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磁性纳米材料NZVI-GO在提取不同生物样本基因组DNA中的应用
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作者 翟方亚 郑慧姿 +6 位作者 胡浩亮 张子琪 宋烨莎 宋小军 邰玉蕾 金大智 陈毓 《中国生物制品学杂志》 2026年第1期59-66,77,共9页
目的应用氧化石墨烯(graphene oxide,GO)和环氧官能团与零价纳米铁(nanoscale zero-valent iron,NZVI)结合制备的吸附剂材料NZVI-GO,建立一种快速提取多种样本基因组DNA(genomic DNA,gDNA)的方法,以期满足后续分子实验要求。方法采用水... 目的应用氧化石墨烯(graphene oxide,GO)和环氧官能团与零价纳米铁(nanoscale zero-valent iron,NZVI)结合制备的吸附剂材料NZVI-GO,建立一种快速提取多种样本基因组DNA(genomic DNA,gDNA)的方法,以期满足后续分子实验要求。方法采用水热法制备磁性纳米材料NZVI-GO,并进行表征。使用NZVI-GO提取不同生物样本(血液、细菌、动植物组织)的gDNA,并优化磁珠用量(人全血和假结核耶尔森菌:10、15、20和25 mg;动植物:20、35、50、65和80 mg)、SDS缓冲液浓度(2%、4%、6%、8%和10%),TC缓冲液pH(2、4、6、8和10)及聚乙二醇6000浓度(5%、10%、20%、30%和40%)。采用建立的方法提取4种生物样本的gDNA,并与2个厂家生产的核酸提取试剂盒进行比较。结果GO颗粒、NZVI颗粒和NZVI-GO的红外光谱分析表明,NZVI与GO之间存在结合;扫描电子显微镜观察显示,GO可作为分散剂将纳米铁颗粒均匀嵌入,GO与NZVI组成的球形结构可保护NZVI表面的羟基和羧基官能团免于氧化。最佳提取条件为:磁珠用量20 mg,SDS浓度为6%,pH为10,聚乙二醇6000浓度为20%。与市售核酸提取试剂盒1比较,采用NZVI-GO法提取人全血、细菌、动植物样本gDNA浓度有所升高,但差异无统计学意义(t=1.236~1.935,P均>0.05);与市售核酸提取试剂盒2比较,NZVI-GO提取人全血、细菌、动植物样本gDNA浓度均显著升高,且差异有统计学意义(t=4.568~15.200,P均<0.01)。结论建立的基于NZVI-GO的gDNA提取方法具有操作简便、快速、效率高、广谱适用等优点,能满足后续分子实验要求。 展开更多
关键词 磁性纳米材料 氧化石墨烯 环氧官能团与零价纳米铁 生物样本 基因组DNA
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低氧对妊娠大鼠肝脏脂代谢的影响及可能机制
2
作者 许佳佳 李建华 《中国高原医学与生物学杂志》 2026年第1期12-18,共7页
目的探讨低氧对妊娠大鼠肝脏脂代谢的影响及可能机制。方法检测常氧组、低氧组妊娠大鼠脂代谢指标(TG、CHO、HDL-C、LDL-C),观察肝脏脂滴和形态学变化;分析与肝脏脂代谢相关指标(PI3K、AKT、SREBP-1c)的mRNA和蛋白表达量。结果与常氧组... 目的探讨低氧对妊娠大鼠肝脏脂代谢的影响及可能机制。方法检测常氧组、低氧组妊娠大鼠脂代谢指标(TG、CHO、HDL-C、LDL-C),观察肝脏脂滴和形态学变化;分析与肝脏脂代谢相关指标(PI3K、AKT、SREBP-1c)的mRNA和蛋白表达量。结果与常氧组相比,低氧组血清TG、LDL-C水平上升,HDL-C水平下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。低氧组肝脏脂滴增多,差异具有统计学意义(P<0.05);肝细胞轻度脂肪变性。低氧组妊娠大鼠肝脏p-PI3K、p-AKT的蛋白表达量上调,SREBP-1c的mRNA和蛋白表达量上调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论低氧可以增加妊娠大鼠肝脏的脂质合成,其机制可能与PI3K、AKT通路磷酸化促进SREBP-1c的表达有关。 展开更多
关键词 低氧 妊娠 脂质代谢 SREBP-1C 通路 肝脏
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转运RNA衍生片段在衰老相关疾病中的研究进展
3
作者 德晓朦 《实用老年医学》 2026年第3期299-303,共5页
