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Rice ferredoxin OsFd4 contributes to oxidative stress tolerance but compromises defense against blight bacteria 被引量:3
1
作者 Minfeng Lu Jinhui Chen +5 位作者 Han Meng Guangling Mo Yunhong Liu Fengping Chen Zonghua Wang Mo Wang 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2023年第6期1937-1942,共6页
Ferredoxins(Fds)in plastids are the most upstream stromal electron receptors shuttling electrons to downstream metabolic systems and function in various physiological processes of dicots,but their roles in monocots’r... Ferredoxins(Fds)in plastids are the most upstream stromal electron receptors shuttling electrons to downstream metabolic systems and function in various physiological processes of dicots,but their roles in monocots’response to stresses are still unclear.In this study,the functions of OsFd4,the major non-photosynthetic type Fd in rice,were characterized under oxidative stress and Xanthomonas oryzae pv.oryzae(Xoo)infection.OsFd4-knockout mutants displayed no defects in key agronomic traits and blast resistance,but were more sensitive to hydrogen peroxide(H2O2)treatment than the wild type.Transient expression of OsFd4 alleviated H2O2-induced rice cell death,suggesting that OsFd4 contributes to rice tolerance to exogenous oxidative stress.Deletion of OsFd4 enhanced rice immune responses against Xoo.OsFd4 formed a complex in vivo with itself and OsFd1,the major photosynthetic Fd in rice,and OsFd1 transcripts were increased in leaf and root tissues of the OsFd4-knockout mutants.These results indicate that OsFd4 is involved in regulating rice defense against stresses and interplays with OsFd1. 展开更多
关键词 ferredoxin RICE OsFd4 Oxidative stress Blight bacteria
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CLONING AND SEQUENCING OF THE FERREDOXIN GENE OF BLUE-GREEN ALGA ANABAENA SIAMENSIS
2
作者 李寿东 宋立荣 +1 位作者 刘永定 赵进东 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 1998年第S1期12-16,共5页
The structure gene for ferredoxin, petFI, from Anabaena siamensis has been ampli-fied by polymerase chain reaction(PCR) and cloned into cloning vector pGEM-3zf(+). The nucleotidesequence of petFI has been determined w... The structure gene for ferredoxin, petFI, from Anabaena siamensis has been ampli-fied by polymerase chain reaction(PCR) and cloned into cloning vector pGEM-3zf(+). The nucleotidesequence of petFI has been determined with silver staining sequencing method. There is 96. 8% homologybetween coding region of petFI from A. siamensis and that of petFI from A. sp. 7120. Amino acid se-quences of seven strains of blue-green algae are compared. 展开更多
关键词 ANABAENA siamensis ferredoxin CLONING NUCLEOTIDE SEQUENCE
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Arabidopsis tic62 trol Mutant Lacking Thylakoid- Bound Ferredoxin-NADP+ Oxidoreductase Shows Distinct Metabolic Phenotype 被引量:1
3
作者 Minna Lintala Natalie Schuck +7 位作者 Ina Thormaihlen Andreas Jungfer Katrin L. Weber Andreas P.M. Weber Peter Geigenberger Juirgen Soil Bettina Bolter Paula Mulo 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期45-57,共13页
Ferredoxin-NADP+ oxidoreductase (FNR), functioning in the last step of the photosynthetic electron transfer chain, exists both as a soluble protein in the chloroplast stroma and tightly attached to chloroplast memb... Ferredoxin-NADP+ oxidoreductase (FNR), functioning in the last step of the photosynthetic electron transfer chain, exists both as a soluble protein in the chloroplast stroma and tightly attached to chloroplast membranes. Surface plasmon resonance assays showed that the two FNR isoforms, LFNR1 and LFNR2, are bound to the thylakoid membrane via the C-terminal domains of Tic62 and TROL proteins in a pH-dependent manner. The tic62 trol double mutants contained a reduced level of FNR, exclusively found in the soluble stroma. Although the mutant plants showed no visual phenotype or defects in the function of photosystems under any conditions studied, a low ratio of NADPH/NADP~ was detected. Since the CO2 fixation capacity did not differ between the tic62 trol plants and wild-type, it seems that the plants are able to funnel reducing power to most crucial reactions to ensure survival and fitness of the plants. However, the activity of malate dehydrogenase was down-regulated in the mutant plants. Apparently, the plastid metabolism is able to cope with substantial changes in directing the electrons from the light reactions to stromal metabolism and thus only few differences are visible in steady-state metabolite pool sizes of the tic62 trol plants. 展开更多
关键词 carbon assimilation ferredoxin-NADP+ oxidoreductase photosynthesis CHLOROPLAST stromal metabolism Tic62 TROL.
