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鸭短喙矮小综合征病毒单克隆抗体制备及竞争ELISA检测方法的建立
1
作者 朱小丽 王劭 +5 位作者 董慧 程晓霞 江丹丹 肖世峰 陈少莺 陈仕龙 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期948-958,共11页
【目的】建立一种快速检测鸭短喙矮小综合征病毒(Short beak and dwarfism syndrome virus,SBDSV)抗体的血清学方法,为SBDSV抗体检测及诊断试剂盒研发提供技术支撑。【方法】本研究用纯化的SBDSV M15株灭活毒免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠... 【目的】建立一种快速检测鸭短喙矮小综合征病毒(Short beak and dwarfism syndrome virus,SBDSV)抗体的血清学方法,为SBDSV抗体检测及诊断试剂盒研发提供技术支撑。【方法】本研究用纯化的SBDSV M15株灭活毒免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,利用间接ELISA筛选可分泌SBDSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用筛选出的杂交瘤细胞接种小鼠制备腹水。通过间接ELISA测定单克隆抗体效价,通过间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)和胶乳凝集(latex particle agglutination,LPA)试验鉴定单克隆抗体特性。通过中和试验测定单克隆抗体中和活性,使用试剂盒鉴定单克隆抗体亚类。运用棋盘滴定法优化反应体系,建立基于SBDSV单克隆抗体的竞争ELISA检测方法。通过检测阴性血清确定该方法的临界值。对建立的竞争ELISA检测方法进行特异性、灵敏性和重复性测定。用该方法检测临床血清样品,并与胶乳凝集抑制(latex particle agglutination inhibition,LPAI)试验结果进行比对。【结果】经间接ELISA筛选,获得3株稳定分泌SBDSV单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为D5-3、G11-23和H2-27。间接ELISA结果显示,3株杂交瘤细胞D5-3、G11-23和H2-27培养上清的抗体效价分别为1∶2~6、1∶2~5和1∶2~6,腹水的抗体效价分别为1∶10~5、1∶10~4和1∶10~6。IFA结果显示,单克隆抗体D5-3、G11-23和H2-27均具有较好的结合活性,可用于IFA检测。LPA试验结果显示,仅单克隆抗体H2-27具有致敏胶乳的特性。中和试验结果显示,3株单克隆抗体均具有中和SBDSV的能力,其中单克隆抗体H2-27的中和活性最强。单克隆抗体亚类鉴定结果显示,单克隆抗体D5-3和G11-23均为IgG1,H2-27为IgM。以纯化的SBDSV(M15株)灭活毒作为包被抗原,单克隆抗体H2-27为竞争抗体,建立了一种检测SBDSV抗体的竞争ELISA方法,当抑制率(PI)≥23.70%时,判定为SBDSV抗体阳性;PI≤15.91%时判定为阴性。该方法特异性好,与番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)、番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)、鸭源副黏病毒(Duck paramyxovirus,DPMV)、鸭肝炎病毒1型(Duck hepatitis virus-1,DHV-1)和鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)阳性血清均无交叉反应;敏感性高,高免血清(LPAI效价1∶2~8)1∶25600稀释时仍为阳性;批间、批内重复性好,变异系数均<6%。竞争ELISA检测结果与LPAI结果具有良好的正相关性,二者的符合率为89.10%(188/211)。【结论】本研究成功制备3株SBDSV单克隆抗体,基于单克隆抗体H2-27建立的竞争ELISA方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可高通量检测SBDSV抗体,为监测SBDSV在中国的流行情况及雏鸭母源抗体水平评价提供技术支撑。 展开更多
关键词 鸭 短喙矮小综合征病毒(SBDSV) 单克隆抗体 竞争ELISA
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雷公藤甲素对妊娠期大鼠生殖参数的影响
2
作者 张晓敏 康玉军 +2 位作者 荆嘉慧 徐坤 党静 《动物医学进展》 北大核心 2026年第1期46-54,共9页
