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青蒿素提取分离方法及工艺
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作者 曹莹莹 陈柄彤 王慧 《工程研究——跨学科视野中的工程》 2026年第1期3-14,共12页
青蒿素是治疗疟疾的特效天然药物,从黄花蒿中提取是工业生产青蒿素的主要工艺,包括提取(从黄花蒿中将青蒿素提取出来)和分离(将青蒿素与杂质分离)两个过程。本文主要综述了近年来在青蒿素提取和分离纯化方面取得的进展,包括工业生产青... 青蒿素是治疗疟疾的特效天然药物,从黄花蒿中提取是工业生产青蒿素的主要工艺,包括提取(从黄花蒿中将青蒿素提取出来)和分离(将青蒿素与杂质分离)两个过程。本文主要综述了近年来在青蒿素提取和分离纯化方面取得的进展,包括工业生产青蒿素的工艺、新型介质开发(超临界CO_(2)、离子液体、分子印迹材料等)、工艺创新(微波强化、超声波强化、提取-制剂一体化工艺)等,对比分析了各工艺优劣势。同时展望了青蒿素生产过程绿色化进程中所面临的挑战,并提出了应对措施。 展开更多
关键词 青蒿素 提取 分离 功能介质 绿色过程
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代谢工程改造枯草芽孢杆菌高效生产维生素K_(2)
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作者 郭凤鸣 朱启尧 +2 位作者 杜丽平 付刚 张大伟 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第5期1-9,共9页
七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7)是维生素K_(2)的重要活性形式,在促进骨骼健康、预防心血管疾病和治疗神经退行性疾病方面具有广泛的应用前景。该研究选用枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)作为底盘菌株,采用多模块代谢工程策略... 七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7)是维生素K_(2)的重要活性形式,在促进骨骼健康、预防心血管疾病和治疗神经退行性疾病方面具有广泛的应用前景。该研究选用枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)作为底盘菌株,采用多模块代谢工程策略系统优化MK-7的生物合成途径。首先,敲除竞争性分支代谢途径的关键基因,包括异分支酸-丙酮酸水解酶基因(dhbB)、芳香族氨基酸合成基因(trpE/aroH)和细菌磷酸酶转移系统(phosphotransferase system,PTS)中的葡萄糖转运蛋白基因(ptsG),以减少前体分流。随后,通过过表达NADH脱氢酶基因(ndh)和末端氧化酶基因(sdhCAB),增强电子传递链效率,促进电子传递。进一步,引入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的异源基因dxs,并过表达内源限速酶基因hepS,以提高甲基赤藓糖醇磷酸(methylerythritol 4-phosphate,MEP)途径的通量。最终,改造后的高产菌株S13在摇瓶发酵中MK-7产量达到(123.90±6.52)mg/L。在3 L发酵罐中进行放大验证后,产量进一步提升至242.38 mg/L,为MK-7的工业化微生物发酵生产奠定了基础。 展开更多
关键词 维生素K_(2) 七烯甲萘醌 枯草芽孢杆菌 代谢工程 生物合成
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碳源优化与代谢调控提高毕赤酵母中天然紫外防护化合物gadusol的产量
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作者 颜悦 钮成拓 +3 位作者 郑飞云 刘春凤 李崎 王金晶 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第2期320-329,共10页
gadusol是一种具有高效UVB吸收特性的天然紫外线防护剂,在绿色化妆品原料开发中极具应用潜力。前期研究将gadusol生物合成途径引入毕赤酵母以生产gadusol,但产量仍然相对较低。针对这一问题,该研究通过提高G418抗生素筛选压力获得高产ga... gadusol是一种具有高效UVB吸收特性的天然紫外线防护剂,在绿色化妆品原料开发中极具应用潜力。前期研究将gadusol生物合成途径引入毕赤酵母以生产gadusol,但产量仍然相对较低。针对这一问题,该研究通过提高G418抗生素筛选压力获得高产gadusol的工程菌。随后,将来自树干毕赤酵母的木糖同化基因引入工程菌株以增加gadusol生物合成的关键前体7-磷酸景天庚酮糖的供应。碳源优化表明,葡萄糖与木糖质量比为1∶1的培养基中gadusol产量明显优于单一碳源条件。同时,通过对磷酸戊糖途径关键限速酶进行调控,将代谢通量重新导向7-磷酸景天庚酮糖合成,从而促进gadusol的高效合成。优化后的工程菌GS10在葡萄糖与木糖质量比为1∶1的培养基中进行摇瓶发酵,gadusol产量为315.5 mg/L(28.3 mg/g DCW)。研究结果表明,在生产天然防晒材料方面,毕赤酵母是极具潜力的宿主,研究为gadusol的工业化生产提供了理论基础。 展开更多
