人脐带间充质干细胞对宫颈癌Hela细胞增殖的影响 被引量：6

1

作者 刘华 陈亚娜 +4 位作者 郑燕 陈莉 李财新 庄秀萍 汪运山 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第6期29-33,39,共6页

目的探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)对宫颈癌细胞生物学特性的影响。方法分离培养脐带MSCs,将MSCs或其条件培养基与宫颈癌细胞Hela共培养,生长曲线、集落形成实验及RT-PCR分别检测MSCs细胞或条件培养基对Hela细胞增殖及凋亡相关基因表达... 目的探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)对宫颈癌细胞生物学特性的影响。方法分离培养脐带MSCs,将MSCs或其条件培养基与宫颈癌细胞Hela共培养,生长曲线、集落形成实验及RT-PCR分别检测MSCs细胞或条件培养基对Hela细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响。结果生长曲线结果显示,MSCs细胞及条件培养液可抑制Hela细胞增殖,并呈现一定的浓度依赖性。集落形成实验结果显示,MSCs条件培养液可抑制Hela细胞集落形成能力;RT-PCR结果显示,MSCs条件培养基促进Hela细胞P53、Bax及caspase-3基因表达,下调Bcl-2及survivin表达。结论 MSCs体外可促进宫颈癌细胞凋亡,抑制Hela细胞增殖。 展开更多

关键词 间充质干细胞 肿瘤细胞 增殖 细胞凋亡

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重组反义c-myc腺病毒抑制K562细胞生长、诱导凋亡的作用 被引量：4

2

作者 陈龙 陈洁平 +1 位作者 林晨 张芳 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期24-27,36,共5页

目的研究重组反义c-myc腺病毒(Ad-AS-c-myc)对人慢性粒细胞K562细胞系抑制生长,诱导凋亡作用及分子机制,探讨Ad-AS-c-myc用于慢性粒细胞白血病基因治疗的可能性。方法采用重组腺病毒Lac-Z(Ad-LacZ)及Ad-AS-c-myc联合多聚季胺转染K562细... 目的研究重组反义c-myc腺病毒(Ad-AS-c-myc)对人慢性粒细胞K562细胞系抑制生长,诱导凋亡作用及分子机制,探讨Ad-AS-c-myc用于慢性粒细胞白血病基因治疗的可能性。方法采用重组腺病毒Lac-Z(Ad-LacZ)及Ad-AS-c-myc联合多聚季胺转染K562细胞,X-gal染色判断转染效率。采用形态学、MTT试验、RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞仪及免疫细胞化学等方法进行研究。结果多聚阳离子可提高腺病毒载体对K562细胞的转染,Ad-LacZ+多聚季胺转染率达86%。Ad-AS-c-myc能抑制K562细胞c-myc基因在转录水平的表达,K562细胞生长受抑(抑制率38%);Ad-AS-c-myc可使K562细胞G1、G2期阻滞,增殖相关基因PCNA表达降低,Apo2.7蛋白阳性细胞率增高,DNA电泳出现DNA梯形条带。结论Ad-AS-c-myc对K562细胞具有抑制生长及诱导凋亡作用,其生物学作用与K562细胞c-myc及PCNA的表达降低有关。Ad-AS-c-myc在慢性粒细胞白血病基因治疗中具有潜在的临床价值。 展开更多

关键词 白血病 髓样 慢性 基因 myc 寡脱氧核糖核苷酸类 反义 转染 K562细胞

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盐酸埃克替尼对人肺癌HCC827细胞Akt通路活化和凋亡相关蛋白表达的影响 被引量：6

3

作者 穆晓东 张晔 +4 位作者 曲秀娟 侯科佐 康健 刘云鹏 胡雪君 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第4期686-689,共4页

