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大肠侧向发育型肿瘤细胞株的建立及其鉴定 被引量:17
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作者 赖卓胜 韩宇晶 +2 位作者 刘思德 王亚东 姜泊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期934-937,共4页
目的 为了深入研究大肠侧向发育型肿瘤 (LST)细胞的生物学特性及其发生发展的机制。方法 采用人LST组织进行肿瘤细胞建株及细胞分离与原代培养 ,传代至 70代进行细胞鉴定 ,包括细胞的形态结构分析、染色体分析和免疫组化分析等 ,并与... 目的 为了深入研究大肠侧向发育型肿瘤 (LST)细胞的生物学特性及其发生发展的机制。方法 采用人LST组织进行肿瘤细胞建株及细胞分离与原代培养 ,传代至 70代进行细胞鉴定 ,包括细胞的形态结构分析、染色体分析和免疫组化分析等 ,并与非LST细胞作对比。结果 LST细胞为上皮来源的肿瘤细胞 ,多形性上皮细胞占大多数 ,其有近似肿瘤细胞的生长特性 ,群体倍增时间为 36h ;染色体数量为 4 2~6 6 ,85 %在三倍体范围内 ,并具有异常染色体核型 ;免疫组织化学观察ESA、CK2 0均呈阳性 ;超微结构具肿瘤细胞样表现和特征。结论 成功建立了 1个LST细胞株 ,并命名为LST R1细胞 ,为进一步深入研究LST细胞的生物学特性及大肠癌的发生发展机制奠定了基础。 展开更多
关键词 侧向发育型肿瘤 大肠 细胞分离 细胞培养 细胞组织化学 生物学特性
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北京等我国四个地区婴幼儿腹泻轮状病毒VP4和VP7型别的研究 被引量:35
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作者 袁丽娟 钱渊 +10 位作者 刘军 张又 熊朝晖 关德华 刘长清 邓琳菲 郭玉茹 谢若男 张振华 赵慧欣 王之梁 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期136-144,共9页
收集了北京、邢台、长春、汕头四个地区1991年秋冬季节婴幼儿腹泻患儿粪便标本共550份。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测到A组轮状病毒334例,阳性率为60.7%。用32P标记的各型特异性VP4和VP7基因cDN... 收集了北京、邢台、长春、汕头四个地区1991年秋冬季节婴幼儿腹泻患儿粪便标本共550份。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测到A组轮状病毒334例,阳性率为60.7%。用32P标记的各型特异性VP4和VP7基因cDNA探针,通过改进的Northern印迹杂交方法,确定了其中250例阳性标本的VP4、VP7型别。结果表明我国上述地区1991年秋冬季流行的轮状病毒的主要型别为VP41A、VP71型(66.4%)和VP41B、VP72型(29.2%),VP41A、VP73型标本仅在北京地区发现。各种型别毒株之间的混合感染占2.8%。本研究首次报告了北京及我国部分地区婴幼儿腹泻轮状病毒VP4、VP7型别及其组合,为我国轮状病毒感染提供了分子流行病学资料。 展开更多
关键词 轮状病毒 婴幼儿 腹泻 分型
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在我国腹泻患儿中发现G9型轮状病毒感染 被引量:36
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作者 钱渊 袁丽娟 +4 位作者 熊朝晖 张又 刘军 关德华 王之梁 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期263-267,共5页
在我国腹泻患儿中发现G9型轮状病毒感染钱渊,袁丽娟,熊朝晖,张又,刘军,关德华,王之梁(首都儿科研究所北京感染与免疫中心实验室,北京100020)关键词轮状病毒,VP7(G)血清型,套式PCRA组轮状病毒是严重婴幼儿... 在我国腹泻患儿中发现G9型轮状病毒感染钱渊,袁丽娟,熊朝晖,张又,刘军,关德华,王之梁(首都儿科研究所北京感染与免疫中心实验室,北京100020)关键词轮状病毒,VP7(G)血清型,套式PCRA组轮状病毒是严重婴幼儿腹泻的最重要的病毒病原[1],在发... 展开更多
关键词 轮状病毒 血清型 婴幼儿腹泻
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高压液相分子相排阻层析-十八角激光散射仪联用技术分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖分子量的方法的验证 被引量:6
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作者 罗树权 赵志强 +5 位作者 房明 杨英英 杜送田 朱莉萍 陈翠萍 谢贵林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第7期736-740,共5页
