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林氏扇头蜱脂质运载蛋白RL22表达量分析及重组蛋白抗蜱效果
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作者 陈杰 谢子芳 +5 位作者 彭维祺 朱勇川 黎明成 赵建国 王金花 管庆丰 《中国热带医学》 北大核心 2025年第6期735-741,共7页
目的探究林氏扇头蜱RL22蛋白的基本理化性质,对RL22在蜱不同发育时期和不同组织中的相对表达量进行分析,并通过动物试验评估RL22作为抗蜱候选抗原的潜力。方法通过收集各时期的蜱、组织样本,提取RNA反转录成cDNA进行qPCR和数据分析;合成... 目的探究林氏扇头蜱RL22蛋白的基本理化性质,对RL22在蜱不同发育时期和不同组织中的相对表达量进行分析,并通过动物试验评估RL22作为抗蜱候选抗原的潜力。方法通过收集各时期的蜱、组织样本,提取RNA反转录成cDNA进行qPCR和数据分析;合成PET28a-RL22表达质粒,转化至大肠埃希菌BL21中进行原核表达、纯化。将纯化后的蛋白用于对新西兰兔的免疫接种试验,通过ELISA、蛋白免疫印迹法(Western blot)测定rRL22的免疫原性及其免疫反应性,通过对攻毒后蜱的饱血体质量、产卵重量、吸血时长、孵化率的测定,评估RL22作为抗蜱候选疫苗的潜力。结果RL22氨基酸长度为177 aa,具备长度18 aa的信号肽,是亲水稳定酸性的分泌蛋白。RL22在19-36 aa、48-53 aa、61-67 aa、76-86 aa、94-109 aa、112-122 aa、147-148 aa、150-158 aa、170-173 aa处存在B细胞线性表位,同源建模显示其N端、C端具备α螺旋结构,且具有典型的β-桶状保守空间结构。RL22在不同时期的蜱中都有一定表达,在饱血蜱中肠中表达最高;通过免疫接种后,rRL22使得宿主新西兰兔产生了特异性抗体,35 d时抗体的滴度达1∶256000;免疫攻毒试验结果表明rRL22提供了一定的保护效果,在饱血体质量、产卵量、孵化率方面分别比PBS对照组下降7.2%、9.4%、6.4%,但是差异无统计学意义,同时发现rRL22显著延长了蜱吸血的时间。结论RL22为亲水酸性分泌蛋白,存在多个B细胞表位,推测其为脂质运载蛋白家族成员。RL22在试验测定的蜱各个发育时期均有表达,尤其在饱血若蜱中表达量最高。重组表达的rRL22蛋白对免疫的新西兰兔有一定的抗蜱保护效果。本研究对抗蜱候选疫苗的开发具有重要参考价值。 展开更多
关键词 林氏扇头蜱 RL22蛋白 免疫原性 抗蜱疫苗 生物信息学
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徐州市2020—2023年蜱虫监测结果分析 被引量:2
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作者 黄立业 刘雪 《中华卫生杀虫药械》 2025年第1期54-56,60,共4页
目的 掌握徐州市蜱种群分布情况,为蜱虫及其所致传染病的精准防制提供参考。方法 游离蜱监测采用人工布旗法,寄生蜱监测采用体表检蜱法。结果 徐州市2020—2023年共采集游离蜱和寄生蜱1 250只,隶属于1科2属3种,其中长角血蜱1 151只,占92... 目的 掌握徐州市蜱种群分布情况,为蜱虫及其所致传染病的精准防制提供参考。方法 游离蜱监测采用人工布旗法,寄生蜱监测采用体表检蜱法。结果 徐州市2020—2023年共采集游离蜱和寄生蜱1 250只,隶属于1科2属3种,其中长角血蜱1 151只,占92.08%,为优势蜱种,血红扇头蜱96只,占7.68%,雉鸡血蜱3只,占0.24%。游离蜱平均密度为1.15只/100 m, 2020年密度最高,林地生境密度最高;寄生蜱平均密度为6.84只/宿主,2023年染蜱率最高,差异有统计学意义(χ^(2)=15.484,P<0.05),不同宿主动物染蜱率山羊高于犬类,差异无统计学意义(χ^(2)=2.314,P>0.05);游离蜱和寄生蜱在4月密度均为最高。结论 徐州市农村外环境、景区生境和宿主动物体表均有蜱虫孳生,长角血蜱是徐州市的优势种群,林地生境和山羊宿主是重点防控对象,春季蜱虫密度最高,提示春季灭蜱效果最好。 展开更多
关键词 蜱虫 监测 种群分布 长角血蜱
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利多卡因乳膏预处理对蜱虫叮咬患者预后的影响分析
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作者 付学锋 张敏 《中国地方病防治》 2025年第5期444-445,共2页
目的 评估利多卡因乳膏预处理对蜱虫叮咬患者预后的影响,为临床处理提供参考。方法 回顾性分析2020年1月至2025年1月本院接诊的20例蜱虫叮咬患者的临床资料,根据处理方式分为两组:对照组(10例)采用75%乙醇湿敷后取出虫体;研究组(10例)... 目的 评估利多卡因乳膏预处理对蜱虫叮咬患者预后的影响,为临床处理提供参考。方法 回顾性分析2020年1月至2025年1月本院接诊的20例蜱虫叮咬患者的临床资料,根据处理方式分为两组:对照组(10例)采用75%乙醇湿敷后取出虫体;研究组(10例)采用利多卡因乳膏预处理后取出虫体。比较两组治疗当日及术后1周的血常规指标[白细胞(WBC)、中性粒细胞(NE)、嗜酸性粒细胞(EOS)]和C反应蛋白(CRP)水平,并随访1周,记录感染相关临床表现。结果 研究组虫体完整移除率为100.00%,对照组为90.00%(1例口器残留),组间差异无统计学意义(P>0.05)。治疗当日两组血常规及CRP水平无显著差异(P>0.05);术后7 d,研究组WBC、NE及CRP均低于对照组,EOS高于对照组(P<0.05)。两组在发热、叮咬处红肿、疼痛及化脓发生率方面无显著差异(P>0.05)。结论 利多卡因乳膏预处理可能有助于减轻蜱虫叮咬后的局部炎症反应。尽管本研究样本量有限,结果 仍支持开展进一步临床研究。 展开更多
