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柞蚕蛹蛋白的提取及分子量测定的实验研究
1
作者 夏鑫媛 冷杰雯 +3 位作者 霍长金 李昀衡 王佳佟 李昌丽 《山东化工》 2025年第4期45-48,共4页
柞蚕蛹历史悠久,年产量丰富,富含蛋白优质,虽然已经应用于食品、医药、纺织等领域,但其工艺尚不成熟,工厂大批量生产难以保障其蛋白品质,无意间造成资源上的浪费。利用丙酮对柞蚕蛹进行脱脂,选用超声辅助碱水解法来提取脱脂蛹粉的蛋白,... 柞蚕蛹历史悠久,年产量丰富,富含蛋白优质,虽然已经应用于食品、医药、纺织等领域,但其工艺尚不成熟,工厂大批量生产难以保障其蛋白品质,无意间造成资源上的浪费。利用丙酮对柞蚕蛹进行脱脂,选用超声辅助碱水解法来提取脱脂蛹粉的蛋白,然后采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对蛹蛋白质提取液进行电泳实验,测定蛹蛋白的相对分子质量,测得其相对分子质量范围大部分为14.4~31.0 kDa,相对分子质量较小,可达到分子肽级别,有益于人体吸收,该方法可为柞蚕蛹蛋白在食品添加剂、医药、护肤品等领域的综合开发利用提供理论依据。 展开更多
关键词 柞蚕 蛹蛋白 SDS-PAGE
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鱼鳔蛋白质成分提取、表征及功效研究进展
2
作者 王云帆 贺木易 +2 位作者 蔡亚杰 徐炼 杨敏莉 《质量安全与检验检测》 2025年第3期1-6,12,共7页
鱼类鱼鳔(fish swim bladder,FSB)蛋白质含量较高,具有一定的营养价值。通过提取、纯化和改性过程,可以增强其药理活性及医疗功效。本文综述了FSB蛋白质分析方法学内容,重点关注蛋白质成分提取、表征及功效研究。FSB蛋白质及其制品表现... 鱼类鱼鳔(fish swim bladder,FSB)蛋白质含量较高,具有一定的营养价值。通过提取、纯化和改性过程,可以增强其药理活性及医疗功效。本文综述了FSB蛋白质分析方法学内容,重点关注蛋白质成分提取、表征及功效研究。FSB蛋白质及其制品表现出多种生物活性,包括抗氧化、抗炎、促进伤口愈合、抗衰老等。多项研究表明,FSB制品作为营养保健品、生物医学产品和治疗制剂均具有良好应用前景,在多种健康问题的干预中具有潜在价值。 展开更多
关键词 鱼鳔 蛋白质成分提取 表征 功效
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多光谱法结合分子模拟探究邻苯二甲酸酯对胃蛋白酶的作用机理 被引量：1
3
作者 马兰 吴雨婷 +2 位作者 周俊锹 张杨 吴来燕 《分析试验室》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1377-1384,共8页
通过多光谱法、分子模拟技术和细胞毒性实验,研究了邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)和邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)与胃蛋白酶(PEP)的作用机理。荧光光谱实验表明,DEHP/DNOP对PEP产生静态猝灭,形成了稳定的复合物。其相互作用是由氢键和... 通过多光谱法、分子模拟技术和细胞毒性实验,研究了邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)和邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)与胃蛋白酶(PEP)的作用机理。荧光光谱实验表明,DEHP/DNOP对PEP产生静态猝灭,形成了稳定的复合物。其相互作用是由氢键和范德华力驱动的自发反应过程(ΔG<0),结合位点均为1;且受支链结构影响,DEHP与PEP的结合常数K_(a)(1.97×10^(4)L/mol)和分子极性指数MPI(7.65 kcal/mol)均大于DNOP(1.58×10^(4)L/mol,7.43 kcal/mol)。同步荧光光谱和分子对接结果表明,DEHP和DNOP均能与PEP的Tyr 75和Tyr 189结合,导致PEP荧光猝灭以及Tyr残基微环境的疏水性增强。圆二色谱和三维荧光光谱结果表明,DEHP与PEP结合,导致PEP二级结构中的α-Helix含量增加,β-Sheet含量下降至41.4%。DEHP和DNOP对Caco-2细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别为4.99×10^(-4)mol/L和3.59×10^(-2)mol/L,证实了DEHP对PEP的毒性更强。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 邻苯二甲酸二正辛酯 胃蛋白酶 多光谱法 分子对接