为评估雌性大鼠妊娠期使用雷公藤甲素(TP)对其生殖参数的影响,将6月龄SD雌雄大鼠合笼,受孕后随机分为对照组和4个TP组,TP组分别接受200、400、600、800μg/kg的TP溶液灌胃平均21 d直至分娩,分娩后处死所有雌性大鼠,记录产仔量,计算生殖... 为评估雌性大鼠妊娠期使用雷公藤甲素(TP)对其生殖参数的影响,将6月龄SD雌雄大鼠合笼,受孕后随机分为对照组和4个TP组,TP组分别接受200、400、600、800μg/kg的TP溶液灌胃平均21 d直至分娩,分娩后处死所有雌性大鼠,记录产仔量,计算生殖腺指数和流产率,检测血清性激素水平及氧化应激指标,测定生殖器官中凋亡蛋白表达情况,检测雌性大鼠子宫和胎盘中3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、雌激素受体基因-1(Esr1)mRNA表达情况。结果显示,与对照组比较,TP组所有雌性大鼠均出现产仔量减少,流产率增加,胎鼠体重降低(P<0.01),血清雌二醇(E2)降低,黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)升高(P<0.05);同时,血清丙二醛(MDA)升高,而超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)降低(P<0.05);与对照组比较,高剂量TP(600~800μg/(kg·d))引起雌性大鼠卵巢和子宫形态异常、生殖腺指数降低、凋亡蛋白与抗凋亡蛋白表达失衡,子宫和胎盘组织3β-HSD表达上调、Esr1表达下调(P<0.05)。结果表明,妊娠期使用TP引起雌性大鼠生殖器官形态异常,妊娠不良结局风险增加,胚胎生长发育异常,这可能与TP干扰下丘脑-垂体-性腺轴(HPG)功能、降低雌激素水平、增强氧化应激、诱导生殖器官细胞凋亡及影响3β-HSD和Esr1基因表达有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 妊娠期 雌激素 氧化应激 凋亡
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新疆地区奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的分离鉴定与耐药性分析
3
作者 蔡扩军 徐敏 +2 位作者 孙鹏亮 夏利宁 赵红琼 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第1期464-475,共12页
旨在了解新疆地区奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的流行情况与耐药特性。本研究从新疆奶牛集约化养殖集中的9个地区采集15个规模奶牛养殖场奶牛2083份临床乳腺炎和隐性乳腺炎奶样,对样品中的肺炎克雷伯菌进行分离培养、革兰染色,并采用PCR及16S... 旨在了解新疆地区奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的流行情况与耐药特性。本研究从新疆奶牛集约化养殖集中的9个地区采集15个规模奶牛养殖场奶牛2083份临床乳腺炎和隐性乳腺炎奶样,对样品中的肺炎克雷伯菌进行分离培养、革兰染色,并采用PCR及16S rRNA测序进行鉴定,对分离菌株采用微量肉汤稀释法检测耐药情况。结果表明,从奶样中分离出266株肺炎克雷伯菌,分离率为12.8%(266/2083),临床乳腺炎和隐性乳腺炎奶样肺炎克雷伯菌分离率无显著差异(P>0.05)。采用微量肉汤稀释法测定266个分离株对16种抗菌药物的敏感性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况,结果显示分离株对四环素、头孢噻呋、头孢吡肟、头孢噻肟和头孢唑林的耐药率较高(23.7%~41.0%)。16.9%(45/266)的分离株为多重耐药菌,6.4%(17/266)的分离株产ESBLs。结果提示,新疆15家规模化奶牛场乳腺炎肺炎克雷伯菌平均分离率在全国处于相对较低水平。分离株对四环素和头孢类抗菌药物具有较强的耐药性,本研究为掌握奶牛乳腺炎肺炎克雷伯菌的流行特征及指导临床用药提供了依据。 展开更多
关键词 奶牛乳腺炎 肺炎克雷伯菌 分离鉴定 耐药特性
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盐胁迫对药用蒲公英生长及菊苣酸含量的影响 被引量：1
4
作者 杨阳 濮春娟 +3 位作者 韦明慧 周桂生 邹立思 严辉 《北方园艺》 北大核心 2026年第1期70-78,共9页
以药用蒲公英为试材,采用种子萌发试验及水培法,研究了盐胁迫对蒲公英种子萌发、幼苗生长及菊苣酸含量的影响,并对盐胁迫条件下促进蒲公英种子发芽方法进行初探,以期为药用蒲公英在盐碱地的规模化栽培提供参考依据。结果表明:浓度为0.3%... 以药用蒲公英为试材,采用种子萌发试验及水培法,研究了盐胁迫对蒲公英种子萌发、幼苗生长及菊苣酸含量的影响,并对盐胁迫条件下促进蒲公英种子发芽方法进行初探,以期为药用蒲公英在盐碱地的规模化栽培提供参考依据。结果表明:浓度为0.3%、0.5%、0.7%的盐溶液对蒲公英种子萌发与幼苗生长有显著的抑制作用;在不同程度的盐胁迫条件下,赤霉素对蒲公英种子萌发的促进作用均最好;蒲公英中菊苣酸含量随盐浓度的升高而升高,表明适度盐胁迫对蒲公英中菊苣酸的积累有促进作用。 展开更多
关键词 蒲公英 盐胁迫 种子萌发 菊苣酸
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格拉瑟菌血清5型cpxAR双组分基因缺失株的生物学特性研究
5
作者 徐引弟 王治方 +8 位作者 蔡旭旺 徐晓娟 张立宪 焦文强 朱文豪 李海利 游一 张家庆 雷亚楠 《河南农业科学》 北大核心 2026年第2期126-135,共10页
