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蛙源米尔伊丽莎白菌的生物膜形成能力及β内酰胺类和喹诺酮类耐药性分析
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作者 蔺凌云 赵颖 +7 位作者 姚嘉赟 沈锦玉 袁雪梅 黄雷 陈静 彭先启 刘忆瀚 潘晓艺 《水生生物学报》 北大核心 2025年第2期95-105,共11页
研究旨在探讨蛙源米尔伊丽莎白菌(Elizabethingia miricola)的药敏特性,生物膜形成能力及对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制。通过16S rRNA和rpoB基因序列系统发育分析对分离菌株进行分子鉴定。采用肉汤稀释法、结晶紫微孔板法和... 研究旨在探讨蛙源米尔伊丽莎白菌(Elizabethingia miricola)的药敏特性,生物膜形成能力及对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制。通过16S rRNA和rpoB基因序列系统发育分析对分离菌株进行分子鉴定。采用肉汤稀释法、结晶紫微孔板法和卡尔加里生物膜装置分别测定其最小抑菌浓度(MIC)、生物膜形成能力及最低生物膜清除浓度(MBEC)。利用PCR方法分析β-内酰胺耐药基因及喹诺酮类耐药决定区(QRDR)突变,并通过双纸片法检测其超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和金属β-内酰胺酶(MBL)的产生。结果显示,从患病蛙类样本中分离到的9株优势菌株均为E.miricola;各菌株对β-内酰胺类、氨基糖苷类及喹诺酮类药物耐药,但对多西环素和氟苯尼考敏感;所有菌株均可形成生物膜,生物膜形成菌的MBEC比对应浮游菌的MIC提高8—>256倍;所有菌株均携带β-内酰胺类耐药相关基因(blaCME、blaGOB和blaB),并产生ESBL及MBL;gyrA基因的QRDR区均检测到了可介导喹诺酮类耐药的非同义突变S83R,gyrB、parC和parE未发现突变。结果表明,蛙源E.miricola呈现多重耐药性,普遍具有生物膜形成能力,β-内酰胺酶的产生及喹酮类药物作用靶点突变与其β-内酰胺及喹诺酮类耐药表型相符。多西环素和氟苯尼考的体外敏感性较高,具有治疗该菌感染的潜力。研究可为E.miricola感染的治疗及耐药机制的深入研究提供参考。 展开更多
关键词 多重耐药性 Β-内酰胺酶 喹诺酮类耐药决定区 生物膜 米尔伊丽莎白菌
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牛蛙常见疾病研究进展及防治方法 被引量:1
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作者 韩乐 靳利忠 +2 位作者 陆雨旷 成江辉 王晓晴 《科学养鱼》 2025年第1期54-55,共2页
随着牛蛙在餐饮方面的市场需求增大,牛蛙养殖产量逐年增加、产值不断提升。牛蛙养殖逐渐从个体户散养走向企业集约化、规模化养殖,高密度人工繁殖成为主流,这便对牛蛙疾病防控有了更高的需求。本文跟进牛蛙常见疾病的研究,了解疾病的病... 随着牛蛙在餐饮方面的市场需求增大,牛蛙养殖产量逐年增加、产值不断提升。牛蛙养殖逐渐从个体户散养走向企业集约化、规模化养殖,高密度人工繁殖成为主流,这便对牛蛙疾病防控有了更高的需求。本文跟进牛蛙常见疾病的研究,了解疾病的病理表现及致病机理,并结合当前一些防治研究的成果,为牛蛙疾病防治提供参考。 展开更多
关键词 防治方法 疾病防控 规模化养殖 牛蛙 致病机理 病理表现 疾病防治 养殖产量
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蛙病毒3型类和桑蒂库帕蛙病毒类双重荧光定量PCR检测方法的建立与应用
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作者 邓艳 柏建山 +5 位作者 徐浩 季新成 黄燕琼 何淑华 曾伟伟 蒋茗 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期48-53,79,共7页