关键词 gadusol 磷酸戊糖途径 毕赤酵母 碳源组成 木糖
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构建大肠杆菌C4途径强化血红素合成
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作者 王子晨 张鑫 唐蕾 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第1期18-24,共7页
血红素一般指亚铁血红素,由亚铁离子和原卟啉组成,是铁卟啉的衍生物,目前在食品医疗等领域的需求日益增加。微生物发酵是获取血红素的方法之一,但是产量低。该研究以大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)为底盘菌株,通过代谢工程手段改... 血红素一般指亚铁血红素,由亚铁离子和原卟啉组成,是铁卟啉的衍生物,目前在食品医疗等领域的需求日益增加。微生物发酵是获取血红素的方法之一,但是产量低。该研究以大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)为底盘菌株,通过代谢工程手段改造大肠杆菌,获得了高产血红素的基因工程菌株。首先阻断了大肠杆菌原有的血红素合成C5途径,导入异源的C4途径,获得的基因工程菌血红素产量优于强化原有C5途径或C4/C5途径共存的菌株。继而在该工程菌株中过表达大肠杆菌血红素合成途径的关键基因hemB或hemH,血红素的产量进一步提升。最终通过优化前体甘氨酸和FeCl 2的供给,经过24 h摇瓶发酵,血红素产量达到了82.39μmol/L,是原始出发菌株的4.2倍。该研究构建了仅表达异源C4途径的大肠杆菌菌株,为代谢工程改造提高大肠杆菌血红素的合成提供了新的策略。 展开更多
关键词 血红素 大肠杆菌 C4途径 C5途径 代谢工程
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气凝胶水性浆料评价体系建立和验证
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作者 韩荣荣 彭战军 王天赋 《广东化工》 2026年第4期1-4,共4页
文章将SiO_(2)气凝胶粉体采用气凝胶专用分散剂进行分散,开发出SiO_(2)气凝胶水性浆料。通过分析SiO_(2)气凝胶在水性浆料中的体积占比,设计了气凝胶性能下降系数和气凝胶匹配度两个参数,讨论了SiO_(2)气凝胶水性浆料的匹配性问题,为SiO... 文章将SiO_(2)气凝胶粉体采用气凝胶专用分散剂进行分散,开发出SiO_(2)气凝胶水性浆料。通过分析SiO_(2)气凝胶在水性浆料中的体积占比,设计了气凝胶性能下降系数和气凝胶匹配度两个参数,讨论了SiO_(2)气凝胶水性浆料的匹配性问题,为SiO_(2)气凝胶生产厂家和使用厂家提供了一套简单易行的气凝胶水性浆料匹配性评价理论依据。另外,本文以SiO_(2)气凝胶水性浆料为原料,设计了一款SiO_(2)气凝胶水性隔热保温涂料。研究表明,采用气凝胶性能下降系数越低,气凝胶匹配度越高的SiO_(2)气凝胶水性浆料为原料制备得气凝胶水性隔热保温涂料的性能越优异,同时达到相同隔热保温性能使用的SiO_(2)气凝胶材料也越少。当气凝胶性能下降系数为2.14%,气凝胶匹配度为46.70%。此时,SiO_(2)气凝胶水性隔热保温涂料导热系数可低至0.040 W/(m·K),对应的附着力≥0.8 MPa,涂料中气凝胶的含量低至2.80%,该涂料可以满足DG/TJ 08-2200-2024《建筑隔热涂料应用技术标准》中的要求。 展开更多
关键词 SiO_(2)气凝胶 气凝胶水性浆料 隔热保温涂料 匹配度 导热系数 粘结强度
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高级氧化技术在污泥深度脱水中的应用研究进展
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作者 吕春峰 王珊 +1 位作者 贤泽生 陈淑芬 《应用化工》 北大核心 2026年第1期142-147,154,共7页