为研究cpxAR双组分基因在格拉瑟菌中的致病机制,同时筛选格拉瑟菌血清5型缺失弱毒株,构建格拉瑟菌血清5型临床分离株(GPS5)的cpxAR双基因缺失株(ΔcpxAR),并对缺失株的生长特性、生物膜形成能力、环境胁迫抗性及豚鼠致病力等生物学特性... 为研究cpxAR双组分基因在格拉瑟菌中的致病机制,同时筛选格拉瑟菌血清5型缺失弱毒株,构建格拉瑟菌血清5型临床分离株(GPS5)的cpxAR双基因缺失株(ΔcpxAR),并对缺失株的生长特性、生物膜形成能力、环境胁迫抗性及豚鼠致病力等生物学特性进行系统研究。结果表明,cpxAR基因缺失后,ΔcpxAR与亲本株GPS5相比,菌落形态和生长速率无明显差异,但生物膜形成能力明显减弱,对渗透压、热休克、氧化应激及碱性胁迫的抗性显著降低,对豚鼠的毒力也显著减弱。综上,cpxAR基因对GPS5的生长无明显调控作用,但对其生物膜形成、环境胁迫抗性及毒力均具有重要调控作用,为深入探究cpxAR双组分系统在格拉瑟菌中的生物学功能,以及筛选格拉瑟菌血清5型弱毒株奠定了基础。 展开更多
关键词 格拉瑟菌血清5型 cpxAR基因缺失株 生长 生物膜 抗性 毒力
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鸡传染性喉气管炎弱毒株FJ19株的关键基因遗传演化分析及作为候选疫苗株的安全性、有效性评价
6
作者 王晨燕 张巍嘉 +4 位作者 柳珊 李亚杰 赵丽霞 刘云涛 侯博 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第2期994-1007,共14页
本研究旨在分析鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)弱毒株FJ19株的部分关键抗原基因及毒力基因的遗传演化特点,评估FJ19株对SPF鸡的安全性和免疫原性,为ILTV FJ19株弱毒活疫苗的开发提供参考依据。通过将FJ19株进行多次尿囊腔途径接种适应后,... 本研究旨在分析鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)弱毒株FJ19株的部分关键抗原基因及毒力基因的遗传演化特点,评估FJ19株对SPF鸡的安全性和免疫原性,为ILTV FJ19株弱毒活疫苗的开发提供参考依据。通过将FJ19株进行多次尿囊腔途径接种适应后,对其关键抗原和毒力基因进行测序分析,点眼或口服接种14日龄SPF鸡观察其安全性,并且通过点眼或口服途径免疫14日龄SPF鸡21 d后用ILTV强毒株攻毒评价保护效果,测定免疫持续期等验证FJ19株作为弱毒活疫苗的潜力。结果显示:将FJ19株在10日龄SPF鸡胚以尿囊腔途径接种连续传代适应后,收获P0、P1、P2、P3代病毒液的EID50分别为10^(5.0)、10^(6.5)、10^(6.9)、10^(6.5)·mL^(-1)。核酸序列分析结果表明:FJ19株主要免疫原性基因gB-gC-gD-UL32和毒力相关基因gE-gI-TK-ICP4-gG-gH-gK-gL-gM-gN与弱毒株K317、Nobilis Laringovac®、LT Blen、Poulvac ILT®、Laryngo Vac和我国2009年分离株LJS09株、2012年分离株ck/CH/LHLJ/120305株、2019年分离强毒株WF03的亲缘关系较近。安全性试验显示,FJ19株以104.0EID50·羽-1的剂量(10羽份)点眼接种14日龄SPF鸡后有40%出现轻度眼炎症状,而口服接种SPF鸡未表现出明显的临床症状;当以104.0EID50·羽-1的剂量气管途径接种21日龄SPF鸡时有30%鸡出现一过性的呼吸道反应,未发生严重的ILTV感染典型症状。免疫后强毒攻毒结果显示,FJ19株以0.2羽份或1羽份的剂量点眼或口服途径免疫14日龄SPF鸡21d后,采用ILTV强毒株以104.0EID50·只-1的剂量气管攻毒后,所有免疫组的鸡均获得了至少90%的保护,未观察到明显的临床症状,而未免疫攻毒组至少有90%的鸡出现了严重的ILTV感染典型症状,FJ19株免疫后的免疫持续期至少可达6个月。ILTV FJ19株采用尿囊腔途径接种可获得高滴度病毒含量,其主要抗原基因和毒力基因与我国早期分离株和疫苗株相比未发生明显变异,通过动物试验证实点眼或口服该弱毒株对14日龄SPF鸡具有良好的安全性和免疫有效性,且免疫持续期可达6个月,通过口服接种不影响其安全性和免疫有效性。因此,ILTV弱毒株FJ19株不仅适应尿囊腔接种途径收获病毒,且具备良好的安全性和免疫有效性,还可适应口服接种途径进行免疫,是一株理想的具有潜力的弱毒疫苗候选毒株。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎 弱毒株 遗传进化 安全性 有效性
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口蹄疫病毒3D蛋白与宿主互作蛋白的筛选及鉴定
7
作者 刘永杰 兰喜 +4 位作者 李玉星 张勇 何继军 尚佑军 郑海学 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第1期13-19,共7页
