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非鸡胚源禽流感疫苗技术研究进展
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作者 程旭 陈祥 +4 位作者 高明燕 张笛 龚建森 俞燕 姜逸 《中国家禽》 北大核心 2026年第4期148-154,共7页
禽流感病毒不断变异给家禽养殖业及公共卫生安全带来巨大威胁,研发有效的禽流感疫苗至关重要。鸡胚生产禽流感疫苗对控制流感发挥了重要作用,但也存在局限性。鸡胚消耗量大,生产流程繁琐,人工成本偏高,同时鸡胚可能携带外源病原污染风... 禽流感病毒不断变异给家禽养殖业及公共卫生安全带来巨大威胁,研发有效的禽流感疫苗至关重要。鸡胚生产禽流感疫苗对控制流感发挥了重要作用,但也存在局限性。鸡胚消耗量大,生产流程繁琐,人工成本偏高,同时鸡胚可能携带外源病原污染风险。随着分子生物学和细胞培养技术的发展,基因工程疫苗和哺乳动物细胞苗在禽流感疫苗的生产中引起重视。文章综述了DNA疫苗、病毒性颗粒疫苗、mRNA疫苗、植物表达疫苗、哺乳动物细胞疫苗等技术在禽流感疫苗中的应用进展,以期为禽流感非鸡胚源疫苗的研发提供参考。 展开更多
关键词 禽流感 DNA疫苗 病毒性颗粒疫苗 mRNA疫苗 植物表达疫苗 哺乳动物细胞疫苗
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禽呼肠孤病毒流行现状及检测
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作者 张艳 冯登侦 《四川畜牧兽医》 2026年第3期61-63,共3页
1病毒特征禽呼肠孤病毒(ARV)是一种全球性感染鸟类的病毒,属于呼肠孤病毒属。ARV直径约80 nm,二十面体,无囊膜,核酸23.42 kb,双层衣壳结构。其10个双链RNA基因组片段分为大(L)、中(M)、小(S)三类,进一步细分为L1-L3、M1-M3及S1-S4。L1... 1病毒特征禽呼肠孤病毒(ARV)是一种全球性感染鸟类的病毒,属于呼肠孤病毒属。ARV直径约80 nm,二十面体,无囊膜,核酸23.42 kb,双层衣壳结构。其10个双链RNA基因组片段分为大(L)、中(M)、小(S)三类,进一步细分为L1-L3、M1-M3及S1-S4。L1基因编码的ARV结构蛋白λA对病毒复制与组装至关重要,该蛋白在多数ARV毒株中高度保守,是疫苗和抗病毒药物开发的首选靶标。 展开更多
关键词 ARV 二十面体 病毒特征 禽呼肠孤病毒
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牛传染性鼻气管炎病毒的研究进展 被引量:1
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作者 周明 孙芬 +4 位作者 张亮 陈九 杨少华 闫滨 杨宏军 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期44-50,共7页
牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)是一种包膜DNA病毒,属于疱疹病毒科γ亚群,是牛的一种重要病原体。该病毒主要引起呼吸道症状,并伴有结膜炎、乳腺炎等多系统病变,对全球养牛业造成了严重的经济损... 牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)是一种包膜DNA病毒,属于疱疹病毒科γ亚群,是牛的一种重要病原体。该病毒主要引起呼吸道症状,并伴有结膜炎、乳腺炎等多系统病变,对全球养牛业造成了严重的经济损失。目前IBRV在国内广泛流行,因尚无特效治疗药物,疫苗接种是其主要的防控措施。本文结合了近年来关于IBRV在病原学、流行病学、检测技术及防控措施方面的研究进展,旨在深入了解该病的致病机制、传播规律及防控策略,为制定更为科学合理的防控方案提供理论依据和实践参考。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 病原学 流行病学 检测技术 防控措施
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非洲猪瘟病毒pB602L蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 张向阳 矫健 +8 位作者 黄培 焦翠翠 张梦瑶 黄静波 龚志远 李海伦 李媛媛 张海丽 王化磊 《病毒学报》 北大核心 2026年第1期126-134,共9页