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Glutathione regulates the transfer of iron-sulfur cluster from monothiol and dithiol glutaredoxins to apo ferredoxin
4
作者 Lei Wang Bingjie Ouyang +4 位作者 Yifei Li Yingang Feng Jean-Pierre Jacquot Nicolas Rouhier Bin Xia 《Protein & Cell》 SCIE CSCD 2012年第9期714-721,共8页
Holo glutaredoxin(Grx)is a homo-dimer that bridges a[2Fe-2S]cluster with two glutathione(GSH)ligands.In this study,both monothiol and dithiol holo Grxs are found capable of transferring their iron-sulfur(FeS)cluster t... Holo glutaredoxin(Grx)is a homo-dimer that bridges a[2Fe-2S]cluster with two glutathione(GSH)ligands.In this study,both monothiol and dithiol holo Grxs are found capable of transferring their iron-sulfur(FeS)cluster to an apo ferredoxin(Fdx)through direct interaction,regardless of FeS cluster stability in holo Grxs.The ligand GSH molecules in holo Grxs are unstable and can be exchanged with free GSH,which inhibits the FeS cluster transfer from holo Grxs to apo Fdx.This phenomenon suggests a novel role of GSH in FeS cluster trafficking. 展开更多
关键词 iron-sulfur cluster GLUTAREDOXIN GLUTATHIONE ferredoxin CD NMR
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FDX1在脑胶质瘤中的表达及临床意义
5
作者 张黎 叶涨 +1 位作者 陈谦学 张申起 《中国临床神经外科杂志》 2025年第1期28-32,共5页
目的 探讨铁氧还蛋白1(FDX1)在脑胶质瘤中的表达及临床意义。方法 从TCGA、CGGA、Rembrandt数据库中下载脑胶质瘤的基因表达数据和对应的临床数据,进行临床特征及生存分析,利用Cancer GSEA在线网站分析FDX1在脑胶质瘤中潜在的生物学功能... 目的 探讨铁氧还蛋白1(FDX1)在脑胶质瘤中的表达及临床意义。方法 从TCGA、CGGA、Rembrandt数据库中下载脑胶质瘤的基因表达数据和对应的临床数据,进行临床特征及生存分析,利用Cancer GSEA在线网站分析FDX1在脑胶质瘤中潜在的生物学功能,利用肿瘤免疫估算资源(TIMER)在线网站分析FDX1与肿瘤免疫浸润之间的相关性。采用免疫组化染色法检测FDX1在2023年1月至2023年6月手术切除的10例脑胶质瘤组织和非肿瘤脑组织中的表达差异。结果 FDX1在脑胶质瘤中表达水平明显高于非肿瘤脑组织(P<0.05),而且,与脑胶质瘤病理分级呈正相关(P<0.05)。FDX1高表达的胶质瘤患者中位生存期较低表达患者明显缩短(P<0.05)。FDX1表达水平与胶质瘤组织中CD4^(+)T细胞、中性粒细胞、单核细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞及巨噬细胞的浸润程度成正比(P<0.05)。结论 脑胶质瘤FDX1呈高表达,与脑胶质瘤的恶性程度、免疫浸润及患者生存预后密切相关。这提示FDX1可作为脑胶质瘤的生物标志物。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 铁氧还蛋白1(FDX1) 生物学标志物 预后
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基于SLC31A1/FDX1通路探讨槲皮素抑制铜死亡缓解类风湿性关节炎大鼠的作用及机制 被引量:1
6
作者 杨昊若 寇秋爱 +2 位作者 任军华 袁果 杨斌 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第1期121-130,共10页
目的:观察槲皮素对类风湿性关节炎的大鼠铜死亡的影响及治疗作用,并基于溶质载体家族31成员1(SLC31A1)/铁氧还蛋白1(FDX1)通路探究其可能机制。方法:60只雄性SD大鼠分为6组:正常组、模型组、槲皮素高、低剂量(150、50 mg·kg^(-1))... 目的:观察槲皮素对类风湿性关节炎的大鼠铜死亡的影响及治疗作用,并基于溶质载体家族31成员1(SLC31A1)/铁氧还蛋白1(FDX1)通路探究其可能机制。方法:60只雄性SD大鼠分为6组:正常组、模型组、槲皮素高、低剂量(150、50 mg·kg^(-1))组、铜死亡抑制剂(TTM)组(10 mg·kg^(-1))、甲氨蝶呤(2 mg·kg^(-1))组,每组10只。除正常组外,采用Ⅱ型胶原诱导法制备类风湿性关节炎模型(CIA)大鼠。造模成功后,各给药组按相应剂量药物进行干预,正常组、模型组使用等体积生理盐水灌胃,每天1次,干预周期为4周。观察大鼠足肿胀度并测定关节炎临床积分;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清类风湿因子(RF)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素(IL)-1β、IL-10、铜蓝蛋白(Cp)水平;检测关节组织铜(Cu)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平;苏木素-伊红(HE)染色法观察关节组织病理形态变化;免疫荧光法(IF)检测关节组织活性氧(ROS)及二氢硫辛酸转乙酰酶(DLAT)水平;免疫组化法(IHC)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测SLC31A1、FDX1、硫辛酸合成酶(LIAS)、热休克蛋白70(HSP70)、丙酮酸脱氢酶E1亚基β(PDHB)、铜转运P型ATP酶β(ATP7B)蛋白及mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节红肿畸形,关节炎临床积分明显升高,关节组织骨破坏、滑膜增生及炎性细胞浸润,病理改变明显,血清中RF、MMP-3、TNF-α、IL-1β、Cp水平明显上升,IL-10水平降低;关节组织Cu、MDA、ROS,DLAT水平明显升高,SOD、GSH含量明显降低;SLC31A1、HSP70蛋白及mRNA表达均明显上调,FDX1、LIAS、PDHB、ATP7B蛋白及mRNA表达下调(P<0.01)。