为确定H9N2猪流感病毒(H9N2-SIV)通过瞬时受体电位通道M2(TRPM2)介导肺微血管上皮细胞(PMVEC)铁死亡的分子机制,使用H9N2-SIV接种PMVEC,构建TRPM2-siRNA质粒并转染细胞。用透射电镜观察细胞超微结构,用荧光探针法检测活性氧(ROS)、Ca^(...为确定H9N2猪流感病毒(H9N2-SIV)通过瞬时受体电位通道M2(TRPM2)介导肺微血管上皮细胞(PMVEC)铁死亡的分子机制,使用H9N2-SIV接种PMVEC,构建TRPM2-siRNA质粒并转染细胞。用透射电镜观察细胞超微结构,用荧光探针法检测活性氧(ROS)、Ca^(2+)和Fe^(2+);用生化试剂盒检测丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,并通过荧光定量PCR和Western-blot检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、TRPM2、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、活化转录因子4(ATF4)、阳离子转运调控样蛋白1(CHAC1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的m RNA和蛋白表达水平。结果显示,H9N2-SIV感染可诱导细胞铁死亡,敲低TRPM2可以减少细胞内ROS水平,降低Ca^(2+)、Fe^(2+)及MDA含量,GSH水平明显增加;此外,GRP78、PERK、ATF4、CHAC1 m RNA和蛋白表达水平下调,GPX4的m RNA和蛋白表达水平上调。结果表明,H9N2-SIV感染可诱导细胞铁死亡,其可通过激活TRPM2使Ca^(2+)内流增多,进而激活PERK/ATF4/CHAC1信号通路,加速GSH耗竭,抑制GPX4的活性,促进细胞铁死亡。展开更多
文摘为确定H9N2猪流感病毒(H9N2-SIV)通过瞬时受体电位通道M2(TRPM2)介导肺微血管上皮细胞(PMVEC)铁死亡的分子机制,使用H9N2-SIV接种PMVEC,构建TRPM2-siRNA质粒并转染细胞。用透射电镜观察细胞超微结构,用荧光探针法检测活性氧(ROS)、Ca^(2+)和Fe^(2+);用生化试剂盒检测丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,并通过荧光定量PCR和Western-blot检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、TRPM2、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、活化转录因子4(ATF4)、阳离子转运调控样蛋白1(CHAC1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的m RNA和蛋白表达水平。结果显示,H9N2-SIV感染可诱导细胞铁死亡,敲低TRPM2可以减少细胞内ROS水平,降低Ca^(2+)、Fe^(2+)及MDA含量,GSH水平明显增加;此外,GRP78、PERK、ATF4、CHAC1 m RNA和蛋白表达水平下调,GPX4的m RNA和蛋白表达水平上调。结果表明,H9N2-SIV感染可诱导细胞铁死亡,其可通过激活TRPM2使Ca^(2+)内流增多,进而激活PERK/ATF4/CHAC1信号通路,加速GSH耗竭,抑制GPX4的活性,促进细胞铁死亡。
文摘基于广义约化R矩阵理论,使用RAC程序(R-matrix analysis code)综合分析了^(6)He系统中所有可以利用的实验数据,给出了氚核入射10-2—20 MeV能量范围内主要反应道的评价核数据.其中积分截面包括T(t,2n)^(4)He,T(t,n)^(5)He,T(t,d)^(4)H;微分截面包括T(t,2n)^(4)He,T(t,n)^(5)He,T(t,d)^(4)H,T(t,t)T.结果表明,RAC的评价结果与实验数据和ENDF/B-Ⅷ.1的评价数据整体符合良好.重点关注T(t,2n)^(4)He反应,评价值在10^(-2)—20 MeV范围内与已有实验数据一致,在2.9 Me V附近出现由2+能级主导的共振,在1.9 Me V处,已有实验同时测量了积分截面和角分布,本工作的评价结果在两类数据上均表现出良好的一致性,积分截面与微分截面的联合约束有效提升了R矩阵参数的稳定性和评价结果的可靠性.基于6He系统的整体评价,进一步补充了T(t,n)^(5)He和T(t,d)^(4)H反应的截面数据.本工作完善了聚变反应相关的数据基础,并为后续与镜像系统6Be系统的联合分析奠定了基础.