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不同SDS-PAGE分离胶浓度条件下大豆贮藏蛋白亚基的分辨效果 被引量：40
4
作者 王显生 麻浩 +2 位作者 向世鹏 张国正 崔国贤 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期75-80,共6页
采用SDS-PAGE浓缩胶浓度为5%,分离胶浓度分别为9%、10%、11%、12%、13%的凝胶系统,探讨不同分离胶浓度条件下大豆籽粒主要贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基的分辨效果。结果表明,分离胶浓度大小对大豆贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基电泳图谱分辨... 采用SDS-PAGE浓缩胶浓度为5%,分离胶浓度分别为9%、10%、11%、12%、13%的凝胶系统,探讨不同分离胶浓度条件下大豆籽粒主要贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基的分辨效果。结果表明,分离胶浓度大小对大豆贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基电泳图谱分辨率的影响非常明显。分离胶浓度为9%和10%时,7S组分亚基(α′、α和β)分辨效果较好;分离胶浓度为13%时,11S组分各亚基(A3、A4A2、A1aA1b、A5、B3、B1aB1bB2和B4)分辨效果较好。如需获得较好的7S和11组分亚基综合分辨效果,以分离胶浓度为12%的凝胶系统为佳。 展开更多
关键词 大豆 蛋白亚基 SDS—PAGE 分离胶浓度 分辨效果
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席夫碱法制备大孔聚合物肝素亲和层析介质
5
作者 古嘉如 王楠 +6 位作者 马磊 乔娟 靳海波 何广湘 赵岚 黄永东 张荣月 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期480-488,共9页
肝素亲和层析介质因其专一性好、操作条件温和等特点,广泛应用于蛋白分离纯化,本工作以大孔聚丙烯酸酯微球为基质,肝素为配基,利用席夫碱法制备了肝素亲和层析介质。配基偶联经过三步完成,首先将大孔聚丙烯酸酯微球表面环氧基团通过0.5 ... 肝素亲和层析介质因其专一性好、操作条件温和等特点,广泛应用于蛋白分离纯化,本工作以大孔聚丙烯酸酯微球为基质,肝素为配基,利用席夫碱法制备了肝素亲和层析介质。配基偶联经过三步完成,首先将大孔聚丙烯酸酯微球表面环氧基团通过0.5 mol/L H_(2)SO_(4)水解为邻羟基,然后将邻羟基氧化为醛基,最后利用醛基与肝素分子的胺基反应将肝素分子固定于微球表面。以溶菌酶为模型蛋白,主要考察了肝素偶联反应的各因素对蛋白结合容量的影响规律,包括肝素浓度、缓冲液pH及浓度、反应时间等,建立了最优偶联肝素配基的方法。所得亲和介质静态结合容量可达40.3 mg/mL,比商品GP-肝素介质高约36%,经1.0 mol/L的氯化钠洗脱,其蛋白回收率达到95%。通过扫描电子显微镜表征微球表面形貌,观察到偶联肝素后的微球仍能保持其大孔结构。考察了该类亲和介质在不同操作流速(31.8~318 cm/h)下的动态结合容量,发现操作流速提高10倍后介质结合容量仅下降12%。经10次重复使用后,动态结合容量仍可保持初始容量的81%。用于混合蛋白模型中分离乳铁蛋白,结果表明具有良好的分离效果。 展开更多
关键词 亲和层析 肝素 大孔层析介质 偶联方法 席夫碱法
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大豆分离蛋白及超高压对鸡肉凝胶色泽、保水和质构的影响 被引量：22
