机器学习预测IAV和SARS-CoV-2感染引起心脏并发症中的共同靶点基因及H1N1感染模型验证

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作者 廖元盛 李恒 +5 位作者 廖芸 胡云光 殷安国 孔美君 刘龙丁 张莹 《昆明医科大学学报》 2025年第5期75-88,共14页

目的 预测并初步验证甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)和严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染引发心脏并发症的共同潜在关键基因。方法 基于GEO(gene expression omnib... 目的 预测并初步验证甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)和严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染引发心脏并发症的共同潜在关键基因。方法 基于GEO(gene expression omnibus)数据库获取心脏并发症差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),采用分层交集策略,首先分别将心脏并发症相关DEGs与两个独立来源的病毒相关基因集(包括GeneCards中与IAV感染相关的3 454个人类基因,以及Human Protein Atlas中与SARS-CoV-2相互作用的333个人类蛋白质编码基因)进行交集分析,随后再将这两个交集的结果进行第二轮交集,进一步确定枢纽基因。采用Lasso回归(lasso regression)、随机森林算法(random forest,RF)和支持向量机算法(support vector machine,SVM)3种机器学习算法对枢纽基因进行筛选。本研究主要采用H1N1病毒感染人心肌细胞系(AC16)和IFITM3-/-基因敲除小鼠模型,对预测基因的表达变化进行体外和体内验证。结果 对3个数据库进行生物信息学分析,筛选出22个枢纽基因。使用3种机器学习算法对枢纽基因进行评估,最终筛选出5个共同的关键基因。随后,通过H1N1感染体外培养的人心肌细胞系(AC16),观察到5种基因的转录水平均呈现出动态变化趋势(P <0.05)。而利用H1N1感染IFITM3-/-基因敲除小鼠的体内实验结果与体外实验结果一致,亦证实这5种基因转录水平均发生动态变化(P <0.05)。结论 通过结合生物信息学分析与机器学习算法,本研究筛选出5个与IAV和SARS-CoV-2感染引起心脏并发症相关的共同关键基因,分别为ACE2、TBK1、NUP210、PUSL1和MEPCE。进一步通过H1N1感染模型的体内和体外实验验证,确认了这些基因均与IAV感染引起的心脏并发症相关。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型 心脏病 机器学习

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中药金叶败毒制剂抗人巨细胞病毒感染的作用机制 被引量：7

2

作者 袁慧 刘世新 +1 位作者 闻良珍 李丹 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期345-347,352,共4页

目的探讨中药金叶败毒制剂抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的作用机制。方法用HCMVAD169感染人胚肺成纤维细胞,采用MTT法观察细胞的增殖活性,应用半定量RTPCR方法检测中药金叶败毒制剂和更昔洛韦(GCV)干预后感染细胞cyclinD1mRNA及细胞周期素... 目的探讨中药金叶败毒制剂抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的作用机制。方法用HCMVAD169感染人胚肺成纤维细胞,采用MTT法观察细胞的增殖活性,应用半定量RTPCR方法检测中药金叶败毒制剂和更昔洛韦(GCV)干预后感染细胞cyclinD1mRNA及细胞周期素依赖激酶4(CDK4)mRNA的表达水平。结果金叶败毒制剂和更昔洛韦能明显提高HCMV感染细胞cyclinD1及CDK4的表达,诱导G0/G1期细胞进入S和G2/M期,从而促进宿主细胞增殖。结论金叶败毒制剂可能通过促进HCMV感染细胞cyclinD1及CDK4的表达,促进宿主细胞增殖而发挥抗病毒作用。 展开更多

关键词 金叶败毒制剂 巨细胞病毒 细胞周期素D1 细胞周期素依赖激酶4 细胞增殖

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CD160在EB病毒感染患儿T淋巴细胞上的表达及临床意义 被引量：5

3

作者 肖晗 孙红 +3 位作者 刘秀珍 向飞艳 夏倩 向赟 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期691-695,共5页