与模型组比较,各给药组均不同程度改善大鼠关节肿胀变形程度,减低关节炎临床积分,降低大鼠关节骨破坏程度及炎细胞浸润及滑膜增生,血清RF、MMP-3、TNF-α、IL-1β、Cp水平明显降低,IL-10水平上升,关节组织Cu、MDA、ROS、DLAT水平明显降低,SOD、GSH水平升高,SLC31A1、HSP70蛋白及mRNA表达下调,FDX1、LIAS、PDHB、ATP7B蛋白及mRNA表达上调(P<0.05)。结论:槲皮素可有效减轻类风湿性关节炎大鼠滑膜增生及炎性浸润,缓解关节组织病理损伤,其机制或与阻断SLC31A1/FDX1信号通路激活,抑制过度的铜死亡有关。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 槲皮素 铜死亡 溶质载体家族31成员1/铁氧还蛋白1
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Drug resistance in the sexually transmitted protozoan Trichomonas vaginalis 被引量:4
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作者 REBECCALDUNNE LINDAADUNN +2 位作者 PETERUPCROFT PETERJO‘DONOGHUE JACQUE-LINEAUPCROFT 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2003年第4期239-250,共12页
Trichomoniasis is the most common, sexually transmitted infection. It is caused by the flagellated protozoan parasite Trichomonas vaginalis. Symptoms include vaginitis and infections have been associated with preterm ... Trichomoniasis is the most common, sexually transmitted infection. It is caused by the flagellated protozoan parasite Trichomonas vaginalis. Symptoms include vaginitis and infections have been associated with preterm delivery, low birth weight and increased infant mortality, as well as predisposing to HIV/AIDS and cervical cancer. Trichomoniasis has the highest prevalence and incidence of any sexually transmitted infection. The 5-nitroimidazole drugs, of which metronidazole is the most prescribed, are the only approved,effective drugs to treat trichomoniasis. Resistance against metronidazole is frequently reported and crossresistance among the family of 5-nitroimidazole drugs is common, leaving no alternative for treatment, with some cases remaining unresolved. The mechanism of metronidazole resistance in T. vaginalis from treatment failures is not well understood, unlike resistance which is developed in the laboratory under increasing metronidazole pressure. In the latter situation, hydrogenosomal function which is involved in activation of the prodrug, metronidazole, is down-regulated. Reversion to sensitivity is incomplete after removal of drug pressure in the highly resistant parasites while clinically resistant strains, so far analysed, maintain their resistance levels in the absence of drug pressure. Although anaerobic resistance has been regarded as a laboratory induced phenomenon, it clearly has been demonstrated in clinical isolates. Pursuit of both approaches will allow dissection of the underlying mechanisms. Many alternative drugs and treatments have been tested in vivo in cases of refractory trichomoniasis, as well as in vitro with some successes including the broad spectrum anti-parasitic drug nitazoxanide. Drug resistance incidence in T. vaginalis appears to be on the increase and improved surveillance of treatment failures is urged. 展开更多
关键词 Trichomonas vaginalis METRONIDAZOLE pyruvate: ferredoxin oxidoreductase ferredoxin hydrogenase drug resistance.
