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乙脑/寨卡嵌合病毒包膜蛋白K283R突变对小鼠神经毒力的影响
1
作者 任阳 黄荣 +5 位作者 杨俊杰 陈蓉 陈岚 冯亚岚 袁磊 杨健 《川北医学院学报》 2026年第1期1-6,共6页
目的:探讨乙脑/寨卡嵌合毒株JE/ZIKV(MR766)包膜蛋白K283R突变对小鼠神经毒力的影响。方法:基于JE/ZIKV(MR766)嵌合病毒全长cDNA,通过重叠延伸PCR介导的定点突变及分子克隆技术,构建含包膜蛋白E第283位突变(K283R)的感染性全长克隆。经... 目的:探讨乙脑/寨卡嵌合毒株JE/ZIKV(MR766)包膜蛋白K283R突变对小鼠神经毒力的影响。方法:基于JE/ZIKV(MR766)嵌合病毒全长cDNA,通过重叠延伸PCR介导的定点突变及分子克隆技术,构建含包膜蛋白E第283位突变(K283R)的感染性全长克隆。经酶切鉴定后,通过XhoⅠ酶线性化全长感染性克隆并体外转录获得突变病毒RNA,经电穿孔转染BHK21细胞拯救出突变病毒JE/ZIKV(MR766)(K283R)。通过病毒传代和测序、蚀斑实验、生长曲线、间接免疫荧光鉴定病毒特性,利用3周龄雌性昆明鼠脑内攻毒模型,解析嵌合病毒的神经毒力,以LD50量化神经毒力水平。结果:酶切验证确认成功构建JE/ZIKV(MR766)(K283R)全长感染性克隆。蚀斑实验、病毒测序及间接免疫荧光证实拯救目的病毒成功,其蚀斑直径大于亲本株JE/ZIKV(MR766)[(0.20±0.04 vs.0.14±0.03)cm,P<0.05]。生长曲线显示,突变株与亲本株均在感染后60 h达到病毒滴度峰值。动物实验表明,JE/ZIKV(MR766)(K283R)的LD50为1.35 pfu/0.03 mL,稍低于亲本株(2.21 pfu/0.03 mL)。结论:寨卡病毒E蛋白K283R突变未明显减弱嵌合病毒对小鼠的脑内神经毒力,提示该位点并非调控病毒毒力的关键位点。 展开更多
关键词 寨卡病毒 乙脑病毒 嵌合病毒 包膜蛋白 神经毒力
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中国流行性乙型脑炎病毒分子生物学特性研究 被引量：34
2
作者 李晓宇 宋宏 +7 位作者 付士红 王环宇 俞永新 董关木 陶三菊 陈端 Ichiro Kurane 梁国栋 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期200-209,共10页
为了从分子水平了解中国流行性乙型脑炎(乙脑)病毒与国外分离株的差异,对1949年以来在中国乙脑主要流行地区分离的19株乙脑病毒的PrM C区及E蛋白基因区的核苷酸序列进行了对比研究,以期了解不同时间不同地区在中国流行的乙脑病毒的分子... 为了从分子水平了解中国流行性乙型脑炎(乙脑)病毒与国外分离株的差异,对1949年以来在中国乙脑主要流行地区分离的19株乙脑病毒的PrM C区及E蛋白基因区的核苷酸序列进行了对比研究,以期了解不同时间不同地区在中国流行的乙脑病毒的分子差异。结果显示:病毒生物学初步鉴定显示,病毒感染BHK细胞后56h所有细胞均发生病变,约50%以上细胞脱落(CPE );3日龄乳鼠接种病毒72h之内死亡;所有病毒均与乙脑病毒(A2株)抗血清发生阳性反应,但反应强度不同,提示所有病毒均为乙脑病毒。病毒PrM C(456～695)区核苷酸序列与各个国家及地区、各个基因型以及各个年代的73株乙脑病毒相应序列,用Woan RuChen建立的方法进行基因分型分析,结果显示,所有19株中国分离的病毒均属于基因型Ⅲ型,与国外相关文献所报道的乙型脑炎病毒中国分离株的基因型相符。以乙型脑炎病毒疫苗株P3株为标准,对各病毒E蛋白500个氨基酸序列进行分析。各毒株核苷酸差异在0和4 2%之间,氨基酸差异在0和4 0%之间。所有核苷酸差异均为碱基的替换,无论核苷酸或氨基酸均无插入或丢失。大多数核苷酸变异在氨基酸编码的第三位,属于沉默突变,不引起氨基酸变化。18株病毒E蛋白活性结构域与疫苗株P3株相比共有247个氨基酸的差异,平均每株病毒有12 35个氨基酸的差异,? 展开更多
关键词 中国 流行性乙型脑炎 病毒 分子生物学 核苷酸 变异