为建立一种可快速鉴别检测蛙病毒3型(FV3)类和桑蒂库帕蛙病毒(SCRV)类的双重荧光定量PCR(qPCR)方法,本研究根据FV3类和SCRV类的主要衣壳蛋白(MCP)基因序列,设计一对特异性引物和两种不同荧光标记的探针,采用特异性引物扩增虎纹蛙病毒(T... 为建立一种可快速鉴别检测蛙病毒3型(FV3)类和桑蒂库帕蛙病毒(SCRV)类的双重荧光定量PCR(qPCR)方法,本研究根据FV3类和SCRV类的主要衣壳蛋白(MCP)基因序列,设计一对特异性引物和两种不同荧光标记的探针,采用特异性引物扩增虎纹蛙病毒(TFV)和大口黑鲈虹彩病毒(LMBV)的目的基因,构建重组质粒标准品pMD19-T-TFV和pMD19-T-LMBV。采用矩阵法优化各反应条件后,初步建立了检测这两类蛙病毒的双重qPCR方法。标准曲线结果显示两个重组质粒标准品混合物与各自的Ct值均呈良好的线性关系。采用本研究建立的方法分别检测TFV、LMBV、伯勒虹彩病毒(BCV)、蛙病毒3型、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、锦鲤疱疹病毒、罗非鱼湖病毒、病毒性神经坏死病毒、斑点叉尾鮰病毒、鲤浮肿病毒、传染性造血器官坏死病毒、传染性脾肾坏死病毒、呼肠孤病毒Ⅱ型、疱疹病毒Ⅱ型,评估该方法的特异;以100~108稀释的重组质粒标准混合物为模板采用建立的双重qPCR方法检测,评估该方法的敏感性;以10^(2)~10^(8)稀释的重组质粒标准混合物为模板采用该双重qPCR方法分别进行组内和组间的重复性试验。结果显示,该方法仅能扩增出FV3类的TFV、BIV、FV3及EHNV和SCRV类的LMBV,其他病毒均无扩增曲线;对pMD19-T-TFV和pMD19-T-LMBV的检测限分别为1拷贝/µL和10拷贝/µL;组内变异系数和组间变异系数均小于2%。利用建立的双重qPCR方法和WOAH推荐的常规PCR方法分别对298份临床样品分别进行检测,结果显示,双重qPCR方法检出21份SCRV类,2份FV3类,普通PCR方法检出15份SCRV类,2份FV3类,双重PCR方法与常规PCR方法对FV3类和SCRV类的检测结果的阳性符合率均达100%。本研究建立的双重qPCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,对于多种蛙病毒属成员的鉴别检测和早期预警具有重要意义。 展开更多
关键词 蛙病毒 双重荧光定量PCR TAQMAN探针
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从我国分离的3株蛙虹彩病毒与蛙病毒3型主要衣壳蛋白基因同源性的比较 被引量:13
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作者 张奇亚 肖枫 +1 位作者 李正秋 桂建芳 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期372-374,共3页
Since 1995,three viral isolates named RGV9506,RGV9807 and RGV9808 associated with frog mortality were isolated from farm-raised frogs (Rana grylio virus,RGV) in China.Both ultrastructural morphology and serological ch... Since 1995,three viral isolates named RGV9506,RGV9807 and RGV9808 associated with frog mortality were isolated from farm-raised frogs (Rana grylio virus,RGV) in China.Both ultrastructural morphology and serological characterisitics had shown that the RGV isolates belong to genus Ranavirus. The DNA sequence analysis of the 5′end of the major capsid protein(MCP) gene of RGV isolates by PCR amplification produced a 531bp fragment.DNA templates were prepared from cells infected with different RGV isolates and the specific primers designed