目的 对高压液相分子排阻层析-十八角激光散射仪(high performance size exclusion chromatography-Multianglelaser-light scattering,HPSEC-MALLS)联用技术分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖重均分子量(weight-average molecularweight... 目的 对高压液相分子排阻层析-十八角激光散射仪(high performance size exclusion chromatography-Multianglelaser-light scattering,HPSEC-MALLS)联用技术分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖重均分子量(weight-average molecularweight,Mw)及其分布的方法进行验证。方法 用已知Mw的普鲁兰多糖标准品对方法的准确性、精密度进行验证。采用该方法对15批b型流感嗜血杆菌荚膜多糖进行Mw及分子量分布的测定,并分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖分子大小指标分配系数(KD)与Mw的相关性。结果 普鲁兰多糖标准品的Mw检测值与Mw标示值的相对偏差均小于5%(除P-20外);精密性相对标准偏差(relative standard clevia-tion,R SD)均小于0.5%,且色谱峰及分子量分布趋势完全重叠。15批b型流感嗜血杆菌荚膜多糖Mw(3次检测的平均值)为2.681×10^5-6.488×10^5g/mol,与KD值无明显相关性。结论 HPSEC-MALLS法具有良好的准确性与精密度,可更直观、真实地反映样品的分子量分布,本实验为多糖及结合疫苗质量控制方法的优化提供了参考。 展开更多
关键词 高压液相分子排阻层析-十八角激光散射仪 b型流感嗜血杆菌荚膜多糖 分子量 验证
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甘肃省瓜州县一起由埃可病毒30引致的无菌性脑炎疫情病原学分析 被引量:5
5
作者 陈建华 朱贞 +4 位作者 李煜山 武海卓 刘海霞 王旭霞 于德山 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期721-726,共6页
对2015年6-8月发生在中国甘肃省瓜州县一起病毒性脑炎疫情进行病原学诊断及其分子特征研究。采集74例病例样本132份(脑脊液14份,咽拭子25份,血清66份以及粪便27份)。对血清与脑脊液标本经ELISA IgM检测初步排除乙脑病毒、单纯疱疹病... 对2015年6-8月发生在中国甘肃省瓜州县一起病毒性脑炎疫情进行病原学诊断及其分子特征研究。采集74例病例样本132份(脑脊液14份,咽拭子25份,血清66份以及粪便27份)。对血清与脑脊液标本经ELISA IgM检测初步排除乙脑病毒、单纯疱疹病毒、流行性腮腺炎病毒和腺病毒感染之后,采用实时荧光PCR法对所有标本进行人类肠道病毒核酸检测,阳性者使用HEp-2和RD细胞进行病毒分离,并对分离株进行全长VP1区核苷酸序列测定及其分子特征分析。结果发现:132份标本中人类肠道病毒核酸检测阳性72份,71份分子定型结果为埃克病毒30(E-30);从29例病例的46份样本分离到E-30;甘肃瓜州E-30的全长VP1区核苷酸序列的同源性高达99.2%-100.0%,进化树图显示其与中国2011年以后的E-30分离株属同一个分支。E-30是引起本次甘肃省瓜州县局部地区病毒性脑炎暴发的病原,且属于中国正在流行的ECHO30进化分支中近期流行簇。 展开更多
关键词 病毒性脑炎 埃可病毒30型(ECHO30) VP1区 序列分析
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肠道病毒71型的热力和紫外灭活效果的研究 被引量:8
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作者 谢婧 李丹地 +6 位作者 谢广成 胡亚倩 章青 孔翔羽 郭妮君 李宇宁 段招军 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期500-506,共7页
EV71感染引起的手足口病给婴幼儿身心健康带来巨大危害,科学有效的灭活EV71为预防和控制EV71引起的手足口病的传播流行提供保障。本文采取热力和紫外照射手段,探讨其对EV71灭活的有效性。实验结果表明50℃不能灭活EV71,60℃和70℃能够... EV71感染引起的手足口病给婴幼儿身心健康带来巨大危害,科学有效的灭活EV71为预防和控制EV71引起的手足口病的传播流行提供保障。本文采取热力和紫外照射手段,探讨其对EV71灭活的有效性。实验结果表明50℃不能灭活EV71,60℃和70℃能够有效灭活EV71;30cm紫外照射30 min和60 min后EV71因基因组RNA被破坏而失活;然而随着胎牛血清含量的增加,热力和紫外灭活EV71的效果减弱。本文研究结果显示热力和紫外照射均可有效灭活EV71,该结果为阻断EV71的传播提供指导。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 热灭活 紫外照射