转运RNA衍生片段(transfer RNA-derived fragments,tRFs/tsRNAs)是由转运RNA(transfer RNA,tRNA)经特定核酸酶切割产生的非编码RNA,具有高度保守性、结构稳定性和功能多样性,其表达异常与多种疾病相关。tRFs的调控机制比微小RNA(microRN... 转运RNA衍生片段(transfer RNA-derived fragments,tRFs/tsRNAs)是由转运RNA(transfer RNA,tRNA)经特定核酸酶切割产生的非编码RNA,具有高度保守性、结构稳定性和功能多样性,其表达异常与多种疾病相关。tRFs的调控机制比微小RNA(microRNA,miRNA)更复杂,涉及类miRNA作用、调节翻译、结合蛋白等。随着人口老龄化,tRFs在肿瘤、神经退行性疾病及代谢综合征等衰老相关疾病中的表达失调受到关注。此外,tRFs在体液中的高稳定性使其成为潜在无创生物标志物。本综述总结了tRFs的分类及其在衰老相关疾病中的诊疗价值,旨在为该领域研究提供新视角。 展开更多
关键词 转运RNA衍生片段 癌症 阿尔茨海默病 帕金森病 生物标志物
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BMPR2非经典信号通路在动脉型肺动脉高压中作用及作为治疗靶点的研究进展
4
作者 王逸婕 胡雅婷 +1 位作者 李彬彬 李芳伟 《中国病理生理杂志》 北大核心 2026年第2期369-375,共7页
动脉型肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是以肺血管病理性重塑和肺动脉压升高为特征的进行性心肺疾病。骨形态发生蛋白受体2(bone morphogenetic protein receptor type 2,BMPR2)信号通路功能异常是驱动PAH发生发展的... 动脉型肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是以肺血管病理性重塑和肺动脉压升高为特征的进行性心肺疾病。骨形态发生蛋白受体2(bone morphogenetic protein receptor type 2,BMPR2)信号通路功能异常是驱动PAH发生发展的关键分子机制。作为PAH的主要遗传易感因素,约70%的遗传性PAH(heritable PAH,HPAH)和20%的特发性PAH(idiopathic PAH,IPAH)患者携带BMPR2突变。传统观点认为BMPR2通过Smad依赖的经典信号通路调控血管稳态,但近年研究显示其非经典信号通路(如TAK1-MAPK、PI3K-AKT、RhoAROCK等)的异常激活也是驱动PAH进展的关键因素。本文阐述BMPR2非经典信号通路的分子机制及其在PAH中的作用,并介绍靶向这些通路的治疗潜力。 展开更多
关键词 动脉型肺动脉高压 骨形态发生蛋白受体2 非经典信号通路
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周细胞向肌成纤维细胞转化在组织纤维化中的研究进展
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作者 唐蕾 史俊(综述) 王朝(审校) 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第8期873-879,共7页
周细胞是具有产生细胞外基质作用的一个功能独特的细胞亚群,被证实是环绕微血管的间充质起源的收缩细胞。肌成纤维细胞的活化、增殖被认为是纤维化病理进程中的核心因素。随着遗传谱系追踪和单细胞RNA测序等技术的应用,周细胞-肌成纤维... 周细胞是具有产生细胞外基质作用的一个功能独特的细胞亚群,被证实是环绕微血管的间充质起源的收缩细胞。肌成纤维细胞的活化、增殖被认为是纤维化病理进程中的核心因素。随着遗传谱系追踪和单细胞RNA测序等技术的应用,周细胞-肌成纤维细胞转化被证实是肌成纤维细胞活化的新途径。文章主要就周细胞-肌成纤维细胞转化参与组织纤维化过程中涉及的多条信号转导途径以及代谢重编程、细胞外囊泡、内皮祖细胞旁分泌、周细胞-内皮细胞间通讯、蛋白质糖基化反应等干预靶点进行综述。 展开更多
关键词 纤维化 周细胞 周细胞-肌成纤维细胞转化 细胞外基质
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基于网络药理学和实验验证探讨降脂理肝汤治疗非酒精性脂肪肝的作用机制 被引量:6
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作者 季敬 姜昊 +2 位作者 彭娇 孙妍华 何珊 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第2期356-364,共9页