目的:探讨酪氨酸蛋白激酶抑制剂盐酸埃克替尼(Icotinib)对人非小细胞肺癌(NSCLC)HCC827细胞Akt通路的活化和凋亡相关蛋白PARP、Caspase-3和Caspase-8表达的影响。方法:将体外培养的人肺癌HCC827细胞分为Icotinib处理组和未处理的对照组... 目的:探讨酪氨酸蛋白激酶抑制剂盐酸埃克替尼(Icotinib)对人非小细胞肺癌(NSCLC)HCC827细胞Akt通路的活化和凋亡相关蛋白PARP、Caspase-3和Caspase-8表达的影响。方法:将体外培养的人肺癌HCC827细胞分为Icotinib处理组和未处理的对照组,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测Icotinib对细胞增殖的抑制作用,采用Western blot检测蛋白表达,应用SPSS 13.0进行统计学分析。结果:Icotinib处理HCC827细胞48h的IC50为0.65μmol/L;选用0.001、0.01μmol/L和0.1μmol/L的Icotinib分别作用HCC827细胞48h,细胞凋亡率分别为(3.35±1.77)%、(8.95±3.18)%和(20.4±3.12)%(P<0.05)。与对照组相比,Icotinib明显抑制Akt的磷酸化水平,诱导PARP、Caspase-3和Caspase-8活化裂解。结论:Icotinib通过抑制Akt信号通路的活化、进一步诱导PARP、Caspase-3和Caspase-8裂解,进而抑制人NSCLC细胞增殖及诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 盐酸埃克替尼 人非小细胞肺癌 P13 K AKT通路 细胞凋亡

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具干细胞特性食管癌耐放射细胞株基因表达分析 被引量：8

4

作者 苏华芳 万秋燕 +4 位作者 邹燕 张力 李海英 景钊 吴式琇 《肿瘤学杂志》 CAS 2010年第1期40-45,共6页

[目的]比较具干细胞特性食管癌耐放射细胞株与其亲本基因表达水平的差异。[方法]Agilent4×44K人全基因组芯片检测具干细胞特性食管癌耐放射细胞株与其亲本细胞,GeneSpring GX 10.0.2数据分析挑选差异表达基因,进一步对差异表达基... [目的]比较具干细胞特性食管癌耐放射细胞株与其亲本基因表达水平的差异。[方法]Agilent4×44K人全基因组芯片检测具干细胞特性食管癌耐放射细胞株与其亲本细胞,GeneSpring GX 10.0.2数据分析挑选差异表达基因,进一步对差异表达基因进行GO分析和干细胞密切相关的信号通路分析,Real-time PCR验证芯片结果。[结果]两组细胞有明显不同的表达谱,差异表达基因多达2246个(fold change cut-off≥2)。在分子功能中,信号感应激活最高,占75.11%;在生物过程中,细胞进程、生物调节分别占35.94%和25.8%;在细胞组分方面,细胞、胞内区、跨膜区的变化比较显著。ALDH1基因表达发生了改变,其中ALDH1A3最显著。Hedgehog通路,PTCH1下调,而GLI2上调。BMP-TGFβ通路信号转导中,MMP3、MMP9上调,FOXL1、BMP4、TGFB2、TGFB3下调。Notch通路相关信号基因均表现为下调。Wnt通路信号转导变化比较复杂,其中WNT4、WNT8B、DKK2、CTNNB1改变超过2倍。Real-time PCR验证芯片结果可靠。[结论]具干细胞特性的食管癌放射抵抗细胞株与其亲本基因表达水平有明显差异。 展开更多

关键词 食管肿瘤 辐射耐受性 肿瘤干细胞 基因表达 CDNA芯片

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三羟异黄酮对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞体外抑瘤效应、细胞周期及凋亡的影响 被引量：2

5

作者 王耕 黄韬 +2 位作者 薛家鹏 王明华 惠震 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期886-890,共5页

目的探讨三羟异黄酮(Genistein GEN)对体外培养人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM抑瘤作用、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测GEN单独及联合阿霉素对体外培养人乳腺癌MCF-7/ADM细胞的抑制作用;荧光分光光度法检测GEN对阿霉素在MCF-... 目的探讨三羟异黄酮(Genistein GEN)对体外培养人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM抑瘤作用、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测GEN单独及联合阿霉素对体外培养人乳腺癌MCF-7/ADM细胞的抑制作用;荧光分光光度法检测GEN对阿霉素在MCF-7/ADM细胞的蓄积作用;用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及凋亡率的变化。结果 GEN单独及联合阿霉素对体外培养MCF-7/ADM细胞均有明显生长抑制作用,GEN单独作用48 h后表现为随时间的延长抑制作用明显增强,当GEN浓度达到60μg/ml时,其抑制作用急剧上升(P<0.01)。联合阿霉素后与对照组相比抑制率明显上升(P<0.01),并随GEN浓度的加大其抑制作用增强,细胞内阿霉素的浓度也随之升高。与对照组相比,细胞周期均有G2/M期阻滞作用,细胞凋亡百分比以联合组最高(P<0.01),G1期前出现典型的亚二倍体凋亡峰。结论 GEN单独及联合阿霉素对体外培养人乳腺癌MCF-7/ADM细胞具有抑瘤增效作用,可以提高阿霉素在MCF-7/ADM细胞内的蓄积、对细胞周期具有G2/M期阻滞作用,显著诱导MCF-7/ADM细胞凋亡,可能是其发挥逆转多药耐药分子生物学机制之一。 展开更多