were based on highly conserved region at the 5′ of the gene encoding Frog virus 3(FV3) MCP, which is the typical species of the genus Ranavirus.The PCR products indicate that the nucleotide sequence of MCP gene of the RGV9506,RGV9807 and RGV9808 showed 99.6%, 99.8% and 98.4% homology respectively with the corresponding region of the MCP gene of FV3. 展开更多
关键词 蛙虹彩病毒 蛙病毒3型 FV3 聚合酶链式反应 衣壳蛋白基因 基因同源性 水产动物
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蛙嗜水气单胞菌的分离鉴定 被引量:8
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作者 朱芝秀 何后军 +3 位作者 邓舜洲 王小莺 闵嗣璠 傅光华 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第3期398-400,共3页
从丰城某养殖场发病蛙苗中分离出两株细菌 ,经人工感染试验 ,对健康鲫鱼、小白鼠产生同蛙苗相一致的病症。经细菌形态特征、培养特性及生理生化特性等试验 ,鉴定为嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila ,AH)。药敏试验表明 ,两株细菌对痢... 从丰城某养殖场发病蛙苗中分离出两株细菌 ,经人工感染试验 ,对健康鲫鱼、小白鼠产生同蛙苗相一致的病症。经细菌形态特征、培养特性及生理生化特性等试验 ,鉴定为嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila ,AH)。药敏试验表明 ,两株细菌对痢特灵、多粘菌素、阿米卡星。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 分离 鉴定 症状 病理变化 诊断
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虎纹蛙白内障病病原的分离鉴定及其免疫防治 被引量:24
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作者 周永灿 朱传华 +2 位作者 陈国华 苏文强 唐泽锋 《上海水产大学学报》 CSCD 2001年第1期16-21,共6页
本文报道了海南养殖虎纹蛙白内障病的病原及其免疫学防治方法。对该典型患病个体进行病原分离并鉴定表明 ,被分离出的病原为脑膜炎败血黄杆菌。在所实验的 2 0种抗菌药物中 ,该菌只对万古霉素敏感 ,对头孢哌酮中度敏感 ,而对其他 18种... 本文报道了海南养殖虎纹蛙白内障病的病原及其免疫学防治方法。对该典型患病个体进行病原分离并鉴定表明 ,被分离出的病原为脑膜炎败血黄杆菌。在所实验的 2 0种抗菌药物中 ,该菌只对万古霉素敏感 ,对头孢哌酮中度敏感 ,而对其他 18种药物均不敏感。通过筛选该病原强毒株制备甲醛灭活疫苗 ,对健康虎纹蛙进行免疫接种后 ,可明显提高其对该病的抵抗能力 ,表明在生产上用免疫学方法防治该病是可行的。 展开更多
关键词 虎纹蛙 脑膜炎败血黄杆菌 白内障病 分离 鉴定 免疫学防治
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棘胸蛙白内障病原鉴定及病理组织观察 被引量:13
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作者 刘子明 金晶 +4 位作者 胡则辉 戴庆敏 李巧玲 施倩 吕耀平 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期1811-1818,共8页
