目的研究Notch4受体激活后对慢性髓系白血病细胞株K562增殖的影响及可能的作用机制。方法用脂质体分别将携带Notch4胞内段(ICN4)的质粒pc DNA 3.1-ICN4及空载体质粒pc DNA 3.1转染入K562细胞,用G418筛选出稳定表达ICN4的细胞株。观察K56...目的研究Notch4受体激活后对慢性髓系白血病细胞株K562增殖的影响及可能的作用机制。方法用脂质体分别将携带Notch4胞内段(ICN4)的质粒pc DNA 3.1-ICN4及空载体质粒pc DNA 3.1转染入K562细胞,用G418筛选出稳定表达ICN4的细胞株。观察K562细胞ICN4转染后的形态变化,MTT法分析细胞增殖水平,RT-PCR法和Western blot法检测Notch4受体、Hes1、Hey1下游靶基因mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果筛选出稳定表达ICN4的细胞株K562/ICN4细胞,与对照组及空载体组比较,ICN4转染组K562细胞数量减少,胞膜透亮度减小,核染色质固缩,核浆比例减低;ICN4转染后K562细胞生长受抑(P<0.05),且随时间延长而明显;Notch4受体及Hes1下游靶基因mRNA及蛋白表达水平相似,均较对照组及空载体组表达增强,但Hey1下游靶基因mRNA及蛋白表达水平未见明显变化;细胞周期检测结果示,转染48 h后细胞阻滞于G1期(P<0.05),S期细胞减少(P<0.05)。结论 Notch4受体激活可抑制K562细胞增殖,其机制可能是通过激活下游靶基因Hes1表达,而调控细胞于G1期而实现的。展开更多
文摘目的探讨电针结合康复训练治疗对脑卒中大鼠神经功能及大鼠大脑皮层Notch1与Notch4表达的影响。方法 60只SD大鼠随机分为3组:假手术组(S)、模型组(M)与电针+康复训练组(E),采用大脑中动脉阻塞法(MCAO)建立局灶性脑缺血动物模型。采用Longa法评定实验大鼠的神经功能缺损程度,免疫组织化学方法与Western blot和real time PCR方法检测大鼠大脑皮层Notch1与Notch4表达。结果与模型组相比,电针+康复训练组大鼠在实施治疗后,Longa评分明显改善(P<0.01)。与假手术组相比,模型组大鼠大脑皮层Notch1与Notch4蛋白与mRNA表达水平显著升高(P<0.01);而与模型组相比,电针+康复训练组大鼠大脑皮层Notch1与Notch4蛋白与mRNA表达水平升高更为显著(P<0.01)。结论电针结合康复训练改善脑卒中大鼠的神经功能可与上调大鼠大脑皮层Notch1与Notch4的表达相关。
文摘目的研究Notch4受体激活后对慢性髓系白血病细胞株K562增殖的影响及可能的作用机制。方法用脂质体分别将携带Notch4胞内段(ICN4)的质粒pc DNA 3.1-ICN4及空载体质粒pc DNA 3.1转染入K562细胞,用G418筛选出稳定表达ICN4的细胞株。观察K562细胞ICN4转染后的形态变化,MTT法分析细胞增殖水平,RT-PCR法和Western blot法检测Notch4受体、Hes1、Hey1下游靶基因mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果筛选出稳定表达ICN4的细胞株K562/ICN4细胞,与对照组及空载体组比较,ICN4转染组K562细胞数量减少,胞膜透亮度减小,核染色质固缩,核浆比例减低;ICN4转染后K562细胞生长受抑(P<0.05),且随时间延长而明显;Notch4受体及Hes1下游靶基因mRNA及蛋白表达水平相似,均较对照组及空载体组表达增强,但Hey1下游靶基因mRNA及蛋白表达水平未见明显变化;细胞周期检测结果示,转染48 h后细胞阻滞于G1期(P<0.05),S期细胞减少(P<0.05)。结论 Notch4受体激活可抑制K562细胞增殖,其机制可能是通过激活下游靶基因Hes1表达,而调控细胞于G1期而实现的。