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云南省边境地区蚊虫自然感染乙型脑炎病毒的研究 被引量：32
3
作者 张海林 米竹青 +10 位作者 张云智 龚正达 自登云 施华芳 龚鹤琴 杨卫红 李兆祥 侯宗柳 杨兰萍 章域震 黄文丽 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2002年第2期101-104,共4页
目的 :阐明蚊虫自然感染乙型脑炎病毒情况 ,评价各蚊种的媒介地位。方法 :夜间在农村人房、畜圈 ,白天在野外竹林捕蚊 ,用细胞法和小白鼠法分离病毒。结果 :在云南省 15个边境县市采获 6属 45种 92 748只雌蚊 ,从 13种蚊虫体内分离出乙... 目的 :阐明蚊虫自然感染乙型脑炎病毒情况 ,评价各蚊种的媒介地位。方法 :夜间在农村人房、畜圈 ,白天在野外竹林捕蚊 ,用细胞法和小白鼠法分离病毒。结果 :在云南省 15个边境县市采获 6属 45种 92 748只雌蚊 ,从 13种蚊虫体内分离出乙型脑炎病毒 42株。其中从三带喙库蚊分离到 15株 ,霜背库蚊 5株 ,伪杂鳞库蚊、中华按蚊各 4株 ,刺扰伊蚊 3株 ,棕头库蚊、白纹伊蚊、窄翅伊蚊各 2株 ,雪背库蚊、环带库蚊、迷走按蚊、阿萨姆伊蚊和常型曼蚊各 1株。结论 :三带喙库蚊是该地区本病的主要传播媒介 ,霜背库蚊、伪杂鳞库蚊、刺扰伊蚊和白纹伊蚊亦为重要媒介。具有夜间以库蚊为主 ,白天以伊蚊为主的传播特点。 展开更多
关键词 云南 边境地区 自然感染 乙型脑炎病毒 蚊虫 传播媒介
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流行性乙型脑炎病毒(JEV)全长感染性克隆的制备及恢复病毒的获得 被引量：20
4
作者 黄莺 贾丽丽 +3 位作者 孙志伟 王志伟 俞炜源 俞永新 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期313-319,共7页
根据JEV病毒减毒株SA14-14-2基因组序列,设计覆盖全长的4对重叠引物,以提取的活疫苗病毒RNA为模板,RT-PCR扩增出4个片段,并克隆到质粒载体中,进一步构建两个半端分子克隆,然后将全长cDNA序列克隆到一个新改造的低拷贝质粒载体pBR-kpn中... 根据JEV病毒减毒株SA14-14-2基因组序列,设计覆盖全长的4对重叠引物,以提取的活疫苗病毒RNA为模板,RT-PCR扩增出4个片段,并克隆到质粒载体中,进一步构建两个半端分子克隆,然后将全长cDNA序列克隆到一个新改造的低拷贝质粒载体pBR-kpn中,构建我国流行性乙型脑炎病毒(JEV)基因组全长cDNA克隆。经过体外转录后得到的转录子转染BHK-21细胞,重新获得JEV的恢复病毒,通过生物学特性、分子生物学水平、蛋白水平等几个方面对恢复病毒进行鉴定。结果获得了稳定的全长cDNA克隆,转录子转染BHK-21细胞后,第4天开始出现细胞病变(CPE),第6～7天时CPE为 ,经过Vero细胞进一步放大培养后,间接免疫荧光实验和RT-PCR实验均为阳性。证实了构建的JEV的全长cDNA克隆有感染性,为进一步的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎病毒 感染性克隆 恢复病毒 质粒载体
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2006～2010年湖北省流行性脑脊髓膜炎病原学和血清学监测分析 被引量：22
5
作者 吕静 杨红梅 +6 位作者 江永忠 邹文菁 赵明江 朱兵清 徐丽 周海健 马静 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第4期287-290,共4页