目的探讨共抑制分子CD160在EB病毒感染患儿外周血CD8^+T淋巴细胞上的表达及临床意义。方法选取2013年1月~2014年12月在武汉市妇女儿童医疗保健中心就诊的急性EB病毒感染患儿、慢性EB病毒感染患儿和同期健康对照儿童各27例。酶联免疫吸附... 目的探讨共抑制分子CD160在EB病毒感染患儿外周血CD8^+T淋巴细胞上的表达及临床意义。方法选取2013年1月~2014年12月在武汉市妇女儿童医疗保健中心就诊的急性EB病毒感染患儿、慢性EB病毒感染患儿和同期健康对照儿童各27例。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清EB病毒特异性抗体,实时荧光聚合酶链反应法(Realtime PCR)定量检测外周血淋巴细胞EBV-DNA,流式细胞仪检测外周血CD4^+、CD8^+T细胞亚群比例以及共抑制分子CD160、PD-1和2B4在CD8^+T细胞上的表达率,并将CD160、2B4的表达率与外周血病毒载量行相关性分析。结果急性感染患儿外周血淋巴细胞CD4^+/CD8^+比值急剧降低,慢性感染患儿该比值有所恢复;与对照组相比,共抑制分子CD160和2B4在慢性感染患儿外周血CD8^+T细胞上的表达明显增高(P<0.05),而在急性感染患儿中的表达无明显变化,PD-1在急、慢性感染患儿中的表达均无明显变化;CD160在CD8^+T细胞上的表达率与患儿外周血EB病毒载量呈正相关(r=0.445 8,P<0.05),而2B4的表达率与病毒载量无明显相关性。结论 CD160在慢性EB病毒感染患儿外周血CD8^+T细胞上的表达上调,且与外周血EB病毒DNA载量呈正相关。 展开更多

关键词 EB病毒 CD4^+T细胞 CD8^+T细胞 CD160

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安徽蚌埠地区卡波氏肉瘤相关疱疹病毒的血清阳性率研究 被引量：6

4

作者 张莹 曾宪聪 +3 位作者 汪小五 刘淑均 李进 王林定 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第5期493-495,共3页

目的研究安徽蚌埠地区卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在普通人群中的感染情况,并初步分析KSHV感染的危险因子。方法选择KSHV ORF65、ORF73和K8.1编码的病毒蛋白为抗原,采用酶联免疫法对1 008份普通人群血清进行了KSHV抗体检测。结果在检... 目的研究安徽蚌埠地区卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在普通人群中的感染情况,并初步分析KSHV感染的危险因子。方法选择KSHV ORF65、ORF73和K8.1编码的病毒蛋白为抗原,采用酶联免疫法对1 008份普通人群血清进行了KSHV抗体检测。结果在检测的1 008份血样中,KSHV抗体的总阳性率为4.3%,其中男为3.9%,女为4.6%。统计学分析结果显示,KSHV感染率没有性别差异,在年龄上也基本无差异。结论在中国安徽北部地区的普通人群KSHV的感染率较低,且KSHV的感染与年龄及性别之间无明显相关性。 展开更多

关键词 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒 血清阳性率 蚌埠 安徽

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甘肃省敦煌地区普通人群卡波肉瘤相关疱疹病毒感染的血清学分析 被引量：5

5

作者 方圆 许常青 +2 位作者 周畅 陈伟 王林定 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第5期697-700,共4页

目的研究卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在甘肃敦煌地区普通人群中的血清阳性率,并分析KSHV感染的危险因素。方法随机收集1 000例敦煌地区普通人群血清,以KSHV 3个基因片段orf65、orf73、orf k8.1编码蛋白为抗原,间接ELISA检测样本中KSHV抗... 目的研究卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在甘肃敦煌地区普通人群中的血清阳性率,并分析KSHV感染的危险因素。方法随机收集1 000例敦煌地区普通人群血清,以KSHV 3个基因片段orf65、orf73、orf k8.1编码蛋白为抗原,间接ELISA检测样本中KSHV抗体,SPSS软件分析危险因素。结果 1 000份血清中,KSHV抗体总阳性率为19%,男性阳性率(22.9%)高于女性(16.6%)(P=0.016);KSHV感染与梅毒螺旋体(P=0.004)和丙肝病毒(P=0.027)感染间有相关性,而与年龄、乙肝五项无关。多因素Logistic回归分析显示梅毒螺旋体感染的OR(95%CI)为10.142(1.920~53.577)。结论甘肃敦煌地区普通人群中KSHV的感染率较高,且与性别有关;梅毒螺旋体感染是该地区KSHV感染最重要的独立危险因素。 展开更多

