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C1QBP抑制猪Ⅱ型圆环病毒衣壳蛋白入核抑制PCV2增殖研究
1
作者 苏小艳 丁梦婷 +1 位作者 吕长杰 王兴龙 《黑龙江科学》 2026年第2期68-71,共4页
Ⅱ通过酵母双杂交实验筛选出补体1q结合蛋白(C1QBP)与猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)衣壳蛋白(Cap)互作。为探讨C1QBP与衣壳蛋白互作的生物学意义,将C1QBP与衣壳蛋白分别克隆入真核表达载体,通过免疫共沉淀和激光共聚焦验证两者互作及互作后的生... Ⅱ通过酵母双杂交实验筛选出补体1q结合蛋白(C1QBP)与猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)衣壳蛋白(Cap)互作。为探讨C1QBP与衣壳蛋白互作的生物学意义,将C1QBP与衣壳蛋白分别克隆入真核表达载体,通过免疫共沉淀和激光共聚焦验证两者互作及互作后的生物学效应。结果表明,C1QBP与衣壳蛋白存在pull-down现象并呈现共定位。过表达C1QBP能够改变衣壳蛋白的细胞内定位,抑制PCV2增殖。这些结果表明,C1QBP通过与衣壳蛋白互作阻滞衣壳蛋白进入细胞核,从而抑制PCV2增殖。该发现为抗PCV2的研究提供了新的靶点和研究思路。 展开更多
关键词 猪Ⅱ型圆环病毒 衣壳蛋白 C1QBP 入核
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鹅星状病毒通用型TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：1
2
作者 陈立功 穆英丽 +5 位作者 张诚 潘保革 范乐乐 魏忠华 王学静 刘聚祥 《中国家禽》 北大核心 2025年第2期53-59,共7页
为建立用于鹅星状病毒1(GAstV 1)和鹅星状病毒2(GAstV 2)感染快速检测的实时荧光定量RT-PCR方法,试验根据部分GAstV ORF2基因和部分3′非编码区序列设计合成特异性引物和探针,采用矩阵法获得引物和探针的最优浓度,在优化退火温度的基础... 为建立用于鹅星状病毒1(GAstV 1)和鹅星状病毒2(GAstV 2)感染快速检测的实时荧光定量RT-PCR方法,试验根据部分GAstV ORF2基因和部分3′非编码区序列设计合成特异性引物和探针,采用矩阵法获得引物和探针的最优浓度,在优化退火温度的基础上,分别建立扩增GAstV 1和GAstV 2的标准曲线,进一步验证该方法的特异性、敏感性和重复性,建立的方法用于临床样品的检测,并与文献报道的常规RT-PCR方法进行比较。结果显示:优化后的反应体系中最优上、下游引物浓度均为0.40(或0.50)μmol/L,探针浓度均为0.50μmol/L,扩增线性范围分别为3.26×10^(3)~3.26×10^(8)拷贝/μL和7.09×10^(3)~7.09×10^(8)拷贝/μL,相关系数均为0.998;该方法可特异性检出两种GAstV,但对新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、鸭坦布苏病毒、新型鸭呼肠孤病毒、鹅细小病毒和血清4型禽腺病毒6种鹅病相关病毒的核酸均无扩增信号;其检测限分别为3.26×10^(2)拷贝/μL和7.09×10^(1)拷贝/μL;组内变异系数和组间变异系数均低于3%。建立的实时荧光定量RT-PCR方法对临床样品的检测结果显示,GAstV阳性率为90.57%(96/106);而文献报道的常规RT-PCR方法对GAstV 1和GAstV 2的混合阳性率为62.26%。研究表明,建立的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法为同时检测GAstV 1和GAstV 2提供了快速、敏感、特异且能满足临床样本需求的检测方法。 展开更多
关键词 鹅星状病毒 荧光定量RT-PCR TAQMAN探针
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CpG-ODN纳米剂增强黏膜免疫及其对禽致病性大肠杆菌的保护效力
3
作者 王艳萍 王文秀 +8 位作者 徐倩倩 王艳 莫玲 苗立中 董林 杨丽梅 郭时金 付石军 田风荣 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期11-18,共8页
