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miR-373与肿瘤侵袭转移研究进展 被引量:7
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作者 李金媚 吴爱兵 杨志雄 《中华实用诊断与治疗杂志》 2015年第10期946-948,共3页
microRNA是生物体内一类长度19~24个核苷酸的非编码小分子单链RNA,通过与目的基因mRNA的3'端非编码区互补配对,引起mRNA直接降解或转录后翻译抑制,影响目的蛋白表达,从而影响细胞凋亡、增殖与分化等生物学行为。miR-373在多种肿瘤中均... microRNA是生物体内一类长度19~24个核苷酸的非编码小分子单链RNA,通过与目的基因mRNA的3'端非编码区互补配对,引起mRNA直接降解或转录后翻译抑制,影响目的蛋白表达,从而影响细胞凋亡、增殖与分化等生物学行为。miR-373在多种肿瘤中均有异常表达,与肿瘤细胞的侵袭、转移和增殖等生物学行为密切相关,可作为肿瘤早期诊断、治疗靶点或预后监测的指标。本文就miR-373在肿瘤侵袭、转移过程中影响的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 miR-373 侵袭 转移
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pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒的构建及其在活细胞内的作用 被引量:2
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作者 高艳军 杨清玲 +1 位作者 陈昌杰 丁勇兴 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期519-526,共8页
目的:构建pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察趋化因子受体4(chemokine receptor 4、CXCR4和CD184)与CXCR4抑制性多肽的相互作用。方法:应用化学合成法获得巨噬细胞... 目的:构建pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察趋化因子受体4(chemokine receptor 4、CXCR4和CD184)与CXCR4抑制性多肽的相互作用。方法:应用化学合成法获得巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ(viralmacrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)N端21肽(N-terminal 21-mer peptide,NT21MP)编码的基因序列,克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VC155中,筛选含有目标基因的正确克隆。利用RT-PCR扩增人乳腺癌细胞株SKBR3的CXCR4全长基因后,T-A亚克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VN173载体中。然后,经酶切鉴定及DNA测序分析2个基因是否正确连接至真核表达载体中。应用脂质体转染的方法共转染pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VC155-CXCR4至细胞株COS-7中,在荧光显微镜下观察NT21MP与CXCR4在胞内的相互作用。结果:经DNA测序及同源性对比,证实pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VN173-CXCR4重组载体构建成功;基因片段与NCBI基因库vMIP-Ⅱ和CXCR4基因CDS序列同源性达99.9%。BiFC法观察NT21MP与CXCR4在细胞内结合出现的荧光信号,该信号分布细胞内。结论:本实验成功构建了应用BiFC技术的真核表达载体,并且在活细胞内检测到NT21MP与CXCR4的互相结合。 展开更多
关键词 受体 趋化因子/遗传学 趋化因子CXCL2 质粒 重组蛋白质类/遗传学 遗传载体 转染 遗传互补测验
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Coagulation indices and fibrinogen degradation products as predictive biomarkers for tumor-node-metastasis staging and metastasis in gastric cancer 被引量:1
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作者 Yi-Qing Shen Qiu-Wan Wei +2 位作者 Yi-Ren Tian Yun-Zhi Ling Min Zhang 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2025年第1期110-120,共11页
BACKGROUND Gastric cancer(GC)is a prevalent malignancy with a substantial health burden and high mortality rate,despite advances in prevention,early detection,and treatment.Compared with the global average,Asia,notabl... BACKGROUND Gastric cancer(GC)is a prevalent malignancy with a substantial health burden and high mortality rate,despite advances in prevention,early detection,and treatment.Compared with the global average,Asia,notably China,reports disproportionately high GC incidences.The disease often progresses asymptoma-tically in the early stages,leading to delayed