成人下颈椎椎体与关节突关节倾角的X射线测量数据 被引量：11

1

作者 席新华 吴强 +4 位作者 唐华军 胡孔和 李康华 李雄 陈立科 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期662-666,共5页

背景：颈椎关节突关节倾角的文献多采用X射线侧位片椎体下缘线测量法，结果有较明显差异。对不同节段关节突关节倾角差异及因年龄的结构退行性变对其影响的研究较少。目的：测量成人下颈椎（C3-7，）关节突关节的倾角，并探讨年龄因素... 背景：颈椎关节突关节倾角的文献多采用X射线侧位片椎体下缘线测量法，结果有较明显差异。对不同节段关节突关节倾角差异及因年龄的结构退行性变对其影响的研究较少。目的：测量成人下颈椎（C3-7，）关节突关节的倾角，并探讨年龄因素对倾角的影响。设计、时间及地点：随机分组，测量实验，于2007—03／06在汕头大学医学院附属粤北人民医院完成。对象：选取2000—01／2006—12汕头大学医学院附属粤北人民医院骨科120例成年人颈椎侧位X射线平片，男58例，女62例；年龄16—75岁。方法：120例成人颈椎侧位X射线平片按年龄分为3组：16～30岁组（n=-38），31～50岁组（n-=43），51～75岁组（n=-39）。以传统的椎体下缘线和自行设计的椎体中线方法测量C3-7关节突关节倾角，比较2种方法不同年龄段的测量数据。主要观察指标：椎体下缘线法和椎体中线法测量颈椎C3-7关节突关节倾角数值。结果：①两种方法测量的下颈椎关节突关节倾角在30°～72°，各节段均值均大于50°，以C5为中心分布，C7〉C3〉C4〉C6〉C5。②两种方法测量的倾角均随年龄增大而减小，c5变化最明显。16～30岁组各节段关节突关节倾角差异均无显著性意义（P〉O．05）；椎体下缘线法测量31～50岁组C4～C6节段关节突关节倾角小于椎体中线法（P〈0．01）；在51～75岁组，椎体F缘线法测量C3～C6节段关节突关节倾角小于椎体中线法（P〈0．05～0．01）。结论：两种方法测量的倾角均随年龄增大而减小，椎体中线法受颈椎年龄因素退变的影响较小，是相对客观的一种测量方法。 展开更多

关键词 颈椎 关节突关节 X射线 测量

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Ⅰ型胶原酶阶段消化法体外培养、纯化及鉴定大鼠成骨细胞 被引量：10

2

作者 刘长剑 刘建国 +1 位作者 于铁成 罗宗键 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期525-527,共3页

目的建立科学有效的大鼠成骨细胞体外培养模式,建立成熟合理的体外培养大鼠成骨细胞鉴定程序。方法采用I型胶原酶阶段消化法来消化新生大鼠乳鼠颅骨,来获得成骨细胞进行体外培养、扩增和鉴定。通过绘制成骨细胞生长曲线,倒置相差显微镜... 目的建立科学有效的大鼠成骨细胞体外培养模式,建立成熟合理的体外培养大鼠成骨细胞鉴定程序。方法采用I型胶原酶阶段消化法来消化新生大鼠乳鼠颅骨,来获得成骨细胞进行体外培养、扩增和鉴定。通过绘制成骨细胞生长曲线,倒置相差显微镜进行细胞形态学观察,基质钙结节形成观察;进行钙-钴法碱性磷酸酶(ALP)染色;I型胶原免疫组化染色来观察、鉴定大鼠成骨细胞。结果Ⅰ型胶原酶改良阶段消化法获得的大鼠成骨细胞纯度较高,增殖较快;ALP染色可见体外培养成骨细胞胞浆内棕褐色阳性颗粒;免疫组化法检测I型胶原可见成骨细胞胞浆呈棕黄色阳性着色,显微镜计数阳性细胞比例为87.3%;体外培养超过3w的成骨细胞可见基质钙结节形成。结论Ⅰ型胶原酶阶段消化法原代培养大鼠成骨细胞是一种科学有效的成骨细胞原代培养方法。 展开更多