为了确定棘胸蛙(Quasipaa spinosa)白内障病的病原,进行了病原菌分离、人工感染、分离菌理化特性和16S rDNA基因序列分析。结果表明,从患病棘胸蛙分离出2种致病菌Mm1和Mm2,将其大腿肌肉注射感染健康棘胸蛙,表现出与自然发病蛙相似症状... 为了确定棘胸蛙(Quasipaa spinosa)白内障病的病原,进行了病原菌分离、人工感染、分离菌理化特性和16S rDNA基因序列分析。结果表明,从患病棘胸蛙分离出2种致病菌Mm1和Mm2,将其大腿肌肉注射感染健康棘胸蛙,表现出与自然发病蛙相似症状。通过理化特性与16S rDNA基因序列鉴定,分离菌为摩氏摩根菌(Morganella morganii),其对链霉素和庆大霉素高度敏感,对氨苄西林和头孢他啶产生抗药性。病理组织学观察发现,其感染可引起棘胸蛙白内障病,发病棘胸蛙的晶状体、肝、肠和肾损伤严重,出现组织溶解、核溶解等现象,且在肠部出现包涵体。本研究发现摩氏摩根菌可感染棘胸蛙,导致棘胸蛙白内障病,并初步研究了病原菌的生物学特性、病理特征和药物敏感性,以期为该病的诊断和防治提供理论依据。 展开更多
关键词 棘胸蛙 白内障病 摩氏摩根菌 组织病理 药敏试验
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棘胸蛙致病性蜡样芽孢杆菌的分离鉴定及病理组织观察 被引量:22
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作者 吕耀平 金晶 +5 位作者 施倩 陈洁 刘子明 陆君 黄富友 傅旭豪 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期26-32,共7页
试验从患烂皮病棘胸蛙(Quasipaa spinosa)中筛选出3种致病性菌株BS_1、BS_2和BS_3,对其进行革兰氏染色、形态观察、生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,鉴定上述3株菌均为蜡样芽孢杆菌。同时观察人工感染棘胸蛙的组织病理切片,发现经病原... 试验从患烂皮病棘胸蛙(Quasipaa spinosa)中筛选出3种致病性菌株BS_1、BS_2和BS_3,对其进行革兰氏染色、形态观察、生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,鉴定上述3株菌均为蜡样芽孢杆菌。同时观察人工感染棘胸蛙的组织病理切片,发现经病原菌感染的棘胸蛙肝、肺、舌和肌肉的损伤较严重,表现出明显变性、坏死和炎症细胞浸润,且在肺部组织内发现嗜碱性包涵体。药敏试验表明,在所试的7种抗生素中,致病性蜡样芽孢杆菌对庆大霉素和链霉素高度敏感,对妥布霉素、卡那霉素和四环素中度敏感,对氨苄西林和头孢他啶产生抗药性。实验初步探究了棘胸蛙烂皮病的发病机理,为棘胸蛙烂皮病的防治提供理论依据。 展开更多
关键词 棘胸蛙 烂皮病 蜡样芽孢杆菌 组织病理 药敏试验
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牛蛙嗜水气单胞菌病的病原研究 被引量:13
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作者 周常义 陈晓凤 +1 位作者 吴俊林 刘章锦 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2003年第4期317-321,共5页
针对厦门市同安区某牛蛙养殖场中出现的后腿肌肉变成淡黄绿色、肝肿大呈深紫红色、肾脏充血呈鲜红色为主要症状的患病牛蛙,进行了细菌分离、培养、人工感染、生理生化、药物敏感等试验研究,结果确认引起该病的病原菌为嗜水气单胞菌(Aero... 针对厦门市同安区某牛蛙养殖场中出现的后腿肌肉变成淡黄绿色、肝肿大呈深紫红色、肾脏充血呈鲜红色为主要症状的患病牛蛙,进行了细菌分离、培养、人工感染、生理生化、药物敏感等试验研究,结果确认引起该病的病原菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),药敏试验结果表明,该病原菌对环丙沙星、诺氟沙星、庆大霉素等高度敏感,而对氯霉素、青霉素钠、复方SMZ等不敏感. 展开更多
关键词 牛蛙 嗜水气单胞菌 病原 人工感染 药物敏感
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棘胸蛙歪头病病原分离·鉴定与药敏试验 被引量:26
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作者 李明 宋婷婷 +4 位作者 郑荣泉 郑善坚 胡文芳 骆艺元 严红 《安徽农业科学》 CAS 2016年第3期64-66,98,共4页
