小鹅瘟免疫荧光诊断方法的研究 被引量：36

1

作者 潘玉民 董玉平 +1 位作者 石全瑞 辛英 《中国兽医科技》 CSCD 1990年第10期6-10,共5页

近年来,我们从“简、快、准”诊断小鹅瘟(GP)的目的出发,在国内首次对应用免疫荧光直接法快速诊断小鹅瘟进行了多方面的研究。寻找出与国内外不同制备高效价抗小鹅瘟高免疫血清新途径。并成功制备出效价高达32倍的小鹅瘟荧光抗体(GPFA)... 近年来,我们从“简、快、准”诊断小鹅瘟(GP)的目的出发,在国内首次对应用免疫荧光直接法快速诊断小鹅瘟进行了多方面的研究。寻找出与国内外不同制备高效价抗小鹅瘟高免疫血清新途径。并成功制备出效价高达32倍的小鹅瘟荧光抗体(GPFA),并对其进行了纯度、F/P比值、效价、特异性、敏感性、稳定性、重复性以及荧光抗体标记最佳条件、染色最佳条件等方面的研究,都获得了满意的效果。应用GPFA对接种强毒鹅胚胎儿肝脏GPV检测和对GP检测。其结果分别在接种后第4天和第2天都可检测到GPV抗原。应用GPFA对人工感染GPV的50只雏鹅脏器GPV抗原检测结果与GPV分离鉴定结果符合率为100％。应用GPFA对阳性病例各脏器检验结果表明,各脏器GPV抗原检出率依次为肾>肝>胰>脾>心>肺>脑。应用GPFA对来自长春、延边、辽源等地区1100只病、健康鹅脏器检测结果表明,与GPV分离鉴定结果符合率为97.48％,群体定性为100％。 展开更多

关键词 小鹅瘟 免疫荧光 诊断

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死亡鹅胚中霉形体的分离与初步鉴定 被引量：1

2

作者 邵国青 毛洪先 +3 位作者 金洪效 钱建飞 樊素琴 夏庆凤 《中国兽医科技》 CSCD 1994年第11期20-21,共2页

死亡鹅胚中霉形体的分离与初步鉴定邵国青，毛洪先，金洪效，钱建飞，樊素琴，夏庆凤（江苏省农业科学院畜牧兽医研究所南京２１００１４）１９８３年，Ｓｔｉｐｋｏｖｉｔｓ首次报道从患阴茎炎的病鹅中分离出霉形体，并用以复制出相同... 死亡鹅胚中霉形体的分离与初步鉴定邵国青，毛洪先，金洪效，钱建飞，樊素琴，夏庆凤（江苏省农业科学院畜牧兽医研究所南京２１００１４）１９８３年，Ｓｔｉｐｋｏｖｉｔｓ首次报道从患阴茎炎的病鹅中分离出霉形体，并用以复制出相同疾病，再次分离出病原。用１５种已知... 展开更多

关键词 鹅病 霉形体 分离 鉴定

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4株鹅源新城疫病毒融合蛋白基因的克隆及序列分析 被引量：13

3

作者 万洪全 吴艳涛 +1 位作者 刘秀梵 张如宽 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期208-213,共6页

测定了 4株鹅源新城疫病毒 (NDV)融合蛋白 (F)基因 5’端 1 70 0核苷酸片段的序列 ,并由此推导了F蛋白氨基酸序列 ,并对鹅源NDV的基因型分类地位进行探讨。结果表明 ,4株病毒F基因的同源性大于 97% ,与DNV标准强毒株F48E8F基因的同源性... 测定了 4株鹅源新城疫病毒 (NDV)融合蛋白 (F)基因 5’端 1 70 0核苷酸片段的序列 ,并由此推导了F蛋白氨基酸序列 ,并对鹅源NDV的基因型分类地位进行探讨。结果表明 ,4株病毒F基因的同源性大于 97% ,与DNV标准强毒株F48E8F基因的同源性为 86 0 %～86 8% ,F基因转录起始序列及起始密码子位置与已知NDV完全相同 ;F蛋白具有和已知NDV相似的各种功能区 ,F蛋白前体F0裂解位点附近的氨基酸序列为112 RRQKRF117,符合NDV强毒株的特征。对F基因第 3 3 4～ 1 6 82位核苷酸之间 3种限制性内切酶HinfⅠ、BstoⅠ、RsaⅠ酶切图谱的分析表明 。 展开更多