目的基于网络药理学和分子对接技术,并结合细胞实验验证,探究降脂理肝汤(Jiangzhi Ligan decoction,JZLGD)治疗非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制。方法通过网络药理学相关数据库获取JZLGD治疗NAFLD... 目的基于网络药理学和分子对接技术,并结合细胞实验验证,探究降脂理肝汤(Jiangzhi Ligan decoction,JZLGD)治疗非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制。方法通过网络药理学相关数据库获取JZLGD治疗NAFLD的活性成分、潜在靶点,构建“药物-成分-靶点”关系网络图,对交集基因进行GO和KEGG富集分析;并将核心成分与核心靶点进行分子对接。然后,采用棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导HepG2细胞建立NAFLD模型,MTT检测JZLGD含药血清的细胞毒性;试剂盒检测胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)的含量;油红O染色检测细胞脂质变性;Western blot法检测自噬关键靶点p62和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated-proteinlight-chain-3,LC3)、AMPKα和p-AMPKα蛋白的表达;设置AMPK抑制剂(compound C,CC)和自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)干预组,检测胞内TC和TG的含量,进一步验证JZLGD的药效及机制。结果筛选出JZLGD活性成分64个,涉及靶点373个,与NAFLD交集靶点109个,前4个核心靶点分别为INS、AKT1、TNF和PPARγ,KEGG分析显示,JZLGD治疗NAFLD主要富集在胰岛素抵抗、AMPK、mTOR、自噬等信号通路。分子对接结果显示,隐丹参酮、荷叶碱、槲皮素、芦荟大黄素等核心成分与核心靶点及自噬相关蛋白受体结合良好。细胞结果表明,JZLGD干预可以显著降低PA诱导的HepG2细胞胞内TG、TC含量,下调p62蛋白表达,上调LC3Ⅱ蛋白表达,AMPK磷酸化程度升高;而CC和CQ的干预下,很大程度上逆转了JZLGD改善脂质蓄积的作用。结论JZLGD调节AMPK信号通路激活自噬,从而治疗NAFLD。 展开更多
关键词 降脂理肝汤 非酒精性脂肪肝 网络药理学 分子对接 作用机制 AMPK-自噬通路
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miR-29a介导双氢青蒿素对肺腺癌B7H3分子调控 被引量:1
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作者 朱亚玉 凌惠娟 +2 位作者 牛可 唐静 陈礼文 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第4期604-610,共7页
目的探究microRNA-29a(miR-29a)介导双氢青蒿素(DHA)对肺腺癌(LUAD)免疫检查点分子B7H3的调控机制。方法利用公共数据库分析B7H3在肺腺癌中的表达水平和预后意义。采用小干扰RNA(siRNA)敲减肺腺癌细胞株A549和HCC827中B7H3分子,CCK-8法... 目的探究microRNA-29a(miR-29a)介导双氢青蒿素(DHA)对肺腺癌(LUAD)免疫检查点分子B7H3的调控机制。方法利用公共数据库分析B7H3在肺腺癌中的表达水平和预后意义。采用小干扰RNA(siRNA)敲减肺腺癌细胞株A549和HCC827中B7H3分子,CCK-8法检测细胞增殖。将梯度浓度的DHA(0、5、10、25、50、100μmol/L)处理A549与HCC827细胞48 h,计算半数抑制浓度(IC_(50)),以IC_(50)浓度DHA处理A549和HCC827细胞1、2、3 d,CCK-8法检测细胞增殖。采用miR-29a inhibitor转染A549、HCC827细胞,DHA处理后RT-qPCR检测miR-29a表达水平,Western blot检测B7H3表达水平。结果B7H3在肺腺癌中过度表达,与预后不良相关。敲低B7H3后A549、HCC827细胞增殖能力显著降低(均P<0.001)。DHA以剂量和时间依赖形式抑制A549、HCC827细胞增殖,IC_(50)分别是30.16μmol/L和7.50μmol/L。DHA上调A549、HCC827细胞miR-29a表达(P<0.001,P<0.01),同时下调B7H3表达(P<0.01,P<0.001)。A549、HCC827细胞转染miR-29a inhibitor后,B7H3表达上调,并且部分逆转DHA对B7H3的下调作用。结论miR-29a介导DHA对肺腺癌B7H3分子调控。 展开更多
关键词 肺腺癌 双氢青蒿素 B7H3 miR-29a 细胞增殖
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重症监护病房医院感染目标性监测与干预效果分析 被引量:8
8
作者 周旋 黄国玺 +2 位作者 陈晓霞 李雅君 曲惠红 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期729-732,共4页