关键词 成骨细胞 原代培养 胶原酶

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改良成骨细胞体外培养和鉴定方法 被引量：12

3

作者 胡静 郑洪新 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期76-78,共3页

目的探讨理想的成骨细胞培养和鉴定方法。方法同时采用多次胶原酶消化法及骨片贴附法获得成骨细胞,应用Gomori改良钙钴法和在此基础上苏木精复染法做成骨细胞鉴定,通过做成骨细胞动态形态学观察和生物学鉴定,比较不同细胞培养法和鉴定... 目的探讨理想的成骨细胞培养和鉴定方法。方法同时采用多次胶原酶消化法及骨片贴附法获得成骨细胞,应用Gomori改良钙钴法和在此基础上苏木精复染法做成骨细胞鉴定,通过做成骨细胞动态形态学观察和生物学鉴定,比较不同细胞培养法和鉴定法。结果多次胶原酶消化法获得的成骨细胞数量更多,纯度更高,密度更均匀一致,多数细胞处于同一个生长周期;在改良钙钴法基础上做苏木精复染,成骨细胞结构更清楚,棕黑色颗粒分布位置更清晰可见,和阴性对照比较差异更显著。结论多次胶原酶消化法获得的成骨样细胞更适于做体外实验研究模型;采用苏木精复染法做成骨细胞鉴定更有效。 展开更多

关键词 成骨细胞/生理学 形态学 碱性磷酸酶 酶消化法 攀定 细胞培养

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常规足正侧位跗跖关节X线解剖特征分析 被引量：3

4

作者 贾晓英 张泽坤 +4 位作者 吴慧钊 李旭 姜乐 蔡亚男 任国山 《河北医药》 CAS 2013年第23期3575-3577,共3页

目的分析常规足正位、侧位对跗跖关节的显示情况及其影像学特征。方法回顾性分析41例足部骨质未见明显异常的正侧位x线片，右足15例，左足26例；包括男21例，女20例；年龄18～68岁，平均年龄39．1岁。两位高级职称影像医师分别对足正位... 目的分析常规足正位、侧位对跗跖关节的显示情况及其影像学特征。方法回顾性分析41例足部骨质未见明显异常的正侧位x线片，右足15例，左足26例；包括男21例，女20例；年龄18～68岁，平均年龄39．1岁。两位高级职称影像医师分别对足正位第1～5跗跖关节评分，对第1、2跖骨基底间隙进行测量；对足侧位跗跖关节面与足底夹角进行测量。结果两位影像医师测量数据之间比较差异无统计学意义（P〉0．05），各年龄段间比较、男女之间以及左右足之间比较差异均无统计学意义（P〉O．05）；两住影像医师足正位评分第1、2、3、5跗跖关节基本能够满足诊断（包括评分2分和3分）所占比率不足5％，第4跗跖关节不足50％；第1、2、3、5跗跖关节清晰的显示关节面和关节间隙（评分3）所占的比率为0，第4跗跖关节仅为4．9％；足正位第1、2跖骨基底间距离（0．14±0．04）cm；足侧位跗跖关节面与足底夹角为（60．87±1．81）°。结论常规足前后位不能充分显示跗跖关节而满足诊断需要，第1、2跖骨基底间距离平均为0．14em，跗跖关节面与足底平均夹角为60．87°。 展开更多

关键词 跗跖关节 足 数字化X线摄影术 影像学

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不同中药含药血清对体外培养成骨细胞影响的实验研究 被引量：10

5

作者 邵敏 赵静 王斌 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2006年第5期19-21,共3页

目的:研究中药骨康及其中补肾、健脾、活血各成分吸收后不同血清对离体大鼠成骨细胞增殖的影响及其对成骨细胞分泌白介素-6(1L-6)的影响。方法:采用胶原-胰蛋白酶消化法获得新生大鼠的成骨细胞,然后以中药骨康及其中补肾、健脾、活血成... 目的:研究中药骨康及其中补肾、健脾、活血各成分吸收后不同血清对离体大鼠成骨细胞增殖的影响及其对成骨细胞分泌白介素-6(1L-6)的影响。方法:采用胶原-胰蛋白酶消化法获得新生大鼠的成骨细胞,然后以中药骨康及其中补肾、健脾、活血成分吸收后血清,加入体外培养成骨细胞中进行培养,MTT法测成骨细胞增殖,ELISA法测培养上清中IL-6含量。结果:发现中药骨康吸收后血清能促进成骨细胞的增殖和分化,补肾成分吸收后血清亦能促进成骨细胞的增殖和分化,健脾、活血各成分吸收后血清对成骨细胞无明显影响,同时,中药骨康及其中补肾成分含药血清可作用于成骨细胞,使分泌其IL-6的能力下降。而中药骨康含药血清的作用明显优于补肾成分含药血清的作用。结论:中药骨康及其中补肾成分含药血清能够促进成骨细胞的增殖与分化从而促进骨形成,同时可抑制成骨细胞分泌IL-6,健脾、活血二法是补肾法的良好补充。 展开更多