关键词 卡波肉瘤相关疱疹病毒 血清阳性率 危险因素 甘肃 敦煌

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蛋清溶菌酶对人单纯疱疹病毒Ⅰ型抑制作用的实验研究 被引量：6

6

作者 李亚男 刘洪臣 +2 位作者 杨丽 宫琦玮 李红梅 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2008年第6期517-519,共3页

目的:观察蛋清溶菌酶(HEWL)对人单纯疱疹病毒I型(hHSV-1)的抑制作用。方法:以HSV-1的敏感细胞BHK-21为实验细胞模型,以更昔洛韦为阳性对照药,以0.5%12-烷基磺酸钠(SDS)为阻断剂,采用细胞病变法(CPE)判定溶菌酶对hHSV-1的抑制效果。结果:... 目的:观察蛋清溶菌酶(HEWL)对人单纯疱疹病毒I型(hHSV-1)的抑制作用。方法:以HSV-1的敏感细胞BHK-21为实验细胞模型,以更昔洛韦为阳性对照药,以0.5%12-烷基磺酸钠(SDS)为阻断剂,采用细胞病变法(CPE)判定溶菌酶对hHSV-1的抑制效果。结果:HEWL对细胞的最大无毒浓度(TC0)和半数中毒浓度(TC50)均>1 000μg.mL-1,HEWL对hHSV-1抑制作用的最小有效浓度(MIC)为104.17μg.mL-1,半数有效浓度(IC50)为46.88μg.mL-1,治疗指数(TI)为10.67。在平行对照试验中,更昔洛韦对BHK-21细胞的TC0和TC50均>500μg.mL-1。更昔洛韦对hHSV-1抑制作用的MIC为7.81μg.mL-1,IC50为3.91μg.mL-1,TI为64。0.5%SDS完全阻断了HEWL的抗病毒能力。结论:蛋清溶菌酶对HSV-1有较明显的抑制作用,作用强度与溶菌酶的浓度相关。 展开更多

关键词 胞壁质酶 BHK-21细胞 更昔洛韦 单纯疱疹病毒I型 人

原文传递

知母宁的体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型作用 被引量：5

7

作者 李沙 甄宏 +1 位作者 蒋杰 向继洲 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期304-307,共4页

目的检测知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ)作用。方法以Vero细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,采用中性红染色法测定不同药物加入方式下知母宁的体外抗HSVⅡ有效率,并检测其抑制病毒作用的时效关系及对病毒感染性的影响。结... 目的检测知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ)作用。方法以Vero细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,采用中性红染色法测定不同药物加入方式下知母宁的体外抗HSVⅡ有效率,并检测其抑制病毒作用的时效关系及对病毒感染性的影响。结果知母宁表现出对HSVⅡ333的综合抑制作用和抑制病毒吸附后的后续复制增殖作用,其抗病毒有效率(ER%)最高达80%,这两种作用的半数有效浓度(EC50)均约为0.8mg/ml。知母宁浓度≥2.08mg/ml时能显著抑制HSVⅡ,ER%最高达95%。知母宁还有较弱的预防病毒吸附作用。知母宁抗病毒作用的时效关系研究表明,随药物作用时间延长,低浓度药物抗病毒有效率呈减小趋势,在高浓度时(≥2.08mg/ml)其病毒抑制强度基本维持稳定。随药物作用时间延长,知母宁可明显削弱病毒的感染性,知母宁组病毒的-lgTCID50值较病毒对照组的下降值呈增大趋势,其下降百分比维持稳定,约为40%。结论知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型效果好,且其抗病毒作用具有多个作用点。 展开更多

关键词 知母宁 抗病毒作用 单纯疱疹病毒Ⅱ型

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2013-2014年南宁市A(H3N2)亚型流感病毒病原学特征分析 被引量：3