关键词 利多卡因乳膏 蜱虫 预后 血常规
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2023-2024年湖北省随州市蜱种类调查 被引量:1
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作者 鲁辉亚 郭芳 +5 位作者 潘义斌 彭猛 吴礼邦 林叶 刘晓辉 于学杰 《中国血吸虫病防治杂志(中英文)》 北大核心 2025年第2期184-189,共6页
目的 了解湖北省随州市蜱的种类,为当地蜱及蜱传疾病防控提供科学依据。方法 2023年5月-2024年6月,在湖北省随州市既往报告确诊及疑似蜱传疾病病例的殷店镇、高城镇、万和镇、吴山镇、小林镇、淅河镇、何店镇及北郊街道管辖的农村地区,... 目的 了解湖北省随州市蜱的种类,为当地蜱及蜱传疾病防控提供科学依据。方法 2023年5月-2024年6月,在湖北省随州市既往报告确诊及疑似蜱传疾病病例的殷店镇、高城镇、万和镇、吴山镇、小林镇、淅河镇、何店镇及北郊街道管辖的农村地区,以病例居住地为中心,选取附近家畜养殖场及植被作为采样点。用镊子夹取养殖场散养家畜体表寄生蜱,用布旗法采集植被表面的游离蜱。于显微镜下对蜱样本进行形态学鉴定,并确定其性别及生长阶段。分别将1只饱血成蜱,2~3只吸血但未饱血成蜱,10~15只未吸血雌蜱,15~20只未吸血雄蜱,30~40只若蜱、幼蜱分为1组,提取各组蜱样本DNA,扩增蜱线粒体16S rR NA基因,采用DNASTAR软件分析获得的序列;采用MEGA 7.0软件进行系统发育分析,采用最大似然法(maximum likelihood method)并基于Kimura 2参数模型构建系统发育树。结果 2023年5月-2024年6月,累计于湖北省随州市采集蜱2 438只,其中游离蜱595只,寄生蜱1 843只;所采集的蜱样本包括幼蜱、若蜱、成蜱3个生长阶段,其中成蜱占75.18%(1 899/2 438);雌性成蜱占成蜱总数的79.04%(1 501/1 899)。经形态学及分子生物学鉴定,采集的蜱隶属于1科3属4种,包括硬蜱科血蜱属长角血蜱2 425只(占99.47%)和褐黄血蜱1只(占0.04%)、扇头蜱属微小扇头蜱11只(占0.45%)、硬蜱属中华硬蜱1只(占0.04%)。经系统发育分析,本研究采集的长角血蜱序列(SZ49)与来自云南省(Gen Bank登录号:MH024510.1)、河北省(Gen Bank登录号:MK450606.1)、河南省(Gen Bank登录号:MZ230645.1)的序列汇集于一簇,褐黄血蜱序列(SZ19)与来自日本(Gen Bank登录号:MW064044.1)、韩国(Gen Bank登录号:ON629585.1)及我国江苏省(Gen Bank登录号:PP494741.1)、河北省(Gen Bank登录号:MH520685.1)的序列汇集于一簇,微小扇头蜱序列(SZ8)与来自印度(Gen Bank登录号:MK621328.1)及我国河南省(Gen Bank登录号:MT555307.1)、贵州省(Gen Bank登录号:PP446801.1)的序列汇集于一簇,中华硬蜱序列(SZ23)与来自湖北省武汉市(Gen Bank登录号:OM368265.1)的序列同源性达99.51%。结论 湖北省随州市存在长角血蜱、褐黄血蜱、微小扇头蜱和中华硬蜱4种蜱,其中长角血蜱为优势蜱种,褐黄血蜱为随州市首次发现。 展开更多
关键词 长角血蜱 褐黄血蜱 形态学鉴别 系统发育分析 随州市
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气候变化对西藏革蜱在青藏高原地理分布的影响研究 被引量:1
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作者 王紫航 白玛次旺 +4 位作者 李世豪 付邦 任佳荣 刘小波 梁莹 《中国媒介生物学及控制杂志》 2025年第1期86-93,98,共9页
目的了解青藏高原地区西藏革蜱的潜在地理分布,探究影响其潜在地理分布的主要因素,为西藏革蜱监测和相关蜱传疾病的预防控制提供科学依据。方法基于西藏革蜱分布位点、27种环境变量、当前时期1970-2000年与典型浓度路径(RCP)4.5情景下未... 目的了解青藏高原地区西藏革蜱的潜在地理分布,探究影响其潜在地理分布的主要因素,为西藏革蜱监测和相关蜱传疾病的预防控制提供科学依据。方法基于西藏革蜱分布位点、27种环境变量、当前时期1970-2000年与典型浓度路径(RCP)4.5情景下未来4个时期(2030s、2050s、2070s和2090s)的数据,利用MaxEnt模型与ArcGIS 10.8软件对西藏革蜱的青藏高原潜在地理分布进行预测预估与可视化展示。结果当前西藏革蜱主要分布于青海省西部、四川省西北部、西藏东部地区与西藏拉萨市周边区域,零星分布于西藏阿里地区,适生区面积占青藏高原总面积15.66%。影响其分布的主要因素为年平均温度、最干季节平均温度、人类足迹指数与海拔。未来时期,高适生区面积均有不同程度的减少,但总适生区面积均有增加。西藏革蜱在未来气候变化情景下呈现向西迁移的趋势。结论青藏高原大部分地区可能存在西藏革蜱,且受环境因素与人类活动因素影响,分布范围较广,潜在危害较大,尤其在人类活动密集且气温偏低的地区,西藏革蜱出现的概率更高。 展开更多