目的分析湖北省2006～2010年流行性脑脊髓膜炎(流脑)病原学和血清学监测结果,掌握湖北省流脑的变迁规律。方法对2006～2010年分离的脑膜炎奈瑟菌(Nm)菌株进行生化鉴定、血清学分型和药物敏感性检测,并采用多位点序列分型(MLST)和脉冲场... 目的分析湖北省2006～2010年流行性脑脊髓膜炎(流脑)病原学和血清学监测结果,掌握湖北省流脑的变迁规律。方法对2006～2010年分离的脑膜炎奈瑟菌(Nm)菌株进行生化鉴定、血清学分型和药物敏感性检测,并采用多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法进行分子分型;对所有的脑脊液和血液标本进行Nm种属特异性荧光PCR检测;对健康人群血清,运用血清杀菌试验(SBA)进行C群杀菌力抗体水平测定。结果 2007年湖北省Nm以B群为主,2008～2010年以来C群为优势菌群;对青霉素等6种抗生素均敏感,但对环丙沙星、米诺环素、萘啶酸、复方新诺明4种抗生素出现多重耐药;分子分型结果显示,湖北省B群Nm菌株具有高度的遗传多样性,未发现明显优势的克隆群,C群优势病原株为ST-4821型。RT-PCR检测(988份脑脊液)确诊29例流脑病例,其中C群22例,A群2例、B群5例。C群杀菌力总保护率(抗体滴度≥1︰8)为38.10%。结论湖北省流脑菌株发生了从B群散发到C群流行的变迁,人群对C群Nm的免疫力不足。 展开更多
关键词 脑膜炎奈瑟菌 菌群变化 分子分型 SBA 荧光PCR
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从云南省无名热病人和脑炎病人分离到新环状病毒 被引量：57
6
作者 徐普庭 王逸民 +2 位作者 左建民 林静雯 徐丕模 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期27-33,共7页
从云南省西双版纳傣族自治州3家医院采集到发热病人血清106份,脑炎病人脑脊液5份,从中分离到27株病毒。经血清学鉴定,该类病毒与披膜病毒科、黄病毒科、布尼亚病毒科某些病毒的免疫腹水,以及呼肠孤病毒科环病毒属M14、YN187病毒的免疫腹... 从云南省西双版纳傣族自治州3家医院采集到发热病人血清106份,脑炎病人脑脊液5份,从中分离到27株病毒。经血清学鉴定,该类病毒与披膜病毒科、黄病毒科、布尼亚病毒科某些病毒的免疫腹水,以及呼肠孤病毒科环病毒属M14、YN187病毒的免疫腹水,都不发生反应。电镜观察病毒为球形无囊膜颗粒,直径65.49±3.11nm,其核衣壳直径为51.79±2.01nm。在感染细胞中常见到大量颗粒状包涵体。负染中可见排列整齐的壳粒结构,显示了典型的环状病毒形态特征。该类病毒对酸和热敏感,抵抗5—Id?和乙醚。27株病毒的基因组均由12条RNA片段组成,其带形均相同,分子量约为0.25×10~6～2.5×10~6道尔顿。该类病毒的带形与文献报道的任何一种环状病毒的RNA带形都不同。病人双份血清中对该环状病毒特异IgM抗体滴度显示4倍以上升高。对该类病毒在分类学上的地位和对无名热和脑炎的病原学意义进行了讨论,目前暂定名为BANNA病毒。 展开更多
关键词 环状病毒 无名热 分离 鉴定
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白纹伊蚊垂直传播乙型脑炎病毒的研究 被引量：26
7
作者 张海林 米竹青 张云智 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期42-47,共6页
用５株乙型脑炎病毒（ＪＥｖｉｒｕｓ）经口感染白纹伊蚊，证明该蚊能感染和传播乙型脑炎病毒。对感染雌蚊的子１和子２代卵３４４３粒、幼虫７０２１只和成虫４８５３只，分１７１批检查乙型脑炎病毒，子１代的批阳性率：卵为46.６７... 用５株乙型脑炎病毒（ＪＥｖｉｒｕｓ）经口感染白纹伊蚊，证明该蚊能感染和传播乙型脑炎病毒。对感染雌蚊的子１和子２代卵３４４３粒、幼虫７０２１只和成虫４８５３只，分１７１批检查乙型脑炎病毒，子１代的批阳性率：卵为46.６７％（１４／３０）幼虫为２１．２１％（７／３３）雌性成虫为２３．６８％（９／３８），雄性成虫为１５，００％（３／２０）；子２代幼虫、雌性和雄性成虫的批阳性率依次为２３．５３％（４／１７）、２７．２７％（６／２２）和１８．１８％（２／１１）。此结果表明，白纹伊蚊具有将乙型脑炎病毒垂直传播给后代的能力。认为该蚊在乙型脑炎病毒自然循环中起重要作用。 展开更多
关键词 流行性 乙型脑炎 病毒 白纹伊蚊 垂直传播