6
作者 方红美 陈从贵 +1 位作者 马力量 王武 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期129-132,共4页
添加大豆分离蛋白(SPI)与超高压处理可以改善肉制品保水性、质构等品质。本研究侧重调查0～3.0%大豆分离蛋白添加水平、300MPa压力对鸡肉糜凝胶色泽、保水和质构的影响。结果表明,对于非受压鸡肉凝胶,其亮度与持水性随SPI添加浓度的增... 添加大豆分离蛋白(SPI)与超高压处理可以改善肉制品保水性、质构等品质。本研究侧重调查0～3.0%大豆分离蛋白添加水平、300MPa压力对鸡肉糜凝胶色泽、保水和质构的影响。结果表明,对于非受压鸡肉凝胶,其亮度与持水性随SPI添加浓度的增大总体上分别呈下降与上升趋势,并在大于等于2.5%时这种下降或上升程度显著;添加高于1.5%的SPI还可显著提高凝胶的硬度、弹性、黏结性与咀嚼性。对于300MPa的受压鸡肉凝胶,在低于2.0%的SPI添加浓度下,加压处理可以显著提高受压鸡肉凝胶的硬度、弹性、黏结性和咀嚼性;且能够降低凝胶的蒸煮损失率,从而提高产品的出品率。但此超高压也会导致受压鸡肉凝胶亮度值的减小。 展开更多
关键词 大豆分离蛋白 超高压 鸡肉凝胶 色泽 保水性 质构
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大豆7S球蛋白热力学特性、溶解性和溶液性质与表面疏水性相关性研究 被引量：9
7
作者 刘春雷 魏冬旭 +2 位作者 贾烨 江连洲 李丹 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期39-43,49,共6页
以6个具有代表性的大豆品种制备的7S球蛋白为实验对象,采用ANS荧光探针法测定表面疏水性,采用差示扫描量热法分析热力学特性,采用体积排阻-凝胶色谱法分析溶液的相对分子质量及其分布,采用Zeta Plus电位及激光粒度分析仪分析流体动力学... 以6个具有代表性的大豆品种制备的7S球蛋白为实验对象,采用ANS荧光探针法测定表面疏水性,采用差示扫描量热法分析热力学特性,采用体积排阻-凝胶色谱法分析溶液的相对分子质量及其分布,采用Zeta Plus电位及激光粒度分析仪分析流体动力学粒径及其分布并测定ξ-电位,研究大豆7S球蛋白热力学特性、溶解性和溶液性质与表面疏水性的关系。结果表明:大豆7S球蛋白的表面疏水性与变性温度、变性焓、ξ-电位绝对值均呈显著负相关;大豆7S球蛋白的溶解性与表面疏水性呈极显著负相关;大豆7S球蛋白溶液可溶性聚集物的平均相对分子质量、平均粒径与表面疏水性呈显著正相关。 展开更多
关键词 大豆7S球蛋白 热力学特性 溶解性 相对分子质量分布 流体动力学粒径 ξ-电位 表面疏水性
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牛奶抗生素残留快速检测技术进展及应用现状 被引量：21
8
作者 叶兴乾 刘东红 陈健初 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期181-185,共5页
综述了商品化牛奶中抗生素残留的快速检测方法和试剂盒。主要的检测方法有微生物抑制法和酶联免疫法。微生物抑制法的主要试剂盒有DELVOTEST、CHARMSCIENCE、BRILLIANTBLACKREDUCTION等;以免疫法为基础的主要有β-LACTAMS、DEVLX-PRESS... 综述了商品化牛奶中抗生素残留的快速检测方法和试剂盒。主要的检测方法有微生物抑制法和酶联免疫法。微生物抑制法的主要试剂盒有DELVOTEST、CHARMSCIENCE、BRILLIANTBLACKREDUCTION等;以免疫法为基础的主要有β-LACTAMS、DEVLX-PRESS、BETASCREEN、CHARM ASSAY、β-STAR、CHARM-MRL、PENZYM、PARALLUX等。文章列出了这些方法的检测极限,对一些新的检测方法和方向进行了讨论,同时提出了牛奶抗生素残留快速筛选方法的问题和今后的发展方向。 展开更多
关键词 牛奶 抗生素残留 微生物抑制法 酶联免疫法
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核酸适配体在生化分离及检测领域中的研究进展 被引量：7
9