目的:评价重症监护病房(intensive care unit,ICU)实施医院感染目标性监测与干预措施的效果。方法:通过目标性监测,同时推行综合性感染控制干预措施,掌握2011-2012年综合性ICU的住院患者医院感染发生情况、危险因素及医院感染变化趋势... 目的:评价重症监护病房(intensive care unit,ICU)实施医院感染目标性监测与干预措施的效果。方法:通过目标性监测,同时推行综合性感染控制干预措施,掌握2011-2012年综合性ICU的住院患者医院感染发生情况、危险因素及医院感染变化趋势。结果:2011年和2012年ICU的感染率分别为21.8%、16.7%,例次感染率分别为22.7%、18.0%,经病人病情平均严重程度调整,调整后的日感染率分别为5.7‰、4.4‰(χ2=0.321,P=0.865),调整的日感染例次率5.9‰、4.7‰(χ2=0.560,P=0.454)。2011年和2012年呼吸机相关性肺炎的感染率分别为29.0‰、20.1‰,中心静脉导管相关血流感染分别为1.8‰、1.2‰,导尿管相关泌尿道感染率分别为1.3‰、0.7‰。采取干预措施后,2012年多重耐药菌的检出率总体呈下降趋势,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出率明显下降,且有统计学差异(χ2=9.05,P=0.029)。结论:实施目标性监测,采取有效干预措施,利于降低ICU医院感染的发生。 展开更多
关键词 重症监护病房 目标性监测 医院感染 干预效果
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大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定 被引量:7
9
作者 王翠艳 魏芳晶 +4 位作者 阴淑莹 李云霞 张晓云 乔晓娟 石秀换 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1086-1088,共3页
目的探讨体外分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的生物学特性,对其表型和生长曲线进行初步鉴定。方法采用全骨髓培养法提取培养MSCs,绘制原代及三代细胞生长曲线,利用免疫组化法检测表面标志物CD34、CD44;流式细胞分析法检测表面标... 目的探讨体外分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的生物学特性,对其表型和生长曲线进行初步鉴定。方法采用全骨髓培养法提取培养MSCs,绘制原代及三代细胞生长曲线,利用免疫组化法检测表面标志物CD34、CD44;流式细胞分析法检测表面标志物CD90。结果成功培养出MSCs,免疫组化CD44阳性表达,CD34阴性表达;流式细胞术CD90阳性表达。结论该实验分离培养的细胞群与MSCs的生物学特性相吻合,说明MSCs易于体外分离、培养和扩增。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 分离 培养 生物学特性
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药物性肝损伤与免疫性肝损伤肝组织中lncRNA表达谱的差异分析 被引量:9
10
作者 周军 朱灵 +2 位作者 曹海军 李善高 吕宾 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期313-318,共6页
目的:研究长链非编码RNA(lncRNA)在药物性肝损伤及免疫性肝损伤中表达谱的变化,并分析二者的差异。方法:利用lncRNA芯片技术分别检测对乙酰氨基酚诱导的小鼠药物性肝损伤及刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤肝组织的lncRNA表达谱,通过对... 目的:研究长链非编码RNA(lncRNA)在药物性肝损伤及免疫性肝损伤中表达谱的变化,并分析二者的差异。方法:利用lncRNA芯片技术分别检测对乙酰氨基酚诱导的小鼠药物性肝损伤及刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤肝组织的lncRNA表达谱,通过对原始数据进行预处理达到均一化后,筛选出差异表达lncRNA并进行分析。结果:与正常肝脏组织比较,变化1.5倍以上并且差异有统计学意义(P<0.05)的lncRNA被认为是差异表达的lncRNA;药物性肝损伤肝组织中变化1.5倍以上的共68条,其中升高1.5倍以上的共21条,降低1.5倍以上的共47条;免疫性肝损伤肝组织中变化1.5倍以上的共60条,其中升高1.5倍以上的共17条,降低1.5倍以上的共43条。所有的lncRNA中有8条lncRNA同时在2种肝损伤肝组织中上调,在药物性肝损伤肝组织上调的lncRNA中占38%,在免疫性肝损伤肝组织中占47%;有28条lncRNA同时在2种肝损伤肝组织中下调,在药物性肝损伤肝组织下调的lncRNA中占59%,在免疫性肝损伤肝组织中占65%。结论:与正常肝脏组织比较,药物性肝损伤肝组织和免疫性肝损伤肝组织中lncRNA表达谱均发生明显变化,且2种不同肝损伤肝组织比较,lncRNA表达谱也存在差异,提示2种肝损伤肝组织中这些同时上、下调的lncRNA可能参与了2种肝损伤之间相似或是相同的病理生理过程,而那些表达不同的lncRNA可能参与相对特异的肝损伤机制的发生。 展开更多