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乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS1基因片段的克隆、测序与表达 被引量：9
8
作者 王祥 陈焕春 +3 位作者 何启盖 吴斌 贾杏林 吴美洲 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期240-244,共5页
以流行性乙型脑炎病毒减弱毒株SA14 14 2的基因组RNA为模板 ,采用RT PCR技术扩增其 NS1基因的cDNA ,将其克隆到 pMD18 T载体中 ,得到克隆质粒pMD18 T NS1。pMD18 T NS1经 EcoRI和SalI酶切后 ,回收NS 1片段克隆到原核表达载体 pET 2 8a(+... 以流行性乙型脑炎病毒减弱毒株SA14 14 2的基因组RNA为模板 ,采用RT PCR技术扩增其 NS1基因的cDNA ,将其克隆到 pMD18 T载体中 ,得到克隆质粒pMD18 T NS1。pMD18 T NS1经 EcoRI和SalI酶切后 ,回收NS 1片段克隆到原核表达载体 pET 2 8a(+) EcoRI/SalI位点 ,构建了重组原核表达质粒 pET 2 8a(+) NS1。转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导获得高效表达 ,产物经SDS PAGE电泳结果显示 ,表达产物分子量约为 45kD。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 NS1基因 反转录-聚合酶链反应 克隆 表达
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流行性乙型脑炎减毒活疫苗SA_(14)-14-2E基因的稳定性 被引量：12
9
作者 范行良 俞永新 +1 位作者 李德富 姚智慧 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期39-47,共9页
分别对SA14 - 14- 2 (PHK8代 )疫苗株及其原野毒株SA14 和另 2个疫苗传代株 [SA14 - 14- 2 (PHK17代 )和SA14 - 14- 2 (鼠脑 1代 ) ]的E区基因进行了序列测定。结果表明 ,乙脑病毒减毒活疫苗SA14 - 14- 2在PHK细胞上连传至 17代时 ,发... 分别对SA14 - 14- 2 (PHK8代 )疫苗株及其原野毒株SA14 和另 2个疫苗传代株 [SA14 - 14- 2 (PHK17代 )和SA14 - 14- 2 (鼠脑 1代 ) ]的E区基因进行了序列测定。结果表明 ,乙脑病毒减毒活疫苗SA14 - 14- 2在PHK细胞上连传至 17代时 ,发现 2个氨基酸突变 (E - 331、E - 398) ,但不是回复突变。虽然在毒力最容易返祖的乳鼠脑内传 1代后发生E - 10 7个氨基酸回复 ,但与野毒株毒力相比仍然相差很大 ,无毒力返祖现象。在疫苗的实际质控工作中 ,对上述与毒力相关的基因进行监测 ,可能有助于发现减毒活疫苗的毒力水平 ,为疫苗安全性提供更可靠的检测手段。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 传代 E基因序列 基因稳定性 减毒活疫苗
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云南蝙蝠血液乙型脑炎病毒分离物的研究 被引量：11
10
作者 黄文丽 张海林 +3 位作者 龚鹤琴 张云智 米竹青 王静林 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2000年第1期48-50,共3页
目的 :进一步探索蝙蝠在乙脑病毒贮存宿主方面的作用。方法 :病毒分离、微量血凝抑制试验 (HI)、间接免疫荧光试验 (IFAT)、电镜和病理检查。结果 :从蝙蝠血中分离到两株乙脑病毒。结论 :蝙蝠在乙脑病毒在自然界中的贮存和扩散方面具有... 目的 :进一步探索蝙蝠在乙脑病毒贮存宿主方面的作用。方法 :病毒分离、微量血凝抑制试验 (HI)、间接免疫荧光试验 (IFAT)、电镜和病理检查。结果 :从蝙蝠血中分离到两株乙脑病毒。结论 :蝙蝠在乙脑病毒在自然界中的贮存和扩散方面具有重要的流行病学意义。 展开更多