目的为了建立非洲猪瘟病毒(African Swine fever virus,ASFV)pB602L蛋白抗体间接ELISA检测方法。方法本研究利用大肠杆菌表达系统表达了His-pB602L重组蛋白,并以纯化的His-pB602L重组蛋白为包被抗原,以表达pB602L的重组狂犬病病毒免疫... 目的为了建立非洲猪瘟病毒(African Swine fever virus,ASFV)pB602L蛋白抗体间接ELISA检测方法。方法本研究利用大肠杆菌表达系统表达了His-pB602L重组蛋白,并以纯化的His-pB602L重组蛋白为包被抗原,以表达pB602L的重组狂犬病病毒免疫后的小鼠阳性血清和ASFV猪阳性血清为一抗,辣根过氧化物酶(HRP)标记的葡萄球菌A蛋白(SPA)作为广谱二抗,采用棋盘滴定法优化各反应条件,建立针对pB602L蛋白的间接ELISA抗体检测方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行评价。结果ASFV pB602L蛋白间接ELISA抗体检测方法的最优反应条件为:抗原包被浓度为4μg/mL,4℃包被16 h~18 h,5%脱脂奶粉37℃封闭0.5 h,待检血清孵育0.5 h,SPA-HRP 1:10000倍稀释后37℃孵育0.5 h。该方法仅对ASFV阳性血清检测结果为阳性,与猪瘟病毒、猪蓝耳病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪乙型脑炎病毒和猪圆环病毒2型阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性;该方法检测稀释度为1∶6400的猪ASFV临床阳性血清时仍呈现阳性,检测分别稀释3200倍和1600倍的ASFVⅠ型和Ⅱ型阳性血清均为阳性;批内重复和批间重复变异系数均小于10%。结论本研究建立的ASFV pB602L蛋白间接ELISA抗体检测方法不仅可用于ASF的临床诊断和流行病学调查,亦能够为ASF疫苗研发过程中免疫动物的特异性抗体评价提供技术支持。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 pB602L蛋白 pB602L抗体 间接ELISA
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灭活鸭肠炎病毒UL31基因定性标准样品研制及初步试用
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作者 姜怀玉 张媛 +11 位作者 史莉圆 穆颖 张晶晶 周梦棋 顾小雪 邵红霞 秦爱建 叶家美 王传彬 李琦 刘玉良 格日勒图 《中国家禽》 北大核心 2026年第4期61-68,共8页
为研制灭活鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV)UL31基因定性标准样品,研究以DEV VAC株为原料,接种SPF鸭胚,经病毒鉴定、灭活处理以及冷冻干燥等技术流程,采用荧光定量PCR(qPCR)方法对所制备的标准样品进行均匀性检验、稳定性监测和评... 为研制灭活鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV)UL31基因定性标准样品,研究以DEV VAC株为原料,接种SPF鸭胚,经病毒鉴定、灭活处理以及冷冻干燥等技术流程,采用荧光定量PCR(qPCR)方法对所制备的标准样品进行均匀性检验、稳定性监测和评估,并委托不同单位进行协作定值和试用。结果显示:该标准样品纯净、均匀,无外源病毒污染;稳定性良好,在4℃、25℃、37℃环境中可至少稳定保存14 d、7 d、5 d,在-20℃环境中可至少稳定保存12个月,且冻融10次后仍稳定;9家单位协作定值和3家试用结果均显示为鸭肠炎病毒UL31基因核酸阳性。研究表明,研制的灭活鸭肠炎病毒UL31基因定性标准样品可作为DEV核酸检测阳性质控品,用于DEV核酸检测质量控制、检测能力比对验证以及试剂盒检测效果评价等工作。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 UL31基因 标准样品 核酸检测 荧光定量PCR 质量控制
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基于湖北省传染病监测预警与应急指挥平台的呼吸道传染病和症候群监测分析
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作者 刘红慧 李诺 +3 位作者 石萌 郑立国 朱可 童叶青 《中华疾病控制杂志》 北大核心 2026年第2期243-248,共6页
目的 对湖北省传染病监测预警与应急指挥信息平台(简称湖北省统筹平台)呼吸系统传染病及症候群病例开展流行病学分析和数据质量评估,为完善传染病防控策略提供科学依据。方法 采用描述性研究分析湖北省统筹平台2023年1月1日―2025年3月1... 目的 对湖北省传染病监测预警与应急指挥信息平台(简称湖北省统筹平台)呼吸系统传染病及症候群病例开展流行病学分析和数据质量评估,为完善传染病防控策略提供科学依据。方法 采用描述性研究分析湖北省统筹平台2023年1月1日―2025年3月13日流行性感冒(简称流感)、呼吸道合胞病毒感染等传染病,以及发热呼吸道症候群、发热伴出疹症候群等五大症候群病例就诊、住院病例流行特征,并基于Pearson相关分析对流感报告卡病例和就诊、住院量在时间、空间分布上的一致性开展评价。结果 湖北省统筹平台可实现对呼吸道合胞病毒等非法定报告传染病、症候群等监测分析。流感报告卡病例与湖北省平台监测病例在时间分布上高度一致,Pearson相关系数为0.86(95%CI:0.85~0.86,P<0.001)。时间相关性方面,超70%的月度相关性为强相关及以上;空间相关性方面,除黄冈市(r=0.26, 95%CI:0.19~0.33,P<0.001)、荆门市(r=0.46, 95%CI:0.40~0.52,P<0.001)外,其他市州均为强相关及以上。结论 湖北省统筹平台在数据质量、监测模式、监测对象上呈现出一定优势,能有效实现对非法定传染病和症候群的常态化实时监测评估。 展开更多