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Key genes expression of reductive tricarboxylic acid cycle from deep-sea hydrothermal chemolithoautotrophic Caminibacter profundus in response to salinity, pH and O_2 被引量:2
8
作者 HE Peiqing LIU Yan +1 位作者 YUE Wenjuan HUANG Xiaohang 《Acta Oceanologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2013年第2期35-41,共7页
CO2 fixation pathway of Caminibacter profundus, a chemolithoautotrophic e-Proteobacteria from deep-sea hydrothermal vent, was determined and characterized by genetic and enzymatic analyses. Gene expression of key enzy... CO2 fixation pathway of Caminibacter profundus, a chemolithoautotrophic e-Proteobacteria from deep-sea hydrothermal vent, was determined and characterized by genetic and enzymatic analyses. Gene expression of key enzymes for CO2 fixation in response to salinity, pH and O2 in Medium 829 were also investigated. The results demonstrate that C. profundus contained aclB, porA and oorA, the genes encoding key enzymes of reductive tricarboxylic acid (rTCA) cycle. However, genes fragments of cbbL and cbbMencoding key enzyme of Calvin cycle were not recovered. Key enzymatic activities of ATP citrate lyase (ACL), pyruvate: ferredoxin oxidoreductase (POR) and 2-oxoglutarate: ferredoxin oxidoreductase (OOR) were also present in C. profun- dus. The combination of genetic and enzymatic analyses confirm that C. profundus adopted rTCA cycle for carbon assimilation. The results of aclB and oorA relative expressions of C. profundus demonstrate that the ranges of environmental factors for high genes expression were sea salt 3.0%-5.0% (optimum 3.0%), pH 5.0-6.5(optimum pH 6.5), anaerobic to microaerobic conditions (optimum 1.0% 02). Gene expression pat- terns under different conditions show similar patterns with bacterial growth, revealing that key rTCA cycle genes provided molecular basis for bacterial growth and propagation. Our results suggest that C. profun- dus could regulate key genes of rTCA cycle for carbon assimilation and energy metabolism in response to environmental fluctuations in hydrothermal vent. 展开更多
关键词 Caminibacter profundus reductive tricarboxylic acid (rTCA) cycle ATP citrate lyase pyruvate:ferredoxin oxidoreductase 2-oxoglutarate: ferredoxin oxidoreductase hydrothermal vent