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中国手足口病的流行状况及病原谱变化分析 被引量:116
7
作者 赵奇 朱俊萍 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期554-559,共6页
手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种全球性的病毒性传染病,目前已成为重要的公共卫生问题,引起世界各国的广泛关注。自20世纪90年代开始,该病在亚太地区频繁暴发,中国自2008年出现全国范围的HFMD大暴发,重症和死亡病例... 手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种全球性的病毒性传染病,目前已成为重要的公共卫生问题,引起世界各国的广泛关注。自20世纪90年代开始,该病在亚太地区频繁暴发,中国自2008年出现全国范围的HFMD大暴发,重症和死亡病例居高不下。虽然多年来中国大陆HFMD主要病原多为肠道病毒A组71型(Enterovirus A71,EV-A71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16),但病原谱在不断变化,病原在逐步进化,情况日趋复杂。本文就中国HFMD的流行状况、病原谱变化进行综述和初步分析。 展开更多
关键词 手足口病 病原谱 肠道病毒
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泰州市2009年手足口病病原检测分析 被引量:20
8
作者 杨海玉 马智龙 查杰 《中国热带医学》 CAS 2010年第1期65-65,111,共2页
目的了解泰州市现阶段儿童手足口病病原学和流行病学特征,为综合防控建立本底资料。方法对泰州四市二区医院2009年1~6月临床诊断为手足口病的住院和门诊病例采集咽拭子、肛拭子,进行荧光定量RT-PCR检测;用描述性流行病学方法对实验室... 目的了解泰州市现阶段儿童手足口病病原学和流行病学特征,为综合防控建立本底资料。方法对泰州四市二区医院2009年1~6月临床诊断为手足口病的住院和门诊病例采集咽拭子、肛拭子,进行荧光定量RT-PCR检测;用描述性流行病学方法对实验室确诊病例进行流行病学特征分析。结果135例临床诊断病例中76例检出肠道病毒核酸阳性,阳性率56.3%,其中EV71阳性率30.4%,CoxA16阳性率23.0%。咽拭子和肛拭子检出阳性率分别为25.9%和26.7%,重症病例9例都是2岁以下儿童,其中1例是CoxA16感染,8例是EV71感染。发病年龄以5岁以下儿童为主,占86.8%,诊断病例中男女病例数之比1.36:1。结论泰州市手足口病病原以EV71和CoxA16为主,5岁以下男性儿童是易感人群;重症病例的病原以EV71为主,多发于2岁以下儿童;荧光定量RT-PCR可快速诊断手足口病病原。 展开更多
关键词 手足口病 儿童 EV71 COXA16 RT—PCR
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肠道病毒71型灭活疫苗的小鼠细胞免疫效果 被引量:5
9
作者 鲁卫卫 吴蕴怡 +5 位作者 郝春生 宋冬梅 马淑花 刘宇 陈蕾 李秀玲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期1-8,共8页
目的评价肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠的细胞免疫效果。方法分别以不同剂量(1、2.5、5、10μg/ml,均含铝佐剂1 mg/ml)、不同剂型(含铝佐剂1 mg/ml或不含铝佐剂)、不同免疫剂次(单次免疫或加强免疫)EV71灭活疫苗... 目的评价肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠的细胞免疫效果。方法分别以不同剂量(1、2.5、5、10μg/ml,均含铝佐剂1 mg/ml)、不同剂型(含铝佐剂1 mg/ml或不含铝佐剂)、不同免疫剂次(单次免疫或加强免疫)EV71灭活疫苗经腹腔免疫小鼠,0.5 ml/只,均设铝佐剂对照组(仅注射铝佐剂1 mg/ml)。采用经典小鼠树突状细胞(dendritic cell,DC)培养方法制备正常小鼠DC,瑞氏染色法检测细胞形态,流式细胞术分析其表型及纯度;免疫磁珠分选法(magnetic activated cell sorting,MACS)分离小鼠脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞,流式细胞术检测细胞纯度。ELISPOT法检测各组免疫小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ的水平;细胞因子试剂盒检测小鼠淋巴细胞培养上清及小鼠血清中细胞因子的水平。