关键词 lncRNA lncRNA芯片 药物性肝损伤 免疫性肝损伤
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白细胞介素24在肺部相关疾病中的研究进展 被引量:1
11
作者 朱梦阳 肖漓 张涛 《结核与肺部疾病杂志》 2025年第4期472-476,共5页
白细胞介素24(IL-24)是细胞因子IL-10家族的重要成员,广泛表达于免疫系统相关的组织和细胞中。在炎症或外界微环境刺激下,IL-24可通过在细胞内或分泌到细胞外与受体结合,激活STAT、ERK和SOCS等信号通路,促进免疫细胞的趋化和表达,参与... 白细胞介素24(IL-24)是细胞因子IL-10家族的重要成员,广泛表达于免疫系统相关的组织和细胞中。在炎症或外界微环境刺激下,IL-24可通过在细胞内或分泌到细胞外与受体结合,激活STAT、ERK和SOCS等信号通路,促进免疫细胞的趋化和表达,参与多种肺部相关疾病的病理生理过程。IL-24的表达水平与非小细胞肺癌、肺纤维化、哮喘等肺部疾病相关,靶向IL-24及其受体能够减少疾病损伤和改善预后。本文主要介绍IL-24在肺部相关疾病中的研究进展,希望为探索其在疾病的作用机制及治疗提供参考。 展开更多
关键词 白细胞介素24(IL-24) 免疫调节 肺部疾病 综述
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mTOR在炎性自身免疫性疾病中的作用 被引量:6
12
作者 白艳梅 刘海杰 +1 位作者 高微 高娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期301-304,共4页
mT OR(mammalian target of rapamycin,mT OR)是一个非典型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是1991年Heitman等学者在酵母中作为雷帕霉素(Rapamyein)靶蛋白被发现的。
关键词 MTOR 自身免疫性疾病 RAPAMYCIN 苏氨酸蛋白激酶 炎性 雷帕霉素 丝氨酸 非典型
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长非编码RNA以及与疾病发生的研究进展 被引量:8
13
作者 唐珍 王含彦 +2 位作者 易芳 郭冬梅 罗蓉 《西南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第1期51-55,共5页
调节性非编码RNA是指不被翻译为蛋白且具调节作用的功能性RNA分子,常见的具调控作用的非编码RNA(ncRNA)包括si RNA、miRNA、piRNA以及长链非编码RNA(lncRNA).lncRNA是目前调节性非编码RNA研究的热点.lncRNA与物种进化、胚胎发育、物质... 调节性非编码RNA是指不被翻译为蛋白且具调节作用的功能性RNA分子,常见的具调控作用的非编码RNA(ncRNA)包括si RNA、miRNA、piRNA以及长链非编码RNA(lncRNA).lncRNA是目前调节性非编码RNA研究的热点.lncRNA与物种进化、胚胎发育、物质代谢以及肿瘤发生等有密切的联系,对其功能深入了解可促进细胞内基因表达调控网络的研究,也为临床疾病尤其是肿瘤的诊断和治疗以及新药的研发提供科学依据.本文主要对lncRNA的功能研究以及与疾病的发生研究现状进行探讨. 展开更多
关键词 非编码RNA(ncRNA) 长链非编码RNA(lncRNA) 调控机制 肿瘤
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骨质疏松症相关基因研究进展 被引量:10
14
作者 赵航 马慧娟 王超 《实用老年医学》 CAS 2019年第6期523-527,共5页
骨质疏松症(osteoporosis)是一种常见的全身性、代谢性骨病,其特征为骨量减少和骨组织结构破坏,导致骨密度(bone mineral density,BMD)下降和脆性骨折的风险增加[1-2]。在成年期,随着年龄的增长,骨量逐渐减少,所以骨质疏松症是公认的老... 骨质疏松症(osteoporosis)是一种常见的全身性、代谢性骨病,其特征为骨量减少和骨组织结构破坏,导致骨密度(bone mineral density,BMD)下降和脆性骨折的风险增加[1-2]。在成年期,随着年龄的增长,骨量逐渐减少,所以骨质疏松症是公认的老年人常见疾病。骨质疏松症影响了全世界范围内三分之一的女性和八分之一50岁以上的男性[3]。 展开更多
关键词 骨质疏松症 相关基因 骨量减少 代谢性骨病 骨组织结构 脆性骨折 常见疾病 全身性
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鹿瓜多肽联合hBMP-2基因对软骨细胞增殖和Ⅱ型胶原分泌的影响 被引量:6