关键词 骨质疏松症 成骨细胞 白介素-6 中药

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颈椎关节突关节面倾角测量特点及临床意义 被引量：8

6

作者 王怀云 何海龙 +3 位作者 李华 张桦 朱云荣 叶晓健 《脊柱外科杂志》 2011年第6期357-359,共3页

目的观察正常成年人下颈椎关节突关节面倾斜角度测量特点,探讨其正常值范围及临床意义。方法随机抽取门诊正常成年人颈椎侧位X线片500张,利用Unisight放射影像处理软件逐个测量其C3～7小关节突关节面倾角。结果 C3～7倾角大小依次分别为... 目的观察正常成年人下颈椎关节突关节面倾斜角度测量特点,探讨其正常值范围及临床意义。方法随机抽取门诊正常成年人颈椎侧位X线片500张,利用Unisight放射影像处理软件逐个测量其C3～7小关节突关节面倾角。结果 C3～7倾角大小依次分别为:61.9°±5.4°、54.8°±4.7°、50.7°±4.9°、55.8°±5.1°、63.4°±5.3°。C3～7倾角值大小呈"U"形分布,以C5最小,C7最大,各倾角均值>45°。经统计分析,各个下颈椎小关节突关节面倾角大小比较可以概括为C7>C3>C4=C6>C5。结论下颈椎小关节突关节面倾角不同,了解其分布特点有利于理解颈椎生物力学特性及相关颈椎疾病、颈椎外伤的发病机制。 展开更多

关键词 颈椎 椎关节突关节 摄影测量法

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腘动脉解剖对下肢动脉CT血管造影选择监测层面的影响 被引量：1

7

作者 王国良 倪炯 +2 位作者 张炜 陈惟 王培军 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期221-224,共4页

目的观察下肢动脉CT血管造影(CTA)扫描不同膝关节层面腘动脉的解剖走行,探讨下肢CTA的最佳腘动脉监测层面。方法回顾性分析2012年5月至2013年4月间47例(共94侧)糖尿病患者腘动脉图像,将其分为髌骨上缘组、髌骨正中组及髌骨下缘组。分析... 目的观察下肢动脉CT血管造影(CTA)扫描不同膝关节层面腘动脉的解剖走行,探讨下肢CTA的最佳腘动脉监测层面。方法回顾性分析2012年5月至2013年4月间47例(共94侧)糖尿病患者腘动脉图像,将其分为髌骨上缘组、髌骨正中组及髌骨下缘组。分析腘动脉与腘静脉的关系及腘动脉斑块的发生情况。结果髌骨上缘组中有76侧腘动脉位于腘静脉前内侧,11侧位于腘静脉正前方,1侧位于外前方,1侧位于正外方,5侧有血管干扰显示不清。髌骨正中组中有68侧腘动脉位于腘静脉前内侧,10侧位于腘静脉正前方,3侧位于外前方,1侧位于外后方,12侧有血管干扰显示不清。髌骨下缘组中有41侧腘动脉位于腘静脉前内侧,17侧位于腘静脉正前方,4侧位于外前方,1侧位于正外方,2侧位于外后方,29侧有血管干扰显示不清。经χ2检验,髌骨上缘和正中层面的腘动脉稳定性较髌骨下缘层面高(P<0.05),血管干扰少(P<0.05)。髌骨上缘层面腘动脉斑块发现率[44.68%(42/94)]高于髌骨正中层面[25.53%(24/94),P<0.05]。结论髌骨正中层面可作为下肢动脉CTA腘动脉监测的最佳监测层面。当髌骨正中层面腘动脉辨认困难时,可选择髌骨上缘层面作为替代监测层面。 展开更多