关键词 三羟异黄酮 MCF-7/ADM 多药耐药 细胞周期 细胞凋亡

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A549细胞三维立体培养模型的建立及耐药机制 被引量：2

6

作者 车萍 季旭明 +2 位作者 吴智春 王海瑞 欧阳兵 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期530-532,共3页

目的探讨肺腺癌A549细胞三维立体(3D)培养模型对顺铂(DDP)的耐药性及其黏附耐药机制。方法胶原培养条件下建立A549三维立体培养模型,MTT法检测平面(2D)培养和3D培养A549细胞敏感性。采用整合素β1激动剂(TSF)和抑制剂(MAB)干预,对其相... 目的探讨肺腺癌A549细胞三维立体(3D)培养模型对顺铂(DDP)的耐药性及其黏附耐药机制。方法胶原培养条件下建立A549三维立体培养模型,MTT法检测平面(2D)培养和3D培养A549细胞敏感性。采用整合素β1激动剂(TSF)和抑制剂(MAB)干预,对其相关机制进行研究。结果 A549细胞3D培养模型中可见细胞生长良好,细胞之间黏附形成典型的多细胞球。2D培养模型中A549细胞对DDP的IC50值为12.84μg/ml;3D培养A549细胞对DDP的IC50是31.74μg/ml,为2D培养的2.47倍。与空白对照组比较,DDP干预组及MAB+DDP组的抑制率明显升高(P<0.01),TSF+DDP组有较显著差别(P<0.05);与DDP干预组相比较,TSF+DDP组细胞抑制率明显降低(P<0.05),MAB+DDP组明显升高(P<0.05)。结论胶原法成功建立A549细胞的3D培养模型。与2D培养相比,该细胞模型具有耐药的特性,其机制可能与促进整合素β1对细胞的黏附作用有关。 展开更多

关键词 三维立体培养 A549 DDP 整合素Β1 黏附耐药

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慢性粒细胞白血病患者中西医结合治疗前后舌微循环及骨髓超微结构变化 被引量：3

7

作者 常晓慧 魏艾红 +3 位作者 刘晓宇 肖景文 梁锐 向阳 《微循环学杂志》 2011年第1期12-14,F0004,I0001,共5页

目的:观察45例慢性粒细胞白血病(CML)患者中西医结合治疗前后的舌尖微循环及骨髓超微结构变化。方法:对45例复方黄黛片联合羟基脲治疗CML患者治疗前后的舌尖微循环及骨髓组织病理、超微结构进行对比观察。结果:CML患者治疗前舌尖微循环... 目的:观察45例慢性粒细胞白血病(CML)患者中西医结合治疗前后的舌尖微循环及骨髓超微结构变化。方法:对45例复方黄黛片联合羟基脲治疗CML患者治疗前后的舌尖微循环及骨髓组织病理、超微结构进行对比观察。结果:CML患者治疗前舌尖微循环超微结构变化包括微血管扩张、内皮肿胀、微血管数量增多;骨髓组织病理表现为中晚幼粒细胞增生明显,且伴有不同程度的骨髓纤维化,超微结构可见中晚幼细胞密集,部分细胞出现破裂。经复方黄黛片联合羟基脲治疗2个月后舌尖组织微循环明显改善,骨髓中白血病细胞明显减少,增生程度减低;但超微结构仍有核固缩等细胞凋亡的形态学改变。结论:本观察结果为CML的中医辨证论治、指导治疗及判断疗效提供了理论依据。 展开更多