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作者 秦剑秋 王亮 +1 位作者 刘海燕 黄莉 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期560-565,共6页

目的分析南宁市2013-2014年A(H3N2)亚型流感病毒的病原学特征及流行趋势。方法通过RT-PCR扩增毒株A(H3N2)病毒血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)并进行同源比对,采用Mega5.1(N-J法)构建系统进化树,统计氨基酸位点的差异,同源建模后分析蛋... 目的分析南宁市2013-2014年A(H3N2)亚型流感病毒的病原学特征及流行趋势。方法通过RT-PCR扩增毒株A(H3N2)病毒血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)并进行同源比对,采用Mega5.1(N-J法)构建系统进化树,统计氨基酸位点的差异,同源建模后分析蛋白结构的变化。结果构建系统进化树,20株毒株HA基因与NA基因均分为4个类群,呈多侧支流行;部分毒株的HA蛋白A抗原决定簇144位点及B抗原决定簇156和158位点发生突变,二硫键和糖基化位点高度保守,未发生变化;NA蛋白抗原基本稳定,只有A/Nanning/43/2014(H3N2)毒株抗原决定簇312位点发生突变,二硫键、酶活性位点、糖基化位点及耐药性位点均未发生变化;HA和NA蛋白晶体结构分析显示氨基酸突变位点主要发生在β折叠部位和无规则卷曲处。结论南宁市A(H3N2)亚型流感病毒株变异活跃,在HA基因和NA基因进化树上疫苗株明显滞后于南宁市流行株,抗原决定簇位点出现氨基酸的替换,但关于疫苗的预防效果尚需进一步验证。 展开更多

关键词 A(H3N2)亚型流感病毒 血凝素 神经氨酸酶 蛋白结构 同源建模

原文传递

双荧光标记定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸 被引量：2

9

作者 黎炜英 赵友云 +2 位作者 高应林 王春香 乐惠荣 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2007年第4期529-531,共3页

目的:探索SYBR GreenⅠ和TaqMan探针双标记荧光定量PCR(dFQ-PCR)检测乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)的意义。方法:选择浓度为1011.70,108.70,106.70和<1×106.00copies/L的4种血清各1份,进行dFQ-PCR,同时以TaqMan探针和SYBR GreenⅠ... 目的:探索SYBR GreenⅠ和TaqMan探针双标记荧光定量PCR(dFQ-PCR)检测乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)的意义。方法:选择浓度为1011.70,108.70,106.70和<1×106.00copies/L的4种血清各1份,进行dFQ-PCR,同时以TaqMan探针和SYBR GreenⅠ单荧光标记PCR(sFQ-PCR)为对照,设置同一扩增和熔解曲线的循环参数,检测HBV-DNA含量及其熔解温度(Tm),每种方法一次检测每份血清5次。结果:dFQ-PCR检测的HBV-DNA阳性血的平均含量为1011.55±0.32,108.79±0.29,106.81±0.30,与TaqMan探针sFQ-PCR的1011.49±0.31,108.69±0.30,106.72±0.25copies/L对应浓度值取10对数比较,无统计学意义(t=0.31,0.54和0.27,均为P>0.05);与SYBRGreenⅠ染料sFQ-PCR的1011.41±0.35,108.21±0.34和106.26±0.26copies/L(不含未检出的两次血清)比较,中低浓度有统计学意义(t=2.90和2.62,P<0.05)。dFQ-PCR和SYBR GreenⅠ染料sFQ-PCR均出现明显熔解曲线,HBV-DNA含量为1011.70,108.70和106.70copies/L的Tm分别为79.8,71.8和72℃。结论:dFQ-PCR能同时检测HBV-DNA含量和Tm,为HBV含量及其基因分型的同步检测提供了新思路。 展开更多

关键词 SYBRGreenⅠ TAQMAN探针 定量PCR HBV-DNA

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卡波肉瘤相关疱疹病毒ORFK12蛋白初步研究 被引量：2

10

作者 汪小五 曾宪聪 +5 位作者 陈伟 张莹 吴悦 杜爱能 刘璐璐 王林定 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第5期565-568,共4页