为了开发增强黏膜免疫的CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)纳米剂,为减抗和替抗提供支撑。本试验采用多碳纳米管(MWCNT)制备CpG-ODN纳米剂,经肺内途径免疫新生海兰W-36白壳蛋鸡,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ... 为了开发增强黏膜免疫的CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)纳米剂,为减抗和替抗提供支撑。本试验采用多碳纳米管(MWCNT)制备CpG-ODN纳米剂,经肺内途径免疫新生海兰W-36白壳蛋鸡,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)和肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量,荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素18(IL-18)和Toll样受体21(TLR21)的mRNA转录水平。通过生存率、临床赋值评分和细菌接种评分评价CpG-ODN纳米剂对禽致病性大肠杆菌O2的攻毒保护效力。结果显示,制备的CpG-ODN纳米剂平均粒径为(72.30±9.54)nm,形态均一。与对照组比较,CpG-ODN组鸡只血清中IL-2和IFN-γ在12和24 h极显著升高(P<0.01);IL-1β、IL-6、IL-18、IL-4和TLR21mRNA转录水平在12和24 h显著增加(P<0.05或P<0.01);IL-10 mRNA转录水平在6 h极显著增加(P<0.01),12 h显著增加(P<0.05);肠道sIgA在12和24 h显著升高(P<0.05),在48 h极显著升高(P<0.01)。与攻毒对照组相比,CpG-ODN组和抗生素组鸡只生存率均显著升高(P<0.05),临床赋值评分和细菌接种评分均显著降低(P<0.05)。结果表明,肺内给予CpG-ODN纳米剂可激活黏膜免疫反应,有效保护禽致病性大肠杆菌O2对试验鸡只的攻击,明显减轻临床症状并降低死亡率,显示良好的减抗和替抗前景。 展开更多
关键词 CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN) 纳米剂 黏膜免疫 禽大肠杆菌 攻毒保护
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H9N2亚型禽流感病毒双重TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用
4
作者 刘莉 张贺楠 +4 位作者 莫一群 徐亚亚 金丁丁 齐岩 胡增垒 《中国家禽》 北大核心 2025年第11期154-160,共7页
为建立一种快速、灵敏且特异的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的双重荧光定量RT-PCR检测方法,试验根据H9N2 AIV的HA基因和NA基因保守区域设计特异性引物及TaqMan探针,通过优化反应体系及条件,建立H9N2亚型AIV的双重荧光定量RT-PCR检测方法,进... 为建立一种快速、灵敏且特异的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的双重荧光定量RT-PCR检测方法,试验根据H9N2 AIV的HA基因和NA基因保守区域设计特异性引物及TaqMan探针,通过优化反应体系及条件,建立H9N2亚型AIV的双重荧光定量RT-PCR检测方法,进一步对该方法的灵敏度、特异性、重复性进行评估,并将建立的方法用于临床样品的检测,与H9亚型AIV荧光RT-PCR检测试剂盒进行比较。结果显示:该方法与其他亚型AIV、新城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、禽白血病病毒、传染性法氏囊病病毒和传染性支气管炎病毒无交叉反应,检测限为0.1 copies/μL,批内和批间变异系数均小于5%,临床样本检测阳性率(24.3%)高于H9亚型AIV荧光RT-PCR检测试剂盒(18.9%)。研究表明,建立的H9N2 AIV双重TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法特异性强,敏感性较高,能够应用于H9N2 AIV的快速检测。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 TAQMAN探针 荧光定量RT-PCR HA基因 NA基因
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国内牛传染性鼻气管炎的核酸检测调查统计分析 被引量：1
5
作者 徐国栋 杨丹 +1 位作者 骆维 张颖 《中国兽医卫生》 2025年第2期31-37,共7页