diagnosis and compromised out-comes.Thus,it is crucial to identify early diagnostic biomarkers and enhance treatment strategies to improve patient outcomes and reduce mortality.METHODS Retrospectively analyzed the clinical data of 148 patients with GC treated at the Civil Aviation Shanghai Hospital between December 2022 and December 2023.The associations of coagulation indices-partial thromboplastin time(APTT),prothrombin time(PT),thrombin time(TT),fibrinogen,fibrinogen degradation products(FDP),fasting blood glucose,and D-dimer(D-D)with TNM stage and distant metastasis were examined.RESULTS Prolongation of APTT,PT,and TT was significantly correlated with the GC TNM stage.Hence,abnormal coagulation system activation was closely related to disease progression.Elevated FDP and D-D were significantly associated with distant metastasis in GC(P<0.05),suggesting that increased fibrinolytic activity contributes to increased metastatic risk.CONCLUSION Our Results reveal coagulation indices,FDPs as GC biomarkers,reflecting abnormal coagulation/fibrinolysis,aiding disease progression,metastasis prediction,and helping clinicians assess thrombotic risk for early intervention and personalized treatment plans. 展开更多
关键词 Coagulation indexes Fibrinogen degradation products Gastric cancer Tumor-node-metastasis staging Distant metastasis
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miR-21对小细胞肺癌进展的调控作用及机制研究
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作者 于璐 陈亚豪 +1 位作者 李辉 王洋 《检验医学与临床》 2025年第6期830-834,共5页
目的探讨miR-21在小细胞肺癌(SCLC)进程中的作用及可能的分子机制。方法以SCLC细胞株H69AR为实验细胞株,构建对照组、miR-21过表达组和miR-21低表达组模型,分别采用CCK-8实验、Transwell实验和流式细胞术观测miR-21对SCLC细胞增殖活性... 目的探讨miR-21在小细胞肺癌(SCLC)进程中的作用及可能的分子机制。方法以SCLC细胞株H69AR为实验细胞株,构建对照组、miR-21过表达组和miR-21低表达组模型,分别采用CCK-8实验、Transwell实验和流式细胞术观测miR-21对SCLC细胞增殖活性、迁移侵袭能力和细胞凋亡的影响;采用Taqman实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-21对SCLC细胞长散在核元件1((LINE-1)基因甲基化的影响。结果对照组、miR-21低表达组及miR-21过表达组不同时间点H69AR细胞的增殖率为24 h<48 h<72 h,且两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。48 h后与对照组[(18.6±3.2)%]比较,miR-21过表达组H69AR细胞凋亡率[(5.7±0.6)%]明显降低(P<0.05),而miR-21低表达组H69AR细胞凋亡率[(34.9±4.6)%]明显升高(P<0.05)。与对照组比较,miR-21过表达组H69AR细胞的迁移和侵袭细胞数目显著增多(P<0.05),miR-21低表达组H69AR细胞的迁移和侵袭细胞数目显著减少(P<0.05);与miR-21过表达组比较,miR-21低表达组迁移和侵袭细胞数目显著降低(P<0.05)。与对照组[(1.86±0.23)%]比较,miR-21低表达组H69AR细胞LINE-1基因的甲基化率[(2.32±0.64)%]明显升高(P<0.05),miR-21过表达组H69AR细胞LINE-1基因的甲基化率[(1.09±0.09)%]明显降低(P<0.05)。结论miR-21具有癌基因的生物学属性,其可能通过抑制LINE-1基因甲基化修饰促进SCLC的恶性进程。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 微小RNA-21 长散在核元件1 甲基化 凋亡 侵袭 迁移
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环状RNA hsa_circ_0117530通过miR-874/ZEB1轴促进宫颈癌细胞生长和转移
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作者 郑晨旸 赵玲军 +3 位作者 沈亲亲 吕一帆 史慧薇 王毅军 《武汉大学学报(医学版)》 2025年第3期335-342,共8页