目的研究卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)ORFK12基因在大肠杆菌的表达及表达的蛋白在普通人群中检测KSHV的感染情况。方法设计一对特异性引物,以BCBL-1细胞总DNA为模板,采用PCR方法扩增KSHV ORFK12基因。构建含目的基因的重组质粒命名为PQE-... 目的研究卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)ORFK12基因在大肠杆菌的表达及表达的蛋白在普通人群中检测KSHV的感染情况。方法设计一对特异性引物,以BCBL-1细胞总DNA为模板,采用PCR方法扩增KSHV ORFK12基因。构建含目的基因的重组质粒命名为PQE-80L-K12和诱导蛋白表达。采用ELISA法和Western blot法筛查临床收集的血清标本中感染KSHV的情况。结果异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导后的PQE-80L-K12重组菌经十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示有一个约10 ku的融合表达蛋白为ORFK12蛋白。采用ELISA法和Western blot法检测显示ORFK12蛋白能与KSHV阳性血清反应。结论 KSHV ORFK12基因在大肠杆菌中表达,表达的ORFK12蛋白在实验室检测感染KSHV有一定的辅助作用。 展开更多

关键词 卡波肉瘤相关疱疹病毒 ORFK12基因 ORFK12蛋白

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238例水痘患者肺部影像学分析 被引量：6

11

作者 丁一 黄汝刚 《放射学实践》 CSCD 北大核心 2021年第11期1382-1385,共4页

目的:分析原发性水痘肺炎的影像学表现及发病特点,提高对该病的认识。方法:回顾性分析238水痘患者的肺部X线平片和CT图像,总结原发性水痘肺炎的影像学特点并将X线及CT图像进行对照分析。结果:水痘肺炎的CT影像学表现分为粟粒型、结节型... 目的:分析原发性水痘肺炎的影像学表现及发病特点,提高对该病的认识。方法:回顾性分析238水痘患者的肺部X线平片和CT图像,总结原发性水痘肺炎的影像学特点并将X线及CT图像进行对照分析。结果:水痘肺炎的CT影像学表现分为粟粒型、结节型、斑片型。23例粟粒型水痘肺炎患者的胸部X线平片正常,结节及斑片型肺部病变两种方法检出率相同。水痘肺炎发病占同期水痘感染的比例为95.2%(220/231),发病率男性高于女性,差异有统计学意义(P<0.05),成人高于儿童,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:双肺结节为水痘肺炎的典型影像学表现,粟粒型肺炎X线平片诊断存在假阴性,需结合CT检查。 展开更多

关键词 水痘 原发性水痘肺炎 X线平片 体层摄影术 X线计算机

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NS5B与HCV负链RNA3′末端特异性结合的分析 被引量：1

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作者 黄志明 黄开红 +2 位作者 邓庆丽 王巍 邵静 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期392-395,共4页

NS5B是RNA依赖性RNA聚合酶 ,在病毒RNA合成过程中起到中心催化酶的作用 .在大肠杆菌中表达和提纯了GST NS5B融合蛋白 ,应用紫外交联试验 (UVcross linking)检测NS5B与丙型肝炎病毒 (HCV)负链RNA 3′末端的结合 ,确定NS5B是否参与HCV负链... NS5B是RNA依赖性RNA聚合酶 ,在病毒RNA合成过程中起到中心催化酶的作用 .在大肠杆菌中表达和提纯了GST NS5B融合蛋白 ,应用紫外交联试验 (UVcross linking)检测NS5B与丙型肝炎病毒 (HCV)负链RNA 3′末端的结合 ,确定NS5B是否参与HCV负链RNA 3′末端复制体的形成 .NS5B可与HCV负链RNA 3′末端发生结合 ,这种结合存在量效关系 ,比与正链RNA 3′UTRX区的结合强约 10倍 ,超大量的非同源性RNA和蛋白质不能竞争抑制NS5B与负链RNA 3′末端的结合 ,证明这种结合存在特异性 .结果提示NS5B是HCV负链RNA 3′末端复制体的成分之一 . 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 NS5B 复制体 负链

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猿猴疱疹病毒B糖蛋白D的表达及抗原性的探讨 被引量：2

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作者 肖镜 付瑞 贺争鸣 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第6期436-440,共5页