为了解近10年国内牛传染性鼻气管炎(IBR)的流行情况,从中国知网(CNKI)20篇调查文献中整理出47条有关牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)核酸检测的信息。对这些信息进行统计分析后发现:文献记载的采样时间为2014—2023年,所有文献都是基于PCR... 为了解近10年国内牛传染性鼻气管炎(IBR)的流行情况,从中国知网(CNKI)20篇调查文献中整理出47条有关牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)核酸检测的信息。对这些信息进行统计分析后发现:文献记载的采样时间为2014—2023年,所有文献都是基于PCR原理检测样品的IBRV核酸,样品采集自新疆、上海、青海、云南、山东等14个省份,累计检测样品8774份,检出阳性样品825份,平均阳性率为9.40%、阳性率区间为0%~96.74%。统计结果表明,没有临床症状和有临床症状牛样品的IBRV核酸检出率存在显著差异(P<0.01),鼻分泌物和血清样品的IBRV核酸检出率不存在差异(P>0.05)。此外,IBRV核酸检测数据偏少,尚不能通过“年度-阳性率”得出国内牛群IBRV感染呈逐年上升趋势的结论。 展开更多
关键词 IBR IBRV 病原学 PCR原理
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双峰驼血浆外泌体对肝癌细胞增殖和侵袭的影响
6
作者 李泽旭 阿拉腾苏布德 +5 位作者 斯日古楞 牛雅如 贺星川 金君健 李子怡 么宏强 《动物医学进展》 北大核心 2025年第10期20-25,共6页
为探究双峰驼血浆外泌体对肝癌细胞增殖和侵袭的作用,采用超速离心法提取双峰驼血浆外泌体,并利用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术对其形态特征进行观察和鉴定。同时,开展外泌体细胞示踪试验,评估肝癌细胞(HEP3B-luc)对外泌体的... 为探究双峰驼血浆外泌体对肝癌细胞增殖和侵袭的作用,采用超速离心法提取双峰驼血浆外泌体,并利用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术对其形态特征进行观察和鉴定。同时,开展外泌体细胞示踪试验,评估肝癌细胞(HEP3B-luc)对外泌体的摄取情况。之后,将外泌体中表达差异显著的miR-144-5p的模拟物(mimics)和miR-144-5p阴性对照(mimics NC)转染至HEP3B-luc细胞,利用CCK-8法和细胞侵袭试验,检测miR-144-5p对HEP3B-luc细胞增殖和侵袭的影响。结果显示,提取的外泌体呈杯状或圆形,大小分布在50~200 nm之间,HEP3B-luc细胞能够有效摄取外泌体。CCK-8试验结果表明,与对照组相比,mimics组的HEP3B-luc细胞增殖能力显著降低(P<0.05),而mimics NC组无显著差异(P>0.05)。细胞侵袭试验结果显示,mimics组的HEP3B-luc细胞侵袭能力显著低于对照组(P<0.01),而mimics NC组无显著差异。以上结果表明,miR-144-5p能够显著抑制HEP3B-luc细胞的增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 双峰驼 血浆外泌体 miR-144-5p 肝癌细胞 细胞增殖 细胞侵袭
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4种常见布鲁氏菌抗体检测方法的评价
7
作者 刘颖昳 苗清新 +6 位作者 徐琦 毕一鸣 司国辉 郝玉欣 郄帅 顾小雪 戴维凝 《中国动物检疫》 2025年第11期97-101,114,共6页
为比较虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、间接ELISA(iELISA)和竞争ELISA(cELISA)等常用布鲁氏菌抗体检测方法的单一和垂直检测(初筛、确诊)性能,对牛羊布鲁氏菌抗体阳性血清以及275份牛羊临床血清样品使用上述4种方法进行单... 为比较虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、间接ELISA(iELISA)和竞争ELISA(cELISA)等常用布鲁氏菌抗体检测方法的单一和垂直检测(初筛、确诊)性能,对牛羊布鲁氏菌抗体阳性血清以及275份牛羊临床血清样品使用上述4种方法进行单一和垂直检测,评价其分析敏感性、分析特异性、阳性检出率和符合率。结果显示:RBT、SAT、iELISA以及cELISA对牛血清的最低检出限分别为25.0、100.0、3.1和3.1 IU/mL,对羊血清分别为25.0、50.0、50.0和12.5 IU/mL;4种单一方法对临床血清样品的总阳性检出率排序为cELISA(70.91%)>iELISA(66.55%)>RBT(39.64%)>SAT(36.00%);垂直方法的总阳性检出率排序为iELISA初筛+cELISA确诊(61.09%)>RBT初筛+cELISA确诊(39.64%)>iELISA初筛+SAT确诊(36.00%)>RBT初筛+SAT确诊(34.55%);单一检测方法中,凝集方法(RBT和SAT)之间、ELISA方法(iELISA和cELISA)之间的一致性程度为极强和高度;垂直检测方法中,使用凝集方法进行初筛或确诊的垂直方法之间一致性程度均为极强,其与iELISA初筛+cELISA确诊之间的一致性程度为中度。结果表明,4种布鲁氏菌抗体检测方法单独使用和联合使用,其敏感性、相符性存在差异,需要根据使用场景选择合适的检测方法。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 ELISA 虎红平板凝集 试管凝集 垂直检测