结果 DC形态不规则,表面树枝状突起形态不同,细胞核较大且不规则;DC纯度为(81.39±9.24)%,可高水平表达MHⅡ(I-A/I-E)类分子,中度表达CD86和CD40。CD4+、CD8+T细胞纯度分别为95.27%和94.08%。随着疫苗免疫剂量的增加,CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC显著增加,5μg/ml疫苗组达最大值,且明显高于其他组(P均<0.05);5μg/ml疫苗组淋巴细胞培养上清中IFNγ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-5、TNF-α含量明显高于其他组(P<0.05);1、2.5、5μg/ml疫苗组血清中IL-10含量明显高于铝佐剂对照组(P<0.05),1μg/ml疫苗组明显低于2.5及5μg/ml疫苗组(P<0.05)。含铝佐剂疫苗组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC、淋巴细胞培养上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平及血清中IL-10含量均明显高于无铝佐剂疫苗组(P均<0.05)。加强免疫组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC、淋巴细胞培养上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平、血清中IL-10含量均明显高于单次免疫组(P均<0.05)。结论 EV71灭活疫苗可诱导小鼠产生特异性细胞免疫反应,本实验为其进一步人体临床试验研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 灭活疫苗 细胞免疫
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急性弛缓性麻痹病例中ECHO11病毒的基因特征分析 被引量:4
10
作者 刘桂艳 许文波 +5 位作者 纪峰 张勇 王海岩 李岩 严冬梅 徐爱强 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期22-30,共9页
该文首次分析了我国ECHO11病毒的分子流行病学资料。1999~2004年,ECHO11病毒是山东省急性弛缓性麻痹(AFP)病例中分离到的优势毒株,2003年从山东省482例AFP病例中共分离到11株ECHO11病毒,其中相关的10例病例分布跨越山东省大部分... 该文首次分析了我国ECHO11病毒的分子流行病学资料。1999~2004年,ECHO11病毒是山东省急性弛缓性麻痹(AFP)病例中分离到的优势毒株,2003年从山东省482例AFP病例中共分离到11株ECHO11病毒,其中相关的10例病例分布跨越山东省大部分地区,但发病日期集中在7月和12月。该研究试图通过对VP1编码基因全序列的测定和分析,为探讨ECHO11病毒与AFP之间的病因关系提供线索。分子流行病学研究提示,11株ECHO11毒株都位于同一传播链,核苷酸同源性为97.2%~100%,氨基酸同源性为99.6%~100%,其中7月和12月的分离株之间相层8~9个核苷酸,氨基酸序列一致。这说明山东省2003年7月和12月分别发生了ECHO11病毒流行,但这些毒株与AFP的病因关系尚需进一步研究。11株病毒组成了A基因型中的一个新亚型,在进化树上单独呈密切相关的一簇,与同基因型内的其它亚型的核苷酸同源性为82.2%~84.7%,氨基酸同源性为94.8%~97.6%. 展开更多
关键词 急性弛缓性麻痹病例 ECHO11病毒 基因特征
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埃可病毒7型分离株全基因序列分析 被引量:3
11
作者 邱晓枫 吕华坤 +3 位作者 刘小东 潘劲草 汪皓秋 陈树昶 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1050-1058,共9页
埃可病毒7型(Echovirus 7,ECHO7)属于小RNA病毒科人肠道病毒属,常引起儿童病毒性脑炎、手足口病和急性迟缓性麻痹等疾病。为了解病毒性脑炎患者脑脊液中分离获得的一株ECHO7毒株(40/Longyou/ZJ)的全基因组特征,进行全基因组测序并分析... 埃可病毒7型(Echovirus 7,ECHO7)属于小RNA病毒科人肠道病毒属,常引起儿童病毒性脑炎、手足口病和急性迟缓性麻痹等疾病。为了解病毒性脑炎患者脑脊液中分离获得的一株ECHO7毒株(40/Longyou/ZJ)的全基因组特征,进行全基因组测序并分析其分子变异和遗传进化特点。设计引物,提取病毒RNA,PCR扩增和序列测定获得全基因序列。利用Mega4.1、DNAstar、RDP4和SimPlot3.5.1软件分析全基因序列。40/Longyou/ZJ病毒株基因组全长7426个核苷酸(nt),5′端和3′端分别为741nt和100nt的非编码区(Untranslated region,UTR),5′UTR和3′UTR间为一个6585nt长的开放阅读框,编码含2194个氨基酸的多聚蛋白。