口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的猪、牛、羊等偶蹄类动物急性、热性,高度接触性传染病。FMDV 3D蛋白是病毒编码RNA的RNA依赖性聚合酶(3D^(pol)),是病毒RNA复制的重要蛋白,有关3D蛋白与宿主蛋白相互作用的报道较少。本研究应用PK-15细... 口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的猪、牛、羊等偶蹄类动物急性、热性,高度接触性传染病。FMDV 3D蛋白是病毒编码RNA的RNA依赖性聚合酶(3D^(pol)),是病毒RNA复制的重要蛋白,有关3D蛋白与宿主蛋白相互作用的报道较少。本研究应用PK-15细胞cDNA酵母表达文库,利用酵母双杂交技术,最终获得与3D有潜在相互作用的15个宿主潜在蛋白,通过免疫共沉淀和共聚焦试验进一步验证,鉴定出宿主ataxin-3和voltage-dependent anion channel 1(VDAC1)与3D具有相互作用,研究结果为宿主蛋白与3D蛋白相互作用在病毒复制中的功能提供了数据支撑。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3D蛋白 酵母双杂交技术 蛋白质相互作用
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猫杯状病毒感染性克隆的构建及拯救病毒的鉴定
8
作者 朱雪敏 李鑫基 +7 位作者 华炯钢 陈柳 叶伟成 张传亮 朱寅初 付媛 张存 云涛 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第1期20-26,共7页
旨在建立猫杯状病毒(FCV)反向遗传系统,以探究FCV的致病机制,为后续疫苗研发提供科学依据。以FCV HZ2024株为对象,构建DNA-launched感染性克隆系统。FCV全基因组的4个片段被依次插入pAY-CHS重组质粒后转染F81细胞并传代鉴定。结果显示,F... 旨在建立猫杯状病毒(FCV)反向遗传系统,以探究FCV的致病机制,为后续疫苗研发提供科学依据。以FCV HZ2024株为对象,构建DNA-launched感染性克隆系统。FCV全基因组的4个片段被依次插入pAY-CHS重组质粒后转染F81细胞并传代鉴定。结果显示,FCV HZ2024基因片段扩增后插入DNA-launched系统质粒,成功构建DNA-launched系统拯救病毒rFCV HZ2024-RE,转染细胞24 h后出现细胞病变效应,病毒滴度稳定在10^(7)~10^(8T)CID_(50)/m L。间接免疫荧光检测证实VP1蛋白抗原表位完全保留,重组病毒的衣壳蛋白成功表达。且重组病毒与亲本毒株的复制动力学高度相似,蚀斑形态无显著差异。Eco R V酶切及测序验证表明,突变位点(C7183T、A7186C)被精准引入且稳定遗传。总之,构建的DNA-launched系统实现了FCV高效拯救与精准遗传。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 感染性克隆 反向遗传学 病毒拯救
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奶山羊源反刍链球菌的分离鉴定
9
作者 刘萍 李美文 +5 位作者 德珍 王敏 曹小安 刘志杰 何继军 尚佑军 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第2期235-240,共6页
为明确陕西省某奶山羊养殖场羔羊关节炎的病因,取发病羔羊关节积液和主要脏器组织进行了病原菌检测和细菌分离培养、生化试验、药敏试验及小鼠致病性试验。结果显示,羔羊关节液和脾组织中链球菌属细菌核酸呈阳性,从关节积液中成功分离出... 为明确陕西省某奶山羊养殖场羔羊关节炎的病因,取发病羔羊关节积液和主要脏器组织进行了病原菌检测和细菌分离培养、生化试验、药敏试验及小鼠致病性试验。结果显示,羔羊关节液和脾组织中链球菌属细菌核酸呈阳性,从关节积液中成功分离出1株链球菌,经形态学观察、生化试验和16S rRNA基因序列比对,鉴定为反刍链球菌。药敏试验表明,该分离株对链霉素、阿米卡星、妥布霉素、多黏菌素B、万古霉素和诺氟沙星高度敏感,对红霉素中度敏感,但对青霉素G、头孢类、四环素和复方新诺明等多种常用抗生素存在耐药性。致病性试验证实该分离株对小鼠具有较强致病性,可致感染小鼠死亡。本研究为反刍链球菌的实验室诊断、抗菌药物合理选用以及后续研究其耐药机制和防控技术奠定了基础。 展开更多
关键词 反刍链球菌 关节炎 耐药性 奶山羊
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鸭星状病毒1型信阳株全基因组扩增及遗传进化分析
10
作者 张敏 李迎晓 +5 位作者 张璐璐 何书海 曲哲会 秦东升 刘纪成 焦凤超 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期959-972,共14页
【目的】了解信阳地区鸭星状病毒1型(Duck astrovirus type 1,DAstV1)流行株基因组的演化特征,为进一步研究信阳地区DAstV1的流行、遗传进化及致病特性提供参考依据。【方法】对某养殖场送检的病鸭进行禽腺病毒、禽星状病毒和鸭甲型肝... 【目的】了解信阳地区鸭星状病毒1型(Duck astrovirus type 1,DAstV1)流行株基因组的演化特征,为进一步研究信阳地区DAstV1的流行、遗传进化及致病特性提供参考依据。【方法】对某养殖场送检的病鸭进行禽腺病毒、禽星状病毒和鸭甲型肝炎病毒等12种常见病毒的PCR/RT-PCR筛查。采集病鸭肝脏组织,无菌处理后经卵黄囊途径接种10日龄SPF鸭胚,连续传代4次,并逐代收集尿囊液进行DAstV RT-PCR鉴定。对分离到的病毒进行全基因组测序,并对ORF1a、ORF1b和ORF2基因序列及其编码蛋白的氨基酸变异位点进行比对分析。