关键词 西藏革蜱 青藏高原 最大熵模型 潜在地理分布 预估
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福建省部分地区寄生蜱中山羊无形体流行情况与遗传进化特征
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作者 胡世菊 周淑姮 +5 位作者 王加熊 曾志伟 韩腾伟 林芬 吴生根 肖方震 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第5期656-662,共7页
目的了解福建省部分地区寄生蜱中山羊无形体的流行情况及其遗传进化特征。方法于2011—2024年在宁德市的柘荣县、周宁县、福安市、霞浦县和南平市的浦城县、邵武市共6个县(市)收集动物(鼠、山麂、犬、山羊、野兔、牛、野猪、猪)体表寄生... 目的了解福建省部分地区寄生蜱中山羊无形体的流行情况及其遗传进化特征。方法于2011—2024年在宁德市的柘荣县、周宁县、福安市、霞浦县和南平市的浦城县、邵武市共6个县(市)收集动物(鼠、山麂、犬、山羊、野兔、牛、野猪、猪)体表寄生蜱,经形态学和分子生物学鉴定后,提取蜱DNA,采用巢式PCR扩增山羊无形体柠檬酸合成酶基因(gltA)片段,PCR阳性产物测序后在美国国家生物技术信息中心(NCBI)进行BLAST初步比对。通过MEGA11软件比对后采用邻接法构建系统进化树。使用DNASP V6.0软件计算山羊无形体gltA基因序列遗传多样性指标,用Arlequinv3.5.2.2进行不同地区的序列分组并通过Popart v1.7绘制单倍型网络图。率的比较采用χ^(2)检验和Fisher确切概率法,影响因素分析采用多因素logistic回归。结果共收集并检测了650只蜱。不同宿主中,山麂体表寄生蜱山羊无形体感染率最高(19.11%,30/157),其次为牛体表寄生蜱(2/13),不同宿主寄生蜱的山羊无形体感染率差异有统计学意义(χ^(2)=59.64,P<0.01)。检获的蜱主要以成蜱为主,其次为若蜱。若蜱感染率最高(15.38%,8/52),成蜱次之(4.88%,29/594),幼蜱(0/2)和卵(0/2)未检出,蜱不同发育期感染率差异有统计学意义(χ^(2)=9.15,P<0.05)。雌、雄成蜱感染率分别为7.99%(27/338)、0.78%(2/256)(χ^(2)=16.29,P<0.01)。宁德市柘荣县、周宁县、福安市、霞浦县蜱的山羊无形体感染率分别为5.68%(5/88)、11.06%(23/208)、0/7、0/7,南平市浦城县、邵武市感染率分别为2.69%(9/335)、0/5,不同地区间感染率差异有统计学意义(χ^(2)=15.74,P<0.01)。夏季、秋季、冬季、春季蜱山羊无形体感染率分别为4.64%(7/151)、4.37%(9/206)、7.34%(21/286)、0/7(χ^(2)=2.86,P>0.05)。650只蜱分属5属14种,山羊无形体总阳性率为5.69%(37/650)。在7个蜱种中检出山羊无形体,卵形硬蜱感染率最高(42.86%,12/28),福建省待定血蜱次之(31.58%,12/38),不同蜱种感染率差异有统计学意义(χ^(2)=83.16,P<0.01)。多因素分析结果显示,与成蜱相比,若蜱感染山羊无形体的风险性显著增加(OR=2.83,95%CI:1.15~6.94)。与宁德市相比,南平市感染风险性降低(OR=0.20,95%CI:0.08~0.50)。BLAST结果显示,37条测序序列与山羊无形体参考序列(GenBank登录号:OQ847085.1)一致性最高,为97.88%~98.92%。系统进化树结果显示,本研究序列与青海省的山羊无形体亲缘关系最近。福建省部分地区山羊无形体序列共有15个单倍型(Hap),总体单倍型多样性指数为0.88,总体核苷酸多样性为0.009,Hap1~Hap3为优势单倍型。结论福建省部分地区寄生蜱山羊无形体感染率较高,需加强蜱传病原体监测及防控。 展开更多
关键词 寄生蜱 山羊无形体 影响因素 福建省
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林氏扇头蜱酰胺酶型分泌蛋白表达及抗菌功能
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作者 谢子芳 彭维祺 +5 位作者 李晴 黎明成 陈杰 朱勇川 赵建国 管庆丰 《中国热带医学》 北大核心 2025年第2期161-165,共5页
目的 探究林氏扇头蜱中的酰胺酶型分泌蛋白(R.ln PGRP-SC1a)的抗菌功能,为蜱虫先天免疫中肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRPs)的功能研究提供参考依据。方法 依据编码区序列设计特异性引物,提取成蜱的RNA并反转录... 目的 探究林氏扇头蜱中的酰胺酶型分泌蛋白(R.ln PGRP-SC1a)的抗菌功能,为蜱虫先天免疫中肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRPs)的功能研究提供参考依据。方法 依据编码区序列设计特异性引物,提取成蜱的RNA并反转录为c DNA,通过PCR扩增R.ln PGRP-SC1a蛋白基因片段,随后将该基因片段连接至质粒p ET32a+,从而构建重组表达载体p ET32a+-R.ln PGRP-SC1a。