目的表达猴B病毒糖蛋白D(BVgD)并对其抗原性进行初步研究。方法应用体外原核表达BVgD,继而进行Ni离子亲和层析纯化。采用Western blotting对蛋白抗原性进行分析,评估其抗原潜力。结果完成了对BVgD的小量表达和纯化。Western blotting结... 目的表达猴B病毒糖蛋白D(BVgD)并对其抗原性进行初步研究。方法应用体外原核表达BVgD,继而进行Ni离子亲和层析纯化。采用Western blotting对蛋白抗原性进行分析,评估其抗原潜力。结果完成了对BVgD的小量表达和纯化。Western blotting结果表明表达出的重组蛋白BVgD具有特异性结合猴B病毒抗体的能力。结论BVgD重组蛋白具有良好的抗原性,与HSV-1抗体无交叉反应。具有进一步开发的潜力,也为BVgD免疫原性等方面的进一步研究提供了条件。 展开更多

关键词 疱疹病毒1型 猕猴 猴B病毒糖蛋白D(BVgD) B病毒抗体 ELISA

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基因枪介导单纯疱疹病毒DNA疫苗的免疫效果研究 被引量：1

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作者 杨慧兰 韩双艳 +2 位作者 王捷 杨传红 杨太成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期748-750,共3页

目的 :研究单纯疱疹病毒DNA疫苗经基因枪免疫小鼠的效果。方法 :基因枪免疫小鼠腹部 ,免疫组化法检测gD抗原在接种部位的表达 ;ELISA检测血清中抗gD抗体 ;病毒攻击检测经基因枪免疫的DNA疫苗对动物的保护效果。结果 :基因枪可有效将DNA... 目的 :研究单纯疱疹病毒DNA疫苗经基因枪免疫小鼠的效果。方法 :基因枪免疫小鼠腹部 ,免疫组化法检测gD抗原在接种部位的表达 ;ELISA检测血清中抗gD抗体 ;病毒攻击检测经基因枪免疫的DNA疫苗对动物的保护效果。结果 :基因枪可有效将DNA质粒运送至小鼠真皮内 ,单纯疱疹病毒Ⅱ型gD2糖蛋白基因在真皮和肌肉组织中高效表达 ,免疫小鼠体内产生高滴度的中和抗体 ,能有效抵抗HSV 2病毒的攻击。结论 :疱疹病毒gDDNA疫苗通过基因枪接种方式 。 展开更多

关键词 基因枪接种 中和抗体 病毒攻击

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HCMV体外感染小鼠胚胎成纤维细胞的研究 被引量：1

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作者 吉阳 任鹏 +1 位作者 陈敬贤 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第3期215-219,共5页

目的观察人巨细胞病毒(HCMV)AD169株体外感染小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的生物学特征,为探讨HCMVAD169株能跨种属感染MEF提供依据。方法将100TCID50HCMV AD169株病毒悬液接种至MEF和人胚胎成纤维细胞(HF)上,逐日观察HCMV特征性细胞病变效... 目的观察人巨细胞病毒(HCMV)AD169株体外感染小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的生物学特征,为探讨HCMVAD169株能跨种属感染MEF提供依据。方法将100TCID50HCMV AD169株病毒悬液接种至MEF和人胚胎成纤维细胞(HF)上,逐日观察HCMV特征性细胞病变效应(CPE);分别收集感染后1、3、5 d的MEF和HF培养物,提取细胞DNA,采用实时荧光定量PCR检测HCMV立即早期基因(IE)拷贝数变化;分别采用HCMV立即早期基因(IE-1)、主要衣壳蛋白(MCP)和包膜糖蛋白(gB)单克隆抗体进行间接免疫荧光实验检测感染后的1、3、5 d MEF和HF中相应病毒蛋白的表达。结果观察到HCMV AD169株接种MEF出现病毒所致CPE,与HF出现的CPE相似;实时荧光定量PCR检测HCMV IE基因拷贝数发现,MEF在HCMVAD169感染后的1、3、5 d,病毒基因拷贝数呈增长趋势,但均低于相同时间点的HF中病毒拷贝数;间接免疫荧光检测HCMV感染MEF和HF后1、3、5 d HCMV IE-1、MCP和gB蛋白表达情况时发现,在MEF上HCMV IE-1、MCP和gB蛋白表达随时间延长呈增强趋势。结论 HCMV AD169株可以体外感染MEF,并在其中复制增殖。 展开更多