高级氧化技术因能有效改善污泥脱水性能,在污泥减量化中受到广泛关注。主要分析了影响污泥脱水的主要因素,并重点阐述了臭氧氧化、双氧水氧化、过硫酸盐氧化、高锰酸钾氧化等高级氧化技术改善污泥脱水性能的机理,以及在污泥脱水中的应用... 高级氧化技术因能有效改善污泥脱水性能,在污泥减量化中受到广泛关注。主要分析了影响污泥脱水的主要因素,并重点阐述了臭氧氧化、双氧水氧化、过硫酸盐氧化、高锰酸钾氧化等高级氧化技术改善污泥脱水性能的机理,以及在污泥脱水中的应用,并对比各种污泥脱水方法的优缺点,以期为污泥深度脱水技术提供思路。 展开更多
关键词 活性污泥 胞外聚合物 高级氧化 污泥脱水
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大肠杆菌与酿酒酵母共培养从头合成色醇
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作者 郑佳敏 付振浩 +7 位作者 张乐乐 何雨铠 詹锦铃 刘春立 刘秀霞 杨艳坤 李业 白仲虎 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第3期55-64,74,共11页
色醇是色氨酸的一种衍生物,因其存在的吲哚结构,可作为许多医药分子的关键中间体。目前色醇的工业生产方式全部为化学合成,生物法从头合成色醇的研究较少。且由于色醇较为复杂的合成代谢途径,单菌株平台进行代谢工程操作的工作量和难度... 色醇是色氨酸的一种衍生物,因其存在的吲哚结构,可作为许多医药分子的关键中间体。目前色醇的工业生产方式全部为化学合成,生物法从头合成色醇的研究较少。且由于色醇较为复杂的合成代谢途径,单菌株平台进行代谢工程操作的工作量和难度较大,且多重基因改造容易给底盘菌株带来代谢负担。该研究采用共培养的方式,将色醇的合成代谢途径分为2个模块,分别由大肠杆菌和酿酒酵母承担,负责从碳源合成色氨酸和将色氨酸转化为色醇。最终通过在大肠杆菌BL21内过表达trpEDCBA,aroG与serA构建色氨酸生产菌株t12,酿酒酵母BY4741内过表达ARO9、ARO10、SFA1构建色醇生产的菌株yBL_965,2株菌构成的微生物群落在经过初始接种比例和接种量优化后,在5 L补料分批发酵中可合成色醇0.23 g/L。该研究方法和成果为生物法从头合成色醇及其他芳香族氨基酸衍生物提供了思考方向和参考依据。 展开更多
关键词 微生物群落 共培养 色醇 代谢工程 大肠杆菌 酿酒酵母
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双途径平衡调控谷氨酸棒杆菌高效生产L-高丝氨酸
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作者 潘越 张心语 +2 位作者 刘清岱 刘君 魏亮 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第5期35-43,共9页
L-高丝氨酸是一种重要的非蛋白质氨基酸,在饲料、医药和化工等领域中具有重要应用。目前,L-高丝氨酸的合成主要依赖化学合成法和生物法2种技术路径。微生物发酵法因其具有环境友好、成本低廉等优势,被认为是实现L-高丝氨酸绿色制造的理... L-高丝氨酸是一种重要的非蛋白质氨基酸,在饲料、医药和化工等领域中具有重要应用。目前,L-高丝氨酸的合成主要依赖化学合成法和生物法2种技术路径。微生物发酵法因其具有环境友好、成本低廉等优势,被认为是实现L-高丝氨酸绿色制造的理想方式,受到科学家们的广泛关注。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)是一种重要的食品安全级工业微生物,是发酵生产L-高丝氨酸的潜在优良菌种,然而目前基于C.glutamicum的L-高丝氨酸代谢工程研究仍较有限,L-高丝氨酸的产量和得率仍然较低,难以满足工业化应用的实际需求。因此,该研究以C.glutamicum为宿主底盘,通过敲除降解途径、重构AspC和AspA双合成途径等策略,构建了具有L-高丝氨酸合成能力的基础底盘细胞。在此基础上,进一步通过强化前体供给能力、调控双通路代谢通量、以及优化辅因子NADPH的再生水平等方法,有效提升了L-高丝氨酸的合成效率。最终构建的工程菌株HOM21在5 L发酵罐中L-高丝氨酸的产量达到95.8 g/L,生产强度为1.6 g/(L·h),转化率为0.45 g/g,是目前已报道的利用C.glutamicum生产L-高丝氨酸的最高水平。该研究为C.glutamicum高效合成L-高丝氨酸提供了系统的代谢工程改造策略,揭示了关键限制步骤及其优化路径,为实现L-高丝氨酸的工业化绿色制造提供了理论支撑和借鉴。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 L-高丝氨酸 AspC和AspA途径 草酰乙酸 代谢调控 NADPH
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多策略组合优化大肠杆菌高效表达贻贝足丝蛋白Mcofp-3