关键词 螺旋计算机体层摄影术 血管造影术 腘动脉 解剖学

原文传递

乳鼠心肌细胞的培养改进 被引量：4

8

作者 王志勇 周立 +1 位作者 郭义威 孙永琨 《医学信息（内.外科版）》 2009年第3期240-241,共2页

目的探讨原代心肌细胞培养的条件和方法。方法采用胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ型和透明质酸酶混合消化分离心肌组织,差速贴壁和化学抑制法相结合纯化心肌细胞。结果心肌细胞未贴壁时呈圆形,24 h后贴壁生长,伸出伪足,呈三角形、多边形等,细胞完整... 目的探讨原代心肌细胞培养的条件和方法。方法采用胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ型和透明质酸酶混合消化分离心肌组织,差速贴壁和化学抑制法相结合纯化心肌细胞。结果心肌细胞未贴壁时呈圆形,24 h后贴壁生长,伸出伪足,呈三角形、多边形等,细胞完整,细胞核大且胞浆丰富,立体感明显,折光性强。3～4 d后伪足可相互接触交织成网,形成细胞单层或细胞簇,其搏动同步化。结论该心肌细胞培养方法存活率较高,是一种可靠的的心肌细胞培养方法。 展开更多

关键词 心肌细胞 原代培养 新生大鼠

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人单核巨噬细胞泡沫化抑制剂筛选模型的建立及应用

9

作者 巫晔翔 刘明 +3 位作者 洪斌 司书毅 王娟 樊秀勇 《中国药师》 CAS 2004年第7期493-496,共4页

目的 :建立人单核巨噬细胞泡沫化抑制剂筛选模型 ,筛选得到可抑制细胞泡沫化的抑制剂。方法 :U937单核细胞经 10 0nmol·L-1佛波酯 (PMA)诱导 72h分化为巨噬细胞后 ,换无血清培养液于 96孔板中 ,每毫升含巨噬细胞 1× 10 6个 ,... 目的 :建立人单核巨噬细胞泡沫化抑制剂筛选模型 ,筛选得到可抑制细胞泡沫化的抑制剂。方法 :U937单核细胞经 10 0nmol·L-1佛波酯 (PMA)诱导 72h分化为巨噬细胞后 ,换无血清培养液于 96孔板中 ,每毫升含巨噬细胞 1× 10 6个 ,每孔再加入 80mg·L-1氧化的低密度脂蛋白 (ox -LDL) ,37℃培养 4 8h ,建立单核巨噬细胞泡沫化模型。利用微生物发酵液 ,或单一的化合物样品与其共孵育 ,油红。染色后观察细胞胞内变化 ,寻找对泡沫细胞形成有抑制作用的样品。利用基因工程技术表达的人清道夫受体A类II型的胞外部分 ,在本模型中可抑制巨噬细胞泡沫化的形成 ,进一步验证了模型的可行性。结果 :从 2 0 0 0个微生物发酵液中筛选到 6株微生物发酵液为阳性 ,从 10个化合物中发现一个有抑制巨噬细胞泡沫化活性的新化合物。结论 展开更多

关键词 泡沫细胞 U937 细胞系 氧化的低密度脂蛋白 筛选模型 微生物次级代谢产物

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粘附分子CD44在舌癌癌旁组织中的表达及意义

10

作者 马净植 逄爱慧 +1 位作者 王戎 吴成虎 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期375-377,共3页

目的评价舌鳞状细胞癌癌旁无瘤上皮(ANTE)中粘附分子CD44的表达及与临床病理指标之间的关系。方法应用免疫组织化学的方法分析52例舌癌癌组织和ANTE中CD44的表达。结果CD44在正常口腔粘膜上皮基底细胞层和近基底1/3上皮细胞膜上表达,而... 目的评价舌鳞状细胞癌癌旁无瘤上皮(ANTE)中粘附分子CD44的表达及与临床病理指标之间的关系。方法应用免疫组织化学的方法分析52例舌癌癌组织和ANTE中CD44的表达。结果CD44在正常口腔粘膜上皮基底细胞层和近基底1/3上皮细胞膜上表达,而在上皮表层细胞无表达。大部分癌组织中CD44低表达或高表达的病例,其ANTE中CD44亦呈相应的低表达或高表达。统计学分析表明,ANTE中CD44的表达水平与临床分期、淋巴结转移、生存周期存在明显的相关性(P<0.05)。结论CD44在ANTE中的表达下调或缺失表达可被认为是舌癌发生和浸润的标志之一,对舌癌的治疗和预后评估有一定的指导意义。 展开更多