关键词 人巨细胞病毒 小鼠胚胎成纤维细胞 跨种属感染

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巨细胞病毒对人巨核系祖细胞体外增殖的影响及干预研究 被引量：2

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作者 詹平 刘斌 +1 位作者 刘文君 郭渠莲 《中国优生与遗传杂志》 2004年第6期25-27,共3页

目的　探讨人巨细胞病毒 (HCMV)对脐血巨核系祖细胞 (CFU -Mk)体外增殖的影响及黄芪对此的干预作用。方法　采用造血祖细胞体外半固体培养技术 ,观察、计数HCMV感染的CFU -Mk集落数、抑制率、集落峰值及维持时间 ;并用定性和定量PCR检... 目的　探讨人巨细胞病毒 (HCMV)对脐血巨核系祖细胞 (CFU -Mk)体外增殖的影响及黄芪对此的干预作用。方法　采用造血祖细胞体外半固体培养技术 ,观察、计数HCMV感染的CFU -Mk集落数、抑制率、集落峰值及维持时间 ;并用定性和定量PCR检测集落细胞内HCMV -DNA ;在 10 - 1感染组中加入黄芪后 ,观察黄芪对HCMV抑制CFU -Mk集落生长的干预作用。结果　①HCMV感染组CFU -Mk集落数较对照组明显减少 (P <0 .0 1) ;②各组集落峰值出现时间无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,但感染组集落维持时间较对照组明显缩短 (P <0 .0 1) ;③用PCR技术在感染组集落细胞内检测到HCMV -DNA的存在 ;④黄芪组CFU -Mk集落数明显提高 ,荧光定量PCR显示集落细胞内HCMV -DNAcopies较 10 - 1感染组明显减少。结论　在体外HCMV -AD169对CFU -Mk的增殖和分化有明显抑制作用。HCMV能直接感染巨核系祖细胞 ,此作用可能与临床HCMV感染出现血小板减少有关 ;黄芪在体外有明显的抗HCMV活性。 展开更多

关键词 巨细胞病毒 造血干细胞 集落刺激因子 黄芪 脐血

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巨细胞病毒感染婴儿母亲携带病毒检测的意义 被引量：5

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作者 宋春兰 杜开先 《中国医药科学》 2012年第17期120-120,126,共2页

目的探讨巨细胞病毒感染婴儿中人巨细胞病毒母乳感染率及意义。方法应用荧光定量PCR法检测124例确诊巨细胞病毒感染患儿母亲的母乳和全血中HCMV-DNA含量,并同时测定母亲血浆中HCMV-IgM。结果 FQ-PCR检测HCMVDNA乳汁的阳性率为69.4%,全... 目的探讨巨细胞病毒感染婴儿中人巨细胞病毒母乳感染率及意义。方法应用荧光定量PCR法检测124例确诊巨细胞病毒感染患儿母亲的母乳和全血中HCMV-DNA含量,并同时测定母亲血浆中HCMV-IgM。结果 FQ-PCR检测HCMVDNA乳汁的阳性率为69.4%,全血的阳性率为23.4%;HCMV-IgM阳性率27.4%。母乳HCMV-DNA的阳性率明显高于全血HCMV-DNA及特异性抗体IgM的阳性率(P<0.05)。结论感染巨细胞病毒患儿的母乳中带毒率高,母乳感染HCMV可能是婴儿获得性巨细胞感染的主要途径。 展开更多

关键词 HCMV 母乳 荧光定量PCR法 感染途径

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性病门诊单纯疱疹病毒2型特异性抗体血清学调查 被引量：1

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作者 邹先彪 李喜龙 +2 位作者 马天 张云杰 葛萍 《传染病信息》 2015年第3期149-151,共3页