目的:探讨环状RNA hsa_circ_0117530促进宫颈癌发展的机制。方法:通过免疫组织化学方法检测ZEB2在宫颈癌组织中的表达,利用circBase和circInteractome数据库进行分析,筛选出环状RNA hsa_circ_0117530。随后,敲低和过表达hsa_circ_01175... 目的:探讨环状RNA hsa_circ_0117530促进宫颈癌发展的机制。方法:通过免疫组织化学方法检测ZEB2在宫颈癌组织中的表达,利用circBase和circInteractome数据库进行分析,筛选出环状RNA hsa_circ_0117530。随后,敲低和过表达hsa_circ_0117530,利用CCK-8法检测宫颈癌细胞增殖活力。此外,使用CircInteractome数据库预测可能与hsa_circ_0117530结合的miRNA并使用StarBase数据库预测miR-874在宫颈癌细胞中的下游靶基因。采用荧光素酶报告基因实验验证并进一步分析其下游的靶点。结果:证实ZEB2在宫颈癌组织中显著上调,发现hsa_circ_0117530分子源自ZEB2基因,并在宫颈癌组织中的表达显著增高。进一步检测结果显示敲低hsa_circ_0117530抑制了宫颈癌细胞系的生长、增殖和迁移,而过表达则产生相反作用。双荧光素酶报告实验表明hsa_circ_0117530与miR-874相互作用,且miR-874直接靶向ZEB1基因。结论:hsa_circ_0117530通过调控miR-874/ZEB1轴促进了宫颈癌细胞的生物功能。 展开更多
关键词 环状RNA circ_0117530 miR-874 ZEB1 宫颈癌
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Multiparameter magnetic resonance imaging-based radiomics model for the prediction of rectal cancer metachronous liver metastasis
6
作者 Zhi-Da Long Xiao Yu +1 位作者 Zhi-Xiang Xing Rui Wang 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2025年第1期62-72,共11页
BACKGROUND The liver,as the main target organ for hematogenous metastasis of colorectal cancer,early and accurate prediction of liver metastasis is crucial for the diagnosis and treatment of patients.Herein,this study... BACKGROUND The liver,as the main target organ for hematogenous metastasis of colorectal cancer,early and accurate prediction of liver metastasis is crucial for the diagnosis and treatment of patients.Herein,this study aims to investigate the application value of a combined machine learning(ML)based model based on the multiparameter magnetic resonance imaging for prediction of rectal metachronous liver metastasis(MLM).AIM To investigate the efficacy of radiomics based on multiparametric magnetic resonance imaging images of preoperative first diagnosed rectal cancer in predicting MLM from rectal cancer.METHODS We retrospectively analyzed 301 patients with rectal cancer confirmed by surgical pathology at Jingzhou Central Hospital from January 2017 to December 2023.All participants were randomly assigned to the training or validation queue in a 7:3 ratio.We first apply generalized linear regression model(GLRM)and random forest model(RFM)algorithm to construct an MLM prediction model in the training queue,and evaluate the discriminative power of the MLM prediction model using area under curve(AUC)and decision curve analysis(DCA).Then,the robustness and generalizability of the MLM prediction model were evaluated based on the internal validation set between the validation queue groups.RESULTS Among the 301 patients included in the study,16.28%were ultimately diagnosed with MLM through pathological examination.Multivariate analysis showed that carcinoembryonic antigen,and magnetic resonance imaging radiomics were independent predictors of MLM.Then,the GLRM prediction model was developed with a comprehensive nomogram to achieve satisfactory differentiation.The prediction performance of GLRM in the training and validation queue was 