[目的]分离并鉴定棘胸蛙歪头病病原。[方法]从患歪头病棘胸蛙(Quasipaa spinosa)体内分离到致病菌,分别采用4种不同方式进行人工感染试验,通过形态观察、生理生化试验、16S r DNA测序等方法进行鉴定,并采用抑菌圈研究该菌株对12种抗生... [目的]分离并鉴定棘胸蛙歪头病病原。[方法]从患歪头病棘胸蛙(Quasipaa spinosa)体内分离到致病菌,分别采用4种不同方式进行人工感染试验,通过形态观察、生理生化试验、16S r DNA测序等方法进行鉴定,并采用抑菌圈研究该菌株对12种抗生素的敏感性。[结果]除口服方式外,肌肉注射、皮肤损伤浸泡、皮肤不损伤浸泡感染途径均能使棘胸蛙发病并导致死亡,且对蛙有较强的致病性。通过生理生化试验和16S r DNA测序等方法鉴定致病菌为脑膜炎败血金黄杆菌(Chryseobacterium meningosepticum)。药敏试验结果表明:该致病菌对万古霉素、头孢哌酮、庆大霉素和红霉素高度敏感,而对吡哌酸、链霉素、四环素、诺氟沙星、青霉素、新霉素、林可霉素、先锋霉素不敏感。[结论]棘胸蛙歪头病病原为脑膜炎败血金黄杆菌。 展开更多
关键词 棘胸蛙 脑膜炎败血金黄杆菌 16S r DNA 药敏试验
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虎纹蛙烂趾病病原菌分离鉴定与药敏试验 被引量:6
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作者 丁燏 唐晓尘 +2 位作者 简纪常 吴灶和 陈魁 《水产科学》 CAS 北大核心 2009年第2期67-70,共4页
从患典型烂趾病的虎纹蛙病灶组织分离到1株细菌,暂命名为WD-01,经人工感染证实该细菌为虎纹蛙烂趾病的病原菌。通过形态学、生理生化特性对其进行鉴定,并用纸片法进行药敏试验。鉴定结果表明,细菌WD-01为嗜水气单胞菌。药敏试验结果表明... 从患典型烂趾病的虎纹蛙病灶组织分离到1株细菌,暂命名为WD-01,经人工感染证实该细菌为虎纹蛙烂趾病的病原菌。通过形态学、生理生化特性对其进行鉴定,并用纸片法进行药敏试验。鉴定结果表明,细菌WD-01为嗜水气单胞菌。药敏试验结果表明,新霉素、利福平、先锋霉素、诺氟沙星、庆大霉素、强力霉素、链霉素、卡那霉素、土霉素和金霉素等12种药物对菌株WD-01具有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 虎纹蛙 嗜水气单胞菌 烂趾病 药敏试验
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W_(135)和Y群脑膜炎球菌培养和多糖纯化 被引量:6
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作者 李文春 戴晓畅 +5 位作者 杨美峰 钱雯 施競 陈兰萍 陈燕 黄镇 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期236-237,243,共3页
目的培养W135和Y群脑膜炎球菌及荚膜多糖的纯化。方法采用综合培养基代替半综合培养基在75L生物反应器中对两群脑膜炎球菌进行培养,研究培养基处方、发酵、多糖提取及纯化工艺。结果综合培养基可代替半综合培养基对两群脑膜炎球菌进行... 目的培养W135和Y群脑膜炎球菌及荚膜多糖的纯化。方法采用综合培养基代替半综合培养基在75L生物反应器中对两群脑膜炎球菌进行培养,研究培养基处方、发酵、多糖提取及纯化工艺。结果综合培养基可代替半综合培养基对两群脑膜炎球菌进行培养。在培养过程中补加葡萄糖溶液、优化搅拌速度及通气量均有利于两菌群生长;在多糖纯化过程中,通过对比试验选择25%乙醇沉淀核酸,2~8℃的酚溶液,萃取蛋白的次数控制在3~4次为好。结论所研制的综合培养基及多糖纯化的工艺具有较好的可行性,为四价脑膜炎球菌多糖疫苗的研制提供了试验基础。 展开更多
关键词 脑膜炎 球菌 Y群 培养基 生物反应器 葡萄糖溶液 荚膜多糖 纯化工艺 多糖提取 培养过程 搅拌速度 纯化过程 乙醇沉淀 试验选择 通气量 菌多糖 研制 菌群
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林蛙红腿病病原分离及鉴定 被引量:13
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作者 李太元 金吉东 +2 位作者 刘学龙 于文会 金庆日 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2002年第12期32-33,共2页