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作者 周生瑞 郑依琳 +3 位作者 候志亮 胥睿睿 康振 李江华 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第4期1-9,共9页
贻贝足丝蛋白因其卓越的黏附能力、良好的生物相容性和生物降解性,在医药、食品和特种材料制造等领域具有广泛而独特的应用前景。通过合成生物学技术重组微生物表达贻贝足丝蛋白具有很大潜力。然而,工程菌表达条件不适合、表达元件不匹... 贻贝足丝蛋白因其卓越的黏附能力、良好的生物相容性和生物降解性,在医药、食品和特种材料制造等领域具有广泛而独特的应用前景。通过合成生物学技术重组微生物表达贻贝足丝蛋白具有很大潜力。然而,工程菌表达条件不适合、表达元件不匹配是造成生产强度低的重要原因。该研究采用多种策略组合优化重组厚壳贻贝(Mytilus coruscus)足丝蛋白Mcofp-3在大肠杆菌中的表达,旨在实现Mcofp-3的高效发酵制备。首先,确定了重组Mcofp-3以包涵体形式表达时产量较高,初始产量为158.6 mg/L,且通过差速离心后蛋白占比超85%;接着,通过正交优化重组菌株的培养条件,确定在诱导时间为1 h,诱导剂浓度0.4 mmol/L,诱导后培养温度37℃时,利用TB培养基发酵培养,Mcofp-3表达量达到303.3 mg/L;在此基础上,结合载体选择、启动子及核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)工程多策略组合优化,在使用pACYCDuet为载体,T7启动子以及更换为翻译速率更高的RBS6,Mcofp-3的表达量进一步提高至484.2 mg/L。最终在5-L发酵罐中放大优化结果表明,发酵37 h后,Mcofp-3的表达水平达到1720 mg/L,产率达46.49 mg/(L·h),结果为现有贻贝足丝蛋白重组表达报道中最高水平。以上研究为Mcofp-3的规模化工业生产奠定了基础,同时也为其他贻贝足丝蛋白的优化表达提供了重要参考。 展开更多
关键词 贻贝足丝蛋白 大肠杆菌 发酵优化 表达框优化 分批补料发酵
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基于酶催化的新型L-丝氨酸检测方法的开发与优化
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作者 孙慕娇 鞠建松 +1 位作者 刘君 魏亮 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第4期353-360,共8页
L-丝氨酸是一种重要的非必需氨基酸,具有重要的生理功能,在食品、化妆品和医药等领域具有广泛的应用。微生物发酵法具有环境友好,条件温和,底物可再生等优势,是生产L-丝氨酸的理想方法,受到研究者的广泛关注。在L-丝氨酸工程菌种的选育... L-丝氨酸是一种重要的非必需氨基酸,具有重要的生理功能,在食品、化妆品和医药等领域具有广泛的应用。微生物发酵法具有环境友好,条件温和,底物可再生等优势,是生产L-丝氨酸的理想方法,受到研究者的广泛关注。在L-丝氨酸工程菌种的选育和改造过程中,需要对大量的菌种进行评估,存在大量的L-丝氨酸分析和检测工作,但是目前L-丝氨酸检测方法存在灵敏度差、准确度低、步骤繁琐等问题,严重限制了L-丝氨酸样品的高通量快速评估和检测。针对上述问题,该研究利用L-丝氨酸-3-脱氢酶的催化特性,建立了一种简单快速、特异性高的L-丝氨酸检测方法。通过对L-丝氨酸-3-脱氢酶挖掘和酶学性质分析,建立了L-丝氨酸最佳的酶法检测体系,该体系包括50 mmol/L碳酸钠-碳酸氢钠(pH=9.5),3 mmol/L NADP^(+),来源于蚕豆农杆菌(Agrobacterium fabrum)的丝氨酸脱氢酶(L-serine dehydrogenase,SerDH)2 U/mL,检测温度为40℃。该研究建立的L-丝氨酸酶法检测方法具有简单快速、检测效率高等特点,在1~10 mmol/L L-丝氨酸的浓度范围具有良好的线性关系,R^(2)达到0.9965。该研究建立的L-丝氨酸酶法检测方法能够实现L-丝氨酸样品的高通量检测和评估,为L-丝氨酸工业菌种的高通量选育提供了重要的技术支撑。 展开更多
关键词 L-丝氨酸 L-丝氨酸-3-脱氢酶 酶学性质分析 高通量检测方法
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茂源链霉菌谷氨酰胺转氨酶在毕赤酵母中的高效表达及性质
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作者 田雪婷 薛意斌 +2 位作者 闫巧娟 曾龙达 江正强 《微生物学通报》 北大核心 2026年第1期389-401,共13页