关键词 乙脑病毒 蝙蝠 血清 贮存宿主 流行病学
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乙型脑炎减毒活疫苗病毒SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种后的生物学和分子生物学特性 被引量：9
11
作者 刘志文 俞永新 +5 位作者 张海林 王志伟 贾丽丽 章域震 董关木 张云 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期419-421,共3页
目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK2... 目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK21细胞中培养,得到SA14-14-2M1C1病毒液。应用空斑形成单位法测定病毒滴度,再进行小鼠脑内毒力测定和乳鼠脑内回传后毒力返祖试验。提取病毒RNA,RT-PCR扩增E基因片段,测序后与SA14-14-2原株的E基因序列进行比较分析。结果SA14-14-2M1C1病毒液滴度达1.4×107PFU/ml,小鼠脑内毒力测定结果无小鼠发病死亡,乳鼠脑内传代对小鼠的脑内致病力很低,毒力为1.9LgLD50/0.03ml,小于《中国药典》规定的3.0LgLD50,且皮下注射未见小鼠发病死亡。扩增出的E基因片段序列与原株相比较,只有E区1340位一个核苷酸的变化A→G,导致E447位1个氨基酸的改变D(Asp)→G(Gly),此差异位点不是SA14-14-2株发生基因变异的8个位点之一。结论SA14-14-2疫苗株病毒经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后,其生物学(弱毒)特性和基因特征(E区8个氨基酸突变)未发生改变,进一步证实了该病毒的稳定性。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 SA14-14-2株 三带喙库蚊 生物学特性 分子生物学特性
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辽宁省乙型脑炎病毒分离及进化树分析 被引量：18
12
作者 王作虪 安淑一 +2 位作者 王燕 韩悦 郭军巧 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期341-343,共3页
目的分离鉴定2007年辽宁省蚊虫携带流行型乙型脑炎(乙脑)病毒及基因型别。方法用细胞培养方法分离病毒,对致金黄色地鼠肾细胞系(BHK-21)细胞病变(CPE)的病毒进行逆转录-聚合酶链式扩增(RT-PCR)检测;扩增的目标片段进行序列测定;用Mega3.... 目的分离鉴定2007年辽宁省蚊虫携带流行型乙型脑炎(乙脑)病毒及基因型别。方法用细胞培养方法分离病毒,对致金黄色地鼠肾细胞系(BHK-21)细胞病变(CPE)的病毒进行逆转录-聚合酶链式扩增(RT-PCR)检测;扩增的目标片段进行序列测定;用Mega3.1软件、以邻位相连法构建进化树。结果共分离到22株病毒,RT-PCR检测结果表明,均为乙型脑炎病毒;随机选择其中3株病毒的基因序列进行基因型鉴定分析,均为Ⅰ型乙型脑炎病毒。3株病毒E基因编码结构域(Domain)区段分析结果显示,其核苷酸和氨基酸同源性分别为99.3%和100%;与疫苗株SA14-14-2的Domain区相比,共有12个氨基酸位点变异。结论辽宁省蚊虫标本中分离的病毒均为基因Ⅰ型乙型脑炎病毒,其中E基因所编码Domain区E-327(S→T)位点发生的变异,提示在辽宁省首次分离到乙型脑炎病毒变异株。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 逆转录-聚合酶链式扩增(RT-PCR) 进化树分析
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森林脑炎纯化疫苗的研究 被引量：11
13