与GenBank中12株ECHO7代表株的全序列比较发现,核苷酸相似性为79.3%~85.7%,氨基酸相似性为95.5%~97.8%。基于5′UTR、P1和P2区构建的遗传进化树中,40/Longyou/ZJ株与ECHO7参考株均在同一进化分支;但在P3区的遗传进化树中却与其他肠道病毒B组病毒聚类。RDP4和SimPlot3.5.1软件分析均证实40/Longyou/ZJ分离株与柯萨奇病毒B组4型(Coxsackievirus B4,CVB4)存在基因自然重组现象,重组位点主要在编码逆转录酶蛋白的3D区。本研究首次对我国脑脊液中分离的ECHO7进行全基因序列测定和分析,发现40/Longyou/ZJ分离株与CVB4存在基因重组,对研究ECHO7的遗传特性具有重要意义。 展开更多
关键词 埃可病毒 全基因组 序列分析 重组
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我国G9型轮状病毒VP7编码基因的序列分析 被引量:5
12
作者 李国华 靖宇 钱渊 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期376-381,共6页
我国G9型轮状病毒VP7编码基因的序列分析李国华靖宇钱渊(首都儿科研究所北京市感染与免疫中心实验室,北京100020)关键词轮状病毒,VP7,序列分析A组轮状病毒是导致婴幼儿重症腹泻的最重要病原,也是导致发展中国家婴... 我国G9型轮状病毒VP7编码基因的序列分析李国华靖宇钱渊(首都儿科研究所北京市感染与免疫中心实验室,北京100020)关键词轮状病毒,VP7,序列分析A组轮状病毒是导致婴幼儿重症腹泻的最重要病原,也是导致发展中国家婴幼儿死亡的主要原因之一〔1〕。轮状... 展开更多
关键词 轮状病毒 VP7 序列分析 编码基因
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EV71的感染和抗病毒天然免疫应答 被引量:12
13
作者 谢广成 段招军 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期501-508,共8页
EV71是儿童手足口病的主要病原体,部分感染儿童会出现疱疹性咽峡炎以及严重的肺水肿和/或脑干脑炎。近几年,EV71感染引起的疾病机制研究取得了诸多进展。本文针对目前EV71的敏感细胞、EV71感染激活的信号途径以及EV71感染活化的天然免... EV71是儿童手足口病的主要病原体,部分感染儿童会出现疱疹性咽峡炎以及严重的肺水肿和/或脑干脑炎。近几年,EV71感染引起的疾病机制研究取得了诸多进展。本文针对目前EV71的敏感细胞、EV71感染激活的信号途径以及EV71感染活化的天然免疫应答或免疫逃逸机制研究进行综述,旨在为EV71抗病毒药物研制和免疫致病机理的研究提供思路。 展开更多
关键词 EV71 模式识别受体 天然免疫 免疫逃逸
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上海市人群Echo30病毒性脑膜炎隐性感染调查 被引量:5
14
作者 高洁 赵雅男 姜庆五 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期121-124,共4页
为了了解上海市不同年龄组人群的Echo30病毒隐性感染情况及IgG抗体阳性率分布。采集上海市412份不同年龄组人群血清,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的Echo30IgG抗体。发现受检普通人群血清中Echo30IgG抗体阳性率为25.8%。其中... 为了了解上海市不同年龄组人群的Echo30病毒隐性感染情况及IgG抗体阳性率分布。采集上海市412份不同年龄组人群血清,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的Echo30IgG抗体。发现受检普通人群血清中Echo30IgG抗体阳性率为25.8%。其中1岁以下婴幼儿中未见抗体阳性者,15岁以下儿童抗体阳性率较低(10%~16.7%),15岁以上人群抗体阳性率水平明显升高(45.0%~46.7%)。孕妇与普通人群抗体阳性率无显著性差异。研究结果提示上海市人群中存在隐性感染者,人群通过自然感染获得免疫保护,15岁以下儿童为Echo30感染及发病的高危人群,母体传递给婴幼儿的抗体水平较低,不能为婴幼儿提供先天性免疫保护。 展开更多
关键词 埃可病毒30型(Echo30) 无菌性脑膜炎 肠道病毒 隐性感染
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2011~2014年中国福建龙岩市Echo 30型病毒分子流行病学特征分析 被引量:2
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作者 陈前进 曹春远 +6 位作者 张彦锋 杨秀惠 吴水新 何云 廖亦红 何春荣 罗招福 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期727-732,共6页