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抗凝剂对猪口蹄疫O型、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体检测的影响
8
作者 赵陈霞 刘向鹏 +2 位作者 吴挺 王琰 曾朔 《中国兽医卫生》 2025年第1期49-54,共6页
为了解肝素钠、柠檬酸钠、乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K_(2))对酶联免疫吸附试验(ELISA)测定猪口蹄疫O型(FMD-O)、猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)免疫抗体结果的影响,在辖区范围内24个FMD-O、CSF、PRRS免疫猪场随机一一对应采集普通... 为了解肝素钠、柠檬酸钠、乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K_(2))对酶联免疫吸附试验(ELISA)测定猪口蹄疫O型(FMD-O)、猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)免疫抗体结果的影响,在辖区范围内24个FMD-O、CSF、PRRS免疫猪场随机一一对应采集普通全血、肝素钠抗凝全血、柠檬酸钠抗凝全血、EDTA-K_(2)抗凝全血各420份,离心分离得到相关血清、血浆样品各420份,用液相阻断ELISA方法测定猪FMD-O免疫抗体,用竞争ELISA方法测定CSF免疫抗体,用间接ELISA方法测定PRRS免疫抗体。结果发现,肝素钠、柠檬酸钠、EDTA-K_(2)抗凝剂血浆均与血清测定FMD-O、CSF、PRRS抗体存在差异,三种抗凝剂血浆测定FMD-O抗体合格率均低于血清,而测定的CSF、PRRS抗体合格率高于血清,表明肝素钠、柠檬酸钠、EDTA-K_(2)三种抗凝剂影响ELISA试验结果的准确性。 展开更多
关键词 抗凝剂 ELISA试验 免疫抗体 结果分析
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疫苗应用对规模化猪场猪圆环病毒2型感染压力和血清流行病学的影响
9
作者 梁彤彤 罗烨 +5 位作者 林美婷 张珊玲 冯泽中 郑金 卿任科 余兴龙 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第11期49-55,共7页
为了解疫苗应用前后规模化猪场中猪圆环病毒2型(PCV2)感染压力和血清流行病学的变化,本试验于我国4个地区48个规模化猪场采集1 818份血清样品,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测疫苗应用前、应用... 为了解疫苗应用前后规模化猪场中猪圆环病毒2型(PCV2)感染压力和血清流行病学的变化,本试验于我国4个地区48个规模化猪场采集1 818份血清样品,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测疫苗应用前、应用5年及10年后PCV2抗体水平和感染情况。结果显示:(1)在疫苗应用前、应用5年内和应用10年后,母猪PCV2衣壳蛋白(Cap)抗体的平均阳性率和平均S/P值分别在98.00%和1.50以上且无显著差异(P > 0.05),与疫苗应用前相比,应用10年后母猪PCV2复制酶(Rep)抗体平均阳性率从97.77%降至76.50%,平均S/P值从0.71降至0.53,均显著下降(P<0.05);(2)与疫苗应用5年内相比,应用10年后肥猪PCV2 Cap抗体平均阳性率无显著差异(P > 0.05),平均S/P值显著降低(P<0.05),PCV2 Rep抗体平均阳性率由81.96%降至30.92%,平均S/P值由0.76降至0.28,均极显著降低(P<0.01);(3)肥猪PCV2 Rep抗体平均阳性率在22周龄后显著上升(P<0.05),平均S/P值极显著上升(P<0.01),与PCV2检出高峰(20~28周龄)同步;(4)与疫苗应用5年内相比,疫苗应用10年后肥猪PCV2的阳性率由14.58%降至2.08%,显著降低(P<0.05)。结果表明,长期疫苗接种可有效控制PCV2感染,Rep抗体动态可作为净化效果评估指标,为PCV2的防控净化提供理论依据和数据支持。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) 疫苗免疫 流行病学调查 间接酶联免疫吸附试验
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国家参考品鸡传染性支气管炎阳性血清(检验用)制备与检定 被引量：1