关键词 呼吸道传染病 症候群 监测分析 相关系数
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猫源细小病毒上海株的分离鉴定及VP2基因遗传进化分析
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作者 唐聪圣 刘健 +9 位作者 常晓静 夏炉明 张忠海 白艺兰 范玉凤 朱亭仪 桂亚萍 夏琦琦 王建 赵洪进 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第4期2071-2081,共11页
【目的】了解上海地区猫源细小病毒VP2基因遗传进化情况,丰富猫源细小病毒的流行病学,为其新型疫苗研究提供技术支持。【方法】对采自上海地区的14份疑似细小病毒感染的猫粪便拭子样品进行病毒分离,采用PCR扩增、间接免疫荧光试验(IFA)... 【目的】了解上海地区猫源细小病毒VP2基因遗传进化情况,丰富猫源细小病毒的流行病学,为其新型疫苗研究提供技术支持。【方法】对采自上海地区的14份疑似细小病毒感染的猫粪便拭子样品进行病毒分离,采用PCR扩增、间接免疫荧光试验(IFA)、病毒粒子形态学观察等方法对分离株进行鉴定,并对分离株VP2基因进行测序和遗传进化分析,进一步对VP2蛋白进行生物信息学分析。【结果】从14份样品中分离到4株病毒,PCR扩增序列与犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)CH-AH-D5、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)cat-2、FPV HN1806和FPV BFPV-1株VP2基因部分序列相似性达100%,分别命名为CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a、FPV/SH/CHN/01/2022、FPV/SH/CHN/02/2022和FPV/SH/CHN/03/2022。其中1株鉴定为CPV New CPV-2a亚型,另外3株鉴定为FPV。相似性比对显示,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株与FPV疫苗株CU-4、Purevax核苷酸序列相似性分别为98.2%和98.3%;相比标准株,分离株14个关键氨基酸位点均未发生变化,但是相比FPV疫苗株,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株VP2蛋白中有12个关键氨基酸位点发生突变。遗传进化分析显示,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株属于CPV分支,与CPV中国株06/09、CPV-G15同属一个亚分支;3株FPV分离株均属FPV分支,但是处于不同亚分支。相比FPV疫苗株,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株的抗原决定簇存在2个氨基酸位点突变,分别位于第93(K-N)和300位(A-G)氨基酸处;相比CPV疫苗株,CPV/SH/CHN/01/2022/New CPV-2a株抗原决定簇存在1个氨基酸位点差异,位于第300位氨基酸处(A-G);3株FPV分离株与FPV疫苗株抗原决定簇7个位点均保持一致。【结论】本研究从上海地区分离获得4株猫源细小病毒,其中1株为CPV New CPV-2a亚型,3株为FPV。研究结果为CPV New CPV-2a亚型感染猫提供了佐证,丰富了猫源细小病毒的流行病学,也为其新型疫苗研究提供了参考资料。 展开更多
关键词 细小病毒 分离鉴定 VP2基因 遗传进化
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荧光定量PCR检测珍珠鸡Tva与ALV-A gp85基因方法的建立及应用
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作者 宁宇航 李喜月 +7 位作者 王扬扬 马晨曦 李鑫鹏 荣晴 何雷 余祖华 丁轲 陈建 《中国家禽》 北大核心 2026年第1期70-78,共9页
研究旨在探讨体内水平下珍珠鸡各组织器官中A亚群禽白血病病毒(ALV-A)组织载量与维生素_(B12)(V_(B12))的含量、Tva基因转录水平之间的关系。试验通过建立检测珍珠鸡ALV-A gp85和Tva基因的荧光定量PCR方法,定量感染ALV-A的珍珠鸡不同组... 研究旨在探讨体内水平下珍珠鸡各组织器官中A亚群禽白血病病毒(ALV-A)组织载量与维生素_(B12)(V_(B12))的含量、Tva基因转录水平之间的关系。试验通过建立检测珍珠鸡ALV-A gp85和Tva基因的荧光定量PCR方法,定量感染ALV-A的珍珠鸡不同组织中ALV-A gp85基因和Tva基因表达水平,并通过ELISA测定珍珠鸡组织中V_(B12)浓度,分析ALV-A gp85表达水平与V_(B12)组织含量和Tva基因表达水平之间的关系。