了解中国福建省龙岩市2011-2014年病毒性脑炎散发病例中Echo 30分子流行病学特征。收集病毒性脑炎或中枢神经系统感染脑脊液标本,细胞培养分离病毒,RT-PCR扩增VP1基因序列全长以鉴定Echo 30血清型及遗传特征分析。2011-2014年共从608例... 了解中国福建省龙岩市2011-2014年病毒性脑炎散发病例中Echo 30分子流行病学特征。收集病毒性脑炎或中枢神经系统感染脑脊液标本,细胞培养分离病毒,RT-PCR扩增VP1基因序列全长以鉴定Echo 30血清型及遗传特征分析。2011-2014年共从608例监测病例中分离到168株肠道病毒,其中60株为Echo 30;60例Echo 30相关病例分析显示,Echo 30流行高峰为6-8月;波及年龄范围广,以小于10岁高发(65%);临床症状以发热、头痛和呕吐为主,脑脊液清,细胞和蛋白含量检测多增加。VP1区分析显示,2011-2014年龙岩流行株均属于h基因型,但有两个传播链共同循环;与2011年导致福建省病毒性脑炎暴发毒株高度同源,但2014年龙岩株均在VP1蛋白I 120V出现新氨基酸变异。福建省2011年暴发流行株仍流行于龙岩市,且两个传播链病毒仍共同循环,但2014年病毒株出现了新的变异,持续监测将有利于早期发现病毒变异积累和评估疾病流行的风险。 展开更多
关键词 ECHO 30型病毒 病毒性脑炎 VP1 分子流行病学
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基于Label-free定量蛋白组学揭示肠道病毒A71型感染致人扁桃体上皮细胞蛋白质组的改变 被引量:2
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作者 李丹 苏萌 +7 位作者 孙萍萍 王春阳 王蒋丽 王宏 章青 杜娈英 郭文平 谢广成 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期778-786,共9页
肠道病毒A组71型(Enterovirus-A71,EV-A71)感染引起的手足口病给婴幼儿造成严重的疾病负担,明确EV-A71的致病机制能为有效防控手足口病提供科学依据。为了研究EV-A71感染与人扁桃体上皮细胞的互作,本研究采用Label-free定量蛋白组学技... 肠道病毒A组71型(Enterovirus-A71,EV-A71)感染引起的手足口病给婴幼儿造成严重的疾病负担,明确EV-A71的致病机制能为有效防控手足口病提供科学依据。为了研究EV-A71感染与人扁桃体上皮细胞的互作,本研究采用Label-free定量蛋白组学技术研究EV-A71感染人扁桃体上皮细胞UT-SCC-60B 6h和12h后蛋白质组的改变情况,并确定EV-A71感染动力学(EV-A71 6h∶12h)过程中蛋白质组的改变情况,并进行差异表达蛋白(Differentially expressed proteins,DEPs)的蛋白互作网络和基因本体(Gene ontology,GO)分析。EV-A71感染6h时共有27个DEPs(下调12个DEPs,上调15个DEPs)发生显著改变;EV-A71感染12h时共有62个DEPs(下调26个DEPs,上调36个DEPs)发生显著改变;EV-A71感染动力学(EV-A71 6h∶12h)过程中共有40个DEPs(下调21个DEPs,上调19个DEPs)发生显著改变。显著发生改变的COX6C、TIMM10、MAP1LC3B、HIST1H1D、DNAJC8、TMED4和ARPC5等DEPs为各组间重叠蛋白。蛋白互作网络和GO分析结果显示,DEPs主要涉及到线粒体及线粒体膜的通透性调节、细胞囊泡形成、细胞凋亡、线粒体介导的凋亡等生物学过程。因此,EV-A71感染使人扁桃体上皮细胞的蛋白表达谱发生改变。 展开更多
关键词 肠道病毒A组71型(EV-A71) 人扁桃体上皮细胞 Label-free定量 蛋白质组学
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EV71型病毒驯化与手足口病动物模型的研究进展 被引量:10
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作者 窦建琳 安静 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期259-262,共4页
手足口病好发于幼儿,通常是自限性的发热、出疹性疾病,但是肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病易于出现伴有神经症状的严重病例。EV71的免疫学发病机制较为复杂,从而妨碍了疫苗的研发。建立良好的手足口病动物模型有助于研究其发病机... 手足口病好发于幼儿,通常是自限性的发热、出疹性疾病,但是肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病易于出现伴有神经症状的严重病例。EV71的免疫学发病机制较为复杂,从而妨碍了疫苗的研发。建立良好的手足口病动物模型有助于研究其发病机制,而建立动物模型的关键是通过病毒驯化获得EV71的神经细胞适应毒株。本文简要综述EV71的病毒驯化及手足口病动物模型的最新进展,以期推动相关研究。 展开更多