10
作者 赵海明 马通通 +2 位作者 张娜 崔松奇 黄丽英 《家禽科学》 2025年第6期14-19,共6页
本研究旨在制备抗鸡传染性支气管炎病毒的特异性阳性血清(以下简称IB阳性血清),用于鸡传染性支气管炎病毒活疫苗、毒种的鉴别检验和外源病毒检测,以及鸡新城疫、支气管炎二联活疫苗的效力检验。对4周龄SPF鸡(公鸡)进行3次免疫,首次用H12... 本研究旨在制备抗鸡传染性支气管炎病毒的特异性阳性血清(以下简称IB阳性血清),用于鸡传染性支气管炎病毒活疫苗、毒种的鉴别检验和外源病毒检测,以及鸡新城疫、支气管炎二联活疫苗的效力检验。对4周龄SPF鸡(公鸡)进行3次免疫,首次用H120株种毒滴鼻免疫,21d用含M41毒株的新支系列灭活苗进行二免,再过21d用相同灭活疫苗进行三免。三免后28d,采集所有鸡的心脏血,经静置自然分离、离心、过滤处理,收获的血清混合分装后冻干。对冻干血清进行无菌、支原体、外源病毒、中和效价等项目检验,结果显示冻干血清中和抗体效价为1:1 212(标准≥1:200);本次制备的IB阳性血清特异性高,细菌、支原体和外源病毒三项检验均符合《中华人民共和国兽药典》(2020年版三部)相关标准。本研究通过对免疫前隔离器消毒验证、环境消毒验证、动物筛选、人员进出控制、动物饲养密度调控等措施,确保了试验顺利完成,同时建立了血清制备和检定方法,为后续相关毒种的新兽药研发或产品检验等血清制备积累了方法。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 特异性阳性血清 检验 中和效价 制备方法
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2019—2023年云南省新平县家畜布鲁氏菌病血清学监测 被引量：1
11
作者 郭红佳 普朝华 +1 位作者 邵勇 范博屹 《中国动物检疫》 2025年第1期14-17,共4页
为了解云南省新平县猪牛羊布鲁氏菌病(以下简称“布病”)防控成效,2019—2023年采集新平县1241个养殖场户的9735份猪牛羊血清样品开展了布鲁氏菌抗体检测。结果显示;家畜平均个体阳性率为0.05%,平均群体阳性率为0.24%;2019—2023年的家... 为了解云南省新平县猪牛羊布鲁氏菌病(以下简称“布病”)防控成效,2019—2023年采集新平县1241个养殖场户的9735份猪牛羊血清样品开展了布鲁氏菌抗体检测。结果显示;家畜平均个体阳性率为0.05%,平均群体阳性率为0.24%;2019—2023年的家畜个体阳性率分别为0、0.07%、0、0.20%、0.05%,群体阳性率分别为0、0.85%、0、0.83%、0.15%,均无统计学差异(P>0.05);猪、牛、羊的个体阳性率分别为0.05%、0.12%、0,有统计学差异(P<0.05),群体阳性率分别为0.38%、0.41%、0,无统计学差异(P>0.05);3个阳性区域的个体阳性率分别为0.36%、0.36%、0.48%,无统计学差异(P>0.05)。结果说明;新平县家畜布病流行水平较低,但尚未彻底根除,部分区域呈零星点状散发态势,需继续加大猪群、牛群和养殖量较大区域的布病防控力度,持续开展血清学监测,严格落实动物及动物产品检疫和跨区域调运监管制度,警惕外来性输入病例。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 家畜 血清学 监测
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广州市犬猫狂犬病免疫抗体监测结果分析 被引量：1
12
作者 陈裕 黄雪英 +8 位作者 朱建翠 陈裕华 周明 钟卓玲 张海冰 林鸿 林皓 张琦 沈丹 《广东畜牧兽医科技》 2025年第2期117-120,共4页
为了解广州市犬猫狂犬病免疫效果,更好地开展狂犬病防控工作,该研究2019-2023年,连续5年采集广州地区犬猫血清样品(犬血清共1768份和猫血清共266份),进行狂犬病免疫抗体监测,并对结果进行统计分析。结果显示2019-2023年犬只抗体合格率... 为了解广州市犬猫狂犬病免疫效果,更好地开展狂犬病防控工作,该研究2019-2023年,连续5年采集广州地区犬猫血清样品(犬血清共1768份和猫血清共266份),进行狂犬病免疫抗体监测,并对结果进行统计分析。结果显示2019-2023年犬只抗体合格率分别是87.99%、78.25%、80.99%、82.61%、88.22%,猫只抗体合格率分别是75.00%、81.82%、100.00%、95.35%、80.00%,犬猫狂犬病免疫抗体平均合格率为83.53%。结果表明,当前广州地区犬猫狂犬病免疫效果整体形势较好,但仍需进一步加强狂犬病免疫和监测工作,降低狂犬病传播风险。 展开更多
关键词 狂犬病 免疫抗体 犬猫 广州
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细菌菌影制备及其作为疫苗佐剂和药物递送载体的研究进展
13
作者 王翠芳 岳巧灵 刘文强 《中国动物检疫》 2025年第3期77-83,共7页