把该表达载体转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,采用浓度为0.2 mmol/L的IPTG进行低温诱导,促使其在上清中表达,从而获得活性更强的上清蛋白。利用抑菌圈法评估上清蛋白对大肠埃希菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)2种常见致病细菌的抑菌效果。结果 扩增所得的基因片段长度为627 bp,成功构建了原核表达载体p ET32a+-R.ln PGRP-SC1a。经过低温诱导表达,结果显示该重组蛋白为可溶性蛋白,重组蛋白R.ln PGRP-SC1a的大小约为23.63 k D。抗菌结果表明,在同一浓度下,R.ln PGRP-SC1a蛋白对大肠埃希菌无抑制作用,而对金黄色葡萄球菌有抑制作用。R.ln PGRP-SC1a在浓度为5 mg/m L时开始呈现抑菌作用,且随着浓度的升高,抑菌作用增强。与各浓度卡那霉素的抑菌效果相比,其7 mg/m L的抑菌效果相当于1 mg/m L卡那霉素的抑菌效果。同时,R.ln PGRP-SC1a对金黄色葡萄球菌的起效时间为2 h,抑菌作用可持续48 h。结论 本研究成功构建了R.ln PGRP-SC1a重组表达载体,其表达产物具有持久性抗革兰阳性菌的活性,为生物活性抑菌剂的开发提供了可能。 展开更多
关键词 林氏扇头蜱 酰胺酶型R.lnPGRP-SC1a蛋白 蛋白表达 抗菌作用
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安徽省硬蜱科4新记录种
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作者 汪敏 章乐生 +7 位作者 汪峰峰 龚磊 侯银续 王毓洁 王旗 李清越 吴家兵 操治国 《中国热带医学》 北大核心 2025年第12期1580-1586,共7页
目的对安徽省蜱类监测过程中发现的硬蜱科4新记录种进行鉴定和系统进化分析。方法蜱样本采集自安徽省巢湖市、祁门县、蒙城县家养动物及宠物体表,初步形态学鉴定后,采用PCR方法特异性扩增蜱线粒体核糖核酸大亚基(16S rRNA)和细胞色素C... 目的对安徽省蜱类监测过程中发现的硬蜱科4新记录种进行鉴定和系统进化分析。方法蜱样本采集自安徽省巢湖市、祁门县、蒙城县家养动物及宠物体表,初步形态学鉴定后,采用PCR方法特异性扩增蜱线粒体核糖核酸大亚基(16S rRNA)和细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ),测序所得序列在GenBank数据库进行比对,使用Mega11构建系统进化树及分析遗传距离矩阵。结果新记录蜱种分别为血蜱属的台湾血蜱(Haemaphysalis formosensis)、铃头血蜱(Haemaphysalis campanulata)、越原血蜱(Haemaphysalis yeni),扇头蜱属图兰扇头蜱(Rhipicephalus turanicus)。16S rRNA系统进化树显示,新记录蜱种16S rRNA与GenBank中相应蜱种聚类为一支;Kimura-2P遗传距离矩阵分析显示,安徽省硬蜱科4新记录蜱种16S rRNA序列与GenBank中其他序列之间种内遗传距离为0~0.07,血蜱属3新记录种种间遗传距离为0.08~0.19。血蜱属3新记录种COⅠ基因系统进化分析显示,新记录种台湾血蜱与褐黄血蜱聚类为一支,同时与长角血蜱、豪猪血蜱聚于一大支,而越原血蜱与铃头血蜱聚于另一支;Kimura-2P遗传距离矩阵分析显示,血蜱属3新记录种COⅠ序列与GenBank中血蜱属其他种之间种内遗传距离为0~0.09,种间遗传距离为0.12~0.20。结论形态学和分子生物学综合鉴定证实安徽省存在台湾血蜱、铃头血蜱、越原血蜱、图兰扇头蜱,建议加强对新记录蜱种的生态学及携带病原状况的监测。 展开更多
关键词 硬蜱科 新记录种 台湾血蜱 铃头血蜱 越原血蜱 图兰扇头蜱 安徽省
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中蒙边境口岸地区蜱携带新发人兽共患病病原体调查
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作者 刘禹含 张厚双 +3 位作者 曹杰 王亚楠 周勇志 周金林 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第8期794-800,共7页
目的 调查中蒙边境口岸地区蜱种类及其携带重要新发人兽共患病(巴贝斯虫病、莱姆病和发热伴血小板减少综合征)病原体,为构建重要蜱传疾病跨境传播数据库和边境地区人兽共患蜱传疾病的防控提供数据支持。方法 2023—2024年采集中蒙边境1... 目的 调查中蒙边境口岸地区蜱种类及其携带重要新发人兽共患病(巴贝斯虫病、莱姆病和发热伴血小板减少综合征)病原体,为构建重要蜱传疾病跨境传播数据库和边境地区人兽共患蜱传疾病的防控提供数据支持。方法 2023—2024年采集中蒙边境12个口岸地区的蜱样本,通过形态学和分子生物学鉴定蜱种后,利用实时荧光定量PCR和常规PCR方法,进行3种新发人兽共患病的病原检测,阳性样本通过基因克隆测序验证。结果 共采集中蒙边境口岸地区蜱样本5属9种2 477只,经鉴定草原革蜱、全沟硬蜱和小亚璃眼蜱为优势蜱种。12个口岸地区蜱携带巴贝斯虫、莱姆病螺旋体和发热伴血小板减少综合征病毒的总体阳性率分别为8.32%、11.59%、0%。其中巴贝斯虫分布最广,在8个口岸的蜱样本中检出,中蒙边境东部、中部和西部口岸均有发现,且全沟硬蜱携带最多;莱姆病螺旋体次之,在4个口岸地区的样本中检出,主要分布在中蒙边境东部口岸,97.2%的阳性样本在全沟硬蜱中检出。全沟硬蜱中存在巴贝斯虫和莱姆病螺旋体共感染情况,共感染样本共153份,占巴贝斯虫阳性样本的74.27%、莱姆病螺旋体阳性样本的53.31%。结论 巴贝斯虫和莱姆病螺旋体是中蒙边境口岸地区重要的蜱携带新发人兽共患病原,感染蜱种主要是全沟硬蜱,并存在共感染情况。 展开更多