作者 李晓佩 杨良嵘 +3 位作者 黄昆 李文松 孙西同 刘会洲 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期233-242,共10页
核酸适配体是一种能够特异性地识别目标物的寡聚核苷酸,可以是RNA也可以是DNA。较其他识别分子而言,适配体具有性质稳定、易合成、易标记、分子量较小和目标分子广泛等优势。目前核酸适配体主要被应用在检测、分离纯化和医疗三大领域,... 核酸适配体是一种能够特异性地识别目标物的寡聚核苷酸,可以是RNA也可以是DNA。较其他识别分子而言,适配体具有性质稳定、易合成、易标记、分子量较小和目标分子广泛等优势。目前核酸适配体主要被应用在检测、分离纯化和医疗三大领域,本文主要论述了适配体在生化分离及检测领域中的研究进展。 展开更多
关键词 核酸适配体 识别分子 生化分离 检测
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植物对重金属的吸收和转运途径及调控机制研究进展 被引量：5
10
作者 江建波 文吉昌 娄飞 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期212-217,共6页
论述了重金属进入植物根表皮层的途径,通过共质体与质外体水平运输的短程运输途径,以及木质部与韧皮部进行装卸的长程运输途径。共质体途径对重金属离子的转运速度慢,而质外体途径转运重金属离子的迁移阻力小、速率快。细胞壁吸附解析... 论述了重金属进入植物根表皮层的途径,通过共质体与质外体水平运输的短程运输途径,以及木质部与韧皮部进行装卸的长程运输途径。共质体途径对重金属离子的转运速度慢,而质外体途径转运重金属离子的迁移阻力小、速率快。细胞壁吸附解析作用是影响重金属离子通过细胞质外体途径传入根木质部的内因,但根系皮层内凯氏带及软木脂发育,构成质外体屏障,能阻断重金属离子向木质部迁移的质外体途径。植物蒸腾作用及根压为木质部重金属离子的长距离运输提供驱动力,和植物的蒸腾速度有关。植物对重金属解毒与耐性的机理主要是诱导植物产生金属硫蛋白、胁迫植物形成植物螯合肽(PCs)和液泡对重金属的区域化作用。 展开更多
关键词 根际 质外体途径 凯氏带 软木脂 质外体屏障 植物螯合肽
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Alcalase水解丝素蛋白的特性 被引量：8
11
作者 周凤娟 许时婴 +1 位作者 杨瑞金 王璋 《纺织学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期13-17,共5页
研究了Alcalase水解丝素蛋白的特性。结果表明,Alcalase水解丝素蛋白的最佳条件是:丝素蛋白质量浓度50 mg/mL,pH值9.0,温度60℃;丝素肽中主要氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和酪氨酸)的含量之和占其氨基酸总量的85%左右;水解度为17%的... 研究了Alcalase水解丝素蛋白的特性。结果表明,Alcalase水解丝素蛋白的最佳条件是:丝素蛋白质量浓度50 mg/mL,pH值9.0,温度60℃;丝素肽中主要氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和酪氨酸)的含量之和占其氨基酸总量的85%左右;水解度为17%的丝素蛋白水解产物中主要组分的相对分子质量分别为249 Da和762 Da,含量分别约占72.9%和15.5%,水解度为21%的丝素蛋白水解产物中主要组分的相对分子质量分别为209 Da和668 Da,含量分别约占84.4%和7.2%。 展开更多
关键词 ALCALASE 丝素蛋白 水解 特性
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芘荧光探针法研究狭鳕鱼皮胶原蛋白临界聚集质量浓度 被引量：6
12
作者 闫鸣艳 李八方 +1 位作者 赵雪 张朝辉 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第2期182-186,共5页