结果显示:研究建立的珍珠鸡Tva基因荧光定量PCR方法灵敏度较常规PCR提升1个数量级(10倍),ALV-A gp85基因检测灵敏度提高2个数量级(100倍),仅靶基因出现特异性扩增且批内及批间变异系数均小于2%,血浆样本ALV-A阳性检出率明显高于PCR和ELISA方法,具有良好的灵敏度、特异性和稳定性。皮尔逊相关性分析显示,珍珠鸡组织器官中V_(B12)浓度与ALV-A gp85转录水平均呈负相关,而ALV-A gp85与Tva基因转录水平整体上符合正相关关系,推测V_(B12)可能通过占据Tva受体干扰ALV-A感染宿主细胞。研究表明,试验成功建立一种定量检测珍珠鸡ALV-A gp85基因和Tva基因的方法,并确定珍珠鸡中V_(B12)组织含量与ALV-A组织载量以及Tva基因表达水平之间的关系,为禽白血病的防控奠定基础。 展开更多
关键词 A亚群禽白血病病毒 TVA gp85 QRT-PCR 珍珠鸡 维生素B_(12)
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鸡滑液囊支原体的分离鉴定及全基因组特征分析
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作者 李琪 方焕新 +5 位作者 胡俊 温家明 顾嘉运 王占新 覃健萍 蔺文成 《中国家禽》 北大核心 2026年第1期79-88,共10页
研究旨在解析鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)全基因组特征及其功能。试验对广东地区疑似感染MS的鸡进行病原分离,对病原进行致病性试验和药物敏感性试验,并进一步解析其基因组特征。结果显示:成功分离一株MS,命名为H12株;肌肉... 研究旨在解析鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)全基因组特征及其功能。试验对广东地区疑似感染MS的鸡进行病原分离,对病原进行致病性试验和药物敏感性试验,并进一步解析其基因组特征。结果显示:成功分离一株MS,命名为H12株;肌肉攻毒10~8 CCU/mL H12株能引起30日龄SPF鸡跛行、肿腿的临床症状;H12株对截短侧耳素类药物高度敏感,但对四环素类耐药性强;H12株基因组存在多个毒力因子,有助于MS感染宿主,其携带CRISPR-Cas系统及高保守DNA修复基因(如recA),表明其对不同环境具有适应潜力;在KEGG、COG、GO数据库分别注释到381、1 410、48个基因;多位点序列分型(MLST)为ST34,与我国主要流行株遗传谱系一致。研究表明,分离株H12属于国内主要流行的ST34型,携带CRISPR-Cas系统、多个毒力因子(adh、ef-tu、pdhb等)及耐药基因(parC、gyrB),具备较强环境适应性与致病性,并对四环素类耐药。 展开更多
关键词 鸡滑液囊支原体 全基因组测序 微量稀释法 MLST分型 毒力因子
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黑龙江省猪流行性腹泻病毒流行毒株分离鉴定与遗传进化分析
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作者 张欣欣 张岳 +6 位作者 崔安 李金儒 张芸菁 何丽霞 杨桂君 任玉东 李广兴 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期378-389,共12页
【目的】通过对黑龙江省猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株进行分离鉴定,基于PEDV分离株S、ORF3基因序列进行遗传进化分析,丰富现有PEDV材料,为猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的防治及疫苗研... 【目的】通过对黑龙江省猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株进行分离鉴定,基于PEDV分离株S、ORF3基因序列进行遗传进化分析,丰富现有PEDV材料,为猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的防治及疫苗研发提供参考依据。【方法】采集养猪场疑似猪流行性腹泻病料,利用Vero-E6细胞进行适应性培养获得病毒,并通过RT-PCR和间接免疫荧光试验(IFA)对毒株进行分离鉴定。通过PCR分别扩增PEDV分离毒株的S1、S2和ORF3基因,构建重组质粒并测序鉴定,获得PEDV分离株的S、ORF3基因序列。将分离株与26株参考毒株的S和ORF3基因序列进行核苷酸序列相似性比对和遗传进化分析,确定分离毒株的所属亚群。【结果】在Vero-E6细胞上培养分离的PEDV毒株,感染细胞出现变形圆缩、折光性降低,细胞发生融合,后期细胞脱落出现空斑等典型细胞病变;RT-PCR和IFA检测显示,扩增均出现片段大小约600 bp的特异性条带,分离株感染细胞后均可与PEDV N蛋白单克隆抗体发生特异性反应,表明分离的3株病毒株均为PEDV,分别命名为HLJ、HLJ2020和HLJ2021株。成功构建PEDV各分离株的S1、S2和ORF3基因重组质粒并测序获得相应基因序列。核苷酸序列相似性比对与遗传进化树分析结果显示,PEDV HLJ与HLJ2020株为GⅠb亚群毒株,PEDV HLJ2021株归入GⅡc亚群。【结论】本研究从黑龙江地区腹泻猪小肠组织中成功分离获得3株PEDV流行毒株,其中分离毒株PEDV HLJ与PEDV HLJ2020属于GⅠb亚群,PEDV HLJ2021株属于GⅡc亚群。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 分离鉴定 S基因 ORF3基因 遗传进化分析