关键词 中蒙边境 人兽共患病病原体
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林氏扇头蜱抗菌肽Microplusin-like基因原核表达及抗菌功能
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作者 彭维祺 谢子芳 +4 位作者 李晴 黎明成 陈杰 朱勇川 赵建国 《中国热带医学》 北大核心 2025年第7期882-889,共8页
目的 探究林氏扇头蜱抗菌肽Microplusin-like基因的抗菌功能,为了解林氏扇头蜱先天免疫系统和开发蜱类防控药物、新型抗菌药物替代提供新的参考依据。方法 根据林氏扇头蜱Microplusin-like基因序列设计特异性引物,提取林氏扇头蜱RNA并... 目的 探究林氏扇头蜱抗菌肽Microplusin-like基因的抗菌功能,为了解林氏扇头蜱先天免疫系统和开发蜱类防控药物、新型抗菌药物替代提供新的参考依据。方法 根据林氏扇头蜱Microplusin-like基因序列设计特异性引物,提取林氏扇头蜱RNA并反转录为cDNA,通过PCR扩增基因片段,将基因片段连接至pCold-SUMO质粒,构建重组表达载体pCold-SUMO/Microplusin-like后,转入大肠埃希菌Rosetta(DE3)感受态细胞,经诱导表达、纯化后获得蛋白;通过滤纸片法测定重组蛋白对大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈,通过微量对倍稀释法测定其对大肠埃希菌、沙门菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),并通过测定该蛋白对大肠埃希菌生长曲线、时间-杀菌曲线的影响探究其抑菌效果;通过扫描电镜及透射电镜观察重组蛋白对大肠埃希菌微观形态的影响,并结合分子对接技术探究重组蛋白的抑菌机制。结果 林氏扇头蜱Microplusin-like基因扩增所得片段长度为333 bp,构建了原核表达载体pCold-SUMO/Microplusin-like,经诱导表达、纯化后获得蛋白,大小约为29 kDa。抑菌试验结果表明,重组蛋白对大肠埃希菌(ATCC 25922、1515、987P、K88、K99)及鸡白痢沙门菌CVCC1791的抑菌圈直径分别为15.8、20.58、18.33、15.4、18.24、18.18 mm,表现出中度或高度敏感;MIC(MBC)分别为0.625(5)、0.625(>5)、0.625(5)、1.25(>5)、0.625(>5)、0.625(>5)mg/mL,存在一定差异;对金黄色葡萄球菌无抑制作用;生长曲线及时间-杀菌曲线测定发现,重组蛋白抑菌活性呈浓度依赖性。扫描及透射电镜显示经重组蛋白处理后大肠埃希菌菌体皱缩,边缘模糊,细胞壁及细胞膜出现破损,内容物外泄,细胞内部松散。分子对接显示蛋白通过氢键、盐桥及疏水作用与大肠埃希菌外膜脂多糖转运蛋白结构发生结合。结论 林氏扇头蜱抗菌肽Microplusin-like蛋白具有抗革兰阴性菌活性,初步分析抗菌机制为破坏细胞壁及细胞膜结构,为开发蜱的新防治策略、新型抗生素替代提供了参考依据。 展开更多
关键词 林氏扇头蜱 Microplusin-like基因 抗菌肽 抗菌活性 原核表达
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青海血蜱Kunitz型蛋白rHq002-1原核表达与抗非小细胞肺腺癌初步研究
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作者 刘思茜 王鹏 +4 位作者 广慧 苏木雅 刘岳青 高金亮 陈开廷 《中国热带医学》 北大核心 2025年第10期1289-1295,共7页
目的探究Kunitz型蜱源蛋白rHq002-1对非小细胞肺癌细胞(A549细胞)生长的抑制作用。方法从青海血蜱cDNA文库中克隆到1个新基因Hq002-1,构建原核表达载体pET-30a-Hq002-1,将表达载体转入大肠埃希菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达后,Ni-NTA... 目的探究Kunitz型蜱源蛋白rHq002-1对非小细胞肺癌细胞(A549细胞)生长的抑制作用。方法从青海血蜱cDNA文库中克隆到1个新基因Hq002-1,构建原核表达载体pET-30a-Hq002-1,将表达载体转入大肠埃希菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达后,Ni-NTA Agarose进行纯化rHq002-1,使用SDS-PAGE分析蛋白纯化情况。纯化得到的rHq002-1处理A549细胞,使用CCK-8法检测rHq002-1对A549细胞增殖的影响,并用流式细胞术(AnnexinFITC/PI双染法)评估A549细胞的凋亡情况。利用细胞划痕实验检测rHq002-1对A549细胞迁移的影响。结果扩增并克隆出青海血蜱1Hq002-1基因片段,成功构建原核表达载体pET30a-Hq002-1,并在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中成功表达rHq002-1。