芘荧光发射光谱的第一振动带和第三振动带强度比值(I1/I3)能够反映周围微环境的极性水平,并且芘荧光光谱不受胶原蛋白内源荧光的干扰,作者用芘荧光探针考察了狭鳕鱼皮胶原蛋白在pH=7.2的磷酸缓冲液中的聚集行为。结果表明:当胶原蛋白质... 芘荧光发射光谱的第一振动带和第三振动带强度比值(I1/I3)能够反映周围微环境的极性水平,并且芘荧光光谱不受胶原蛋白内源荧光的干扰,作者用芘荧光探针考察了狭鳕鱼皮胶原蛋白在pH=7.2的磷酸缓冲液中的聚集行为。结果表明:当胶原蛋白质量浓度增大到一定程度时,芘荧光探针的I1/I3值有一突变,继续增大其质量浓度,I1/I3值趋向于定值,证明胶原蛋白在pH=7.2的磷酸缓冲液中,随质量浓度增大有明显的聚集行为。运用芘I1/I3值与胶原蛋白质量浓度对数的关系,通过作图法确定胶原蛋白的临界聚集质量浓度(CAMC)为0.138 g/L和0.48 g/L,结合不同质量浓度胶原蛋白溶液的聚集动力学曲线,故胶原蛋白的CAMC为0.48 g/L。由于胶原蛋白聚集过程在动力学上分为两个阶段,作者认为该胶原蛋白的聚集机理可能为协同成核生长机理。 展开更多
关键词 芘 荧光探针 胶原蛋白 临界聚集质量浓度(CAMC)
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多花黄精总蛋白质提取工艺优化 被引量：6
13
作者 何庆玲 雷朋 +4 位作者 董洁 唐文杰 杨倩 石牛牛 陈向阳 《资源开发与市场》 CAS CSSCI 2011年第12期1065-1067,共3页
对多花黄精主根与须根总蛋白质的提取工艺进行了研究。在对料液比、离心转速、NaCl溶液的浓度等进行单因素试验的基础上,通过正交试验确定了多花黄精主根与须根总蛋白质提取的最佳工艺条件,即对多花黄精主根蛋白质的提取最佳条件为料液... 对多花黄精主根与须根总蛋白质的提取工艺进行了研究。在对料液比、离心转速、NaCl溶液的浓度等进行单因素试验的基础上,通过正交试验确定了多花黄精主根与须根总蛋白质提取的最佳工艺条件,即对多花黄精主根蛋白质的提取最佳条件为料液比1∶15、NaCl浓度0.10mol/L、转速为2500r/min;须根蛋白的提取最佳条件为料液比1∶15、NaCl浓度0.20 mol/L、转速为4500r/min。在相同的提取条件下,多花黄精主根与须根的蛋白质得率差异显著。须根中蛋白质的含量与主根的差异性不显著,须根的利用价值也很高,有待于进一步开发利用。 展开更多
关键词 多花黄精 主根 须根 蛋白质 提取工艺
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大豆特征蛋白的SDS-PAGE研究 被引量：4
14
作者 管方方 卢伟京 +4 位作者 许旭 董宏伟 李冰瑶 陈保华 钟佳琪 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第4期438-442,共5页
大豆蛋白作为乳品中的主要掺假蛋白,对其进行鉴别并建立相应的检测和分析方法,对于健全乳制品安全监管体制,确保消费者的合法权益具有重要的意义。该文利用SDS-PAGE方法对12种不同来源大豆均质浆液中的可溶性蛋白进行分析,并与两种商品... 大豆蛋白作为乳品中的主要掺假蛋白,对其进行鉴别并建立相应的检测和分析方法,对于健全乳制品安全监管体制,确保消费者的合法权益具有重要的意义。该文利用SDS-PAGE方法对12种不同来源大豆均质浆液中的可溶性蛋白进行分析,并与两种商品大豆蛋白进行比较。经SDS-PAGE电泳分析,这14种大豆蛋白主要包含相对分子质量（简称分子量）为1.90×10^4～8.50×10^4的9组蛋白。每组蛋白的分子量差异较小,相对差值不大于3.3%,而且蛋白条带的相对含量基本相同。发现大豆中蛋白分子量为4.97×10^4、4.17×10^4、3.57×10^4以及1.98×10^4的可溶性蛋白组分,可作为SDS-PAGE鉴别牛乳中掺杂大豆蛋白的特征识别标记,其中4.96×10^4和3.57×10^4的最低检出限可达0.2 g/L。使用光密度仪测定,在大豆浆液蛋白含量0.1～10 g/L范围,定量工作曲线的线性关系较好,R=0.998 1,应用于0.60～8.0 g/L范围测量,相对误差为0.63%～13.3%。 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 大豆蛋白 乳品 乳品掺假 食品与饲料用化学品
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酪蛋白酶解产物阿片样活性的细胞生物学鉴定 被引量：9
15