细菌菌影(bacterial ghosts,BGs)是一种没有变形的空细菌包膜,缺乏细胞质内容物,但其保持了与活菌相同的膜蛋白成分、天然结构、细胞表面抗原等特性,可以装载DNA、蛋白质和药物,因此在疫苗佐剂、递送载体系统中具有许多优势,包括有效的... 细菌菌影(bacterial ghosts,BGs)是一种没有变形的空细菌包膜,缺乏细胞质内容物,但其保持了与活菌相同的膜蛋白成分、天然结构、细胞表面抗原等特性,可以装载DNA、蛋白质和药物,因此在疫苗佐剂、递送载体系统中具有许多优势,包括有效的抗原传递、增强的免疫原性、固有的佐剂特性以及安全性和可扩展性。BGs可通过基因工程和化学方法制备,基因工程方法仅限于革兰阴性菌,还需要继续提高裂解效率和稳定性,化学方法制备简单、快速,可扩展到革兰阳性菌,但需要选择合适的化学试剂,准确控制制备条件,注意操作安全。目前已有将BGs作为DNA疫苗、重组蛋白疫苗等新型疫苗佐剂的相关研究,以及将其用于肿瘤免疫治疗药物和抗菌药物载体的研究,并证实BGs具有作为疫苗佐剂和药物递送载体的发展潜力,但在实际应用中也暴露出其在免疫原性、递送效率和安全性方面的一些问题,未来需要从技术优化、个性化疫苗设计、拓展应用领域3个方面开展相关技术研究。本文通过综述BGs制备技术及其作为疫苗佐剂和药物递送载体的研究进展,以期为BGs相关研究和生产应用提供参考。 展开更多
关键词 细菌菌影 疫苗佐剂 递送载体
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兽医法律法规与行政执法关联的思考 被引量：1
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作者 李婷 王治国 +2 位作者 袁忠勋 洪光 赖荣强 《中国兽医卫生》 2025年第1期5-8,共4页
本文围绕兽医法律法规与行政执法的关联进行研究,阐述了兽医法律法规在保障动物健康、维护公共卫生安全和促进兽医行业发展方面的重要性,包括对动物疫病防控的具体规定、防止人畜共患病传播及为养殖业创造稳定环境和引导养殖规范等。分... 本文围绕兽医法律法规与行政执法的关联进行研究,阐述了兽医法律法规在保障动物健康、维护公共卫生安全和促进兽医行业发展方面的重要性,包括对动物疫病防控的具体规定、防止人畜共患病传播及为养殖业创造稳定环境和引导养殖规范等。分析了兽医行政执法的现状,涉及行政执法主体与职责、方式与手段以及面临的执法力量不足和执法环境复杂等挑战。从法律法规为行政执法提供依据、行政执法推动法律法规落实以及两者相互促进共同发展三个方面体现了二者的关联。总结了兽医法律法规与行政执法的紧密关联,提出加强兽医法律法规与行政执法关联的建议,强调加强两者关联的必要性和紧迫性,并对未来兽医行业发展进行了展望。 展开更多
关键词 兽医法律法规 行政执法 动物健康
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猪瘟兔化弱毒疫苗——半个世纪的回顾 被引量：88
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作者 仇华吉 童光志 沈荣显 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1675-1685,共11页
猪瘟是一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。20世纪50年代中国首创了举世闻名的猪瘟兔化弱毒疫苗(即C株),随后创制了不同的疫苗制造工艺,如细胞培养苗、乳兔组织苗和牛体反应组织苗等。C株是一株非常安全的弱毒疫苗,对各种年龄和品种的... 猪瘟是一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。20世纪50年代中国首创了举世闻名的猪瘟兔化弱毒疫苗(即C株),随后创制了不同的疫苗制造工艺,如细胞培养苗、乳兔组织苗和牛体反应组织苗等。C株是一株非常安全的弱毒疫苗,对各种年龄和品种的猪都没有副作用,并且有良好的免疫效力,它能同时诱导体液免疫和细胞免疫应答,对不同基因型的猪瘟病毒株均能提供有效的免疫保护。免疫母猪通过母乳可对仔猪提供被动免疫保护,但过高水平的母源抗体会影响仔猪对C株疫苗的主动免疫应答。目前已经完成了包括C株及其亲本株在内的几十株猪瘟病毒的全基因组序列测定和注释,建立了猪瘟病毒的反向遗传操作系统,初步解析了猪瘟病毒主要基因的结构与功能,并构建了不同的反向遗传操作标记疫苗,赋予了C株疫苗新的生命和内涵。C株疫苗可以用于猪瘟的控制和根除,借助于C株疫苗密集接种和综合控制措施,有关国家有效地控制了猪瘟,甚至消灭了猪瘟。尽管如此,要在全球范围内根除猪瘟,今后依然有漫长的路要走,这可能有赖于对C株进行进一步改造和利用。 展开更多
关键词 猪瘟 猪瘟病毒 猪瘟兔化弱毒疫苗 20世纪50年代 综合控制措施 细胞免疫应答 被动免疫保护 反向遗传操作 回顾 免疫效力