关键词 林蛙 红腿病 病原 分离 鉴定
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虎纹蛙病毒体外培养及其理化特性 被引量:8
14
作者 王晓红 翁少萍 何建国 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期363-367,共5页
从发病濒死的虎纹蛙(Rana tigrina rugulosa)蝌蚪中分离到一种病毒。在25℃条件下,该病毒能在鲤鱼表皮瘤细胞系(EPC),胖头肌肉细胞系(FHM)和草鱼性腺细胞系(CO)三种鱼类细胞上产生空斑状的细胞病理变化(CPE)。该病毒对氯仿,热(56℃,30m... 从发病濒死的虎纹蛙(Rana tigrina rugulosa)蝌蚪中分离到一种病毒。在25℃条件下,该病毒能在鲤鱼表皮瘤细胞系(EPC),胖头肌肉细胞系(FHM)和草鱼性腺细胞系(CO)三种鱼类细胞上产生空斑状的细胞病理变化(CPE)。该病毒对氯仿,热(56℃,30min)和酸(pH3)敏感。其体外培养的适合增殖温度范围为20~30℃。 电镜下观察,病毒为对称的二十面体,切面正六边形,对角直径125nm左右。 展开更多
关键词 虹彩病毒 虎纹蛙 病毒 体外培养 理化特性
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黑龙江林蛙热休克蛋白hsp70家族基因的鉴定及其在感染下的表达分析 被引量:4
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作者 刘婷婷 郭晶晶 +4 位作者 陈兆东 刘玉芬 井乐刚 刘鹏 赵文阁 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1710-1730,共21页
热休克蛋白(heat shock protein,HSPs)是一类广泛存在于各类生物体中高度保守的应激蛋白,当生物体受到环境中物理、化学和生物等因素的刺激时,机体出于自我保护会迅速产生应激反应,合成该类蛋白,从而减少外界刺激对机体的损伤,提高自身... 热休克蛋白(heat shock protein,HSPs)是一类广泛存在于各类生物体中高度保守的应激蛋白,当生物体受到环境中物理、化学和生物等因素的刺激时,机体出于自我保护会迅速产生应激反应,合成该类蛋白,从而减少外界刺激对机体的损伤,提高自身抵抗能力,HSP70是该家族的重要成员。为探究HSP70在两栖类抗感染中的作用,以黑龙江林蛙(Rana amurensis)作为研究对象,基于同源克隆的方法,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术克隆Ra-hsp70家族基因;采用生物信息学方法对Ra-hsp70家族基因进行序列特征、立体结构、亲缘关系的分析;再利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)技术对Ra-hsp70家族基因在细菌感染下的表达谱进行分析;应用免疫组织化学技术对HSP70蛋白进行表达和定位分析。结果表明,获得的Ra-HSP70家族的4个成员HSP70、HSPA5、HSPA8和HSPA13均包含有3段保守的HSP70家族标签序列,属于典型的HSP70家族成员;4个成员在系统发育树中分布在4个不同的分支,且含有相同亚细胞定位基序的成员分布在同一分支;感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)后,Ra-hsp70家族基因的4个成员的相对表达量均出现显著上调(P<0.01),但是在不同组织中到达峰值的时间不同。免疫组织化学法检测到HSP70蛋白在肝脏、肾脏、皮肤和胃组织的胞质中均有不同程度表达。Ra-hsp70家族基因的4个成员能够不同程度地响应细菌感染,推测参与了机体对抗致病菌侵染的生物学过程,并在其中发挥不同的生物学作用,为两栖类HSP70基因的功能研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 黑龙江林蛙 HSP70家族 序列分析 嗜水气单胞菌 表达谱
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蛙病毒三重荧光PCR检测方法的建立 被引量:6