关键词 CD44 舌鳞状细胞癌 癌旁无瘤上皮

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重组人VEGF基因对游离组织移植物血管形成的作用

11

作者 刘嘉锋 钟文慧 +4 位作者 张一鸣 易传勋 张俊 刘宇兰 聂祝峰 《中国美容医学》 CAS 2007年第10期1325-1328,共4页

目的:研究重组人血管内皮生长因子(VEGF)基因对游离皮瓣、皮片及游离颗粒脂肪等移植物血管形成的作用。方法:将带有PCD-VEGF165的大肠杆菌接种到LB培养基中,通过碱分裂法制备PCD-VEGF165质粒,再用反蒸发法将质粒包埋于脂质体中。将108... 目的:研究重组人血管内皮生长因子(VEGF)基因对游离皮瓣、皮片及游离颗粒脂肪等移植物血管形成的作用。方法:将带有PCD-VEGF165的大肠杆菌接种到LB培养基中,通过碱分裂法制备PCD-VEGF165质粒,再用反蒸发法将质粒包埋于脂质体中。将108只雄性SD大鼠均分为三组,每组36只,每组再分三小组,分别为PCD-VEGF165目的基因组、PCD空白质粒组和生理盐水组,注入后在不同时间点取标本做成石蜡块行常规染色以观察血管生长情况。结果:三种移植组织中目的基因组微血管密度均显著高于其他两对照组(P<0.01),血管直径明显小于对照组(P<0.05),空白质粒组及生理盐水组差异无显著性意义(P>0.05)。结论:VEGF基因生物活性稳定,特异性强,持续时间长。注射转VEGF基因的质粒后可诱导移植组织周围新血管的形成,增加血流灌注。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子(VEGF) 血管形成 皮瓣 皮片 游离颗粒脂肪

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转化生长因子β1和胰岛素样生长因子1对体外培养人退变髓核细胞生物学活性的影响 被引量：12

12

作者 王磊 吴小涛 +1 位作者 史志英 靳激扬 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2007年第3期218-221,I0004,共5页

目的:观察在体外培养条件下转化生长因子β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)对人退变髓核细胞生物学活性的影响。方法:体外培养人退变髓核细胞,台盼蓝染色法测定活细胞率。将每份髓核细胞样本分为对照组、TGF-β1组和TGF-β1+IGF-... 目的:观察在体外培养条件下转化生长因子β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)对人退变髓核细胞生物学活性的影响。方法:体外培养人退变髓核细胞,台盼蓝染色法测定活细胞率。将每份髓核细胞样本分为对照组、TGF-β1组和TGF-β1+IGF-1组。采用考马斯亮蓝法测定TGF-β1和IGF-1干预后第0、2、4、6天细胞内总蛋白含量。采用免疫组织化学和免疫荧光化学染色方法测定细胞在TGF-β1和IGF-1干预后0～6d合成Ⅱ型胶原的情况。结果:体外培养人退变髓核细胞的活细胞率为90%～95%。干预后第4、6天TGF-β1组和TGF-β1+IGF-1组与对照组比较、TGF-β1+IGF-1组与TGF-β1组比较细胞内总蛋白含量均显著增加(P<0.05),TGF-β1+IGF-1组Ⅱ型胶原的合成较对照组显著增加(P<0.05);干预后第6天TGF-β1组和TGF-β1+IGF-1组与对照组比较、TGF-β1+IGF-1组与TGF-β1组比较Ⅱ型胶原均显著增加(P<0.05)。结论:一定浓度的TGF-β1能够促进人退变髓核细胞合成Ⅱ型胶原,改善其生物学活性,合用TGF-β1和IGF-1上述作用更加明显。 展开更多

关键词 椎间盘退变 髓核细胞 细胞培养 转化生长因子Β1 胰岛素样生长因子1

原文传递

蕨麻正丁醇部位对大鼠海马神经元缺氧致钙超载的抑制作用 被引量：7

13

作者 卜婧 张永亮 +2 位作者 李灵芝 龚海英 李建宇 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第2期133-137,共5页

