目的:开发针对粘液病毒抗性蛋白A(Myxovirus resistance protein A,MxA)的高亲和力抗体,旨在满足MxA体外检测试剂开发对抗体原料的高灵敏度需求。方法:通过传统杂交瘤抗体开发技术制备抗MxA抗体,结合计算机模拟手段,运用虚拟氨基酸突变...目的:开发针对粘液病毒抗性蛋白A(Myxovirus resistance protein A,MxA)的高亲和力抗体,旨在满足MxA体外检测试剂开发对抗体原料的高灵敏度需求。方法:通过传统杂交瘤抗体开发技术制备抗MxA抗体,结合计算机模拟手段,运用虚拟氨基酸突变等方法,对抗体进行结构优化。结果:计算机模拟技术确定抗原-抗体关键氨基酸位点为重链第37、38、57、66、106、108、117位,轻链第34、36、38、56位。对这些位点进行虚拟氨基酸突变,得到轻链ASN36→ARG突变抗体。亲和力分析显示该突变抗体比野生型抗体亲和力提高2个数量级,KD值达到5.93×10^(-11) mol/L。结论:本文成功开发了抗MxA单克隆抗体,并通过计算机模拟技术使该抗体亲和力提升了2个数量级,为抗体的体外亲和力成熟提供了理论指导。展开更多
文摘目的:开发针对粘液病毒抗性蛋白A(Myxovirus resistance protein A,MxA)的高亲和力抗体,旨在满足MxA体外检测试剂开发对抗体原料的高灵敏度需求。方法:通过传统杂交瘤抗体开发技术制备抗MxA抗体,结合计算机模拟手段,运用虚拟氨基酸突变等方法,对抗体进行结构优化。结果:计算机模拟技术确定抗原-抗体关键氨基酸位点为重链第37、38、57、66、106、108、117位,轻链第34、36、38、56位。对这些位点进行虚拟氨基酸突变,得到轻链ASN36→ARG突变抗体。亲和力分析显示该突变抗体比野生型抗体亲和力提高2个数量级,KD值达到5.93×10^(-11) mol/L。结论:本文成功开发了抗MxA单克隆抗体,并通过计算机模拟技术使该抗体亲和力提升了2个数量级,为抗体的体外亲和力成熟提供了理论指导。