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作者 李江宇 王树云 +10 位作者 王姝 任彤 高志强 谷强 张伟 刘艳华 王娜 张旻 景宏丽 江育林 张利峰 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期746-752,共7页
根据GenBank中收录的蛙病毒属虹彩病毒主要衣壳蛋白(MCP)基因序列设计了一对通用引物和3条Taqman探针,通过PCR反应体系的优化以及反应的特异性、灵敏性和干扰性试验,建立了一种可检测蛙病毒属大部分成员并能进行初步分类的三重荧光... 根据GenBank中收录的蛙病毒属虹彩病毒主要衣壳蛋白(MCP)基因序列设计了一对通用引物和3条Taqman探针,通过PCR反应体系的优化以及反应的特异性、灵敏性和干扰性试验,建立了一种可检测蛙病毒属大部分成员并能进行初步分类的三重荧光PCR方法。通过鉴定分析将蛙病毒属成员分为三类,其中第一类包括蛙病毒3型(FV3)、饰纹汀蛙虹彩病毒(BIV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、欧洲鲴鱼病毒(ECV)、欧鲶病毒(ESV)、中华鳖虹彩病毒(STIV)、大鲵虹彩病毒(ADIV)、沼泽绿牛蛙虹彩病毒(RGV)和虎纹蛙病毒(TFV),第二类是Santee.Cooper蛙病毒(SCRV),由大口黑鲈虹彩病毒(LMBV)、裂唇鱼病毒(DFV)和孔雀鱼病毒(GV6)组成,而新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)则单独作为第三类。进一步分析发现各病毒的最低检测量均达到10^2拷贝,表明该方法除了具有良好的特异性和稳定性之外还具有高度灵敏性。建立的该蛙病毒三重荧光PCR方法可为蛙病毒的快速诊断和分子流行病学调查提供一种有效的技术手段。 展开更多
关键词 蛙病毒 虹彩病毒 主要衣壳蛋白(MCP)基因 三重荧光PCR TAQMAN探针
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美国青蛙腐皮病病原的研究 被引量:9
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作者 谢凤 张凤君 黄文芳 《华南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2002年第2期102-105,共4页
Three bacteria strains were isolated from the skin tissue of Rana grylio with "necrotic skin disease".After artificial infection by the bacteria strain skin 1-3 was determined to be the pathogen of the "... Three bacteria strains were isolated from the skin tissue of Rana grylio with "necrotic skin disease".After artificial infection by the bacteria strain skin 1-3 was determined to be the pathogen of the "necrotic skin disease".It was identified to be Acinetobacter lwoffii by VITEK-AMS-60 automatic identification system.The bacteria were rod shaped with a size of (0 75~0 93 ) μm×(1 5~2) μm, Gram-negative, and non-mobile. It was sensitive to 17 species of drugs and resistant to 5 drugs. 展开更多
关键词 美国青蛙 腐皮病 病原 鲁氏不动杆菌 药物敏感性
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虎纹蛙蝌蚪致病菌株鉴定及药物敏感性分析 被引量:5
18
作者 郭秀平 林明辉 +4 位作者 何有根 彭勇鳌 曹少卫 石存斌 黄志斌 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期114-115,共2页