目的细胞内钙超载被认为是诱发神经元变性和死亡的关键因素。文中研究蕨麻正丁醇部位(n-butanol extract of Potentilla anserina L,NP)对大鼠海马神经元急性缺氧所致钙超载的抑制作用。方法采用体外原代培养的海马神经元建立缺氧所致... 目的细胞内钙超载被认为是诱发神经元变性和死亡的关键因素。文中研究蕨麻正丁醇部位(n-butanol extract of Potentilla anserina L,NP)对大鼠海马神经元急性缺氧所致钙超载的抑制作用。方法采用体外原代培养的海马神经元建立缺氧所致钙超载的实验模型,分为正常对照组、缺氧模型组、尼莫地平干预组以及NP高、中、低剂量干预组。通过免疫荧光双染观察蕨麻正丁醇部位对海马神经元急性缺氧所致微管相关蛋白2(microtuble-associated protein2,MAP2)的保护作用。利用荧光分光光度计检测各组细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)。通过半定量RT-PCR、免疫细胞化学染色及Western blot技术检测各组钙依赖中性蛋白酶1(Calpain 1)在基因及蛋白质水平的表达差异。结果缺氧3 h模型组与正常组相比较,神经元特异性细胞骨架蛋白MAP2被水解,细胞骨架形态的被破坏,[Ca2+]i显著升高,Calpain 1在基因和蛋白水平的表达量明显增加,细胞骨架发生破坏。NP各剂量干预明显抑制神经元特异性细胞骨架蛋白MAP2水解,减轻细胞骨架形态的破坏,且显著降低缺氧神经元[Ca2+]i(P<0.05);并且下调了Calpain 1在基因和蛋白的表达水平(P<0.05)。结论急性缺氧3 h可使神经元细胞内发生钙超载,NP可有效抑制缺氧所致神经元细胞钙超载,而发挥神经元作用。 展开更多

关键词 蕨麻正丁醇部位 海马神经元 缺氧 钙超载 钙依赖中性蛋白酶1

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新生鼠肺成纤维细胞原代培养方法的比较与体外肌成纤维细胞分化模型的建立 被引量：10

14

作者 孙月 徐洪 +6 位作者 徐丁洁 魏中秋 于婉莹 邓海静 薛新新 杜世璞 杨方 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第2期129-132,共4页

目的肌成纤维细胞(fibroblasts,FB)是器官纤维化形成过程中关键的靶细胞,以特异表达α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和细胞基质沉积为特征。文中比较胰蛋白酶消化法和组织贴壁法原代培养乳鼠肺FB的优缺点,并报道体外... 目的肌成纤维细胞(fibroblasts,FB)是器官纤维化形成过程中关键的靶细胞,以特异表达α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和细胞基质沉积为特征。文中比较胰蛋白酶消化法和组织贴壁法原代培养乳鼠肺FB的优缺点,并报道体外肌FB分化模型的建立。方法分别采用胰蛋白酶消化法和组织贴壁法原代培养乳鼠肺FB,倒置相差显微镜观察原代培养,MTT法检测细胞增殖,免疫细胞化学染色法鉴定细胞来源,采用转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导FB向肌FB分化。结果采用胰蛋白酶消化法和组织块贴壁法均可以成功原代培养鼠胚肺FB,2种方法无论在形态、细胞增殖水平还是在细胞鉴定方面均无差异,但胰蛋白酶消化法在相同条件下能够快速获得较组织贴壁法更多的细胞,且2种方法获得的FB在4代之内均不表达α-SMA,需经TGF-β1诱导分化为肌FB。随TGF-β1诱导时间的延长,α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达上调。结论胰酶消化法较组织贴壁法能快速、大量获得纯度较高的FB,4代以内的乳鼠FB适合建立肌FB分化模型。 展开更多

关键词 成纤维细胞 原代培养 肌成纤维细胞

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毛囊无黑素性黑素细胞的分离和培养 被引量：4

15

作者 张汝芝 朱文元 +1 位作者 王大光 马慧军 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期509-511,共3页

目的:分离和培养毛囊无黑素性黑素细胞,探讨其生物学特性。方法:采用胶原酶V游离毛囊,0.5％分离酶消化婴幼儿包皮。0.05％,胰酶和0.53 mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)消化游离的毛囊和来自包皮的表皮,分别制备单细胞悬液进行培养。传至第3代... 目的:分离和培养毛囊无黑素性黑素细胞,探讨其生物学特性。方法:采用胶原酶V游离毛囊,0.5％分离酶消化婴幼儿包皮。0.05％,胰酶和0.53 mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)消化游离的毛囊和来自包皮的表皮,分别制备单细胞悬液进行培养。传至第3代,待细胞爬上盖玻片后,分别以NKI/beteb和HMB-45单抗染色。结果:毛囊的培养细胞,绝大多数为双极细胞,增殖较快,被NKI/beteb单抗识别,而HMB-45染色阴性。包皮的黑素细胞染色结果则与之相反。结论:毛囊的外根鞘中存在功能和形态上不成熟的无黑素性黑素细胞(AMMC)。AMMC长期培养的成功,有利于研究AMMC在毛囊生物学中所起的作用。 展开更多

关键词 外毛根鞘 无黑素性黑素细胞 培养 分离

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SD大鼠毛乳头细胞体外培养及组织工程皮肤的构建 被引量：4