0.765[95%confidence interval(CI):0.710-0.820]and 0.767(95%CI:0.712-0.822),respectively.Compared with GLRM,RFM achieved superior performance with AUC of 0.919(95%CI:0.868-0.970)and 0.901(95%CI:0.850-0.952)in the training and validation queue,respectively.The DCA indicated that the predictive ability and net profit of clinical RFM were improved.CONCLUSION By combining multiparameter magnetic resonance imaging with the effectiveness and robustness of ML-based predictive models,the proposed clinical RFM can serve as an insight tool for preoperative assessment of MLM risk stratification and provide important information for individual diagnosis and treatment of rectal cancer patients. 展开更多
关键词 Rectal cancer Metachronous liver metastases Magnetic resonance imaging Radiomics Machine learning
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CXCR4在VEGF-C介导的胃癌淋巴道转移中的作用 被引量:15
7
作者 孙梯业 赵永亮 +3 位作者 颜伟 石彦 曾冬竹 余佩武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期161-165,共5页
目的探索趋化因子受体CXCR4和VEGF-C与胃癌淋巴道转移的关系,为研究干预胃癌淋巴转移的新方法提供理论依据。方法采用RT-PCR方法检测86例胃癌组织中趋化因子受体CXCR4 mRNA的表达及VEGF-C mRNA的表达,探索其与胃癌淋巴结转移的关系;Boy... 目的探索趋化因子受体CXCR4和VEGF-C与胃癌淋巴道转移的关系,为研究干预胃癌淋巴转移的新方法提供理论依据。方法采用RT-PCR方法检测86例胃癌组织中趋化因子受体CXCR4 mRNA的表达及VEGF-C mRNA的表达,探索其与胃癌淋巴结转移的关系;Boyden趋化小室法检测CXCR4不同表达状态胃癌细胞的趋化活性和趋化抑制性。结果86例胃癌组织均有不同程度的CXCR4 mRNA和VEGF-C mRNA的表达。53例CXCR4 mRNA呈高表达,表达率为61.63%,VEGF-C mRNA高表达率为56.98%(49/86);VEGF-C mRNA高表达组中的CXCR4 mRNA的表达率也较高;CXCR4 mRNA的表达与胃癌淋巴结转移呈正相关(P<0.05);CXCR4的配体SDF-l对胃癌细胞的平均趋化率为81%,经抗CXCR4单克隆抗体处理后癌细胞的平均趋化率下降至30%,CXCR4被特异性抗体封闭前后的癌细胞趋化活性有显著性差异(P<0.05)。结论胃癌CXCR4的表达和VEGF-C的表达与胃癌淋巴结转移呈正相关;CXCR4的功能状态影响胃癌细胞的迁移活性。通过干预趋化因子受体CXCR4和VEGF-C的活性可能成为阻断胃癌淋巴转移的新靶点。 展开更多
关键词 胃癌 CXCR4 VEGF—C 淋巴转移 侵袭 转移
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EGFR信号通路调控结肠癌Caco-2细胞侵袭转移的分子机制 被引量:10
8
作者 张晓晶 王甦 +2 位作者 刘云鹏 候科佐 王舒宝 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期1479-1482,共4页
目的探讨EGFR信号通路与人结肠癌Caco-2细胞增殖和侵袭转移的关系及其调控分子机制。方法采用MTT法和Boyden小室体外侵袭实验检测Caco-2细胞增殖和体外侵袭能力;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因转录水平;采用W este... 目的探讨EGFR信号通路与人结肠癌Caco-2细胞增殖和侵袭转移的关系及其调控分子机制。方法采用MTT法和Boyden小室体外侵袭实验检测Caco-2细胞增殖和体外侵袭能力;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因转录水平;采用W estern b lot法检测P-EGFR和P-ERK蛋白表达。结果外源性EGF(10μg/L)增加P-EGFR和P-ERK蛋白表达同时使24 h细胞生长率提高了23.35%(P<0.01),使过膜细胞数由(208±3)上升到(241±5)(P<0.01)。当用AG1478(20μmol/L)和PD98059(40μmol/L)分别阻断EGFR和ERK/MAPK后,EGF作用消失,Caco-2细胞生长明显抑制(P<0.01),但无时间效应关系;Caco-2细胞体外侵袭力明显减弱(P<0.01)。RT-PCR测定显示,EGF能增加Caco-2细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达和减少TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达;而AG1478能逆转EGF的作用,使MMP-2、MMP-9 mRNA的表达下降,TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达上升,结果MMP-2/TIMP-2比值和MMP-9/TIMP-1比值均下降(P<0.01)。结论EGFR-ERK/MAPK信号通路通过改变基质金属蛋白酶和其抑制剂mRNA比值调控人结肠癌细胞侵袭转移能力。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 侵袭 转移 基质金属蛋白酶
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检测胃癌患者外周血微转移端粒酶hTERT-mRNA的意义 被引量:7
