目的基于TLR4/NF-κB信号通路探讨枳葛保肝降脂方含药血清对乙醇诱导的人肝LO2细胞炎症损伤的作用及机制。方法将人肝LO2细胞分为正常组(10%正常大鼠血清)、诱导组(10%正常大鼠血清+2.5%无水乙醇)、美他多辛组(10%美他多辛含药血清+2.5...目的基于TLR4/NF-κB信号通路探讨枳葛保肝降脂方含药血清对乙醇诱导的人肝LO2细胞炎症损伤的作用及机制。方法将人肝LO2细胞分为正常组(10%正常大鼠血清)、诱导组(10%正常大鼠血清+2.5%无水乙醇)、美他多辛组(10%美他多辛含药血清+2.5%无水乙醇)和低、中、高浓度枳葛保肝降脂方含药血清组(简称“低、中、高浓度组”)(10.0%、5.0%、2.5%枳葛保肝降脂方含药血清+2.5%无水乙醇)。采用酶联免疫吸附试验法检测各组细胞裂解液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量;Western blot法检测各组Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、NLR家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、磷酸化核因子κB p65亚基/核因子κB p65亚基(p-NF-κBp65/NF-κBp65)蛋白表达水平;RT-qPCR检测各组TLR4、MYD88、NLRP3、Caspase-1 m RNA表达情况。结果与正常组比较,诱导组中TNF-α、IL-1β、IL-18含量,TLR4、My D88、NLRP3、Caspase-1、p-NF-κBp65/NF-κBp65蛋白表达水平,TLR4、MYD88、NLRP3、Caspase-1 m RNA表达量均升高(P<0.01)。与诱导组比较,中、高浓度组TNF-α、IL-1β、IL-18含量,TLR4、My D88、NLRP3、Caspase-1、p-NF-κBp65/NF-κBp65蛋白表达水平,TLR4、MYD88、NLRP3、Caspase-1、p-NF-κBp65/NF-κBp65mRNA表达量均降低(P<0.01)。结论枳葛保肝降脂方含药血清对无水乙醇诱导的人肝LO2细胞炎症损伤具有保护作用,其作用可能通过TLR4/NF-κB信号通路产生。展开更多
文摘目的基于TLR4/NF-κB信号通路探讨枳葛保肝降脂方含药血清对乙醇诱导的人肝LO2细胞炎症损伤的作用及机制。方法将人肝LO2细胞分为正常组(10%正常大鼠血清)、诱导组(10%正常大鼠血清+2.5%无水乙醇)、美他多辛组(10%美他多辛含药血清+2.5%无水乙醇)和低、中、高浓度枳葛保肝降脂方含药血清组(简称“低、中、高浓度组”)(10.0%、5.0%、2.5%枳葛保肝降脂方含药血清+2.5%无水乙醇)。采用酶联免疫吸附试验法检测各组细胞裂解液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量;Western blot法检测各组Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、NLR家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、磷酸化核因子κB p65亚基/核因子κB p65亚基(p-NF-κBp65/NF-κBp65)蛋白表达水平;RT-qPCR检测各组TLR4、MYD88、NLRP3、Caspase-1 m RNA表达情况。结果与正常组比较,诱导组中TNF-α、IL-1β、IL-18含量,TLR4、My D88、NLRP3、Caspase-1、p-NF-κBp65/NF-κBp65蛋白表达水平,TLR4、MYD88、NLRP3、Caspase-1 m RNA表达量均升高(P<0.01)。与诱导组比较,中、高浓度组TNF-α、IL-1β、IL-18含量,TLR4、My D88、NLRP3、Caspase-1、p-NF-κBp65/NF-κBp65蛋白表达水平,TLR4、MYD88、NLRP3、Caspase-1、p-NF-κBp65/NF-κBp65mRNA表达量均降低(P<0.01)。结论枳葛保肝降脂方含药血清对无水乙醇诱导的人肝LO2细胞炎症损伤具有保护作用,其作用可能通过TLR4/NF-κB信号通路产生。