16

作者 凡孝菊 陆伟 +3 位作者 余春艳 徐军军 李裕强 金岩 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期321-324,共4页

目的了解SD大鼠毛乳头细胞(DPCs)体外培养的生长特性,并用其构建组织工程双层皮肤。方法分离大鼠触须部获取完整毛囊,胶原酶消化获取毛乳头组织,组织块法培养毛乳头细胞并传代。以Ⅰ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin-α,S... 目的了解SD大鼠毛乳头细胞(DPCs)体外培养的生长特性,并用其构建组织工程双层皮肤。方法分离大鼠触须部获取完整毛囊,胶原酶消化获取毛乳头组织,组织块法培养毛乳头细胞并传代。以Ⅰ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin-α,SMA-α)、CK抗体免疫组化法鉴定细胞,MTT法检测并绘制细胞生长曲线。将第二代DPCs作为真皮种子细胞,角质形成细胞作为表皮种子细胞,用气-液面培养制备组织工程双层皮肤,HE染色观察其组织学结构。结果成功培养DPCs并传代,Ⅰ型胶原、SMA-α染色阳性;成功构建出含表皮与真皮层的组织工程双层皮肤。结论体外培养得到的DPCs与表皮结合较好,可作为组织工程皮肤的种子细胞。 展开更多

关键词 毛乳头细胞 细胞培养 生物学特性 组织工程皮肤

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大鼠牙乳头细胞体外培养和矿化的实验研究 被引量：5

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作者 汪平 王宇 +1 位作者 何宇 袁渝萍 《口腔医学》 CAS 2003年第1期1-3,共3页

目的　观察体外培养的大鼠第一磨牙牙乳头细胞的生物学特征。方法　大鼠第一磨牙牙乳头细胞培养 ,免疫组织化学染色、钙盐染色。结果　培养的大鼠牙乳头细胞表达Ⅲ型胶原、纤维黏连蛋白、碱性磷酸酶 ,当细胞培养于含 5mmol/Lβ-磷酸甘... 目的　观察体外培养的大鼠第一磨牙牙乳头细胞的生物学特征。方法　大鼠第一磨牙牙乳头细胞培养 ,免疫组织化学染色、钙盐染色。结果　培养的大鼠牙乳头细胞表达Ⅲ型胶原、纤维黏连蛋白、碱性磷酸酶 ,当细胞培养于含 5mmol/Lβ-磷酸甘油钠和 5 0 μg/mlL -维生素C的培养液中时 ,细胞可形成矿化的胞外基质。结论　培养的大鼠牙乳头细胞保留体内的某些特征 。 展开更多

关键词 实验研究 细胞培养 乳头细胞 矿化 牙髓组织

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成纤维细胞体外培养、冻存及复苏的实验研究 被引量：7

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作者 李惠斌 蔡景龙 +2 位作者 潘博 刘振中 安纲 《中国美容医学》 CAS 2005年第4期394-396,i0002,共4页

目的:探讨正常皮肤和瘢痕疙瘩组织成纤维细胞在体外培养情况下其生物学特性的差异,以及与细胞冻存和复苏的方法及其应用价值。方法:对8例正常皮肤和8例瘢痕疙瘩组织标本分别进行体外成纤维细胞的原代培养、传代培养,观察培养的成纤维细... 目的:探讨正常皮肤和瘢痕疙瘩组织成纤维细胞在体外培养情况下其生物学特性的差异,以及与细胞冻存和复苏的方法及其应用价值。方法:对8例正常皮肤和8例瘢痕疙瘩组织标本分别进行体外成纤维细胞的原代培养、传代培养,观察培养的成纤维细胞形态,并作生长曲线比较细胞增殖情况。选取处于对数生长期的培养细胞梯度降温后置入液氮(-196℃)中保存4～6个月,进行细胞复苏培养,以2%台盼蓝确定细胞活力,并观察复苏的成纤维细胞形态学状况。结果:体外培养的正常皮肤和瘢痕疙瘩组织成纤维细胞形态和生长曲线基本相同,但瘢痕疙瘩原代成纤维细胞萌出生长较正常皮肤快,生长融合后成纤维细胞排列紊乱,极性消失,有明显的交叉重叠现象;体外培养的成纤维细胞,经冷冻保存4～6个月后,复苏率超过80%,细胞形态无明显改变。结论:体外培养的正常皮肤和瘢痕疙瘩组织成纤维细胞形态与生长特性基本相同。瘢痕疙瘩成纤维细胞可成功冻存和复苏。 展开更多