作者 宋宗明 韩亮 +10 位作者 郭新 洪成龙 赵红丽 宋建军 刘双军 钱依群 王全 冉姝 岳立广 惠连 崔文广 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期32-34,共3页
目的 制备森林脑炎纯化疫苗。方法 将森林脑炎病毒感染地鼠肾单层细胞，收获病毒液，经超滤浓缩、柱层析纯化病毒后配制而成。结果 疫苗兔疫保护力指数均≥1 .0 ×106，杂蛋白去除率≥99％，小牛血清蛋白去除率＞99％，所有检测项... 目的 制备森林脑炎纯化疫苗。方法 将森林脑炎病毒感染地鼠肾单层细胞，收获病毒液，经超滤浓缩、柱层析纯化病毒后配制而成。结果 疫苗兔疫保护力指数均≥1 .0 ×106，杂蛋白去除率≥99％，小牛血清蛋白去除率＞99％，所有检测项目全部合格。结论 该纯化工艺制备的森林脑炎纯化疫苗抗原含量高，热稳定性好，免疫原性强，各项检测结果均符合2000年版《中国生物制品规程》标准。 展开更多
关键词 森林脑炎病毒 柱层析 纯化疫苗
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乙型脑炎重组痘苗病毒的抗原表达及其免疫保护性 被引量：11
14
作者 娄元梅 刘启富 +1 位作者 朱德钟 蹇锐 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期317-321,共5页
采用乙型脑炎重组痘苗病毒Ｊ１和Ｊ３株，两者均含乙脑病毒（ＪＥＶ）的Ｅ、ＮＳ１和ＮＳ２Ａ基因，后者还含ＰｒＭ基因，在ＢＨＫ－２１－１５细胞中培养表达，经免疫荧光法（ＩＦＡ）测定，两者均可高效表达ＪＥＶ特异性抗原。用该重... 采用乙型脑炎重组痘苗病毒Ｊ１和Ｊ３株，两者均含乙脑病毒（ＪＥＶ）的Ｅ、ＮＳ１和ＮＳ２Ａ基因，后者还含ＰｒＭ基因，在ＢＨＫ－２１－１５细胞中培养表达，经免疫荧光法（ＩＦＡ）测定，两者均可高效表达ＪＥＶ特异性抗原。用该重组病毒免疫瑞士种小鼠，经ＩＦＡ检测证明Ｊ１、Ｊ３均可诱生抗ＪＥＶ抗体，其中Ｊ３免疫鼠还产生中和抗体（Ｎ）和血抑抗体（ＨＩ），且其抗ＪＥＶ攻击能力显著增高。 展开更多
关键词 乙型脑炎 重组痘苗病毒 抗原表达 免疫保护性
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左归丸和右归丸对自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑组织中凋亡蛋白Fas、Bax表达的影响 被引量：13
15
作者 寇爽 王义周 +4 位作者 李明 齐放 郑琦 赵晖 王蕾 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2011年第8期61-65,共5页
目的:观察左、右归丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠脑组织中凋亡蛋白Fas、Bax表达的影响。方法:用髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein68-86,MBP68-86)免疫Lewis大鼠建立EAE模型。观... 目的:观察左、右归丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠脑组织中凋亡蛋白Fas、Bax表达的影响。方法:用髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein68-86,MBP68-86)免疫Lewis大鼠建立EAE模型。观察各组大鼠体重体温变化,饮食和饮水变化,神经功能评分,发病率、死亡率、潜伏期及病程变化。取脑和脊髓,HE染色后进行病理观察;用免疫组化法检测大鼠脑组织中Fas、Bax的表达情况。结果:左归丸组和右归丸组明显减轻病灶区域的炎性细胞浸润,对Fas、Bax的表达均有一定的抑制作用,与激素组类似。结论:左、右归丸均有防治小鼠EAE的作用,其作用机制可能与调节细胞凋亡蛋白Fas、Bax的表达有关。 展开更多
关键词 自身免疫性脑脊髓炎 左归丸 右归丸 凋亡蛋白
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安徽省北部疟疾流行区中华按蚊溴氰菊酯抗性现状 被引量：15