9
作者 邢全台 袁孟彪 +5 位作者 孙启龙 梁业民 王菁华 于涛 高艳景 李延青 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期321-323,共3页
目的 探讨检测胃癌血液微转移的新方法 ,评价端粒酶hTERT—mRNA作为检测微转移标志物的价值。方法 提取4 2例胃癌病人外周血有核细胞RNA ,采用RT -PCR方法检测其端粒酶hTERT -mRNA的表达 ,半定量分析 ,并与 2 5名健康者作对照。结果 ... 目的 探讨检测胃癌血液微转移的新方法 ,评价端粒酶hTERT—mRNA作为检测微转移标志物的价值。方法 提取4 2例胃癌病人外周血有核细胞RNA ,采用RT -PCR方法检测其端粒酶hTERT -mRNA的表达 ,半定量分析 ,并与 2 5名健康者作对照。结果  4 2例胃癌病人外周血端粒酶hTERT—mRNA的表达显著高于 2 5例健康者 ;Ⅰ期癌与Ⅱ~Ⅳ期癌之间存在显著性差异 ;不同细胞学类型胃癌之间无显著性差异 ;不同病理学类型的胃癌之间不存在显著性差异。结论 RT -PCR检测外周血端粒酶hTERT -mRNA可用来观察胃癌微转移 ,半定量分析更具价值。 展开更多
关键词 胃癌 微转移 端粒酶 hTERT-mRNA RT-PCR法
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胃癌VEGF-C、VEGFR-3及CNTN-1的表达及其与淋巴转移的关系 被引量:8
10
作者 吴生华 俞继卫 +5 位作者 郑林海 吴巨钢 倪晓春 李晓强 杜光烨 姜波健 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1065-1070,共6页
目的探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及其受体VEGFR-3(也称Flt-4)与神经细胞黏附分子-接触蛋白-1(contactin-1,CNTN-1)在原发性胃癌组织中的表达,并分析其与淋巴转移和其他临床病理参数之间的关系。方法对37例原发性胃癌病例的原发灶和... 目的探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及其受体VEGFR-3(也称Flt-4)与神经细胞黏附分子-接触蛋白-1(contactin-1,CNTN-1)在原发性胃癌组织中的表达,并分析其与淋巴转移和其他临床病理参数之间的关系。方法对37例原发性胃癌病例的原发灶和癌旁组织标本,行免疫组化法检测VEGF-C、VEGFR-3及CNTN-1的表达,测定淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)。分析上述四者之间的相互关系,及其与临床病理因素之间的联系。结果胃癌组织中VEGF-C、VEGFR-3及CNTN-1的阳性表达率分别为54.05%、72.97%及62.16%。CNTN-1的表达与VEGF-C(P<0.05)及VEGFR-3表达(P<0.05)存在明显的相关性。VEGF-C的阳性表达与TNM分期、淋巴管浸润及淋巴结转移有关(均P<0.05)。肿瘤较大、TNM分期、淋巴管浸润和淋巴结转移率较高者,CNTN-1表达的阳性率也越高(均P<0.05)。VEGFR-3阳性表达与TNM分期及有淋巴结转移有关(均P<0.05)。LVD计数与TNM分期晚、淋巴管浸润、淋巴结转移有关(P<0.05)。LVD计数与VEGF-C的表达呈正相关(P<0.05)。结论 VEGF-C、VEGFR-3和CNTN-1在胃癌组织中均存在高表达。VEGF-C的表达与LVD计数相关,且两者都与淋巴管浸润和淋巴结转移密切相关。VEGF-C可能是通过CNTN-1通路介导淋巴管生成,从而促进胃癌的淋巴管浸润和淋巴结转移。 展开更多
关键词 新生物/癌 接触蛋白-1 血管内皮生长因子 淋巴转移
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Ki-67与Cyfra21-1联合检测在鼻咽癌不良预后评估中的作用 被引量:5
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作者 雷琳 肖何 +9 位作者 陈川 张志敏 毛必静 何轩 谢飞 丁琛琛 张辉 杨镇洲 王东 王阁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1199-1202,共4页
目的探讨检测鼻咽癌组织Ki-67的表达水平及治疗后血清细胞角蛋白19片段21-1(Cyfra21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)的含量在鼻咽癌不良预后评估中的作用及临床意义。方法回顾性分析2008年6-12月经病理确... 目的探讨检测鼻咽癌组织Ki-67的表达水平及治疗后血清细胞角蛋白19片段21-1(Cyfra21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)的含量在鼻咽癌不良预后评估中的作用及临床意义。方法回顾性分析2008年6-12月经病理确诊并接受根治性同步放化疗治疗的鼻咽鳞癌患者89例。免疫组化法检测患者鼻咽癌组织Ki-67表达情况,化学发光法检测治疗后血清Cyfra21-1、SCCA含量,连续监测法检测患者治疗后血清中的LDH、ALP含量。结果至2013年12月随访日结束,36例患者入组复发组,34例患者入组远处转移组,19例患者入组临床缓解组。临床缓解组患者鼻咽癌组织中的Ki-67表达水平低于远处转移组(P<0.05),且血清Cyfra21-1表达水平低于复发组及远处转移组(P<0.05)。同时,复发组患者的血清LDH表达水平低于远处转移组(P<0.05);血清ALP与SCCA在各组间未见明显差异(P>0.05)。Cox回归分析结果显示,组织Ki-67高表达(P<0.01,HR=1.973)与血清Cyfra21-1高表达(P<0.01,HR=1.537)均为无进展生存期的不良预后因素,血清Cyfra21-1高表达(P<0.01,HR=1.492)为总生存期的不良预后因素。通过建立预后指数方程发现,高危组与低危组患者的无进展生存期和总生存期差异有统计学意义(P<0.01)。结论联合检测患者鼻咽癌组织中Ki-67的表达水平与血清Cyfra21-1的含量可用于评估鼻咽癌患者的不良预后情况。 展开更多
关键词 鼻咽癌 KI-67 细胞角蛋白19 CYFRA21-1 标志物