关键词 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 细胞培养 冻存 复苏

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JNK信号通路对亚急性帕金森病MPTP模型小鼠黑质iNOS表达的影响 被引量：2

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作者 王永生 张宇新 +4 位作者 李会 王素娟 周洪霞 司道文 张作凤 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期348-351,共4页

目的：研究JNK在1-甲基4-苯基-1，2，3，6-四氢毗啶（MPTP）所致小鼠帕金森病（PD）模型中对诱导型一氧化氮合酶（iNOs）表达的调控作用，探讨PD黑质多巴胺（DA）能神经元变性失活的可能机制。方法：采用神经毒素MPTP制备亚急性PD小鼠... 目的：研究JNK在1-甲基4-苯基-1，2，3，6-四氢毗啶（MPTP）所致小鼠帕金森病（PD）模型中对诱导型一氧化氮合酶（iNOs）表达的调控作用，探讨PD黑质多巴胺（DA）能神经元变性失活的可能机制。方法：采用神经毒素MPTP制备亚急性PD小鼠模型，健康雄性C57BL／6N小鼠随机分为模型组、JNK抑制剂组和对照组，采用行为学观察、免疫组织化学和免疫印迹法，观察模型小鼠行为学变化及中脑黑质酪氨酸羟化酶（TH）、iNOS和磷酸化cJun（p-c-Jun）的表达变化；观察给予JNK通路特异性抑制剂SP600125对上述变化的影响。结果：与对照组相比，模型小鼠出现典型PD样症状。中脑黑质区TH阳性神经元下降约65％，中脑黑质TH表达水平显著降低约75％；黑质区iNOS和p-c-Jun阳性细胞明显增加，且矿pJun特异性表达于细胞核，中脑黑质iNOS与p-c-Jun表达水平明显升高。经SP600125处理后，模型小鼠PD样症状减轻，与对照组比较，TH阳性细胞数和TH表达水平仅下降约15％和25％，与模型组比较，黑质区iNOS与p-c-Jun阳性细胞减少，且p-c-Jun仅表达于胞质，中脑黑质iNOS与p-c-Jun表达水平明显下降。结论：JNK通路在MPTP诱导的亚急性PD小鼠黑质iNOS表达中可能起重要的调控作用；JNK通路特异性抑制剂SP600125可能对帕金森病小鼠具有一定的神经保护作用。 展开更多

关键词 帕金森病 诱导型一氧化氮合酶 JNK通路 酪氨酸羟化酶 C57BL/6N小鼠 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢 吡啶

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大鼠主动脉内皮细胞和平滑肌细胞的原代培养及生物学特性比较 被引量：4

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作者 胡少勃 宋自芳 +1 位作者 郑启昌 聂君 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期349-353,共5页

目的培养大鼠主动脉平滑肌细胞和内皮细胞,细胞纯化与鉴定,比较生物学特性的差异。方法采用血管环贴壁法培养动脉内皮细胞,组织块贴壁法培养动脉平滑肌细胞,并采用有限稀释法挑选内皮细胞单克隆,免疫细胞荧光鉴定二者的特异性标志,相差... 目的培养大鼠主动脉平滑肌细胞和内皮细胞,细胞纯化与鉴定,比较生物学特性的差异。方法采用血管环贴壁法培养动脉内皮细胞,组织块贴壁法培养动脉平滑肌细胞,并采用有限稀释法挑选内皮细胞单克隆,免疫细胞荧光鉴定二者的特异性标志,相差显微镜观察二者单个细胞及细胞群体在形态上的差异性,CCK-8试剂盒检测细胞的增殖,比较二者对胰酶消化,粘附,冻存后复苏的情况。结果血管环贴壁法成功培养血管内皮细胞,组织块培养法成功培养出血管平滑肌细胞,内皮细胞能够形成单克隆集落,培养的细胞均表达相应的特异性标志,内皮细胞增殖速度和平滑肌细胞有差异,内皮细胞对胰酶的耐受性较差,内皮细胞粘附所需时间短,对冻存后的耐受性较好。结论组织块贴壁法适合内皮细胞和平滑肌细胞的培养,有限稀释法能够纯化原代培养的内皮细胞,大鼠主动脉平滑肌细胞和内皮细胞在细胞形态、增殖、粘附、对胰酶的反应、冻存后复苏均存在差异。 展开更多

关键词 内皮细胞 平滑肌细胞 平滑肌样细胞 细胞培养

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