花粉过敏近年来患病率呈上升趋势,灰藜花粉量大、致敏性强,是夏秋季主要过敏原之一.本研究以灰藜花粉为研究对象,提取其花粉总蛋白,经Western blot初步鉴定灰藜过敏原蛋白分布;并利用蛋白质质谱技术,结合灰藜转录组数据预测其潜在的过...花粉过敏近年来患病率呈上升趋势,灰藜花粉量大、致敏性强,是夏秋季主要过敏原之一.本研究以灰藜花粉为研究对象,提取其花粉总蛋白,经Western blot初步鉴定灰藜过敏原蛋白分布;并利用蛋白质质谱技术,结合灰藜转录组数据预测其潜在的过敏原基因,并构建酵母展示文库;运用酵母表面展示体系,结合高通量测序鉴定灰藜花粉过敏原.结果表明:(1)灰藜的过敏原蛋白分子量大小分布在15~95 kD;(2)成功鉴定位于15 kD处的灰藜过敏原Che a 4;(3)Che a 4含133个氨基酸残基,蛋白分子量约14.2 kD,其开放阅读框ORF序列长度为402 bp,属于Profilin家族,与Che a 2氨基酸序列相似性约为76%.本研究利用酵母表面展示体系,结合高通量测序筛选出灰藜花粉过敏原Che a 4,为植物花粉过敏原的鉴定提供技术支持.展开更多
文摘花粉过敏近年来患病率呈上升趋势,灰藜花粉量大、致敏性强,是夏秋季主要过敏原之一.本研究以灰藜花粉为研究对象,提取其花粉总蛋白,经Western blot初步鉴定灰藜过敏原蛋白分布;并利用蛋白质质谱技术,结合灰藜转录组数据预测其潜在的过敏原基因,并构建酵母展示文库;运用酵母表面展示体系,结合高通量测序鉴定灰藜花粉过敏原.结果表明:(1)灰藜的过敏原蛋白分子量大小分布在15~95 kD;(2)成功鉴定位于15 kD处的灰藜过敏原Che a 4;(3)Che a 4含133个氨基酸残基,蛋白分子量约14.2 kD,其开放阅读框ORF序列长度为402 bp,属于Profilin家族,与Che a 2氨基酸序列相似性约为76%.本研究利用酵母表面展示体系,结合高通量测序筛选出灰藜花粉过敏原Che a 4,为植物花粉过敏原的鉴定提供技术支持.