关键词 鹅 新城疫病毒 融合蛋白基因 序列分析 基因型 基因克隆

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鹅源禽副粘病毒NA-1株生物学特性的研究 被引量：21

4

作者 王学理 武迎红 丁壮 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期93-97,共5页

对从吉林省分离的鹅副粘病毒NA-1株应用SPF鸡胚进行传代,通过电镜形态学观察、HA及HI试验、血清学鉴定、毒力鉴定、AGID试验、血凝谱的测定、动物感染试验等一系列研究,发现NA-1株属于禽副粘病毒Ⅰ型,具有新城疫病毒速发型相似的毒力,... 对从吉林省分离的鹅副粘病毒NA-1株应用SPF鸡胚进行传代,通过电镜形态学观察、HA及HI试验、血清学鉴定、毒力鉴定、AGID试验、血凝谱的测定、动物感染试验等一系列研究,发现NA-1株属于禽副粘病毒Ⅰ型,具有新城疫病毒速发型相似的毒力,属于强毒力毒株,遗传进化树分析属于基因Ⅶ新城疫病毒。该病毒对鹅、鸡均具有高致病性。 展开更多

关键词 鹅 禽副粘病毒 生物学特性

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一株鹅细小病毒全基因特征分析 被引量：16

5

作者 万春和 朱海侠 +5 位作者 黄瑜 彭春香 程龙飞 施少华 傅光华 陈红梅 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第4期19-24,共6页

根据GenBank登录的鹅细小病毒基因序列和基因组结构特征，采用PCR技术扩增获得一株鹅细小病毒株（Goose parvovirus，GoPV）全基因序列，为中国大陆地区首次报道。GoPV株病毒全基因大小为5106nt，其基因组5’端和3’端均含有相同的末端... 根据GenBank登录的鹅细小病毒基因序列和基因组结构特征，采用PCR技术扩增获得一株鹅细小病毒株（Goose parvovirus，GoPV）全基因序列，为中国大陆地区首次报道。GoPV株病毒全基因大小为5106nt，其基因组5’端和3’端均含有相同的末端倒置重复序列（inverted terminal repeats, ITR），ITR全长为444nt。GoPV基因组主要由左右两侧两个开放阅读框组成，左侧编码非结构蛋白（non-structureprotein，NS）NSl和NS2，右侧编码3种结构蛋白（viral structural protein，VP）VP1、VP2和VP3。NS基因全长为1884nt（537-2420nt），其中NS2全长1356nt（1065～2420nt）；VP基因全长2199nt（2439-4637nt），其中Ⅵ叼全长1764nt（2874-4637nt），VP3全长1605nt（3033-4637nt），在其右侧的ITR前有一个Poly（A）的尾。GoPV株病毒全基因和欧洲疫苗株（EU583392（VG32／1，Europe））核苷酸同源性最高，高达98．6％。本研究为进一步研究GPV分类地位以及进化关系提供依据，也为研究GPV强毒株和疫苗株之间生物学特性以及GPV治病机理和开发基因工程疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 鹅细小病毒 全基因 分子特征

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朗德鹅圆环病毒全基因组序列测定和遗传演化分析 被引量：14

6

作者 万春和 施少华 +3 位作者 程龙飞 傅光华 陈红梅 黄瑜 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第4期6-12,共7页