15
作者 王丽红 何英 +1 位作者 徐永柱 赖国旗 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1577-1580,共4页
目的观察鹿瓜多肽联合hBMP-2基因对软骨细胞的增殖和软骨细胞分泌Ⅱ型胶原是否有协同作用。方法分离培养原代兔软骨细胞,用第3代细胞为模型,实验分为未转染组、腺病毒-绿色荧光蛋白(Ad-GFP)组、Ad-hBMP2-GFP组、鹿瓜多肽+Ad-hBMP2-GFP组... 目的观察鹿瓜多肽联合hBMP-2基因对软骨细胞的增殖和软骨细胞分泌Ⅱ型胶原是否有协同作用。方法分离培养原代兔软骨细胞,用第3代细胞为模型,实验分为未转染组、腺病毒-绿色荧光蛋白(Ad-GFP)组、Ad-hBMP2-GFP组、鹿瓜多肽+Ad-hBMP2-GFP组,培养48 h后,RT-PCR检测hBMP-2mRNA的表达,流式细胞仪检测软骨细胞的周期。培养48、72 h后,MTT法检测软骨细胞的增殖,W estern印迹检测hBMP-2蛋白和Ⅱ型胶原的表达。结果培养48 h后,Ad-hBMP2-GFP组和鹿瓜多肽+Ad-hBMP2-GFP组hBMP-2 mRNA呈阳性,而未转染组、Ad-GFP组表达呈阴性;与未转染组、Ad-GFP组、Ad-hBMP2-GFP组比较,鹿瓜多肽+hBMP-2基因组能使软骨细胞S-G2/M期细胞比例增加,软骨细胞数量增加(P<0.05),软骨细胞hBMP-2蛋白表达和Ⅱ型胶原分泌增加(P<0.01);培养48与72 h比较,鹿瓜多肽联合hBMP-2基因对软骨细胞增殖和Ⅱ型胶原分泌无显著性差异(P>0.05)。结论鹿瓜多肽能促进hBMP-2基因在软骨细胞中合成hBMP-2蛋白,鹿瓜多肽联合hBMP-2基因对软骨细胞增殖和分泌Ⅱ型胶原的功能有协同作用。 展开更多
关键词 鹿瓜多肽 HBMP-2 软骨细胞 增殖 Ⅱ型胶原
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慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白筛选稳定转染的兔骨髓间充质干细胞 被引量:5
16
作者 李琦 邹志余 +3 位作者 杨瑞泽 邓洪利 张蕊 周劲松 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期619-623,共5页
目的分离、培养并鉴定兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),探讨慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)感染兔BMSCs的最佳条件,筛选稳定转染的兔 BMSCs 。方法通过全骨髓贴壁... 目的分离、培养并鉴定兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),探讨慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)感染兔BMSCs的最佳条件,筛选稳定转染的兔 BMSCs 。方法通过全骨髓贴壁法获得兔BMSCs;茜素红、甲苯胺蓝及油红O染色对BMSCs成骨、成软骨及成脂分化进行鉴定;免疫荧光组化染色检测CD44及CD90的表达;不同浓度嘌呤霉素筛选BMSCs的最小致死浓度;以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为50、100、150、200的慢病毒载体介导eGFP转染BMSCs,倒置显微镜下观察荧光表达,并用嘌呤霉素筛出稳定转染系。结果当MOI为150,慢病毒载体介导eGFP感染兔BMSCs效率最高;嘌呤霉素筛选稳定转染兔BMSCs的最适质量浓度是1.0 μg/mL。结论成功培养了兔BMSCs,用慢病毒介导的GFP标记了兔BMSCs并筛选出了稳定转染的兔BMSCs,建立了一个简便有效的干细胞标记方法,为BMSCs在动物体内实验标记示踪奠定了基础。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 慢病毒载体 增强型绿色荧光蛋白 转染 嘌呤霉素
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人参皂苷Rb1激活Nrf2/ARE通路对术后疲劳综合征老年大鼠骨骼肌氧化应激损伤的影响 被引量:9
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作者 毛翔宇 庄成乐 +6 位作者 陈伟哲 刘舒 朱江 吴天添 张昌静 陈必成 余震 《医学研究杂志》 2014年第5期26-30,共5页