经1 mmol/L IPTG诱导表达4 h后,可显著增加rHq002-1的表达量。SDS-PAGE检测表明重组蛋白rHq002-1以可溶性的形式表达于培养物的上清液中。将rHq002-1作用于非小细胞肺癌A549细胞,CCK-8法检测结果显示,与对照组相比,处理48 h和72 h后,A549细胞生长受到显著抑制,细胞存活率明显下降(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,使用0.3 mg/mL rHq002-1处理A549细胞72 h,与对照组相比,细胞迁移率下降(P<0.05)。流式细胞术检测显示,与对照组相比,处理24、48、72 h后,实验组细胞凋亡率提高1.99%、9.25%、21.96%(P<0.05)。结论本研究利用原核表达体系成功表达可溶的rHq002-1,并且成功纯化出目的蛋白。rHq002-1能够抑制A549细胞的增殖、迁移,促进A549细胞凋亡,为开发新型蜱源抗肿瘤药物提供理论依据。 展开更多
关键词 青海血蜱 Kunitz结构域 非小细胞肺癌细胞 细胞增殖 迁移 细胞凋亡
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蜱实验室人工饲养技术研究进展
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作者 董晓楠 孙连阳 +4 位作者 崔浩 康佳美 丁玉林 刘永宏 赵丽 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第1期67-74,共8页
蜱作为世界第二大病原传播媒介,可通过吸食宿主血液从而传播多种病原体。蜱的存在不仅威胁了人的生命健康,同时也给畜牧业造成极大的经济损失。开展蜱的人工饲养可以为蜱类生长发育繁殖提供稳定的环境,从而为了解蜱的生物学特性,进行蜱... 蜱作为世界第二大病原传播媒介,可通过吸食宿主血液从而传播多种病原体。蜱的存在不仅威胁了人的生命健康,同时也给畜牧业造成极大的经济损失。开展蜱的人工饲养可以为蜱类生长发育繁殖提供稳定的环境,从而为了解蜱的生物学特性,进行蜱传病原体的研究及为研制抗蜱药物及防蜱疫苗提供充足实验材料。目前实验室饲养蜱的方法大致可分为两类,一类为使用宿主动物的饲养方法,另一类为使用人工膜的饲养方法,饲养方法的选择需根据蜱的种类、吸血习性、生活环境等多方面综合考虑,现就两种方法的发展过程及各自存在的优弊进行阐述与讨论,以期为实验室开展蜱的人工饲养提供一定的帮助。 展开更多
关键词 人工饲养 生活史
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抑制田鼠巴贝斯虫增殖的蜱自噬分子的鉴定
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作者 龚凤君 曹杰 +3 位作者 周勇志 王亚楠 张厚双 周金林 《寄生虫与医学昆虫学报》 2025年第2期93-98,共6页
目的蜱为田鼠巴贝斯虫的传播媒介,其作为巴贝斯虫媒介的具体机制尚不明确。本研究旨在研究蜱自噬分子对田鼠巴贝斯虫增殖的影响。方法通过长角血蜱叮咬感染与未感染田鼠巴贝斯虫的小鼠实验模型,收集蜱材料进行蛋白质差异组学分析,筛选... 目的蜱为田鼠巴贝斯虫的传播媒介,其作为巴贝斯虫媒介的具体机制尚不明确。本研究旨在研究蜱自噬分子对田鼠巴贝斯虫增殖的影响。方法通过长角血蜱叮咬感染与未感染田鼠巴贝斯虫的小鼠实验模型,收集蜱材料进行蛋白质差异组学分析,筛选具有差异表达的长角血蜱自噬相关分子Haemaphysalis longicornis ATG8(HlATG8),完成其编码基因克隆、蛋白表达及多克隆抗体的制备。利用RNAi干扰技术敲低HlATG8基因。结果鉴定了长角血蜱自噬分子ATG8。蜱感染田鼠巴贝斯虫后,HlATG8蛋白显著上调。敲低HlATG8基因,可以显著增加巴贝斯虫感染量。结论长角血蜱自噬分子ATG8抑制巴贝斯虫的体内增殖。 展开更多
关键词 田鼠巴贝斯虫 长角血蜱 自噬 ATG8
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蜱的分子鉴定技术研究进展
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作者 李思颖 王瑞 周金林 《寄生虫与医学昆虫学报》 2025年第3期184-192,共9页
蜱是一类重要医学节肢动物,在世界范围内广泛分布,能够传播多种人类和动物病原体,是仅次于蚊虫的第二大传染病媒介生物。近年来,城市化、国际贸易和气候变化等因素显著增加了蜱传病发病率,新发蜱传自然疫源性疾病也与日俱增。由于不同... 蜱是一类重要医学节肢动物,在世界范围内广泛分布,能够传播多种人类和动物病原体,是仅次于蚊虫的第二大传染病媒介生物。近年来,城市化、国际贸易和气候变化等因素显著增加了蜱传病发病率,新发蜱传自然疫源性疾病也与日俱增。由于不同蜱种所能携带或传播的病原体不尽相同,查清在不同地理区域分布的蜱对于预防和控制蜱及蜱传疾病至关重要。因此,快速准确鉴定蜱的种类在蜱传疫病流行病学调查及防控方面均具有重要意义。本文综述了蜱的分子鉴定技术研究进展,为相关工作提供参考。 展开更多
关键词 鉴定技术 研究进展
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基于文献计量学的我国西部地区蜱及蜱传疾病的研究热点及趋势分析
