为Ets1的2.58倍。结论:Ets1和Cbfa1在骨缝牵张中对成骨细胞合成分泌骨基质蛋白可能起着不同的调节作用,而它们的功能具有时序性。高频率的牵张(>2次/24 h)更有利于Ets1和Cbfa1的最佳表达。展开更多
目的:探讨4种生长因子对体外培养的人牙乳头细胞中核心结合因子a1(core b ind ing factora1,cbfa1)表达的影响。方法:体外培养人牙乳头细胞,转染pcDNA3-cbfa1重组质粒,G418筛选建立稳定表达cbfa1的细胞模型PC-3,分别在正常细胞和PC-3细...目的:探讨4种生长因子对体外培养的人牙乳头细胞中核心结合因子a1(core b ind ing factora1,cbfa1)表达的影响。方法:体外培养人牙乳头细胞,转染pcDNA3-cbfa1重组质粒,G418筛选建立稳定表达cbfa1的细胞模型PC-3,分别在正常细胞和PC-3细胞中加入不同浓度的BMP-2、TGF-β1、FGF-2、EGF,采用RT-PCR、W estern b lot、免疫组织化学的方法,观察这4种生长因子在人牙乳头细胞中对cbfa1基因表达、蛋白合成、蛋白表达部位的影响。结果:200 ng/mL BMP-2和50 ng/mL的FGF-2刺激正常人牙乳头细胞6 h后cbfa1的表达明显升高,而20和40 ng/mL的TGF-β1作用12 h,能抑制稳定转染cbfa1基因的细胞中cbfa1mRNA的表达;EGF则对人牙乳头细胞中cbfa1的表达没有显著影响。结论:BMP-2和FGF-2可以上调人牙乳头细胞中cbfa1的表达,TGF-β1对cbfa1的表达有抑制作用,EGF则对人牙乳头细胞中cbfa1的表达没有显著影响。展开更多
文摘目的:探讨钴铬钼(Co-Cr-Mo)颗粒对大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)成骨特异性转录因子cbfal(corebinding factor a l)mRNA的影响。方法:条件培养液(含0.00％、0.005％和0.001％的Co-Cr-Mo颗粒)干预第7d与第14d细胞,Annexin V法检测凋亡率、RT-PCR和原位杂交检测cbfalmRNA变化,结果:随着培养时间延长和颗粒浓度增加,BMSC凋亡率增加,cbfalmRNA表达减少,与对照组显著差异(P<0.05),cbfalmRNA阳性细胞数目降低,与对照组显著差异(P<0.05)。结论:Co-Cr-Mo颗粒引起BMSC的cbfalmRNA减少,降低其成骨分化能力。
文摘目的:探讨4种生长因子对体外培养的人牙乳头细胞中核心结合因子a1(core b ind ing factora1,cbfa1)表达的影响。方法:体外培养人牙乳头细胞,转染pcDNA3-cbfa1重组质粒,G418筛选建立稳定表达cbfa1的细胞模型PC-3,分别在正常细胞和PC-3细胞中加入不同浓度的BMP-2、TGF-β1、FGF-2、EGF,采用RT-PCR、W estern b lot、免疫组织化学的方法,观察这4种生长因子在人牙乳头细胞中对cbfa1基因表达、蛋白合成、蛋白表达部位的影响。结果:200 ng/mL BMP-2和50 ng/mL的FGF-2刺激正常人牙乳头细胞6 h后cbfa1的表达明显升高,而20和40 ng/mL的TGF-β1作用12 h,能抑制稳定转染cbfa1基因的细胞中cbfa1mRNA的表达;EGF则对人牙乳头细胞中cbfa1的表达没有显著影响。结论:BMP-2和FGF-2可以上调人牙乳头细胞中cbfa1的表达,TGF-β1对cbfa1的表达有抑制作用,EGF则对人牙乳头细胞中cbfa1的表达没有显著影响。