目的了解性病门诊患者单纯疱疹病毒2型（herpes simplex virus type 2,HSV-2）感染情况。方法用ELISA法检测我院性病门诊1215例患者HSV-2型特异性抗体,并对不同性别和不同年龄组的HSV-2 Ig g G抗体阳性情况进行对比研究。结果 1215例患... 目的了解性病门诊患者单纯疱疹病毒2型（herpes simplex virus type 2,HSV-2）感染情况。方法用ELISA法检测我院性病门诊1215例患者HSV-2型特异性抗体,并对不同性别和不同年龄组的HSV-2 Ig g G抗体阳性情况进行对比研究。结果 1215例患者中,HSV-2 Ig g G抗体阳性者共291例,阳性率为23.95%,男性阳性率为21.34%（197/923）,女性阳性率为32.19%（94/292）,女性阳性率高于男性,二者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。年龄以31~40岁最多,为119例（男性81例,女性38例）;其次为21~30岁,为85例（男性54例,女性31例）。结论 HSV-2型特异性抗体检测率存在男女差异,女性高于男性。生殖器疱疹易发于21~40岁性活跃人群。HSV-2型特异性抗体血清学检测具有快速、简便、灵敏度高等优点,适用于临床检测。 展开更多

关键词 疱疹病毒2型 人 性传播疾病 抗体

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人类疱疹病毒6型的致瘤作用及其与口腔癌的关系 被引量：1

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作者 杨婕 朱玲 《口腔医学》 CAS 2006年第4期307-309,共3页

人类疱疹病毒6型(HHV-6)是近年来新分离出的对T淋巴细胞具有高度亲嗜性的DNA病毒,与人类的多种疾病有关,可影响机体的细胞免疫。HHV-6具有致癌潜能的证据主要来自将HHV-6完整基因组或基因片断转染NIH3T3细胞引发裸鼠肿瘤及人上皮角质细... 人类疱疹病毒6型(HHV-6)是近年来新分离出的对T淋巴细胞具有高度亲嗜性的DNA病毒,与人类的多种疾病有关,可影响机体的细胞免疫。HHV-6具有致癌潜能的证据主要来自将HHV-6完整基因组或基因片断转染NIH3T3细胞引发裸鼠肿瘤及人上皮角质细胞癌变;其次为HHV-6在多种肿瘤组织中存在,包括口腔癌。该文从HHV-6的致瘤作用及其与口腔癌的关系两方面对HHV-6转染细胞、引发癌变的研究现状进行综述。 展开更多

关键词 人类疱疹病毒6型 致瘤作用 口腔癌

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KSHV K15蛋白多克隆抗体的制备及其初步鉴定

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作者 陈伟 方圆 +5 位作者 汪小五 许常青 朱晨辰 杨宇 张龙龙 王林定 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第1期1-4,共4页

目的制备卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15蛋白多克隆抗体,并将其应用于细胞内K15蛋白的检测。方法选择K15基因第8个外显子(K15P_(ex8))序列做为模板,构建K15P_(ex8)的表达载体p QE-80L-K15P_(ex8)。诱导重组菌蛋白表达,免疫新西兰兔,... 目的制备卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15蛋白多克隆抗体,并将其应用于细胞内K15蛋白的检测。方法选择K15基因第8个外显子(K15P_(ex8))序列做为模板,构建K15P_(ex8)的表达载体p QE-80L-K15P_(ex8)。诱导重组菌蛋白表达,免疫新西兰兔,制备抗K15P_(ex8)多克隆抗体,并用间接ELISA法测定抗体效价。将p FJ和p FJ-K15P两种重组质粒分别转入HEK 293T细胞,用Western blot法检测抗K15P_(ex8)多克隆抗体对K15P-Flag蛋白的识别。结果由K15P_(ex8)制备的抗K15P_(ex8)多克隆抗体效价大于1∶6 400,能特异性识别重组质粒p FJ-K15P转染293T细胞产生的K15P-Flag融合蛋白。结论初步证明K15P_(ex8)蛋白有免疫反应性,该多克隆抗体可用于重组的K15P-Flag融合蛋白的检测。 展开更多

关键词 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒 K15基因 多克隆抗体

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