目的以信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3,STAT3)为靶基因,设计并构建短发夹状小干扰RNA表达载体,探讨STAT3小干扰RNA表达载体对胃癌细胞株SGC7901增殖和凋亡的影响。方法以PAVU6+27质粒为载...目的以信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3,STAT3)为靶基因,设计并构建短发夹状小干扰RNA表达载体,探讨STAT3小干扰RNA表达载体对胃癌细胞株SGC7901增殖和凋亡的影响。方法以PAVU6+27质粒为载体,构建STAT3的小干扰RNA表达载体,并将其转染胃癌SGC7901细胞,G418筛选后经反转录聚合酶链反应和Western blot法检测STAT3基因和蛋白表达的改变,MTT法和3H-TdR掺入率检测细胞增殖和DNA合成情况,原位凋亡检测细胞凋亡率,流式细胞术检测抗细胞凋亡因子Bcl-2的表达。结果酶切鉴定和测序分析表明靶向STAT3的RNA干扰重组体构建成功;重组体转染SGC7901后,STAT3的mRNA和蛋白水平较空载体转染组显著下降;MTT比色A值和3H-TdR掺入率均明显低于对照组(P<0.05),凋亡率升高(P<0.01),Bcl-2表达下降。结论STAT3小干扰RNA表达载体可能是抑制人胃癌细胞增殖和促进凋亡的有效手段。展开更多
背景与目的:研究香加皮杠柳苷(periplocin extracted from cortex periplocae,CPP)对人结肠癌SW480细胞株在裸鼠体内的成瘤抑制作用及其机制。材料与方法:将SW480细胞经皮下接种Balb/c-nu/nu裸小鼠,构建裸鼠SW480细胞荷瘤动物模型,观察...背景与目的:研究香加皮杠柳苷(periplocin extracted from cortex periplocae,CPP)对人结肠癌SW480细胞株在裸鼠体内的成瘤抑制作用及其机制。材料与方法:将SW480细胞经皮下接种Balb/c-nu/nu裸小鼠,构建裸鼠SW480细胞荷瘤动物模型,观察CPP作用后移植瘤体积和重量的变化,HE染色光镜下观察移植瘤组织形态学变化,免疫组织化学方法检测瘤组织内Wnt/β-catenin信号通路中核心成分β-catenin及其下游靶蛋白Survivin和C-myc表达的变化。结果:CPP在体内能明显抑制SW480细胞荷瘤小鼠移植瘤的生长,其肿瘤体积和重量均被明显抑制,抑瘤率为61.41%(P<0.01)。CPP治疗组小鼠的移植瘤组织出现明显炎性细胞浸润和坏死性变化;肿瘤组织内β-catenin、Survivin和C-myc蛋白表达水平明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:CPP可抑制结肠癌细胞SW480在小鼠体内的增殖,其作用机制可能与Wnt/β-catenin信号分子的表达下调有关。展开更多
文摘目的以信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3,STAT3)为靶基因,设计并构建短发夹状小干扰RNA表达载体,探讨STAT3小干扰RNA表达载体对胃癌细胞株SGC7901增殖和凋亡的影响。方法以PAVU6+27质粒为载体,构建STAT3的小干扰RNA表达载体,并将其转染胃癌SGC7901细胞,G418筛选后经反转录聚合酶链反应和Western blot法检测STAT3基因和蛋白表达的改变,MTT法和3H-TdR掺入率检测细胞增殖和DNA合成情况,原位凋亡检测细胞凋亡率,流式细胞术检测抗细胞凋亡因子Bcl-2的表达。结果酶切鉴定和测序分析表明靶向STAT3的RNA干扰重组体构建成功;重组体转染SGC7901后,STAT3的mRNA和蛋白水平较空载体转染组显著下降;MTT比色A值和3H-TdR掺入率均明显低于对照组(P<0.05),凋亡率升高(P<0.01),Bcl-2表达下降。结论STAT3小干扰RNA表达载体可能是抑制人胃癌细胞增殖和促进凋亡的有效手段。
文摘背景与目的:研究香加皮杠柳苷(periplocin extracted from cortex periplocae,CPP)对人结肠癌SW480细胞株在裸鼠体内的成瘤抑制作用及其机制。材料与方法:将SW480细胞经皮下接种Balb/c-nu/nu裸小鼠,构建裸鼠SW480细胞荷瘤动物模型,观察CPP作用后移植瘤体积和重量的变化,HE染色光镜下观察移植瘤组织形态学变化,免疫组织化学方法检测瘤组织内Wnt/β-catenin信号通路中核心成分β-catenin及其下游靶蛋白Survivin和C-myc表达的变化。结果:CPP在体内能明显抑制SW480细胞荷瘤小鼠移植瘤的生长,其肿瘤体积和重量均被明显抑制,抑瘤率为61.41%(P<0.01)。CPP治疗组小鼠的移植瘤组织出现明显炎性细胞浸润和坏死性变化;肿瘤组织内β-catenin、Survivin和C-myc蛋白表达水平明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:CPP可抑制结肠癌细胞SW480在小鼠体内的增殖,其作用机制可能与Wnt/β-catenin信号分子的表达下调有关。