关键词 慢性粒细胞白血病 舌尖微循环 骨髓病理 骨髓超微结构

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抑制DEK基因表达对结肠癌HCT116细胞增殖的影响 被引量：1

8

作者 杨静 宋扬 +5 位作者 赵鹏 王宏 闵婕 张贺龙 苏海川 冯英明 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第4期695-698,共4页

目的:通过siRNA技术,阻断结肠癌细胞系HCT116中DEK基因的表达,并研究DEK基因沉默后对HCT116细胞增殖能力影响。方法:用真核转录载体pLKO.1-TRC cloning vector构建针对DEK基因的重组siRNA真核转录载体pLKO.1-siDEK A,pLKO.1-siDEK B和pL... 目的:通过siRNA技术,阻断结肠癌细胞系HCT116中DEK基因的表达,并研究DEK基因沉默后对HCT116细胞增殖能力影响。方法:用真核转录载体pLKO.1-TRC cloning vector构建针对DEK基因的重组siRNA真核转录载体pLKO.1-siDEK A,pLKO.1-siDEK B和pLKO.1-siDEK C,脂质体法转染结肠癌细胞系HCT116,Western blot检测DEK的表达变化;选择沉默效率最高的载体,采用噻唑蓝(MTT)比色法、克隆形成实验检测转染HCT116细胞在增殖、克隆形成等方面的改变,流式细胞术检测其细胞周期的改变。结果:重组载体pLKO.1-siDEK A有效地阻断了HCT116细胞中DEK基因的表达。pLKO.1-siDEK A转染HCT116细胞后,与对照组相比细胞生长、增殖速度明显减慢(P<0.05),克隆形成率明显下降;流式细胞术表明DEKsiRNA可导致HCT116细胞G0/G1期阻滞,S期细胞减少。结论:成功构建了可有效沉默DEK基因的siRNA干涉载体,证明沉默DEK基因对人结肠癌HCT116细胞增殖有负性调节作用。本研究为进一步阐明DEK基因在结直肠癌中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 DEK 结直肠癌 增殖 SIRNA

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PDCD5对胃癌SGC-7901细胞株细胞周期的影响 被引量：1

9

作者 王巍 张冰 +1 位作者 王舰 赵成海 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第6期1120-1123,共4页

目的:通过检测PDCD5蛋白对胃癌细胞株SGC-7901的细胞周期的影响,探讨PDCD5蛋白对胃癌的作用。方法:培养胃癌细胞株SGC-7901。构建pEGFP-C1-PDCD5质粒并转染SGC-7901细胞,使其表达PDCD5蛋白。另外在SGC-7901细胞的培养基中,加入重组人PDC... 目的:通过检测PDCD5蛋白对胃癌细胞株SGC-7901的细胞周期的影响,探讨PDCD5蛋白对胃癌的作用。方法:培养胃癌细胞株SGC-7901。构建pEGFP-C1-PDCD5质粒并转染SGC-7901细胞,使其表达PDCD5蛋白。另外在SGC-7901细胞的培养基中,加入重组人PDCD5(rhPDCD5)蛋白直接作用。采用MTT比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光技术和Western blot检测相关周期蛋白的变化。结果:在以上两种作用方式下,SGC-7901的增殖均受到抑制,细胞增殖率明显降低(P<0.01),细胞出现G0/G1期阻滞(P<0.05)。经过两种作用方式处理后的细胞周期蛋白Cyclin D1和Cyclin E明显下降(P<0.01)。结论:转染PDCD5质粒与rhPDCD5蛋白均能够起到对胃癌细胞株SGC-7901周期阻滞的作用。且两种方式作用的效果和机制无明显差异。可以为临床胃癌治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 胃癌 PDCD5 转染 rhPDCD5蛋白

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树突状细胞负载MAGE-n表位肽的体外免疫学效应研究 被引量：1

10

作者 张秀敏 郭风 +1 位作者 林慧 曲萍 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第12期2386-2389,共4页