圆环病毒可以引起免疫抑制,从而造成其他病原的并发和(或)继发感染。为研究鹅圆环病毒(Goosecircovirus,GoCV)全基因组的分子生物学特性,运用重叠PCR技术从江西朗德鹅组织脏器提取的DNA中扩增出2条核苷酸序列,用Lasergene v7.1 DNAStar... 圆环病毒可以引起免疫抑制,从而造成其他病原的并发和(或)继发感染。为研究鹅圆环病毒(Goosecircovirus,GoCV)全基因组的分子生物学特性,运用重叠PCR技术从江西朗德鹅组织脏器提取的DNA中扩增出2条核苷酸序列,用Lasergene v7.1 DNAStar软件对拼接后的鹅圆环病毒江西株核苷酸组成、基因组结构及病毒的遗传变异进行分析。结果表明,所获病毒(简称GoCV-JX1)核酸全基因大小1821 nt,与GenBank登录的浙江永康株(No.DQ192280)GoCV的核苷酸同源性最高,高达98.6%。GoCV-JX1为我国江西朗德鹅群中首次报道并被测定全基因的鹅圆环病毒。 展开更多

关键词 鹅圆环病毒 全基因 序列分析

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鹅源腺病毒全基因组DNA酶切片段的克隆 被引量：4

7

作者 徐福洲 崔治中 +3 位作者 段玉友 刘岳龙 孙怀昌 何良梅 《扬州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2001年第1期44-47,共4页

利用 1株鹅源腺病毒 Y81G4 株 ,经鹅胚增殖后收获尿囊液 ,用差速离心法纯化病毒子并提取病毒基因组 DNA.病毒 DNA经 H ind 酶切后共产生 1 0个片段 ,分别回收各酶切片段 ,与经 H ind 单酶切的p UC1 8连接 ,获得 8个不同的重组质粒 .对... 利用 1株鹅源腺病毒 Y81G4 株 ,经鹅胚增殖后收获尿囊液 ,用差速离心法纯化病毒子并提取病毒基因组 DNA.病毒 DNA经 H ind 酶切后共产生 1 0个片段 ,分别回收各酶切片段 ,与经 H ind 单酶切的p UC1 8连接 ,获得 8个不同的重组质粒 .对于未克隆到的两末端片段 ,经碱处理去除末端蛋白后 ,以平端和 H ind 粘端与经 Sma 和 H ind 双酶切的 p UC1 8连接 ,获得了重组质粒 p GAHC和 p GAHI.克隆的各酶切片段 ,通过酶切电泳和 Southern blotting结果鉴定 ,证明已分别克隆到该病毒基因组 DNA H ind 酶切片段 ,且各酶切片段大小之和约为 3 2 . 展开更多

关键词 鹅源腺病毒 基因组 酶切片段 克隆

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鹅副粘病毒毒力特性的研究 被引量：16

8

作者 刘华雷 王永坤 +5 位作者 周继宏 田慧芳 朱国强 钱忠明 严维巍 李玉峰 《江苏农业研究》 CSCD 2000年第2期15-20,共6页

新城疫病毒毒力的判定标准是根据国际上规定的 3项指标 ,即最小致死量致死鸡胚平均死亡时间 ( MDT)、 1日龄雏鸡脑内接种致病指数 ( ICPI)和 6周龄非免疫雏鸡静脉接种致病指数 ( IVPI)等加以评价。将分离到的 1 1株鹅副粘病毒中选取了其... 新城疫病毒毒力的判定标准是根据国际上规定的 3项指标 ,即最小致死量致死鸡胚平均死亡时间 ( MDT)、 1日龄雏鸡脑内接种致病指数 ( ICPI)和 6周龄非免疫雏鸡静脉接种致病指数 ( IVPI)等加以评价。将分离到的 1 1株鹅副粘病毒中选取了其中 3株 ,即 HG97C5 、YG97F1 1 、YG98- 2 C4,按照新城疫病毒毒力判定的标准方法进行了一系列致病性试验。结果为 :3株鹅副粘病毒的 MDT分别为 56.7、52 .0、53 .2 ,ICPI分别为 1 .64、1 .69、1 .70 ,IVPI分别为 2 .62、2 .60、2 .60 ,表明这 3株鹅副粘病毒均具有与新城疫病毒速发型相类似的毒力。同时将鹅胚和鹅按照研究新城疫病毒毒力的方法进行了相应的毒力试验。结果为 :上述 3株鹅副粘病毒最小致死量致死 1 3日龄鹅胚的平均死亡时间分别为 68.8、67.4、70 .2 ,1日龄雏鹅脑内接种致病指数分别为 1 .52、1 .64、1 .66,6周龄非免疫雏鹅静脉接种致病指数分别为 1 .2 6、1 .65、1 .68。目前虽然没有鹅副粘病毒毒力判定标准 ,但从其对鸡和鹅的致病性检测结果表明这 展开更多