从患病虎纹蛙蝌蚪体内分离到一株优势菌,经分离纯化培养制成细菌悬液,采用浸泡方式感染蝌蚪。结果表明:该菌株能感染蝌蚪,且具有较强的毒力,可导致受试蝌蚪100%死亡;受试蝌蚪出现与自然感染相似的症状。对该菌进行形态特征和主要理化特... 从患病虎纹蛙蝌蚪体内分离到一株优势菌,经分离纯化培养制成细菌悬液,采用浸泡方式感染蝌蚪。结果表明:该菌株能感染蝌蚪,且具有较强的毒力,可导致受试蝌蚪100%死亡;受试蝌蚪出现与自然感染相似的症状。对该菌进行形态特征和主要理化特性分析,鉴定为豚鼠气单胞菌。药敏试验结果显示:该菌对链霉素、卡那霉素、新霉素、恩诺沙星、培氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星等药物高度敏感;对复方新诺明、强力霉素药物等表现中度敏感;对试验的4种中草药表现耐药性。 展开更多
关键词 虎纹蛙蝌蚪 分离鉴定 豚鼠气单胞菌 药物敏感性
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牛蛙"白内障"病病原的初步研究 被引量:15
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作者 纪荣兴 邹文政 莫英军 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2003年第1期8-11,共4页
从患"白内障"病的牛蛙肝脏、心脏、眼睛等器官中分离到A 1 L、B 4 H、B 2 E3株细菌.各以108CFU/mL的浓度进行肌肉注射健康蛙,剂量为0.2mL.发现B 2 E分离菌可使实验蛙100%产生与自然发病相似的"白内障"症状,死亡率达... 从患"白内障"病的牛蛙肝脏、心脏、眼睛等器官中分离到A 1 L、B 4 H、B 2 E3株细菌.各以108CFU/mL的浓度进行肌肉注射健康蛙,剂量为0.2mL.发现B 2 E分离菌可使实验蛙100%产生与自然发病相似的"白内障"症状,死亡率达70%,可确认该菌为"白内障"病的致病菌.该分离菌大小为(0.3~0.5)μm×(0.6~0.8)μm,短杆状,极生单鞭毛,革兰氏阴性,无芽孢,无荚膜,主要生理生化特性是葡萄糖产酸、产气;氧化酶、赖氨酸脱羧酶、精氨酸脱羧酶阳性;鸟氨酸脱羧酶阴性;能在TCBS培养基上生长、培养基呈绿色,但不能在6%NaCl蛋白胨水上生长.根据其主要生理生化特性,初步鉴定为气单胞菌(Aeromonassp.).药敏试验结果表明,该菌对链霉素等敏感,对氨苄青霉素、青霉素G、先锋霉素V等不敏感. 展开更多
关键词 牛蛙 “白内障”病 病原 气单胞菌 生理生化特性 药敏试验 致病菌 人工养殖
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蛙类歪头、破头与白眼综合征病原分析 被引量:4
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作者 李旭东 刘永涛 +2 位作者 杨先乐 杨移斌 艾晓辉 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第8期1617-1625,共9页
为探明湖北、福建等主养区一系列蛙疾病的发病原因,从具有典型歪头、破头与白眼等症状的蛙脑部和内脏器官分离到40株优势菌。经16S rRNA基因序列比对,发现40株优势菌均与米尔伊丽莎白菌(Elizabethkingia miricola)同源。经生理生化鉴定... 为探明湖北、福建等主养区一系列蛙疾病的发病原因,从具有典型歪头、破头与白眼等症状的蛙脑部和内脏器官分离到40株优势菌。经16S rRNA基因序列比对,发现40株优势菌均与米尔伊丽莎白菌(Elizabethkingia miricola)同源。经生理生化鉴定、系统发育分析发现,这40株优势菌存在遗传差异,宿主和区域是影响亲缘关系的重要因素,并判定菌株典型株QW08为米尔伊丽莎白菌。回归感染实验证实QW08为蛙类歪头、破头与白眼病的病原菌。组织病理学观察显示,米尔伊丽莎白菌感染黑斑蛙可引起其全身多脏器与组织损伤,脑、肠道、肝、脾与肾等组织器官损伤极其严重,主要病理变化表现为变性、坏死和炎症反应,致多组织器官功能障碍而引起感染蛙死亡。药敏特性分析显示,分离株QW08仅对氟苯尼考高度敏感,对其余19种抗生素表现出不同程度的耐药。研究结果为蛙类该病防控提供了理论依据。 展开更多
关键词 米尔伊丽莎白菌 分离鉴定 病理 药敏特性
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