【结果】送检病料筛查结果显示,禽星状病毒呈阳性。第1~4代鸭胚尿囊液中均呈DAstV1阳性,将该病毒命名为HN24XY06。第4代接种鸭胚全部死亡,死亡胚体发育不良且体表出血。HN24XY06基因组全长7 755 nt,包含ORF1a、ORF1b和ORF2 3个开放阅读框。序列比对和系统发育分析表明,HN24XY06属于DAstV1毒株,与山东分离株DAstV-SDZZ和DAstV-SDWF亲缘关系较近。ORF1a、ORF1b和ORF2蛋白的氨基酸序列分析显示,存在不同程度的突变,多发生在ORF1a编码的氨基酸序列中。【结论】本研究分离到了1株DAstV1,丰富了信阳地区DAstV1的分子流行病学资料,并为进一步研究DAstV1的致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭星状病毒1型(DAstV1) 病毒分离与鉴定 全基因组扩增 遗传进化分析
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茶树菇酸性多糖的结构特征及其对免疫抑制小鼠肠道微环境稳态的调控作用
11
作者 武彩红 蔡高峰 +5 位作者 丁爱云 刘朋 邱树磊 陈晓兰 张斌 陆辉 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第2期273-281,共9页
为解析茶树菇酸性多糖(AAP)的结构特征,并探究其对环磷酰胺(CY)诱导的免疫抑制小鼠肠道微环境稳态的调控作用,采用DEAE离子交换层析从茶树菇粗多糖中分离纯化酸性多糖组分,并通过高效凝胶渗透色谱、高效液相色谱、傅里叶变换红外光谱和... 为解析茶树菇酸性多糖(AAP)的结构特征,并探究其对环磷酰胺(CY)诱导的免疫抑制小鼠肠道微环境稳态的调控作用,采用DEAE离子交换层析从茶树菇粗多糖中分离纯化酸性多糖组分,并通过高效凝胶渗透色谱、高效液相色谱、傅里叶变换红外光谱和甲基化分析对其分子质量、单糖组成和结构特征进行解析。将36只6周龄雌性小鼠随机分成6组,每组6只,设空白对照组(CON)、模型组(CY)、阳性药物组(左旋咪唑,LH)及AAP低、中、高剂量组,灌胃干预7 d后,测定小鼠体重、血清二胺氧化酶(DAO)活性及肠道β-防御素、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结构分析表明,AAP是一种分子质量为6.248 kDa的酸性多糖,主要由葡萄糖、半乳糖、岩藻糖和葡萄糖醛酸构成,主链以1→6糖苷键连接,并具有高度分支化结构。动物试验结果表明,AAP能显著缓解CY引起的小鼠体重下降,降低血清DAO活性,促进肠道β-防御素分泌并调节IL-4、IL-10、IL-17和TNF-α水平,同时提高SOD活性并降低MDA含量。表明,AAP具有明确的结构特征,可通过多途径协同调节免疫抑制小鼠的肠道微环境稳态,可为AAP开发为一种新型的畜禽免疫调节剂提供试验依据。 展开更多
关键词 茶树菇酸性多糖 结构表征 小鼠 免疫抑制 肠道稳态
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四川肉牛源疣状毛癣菌的分离鉴定、系统发育分析与药敏试验
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作者 王娅 李志国 +3 位作者 罗荣艳 刘瑞国 左之才 马晓平 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期459-468,共10页
【目的】探究四川肉牛真菌性皮肤病的病原,为该病的防治提供参考。【方法】采集四川各地疑似皮肤癣病的患畜皮屑,用三点接种法将采集的样本接种于皮肤癣菌鉴别培养基,将分离得到的菌株经内部转录间隔区(ITS)序列扩增后通过NCBI数据库BL... 【目的】探究四川肉牛真菌性皮肤病的病原,为该病的防治提供参考。【方法】采集四川各地疑似皮肤癣病的患畜皮屑,用三点接种法将采集的样本接种于皮肤癣菌鉴别培养基,将分离得到的菌株经内部转录间隔区(ITS)序列扩增后通过NCBI数据库BLAST分析基因相似性并构建系统发育树,以10^(7) CFU/mL分离菌孢子悬液感染免疫抑制小鼠,观察临床症状和病理学特征,微量二倍稀释法探究分离菌耐药表型。【结果】从24个样本中分离到10株真菌(rntv01~rntv10)。PCR扩增结果显示,分离株均得到大小为681 bp的扩增片段;BLAST比对结果显示,分离株与疣状毛癣菌相似性为97%~100%;动物试验结果显示,免疫抑制小鼠感染该菌后皮肤出现被毛脱落、结痂、皮屑增多等症状,HE染色后观察到表皮角质层角化不全、炎性细胞增生,PAS染色后观察到大量菌丝侵染;药敏试验结果显示,除rntv10外,其余菌株对两性霉素B中介;分离菌对伊曲康唑敏感性不同,rntv09、rntv10敏感,rntv01、rntv04~rntv08中介,rntv02、rntv03耐药;rntv10对酮康唑敏感、对5-氟胞嘧啶中介,其余菌株均为耐药株;所有菌株对环吡酮胺中介,对氟康唑和特比萘芬耐药。【结论】四川肉牛真菌性皮肤病主要病原是疣状毛癣菌,该菌可引起小鼠皮肤的侵袭性感染,患病牛可用两性霉素B、伊曲康唑或环吡酮胺进行治疗。 展开更多
关键词 肉牛 疣状毛癣菌 分离鉴定 ITS序列 系统发育分析 药敏试验
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猪血浆中替米考星高效液相色谱检测方法的建立