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miR-504靶向CHD1L抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制 被引量:6
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作者 王照岩 杨志一 +5 位作者 林祥博 陈智凯 李洪利 尹崇高 牟青杰 刘雨清 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1302-1307,共6页
目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中m... 目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中miR-504的表达量,同时检测miR-504在MDA-MB-231细胞中的转染效率;双荧光素酶实验检测miR-504与CHD1L是否存在结合靶点;qRT-PCR及Western blot法检测CHD1L mRNA和蛋白的表达水平;Transwell侵袭实验检测MDAMB-231细胞的侵袭能力;Western blot法检测p-Akt、MMP-2和MMP-9的表达情况。结果乳腺癌细胞中miR-504的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P <0. 05);miR-504在MDA-MB-231/miR-504组中的表达水平明显增高(P <0. 05);双荧光素酶实验检测显示miR-504能与CHD1L mRNA的3'-UTR结合;此外,过表达miR-504后CHD1L mRNA的表达水平无显著变化,但CHD1L蛋白表达水平显著降低(P <0. 05);与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组侵袭能力明显降低,而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组侵袭能力比MDA-MB-231/miR-504+Con组明显增加;用表皮生长因子分别刺激转染不同质粒的MDA-MB-231细胞,与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P <0. 05),而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与MDA-MB-231/miR-504+Con组相比明显增加(P <0. 05)。结论 miR-504靶向CHD1L通过PI3K/Akt/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 miR-504 CHD1L PI3K/Akt/MMP 侵袭
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PRL-3调节PI3K信号通路在促进结肠癌细胞增殖侵袭中的作用 被引量:6
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作者 张建龙 张萦斐 +2 位作者 张育超 毛凯 陈双 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期16-21,共6页
【目的】研究肝再生磷酸酶-3(PRL-3)的过表达与PI3K信号通路的调节及其与结肠癌细胞增殖侵袭的关系。【方法】构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo-PRL-3和LoVo-VC,用qRT-PCR和Western blot的方法对miR-21及其靶蛋白... 【目的】研究肝再生磷酸酶-3(PRL-3)的过表达与PI3K信号通路的调节及其与结肠癌细胞增殖侵袭的关系。【方法】构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo-PRL-3和LoVo-VC,用qRT-PCR和Western blot的方法对miR-21及其靶蛋白PTEN的表达进行检测,在稳转细胞株中转染miR-21或对其进行敲除,用CCK-8、Tanswell实验对细胞的增殖侵袭能力的变化进行研究。【结果】LoVo-PRL-3细胞的增殖侵袭能力要强于对照组LoVo-VC细胞。在结肠癌细胞株LoVo-PRL-3中miR-21的表达上调而PTEN的表达被下调,在LoVo-VC细胞中过表达miR-21促进了细胞的增殖侵袭并降低PTEN的表达,而在LoVo-PRL-3细胞中敲除miR-21抑制了细胞的增殖侵袭并能部分恢复PTEN的表达。【结论】PRL-3通过上调miR-21抑制PTEN的表达,调节了PI3K信号通路,从而促进了结肠癌细胞的增殖侵袭。 展开更多
关键词 肝再生磷酸酶-3 MIR-21 PTEN
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胃癌相关基因Serpine1的RT-LAMP快速检测法 被引量:7
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作者 徐凌 殷建华 +3 位作者 朱秀 唐毕锋 曹广文 邓松华 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第6期695-697,共3页
目的建立逆转录-环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因。方法快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增转移相关基因Serpine1,扩增条件为63℃保温30min,扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定。结果... 目的建立逆转录-环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因。方法快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增转移相关基因Serpine1,扩增条件为63℃保温30min,扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定。结果RT-LAMP能特异性快速的扩增目的基因。结论RT-LAMP能因其特异,快速,高效的优点可以广泛运用于肿瘤转移相关基因的检测,对临床早期诊断提供标准。 展开更多
关键词 胃肿瘤 肿瘤 转移