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铁硫簇的结构、功能及生物合成研究进展 被引量:10
9
作者 黄霞 曾嘉 +2 位作者 王敏 柳建设 邱冠周 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第5期944-947,951,共5页
铁硫簇是普遍存在于生物体中的最古老的生命物质之一。铁硫簇基本结构单元有[2Fe-2S]、[3Fe-4S]、[4Fe-4S]及[8Fe-7S]等几种形式,不同结构的铁硫簇具有不同的生物学功能,主要包括参与电子传递、底物的结合与激活、铁/硫的存储、基因表... 铁硫簇是普遍存在于生物体中的最古老的生命物质之一。铁硫簇基本结构单元有[2Fe-2S]、[3Fe-4S]、[4Fe-4S]及[8Fe-7S]等几种形式,不同结构的铁硫簇具有不同的生物学功能,主要包括参与电子传递、底物的结合与激活、铁/硫的存储、基因表达的调控、酶活的调控等。铁硫簇既可在生物体内合成,也可在体外进行人工组装。铁硫簇的生物合成主要和NIF、ISC、SUF这三个系统有关。研究已确定了参与铁硫簇合成的关键蛋白,但对它们分子水平上的机制及如何进行相互作用在体内外合成铁硫簇的认识尚待进一步研究。 展开更多
关键词 铁硫簇 铁氧还蛋白 生物合成 支架蛋白 分子伴侣
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Prdx2在结直肠癌细胞增殖、凋亡中的作用及其机制研 被引量:6
10
作者 王昊 傅仲学 +3 位作者 卢伟东 魏锦来 黄镇 谢勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期293-296,共4页
目的观察Prdx2基因对结直肠癌细胞SW480增殖及凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。方法将干扰片段(Prdx2-shRNA)及空载体(阴性对照)经慢病毒转染结直肠癌细胞株SW480,1.25μg/ml嘌呤霉素筛选,建立稳定细胞株,以野生型SW480细胞作为空白... 目的观察Prdx2基因对结直肠癌细胞SW480增殖及凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。方法将干扰片段(Prdx2-shRNA)及空载体(阴性对照)经慢病毒转染结直肠癌细胞株SW480,1.25μg/ml嘌呤霉素筛选,建立稳定细胞株,以野生型SW480细胞作为空白对照。采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qRT-PCR及Western blotting检测Prdx2及survivin的mRNA和蛋白表达情况。结果沉默Prdx2基因对结直肠癌细胞株SW480的生长和增殖有明显抑制作用。与阴性对照(5.59%±0.63%)及空白对照(5.79%±0.60%)比较,Prdx2基因沉默后,细胞凋亡率明显增加(26.60%±4.39%,P<0.05)。qRT-PCR、Western blotting结果显示,干扰Prdx2基因明显降低了survivin mRNA及蛋白表达。结论沉默Prdx2基因可抑制结直肠癌细胞增殖,增加凋亡,其机制可能与下调survivin的表达有关。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 转氧化还原蛋白类 RNA干扰 细胞凋亡
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高等植物铁氧还蛋白-NADP^+氧化还原酶研究进展 被引量:15
11
作者 杨超 胡红涛 +1 位作者 吴平 莫肖蓉 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1353-1366,共14页
高等植物叶绿体定位的铁氧还蛋白-NADP+氧化还原酶(LFNR)负责催化光合线性电子传递的最后一步反应,催化电子由还原态的铁氧还蛋白(Fd)传递给NADP+。LFNR分布在叶绿体的3个不同的组分中,即叶绿体基质中、类囊体膜上和叶绿体内膜上。最近... 高等植物叶绿体定位的铁氧还蛋白-NADP+氧化还原酶(LFNR)负责催化光合线性电子传递的最后一步反应,催化电子由还原态的铁氧还蛋白(Fd)传递给NADP+。LFNR分布在叶绿体的3个不同的组分中,即叶绿体基质中、类囊体膜上和叶绿体内膜上。最近的研究表明,大多数膜定位的LFNR并非光合作用所必需的,叶绿体基质中的LFNR足以维持光合作用的正常进行。叶绿体中的两个蛋白——Tic62和TROL作为LFNR的锚定蛋白,可以与LFNR在类囊体膜上形成高分子量的蛋白复合体。Tic62-LFNR复合体主要负责在夜间保护LFNR的活性,但它不直接在光合作用中起作用。然而,TROL-LFNR复合体对植物的光合作用有一定的影响。本文将概述植物LFNR的最新研究进展。 展开更多