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作者 接润达 张妞妞 +1 位作者 马嫣然 张冰 《中华卫生杀虫药械》 2025年第2期142-148,共7页
目的分析国内外近20年对我国西部地区蜱及蜱传疾病研究的研究热点及趋势,为西部地区蜱传疾病监测、预防和治疗的决策提供参考。方法在CNKI和Web of Science检索2004年1月至2024年6月有关我国西部地区蜱相关文献,使用CiteSpace 6.1.R6对... 目的分析国内外近20年对我国西部地区蜱及蜱传疾病研究的研究热点及趋势,为西部地区蜱传疾病监测、预防和治疗的决策提供参考。方法在CNKI和Web of Science检索2004年1月至2024年6月有关我国西部地区蜱相关文献,使用CiteSpace 6.1.R6对关键词、作者等进行可视化分析。结果国内外蜱及蜱传疾病主题文献量均呈逐年增长的趋势,英文文献发文量远超过中文文献。具体研究领域主要为生态学和分类学研究、流行病学与诊断技术/防治措施研究、分子生物学与生物信息学研究等。国内外研究热点整体方向一致,均围绕西部牧区的高发疾病和储存宿主,但又各有不同的侧重点。结论西部地区蜱的生态学、蜱传疾病的流行分布、反向病原学早发现早针对蜱传疾病、多组学研究蜱-蜱传病原体-宿主互作现象、保护性抗原的发现以及灵敏检测方法的建立是未来的发展趋势。研究热点及趋势提示,应当注意边境地区检疫防疫,监测蜱传疾病流行情况,调查蜱虫在牧区的资源分布,识别新发蜱传微生物,多学科交叉进行基础研究。 展开更多
关键词 文献计量学 蜱及蜱传疾病 研究热点 研究趋势 反向病原学
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信阳市2021—2023年蜱生态学监测结果分析
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作者 陈宏 杨岩岩 +2 位作者 王珊 徐威 樊畅 《中华卫生杀虫药械》 2025年第3期360-362,共3页
目的分析信阳市2021—2023年蜱生态学监测结果,为制定防控措施提供依据。方法在信阳市设光山县、新县2个蜱监测点,采用动物体表检蜱法对寄生蜱进行监测,采用布旗法对游离蜱进行监测。对所得数据进行描述性统计分析。结果2021—2023年共... 目的分析信阳市2021—2023年蜱生态学监测结果,为制定防控措施提供依据。方法在信阳市设光山县、新县2个蜱监测点,采用动物体表检蜱法对寄生蜱进行监测,采用布旗法对游离蜱进行监测。对所得数据进行描述性统计分析。结果2021—2023年共对243只动物进行体表检查,检获蜱3191只,长角血蜱占比99.8%(3186/3191),寄生蜱平均蜱指数为13.13,其中2023年3月寄生蜱蜱指数最高,为29.50;羊的寄生蜱蜱指数最高(13.83);光山县的寄生蜱蜱指数(15.90)高于新县(8.51)。游离蜱平均密度为0.39只/(布旗100 m·h),2023年7月游离蜱密度最高,为0.77只/(布旗100 m·h)。光山县的游离蜱密度[0.45只/(布旗100 m·h)]高于新县[0.31只/(布旗100 m·h)],检获蜱全部为长角血蜱。结论长角血蜱是信阳市优势蜱种,在各类宿主动物中,羊的染蜱率较高,应根据监测结果采取针对性措施进行蜱防控。 展开更多
关键词 生态学 监测 密度
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复方非泼罗尼滴剂对犬体寄生蜱的驱杀效果评价
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作者 李世杰 陈国庆 +5 位作者 程阳颖 张燕 邓梦梦 冀伟 谢等龙 索勋 《寄生虫与医学昆虫学报》 2025年第3期167-173,共7页
目的 验证复方非泼罗尼滴剂对犬体寄生蜱的驱杀效果。方法 从我国南方和北方共收集140例自然感染蜱的犬,随机分配至南方试验药物组、南方对照药物组、北方试验药物组和北方对照药物组,每组35只,按推荐剂量对各试验犬进行治疗,在用药前... 目的 验证复方非泼罗尼滴剂对犬体寄生蜱的驱杀效果。方法 从我国南方和北方共收集140例自然感染蜱的犬,随机分配至南方试验药物组、南方对照药物组、北方试验药物组和北方对照药物组,每组35只,按推荐剂量对各试验犬进行治疗,在用药前、用药后1、7、14、21和28 d对患犬进行蜱计数,统计分析蜱平均减少率和患犬转阴率。结果 用药后28 d,南方试验药物组和对照药物组蜱平均减少率均为100%,北方试验药物组和对照药物组蜱平均减少率也均为100%,所有受试动物用药后均未出现其他临床症状和不良反应。结论 复方非泼罗尼滴剂用于防治犬体寄生蜱,用药1次疗效可持续28 d,且对南北不同地区犬的蜱病治疗效果无明显差异,可用于我国不同地区犬蜱的防治。 展开更多
关键词 复方非泼罗尼滴剂 安全性 临床疗效
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我国东南沿海地区蜱及蜱传疾病防控对策 被引量:1
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作者 徐巧 陈德华 +5 位作者 吴婷 朱长强 王优俊 齐永 谭伟龙 相芳 《中华卫生杀虫药械》 2025年第3期333-337,共5页