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RNA干扰抑制骨肉瘤MG-63细胞β-catenin的表达 被引量:6
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作者 张帆 陈安民 +1 位作者 郭风劲 陈剑峰 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期13-16,21,共5页
目的通过抑制Wnt信号通路核心蛋白β-catenin在骨肉瘤细胞系MG-63中的表达,探讨β-catenin对MG-63细胞的生长、细胞侵袭性以及耐药性等方面的作用。方法设计合成β-catenin的si RNA序列,LipofectamineTM2000转染入MG-63细胞。用RT-PCR和... 目的通过抑制Wnt信号通路核心蛋白β-catenin在骨肉瘤细胞系MG-63中的表达,探讨β-catenin对MG-63细胞的生长、细胞侵袭性以及耐药性等方面的作用。方法设计合成β-catenin的si RNA序列,LipofectamineTM2000转染入MG-63细胞。用RT-PCR和Western blot法检测干扰后β-catenin的mRNA和蛋白表达情况,利用流式细胞仪检测细胞周期,Transwell法检测细胞侵袭能力,CCK-8法检测细胞增殖,利用阿霉素检测细胞耐药性。结果干扰后,实验组细胞的β-catenin mRNA和蛋白表达较对照组和空白组显著降低(均P<0.05);细胞周期检测实验组与对照组和空白组比较差异无统计学意义(P>0.05);Transwell法结果显示实验组细胞侵袭能力较对照组和空白组显著下降(均P<0.05);CCK-8法检测显示实验组细胞增殖力较对照组和空白组略有降低,但差异无统计学意义(均P>0.05);多柔比星敏感性检测显示实验组较对照组和空白组细胞生长抑制率显著增加(均P<0.05)。结论特异性抑制β-catenin基因表达可抑制骨肉瘤MG-63细胞的侵袭能力,并增加MG-63细胞对化疗药物阿霉素的敏感性。 展开更多
关键词 骨肉瘤 Β-CATENIN RNA干扰
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VEGFR-3、LYVE-1与直肠癌组织中表达及淋巴转移相关性的研究 被引量:4
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作者 陶成诚 余昌俊 +4 位作者 孟刚 曹志国 陈昌裕 龙腾云 王岳君 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第10期1237-1239,共3页
目的通过研究血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)、淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)在直肠癌组织、正常直肠组织淋巴管中的表达,分析直肠癌组织中微淋巴管密度(LMVD)与直肠癌淋巴结转移之间的关系。方法收集46例直肠癌石蜡切片和15例正... 目的通过研究血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)、淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)在直肠癌组织、正常直肠组织淋巴管中的表达,分析直肠癌组织中微淋巴管密度(LMVD)与直肠癌淋巴结转移之间的关系。方法收集46例直肠癌石蜡切片和15例正常直肠组织,分析直肠癌组织及正常直肠组织中的淋巴管分布以及LMVD与直肠癌淋巴结转移、浸润之间的关系。结果直肠癌组织周围原有淋巴管增生、变异,新生功能性淋巴管明显增多,直肠癌组织LMVD与淋巴结转移、肿瘤大小和肿瘤浸润深度有关(P<0.05),与生物学特性和肿瘤部位无关。结论 VEGFR-3、LYVE-1在直肠癌组织淋巴管中的表达,促进了直肠癌的浸润及淋巴结转移。通过对针对VEGFR-3、LYVE-1的靶向治疗,可减少直肠癌的远处转移,检测VEGFR-3、LYVE-1可作为直肠癌治疗的预后指标。 展开更多
关键词 直肠癌 微淋巴管密度 VEGFR-3 LYVE-1 淋巴结 转移
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Ezrin蛋白过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响 被引量:4
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作者 孟云霄 于双妮 +1 位作者 卢朝辉 陈杰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期600-603,共4页
目的探讨Ezrin过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响。方法用过表达载体pcb6-Ezrin稳定转染Panc-1细胞,并用流式细胞仪检测细胞周期,CCK-8法检测细胞生长曲线,扫描电镜观察细胞表面形态及表面突起的变化,用未包被及包被Matrigel... 目的探讨Ezrin过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响。方法用过表达载体pcb6-Ezrin稳定转染Panc-1细胞,并用流式细胞仪检测细胞周期,CCK-8法检测细胞生长曲线,扫描电镜观察细胞表面形态及表面突起的变化,用未包被及包被Matrigel胶的Transwell小室分别检测细胞的运动和侵袭能力,并用免疫印迹法检测信号相关蛋白Erk1/2的变化。结果过表达Ezrin后其蛋白的表达明显升高,Panc-1细胞表面的细胞突起、微绒毛数量明显增加,运动及侵袭能力也明显增加,但对细胞的体外增殖和细胞周期无明显的影响。Ezrin的过表达能够激活Erk1/2的表达。结论 Ezrin蛋白对胰腺癌细胞的细胞突起、表面微绒毛的形成、细胞骨架及细胞的运动和侵袭发挥着重要的作用。因此,Ezrin可能在胰腺癌的进展中发挥着重要的作用,Erk1/2信号转导途径在这一过程中发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 EZRIN 微绒毛 运动 侵袭 过表达
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RT-PCR检测乳腺癌淋巴结转移的临床意义 被引量:6