关键词 高等植物 光合作用 电子传递 铁氧还蛋白-NADP+氧化还原酶
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文心兰RFNR的克隆、亚细胞定位及其与LFNR不同的胁迫响应机制研究 被引量:5
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作者 李蓉 吴晓佩 +5 位作者 王雪晶 陈裕坤 郭容芳 林玉玲 赖钟雄 徐涵 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2164-2176,共13页
以‘小樱桃’文心兰为材料克隆了铁氧还蛋白氧化还原酶(FNR)两种类型基因RFNR(Root-type Ferredoxin-NADP+oxidoreductase)和LFNR(Leaf-type Ferredoxin-NADP+oxidoreductase)。生物信息学分析表明,RFNR与LFNR都属于FNR-like超家族,具... 以‘小樱桃’文心兰为材料克隆了铁氧还蛋白氧化还原酶(FNR)两种类型基因RFNR(Root-type Ferredoxin-NADP+oxidoreductase)和LFNR(Leaf-type Ferredoxin-NADP+oxidoreductase)。生物信息学分析表明,RFNR与LFNR都属于FNR-like超家族,具有黄素腺嘌呤二核苷酸(flavinadenine dinucleotide,FAD)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)功能结合域,在进化过程中比较保守;两种类型的FNR在氨基酸组成、蛋白结构和构型方面存在明显差异,RFNR比LFNR有更强的保守性。FNR蛋白亚细胞定位结果表明文心兰FNR蛋白都定位于叶绿体。实时荧光定量PCR分析表明,LFNR和RFNR具有器官表达特异性:LFNR更多地在叶中表达,RFNR更多地在根中表达;在软腐病胁迫下LFNR下调响应,RFNR上调响应;两种类型的FNR在盐胁迫以及高温胁迫处理时上调响应,但RFNR响应较快且强度更大;LFNR和RFNR在水杨酸(salicylicacid,SA)处理时轻微波动,茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理时呈现单峰反应。文心兰两种类型的FNR基因在不同类型的胁迫中显示相似的和有区别的表达特性,表明其具有不同的胁迫响应分子机理。 展开更多
关键词 文心兰 铁氧还蛋白氧化还原酶 胁迫 亚细胞定位 基因表达
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亚硫酸氢钠在低光强下对叶绿体循环光合磷酸化的促进作用 被引量:24
13
作者 魏家绵 沈允钢 +1 位作者 李德耀 徐春和 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1989年第1期101-104,共4页
我们在70年代曾发现喷洒低浓度的亚硫酸氢钠能提高多种作物叶片的光合作用速率(沈允钢等1980)。近年来,谭实和沈允钢(1987)观察到喷洒低浓度的亚硫酸氢钠不但能增加作物叶片的光合作用速率,而且同时增加其呼吸作用速率。
关键词 叶绿体 光合磷酸化 亚硫酸氢钠
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阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因的克隆和序列分析 被引量:2
14
作者 谢辉 王雅静 +2 位作者 帖超男 毕世樑 刘佩娜 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期24-26,共3页
目的 构建阴道毛滴虫铁氧还蛋白 (ferredoxin ,Fd)基因重组质粒 ,并进行克隆及序列分析。 方法 根据Fd基因已知序列 ,设计合成 1对引物 ,应用螯合树脂 (Chelex 10 0 )提取基因组DNA ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增出Fd基因 ,克隆入pMD 18... 目的 构建阴道毛滴虫铁氧还蛋白 (ferredoxin ,Fd)基因重组质粒 ,并进行克隆及序列分析。 方法 根据Fd基因已知序列 ,设计合成 1对引物 ,应用螯合树脂 (Chelex 10 0 )提取基因组DNA ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增出Fd基因 ,克隆入pMD 18T载体 ,转化大肠埃希菌JM 10 9感受态细胞 ,经PCR及酶切鉴定、测序。 结果 Fd基因体外扩增产物长度为 3 0 6bp ,重组质粒经PCR及酶切鉴定结果表明获得正确重组子 ,测序结果表明其片段与已知序列吻合。 结论 克隆出阴道毛滴虫Fd基因。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 蛋白基因 克隆 吻合 PCR 序列分析 测序 酶切 增产 引物