目的研究人参皂苷Rb1激活Nrf2/ARE通路来减轻术后疲劳综合征老年大鼠骨骼肌氧化应激损伤,探讨人参皂苷Rb1的抗疲劳机制。方法以70%中段小肠切除用以制备术后大鼠疲劳综合征模型。老年SD大鼠随机分为对照组、模型组和人参皂苷Rb1干预组,... 目的研究人参皂苷Rb1激活Nrf2/ARE通路来减轻术后疲劳综合征老年大鼠骨骼肌氧化应激损伤,探讨人参皂苷Rb1的抗疲劳机制。方法以70%中段小肠切除用以制备术后大鼠疲劳综合征模型。老年SD大鼠随机分为对照组、模型组和人参皂苷Rb1干预组,每组再分别按时间点分为术后6h,第1、3、7天组。在术后对应时间点进行旷场实验检测行为学变化后取骨骼肌,分光光度法测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,RT-PCR检测Nrf2及下游Ⅱ相解毒酶基因Nqo1表达。Western blot检测Nrf2核转位情况。结果旷场实验显示,相比于对照组,模型组术后穿越格子数降低(第1、3天,P<0.05),休息时间增加(第1、3、7天,P<0.05);相比于模型组,干预组穿越格子数术后增加(第1、3天,P<0.05)。相比于对照组,模型组SOD活性在术后增加(第3、7天,P<0.05),MDA含量增加(第1、3、7天,P<0.05);相比于模型组,干预组SOD活性术后增加(第3、7天,P<0.05),MDA含量术后降低(第3、7天,P<0.05)。RT-PCR结果表明,相比于对照组,模型组Nrf2术后表达增加(第1、3天,P<0.05),Nqo1术后表达有上升倾向(第1、3天,P>0.05);相比于模型组,干预组Nrf2术后表达增加(6h、第1天、第3天,P<0.05),Nqo1表达增加(6h、第1天,P<0.05)。Western blot结果表明,相比于对照组,模型组核内Nrf2术后表达增加(6h、第1、3、7天,P<0.05);相比于模型组,干预组核内Nrf2术后表达增加(6h、第1天、第3天,P<0.05)。结论通过激活Nrf2/ARE通路,人参皂苷Rb1能减轻老年大鼠术后疲劳综合征骨骼肌氧化应激所致损伤,这可能是其抗术后疲劳的一种机制。 展开更多
关键词 人参皂苷RB1 术后疲劳综合征 NRF2 ARE信号通路 老年大鼠 氧化应激
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非诺贝特对高脂模型大鼠过氧化物酶增殖物活化受体γ、肝X受体α和ABCA1 mRNA及其蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 高丽君 齐晓勇 +5 位作者 王秀萍 高俊茶 蔺杰 王超 孙海平 马艳凯 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第20期4421-4423,共3页
目的研究非诺贝特对高脂模型大鼠肝脏和主动脉中过氧化物酶增殖物活化受体γ(PPARγ),肝X受体(LXRα)和ABCA1 mRNA及其蛋白表达的影响。方法将30只雄性健康Wistar大鼠,随机分为正常对照组、高脂模型组、非诺贝特组,应用RT-PCR方法测量... 目的研究非诺贝特对高脂模型大鼠肝脏和主动脉中过氧化物酶增殖物活化受体γ(PPARγ),肝X受体(LXRα)和ABCA1 mRNA及其蛋白表达的影响。方法将30只雄性健康Wistar大鼠,随机分为正常对照组、高脂模型组、非诺贝特组,应用RT-PCR方法测量各组肝脏和血管中PPARγmRNA,LXRα和ABCA1 mRNA的表达,应用Western印迹方法测量肝脏和血管中PPARγ,LXRα和ABCA1蛋白的表达。结果高脂模型组肝脏、主动脉中PPARγ,LXRα和ABCA1 mRNA及蛋白表达水平与正常对照组相比升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。非诺贝特药物干预后大鼠肝脏、主动脉的PPAR-γmRNA与模型组比较虽有升高,但差异无统计学意义(P>0.05);LXRα和ABCA1 mRNA与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);它们蛋白表达变化趋势与mRNA的表达均趋势一致。结论非诺贝特不仅降低血脂,而且能够升高LXRα的表达和促进ABCA1的释放,使ABCA1的含量升高,促进胆固醇的逆转运,发挥抗动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 非诺贝特 过氧化物酶体增殖物激活受体 肝X受体 ATP结合盒转运子A1
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长链非编码RNA aHIF和ANRIL在胃癌中的表达 被引量:5
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作者 刘鑫 张尤历 +4 位作者 秦岩 倪鑫 龚爱华 张行行 徐岷 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2016年第2期176-179,共4页