作者 张源淑 邹思湘 陈伟华 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2000年第4期36-38,共3页
以富含δ 阿片受体的NG1 0 8-1 5杂交瘤细胞株 ,在有和无阿片特异性拮抗剂纳洛酮存在的情况下 ,与酪蛋白及其胃蛋白酶酶解消化液共同孵育。其细胞抽提液用 1 2 5I标记cAMP试剂盒进行放免测定 ,观察对细胞腺苷酸环化酶活性的影响。结果证... 以富含δ 阿片受体的NG1 0 8-1 5杂交瘤细胞株 ,在有和无阿片特异性拮抗剂纳洛酮存在的情况下 ,与酪蛋白及其胃蛋白酶酶解消化液共同孵育。其细胞抽提液用 1 2 5I标记cAMP试剂盒进行放免测定 ,观察对细胞腺苷酸环化酶活性的影响。结果证明 ,酪蛋白经胃蛋白酶处理后有阿片样活性物质释放。 展开更多
关键词 酪蛋白 杂交瘤细胞 阿片活性物质 鉴定 酶解
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用谷朊粉溶涨指数法测定谷朊粉品质 被引量：3
16
作者 胡新中 张国权 +2 位作者 郑建梅 师俊玲 靳琼 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第3期171-175,共5页
开发了一种新的谷朊粉品质检测方法。对小麦谷蛋白溶涨指数法的参数进行调整,在9种不同离心力条件下,测定从16个小麦品种中分离出的谷朊粉的溶涨指数,根据谷朊粉溶涨指数、面筋吸水率及面粉的蛋白质组分含量之间的关系,提出了用谷朊粉... 开发了一种新的谷朊粉品质检测方法。对小麦谷蛋白溶涨指数法的参数进行调整,在9种不同离心力条件下,测定从16个小麦品种中分离出的谷朊粉的溶涨指数,根据谷朊粉溶涨指数、面筋吸水率及面粉的蛋白质组分含量之间的关系,提出了用谷朊粉溶涨指数法测定谷朊粉品质的步骤及评价标准。结果认为:加入0.9mL蒸馏水水化10min,再加入0.9mL0.3%十二烷基磺酸钠(SDS)-乳酸溶液混合30min,最后用5000×g离心力进行离心是谷朊粉品质测定的最佳技术参数,在此条件下的谷朊粉溶涨指数与面筋吸水率、小麦谷蛋白溶涨指数呈显著正相关(r=0.541,0.547;P<0.05),与面筋指数、不溶性谷蛋白含量呈极显著正相关(r=0.608,0.589;P<0.01),与单体蛋白含量呈显著负相关(r=-0.573;P<0.05)。与测定谷朊粉品质的国家标准方法吸水率法相比,谷朊粉溶涨指数法能快速、稳定地反应小麦谷朊粉品质差异。 展开更多
关键词 谷朊粉 谷蛋白溶涨指数 吸水率 检测方法
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关于几种蛋白氧化后羰基含量的对比研究 被引量：4
17
作者 贡慧 史智佳 +1 位作者 陈文华 乔晓玲 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1014-1016,1035,共4页
羰基含量的测定一直是反应蛋白质氧化程度的重要理化指标,近年来,蛋白中的羰基含量往往采用较简便的DNPH比色法进行检测,但在实际测定过程中存在着蛋白含量不好精确定量、不同种类蛋白紫外吸收波长不统一等问题。且以往研究均是针对单... 羰基含量的测定一直是反应蛋白质氧化程度的重要理化指标,近年来,蛋白中的羰基含量往往采用较简便的DNPH比色法进行检测,但在实际测定过程中存在着蛋白含量不好精确定量、不同种类蛋白紫外吸收波长不统一等问题。且以往研究均是针对单一蛋白的氧化程度进行,鲜有系统性的针对不同种类的蛋白质进行氧化程度与羰基含量相关性研究的报道。针对此问题分别对牛肌原纤维蛋白、牛血清白蛋白以及豌豆蛋白进行了一系列氧化实验及其羰基含量测定,并且在蛋白羰基含量测定方面优化了DNPH比色法,使其可操作性更强,数据稳定性更高。 展开更多
关键词 蛋白质氧化 肌原纤维蛋白 牛血清白蛋白 豌豆蛋白 羰基含量测定
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超速离心和酸沉淀制备牛乳清的蛋白质组学研究 被引量：4
18
作者 齐云霞 赵小伟 +4 位作者 黄冬维 蔡东东 杨永新 程广龙 赵辉玲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第8期2203-2210,共8页