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一种新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因(英文) 被引量:3
15
作者 傅玉才 徐虹 +4 位作者 章家新 张可浩 刘红 林晖榕 郑晓虹 《热带医学杂志》 CAS 2004年第4期352-356,381,共6页
目的铁氧还蛋白系铁硫蛋白,在多种反应体系中起着传递电子的作用,也参与抗滴虫药物甲硝咪唑杀虫作用的激活。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因,以便进一步探讨其生理功能。方法构建阴道毛滴虫cDNA表达文库,分离cDNA进行克... 目的铁氧还蛋白系铁硫蛋白,在多种反应体系中起着传递电子的作用,也参与抗滴虫药物甲硝咪唑杀虫作用的激活。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因,以便进一步探讨其生理功能。方法构建阴道毛滴虫cDNA表达文库,分离cDNA进行克隆、测序及序列分析。结果在分离出的cDNA克隆中发现一个新的铁氧还蛋白基因。该基因读码框全长312bp,相应蛋白质序列具103个氨基酸;在该蛋白质前体的N端带有10个氨基酸残基的氢酶体靶片段(MLSQCSPLRF)。序列分析显示该铁氧还蛋白(TvFd2)与已报道的阴道毛滴虫铁氧还蛋白(TvFd)有高度同源性(69%);TvFd2与铁氧还蛋白(2Fe-2S)的两大亚类(氧化酶铁氧还蛋白和光合铁氧还蛋白)均具较低的同源性;可与(2Fe-2S)结合的4个半胱氨酸排列成典型的铁氧还蛋白保守序列(-C-X5-C-X2-C-Xn-C-)。结论分析表明TvFd2是一新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白,其功能有待进一步研究。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 铁氧还蛋白 基因克隆
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拟南芥铁氧还蛋白基因缺失促进花期提前的初步研究(英文) 被引量:2
16
作者 刘兵 魏海轩 +4 位作者 苏建斌 张洋 王金发 王宏斌 冯冬茹 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期112-116,127,共6页
拟南芥的红光/远红光受体光敏色素(PHYs)参与花期调节过程,而铁氧还蛋白色素还原酶(FD-BRs)的一种——植物色素合成酶(HY2)对于光敏色素的合成是必不可少的。研究发现拟南芥铁氧还蛋白——AtFd2的基因缺失突变体(Fd2-KO突变体)在长日照... 拟南芥的红光/远红光受体光敏色素(PHYs)参与花期调节过程,而铁氧还蛋白色素还原酶(FD-BRs)的一种——植物色素合成酶(HY2)对于光敏色素的合成是必不可少的。研究发现拟南芥铁氧还蛋白——AtFd2的基因缺失突变体(Fd2-KO突变体)在长日照与短日照培养条件下,较其野生型而言均表现出花期提前的表型,而且显示AtFd2与AtHY2在叶绿体中发生互作,并且Fd2突变体对光敏色素的反应受到抑制。推测At-Fd2基因的缺失可能通过影响光敏色素介导的相关生理功能进而对植株的花期进行调节。 展开更多
关键词 铁氧还蛋白2 拟南芥 开花
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铁氧化还原蛋白在多壁碳纳米管上的固定、表征及直接电子转移 被引量:7
17
作者 吕亚芬 蔡称心 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第24期2396-2402,共7页
将来源于SpinaciaOleracea的铁氧化还原蛋白(ferredoxin,SOFd)固定在多壁碳纳米管(CNT)表面,紫外-可见及红外光谱表明,SOFd在CNT表面没有变性,仍保持原来的二级空间结构.循环伏安结果表明,SOFd在CNT表面能进行有效和稳定的直接电子转移... 将来源于SpinaciaOleracea的铁氧化还原蛋白(ferredoxin,SOFd)固定在多壁碳纳米管(CNT)表面,紫外-可见及红外光谱表明,SOFd在CNT表面没有变性,仍保持原来的二级空间结构.循环伏安结果表明,SOFd在CNT表面能进行有效和稳定的直接电子转移反应,伏安曲线上出现一对良好的、几乎对称的氧化还原峰,式量电位E0'为(-570.4±1.5)mV(vs.SCE,0.1mol/L磷酸盐缓冲液),且不随扫速和溶液pH值的变化而变化.SOFd直接电子转移的表观速率常数ks为(0.73±0.04)s-1. 展开更多
关键词 碳纳米管 化学修饰电极 铁氧化还原蛋白 直接电化学
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文心兰转化龙眼不同类型铁氧还蛋白基因提高抗病作用分析 被引量:2
