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月季ISSR反应体系的优化 被引量：10
1
作者 金凤 陈崇顺 +3 位作者 邹爱兰 曹伟杰 瞿大枞 杨燕燕 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第1期72-75,共4页
以萨曼莎月季为材料,对影响ISSR-PCR扩增的主要影响因子进行了优化,建立了适于月季的ISSR反应体系:25μl反应体积中,1×Buffer、1.5 mmol/L Mg2+、1 U Taq DNA聚合酶、0.6μmol/L引物、0.48 mmol/LdNTPs、20 ng模板DNA;并将该优化... 以萨曼莎月季为材料,对影响ISSR-PCR扩增的主要影响因子进行了优化,建立了适于月季的ISSR反应体系:25μl反应体积中,1×Buffer、1.5 mmol/L Mg2+、1 U Taq DNA聚合酶、0.6μmol/L引物、0.48 mmol/LdNTPs、20 ng模板DNA;并将该优化体系应用于其他5个ISSR引物和6个月季品种,证实了该体系的适用性和稳定性。 展开更多
关键词 月季 ISSR 反应体系优化
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月季茎段快繁体系的优化 被引量：7
2
作者 周晓馥 杨伟新 +3 位作者 丁雪 杜丰平 张鑫 徐洪伟 《北方园艺》 CAS 北大核心 2014年第22期98-102,共5页
以月季无菌苗茎段为试材,以MS为基础培养基,探究细胞分裂素6-BA、TDZ对茎段增殖的影响,TDZ与NAA 2种激素的配比对株高、节间的影响,及活性炭浓度对月季组培苗生根的影响。结果表明:月季单芽茎段在激素浓度为6-BA 4.0mg/L培养基上增殖数... 以月季无菌苗茎段为试材,以MS为基础培养基,探究细胞分裂素6-BA、TDZ对茎段增殖的影响,TDZ与NAA 2种激素的配比对株高、节间的影响,及活性炭浓度对月季组培苗生根的影响。结果表明:月季单芽茎段在激素浓度为6-BA 4.0mg/L培养基上增殖数最高,确定MS+6-BA 4.0mg/L+活性炭0.6g/L为月季茎段最适芽增殖培养基;当TDZ浓度为1.0mg/L,NAA浓度为0.05mg/L时,株高最大达5.02cm,节间长度最大达到0.40cm;月季茎段的最适生根培养基为1/2MS+活性炭1.0g/L,生根率为92.9%。 展开更多
关键词 月季 外源激素 活性炭 离体再生体系
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月季RhD14基因克隆、亚细胞定位及表达分析 被引量：1
3
作者 杜高齐 李雪娇 +2 位作者 许彬 关文灵 孟静 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期34-45,共12页
【目的】克隆月季独脚金内酯(SLs)信号应答底物受体即α/β折叠水解蛋白基因Dwarf 14(D14),对其进行亚细胞定位及表达分析,为探究该基因的生物学功能及其在SLs调控月季侧枝发生中的转导机制提供理论支持。【方法】以月季品种滇红为材料... 【目的】克隆月季独脚金内酯(SLs)信号应答底物受体即α/β折叠水解蛋白基因Dwarf 14(D14),对其进行亚细胞定位及表达分析,为探究该基因的生物学功能及其在SLs调控月季侧枝发生中的转导机制提供理论支持。【方法】以月季品种滇红为材料,克隆RhD14基因并进行生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其在不同组织中的表达情况,利用烟草瞬时转化系统对RhD14基因编码蛋白进行亚细胞定位。【结果】克隆RhD14基因(GenBank登录号OP009358)cDNA序列1094 bp,包含完整的开放阅读框(ORF),长度为1045 bp,编码347个氨基酸残基,蛋白分子式为C_(1738)H_(2703)N_(441)O_(510)S_(15),相对分子量为38.41 kD,理论等电点(pI)为5.71,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,且RhD14为无跨膜结构和信号肽的稳定蛋白,属于α/β水解酶家族,亚细胞定位于细胞质和细胞膜上。同源序列比对和系统发育进化树分析结果显示,RhD14蛋白的氨基酸序列与同属的古老月季品种月月粉RcD14(XP_024283944.1)的相似性最高为98.05%,其次是同亚科的草莓FvD14(XP_004287076.1),相似性为89.75%,三者亲缘关系较近。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)结果显示,RhD14基因在根、茎、叶、腋芽、节和顶芽中均有表达,其中RhD14基因在茎和腋芽中的相对表达量最高,极显著高于根(P<0.01,下同)。去顶处理后RhD14基因在茎和腋芽中的表达模式相似,均较未去顶处理明显上调表达,且随着处理时间的延长均呈先上升后下降的趋势,去顶处理后12 h达峰值,尤其是腋芽中RhD14基因在6、12、24和48 h的相对表达量与未去顶处理差异显著(P<0.05)或极显著。【结论】RhD14基因在细胞质和细胞膜上发挥作用,具有组织特异性,且受去顶诱导高效表达,推测该基因参与腋芽萌发过程。 展开更多
关键词 月季 D14基因 基因克隆 生物信息学分析 亚细胞定位 表达分析
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基于ISSR标记的藤本月季品种遗传多样性及其分子身份证的构建 被引量：3
4
作者 高鹏华 于文剑 +2 位作者 赵芮 熊阳阳 王锦 《江苏农业科学》 2019年第18期98-101,共4页
38个藤本月季品种ISSR分子标记结果表明,23条引物共扩增出212个多态性位点,多态性比率高达72.35%。基因分化系数GS值变化范围在0.755~0.971,变化幅度较小,品种亲缘关系较近。38个藤本月季品种的群体遗传参数中平均观测等位基因数为1.973... 38个藤本月季品种ISSR分子标记结果表明,23条引物共扩增出212个多态性位点,多态性比率高达72.35%。基因分化系数GS值变化范围在0.755~0.971,变化幅度较小,品种亲缘关系较近。38个藤本月季品种的群体遗传参数中平均观测等位基因数为1.973 5,平均有效等位基因数1.578 1,平均Nei’s基因多样性指数为0.372 6,平均Shannon’s信息指数为0.572 3。38个品种间的遗传分化系数(Gst)为0.785 6,基因流(Nm)为0.058 4,表明38个品种遗传多样性丰富。由聚类分析图可知,38个品种可聚为3个大类7个分支。以23条引物中多态性较好且能区分这38个供试品种的17条引物对不同品种扩增条带进行统计,建立了38个藤本月季品种的分子身份证。 展开更多
关键词 藤本月季 ISSR标记 亲缘关系 遗传多样性 分子身份证
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