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作者 赵莎莎 程星星 +7 位作者 龚佳豪 汪宇涵 赵源 司星星 张梦醒 魏经阁 高修歌 郭大伟 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第2期56-60,共5页
旨在建立一种用于猪血浆中替米考星含量的高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测方法。制备含替米考星标准品的健康仔猪血浆样品,用甲醇提取和氯仿萃取,使用Agilent ZOR BAX Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm&... 旨在建立一种用于猪血浆中替米考星含量的高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测方法。制备含替米考星标准品的健康仔猪血浆样品,用甲醇提取和氯仿萃取,使用Agilent ZOR BAX Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)洗脱,外标法定量分析。结果:方法学验证显示,替米考星在0.15~50μg/m L的浓度范围内,呈线性(y=9 956.3x-798.18,R^(2)=0.999),日内与日间精密度分别为0.30%~2.46%、1.25%~4.78%,回收率为85.37%~118.45%。结论:该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,适用于猪血浆中替米考星的含量测定。 展开更多
关键词 替米考星 高效液相色谱 血浆 猪 外标法
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肠炎沙门氏菌快速检测技术研究进展
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作者 李佳 刘垚 +4 位作者 李珊珊 何坤淼 余秋颖 陈琳琳 王娜 《动物医学进展》 北大核心 2026年第2期103-108,共6页
肠炎沙门氏菌是沙门氏菌属中最重要的血清型之一,主要通过受污染的饮用水、食物等传播,与人类食源性疾病密切相关。该菌不仅对畜牧业造成重大经济损失,还会威胁人类健康,严重病例甚至导致死亡。因此,建立快速检测食品中肠炎沙门氏菌的... 肠炎沙门氏菌是沙门氏菌属中最重要的血清型之一,主要通过受污染的饮用水、食物等传播,与人类食源性疾病密切相关。该菌不仅对畜牧业造成重大经济损失,还会威胁人类健康,严重病例甚至导致死亡。因此,建立快速检测食品中肠炎沙门氏菌的技术对于预防食源性疾病的暴发具有重要意义。论文综述了肠炎沙门氏菌的分子生物学技术、免疫学技术和生物传感器技术等快速检测技术的原理、优势与局限性,探讨了相关领域的研究概况,了解肠炎沙门氏菌快速检测技术的研究现状,为未来肠炎沙门氏菌快速检测技术的开发与应用提供参考。 展开更多
关键词 肠炎沙门氏菌 快速检测 分子生物学技术 免疫学技术 生物传感器技术
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几种补益方剂对血虚型鸡血液参数、造血及免疫功能的影响
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作者 王慧 高珍珍 +5 位作者 陈晓兰 殷韶杰 武彩虹 张璇 钟文浩 邱树磊 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第3期1610-1622,共13页
【目的】研究几种补益方剂对血虚型鸡血液参数、造血及免疫功能的影响,以考察5种补益方剂对血虚型鸡的治疗作用。【方法】将210只2周龄雪山鸡分为7组:空白对照组(BC)、血虚模型组(MC)和5个给药组(四君子汤组(SJ)、四物汤组(SW)、八珍汤... 【目的】研究几种补益方剂对血虚型鸡血液参数、造血及免疫功能的影响,以考察5种补益方剂对血虚型鸡的治疗作用。【方法】将210只2周龄雪山鸡分为7组:空白对照组(BC)、血虚模型组(MC)和5个给药组(四君子汤组(SJ)、四物汤组(SW)、八珍汤组(BZ)、十全大补汤组(SQ)和补中益气汤组(BQ)),每组30只鸡。除空白对照组外,其余各组鸡均采用乙酰苯肼联合环磷酰胺复制血虚模型(第1~3天注射20 mg/kg的乙酰苯肼,第4~6天注射40 mg/kg的环磷酰胺,测定红细胞与血红蛋白含量显著低于空白对照组时表示造模成功),造模成功后,5个给药组在饮水中分别添加2%的四君子汤、四物汤、八珍汤、十全大补汤、补中益气汤溶液,连续给药7 d,每日限时饮用8 h后,更换为普通饮用水,BC与MC组鸡自由饮水,开始给药后试验持续28 d。于给药后第7、21、28天,分别采样测定各组血液参数、造血及免疫相关指标。【结果】与MC组相比,各给药组鸡在所有时间点的血清促红细胞生成素(EPO)含量、第21天的红细胞数和血红蛋白含量,以及第28天的血清免疫球蛋白A(IgA)、IgM、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)含量,脾脏指数和法氏囊指数,十二指肠、空肠及回肠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量及十二指肠IgM含量均显著升高(P<0.05);SW组鸡血清总蛋白含量及BZ、SW和SQ组鸡胸腺指数也显著高于MC组(P<0.05),且使用补益方剂后各组脾脏、法氏囊结构均有好转。