目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)中的反义缺氧诱导因子(antisense hypoxia inducible factor,a HIF)和位于细胞周期激酶抑制因子4(INK4)基因座中反义非编码RNA(antisense noncoding RNA in the INK4 locus,ANRIL)在... 目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)中的反义缺氧诱导因子(antisense hypoxia inducible factor,a HIF)和位于细胞周期激酶抑制因子4(INK4)基因座中反义非编码RNA(antisense noncoding RNA in the INK4 locus,ANRIL)在胃癌组织与血浆中的表达。方法:收集20例胃癌患者癌组织及对应的癌旁组织、33例胃癌患者和20例健康者血浆,采用实时荧光定量PCR测定胃癌组织和血浆中lncRNA a HIF和ANRIL的表达水平,分析lncRNA a HIF、ANRIL在血浆中的表达与胃癌组织表达的相关性。结果:胃癌组织中lncRNA a HIF和ANRIL的表达水平均明显高于癌旁组织(t分别为-4.463,-4.886,P均<0.01);胃癌患者血浆中lncRNA a HIF和ANRIL的表达水平均明显高于健康者(t分别为-4.232,-4.450,P<0.01),且与胃癌组织中的表达水平呈正相关(r分别为0.536,0.524,P<0.05)。结论:lncRNA a HIF和ANRIL在胃癌组织和患者血浆中均高表达,且血浆与组织中的表达水平呈正相关。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA 反义缺氧诱导因子 INK4基因座中反义非编码RNA
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AR基因突变雄激素不敏感综合征相关因素在性别分配中的作用分析 被引量:6
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作者 吴德华 田红娟 +6 位作者 唐达星 傅君芬 董关萍 吴鼎文 袁金娜 杨荣旺 孙莉颖 《临床小儿外科杂志》 CAS 2019年第5期387-394,共8页
目的分析与青春期后AR基因突变雄激素不敏感综合征患儿的临床结局及外生殖器发育相关因素在性别分配中的作用,探讨AR基因突变雄激素不敏感综合症的最佳性别分配方案。方法以2015年11月至2018年10月浙江大学医学院附属儿童医院收治的21... 目的分析与青春期后AR基因突变雄激素不敏感综合征患儿的临床结局及外生殖器发育相关因素在性别分配中的作用,探讨AR基因突变雄激素不敏感综合症的最佳性别分配方案。方法以2015年11月至2018年10月浙江大学医学院附属儿童医院收治的21例出现AR基因突变的雄激素不敏感综合征(androgen insensitivity syndrome,AIS)患儿为研究对象,年龄3个月至13岁5个月,中位数为49.7个月。初诊性别女14例,男7例。外生殖器均表现为不同程度的雄性化不全,其中8例表型为完全女性化、10例为外生殖器模糊、3例为小阴茎。在分子诊断结果的基础上,将外生殖器雄性化评分(external masculinisation score,EMS)、性心理评估结果、外生殖器对雄激素刺激反应情况作为青春期后临床结局和外生殖器发育程度的预测因素,结合社会文化因素、性腺发育特点、患儿及其父母主观层面认知等因素,由本院多学科团队(multidisciplinary team,MDT)作出性别分配。结果8例(38.1%)诊断为完全性雄激素不敏感综合征(complete androgen insensitivity syndrome,CAIS)患儿的Prader评分均为0分,EMS评分为1~2分,性心理量表评估结果均表现为女性优势,雄激素治疗外生殖器无明显反应,性别分配均为女性。10例(42.9%)Prader评分为1~3分的部分性雄激素不敏感综合征(partial androgen insensitivity syndrome,PAIS)患儿EMS评分为2~9分,性心理量表评估结果除1例表现为女性优势外,其余均表现为男性优势,雄激素治疗后阴茎增长明显,性别分配均为男性。3例(14%)小阴茎患儿性心理量表评估结果均表现为男性优势,雄激素治疗后阴茎明显增长,性别分配均为男性。男性性别分配者的Prader评分和EMS评分高于女性性别分配者,且差异有统计学意义(P<0.05),雄激素治疗有效性、性心理评估结果与性别分配结果间均具有良好的关联性(P<0.05)。结论分析AR基因突变情况、EMS评分、性心理评估结果和外生殖器雄激素治疗反应结局等因素对AIS患儿未来性别认同、外生殖器发育程度等青春期后临床结局进行预测具有一定的可行性,在充分考虑社会文化因素、患儿及其父母主观层面认知情况下,由MDT进行性别分配是目前较为适宜的AIS性别分配方法。 展开更多
关键词 雄激素迟钝综合征/诊断 雄激素迟钝综合征/治疗 预测/方法 预后
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