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扬州鹅不同群体感染鹅星状病毒的表型比较与分析
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作者 单晓雨 王铭丰 +4 位作者 杜玉艳 江慧 胡序明 陈国宏 徐琪 《中国家禽》 北大核心 2026年第3期79-84,共6页
研究主要探讨星状病毒感染对扬州鹅不同群体的表型变化及抗性差异,以期为扬州鹅抗性品系选育提供理论依据。研究以扬州鹅普通群体和抗性群体为研究对象,建立雏鹅痛风模型。攻毒后,系统记录并分析感染水平、生长受阻情况、免疫器官(脾脏... 研究主要探讨星状病毒感染对扬州鹅不同群体的表型变化及抗性差异,以期为扬州鹅抗性品系选育提供理论依据。研究以扬州鹅普通群体和抗性群体为研究对象,建立雏鹅痛风模型。攻毒后,系统记录并分析感染水平、生长受阻情况、免疫器官(脾脏、法氏囊)变化、病理损伤特征及血清生化指标。结果显示,与普通群体相比,抗性群体感染后生长受阻率降低,免疫器官形态变化轻微,病理损伤程度减轻,血清生化指标异常波动幅度小。研究结果表明,扬州鹅抗性群体对星状病毒具有较强的抵抗力,感染后不表现明显的病理变化。 展开更多
关键词 扬州鹅 星状病毒 免疫器官 生长受阻
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重组牛冠状病毒N蛋白在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与鉴定
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作者 郝良玉 郭衍冰 +8 位作者 王楠 孙兴忠 项钰 王改丽 崔鹤馨 姜乐凡 张天宇 宋建臣 曹利利 《中国草食动物科学》 北大核心 2026年第1期65-71,共7页
为更好利用昆虫杆状病毒表达系统对牛冠状病毒(BcoV)的主要结构蛋白N蛋白进行表达,本研究采用BCoV-N基因为目标设计特异性引物进行PCR扩增,通过无缝克隆技术将其插入昆虫杆状病毒系统转移载体pFastBacHT B,并构建pFastBacHT B-BCoV-N重... 为更好利用昆虫杆状病毒表达系统对牛冠状病毒(BcoV)的主要结构蛋白N蛋白进行表达,本研究采用BCoV-N基因为目标设计特异性引物进行PCR扩增,通过无缝克隆技术将其插入昆虫杆状病毒系统转移载体pFastBacHT B,并构建pFastBacHT B-BCoV-N重组质粒。随即转化至DH10Bac大肠杆菌,经过蓝白斑筛选后提取阳性重组杆粒Bacmid-BCoV-N,转染至Sf9昆虫细胞产生杆状病毒并进行传代。结果表明,经双酶切、PCR验证,重组质粒与重组杆粒均构建成功,重组杆粒Bacmid-BCoV-N转染Sf9昆虫细胞并连续盲传5代后获得重组杆状病毒Bacmid-BCoV-N,成功表达纯化出BCoV-N蛋白,经SDS-PAGE及Western blot鉴定,其分子量大小约为55 kDa,具有良好的特异性。将50μg重组蛋白与弗氏完全佐剂充分混匀乳化后免疫小鼠,间接ELISA试验结果显示免疫小鼠产生了特异性抗体。综上所述,本研究构建的昆虫杆状病毒表达系统能够高水平地表达外源基因,可以满足后续建立免疫学抗体诊断检测技术的需要。 展开更多
关键词 牛冠状病毒(BCoV) 核衣壳蛋白(N蛋白) 昆虫杆状病毒表达系统
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DHAV-1、DAstV-1、DHAV-3和APMV-1四重PCR检测方法的建立及应用
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作者 李海名 吴晓燕 +3 位作者 康华裕 王旭 王一涵 张彦龙 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期94-99,共6页
为了建立一种能同时检测鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)、鸭星状病毒1型(DAstV-1)、鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)和禽副黏病毒1型(APMV-1)的方法,试验根据GenBank中公布的DHAV-13A基因、DAstV-11a基因、DHAV-33a3b基因和APMV-1 F基因序列分别设计4对... 