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作者 叶炜 林玉玲 +4 位作者 匡云波 江金兰 李永清 雷伏贵 赖钟雄 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2015年第9期850-855,共6页
以含5mg·L-1潮霉素MS培养基进行抗性筛选培养,以EHA105农杆菌介异,将龙眼2个非光合铁氧还蛋白基因导入文心兰,结果表明,所获Fd3转化植株表现更高的移栽成活率和对抗病害的能力。与野生型植株相比,Fd3转化植株抵抗软腐病能力提高,... 以含5mg·L-1潮霉素MS培养基进行抗性筛选培养,以EHA105农杆菌介异,将龙眼2个非光合铁氧还蛋白基因导入文心兰,结果表明,所获Fd3转化植株表现更高的移栽成活率和对抗病害的能力。与野生型植株相比,Fd3转化植株抵抗软腐病能力提高,由高感软腐病(Di=100)提升为中抗软腐病(Di=27.5),移栽成活率由79.3%提高至95.7%,均达极显著差异水平。 展开更多
关键词 切花 文心兰 转基因 铁氧还蛋白 抗病力
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铁氧化还原蛋白的直接电化学 被引量:1
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作者 吕亚芬 印亚静 +3 位作者 杜攀 吴萍 陆天虹 蔡称心 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期53-55,共3页
将来源于Spinacia oleracea的铁氧化还原蛋白(ferredoxin,SoFd)通过吸附的方法固定在碳纳米管(CNT)表面.红外光谱表明SoFd固定在CNT表面后没有变性.循环伏安结果表明,SoFd在CNT表面能进行有效和稳定的直接电子转移反应,伏安曲线上表现... 将来源于Spinacia oleracea的铁氧化还原蛋白(ferredoxin,SoFd)通过吸附的方法固定在碳纳米管(CNT)表面.红外光谱表明SoFd固定在CNT表面后没有变性.循环伏安结果表明,SoFd在CNT表面能进行有效和稳定的直接电子转移反应,伏安曲线上表现出一对良好的、几乎对称的氧化还原峰;式量电位E0′不随扫速(在20—120 mV/s的扫速范围内,其平均值为(-571.7±1.9)mV(vs.SCE,pH 7.0))变化而变化;SoFd直接电子转移的表观速率常数ks为(0.73±0.04)s-1. 展开更多
关键词 碳纳米管 修饰电极 直接电化学 铁氧化还原蛋白
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普通烟草铁氧还蛋白Ⅰ的原核表达、抗体制备及在ToMV侵染烟草体内表达分析 被引量:1
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作者 孙现超 李勇 +1 位作者 周常勇 青玲 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期3981-3987,共7页
【目的】构建普通烟草铁氧还蛋白I(ferredoxin I,Fdn-Ⅰ)原核表达载体,表达可溶性Fdn-Ⅰ蛋白,并制备其多克隆抗体,分析Fdn-Ⅰ在ToMV侵染烟草叶片内的表达情况。【方法】以Fdn-Ⅰ全长cDNA为模板,用PCR扩增Fdn-Ⅰ,克隆至原核表达载体pEGX-... 【目的】构建普通烟草铁氧还蛋白I(ferredoxin I,Fdn-Ⅰ)原核表达载体,表达可溶性Fdn-Ⅰ蛋白,并制备其多克隆抗体,分析Fdn-Ⅰ在ToMV侵染烟草叶片内的表达情况。【方法】以Fdn-Ⅰ全长cDNA为模板,用PCR扩增Fdn-Ⅰ,克隆至原核表达载体pEGX-6p-1,构建Fdn-Ⅰ与GST融合表达载体pEGX-Fdn-Ⅰ,重组质粒转化原核表达菌株BL21,优化GST-Fdn-Ⅰ可溶性表达条件后大量表达蛋白,用GST亲和层析法纯化获得可溶性GST-Fdn-Ⅰ蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体。ELISA测定抗体效价,Western印迹法检测抗体的特异性和ToMV侵染前后烟草叶片内Fdn-Ⅰ的表达情况。【结果】在温度为28℃,IPTG诱导浓度为0.3mmol·L-1条件下表达出大小为41.3kD的可溶性融合蛋白。纯化获得约4mg可溶性蛋白,免疫家兔制备了效价为1/6400的多克隆抗体。Western印迹结果表明,该抗体可以与Fdn-Ⅰ的原核和酵母表达产物特异性结合。分析表明Fdn-Ⅰ在ToMV侵染后烟草叶片内含量明显低于其在健康烟草叶片内的含量。【结论】通过Fdn-Ⅰ大肠杆菌中的可溶性表达,制备获得了其高效价特异性多克隆抗体,利用该抗体检测表明ToMV侵染烟草降低了Fdn-Ⅰ的表达。 展开更多
关键词 铁氧还蛋白Ⅰ 原核表达 抗体 番茄花叶病毒
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