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表达载体pCAGGS显著增强禽流感DNA疫苗的免疫保护效果 被引量：30
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作者 姜永萍 张洪波 +5 位作者 步志高 李呈军 赵有淑 王秀荣 于康震 陈化兰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期825-830,共6页
目的将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5,以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。方法将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因... 目的将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5,以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。方法将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒pCIHA5通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测转染293T细胞后瞬时表达的HA抗原蛋白,随之将pCAGGHA5及pCIHA5分别以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后用100LD50的HPAIVGD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击。结果间接免疫荧光法和Western-blot分析表明2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,载体pCAGGS表达水平显著高于载体pCI;免疫SPF鸡后,100μgpCAGGHA5可形成5/5的免疫保护,100μgpCIHA5可形成2/4的免疫保护,10μgpCAGGHA5可形成对免疫鸡5/5的免疫保护,而10μgpCIHA5则基本不能形成免疫保护,pCAGGHA5诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA5。结论鸡β-actin启动子表达载体pCAGGS可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果。 展开更多
关键词 禽流感 H5亚型 鸡β-actin启动子 DNA疫苗 免疫保护
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表达猪传染性胃肠炎病毒S基因的重组乳酸乳球菌的构建及免疫原性分析 被引量：22
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作者 唐丽杰 欧笛 +5 位作者 葛俊伟 徐义刚 李一经 史达 夏春丽 郁茵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期340-344,共5页
根据猪传染性胃肠炎病毒纤突(S)蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR扩增,获得含有TGEVS基因4个主要抗原位点的约2000bp的目的片段,将其与分泌表达的载体质粒pNZ8112进行连接,通过电击转化进入宿主菌乳... 根据猪传染性胃肠炎病毒纤突(S)蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR扩增,获得含有TGEVS基因4个主要抗原位点的约2000bp的目的片段,将其与分泌表达的载体质粒pNZ8112进行连接,通过电击转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内,在乳链菌肽(Nisin)的诱导下进行表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析,表明TGEVS蛋白在乳酸乳球菌中获得表达,所表达的TGEVS蛋白具有与TGE病毒一样的抗原特异性。间接免疫荧光试验表明重组菌表达蛋白定位于菌体表面。将表达TGEVS蛋白的重组乳酸乳球菌及空质粒菌株分别口服免疫BALB/c小鼠,收集粪便样品进行抗体检测,结果表明分泌型的重组菌pNZ8112-Sa/NZ9000免疫小鼠能够产生明显的抗TGEVsIgA抗体。 展开更多
关键词 TGEV S蛋白 乳酸乳球菌 表面表达 免疫原性分析
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禽波氏杆菌外膜蛋白的提取及其免疫原性的检测 被引量：20