目的:研究树突状细胞(dendritic cell,DC)负载MAGE-n表位肽QLVFGIEVV体外诱导特异性CTL的能力及其抗肿瘤效应。方法:MAGE-n表位肽以固相多肽合成技术合成,并用HPLC进行纯化,质谱法(MS)鉴定,以流式细胞仪筛选HLA-A2+人外周血PBMC,连续贴... 目的:研究树突状细胞(dendritic cell,DC)负载MAGE-n表位肽QLVFGIEVV体外诱导特异性CTL的能力及其抗肿瘤效应。方法:MAGE-n表位肽以固相多肽合成技术合成,并用HPLC进行纯化,质谱法(MS)鉴定,以流式细胞仪筛选HLA-A2+人外周血PBMC,连续贴壁法分离培养人外周血来源树突状细胞,用成熟的DC负载MAGE-n表位肽QLVFGIEVV反复刺激活化诱导抗原特异性CTL,用51Cr释放法检测CTL的杀伤活性,并用抗HLA-A2分子单抗进行杀伤抑制实验。结果:用DC负载MAGE-n表位肽QLVF-GIEVV可诱导特异性CTL反应,对MAGE-n阳性表达细胞有较强的杀伤作用。结论:DC负载抗原肽QLVF-GIEVV在体外可诱发较强的特异性免疫反应。 展开更多

关键词 树突状细胞疫苗 限制性表位肽 MAGE-N HLA-A2

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转基因厌氧菌对鼠黑色素瘤的靶向性研究 被引量：1

11

作者 任启伟 郭志英 王郡甫 《济宁医学院学报》 2010年第1期1-3,共3页

目的探讨转基因婴儿双歧杆菌对小鼠黑色素瘤的靶向性。方法经小鼠尾静脉注射转基因婴儿双歧杆菌,通过放射性体内参入示踪分析、组织厌氧培养及组织切片方法,观察转基因厌氧菌对黑色素瘤组织的靶向性。结果肿瘤组织的放射性强度逐渐增强... 目的探讨转基因婴儿双歧杆菌对小鼠黑色素瘤的靶向性。方法经小鼠尾静脉注射转基因婴儿双歧杆菌,通过放射性体内参入示踪分析、组织厌氧培养及组织切片方法,观察转基因厌氧菌对黑色素瘤组织的靶向性。结果肿瘤组织的放射性强度逐渐增强,而正常组织放射性强度逐渐减弱;组织厌氧培养可见转基因厌氧菌在瘤组织内集聚增殖,组织切片可见瘤组织中有大量的革兰氏染色阳性的条杆状蓝色深染区域,而正常组织则无。结论婴儿双歧杆菌对小鼠黑色素瘤组织具有良好的靶向性,可将携带的基因靶向转运至实体瘤局部。 展开更多

关键词 厌氧菌 肿瘤 靶向性 基因治疗

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脐血来源树突状细胞的培养鉴定 被引量：2

12

作者 陈静琦 曾波航 +1 位作者 黄慧 吕嘉春 《广州医学院学报》 2003年第4期68-72,共5页

目的:探索体外诱导出的成熟脐血来源树突状细胞(CBDCs)功能性抗原表达的变化规律。方法:用光镜观察培养12 d CBDCs的形态。用流式细胞仪分析培养不同时间CBDCs功能性抗原表达的变化规律。结果:体外诱导出典型形态的CBDCs,HLA-ABC、HLA-D... 目的:探索体外诱导出的成熟脐血来源树突状细胞(CBDCs)功能性抗原表达的变化规律。方法:用光镜观察培养12 d CBDCs的形态。用流式细胞仪分析培养不同时间CBDCs功能性抗原表达的变化规律。结果:体外诱导出典型形态的CBDCs,HLA-ABC、HLA-DR、CD1a在培养0—8 d表达率渐升高,在第12 d达高峰,第16 d表达有所下降;CD83、CD80在第12 d的表达略高于其他时间段;CD54在0 d、4 d、8 d的表达率相近,而第12 d的表达率明显升高,第16 d明显降低。结论:应用本文的方法,在体外培养第12 d,能诱导出典型形态的CBDcs,多种功能性抗原的表达达到高峰。 展开更多

关键词 树突状细胞 脐带血 免疫

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肿瘤细胞疫苗的研究进展 被引量：2

13

作者 黄文俊 曾晓荣 《泸州医学院学报》 2012年第4期435-439,共5页

恶性肿瘤是威胁人类健康和生命的主要疾病之一,其发病率逐年增高,有效地治疗恶性肿瘤是一项长期而艰巨的任务。目前,常规的治疗恶性肿瘤的手术、放疗、化疗等手段尚不能达到满意的治疗效果,并且都伴有明显的毒副作用。