为了建立一种能同时检测鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)、鸭星状病毒1型(DAstV-1)、鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)和禽副黏病毒1型(APMV-1)的方法,试验根据GenBank中公布的DHAV-13A基因、DAstV-11a基因、DHAV-33a3b基因和APMV-1 F基因序列分别设计4对特异性引物,通过优化反应条件及特异性、敏感性和重复性试验建立了四重PCR检测方法,并采用该方法对96份疑似病毒感染的鸭病料样本进行检测。结果表明:DHAV-1、DHAV-3、DAstV-1和APMV-1四重RT-PCR检测方法的最优退火温度和引物浓度分别为56℃、0.8μmol/L。该方法能同时扩增出大小为195 bp(DHAV-13A基因)、289 bp(DAstV-11a基因)、462 bp(DHAV-33a3b基因)、726 bp(APMV-1基因)的特异性片段,而与鸭瘟病毒(DPV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭圆环病毒(DuCV)和鸭甲肝病毒2型(DHAV-2)无交叉反应;对DHAV-1、DAstV-1、DHAV-3和APMV-1的最低检测限分别为1.111×10~4 copies/μL、3.078×10~2 copies/μL、4.938×10~3 copies/μL、3.456×10~2 copies/μL;批间重复试验和批内重复试验的3个平行样本的结果均一致。采用该方法对96份临床样本的检测结果与参考方法的符合率为100%。说明本研究建立的针对DHAV-1、DHAV-3、DAstV-1和APMV-1四重PCR检测方法特异性强、敏感性较高、重复性好,在临床样本检测中展现出良好的应用效果。 展开更多
关键词 鸭甲肝病毒 鸭星状病毒 禽副黏病毒1型 混合感染 多重PCR检测方法 检测方法建立
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种猪场猪繁殖与呼吸综合征快速稳定和病毒清除的案例分析
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作者 蒋大良 沙垣坤 +3 位作者 魏效祺 李润成 颜运秋 龚自冶 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第1期132-140,共9页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害养猪业健康发展的主要疾病之一。针对该病,多数猪场依赖疫苗免疫和抗生素辅助治疗,但难以阻断猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪场的循环感染,猪体内病毒清除缓慢、净化困难。2024年2月,笔者针对某... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害养猪业健康发展的主要疾病之一。针对该病,多数猪场依赖疫苗免疫和抗生素辅助治疗,但难以阻断猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪场的循环感染,猪体内病毒清除缓慢、净化困难。2024年2月,笔者针对某母猪存栏2400头、类PRRSV NADC30毒株阳性不稳定的种猪场,采用《科赛安4招8步PRRSV净化方案》,于饲料中定期添加科赛安1号(天然产物复方制剂),结合病原和抗体监测、合理淘汰、强化生物安全、调整生产管理等综合防控方法进行PRRS防控和净化。结果显示,在方案实施2个月后,猪群实现了PRRSV核酸检测阴性;7个月后,基础母猪群PRRSV N蛋白抗体平均S/P值从1.09降至0.29,抗体阳性率从96.0%降至33.3%;4个月后引入497头PRRSV核酸和N蛋白抗体双阴性后备种猪,入群9个月一直维持PRRSV核酸和N蛋白抗体双阴性。与2023年相比,2024年该猪场各项生产指标得到了明显改善,年母猪流产数减少228窝(月均19窝),年保育猪淘汰率和死亡率分别降低10.3%和4.5%,后备种猪利用率提高16.9%。该案例证明,《科赛安4招8步PRRSV净化方案》可以促进PRRSV阳性不稳定猪群更快实现病情稳定和病毒清除,促进N蛋白抗体转阴,显著改善PRRSV阳性不稳定猪场的生产成绩,为规模猪场PRRS的防控和净化提供了参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 稳定 净化 维持阴性
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海南省禽流感病毒的流行与遗传演化特征
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作者 蒋权归 曹婕 +6 位作者 李庆霞 李玉冬 束思成 王林林 陈雪 蒲娟 王金秀 《中国家禽》 北大核心 2026年第4期81-89,共9页