与BC组相比,给药后第28天,除BQ组外,其余各给药组鸡血清IgA含量均显著升高(P<0.05);除SJ和BQ组外,其余各组鸡血清IgM含量均显著升高(P<0.05)。SW和BZ组在多项指标上表现出更强的作用,给药后第28天,其血清EPO、IL-2含量、脾脏指数、法氏囊指数及空肠、回肠sIgA和十二指肠IgM含量均显著高于BC组(P<0.05);SW组鸡血清IFN-γ和十二指肠sIgA含量、SJ组鸡法氏囊指数及SQ组鸡回肠sIgA含量也显著高于BC组(P<0.05)。【结论】5种补益方剂均能提高血虚型鸡的血液参数、造血及免疫相关指标,其中,四物汤、八珍汤效果较好,能使血虚型鸡的造血及免疫功能恢复至正常水平。 展开更多
关键词 补益方剂 血虚模型 血液参数 造血因子 免疫功能
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猪血凝性脑脊髓炎病毒河南株的分离鉴定
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作者 郭爽 康静静 +4 位作者 罗琴 于瑞 樊明明 李秀青 吴玉臣 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第3期75-81,共7页
为了明确河南地区猪场中猪凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)流毒株的物学特性,采集河南省信阳市某猪场的患病仔猪样本,进行病毒分离、细胞培养,电镜检测、病毒半数感染剂量(TCID50)测定、动物... 为了明确河南地区猪场中猪凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)流毒株的物学特性,采集河南省信阳市某猪场的患病仔猪样本,进行病毒分离、细胞培养,电镜检测、病毒半数感染剂量(TCID50)测定、动物试验以及病毒M、N基因的扩增和序列分析。结果:将分离获得的病毒接种于PK-15细胞后,可诱导明显的细胞病变效应,电镜负染可观察到星状近似球形的病毒粒子,并呈现典型帽子结构;攻毒后小鼠表现神经症状,脑组织病理学检查呈现病毒性脑炎特征,病变组织经PCR鉴定后,出现与PHEV目标片段大小一致的条带;N、M基因遗传进化树分析显示与JT06-China以及比利时的PHEV-VW572亲缘关系较近,属于流行毒株,未见明显变异。本研究结果可为河南猪场猪血凝性脑脊髓炎的防控提供理论依据。 展开更多
关键词 河南 猪血凝性脑脊髓炎病毒 病毒分离 变异毒株
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猪肠道病毒和猪捷申病毒双重荧光RT-PCR检测方法的建立
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作者 莫玲 于新友 +5 位作者 吕素芳 毕艳丽 张颖 李天芝 Ashenafi Kiros Wubshet 王文秀 《动物医学进展》 北大核心 2026年第2期49-53,共5页
为建立同时检测猪肠道病毒(PEV)和猪捷申病毒(PTV)的荧光RT-PCR方法,根据NCBI中PEV VP1(NCBI AF363453)和PTV VP1(NCBI GQ293092)基因序列,分别设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和扩增程序,建立了一种无需提取核酸即可同时检测PEV... 为建立同时检测猪肠道病毒(PEV)和猪捷申病毒(PTV)的荧光RT-PCR方法,根据NCBI中PEV VP1(NCBI AF363453)和PTV VP1(NCBI GQ293092)基因序列,分别设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和扩增程序,建立了一种无需提取核酸即可同时检测PEV和PTV的双重荧光RT-PCR检测方法,对该方法的特异性、敏感性及重复性进行评估,并对临床样品进行检测。结果表明,20μL体系中各引物和探针最适加入量为:PEV-F 0.8μL、PEV-R 1.3μL、PEV-P 0.6μL、PTV-F 1.2μL、PTV-R 1.4μL和PTV-P 0.7μL,优化后的扩增程序为:90℃3 min;60℃反转录5 min;95℃5 s,52℃退火延伸20 s(此处收集荧光),共计40个循环。该对猪常见病原均无扩增,对PEV和PTV检测敏感性分别为5.13 TCID 50/100μL和3.47 TCID 50/100μL,对135份临床样品检测结果与传统核酸提取法结果一致。成功建立了PEV和PTV的免提取核酸双重荧光RT-PCR方法,特异性好,敏感性高,可用于临床两种疑似病例的快速检测。 展开更多
关键词 猪肠道病毒 猪捷申病毒 免提取核酸 荧光PCR
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国外兽医器械行业监管概况
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作者 于遵波 胡剑武 +1 位作者 屠迪 郭辉 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第2期138-140,F0003,共4页