关键词 肿瘤细胞疫苗 恶性肿瘤 治疗效果 人类健康 毒副作用 发病率

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选择复制性腺病毒M4对卵巢癌细胞系OV2008的体外治疗作用及初步机制探讨

14

作者 陈彩虹 方海燕 +2 位作者 韩志强 高庆蕾 吴鹏 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2011年第6期437-440,共4页

目的:研究选择复制性腺病毒M4对卵巢癌细胞系OV2008的体外治疗作用并初步探讨其机制。方法:选择复制性腺病毒M4感染卵巢癌细胞系OV2008后,MTT法检测M4对OV2008细胞增殖抑制情况;流式细胞术检测M4对OV2008细胞凋亡的影响;PI法检测M4对OV2... 目的:研究选择复制性腺病毒M4对卵巢癌细胞系OV2008的体外治疗作用并初步探讨其机制。方法:选择复制性腺病毒M4感染卵巢癌细胞系OV2008后,MTT法检测M4对OV2008细胞增殖抑制情况;流式细胞术检测M4对OV2008细胞凋亡的影响;PI法检测M4对OV2008细胞周期的影响,W estern blot法检测感染M4后STAT3蛋白以及其下游靶蛋白表达的改变。结果:选择复制性腺病毒M4能明显抑制OV2008细胞的增殖(P<0.05),并且能促进OV2008细胞的凋亡(P<0.05),PI法检测发现M4可以引起细胞G2-M期阻滞。W estern blot检测发现感染M4后STAT3蛋白及其靶蛋白survivin,Cyclin D1,Bcl-xl,p-STAT3的表达水平明显降低(P<0.05)。结论:M4在体外对卵巢癌细胞系OV2008有非常好的治疗效果,其机制可能是因为M4能封闭卵巢癌细胞系中的STAT3基因,从而进一步促使p-STAT3蛋白以及其下游靶蛋白survivin,Bcl-xl,Cyclin D1等的表达降低,最终导致OV2008细胞的凋亡。 展开更多

关键词 选择复制性腺病毒M4 STAT3 基因治疗 OV2008 细胞系 卵巢肿瘤

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重组人纤维连接蛋白对肝细胞肝癌患者自体CIK细胞体外扩增及生物学活性的影响

15

作者 骆莹 朱争艳 +3 位作者 郭红星 王鹏 刘辉 杜智 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1056-1059,共4页

目的观察重组人纤维连接蛋白(RN)对肝细胞肝癌(HCC)患者细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)生物活性的影响,建立一种高效的CIK细胞体外扩增方法。方法取15份HCC患者外周血,分离单个核细胞,分别使用传统方法(抗CD3mAb+IFN-γ+IL-2)和RN法(RN+抗... 目的观察重组人纤维连接蛋白(RN)对肝细胞肝癌(HCC)患者细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)生物活性的影响,建立一种高效的CIK细胞体外扩增方法。方法取15份HCC患者外周血,分离单个核细胞,分别使用传统方法(抗CD3mAb+IFN-γ+IL-2)和RN法(RN+抗CD3mAb+IL-2)诱导,观察不同时间点两组细胞形态、数目、细胞表型和杀伤效率。结果与传统方法相比,RN组显著增加CIK细胞扩增倍数(P<0.05),是对照组的2.0～2.8倍,提高活化T细胞(CD25+T细胞)数量,增加CD3+CD8+T细胞比例,增强对肝癌细胞株的杀瘤活性。结论 RN能够高效促进HCC患者CIK细胞的扩增,可以替代传统方法。 展开更多

关键词 重组人纤维连接蛋白 细胞因子诱导的杀伤细胞 肝细胞肝癌

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Lewis y抗原对人卵巢癌细胞RMG-Ⅰ裸鼠移植瘤p-Akt蛋白表达的影响

16

作者 穆庆 刘娟娟 +2 位作者 郝莹莹 林蓓 张淑兰 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第4期692-695,共4页

