Toxoplasma gondii is a single-celled parasite that infects nearly all warm-blooded animals,including humans(Montoya and Liesenfeld,2004).It occurs worldwide and can persist for a lifetime in mammals.Humans get infecte...Toxoplasma gondii is a single-celled parasite that infects nearly all warm-blooded animals,including humans(Montoya and Liesenfeld,2004).It occurs worldwide and can persist for a lifetime in mammals.Humans get infected by eating undercooked meat of animals containing the tissue cysts of this parasite.In immune-competent individuals,T.展开更多
目的建立一种用于快速检测间日疟原虫Plasmodium vivax的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)方法。方法以间日疟原虫18 S rRNA基因为靶标,根据RPA技术原理设计引物和探针,构建18 S rRNA基因片段的质粒DNA为标...目的建立一种用于快速检测间日疟原虫Plasmodium vivax的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)方法。方法以间日疟原虫18 S rRNA基因为靶标,根据RPA技术原理设计引物和探针,构建18 S rRNA基因片段的质粒DNA为标准品,进行引物探针筛选和灵敏度检测;以间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫、卵形疟原虫、人全血核酸、乙型脑炎病毒以及黄热病毒核酸评价方法的特异性;最后用实际样本来评估方法与PCR检测的一致性。结果所建立的方法在39℃20 min内,可以最低检测出10拷贝/反应的质粒DNA,并且与其他病原体核酸无交叉反应。样本检测结果显示,测试的结果同PCR检测具有一致性。结论建立的重组酶聚合酶扩增方法具有灵敏度高以及特异性强的特点,可应用于间日疟原虫的快速检测。展开更多
目的了解江西省HIV阳性人群隐孢子虫感染现状及虫种和基因型分布。方法2022年1月—2023年3月,于江西省3家艾滋病治疗定点医院收集HIV阳性人群社会人口学特征和临床资料,并采集其新鲜粪便样本。提取粪样基因组DNA,采用基于隐孢子虫小亚...目的了解江西省HIV阳性人群隐孢子虫感染现状及虫种和基因型分布。方法2022年1月—2023年3月,于江西省3家艾滋病治疗定点医院收集HIV阳性人群社会人口学特征和临床资料,并采集其新鲜粪便样本。提取粪样基因组DNA,采用基于隐孢子虫小亚基核糖体RNA(small subunit ribosomal RNA,SSU r RNA)基因的巢式PCR方法检测样本,阳性样本再扩增其隐孢子虫60 k Da糖蛋白(60 k Da glycoprotein,gp60)基因。阳性样本两种基因均重复进行3次PCR扩增。采用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测第二轮PCR扩增产物,对两基因的疑似阳性产物进行双向基因测序和比对。应用MEGA 11.0软件基于邻接法绘制系统进化树,以鉴定隐孢子虫虫种、基因型和基因亚型。结果累计将382例江西省HIV阳性者纳入研究,其中2例感染隐孢子虫,感染率为0.52%(2/382),感染者均无腹痛、腹泻等临床症状。经测序与序列比对,2例感染样本隐孢子虫分离株与火鸡隐孢子虫分离株相似性分别为99.76%和99.88%。基于隐孢子虫SSU rRNA基因序列的系统进化树分析显示,2份隐孢子虫阳性样本虫种均为火鸡隐孢子虫。对2株火鸡隐孢子虫gp60基因进行巢式PCR扩增、测序和序列比对,分别鉴定为火鸡隐孢子虫Ⅲe A17G2R1亚型和Ⅲb A25G1R1a亚型,其中Ⅲb A25G1R1a亚型为人体中首次发现。结论江西省HIV阳性人群隐孢子虫感染率较低。临床治疗中应关注无腹泻症状的HIV阳性者隐孢子虫感染可能性。展开更多
基金supported by the National Natural Sci ence Foundation of China(No.31672543)the Zhejiang Province“Sannongliufang”Science and Technology Coopera tion Project(No.2020SNLF007),China.
文摘Toxoplasma gondii is a single-celled parasite that infects nearly all warm-blooded animals,including humans(Montoya and Liesenfeld,2004).It occurs worldwide and can persist for a lifetime in mammals.Humans get infected by eating undercooked meat of animals containing the tissue cysts of this parasite.In immune-competent individuals,T.
文摘目的建立一种用于快速检测间日疟原虫Plasmodium vivax的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)方法。方法以间日疟原虫18 S rRNA基因为靶标,根据RPA技术原理设计引物和探针,构建18 S rRNA基因片段的质粒DNA为标准品,进行引物探针筛选和灵敏度检测;以间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫、卵形疟原虫、人全血核酸、乙型脑炎病毒以及黄热病毒核酸评价方法的特异性;最后用实际样本来评估方法与PCR检测的一致性。结果所建立的方法在39℃20 min内,可以最低检测出10拷贝/反应的质粒DNA,并且与其他病原体核酸无交叉反应。样本检测结果显示,测试的结果同PCR检测具有一致性。结论建立的重组酶聚合酶扩增方法具有灵敏度高以及特异性强的特点,可应用于间日疟原虫的快速检测。
文摘目的了解江西省HIV阳性人群隐孢子虫感染现状及虫种和基因型分布。方法2022年1月—2023年3月,于江西省3家艾滋病治疗定点医院收集HIV阳性人群社会人口学特征和临床资料,并采集其新鲜粪便样本。提取粪样基因组DNA,采用基于隐孢子虫小亚基核糖体RNA(small subunit ribosomal RNA,SSU r RNA)基因的巢式PCR方法检测样本,阳性样本再扩增其隐孢子虫60 k Da糖蛋白(60 k Da glycoprotein,gp60)基因。阳性样本两种基因均重复进行3次PCR扩增。采用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测第二轮PCR扩增产物,对两基因的疑似阳性产物进行双向基因测序和比对。应用MEGA 11.0软件基于邻接法绘制系统进化树,以鉴定隐孢子虫虫种、基因型和基因亚型。结果累计将382例江西省HIV阳性者纳入研究,其中2例感染隐孢子虫,感染率为0.52%(2/382),感染者均无腹痛、腹泻等临床症状。经测序与序列比对,2例感染样本隐孢子虫分离株与火鸡隐孢子虫分离株相似性分别为99.76%和99.88%。基于隐孢子虫SSU rRNA基因序列的系统进化树分析显示,2份隐孢子虫阳性样本虫种均为火鸡隐孢子虫。对2株火鸡隐孢子虫gp60基因进行巢式PCR扩增、测序和序列比对,分别鉴定为火鸡隐孢子虫Ⅲe A17G2R1亚型和Ⅲb A25G1R1a亚型,其中Ⅲb A25G1R1a亚型为人体中首次发现。结论江西省HIV阳性人群隐孢子虫感染率较低。临床治疗中应关注无腹泻症状的HIV阳性者隐孢子虫感染可能性。