为了解海南地区禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的流行与演化特征,研究整理分析截至2025年7月12日收录于GISAID和NCBI的分离自海南的AIV序列,通过系统发育与关键突变分析评估AIV演化动态及哺乳动物适应性。结果显示:共纳入90个AI... 为了解海南地区禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的流行与演化特征,研究整理分析截至2025年7月12日收录于GISAID和NCBI的分离自海南的AIV序列,通过系统发育与关键突变分析评估AIV演化动态及哺乳动物适应性。结果显示:共纳入90个AIV毒株,主要分离于2011—2013年,涵盖H9N2、H5N6、H6N6、H1N2和H1N1亚型,其中H9N2亚型占优势,宿主以鸡为主,其次为鸭;各亚型均属于欧亚谱系,多数毒株与华南禽源毒株聚为近缘分支,提示跨省活禽流通或候鸟迁徙可能为主要输入来源;部分H9N2亚型毒株形成本地特有分支,提示其可能已在本地建立传播链;全基因组适应性突变分析发现部分毒株携带HA-226L、PB2-598T和PB1-621R等与哺乳动物适应性相关突变。综上,海南地区AIV呈现“外源输入与本地演化”并存的传播格局,部分毒株可能具备跨种传播潜力,须加强监测与防控。 展开更多
关键词 海南省 禽流感 流行现状 遗传演化
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3种方法对犬猫狂犬病疫苗免疫抗体检测的比较
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作者 杨国强 钟亮宁 +8 位作者 陈燕君 张险朋 罗霖霜 杜艺彤 邝锦霞 何铭诗 何德胜 吕宗吉 潘杰 《中国动物检疫》 2026年第3期108-112,共5页
为评价商品化狂犬病疫苗免疫抗体检测试剂的性能,评估狂犬病疫苗免疫效果,以荧光抗体病毒中和试验(FAVN)为标准,通过检测20份犬参比血清狂犬病免疫抗体,从酶联免疫吸附试验(ELISA)商品化试剂盒A(批号307E、806F)和B以及胶体金试纸条C和D... 为评价商品化狂犬病疫苗免疫抗体检测试剂的性能,评估狂犬病疫苗免疫效果,以荧光抗体病毒中和试验(FAVN)为标准,通过检测20份犬参比血清狂犬病免疫抗体,从酶联免疫吸附试验(ELISA)商品化试剂盒A(批号307E、806F)和B以及胶体金试纸条C和D中,筛选出检测效果较好的ELISA试剂盒A批号806F和胶体金试纸条C,与FAVN方法联用,检测219份从东莞市随机采集的狂犬病疫苗免疫犬猫血清。结果显示:3种方法的检测结果差异显著(P<0.01),FAVN法检出阳性率最高,试纸条C最低,但其特异性较高;3种方法在弱阳性样品的检测中差异更为显著,但在阴性或强阳性样品检测中符合率较高;3种方法检测的犬血清抗体阳性率均显著高于猫(P<0.01),疫苗加强免疫(免疫次数≥2)可显著提高血清中和抗体效价和抗体阳性率。本研究对犬猫狂犬病疫苗免疫抗体检测方法的筛选以及狂犬病疫苗免疫应用提供了参考。 展开更多
关键词 狂犬病 免疫抗体 检测方法比较 荧光抗体病毒中和试验 酶联免疫吸附试验 胶体金试纸条
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E种牛肠道病毒VP1蛋白的截短表达及抗体间接ELISA检测方法的建立
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作者 崔平 刘澜 +3 位作者 李本科 白耀国 李玉坤 管宇 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第2期40-48,共9页
为了开展E种牛肠道病毒(BEV-E)的流行病学调查和抗体筛查,本试验采用原核表达技术对BEV-E外衣壳蛋白VP1进行体外截短表达,采用His-Tag蛋白纯化柱对VP1重组蛋白进行纯化,采用蛋白免疫印迹(WB)方法对重组蛋白进行鉴定。以纯化的VP1重组蛋... 为了开展E种牛肠道病毒(BEV-E)的流行病学调查和抗体筛查,本试验采用原核表达技术对BEV-E外衣壳蛋白VP1进行体外截短表达,采用His-Tag蛋白纯化柱对VP1重组蛋白进行纯化,采用蛋白免疫印迹(WB)方法对重组蛋白进行鉴定。以纯化的VP1重组蛋白作为包被抗原,对反应条件进行优化和确定临界值,建立了检测BEV-E抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,并进行特异性、灵敏性、重复性、符合率试验和临床样品检测。结果显示,成功表达VP1重组蛋白;间接ELISA检测方法的最佳抗原工作浓度为15.0μg/mL,最佳一抗稀释倍数为1∶80,最佳酶标二抗稀释倍数为1∶3000,最佳封闭液为10%马血清,最佳一抗、酶标二抗、封闭液工作时间分别为30、30、60 min;临界值为0.386;与牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛冠状病毒、牛轮状病毒、O型口蹄疫病毒、A型口蹄疫病毒、产肠毒素性大肠杆菌阳性血清均无交叉反应,特异性良好;BEV-E阳性血清1∶25600稀释时仍可检测出阳性,灵敏性较高;批内和批间变异系数均小于10%,重复性良好;该方法与间接免疫荧光检测方法的符合率为92.5%;临床样品检测结果显示,BEV-E抗体平均阳性率为7.88%。结果表明,本试验建立的BEV-E VP1抗体间接ELISA检测方法为开展BEV-E临床诊断和流行病学调查提供了试验依据。 展开更多
关键词 E种牛肠道病毒(BEV-E) VP1蛋白 截短表达 抗体检测 间接ELISA
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一例猫传染性腹膜炎的分子病理学诊断