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作者 胡晓娜 朱瑞良 +3 位作者 刘红珍 毕建敏 王伟 李新苍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期714-717,共4页
为研究禽波氏杆菌OMP的免疫原性,试验采用超声波破碎、TritonX-100处理技术提取了禽波氏杆菌OMP,采用Bradford方法测定禽波氏杆菌OMP含量,进行了SDS-PAGE检测,然后制备油乳剂OMP免疫抗原,对1日龄雏鸡分别以0.3mL(OMP90μg)、0.5mL(OMP15... 为研究禽波氏杆菌OMP的免疫原性,试验采用超声波破碎、TritonX-100处理技术提取了禽波氏杆菌OMP,采用Bradford方法测定禽波氏杆菌OMP含量,进行了SDS-PAGE检测,然后制备油乳剂OMP免疫抗原,对1日龄雏鸡分别以0.3mL(OMP90μg)、0.5mL(OMP150μg)、0.8mL(OMP240μg)的剂量颈部皮下接种。结果:禽波氏杆菌OMP含量为300μg/mL;禽波氏杆菌OMP最佳免疫剂量为0.5mL/只;通过免疫抗体与攻毒保护相关性测试,抗体效价在1:28以上能抵抗致死量禽波氏杆菌的攻击。据间接ELISA法检测的抗体水平可知,抗体的持续时间足以保护雏鸡避过易感日龄,试验发现OMP具有良好的免疫原性。本试验结果将为禽波氏杆菌OMP单克隆抗体的制备、快速诊断试剂盒的研制、亚单位疫苗的开发奠定良好的基础。 展开更多
关键词 禽波氏杆菌 外膜蛋白 提取 ELISA 免疫原性
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抑制素α(1～32)基因免疫对大鼠卵泡发育和生殖激素的影响 被引量：22
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作者 茆达干 杨利国 +1 位作者 叶荣 姜勋平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1554-1559,共6页
选择 40只 3 0日龄雌性大鼠分为 4组 ,分别用含重组抑制素α(1～ 3 2 )基因真核表达质粒pcINH 0 μg(对照组 )、15μg(试验组 1)、2 5μg(试验组 2 )、40 μg(试验组 3 )的脂质体进行主动免疫 ,间隔 2 0d后用不含脂质体的重组基因质粒... 选择 40只 3 0日龄雌性大鼠分为 4组 ,分别用含重组抑制素α(1～ 3 2 )基因真核表达质粒pcINH 0 μg(对照组 )、15μg(试验组 1)、2 5μg(试验组 2 )、40 μg(试验组 3 )的脂质体进行主动免疫 ,间隔 2 0d后用不含脂质体的重组基因质粒加强免疫 1次。结果发现 ,抗体阳性鼠占 50 % (13 / 2 6) ,但加强免疫 10d后的抗体P/N值没有升高 ,而且免疫剂量的增加并没有提高阳性鼠的比例 ;抗体阳性鼠卵巢上的成熟卵泡数比阴性鼠多 2 .3 ,但统计差异不显著 (P >0 .0 5)。首次免疫 10d后阳性鼠血浆FSH浓度显著升高 (P <0 .0 5) ;但血浆雌二醇水平无显著差异 (P >0 .0 5)。加强免疫 10d后血中促卵泡素水平没有升高。本试验结果证明 ,应用重组抑制素真核表达质粒免疫动物可以产生抗抑制素抗体。 展开更多
关键词 抑制素α 基因免疫 大鼠 卵泡发育 生殖激素 影响因素 免疫动物
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疫苗佐剂的研究现状和发展趋势 被引量：23
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作者 李娜 周伟芳 +2 位作者 刘慧敏 李赞 仇华吉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期81-86,共6页
疫苗佐剂是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作用的一类物质。佐剂能够诱发机体产生长期、高效的特异性免疫反应，提高机体保护能力，同时又能减少免疫物质的用量，降低疫苗的生产成本。长期以来，传统疫... 疫苗佐剂是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作用的一类物质。佐剂能够诱发机体产生长期、高效的特异性免疫反应，提高机体保护能力，同时又能减少免疫物质的用量，降低疫苗的生产成本。长期以来，传统疫苗（多为菌体或其裂解物）由于其免疫原性强，佐剂的研究和使用只局限于较小的范围，如毒素和类毒素。从巴斯德至今近百年来已开发了许多菌苗和疫苗，但传统的菌疫苗一般多为全细菌或全病毒制成，其中含有大量非免疫原性物质，这些物质除具有毒副作用外也具有佐剂作用。 展开更多
关键词 疫苗佐剂 发展趋势 免疫物质 非特异性 免疫原性 免疫应答 辅助作用 免疫反应
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