关键词 鹅 副粘病毒 毒力特性 抗原性

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鹅细小病毒基因组结构特征研究进展 被引量：16

9

作者 朱海侠 万春和 黄瑜 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第1期82-86,共5页

鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)属细小病毒科,细小病毒属,由我国学者方定一1956年首次分离报道。GPV基因组约5 Kb,由左右2个完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)组成:LORF(left ORF)和RORF(right ORF)。LORF编码非结构蛋白(non... 鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)属细小病毒科,细小病毒属,由我国学者方定一1956年首次分离报道。GPV基因组约5 Kb,由左右2个完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)组成:LORF(left ORF)和RORF(right ORF)。LORF编码非结构蛋白(nonstructural protein,NS)NS1和NS2,RORF编码VP1、VP2和VP3三种结构蛋白。本文针对近年来鹅细小病毒基因组结构特征的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 鹅细小病毒 基因组结构 非结构蛋白 结构蛋白

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小鹅瘟病毒单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量：7

10

作者 朱小丽 陈少莺 +5 位作者 程晓霞 林锋强 陈仕龙 王劭 黄梅清 李兆龙 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第6期20-24,共5页

为了建立快速、简便的番鸭小鹅瘟病诊断方法,用纯化的小鹅瘟病毒(Goose parpovirus,GPV-PT)免疫BABL/c鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA和间接免疫荧光检检(indirect immunofluorescence assay,IFA)筛选,获得3株能稳定分泌... 为了建立快速、简便的番鸭小鹅瘟病诊断方法,用纯化的小鹅瘟病毒(Goose parpovirus,GPV-PT)免疫BABL/c鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA和间接免疫荧光检检(indirect immunofluorescence assay,IFA)筛选,获得3株能稳定分泌抗GPV单克隆抗体的杂交瘤细胞株(分别命名为D11、7-7和E16)。三株单抗的免疫球蛋白亚类分别为IgM、IgG3和IgM,3株单抗均具有ELISA、IFA和中和特性;其中两株(D11和E16)具有致敏胶乳特性;特异性测定显示3株单抗仅与GPV反应,而与番鸭细小病毒(Duck parpovirus,MPV)、番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)、禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)、鸭副粘病毒(Paramyxovirus,PMV)、鸭肝炎病毒(Duck hepatis virus,DHV)、正常细胞和胚液等均无交叉反应;在-20℃保存期为18个月。结果表明3株单抗均具有良好的特异性,为研制免疫学快速诊断奠定了基础。 展开更多

关键词 小鹅瘟病毒 单克隆抗体 制备

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密码子优化型鹅细小病毒病毒样颗粒的表达与鉴定

11

作者 陈宗艳 李传峰 +4 位作者 高景鹏 朱英奇 王玢瑸 杨宗伟 刘光清 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第4期1-6,共6页