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作者 蒋凯 赵飞宇 +2 位作者 赵鹏宇 贺显晶 郭东华 《黑龙江八一农垦大学学报》 2026年第1期30-35,共6页
9月龄三花猫,迅速消瘦,突然死亡。为确定该病死猫的死亡原因,对病死猫进行病理剖检并对心、肝、脾、肺、肾进行H&E染色,免疫组织化学技术和PCR诊断检测心、肝、脾、肺、肾、腹水中的猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)信号。病理剖检显示,病... 9月龄三花猫,迅速消瘦,突然死亡。为确定该病死猫的死亡原因,对病死猫进行病理剖检并对心、肝、脾、肺、肾进行H&E染色,免疫组织化学技术和PCR诊断检测心、肝、脾、肺、肾、腹水中的猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)信号。病理剖检显示,病死猫腹腔内有澄清淡黄的腹水,肝和肾表面可见多灶性、灰白色或暗红色凸起,心脏横径增宽,肺和脾无明显病理变化;H&E结果显示,肝和肾组织内可见多灶性、界限清晰的坏死性肉芽肿,肺脏各级静脉不同程度淤血,其他组织无明显病理变化;免疫组织化学结果显示,肝和肾坏死灶周围有明显的FIPV阳性信号;PCR结果显示,肝、肾和腹水中检测到FIPV ORF 6b基因,特异性条带片段大小为506 bp。通过以上结果综合分析,最终诊断本病例为猫传染性腹膜炎(FIP),此研究结果对猫传染性腹膜炎的诊断与研究提供参考价值。 展开更多
关键词 猫传染性腹膜炎 病理学诊断 肉芽肿 免疫组织化学
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牛病毒性腹泻病毒流行病学及防治研究进展
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作者 刘倩芸 安乐乐 +3 位作者 蓝秋菊 张胜卫 张丽娟 刘俊林 《动物医学进展》 北大核心 2026年第2期108-113,共6页
牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)广泛流行于全球牛群,是引起牛病毒性腹泻的重要病原体,对养牛业造成了巨大的经济损失。由于BVDV的基因组具有高度变异的遗传特性,随着其不断的流行与变异,出现了多种不同的基因亚型... 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)广泛流行于全球牛群,是引起牛病毒性腹泻的重要病原体,对养牛业造成了巨大的经济损失。由于BVDV的基因组具有高度变异的遗传特性,随着其不断的流行与变异,出现了多种不同的基因亚型,且不同的基因亚型对易感动物的致病力、临床症状、免疫反应及传播途径等都具有多变性,新出现的基因亚型为BVDV的研究与防治带来了巨大的挑战。因此,研究BVDV全基因型的快捷检测方法,提高BVDV疫苗的高效广谱性和及时控制BVDV的流行具有重要意义。本文从BVDV的检测方法、BVDV在国内的流行情况以及BVDV疫苗等方面,对BVDV近年的流行及防控研究进展进行综述,为BVDV的防治手段提供参考。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 流行情况 检测方法 疫苗
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PRRSV编码蛋白在感染中的作用机制研究进展
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作者 王宇 苑红杰 +2 位作者 连丽粉 侯衍猛 李宝全 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期1-12,共12页
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)主要是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)所引起的,该病症在母猪群体中,主要表现为流产、产出死胎、弱... 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)主要是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)所引起的,该病症在母猪群体中,主要表现为流产、产出死胎、弱仔以及木乃伊胎;在仔猪群体里,则以呼吸功能出现障碍以及罹患败血症为显著特征。PRRSV有着较快的传播速度和较强的传染性,这使得PRRS在规模化养猪场中成为一种常见的接触性传染病。PRRSV的流行对养猪业造成严重的经济影响。科学防治PRRS需要对病原生物学,特别是病原感染机制的知识。因此,本文从PRRSV的基因组结构,各个病毒编码蛋白的功能、特别是病毒蛋白在感染中的作用机制等方面进行综述,旨在为PRRSV的研究以及制定相应的防控策略提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 结构蛋白 非结构蛋白 感染机制
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