目的:探讨α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对人卵巢癌细胞株RMG-I裸鼠移植瘤中磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达的影响。方法:利用已经建立的Lewis y抗原稳定高表达的卵巢癌细胞株RMG-I-H建立裸鼠移植瘤模型,利用免疫组织化学染色法检测基因转染前... 目的:探讨α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对人卵巢癌细胞株RMG-I裸鼠移植瘤中磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达的影响。方法:利用已经建立的Lewis y抗原稳定高表达的卵巢癌细胞株RMG-I-H建立裸鼠移植瘤模型,利用免疫组织化学染色法检测基因转染前后裸鼠移植瘤组织中Lewis y抗原及p-Akt蛋白的表达。结果:基因转染后的裸鼠移植瘤组织细胞表面Lewis y抗原及p-Akt蛋白的表达均明显增加,转染组与非转染组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Lewis y抗原明显促进卵巢癌细胞株RMG-I裸鼠移植瘤p-Akt蛋白的表达。 展开更多

关键词 LEWIS y抗原 卵巢癌 p—Akt

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转染外源性Fas配体基因的正常骨髓CD34^+细胞诱导U937细胞凋亡的实验研究

17

作者 刘忠文 邹萍 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第13期725-728,共4页

目的:观察转染外源性FasL的CD34+细胞对白血病细胞系U937的凋亡诱导作用,探讨通过向CD34+细胞转染FasL以增强移植后GVL效应的可能性。方法:免疫磁珠法分选骨髓CD34+细胞并进行体外扩增培养;FasL基因逆转录病毒途径转染CD34+细胞,并与白... 目的:观察转染外源性FasL的CD34+细胞对白血病细胞系U937的凋亡诱导作用,探讨通过向CD34+细胞转染FasL以增强移植后GVL效应的可能性。方法:免疫磁珠法分选骨髓CD34+细胞并进行体外扩增培养;FasL基因逆转录病毒途径转染CD34+细胞,并与白血病细胞U937混合培养,加入或不加入柔红霉素、阿糖胞苷,借助TUNEL、流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果:逆转录病毒上清转染后48～72h,流式细胞仪检测24.2%±2.4%CD34+细胞表达FasL(P<0.01)(未转染的CD34+细胞FasL阳性率为7.6%±1.1%)。未转染或转染外源FasL的CD34+细胞与白血病细胞U937以1:1的比例混合培养18h后,细胞凋亡率分别为5.0%±1.3%、10.8%±0.6%(P<0.01);FasL+CD34++DNR或FasL+CD34++Arac作用后,细胞凋亡率分别为13.4%±1.0%(P<0.05)、17.95%±1.3%(P<0.01)。结论:表达外源性FasL的骨髓CD34+细胞可诱导白血病细胞U937凋亡。提示植入转染外源性FasL基因的骨髓CD34+细胞可增强BMT后的GVL效应。 展开更多

关键词 FAS配体 CD34^+细胞 调亡 U937细胞

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Ezrin siRNA对人膀胱移行细胞癌T24细胞增殖的影响

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作者 谢宇 韩惟青 周晓 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第8期1692-1694,共3页

目的:探讨siRNA沉默Ezrin基因表达对膀胱移行细胞癌T24细胞增殖的影响。方法:设计siRNAEzrin,脂质体转染法将Ezrin siRNA转染入T24细胞。RT-PCR法检测Ezrin siRNA对T24细胞Ezrin基因的抑制作用,筛选有效的siRNA片段。采用绘制细胞生长... 目的:探讨siRNA沉默Ezrin基因表达对膀胱移行细胞癌T24细胞增殖的影响。方法:设计siRNAEzrin,脂质体转染法将Ezrin siRNA转染入T24细胞。RT-PCR法检测Ezrin siRNA对T24细胞Ezrin基因的抑制作用,筛选有效的siRNA片段。采用绘制细胞生长曲线、MTT实验、流式细胞检测,观察siRNA干扰后细胞增殖的变化。结果:设计的siRNA能够很好地对目的基因产生沉默效应。转染siRNA后的实验组T24细胞生长速度较对照组明显减慢,差异有统计学意义。实验组T24细胞凋亡率为(30.37±8.37)%,同空白组、阴性对照组比较,凋亡率明显增加(P<0.05)。结论:Ezrin siRNA可以明显下调T24细胞中Ezrin mRNA表达水平,且导致细胞生长减慢、凋亡增加。 展开更多