本研究旨在对超速离心法和酸沉淀法鉴定的乳清蛋白进行分析,并比较不同样品制备方法对乳清蛋白组鉴定结果的影响。采集牛奶样品去除脂肪,利用超速离心和酸沉淀法制备乳清蛋白,液相色谱串联质谱分析结合数据库搜索鉴定,比较两种方法制备... 本研究旨在对超速离心法和酸沉淀法鉴定的乳清蛋白进行分析,并比较不同样品制备方法对乳清蛋白组鉴定结果的影响。采集牛奶样品去除脂肪,利用超速离心和酸沉淀法制备乳清蛋白,液相色谱串联质谱分析结合数据库搜索鉴定,比较两种方法制备的乳清蛋白的差异,分析了差异蛋白参与的生物过程、细胞组成和分子功能等。聚类分析和主成分分析展示了两种样品制备方法的差异蛋白,超速离心方法鉴定的表达量增加的蛋白有53个,包括β-酪蛋白、糖基化依赖细胞黏附分子1和多聚免疫球蛋白受体等;酸沉淀方法鉴定的表达量增加的蛋白有21个,包括CD9抗原、β2-微球蛋白和β-乳球蛋白等。将两种方法获得的差异蛋白根据蛋白注释分类发现,超速离心法中高表达的蛋白主要位于胞外区域、囊泡、内膜系统、内质网和高尔基体等,涉及蛋白结合、酶调节活性、受体结合和抗氧化活性等;酸沉淀法中高表达的蛋白主要位于胞外区域和囊泡等,涉及结合、核酸酶活性和离子结合等。结果提示,两种方法鉴定的蛋白质组表达模式存在差异,乳清蛋白样品制备方法的结合可以获得更多的鉴定蛋白,为乳清蛋白组学研究中样品制备方法的选择提供参考依据。 展开更多
关键词 牛奶 乳清蛋白 超速离心 酸沉淀
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金属鳌合亲和层析填料的制备及其在重组六聚组氨酸融合蛋白中的应用 被引量：3
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作者 张培因 王燕媚 +3 位作者 卫红飞 王爱丽 于永利 王丽颖 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期340-342,共3页
目的:制备Ni2+螯合金属层析填料,分离HSP65-MUC1-histag基因工程蛋白质。方法:应用Sepharose4B作为载体,亚氨基二乙酸(IDA)为起始材料合成金属鳌合层析填料,同时应用5-Br-PADAP一阶导数光度法对Ni2+的吸收峰进行鉴定和定量。最后应用制... 目的:制备Ni2+螯合金属层析填料,分离HSP65-MUC1-histag基因工程蛋白质。方法:应用Sepharose4B作为载体,亚氨基二乙酸(IDA)为起始材料合成金属鳌合层析填料,同时应用5-Br-PADAP一阶导数光度法对Ni2+的吸收峰进行鉴定和定量。最后应用制备的Ni2+-Sepharose4B纯化HSP65-MUC1-histag。结果:Ni2+最佳吸收峰为574nm,凝胶中螯合的Ni2+为5.2mg.g-1,Ni2+-Sepharose4B金属螯合亲和层析纯化重组蛋白纯度≥98%,回收率≥90%。结论:制备了能应用于蛋白质亲和层析的高效金属鳌合层析填料。 展开更多
关键词 金属鳌合层析填料 基因工程蛋白质 纯化
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预测蛋白质三维结构的拟物算法 被引量：3
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作者 黄文奇 黄勤波 石赫 《武汉大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期586-590,共5页
研究了生物信息学中的一个重要问题,即蛋白质结构预测.并受物理世界的物体间相互作用的规律的启发,给出了该问题一个三维欧氏空间连续模型,它比离散模型有一定的优越性,使计算很自然地利用到了一个客观存在的"天然导引",这个&... 研究了生物信息学中的一个重要问题,即蛋白质结构预测.并受物理世界的物体间相互作用的规律的启发,给出了该问题一个三维欧氏空间连续模型,它比离散模型有一定的优越性,使计算很自然地利用到了一个客观存在的"天然导引",这个"天然导引"即是疏水氨基酸之间的引力,然后根据这个连续模型找到了相应的拟物算法,最后还给出了实验结果,结果也证明了这个拟物算法在计算速度方面的优越性. 展开更多
关键词 蛋白质 三维结构 拟物算法 结构预测 NP难度问题 折叠 引力势能 生物信息学
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