根据昆虫细胞密码子的偏嗜性,对鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)VP2基因的密码子进行优化,利用Bac-to-Bac表达系统构建了表达优化VP2基因的重组杆状病毒,通过感染昆虫细胞(Sf9)获得病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)。SDS-PAGE... 根据昆虫细胞密码子的偏嗜性,对鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)VP2基因的密码子进行优化,利用Bac-to-Bac表达系统构建了表达优化VP2基因的重组杆状病毒,通过感染昆虫细胞(Sf9)获得病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)。SDS-PAGE分析显示Sf9细胞中出现了65 kDa的蛋白条带,间接免疫荧光(indirect immunofluorescent assay,IFA)和Western blot结果均证实表达产物能与鼠抗GPV VP2抗体发生特异性反应,说明其具有良好的免疫反应性。同时,试验结果还证明,密码子优化后的GPV VP2基因在昆虫细胞中表达量得到了提高,明显高于野生型VP2基因。透射电镜观察纯化后的昆虫细胞表达产物,可见直径约30 nm的VLPs,表明密码子的优化并不影响VP2蛋白的组装。本研究为进一步研制诊断抗原以及新型GPV疫苗等奠定了基础。 展开更多

关键词 鹅细小病毒 VP2 密码子优化 杆状病毒表达系统 病毒样颗粒

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鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的制备和鉴定 被引量：10

12

作者 吕炫 张淼 +8 位作者 胡增金 李佳明 张冲 朱英奇 魏娟文 吴琼 张瑞辰 夏伦志 王桂军 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期412-417,共6页

采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷... 采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达鹅星状病毒衣壳纤突重组蛋白,使用镍柱纯化衣壳纤突蛋白VP27,将定量的重组蛋白免疫BALB/c小鼠。利用ELISA、Western blot和IFA鉴定鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体。结果显示,鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的效价大于1∶64000,Western blot试验结果证明了鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的特异性,IFA试验结果证明鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体能够识别天然的鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27。 展开更多

关键词 鹅星状病毒 衣壳纤突蛋白VP27 多克隆抗体

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抗鹅细小病毒单克隆抗体的制备及其免疫荧光检测方法的建立 被引量：7

13

作者 郭卉 涂飞 +5 位作者 吕亚楠 史荣华 金文杰 邵红霞 钱琨 秦爱建 《中国动物传染病学报》 CAS 2013年第4期1-6,共6页

为建立免疫荧光检测鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)的方法,本研究利用超速离心纯化的GPV作为免疫原,制备了3株抗GPV特异性单克隆抗体,依次命名为GPV-Mab-6C8、GPV-Mab-1B9、GPV-Mab-2H8。试验结果表明,3株抗GPV抗体特异性良好,并能... 为建立免疫荧光检测鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)的方法,本研究利用超速离心纯化的GPV作为免疫原,制备了3株抗GPV特异性单克隆抗体,依次命名为GPV-Mab-6C8、GPV-Mab-1B9、GPV-Mab-2H8。试验结果表明,3株抗GPV抗体特异性良好,并能够中和GPV对鹅胚成纤维细胞的感染能力。利用抗GPV单抗作为一抗,FITC标记的羊抗鼠IgG为二抗,建立了检测GPV的间接免疫荧光方法(indirect immunofluorescence assay,IFA),该方法不仅能够检测鹅胚成纤维细胞中的GPV,还能够检测发病鹅组织冰冻切片中的GPV。本研究制备的抗GPV特异性单克隆抗体和建立的检测GPV的免疫荧光方法,为今后GPV细胞活疫苗的检测评价和临床诊断提供了技术手段。 展开更多