【背景】谷氨酰胺转氨酶(TGase)在食品工业具有重要应用价值,但异源表达水平仍较低。【目的】通过多组合策略实现茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis)谷氨酰胺转氨酶(SmTGase)在毕赤酵母(Komagataella phaffii)中高水平表达。【方法... 【背景】谷氨酰胺转氨酶(TGase)在食品工业具有重要应用价值,但异源表达水平仍较低。【目的】通过多组合策略实现茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis)谷氨酰胺转氨酶(SmTGase)在毕赤酵母(Komagataella phaffii)中高水平表达。【方法】采用酶原区和成熟区共表达、共表达分子伴侣和过表达翻译起始因子的组合策略提高Sm TGase在毕赤酵母中的表达水平,通过甘油-甲醇共补料策略进行5 L发酵罐高密度发酵实现Sm TGase的高效生产,利用强阴离子交换柱对Sm TGase进行纯化,测定其酶学性质。【结果】重组菌株摇瓶发酵酶活力为5.67 U/mL。在5 L发酵罐中高密度发酵酶活力为80.5 U/mL,蛋白含量为7.68 g/L。纯化后该酶的最适催化条件为pH 7.0和55℃,在pH5.5-8.0范围内及45℃以下具有良好稳定性。【结论】本研究为谷氨酰胺转氨酶在毕赤酵母中高水平表达提供了重要参考。 展开更多
关键词 茂源链霉菌 谷氨酰胺转氨酶 毕赤酵母 高效表达
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高产普鲁兰多糖诱变菌株选育及发酵条件优化
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作者 李文敏 孙营营 +3 位作者 赵晓雯 李淼鑫 乔长晟 赵廷彬 《中国酿造》 北大核心 2026年第2期257-265,共9页
以出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)为出发菌株,利用紫外诱变技术筛选高产普鲁兰多糖菌株,进一步通过正交试验偶联人工神经网络对高产普鲁兰多糖菌株的发酵条件进行优化。结果表明,通过紫外诱变筛选获得了一株高产普鲁兰多糖菌株,... 以出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)为出发菌株,利用紫外诱变技术筛选高产普鲁兰多糖菌株,进一步通过正交试验偶联人工神经网络对高产普鲁兰多糖菌株的发酵条件进行优化。结果表明,通过紫外诱变筛选获得了一株高产普鲁兰多糖菌株,命名为UV013,普鲁兰多糖产量为(55.72±3.47)g/L,较出发菌株提高了39.3%。最佳发酵条件为葡萄糖174.50 g/L,酵母浸粉7.96 g/L,MgSO_(4)·7H_(2)O 1.64 g/L,K_(2)HPO_(4)5.08 g/L,NaCl 6.39 g/L,味精0.53 g/L,初始pH值6.08。在此优化条件下,普鲁兰多糖产量为(87.50±2.40)g/L,较基础培养基优化前提升了57.1%,其重均分子质量达到1.26×10^(5)Da,该研究结果可为普鲁兰多糖工业化生产提供参考。 展开更多
关键词 出芽短梗霉 普鲁兰多糖 紫外诱变 人工神经网络 正交试验 培养基优化
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基于近红外光谱的虾青素发酵过程中生物量在位监测方法的建立及应用
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作者 徐俊辰 潘星如 +3 位作者 季雯艳 刘豪 方之颖 陈敏 《生物工程学报》 北大核心 2026年第2期774-785,共12页
生物量(biomass)是微生物高密度发酵过程中必须监控的关键指标之一,常用细胞光密度(optical density,OD)来测定。相较于传统的取样离线检测,实时在位监测技术具有无损、反馈快速和污染减少等优点,能够有效调控和优化发酵过程。为实现发... 生物量(biomass)是微生物高密度发酵过程中必须监控的关键指标之一,常用细胞光密度(optical density,OD)来测定。相较于传统的取样离线检测,实时在位监测技术具有无损、反馈快速和污染减少等优点,能够有效调控和优化发酵过程。为实现发酵过程中关键指标的实时反馈,本研究构建了一个基于漫反射近红外光谱仪的在位监测平台,用于虾青素的高密度发酵过程中生物量的监测。通过实施光谱异常值剔除、比较不同的光谱预处理方法以及间隔偏最小二乘法(interval partial least squares,i-PLS)光谱波段分析,结果表明在1417-1650 nm波长范围内存在虾青素发酵生物量的特征波段。在此波段基础上建立的生物量动态预测模型交互验证决定系数(determination coefficient of cross validation,Rcv2)和交叉验证均方根误差(root mean square error of cross validation,RMSECV)分别为0.973和9.32。经过3批次发酵的外部验证表明采用i-PLS方法建立的生物量模型在细胞光密度(OD600)2.46-180.50范围内进行监测,OD平均绝对误差(mean absolute error,MAE)为6.28,展现出较高的预测准确性和稳定性。这表明该模型在虾青素高密度发酵过程生物量监测中具有应用前景。 展开更多