16
作者 武松 刘茜 +7 位作者 仰凤桃 陈道俊 岳星星 林玲 张直林 孙东旭 刘雷 刘莉莉 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第12期920-921,共2页
目的探明安徽省北部疟疾流行区中华按蚊的溴氰菊酯抗性现状。方法选择涡阳县临湖镇、蒙城县坛城镇、太和县大新镇、利辛县纪五场乡,每乡镇各选取1个自然村,于2011年7～8月采用牛诱和猪诱法捕获饱血中华按蚊,采用WHO推荐的成蚊接触筒法... 目的探明安徽省北部疟疾流行区中华按蚊的溴氰菊酯抗性现状。方法选择涡阳县临湖镇、蒙城县坛城镇、太和县大新镇、利辛县纪五场乡,每乡镇各选取1个自然村,于2011年7～8月采用牛诱和猪诱法捕获饱血中华按蚊,采用WHO推荐的成蚊接触筒法进行按蚊敏感性测试。结果涡阳县临湖镇,蒙城县坛城镇、太和县大新镇、利辛县纪五场乡捕获的中华按蚊0.05%溴氰菊酯击倒率分别为2.73%、4.9%、4.72%和6.42%,校正死亡率分别为6.54%、7.78%、9.27%和11.18%,均为抗性群体。结论安徽省北部疟疾流行区中华按蚊已经对溴氰菊酯产生明显抗性。 展开更多
关键词 中华按蚊 溴氰菊酯 抗药性
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广西白裤瑶地区居民肠道寄生虫感染现状调查 被引量：8
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作者 蒋智华 张鸿满 +8 位作者 司国爱 黄福明 谭裕光 江河 张陆娟 阮廷清 欧松 吴钦华 李树林 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第2期139-141,共3页
目的了解广西白裤瑶少数民族地区居民肠道寄生虫感染情况,为进一步防治策略制定和实施提供依据。方法收集白裤瑶聚居区居民的一般人口学情况,采集粪便标本,采用改良加藤厚涂片法和生理盐水涂片法对粪样进行检查。结果调查广西白裤瑶聚... 目的了解广西白裤瑶少数民族地区居民肠道寄生虫感染情况,为进一步防治策略制定和实施提供依据。方法收集白裤瑶聚居区居民的一般人口学情况,采集粪便标本,采用改良加藤厚涂片法和生理盐水涂片法对粪样进行检查。结果调查广西白裤瑶聚居地居民671人,肠道寄生虫感染386人,感染率57.53%,其中白裤瑶居民感染率71.02%。检出9种肠道寄生虫,钩虫感染率33.68%,蛔虫感染率24.89%,鞭虫感染率9.84%,人芽囊原虫感染率10.87%,蓝氏贾第鞭毛虫感染率1.15%,结肠内阿米巴原虫感染率4.45%,溶组织内阿米巴原虫感染率1.65%,其他寄生虫感染率0.33%。不同年龄、不同民族居民的感染率差异有统计学意义。结论肠道寄生虫感染仍是广西山区农村尤其是少数民族地区突出的公共卫生问题。 展开更多
关键词 白裤瑶 广西 肠道寄生虫 感染率 流行病学调查
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乙型脑炎病毒E蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达 被引量：5
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作者 吴玉水 任君萍 +6 位作者 黄庆生 丁天兵 张伟 宋建华 朱忠勇 张红毅 马文煜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期130-131,135,共3页
目的 :用巴斯德毕赤酵母系统表达乙型脑炎病毒 (JEV)E蛋白。方法 :将JEVE蛋白基因亚克隆入真核表达载体 pPIC9K ,以电穿孔法转化酵母SMD116 8。用MD平板筛选重组子、G4 18筛选高拷贝转化子 ,经甲醇诱导表达后 ,SDS PAGE和免疫印迹分析... 目的 :用巴斯德毕赤酵母系统表达乙型脑炎病毒 (JEV)E蛋白。方法 :将JEVE蛋白基因亚克隆入真核表达载体 pPIC9K ,以电穿孔法转化酵母SMD116 8。用MD平板筛选重组子、G4 18筛选高拷贝转化子 ,经甲醇诱导表达后 ,SDS PAGE和免疫印迹分析表达产物。结果 :由于糖基化不同 ,所表达产物的相对分子质量 (Mr)约为 1130 0 0和 780 0 0 ,表达量约为5 0mg/L。结论 :在巴斯德比赤酵母中成功地表达了JEVE蛋白 。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 E蛋白 基因克隆 蛋白表达 巴斯德毕赤酵母 电穿孔法