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作者 郝新保 付京 邱福海 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期964-967,共4页
背景与目的:近年来有报道,应用逆转录-多聚酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测有关肿瘤细胞标志物的mRNA表达来判断淋巴结转移情况,可以获得较高的检测灵敏度。本研究的目的在于探讨RT-PCR检测癌... 背景与目的:近年来有报道,应用逆转录-多聚酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测有关肿瘤细胞标志物的mRNA表达来判断淋巴结转移情况,可以获得较高的检测灵敏度。本研究的目的在于探讨RT-PCR检测癌细胞淋巴结转移的临床意义。方法:应用RT-PCR技术检测患者腋窝淋巴结中MUC1和keratin19的mRNA表达,结合HE染色结果判断有无发生腋窝淋巴结转移。HE染色阴性患者随访3年。结果:86例肿瘤组织中可检测出MUC1和keratin19的表达,而正常淋巴结中未发现。在37例HE染色淋巴结阴性的病例中,有11例(29.7%)的keratin19检测结果阳性,这部分病例的3年复发率为45.5%,而keratin19表达阴性的病例其3年复发率仅为12.5%(P<0.01)。结论:RT-PCR检测出的MUC1和keratin19在淋巴结中的表达可作为乳腺癌转移的参考标志,有助于对乳腺癌预后的判断。 展开更多
关键词 RT-PCR 检测 乳腺癌 淋巴结转移
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hnRNP B_1对人肺癌A549细胞DNA-PK活性及细胞周期、凋亡的影响 被引量:5
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作者 韩娟 李为民 +2 位作者 唐凤鸣 蒲丹 陈文彬 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期815-818,共4页
目的探讨核内不均一核糖核蛋白B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein B1,hnRNP B1)对肺癌细胞抑癌基因DNA依赖蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)的活性、细胞周期和凋亡的影响。方法根据干扰hnRNP B1基因序列的两段... 目的探讨核内不均一核糖核蛋白B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein B1,hnRNP B1)对肺癌细胞抑癌基因DNA依赖蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)的活性、细胞周期和凋亡的影响。方法根据干扰hnRNP B1基因序列的两段不同靶序列构建2个hnRNP B1的siRNA抑制表达质粒A、D,转染人肺癌A549细胞。实验分组为重组质粒A、D转染的A549细胞、空质粒转染的A549细胞、未转染的A549细胞、预先用DNA-PK抑制剂NU7026(10μmol/L)作用1h的重组质粒A、D转染的A549细胞。Western blot检测各组细胞hnRNP B1表达。采用DNA-PK检测试剂盒检测DNA-PKcs激酶活性。以流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果hnRNP B1 siRNA抑制肺癌细胞hnRNP B1表达;转染hnRNP B1 siRNA细胞的DNA-PK活性、凋亡率较未转染组明显增高(P均<0.05);G1期细胞明显增多(P<0.05),S期细胞减少(P<0.05)。预先用NU7026处理的转染hnRNP B1 siRNA细胞组与未处理的转染组比较,其G1期细胞明显降低(P<0.05),S期细胞明显增多(P<0.05),凋亡率明显降低(P<0.05);DNA-PK酶活性和细胞凋亡率成明显的正相关(相关系数r=0.817,P<0.01)。结论hnRNP B1可以使DNA-PK酶活性降低,从而影响细胞基因组的稳定及参与调控肺癌细胞周期与凋亡。 展开更多
关键词 DNA依赖蛋白激酶 核内不均一核糖核蛋白B1 肺癌细胞A549
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大鼠Walker-256肝微小转移癌模型的建立及病理学、影像学的初步研究 被引量:3
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作者 王琦 时高峰 +6 位作者 彰俊杰 杜煜 王亚宁 李月考 杨丽 刘辉 张金香 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2006年第4期541-544,共4页
目的建立实验性大鼠Walker-256肝微小转移癌模型并探讨其病理学和影像学特点.方法 SD大鼠30只经脾脏注入Walker-256瘤细胞建立大鼠微小肝转移癌模型.在接种瘤细胞第9天行CT检查观察肿瘤生长情况.病理学用HE染色和血管内皮生长因子(VEG... 目的建立实验性大鼠Walker-256肝微小转移癌模型并探讨其病理学和影像学特点.方法 SD大鼠30只经脾脏注入Walker-256瘤细胞建立大鼠微小肝转移癌模型.在接种瘤细胞第9天行CT检查观察肿瘤生长情况.病理学用HE染色和血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)免疫组织化学的方法观察肿瘤的大小、形态及血管化程度.结果 SD大鼠30只中有2只麻醉意外死亡,剩余大鼠中随机选取22只处死,有19只肝脏内找到转移灶.转移灶的直径在0.5~6.6 mm.转移的成功率为86.4%.CT常规扫描方法对直径小于5 mm的转移灶检出率不足10%.病理学病灶符合癌肉瘤的特点.肿瘤内均有VEGF的表达,但程度不同;MVD的数量与VEGF表达程度呈正相关.结论经脾脏注入Walker-256癌肉瘤细胞建立大鼠肝转移癌模型的方法简便易行,成瘤率高.免疫组织化学方法显示微小转移癌灶内有新血管生成,适合影像学功能成像技术与肿瘤血管化程度的对照研究. 展开更多
关键词 肝肿瘤 动物模型 体层摄影术 X线计算机 血管生成
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