关键词 近红外光谱技术 在位监测 生物量 间隔偏最小二乘法 因子数选择
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代谢工程改造大肠杆菌生产黄嘌呤核苷
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作者 冷艳琳 孙晓佳 +3 位作者 卢玉娇 王非傲 田思宇 李燕军 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第5期10-16,I0001-I0005,共12页
黄嘌呤核苷(xanthosine)简称黄苷,是由黄嘌呤和核糖基组成的核苷,可作为非平衡细胞动力学分裂方式的抑制剂。目前合成黄苷的方法有天然提取法和化学合成法,这2种方法存在产率低、成本高的问题。为构建出1株无质粒的黄苷生产菌株,该研究... 黄嘌呤核苷(xanthosine)简称黄苷,是由黄嘌呤和核糖基组成的核苷,可作为非平衡细胞动力学分裂方式的抑制剂。目前合成黄苷的方法有天然提取法和化学合成法,这2种方法存在产率低、成本高的问题。为构建出1株无质粒的黄苷生产菌株,该研究对大肠杆菌野生型W3110进行了系统的代谢工程改造。结果显示,通过过表达甘氨酸羟甲基转移酶基因glyA、L-天冬氨酸解氨酶基因aspA、碳酸酐酶基因can,加强黄苷合成前体物甘氨酸、L-天冬氨酸、CO_(2)的供应;且敲除guaA基因,阻断黄苷酸到鸟苷酸的支路代谢后,并未检测到黄苷生成。通过过表达解除反馈抑制的5-磷酸核糖焦磷酸(phosphoribosyl pyrophosphate,PRPP)合成酶的突变体编码基因prs_(Eco)^(D128A),敲除嘌呤核苷酸阻遏蛋白基因purR,摇瓶发酵黄苷产量达到1.05 g/L。引入解淀粉芽孢杆菌解除反馈抑制的PRPP转酰胺酶的基因purF_(Baz)^(K326Q),解除嘌呤从头合成途径中的限速反应,黄苷产量为1.43 g/L。过表达6-磷酸葡萄糖脱氢酶编码基因zwf和转酮醇酶基因tktA,加强磷酸戊糖途径,黄苷产量提高至2.28 g/L。引入异源嘌呤操纵子purEKBCSQLFMNHD强化嘌呤合成途径,黄苷产量进一步提升至2.85 g/L。敲除嘌呤核苷分解酶的编码基因ppnP、嘌呤核苷磷酸化酶基因deoD,减弱黄苷的降解,最终工程菌株XL12黄苷产量达到4.00 g/L。该菌株在5 L发酵罐发酵26 h后产生10.25 g/L黄苷,是目前报道的微生物发酵法生产黄苷的最高水平。 展开更多
关键词 代谢工程 大肠杆菌 黄苷 途径优化 发酵
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野生型己酸菌的分离鉴定及其发酵性能
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作者 李成梅 梁天宇 +3 位作者 李敏 郑孟婷 王青艳 张存胜 《化工进展》 北大核心 2026年第2期1068-1078,共11页
己酸是一种具有高附加值的工业化学品,但目前的己酸生产过程中存在着成本高、产量低等问题。本文通过获得高性能的己酸菌株并优化其培养条件,以提高己酸产量并推动其在生产中的应用。通过实验成功从厌氧活性污泥体系中分离纯化出一株厌... 己酸是一种具有高附加值的工业化学品,但目前的己酸生产过程中存在着成本高、产量低等问题。本文通过获得高性能的己酸菌株并优化其培养条件,以提高己酸产量并推动其在生产中的应用。通过实验成功从厌氧活性污泥体系中分离纯化出一株厌氧己酸菌株,命名为Y2,种属鉴定结果表明该菌株为Caproicibacter fermentans EA1,其最适生长温度、pH和接种量分别为30℃、6.0和10%。进一步研究表明,该菌株可利用多种电子供体和氮源,其中当添加16.8g/L的木糖作为电子供体和2.5g/L的酵母浸粉为氮源时,该菌的生长及产己酸性能最佳。在最佳条件下,开展了细胞固定化对Caproicibacter fermentans EA1发酵产己酸的性能研究,结果表明,细胞在小麦秸秆上固定后,其己酸合成能力有所增强,比未添加秸秆的空白组提高了13.1%,其原因是生物被膜增强了Y2菌株的耐受性。本文为木糖等糖类物质直接向己酸转化提供了新型菌株,为廉价己酸生物合成奠定了研究基础。 展开更多
关键词 菌种鉴定 己酸菌 分离纯化 电子供体 生长条件
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己酸菌液培养条件优化的研究