关键词 EZRIN RNA干扰 膀胱移行细胞癌

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白介素12不同给药方案对急性放射病小鼠的治疗作用

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作者 王利 王松雷 +5 位作者 曹务锐 耿斌 翟瑞仁 逄朝霞 张超 余长林 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第4期706-709,共4页

目的:研究重组鼠白细胞介素12(rmIL-12)不同给药方案对γ射线急性放射病小鼠的治疗作用。方法:42只BALB/c小鼠均给予60Coγ射线6.0Gy一次全身照射后随机分为对照组、rmIL-12 1次及5次剂量3组,1次剂量组小鼠于照射后1h腹腔注射rmIL-12 20... 目的:研究重组鼠白细胞介素12(rmIL-12)不同给药方案对γ射线急性放射病小鼠的治疗作用。方法:42只BALB/c小鼠均给予60Coγ射线6.0Gy一次全身照射后随机分为对照组、rmIL-12 1次及5次剂量3组,1次剂量组小鼠于照射后1h腹腔注射rmIL-12 20μg/kg,5次剂量组小鼠于照射后1h及此后每3d一次分别腹腔注射rmIL-12 20μg/(kg.d),共5次,对照组给予等体积的无菌PBS。2次/d观察小鼠一般情况,3d检测1次外周血细胞计数,分别于照射后14d和28d收集骨髓细胞进行集落培养。结果:rmIL-12治疗组小鼠一般情况较对照组改善,1及5次剂量组外周血中血小板计数(PLT)下降速度均明显慢于对照组,PLT恢复时间较对照组均明显提前(11d vs 14d),且PLT最低值均明显高于对照组(18.9%vs 8.1%,22.5%vs8.1%,P<0.05),两治疗组间差异无统计学意义(P>0.05);照后17d rmIL-12 1及5次剂量组外周血白细胞恢复速度均快于对照组(P<0.05),两治疗组间差异无统计学意义(P>0.05);照后14d 1及5次剂量组CFU-Mix均明显高于对照组(P<0.01),28d两治疗组CFU-GM、CFU-Mix均高于对照组(P<0.05,P<0.01),两治疗组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:rmIL-12 1及5次剂量组均可明显促进急性放射病小鼠造血系统,尤其是巨核系的恢复,两治疗组效果相当。 展开更多

关键词 白细胞介素12 急性放射病 造血损伤 γ射线 小鼠

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化疗期间不同时间段肿瘤患者CIK细胞抗肿瘤作用的体外研究

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作者 汪碧琼 杨红茹 +2 位作者 文庆莲 尚昌玲 杨玲麟 《泸州医学院学报》 2014年第6期565-568,共4页

目的:研究同一肿瘤患者在化疗期间不同时间段自体CIK细胞对不同癌细胞株杀伤活性的差异。方法:分离化疗期间不同时间段肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),加入细胞因子,体外诱导CIK细胞,用MTT法检测其对不同时间段不同癌细胞株的杀伤活性... 目的:研究同一肿瘤患者在化疗期间不同时间段自体CIK细胞对不同癌细胞株杀伤活性的差异。方法:分离化疗期间不同时间段肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),加入细胞因子,体外诱导CIK细胞,用MTT法检测其对不同时间段不同癌细胞株的杀伤活性及随化疗次数变化的趋势,杀伤活性比较采用方差分析。结果:化疗期间不同时间段CIK细胞对肺癌(A549)、肠癌(HCT-116)、鼻咽癌细胞珠(CNE2)的杀伤活性比较:同一肿瘤患者的CIK细胞随着化疗次数的递增,对肺癌细胞株、肠癌细胞株的杀伤活性逐渐降低,不同时段差异具有统计学意义(P<0.001),鼻咽癌细胞株杀伤活性无规律性变化(P>0.05);同一化疗时间段,CIK细胞对不同癌细胞株杀伤活性的比较:对肺癌细胞株的杀伤活性最强,对鼻咽癌细胞株的杀伤活性最差。结论:化疗联合自体CIK细胞在化疗不同时间段对不同癌细胞株的杀伤活性有差异。 展开更多

关键词 CIK细胞 化疗 抗肿瘤作用 化疗时段

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