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云南省乙型脑炎流行与防治现状调查 被引量：9
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作者 王丕玉 周红宁 +5 位作者 张再兴 吴超 顾云安 董利民 毛祥华 陈章伟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第1期19-22,F0003,共5页
目的了解云南省乙型脑炎流行变化和趋势，为制定防治方案和策略提供科学依据。方法收集2002～2005年云南省乙脑疫情资料，采用乙型脑炎病例个案凋查表进行现场既往流行病学个案调查，应用诱蚊灯和吸蚊管人工捕蚊方法进行现场传播媒介调... 目的了解云南省乙型脑炎流行变化和趋势，为制定防治方案和策略提供科学依据。方法收集2002～2005年云南省乙脑疫情资料，采用乙型脑炎病例个案凋查表进行现场既往流行病学个案调查，应用诱蚊灯和吸蚊管人工捕蚊方法进行现场传播媒介调查，同时进行防治现状调查。结果2002～2004年全省报告乙脑病例1272例，发病率在1‰～1．84‰的县市有8个，每年平均有69个县（市）有病例报告，多集中在6～9月发病。2005年全省报告乙脑病例426例，比2004年397例上升12．40％；死亡22例，上升69．23％，病死率5．16％，上升50．44％。全省16个州（市）中有15个州（市）有乙脑病例报告。既往流行病学个案调查6个县（市）17例，其中儿童发病12例（占70．59％），治疗后有严重后遗症4例（致残率23．53％），死亡4例（病死率23．53％）；媒介调查12个县（市），乙脑主要传播媒介三带喙库蚊为当地的主要优势蚊种（58．10％）；防治现状调查了15个州（市）26个县，主要采取的防治措施为：疫情监测、健康教育、疫点灭蚊喷洒、乙脑疫苗接种。其中疫苗预防接种调查8个州（市）26个县，年接种率在0．10％～9．58％之间。结论1）云南省乙型脑炎发病多、分布较广，儿童发病、致残、病死率较高；2）乙脑的主要传播媒介三带喙库蚊在云南省广泛分布；3）人群乙脑疫苗预防接种率较低，特别是农村儿童接种覆盖率非常低。 展开更多
关键词 乙型脑炎 防治现状 调查分析 云南
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治疗用乙型脑炎单克隆抗体注射液的研制 被引量：6
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作者 过琴媛 张碧如 +10 位作者 邹林 寿伟华 李鸿斌 全昱东 万邦礼 李玲玲 黄文萱 王兵 宋爱京 马文煜 黄庆生 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1997年第1期16-20,共5页
用清洁级F1代小鼠制备日本脑炎病毒单克隆抗体腹水，经辛酸沉淀、硫酸铵盐析粗提后，再通过凝胶过滤柱层析纯化。每毫升腹水可得到单克隆抗体4～4．5mg，纯度大于95％，回收率为60％～70％，蚀斑中和法测定活性大于5×105，无鼠源... 用清洁级F1代小鼠制备日本脑炎病毒单克隆抗体腹水，经辛酸沉淀、硫酸铵盐析粗提后，再通过凝胶过滤柱层析纯化。每毫升腹水可得到单克隆抗体4～4．5mg，纯度大于95％，回收率为60％～70％，蚀斑中和法测定活性大于5×105，无鼠源病毒污染，经各项检测均符合人用鼠源性单克隆抗体的要求。按有关规程研制成治疗用乙型脑炎单克隆抗体注射液，经全面检定符合临床试验的标准。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 单克隆抗体 注射液 研制
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