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作者 林房 张杰 +6 位作者 贾军全 徐广波 孙传波 冯跃武 黄进步 高泓源 谢国排 《酿酒》 2026年第2期119-121,共3页
目前己酸菌液在各白酒企业已实现大规模生产,本研究通过对生产过程中工艺优化,确定最佳的己酸菌液的培养条件,培养时间7 d、培养温度35℃、培养基p H6.5、接种量5‰、装液量85%。获得的己酸菌培养液,培养7 d总菌数可达18.62亿个/m L,对... 目前己酸菌液在各白酒企业已实现大规模生产,本研究通过对生产过程中工艺优化,确定最佳的己酸菌液的培养条件,培养时间7 d、培养温度35℃、培养基p H6.5、接种量5‰、装液量85%。获得的己酸菌培养液,培养7 d总菌数可达18.62亿个/m L,对照初始培养条件的结果总菌数提高了49.56%。为制备高产己酸菌液提供了理论及实践依据。 展开更多
关键词 白酒 窖泥 己酸菌 己酸菌液 保养窖池
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谷氨酸棒杆菌表面展示与代谢工程生产γ-氨基丁酸
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作者 李豪倩 史锋 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第3期65-74,共10页
γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)在医药、食品、饲料等领域应用广泛。谷氨酸棒杆菌中GABA的生产依赖外源谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)催化L-谷氨酸脱羧,但一般GAD的最适pH值为4.0~5.0,与细胞内偏中性环境不符,限... γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)在医药、食品、饲料等领域应用广泛。谷氨酸棒杆菌中GABA的生产依赖外源谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)催化L-谷氨酸脱羧,但一般GAD的最适pH值为4.0~5.0,与细胞内偏中性环境不符,限制了其活性。该研究采用细胞表面展示技术,将GAD展示在谷氨酸棒杆菌细胞表面,以解决上述问题。结果表明锚定基序PorH对于表面展示GAD是有效的,产生了1.7 g/L GABA。通过延长PorH与GAD之间接头序列至(G_(4)S)_(3),GABA的产量提高至2.1 g/L。进一步优化发酵方式,在10~24 h阶段添加尿素调控pH,使GABA产量显著增加至9.9 g/L。最后,通过敲除GABA渗透酶编码基因gabP阻断谷氨酸棒杆菌中的GABA摄取途径,最终将GABA产量提高至10.9 g/L。该研究为在谷氨酸棒杆菌中生产GABA提供了新的思路和策略。 展开更多
关键词 Γ-氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶 细胞表面展示 代谢工程 谷氨酸棒杆菌
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费氏链霉菌代谢物新霉素核糖开关传感器的构建与应用
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作者 张轩绮 俞飞洋 +3 位作者 胡孟凯 李翔飞 薛正莲 刘坤 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第3期75-84,共10页
新霉素是一类具有广谱抗菌性的氨基糖苷类抗生素,广泛用于农作物疾病防控、呼吸道和胃肠道细菌感染的治疗。费氏链霉菌(Streptomyces fradiae)主要通过磷酸戊糖途径代谢糖类物质合成新霉素B。为了获得高产新霉素B的工程费氏链霉菌,该研... 新霉素是一类具有广谱抗菌性的氨基糖苷类抗生素,广泛用于农作物疾病防控、呼吸道和胃肠道细菌感染的治疗。费氏链霉菌(Streptomyces fradiae)主要通过磷酸戊糖途径代谢糖类物质合成新霉素B。为了获得高产新霉素B的工程费氏链霉菌,该研究基于特异性结合新霉素B的核糖开关N1和基因线路原理构建了能够响应新霉素B的生物传感器。新霉素B特异性结合到人工合成的由ermE^(*)、N1、间隔序列和RBS共同构成的启动子ermE^(#),破坏其发夹结构,控制下游报告基因GFP的表达。表征并优化了核糖开关生物传感器的灵敏度和特异性。应用该生物传感器筛选获得一株效价为(9480±254)U/mL新霉素B的工程费氏链霉菌,相较于出发菌株效价提高了43%。该研究提供的特异性响应新霉素B的生物传感器,为新霉素B高产菌株费氏链霉菌的高效筛选提供了有效的策略和方法。 展开更多
关键词 费氏链霉菌 新霉素 核糖开关 生物元件 生物传感器