关键词 鹅细小病毒 单克隆抗体 间接免疫荧光

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小鹅瘟琼脂扩散试验的研究 被引量：8

14

作者 王新海 《动物检疫》 1990年第2期11-13,共3页

用临床分离的小鹅瘟病毒,接种于健康的雏鹅,使其发病,取肝脾制成悬液接种于10日龄的鹅胚,收集尿囊液,制成抗原,并用尿囊液接种于健康的成年鹅,制得高免血清,其抗原与高免血清作琼脂扩散(AGID)试验,具有特异性反应,方法简便,灵敏度高,适... 用临床分离的小鹅瘟病毒,接种于健康的雏鹅,使其发病,取肝脾制成悬液接种于10日龄的鹅胚,收集尿囊液,制成抗原,并用尿囊液接种于健康的成年鹅,制得高免血清,其抗原与高免血清作琼脂扩散(AGID)试验,具有特异性反应,方法简便,灵敏度高,适应于基层的血清样品调查,疾病的定性和病毒分离鉴定试验。 小鹅瘟是由细小病毒科细小病毒属的小鹅瘟病毒感染所引起雏鹅的急性传染病。在临床上主要根据病理变化特征进行诊断。近年来,由于一些雏鹅感染后呈最急性死亡,发病年龄较大,临床无特征性的病理变化,而荧光抗体和反向间接血凝试验又不适于基层的应用,为此,笔者自1987年以来对小鹅瘟琼脂扩散试验进行了研究,现报告如下: 展开更多

关键词 鹅 小鹅瘟 琼脂扩散试验

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鹅源副粘病毒的分离与鉴定

15

作者 张忠群 孙刚 +3 位作者 赵晓春 张加勇 朱琪 李海山 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2002年第7期33-34,共2页

从鹅体中分离到一株副粘病毒 ,该病毒能使SPF鸡胚 10 0 %死亡。试验证实该病毒颗粒呈多形性 ,有囊膜 ,直径2 6 0mm左右 :ELD50 为 10 9.6/mL ;通过动物接种试验 ,发现该病毒对鹅具有 10 0 %的发病率和致死率 ,而且对鸽。

关键词 鹅源副粘病毒 分离 鉴定

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小灰鹅滑液囊支原体病诊疗报告

16

作者 龙明珠 张文文 +2 位作者 刘杰 成标 华敏 《云南畜牧兽医》 2020年第5期39-40,共2页

鹅滑液囊支原体病是由滑液囊支原体(M.synoviae)引起的,以损害跗关节,引起鹅滑液囊炎,造成鹅跛行为特征的一种慢性接触性传染病。2019年4月实施果园肉鹅规模化养殖时,发生了以跛脚症状为明显特征的散发型传染病,结合流行病学、临床症状... 鹅滑液囊支原体病是由滑液囊支原体(M.synoviae)引起的,以损害跗关节,引起鹅滑液囊炎,造成鹅跛行为特征的一种慢性接触性传染病。2019年4月实施果园肉鹅规模化养殖时,发生了以跛脚症状为明显特征的散发型传染病,结合流行病学、临床症状、病理剖检、用药情况和实验室诊断,确诊为鹅滑液囊支原体病。 展开更多

关键词 小灰鹅 跛脚 滑液囊支原体

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雏鹅曲霉菌病的诊治报告 被引量：1

17

作者 夏运仔 丁美贤 《当代畜牧》 2012年第9期16-16,共1页

曲霉菌病是禽类较为常见的疾病之一,多因饲养管理不当引起,主要特征是呼吸系统发生炎症,临床上雏鸡发生较多,雏鹅发生较少报道。建宁县某养鹅专业户2012年2月初从浙江省江山市某种鹅场购进雏鹅1200羽,从15日龄起陆续有少量雏鹅发病死亡... 曲霉菌病是禽类较为常见的疾病之一,多因饲养管理不当引起,主要特征是呼吸系统发生炎症,临床上雏鸡发生较多,雏鹅发生较少报道。建宁县某养鹅专业户2012年2月初从浙江省江山市某种鹅场购进雏鹅1200羽,从15日龄起陆续有少量雏鹅发病死亡。根据发病情况、临床症状及剖检变化,结合实验室检验。 展开更多

关键词 鹅曲霉菌病 诊治报告 临床症状 实验室检验 饲养管理 呼吸系统 发病死亡 发病情况

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