蜱类是全球第二大病媒生物,仅次于蚊类,分布广泛,可携带多种病原微生物,传播疾病危害严重,且构成跨物种传播的潜在威胁,成为新发再发传染病研究的重点。本文介绍了蜱类的生物学特性与我国东南沿海地区的蜱类分布情况,总结了东南沿海地... 蜱类是全球第二大病媒生物,仅次于蚊类,分布广泛,可携带多种病原微生物,传播疾病危害严重,且构成跨物种传播的潜在威胁,成为新发再发传染病研究的重点。本文介绍了蜱类的生物学特性与我国东南沿海地区的蜱类分布情况,总结了东南沿海地区蜱传疾病的流行特征以及蜱类的监测方法,进而有针对性地提出该地区防控策略,对于降低疾病发病率、提高治愈率、增强公共卫生防控能力具有重要的意义。 展开更多
关键词 东南沿海地区 蜱传疾病 防控
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辽宁省部分城市犬体蜱虫种类及蜱携带病原体的调查研究
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作者 修福晓 翟翯 +4 位作者 王尧 赵禹 杨宇翔 王朋朋 冯宇 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第8期809-815,共7页
目的了解辽宁部分城市中犬体蜱虫流行情况及携带病原体种类,为科学进行蜱虫及蜱媒病的防控提供理论依据。方法对辽宁省6个城市(沈阳市、大连市、鞍山市、朝阳市、铁岭市和丹东市)进行犬体蜱虫采集,通过形态学和分子生物学相结合方法对... 目的了解辽宁部分城市中犬体蜱虫流行情况及携带病原体种类,为科学进行蜱虫及蜱媒病的防控提供理论依据。方法对辽宁省6个城市(沈阳市、大连市、鞍山市、朝阳市、铁岭市和丹东市)进行犬体蜱虫采集,通过形态学和分子生物学相结合方法对采集的蜱虫进行种属鉴定;采用PCR方法检测蜱媒病原体:立克次体、伯氏疏螺旋体、巴贝斯虫、无形体和埃立克体。结果辽宁省犬体蜱虫主要流行于4—6月份;所采集的蜱虫包括长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)456只,全沟硬蜱(Ixodes persulcatus)70只、血红扁头蜱(Rhicephalus sanguineus)31只;本研究共检测到埃立克体、伯氏疏螺旋体和立克次体3种蜱媒病原体,未检测到巴贝斯虫和无形体。其中,埃立克体总检出率(46.85%)高于伯氏疏螺旋体总检出率(10.81%)(χ^(2)=33.392,P<0.05),与立克次体总检出率(34.23%)差异无统计学意义(χ^(2)=3.370,P>0.05),埃立克体和立克次体在6个城市中均有分布。结论长角血蜱为辽宁省犬体表寄生的优势蜱种,辽宁省城市犬体蜱媒病原体以埃立克体和立克次体为主。 展开更多
关键词 蜱虫 长角血蜱 埃立克体 立克次体
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浙江遂昌县和天台县长角血蜱携带菌群多样性及群落结构特征
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作者 杨汉银 俞铖航 +5 位作者 梁家瑞 闫书宁 辛怡 蔡玉春 徐斌 郑彬 《中国热带医学》 北大核心 2025年第4期440-447,共8页
目的探究浙江省遂昌县和天台县地区长角血蜱体内细菌菌群多样性和群落结构多样性,为后续研究及当地蜱传疾病的预防控制工作提供参考。方法2023年8月及2024年4—8月在浙江遂昌和天台多个蜱活动频繁区域采集游离蜱和家畜体表寄生蜱,通过... 目的探究浙江省遂昌县和天台县地区长角血蜱体内细菌菌群多样性和群落结构多样性,为后续研究及当地蜱传疾病的预防控制工作提供参考。方法2023年8月及2024年4—8月在浙江遂昌和天台多个蜱活动频繁区域采集游离蜱和家畜体表寄生蜱,通过形态学和分子生物学鉴定长角血蜱,随机筛选150只长角血蜱与30只实验室传代长角血蜱,每10只混为1蜱池,并分为天台游离蜱(TTqt)、天台寄生蜱(TTet)、遂昌游离蜱(SCqt)、遂昌寄生蜱(SCet)和实验室对照(Control)共18个蜱池进行16S rRNA高通量测序,描述不同地区(遂昌、天台、对照)和不同寄生状态(游离蜱、寄生蜱、对照)的长角血蜱内菌群构成,并使用生物信息学分析和统计分析比较不同组别菌群及结构多样性,评估群落结构差异,明确各组别间显著差异物种。结果长角血蜱主要携带菌群在门水平上以变形菌门(Proteobacteria,63.98%)、厚壁菌门(Firmicutes,22.35%)、放线菌门(Actinobacteria,9.93%)为主,在属水平上以柯克斯体属(Coxiella,29.29%)、地芽胞杆菌属(Bacillus,13.71%)、假单胞菌属(Pseudomonas,11.59%)为主。按不同地区或不同寄生状态分组下的蜱样本菌群群落多样性和结构多样性差异有统计学意义(P<0.05)。物种数统计和显著差异物种分析,在地区分组时,共有可操作性分类单元(operational taxonomic unit,OTU)为61,遂昌、天台、对照组特有OTU数目分别为894、151、75,中间根瘤菌属(Mesorhizobium)在3组间差异有统计学意义(P<0.05)。以寄生状态分组时,共有OTU为62,寄生蜱、游离蜱、对照组特有OTU数目分别为500、408、75,柯克斯体属(Coxiella)在3组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论浙江省遂昌和天台的寄生和游离状态的长角血蜱携带菌群丰富,菌群群落结构构成不同,存在明显差异。 展开更多
关键词 长角血蜱 微生物 多样性 微生物群落结构 16S rRNA测序
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