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基于生物合成途径的Holoferritin高效制备工艺优化及其结构表征
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作者 虎梦吉 凌耀 +2 位作者 谭晓怡 张宇昊 陈海 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第4期77-83,共7页
Holoferritin富含丰富的铁元素,被认为是优良的潜在补铁因子,然而,其制备过程存在工艺繁杂、损失率高等问题,该研究基于铁离子胁迫诱导微生物细胞生物合成Holoferritin体系,优化并建立了Holoferritin高效制备的工艺,并探讨该工艺对Holof... Holoferritin富含丰富的铁元素,被认为是优良的潜在补铁因子,然而,其制备过程存在工艺繁杂、损失率高等问题,该研究基于铁离子胁迫诱导微生物细胞生物合成Holoferritin体系,优化并建立了Holoferritin高效制备的工艺,并探讨该工艺对Holoferritin结构、性质的影响。琼脂糖凝胶电泳、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,0.005%核酸酶处理即可有效去除宿主核酸残留,联合加热处理和硫酸铵沉淀处理,即可高效制备高纯度Holoferritin。通过紫外光谱、圆二色谱、傅里叶变换红外光谱、马尔文粒度仪、透射电子显微镜等方法表征Holoferritin的结构,发现该纯化工艺能够维持Holoferritin天然的铁蛋白纳米笼-铁芯完整构象和典型的α-螺旋二级结构。此外,该工艺能够在保证Holoferritin结构完整性的前提下,将蛋白纯化周期由72 h缩短至48 h,为Holoferritin的规模化制备和其在生物医药、食品等领域的应用提供了可靠的技术支撑。 展开更多
关键词 核酸酶 Holoferritin 核酸残留 生物合成 蛋白结构
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大肠杆菌中羽扇豆醇的生物合成
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作者 宫林煜 万晓宇 +1 位作者 刘振 毛相朝 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第2期59-67,共9页
羽扇豆醇具有多种生物活性,在食品和医药领域具有重要应用价值。大肠杆菌培养条件简单,发酵周期较短,是一种广泛应用于活性化合物合成的模式微生物。该研究通过共表达人源角鲨烯合酶(human squalene synthase, hSQS)、解脂耶氏酵母中的... 羽扇豆醇具有多种生物活性,在食品和医药领域具有重要应用价值。大肠杆菌培养条件简单,发酵周期较短,是一种广泛应用于活性化合物合成的模式微生物。该研究通过共表达人源角鲨烯合酶(human squalene synthase, hSQS)、解脂耶氏酵母中的角鲨烯环氧化酶(Yarrowia lipolytica squalene epoxidase, YlSQE)和木榄中的羽扇豆醇合酶(Bruguiera gymnorrhiza lupeol synthase, BgLUS)3个途径的相关酶,在大肠杆菌中构建了羽扇豆醇合成途径。比较3种NADPH-细胞色素P450还原酶/角鲨烯环氧酶(NADPH-cytochrome P450 reductase/squalene epoxidase, CPR/SQE)氧化体系发现,拟南芥源AtCPR/荚膜甲基球菌源McSQE最有利于羽扇豆醇的合成。过表达限速酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate synthase, DXS)和异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl pyrophosphate isomerase, IDI)以增加上游甲基赤藓糖醇磷酸(methylerythritol phosphate, MEP)途径流量,获得的工程菌株LUEAMU可以产生155.25 mg/L的羽扇豆醇,是原始菌株LUE的174.44倍。通过优化培养基及甘油添加量发现,含有64 g/L甘油的TB培养基可以将羽扇豆醇产量提高1.38倍,达到214.87 mg/L。在该培养基中进行补料分批培养,大肠杆菌LUEAMU生产羽扇豆醇最高产量为313.95 mg/L。这是目前原核生物作为底盘合成羽扇豆醇的最高产量。该研究为羽扇豆醇的高效合成奠定了基础。 展开更多
关键词 羽扇豆醇 大肠杆菌 MEP途径 NADPH-细胞色素P450还原酶
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