兽医器械在动物疫病防治中起着至关重要的作用,国际上对兽医器械的监管主要有美国模式和欧盟模式,本文以典型国家为例剖析了其法律设定和运行机制,介绍了国际医疗器械监管机构论坛(IMDRF)的工作机制,以及其指南文件对各国兽医器械规则... 兽医器械在动物疫病防治中起着至关重要的作用,国际上对兽医器械的监管主要有美国模式和欧盟模式,本文以典型国家为例剖析了其法律设定和运行机制,介绍了国际医疗器械监管机构论坛(IMDRF)的工作机制,以及其指南文件对各国兽医器械规则的指导作用。 展开更多
关键词 国外 兽医器械 监管 国际医疗器械监管机构论坛(IMDRF)
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一株猪流行性腹泻病毒G2b亚型细胞适应性毒株的复制特性及致病性
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作者 杨帆 胡国芳 +5 位作者 魏子文 周莹珊 宋厚辉 何海健 董婉玉 王晓杜 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第2期955-964,共10页
旨在探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行株细胞适应后的复制特性及致病性,本研究将分离自某规模化猪场的PEDV流行毒株在Vero细胞中连续传代至不同代次,分别评价该毒株在细胞上的生物学特性,并将第25代和第141代病毒接种至3日龄仔猪,以比较... 旨在探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行株细胞适应后的复制特性及致病性,本研究将分离自某规模化猪场的PEDV流行毒株在Vero细胞中连续传代至不同代次,分别评价该毒株在细胞上的生物学特性,并将第25代和第141代病毒接种至3日龄仔猪,以比较其致病性差异。结果表明:临床病料接种液盲传至第4代时,在Vero细胞上形成PEDV典型合胞体病变;传代至25代时,细胞病变形态与病毒滴度趋于稳定;传代至141代时,病毒滴度显著提高,并诱发更快速的细胞病变效应。间接免疫荧光试验(IFA)可特异性检出PEDV N蛋白表达,序列分析表明该毒株为G2b型。仔猪攻毒试验表明,与亲本低代次毒株(YJH/2017/F25)相比,YJH/2017/F141接种组未出现明显临床症状或组织病理损伤,且肛拭子病毒排放量显著减少,各项指标与DMEM对照组无显著差异,该毒株的致病性较低而具有较好安全性。以上结果说明该流行毒株在体外连续传代后获得了更好的细胞适应性且对新生仔猪的致病性降低,本研究为PEDV弱毒疫苗研发提供新的候选毒株,其全基因组序列和生物学特征也为后续重组病毒研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 G2b型 细胞适应毒株 生物学特性
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LSDV感染对牛环鸟苷酸-腺苷酸合成酶表达的影响及其细胞定位研究
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作者 罗逸青 吴瑞瑞 +8 位作者 景伟 苏洋 李小明 陈国华 房永祥 景志忠 何小兵 翟军军 张艳 《动物医学进展》 北大核心 2026年第2期54-60,共7页
为明确牛环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(bovine cyclic GMP-AMP synthase,bcGAS)遗传进化、细胞定位、组织和细胞表达谱,研究克隆了bcGAS基因,用MEGA-X软件构建了遗传进化树,随后将其连接到pCAGGS-HA和pCAGGS-GFP真核表达载体上,通过激光共聚... 为明确牛环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(bovine cyclic GMP-AMP synthase,bcGAS)遗传进化、细胞定位、组织和细胞表达谱,研究克隆了bcGAS基因,用MEGA-X软件构建了遗传进化树,随后将其连接到pCAGGS-HA和pCAGGS-GFP真核表达载体上,通过激光共聚焦显微镜检测其在HEK-293T和MDBK细胞中的定位情况,通过荧光定量PCR和Western blot,分别从mRNA和蛋白水平评价bcGAS在牛结节性皮肤病病毒(LSDV)感染不同组织和细胞中的表达差异,通过激光共聚焦显微镜检测其在HEK-293T和MDBK细胞中的定位情况。结果显示,bcGAS的基因全长为1542 bp,在遗传进化关系上相对保守,其中与家牛、水牛的亲缘关系最近,与绵羊、山羊和猪的亲缘关系较近,与鸡、草鱼和中华蟾蜍等亲缘关系较远;bcGAS主要定位于HEK-293T和MDBK细胞的细胞质内;bcGAS在不同组织和细胞的转录和表达水平均存在差异,其中在小肠、淋巴结和肺脏较高,在肝脏、心脏、肾脏和肌肉较低,在MDBK和BT细胞中较高,在BSC和BK细胞中较低;bcGAS主要定位于HEK-293T和MDBK细胞的细胞质内。本研究为进一步解析并阐明bcGAS的模式识别和抗病毒天然免疫机制研究奠定一定的理论基础。 展开更多
关键词 牛cGAS 基因克隆 细胞定位 表达谱 牛结节性皮肤病病毒
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