关键词 手足口病 EV71病毒 病毒驯化 动物模型
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我国常用IHA方法对日本血吸虫人体感染检测效能的综合评估 被引量:3
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作者 王利磊 王用斌 魏冬冬 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第2期155-159,164,共6页
目的对我国日本血吸虫人体感染检测的常用IHA方法诊断效能进行综合评估。方法在中国知网(CNKI)、万方数据(Wanfang Data)、重庆维普(VIP)、中国生物医学文献数据库、PubMed、Web of Science、Scopus和Google Scholar中检索有关间接血凝... 目的对我国日本血吸虫人体感染检测的常用IHA方法诊断效能进行综合评估。方法在中国知网(CNKI)、万方数据(Wanfang Data)、重庆维普(VIP)、中国生物医学文献数据库、PubMed、Web of Science、Scopus和Google Scholar中检索有关间接血凝试验(IHA)诊断日本血吸虫人体感染的全部文献,采用meta分析综合评价IHA检测日本血吸虫人体感染的诊断效能。结果共有14项研究纳入最终分析,IHA法诊断日本血吸虫人体感染的灵敏度为37.6%(95%CI:32.1%~43.3%)~95.1%(95%CI:83.5%~99.4%),特异度为34.7%(95%CI:33.2%~38.2%)~91.6%(95%CI:91.6%~95.6%)。不同研究间存在异质性,采用随机效应模型加权合并的敏感度、特异度、阳性似然比和阴性似然比分别为75.6%(95%CI:73.9%~77.7%)、73%(95%CI:72.4%~73.7%)、2.877(95%CI:2.106~3.931)和0.306(95%CI:0.196~0.48)。应用加权最小二乘法、一般最小二乘法和稳健法计算得出的IHA合并准确度为0.71、0.759和0.749,合并OR值分别为5.997、9.937和8.893,3种方法拟合的IHA法SROC曲线下面积分别为0.766、0.826、0.815;合并优势比DOR值为9.41(95%CI:4.88~18.182)。散点图中散点基本对称,纳入文献发表偏倚较小。结论IHA法对日本血吸虫人体感染诊断效能较高,是适合在向血吸虫病传播阻断乃至消除迈进中应用的适宜技术。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 间接血凝试验 免疫诊断 诊断效能 meta分析
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埃可病毒9型荧光RT-PCR快速检测方法的建立及应用 被引量:2
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作者 邱晓枫 张国忠 +2 位作者 黄志成 潘劲草 于新芬 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期836-841,共6页
为了建立特异、灵敏、快速的荧光定量RT-PCR方法用于检测埃可病毒9型病毒核酸,并初步应用于埃可病毒9型的临床标本检测。根据GenBank登录的埃可病毒9型毒株VP1基因序列,应用生物学软件进行序列比对,在保守区设计特异性引物和TaqMan探针... 为了建立特异、灵敏、快速的荧光定量RT-PCR方法用于检测埃可病毒9型病毒核酸,并初步应用于埃可病毒9型的临床标本检测。根据GenBank登录的埃可病毒9型毒株VP1基因序列,应用生物学软件进行序列比对,在保守区设计特异性引物和TaqMan探针。对反应条件进行优化,验证方法的特异性、灵敏度和重复性,同时对疑似埃可病毒9型病例标本进行检测。该方法对埃可病毒9型的检出有高度特异性,与EV71、CA16、CA24v、CA6、CA10、埃可病毒30型等均无交叉反应,检测灵敏度均达0.1TCID50/mL,可从疑似埃可病例粪便标本中直接检测病毒核酸,检测仅需3~4h。本研究建立的埃可病毒9型TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法特异、灵敏,适用于临床早期诊断。 展开更多
关键词 埃可病毒9型(ECHO-9) 荧光定量RT-PCR TAQMAN探针
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珠海市2013年肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型基因特征 被引量:2
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作者 周兰兰 魏泉德 +5 位作者 张丽荣 林毅雄 李红霞 郑予柯 方艳梅 沈韧 《中国热带医学》 CAS 2014年第12期1429-1434,共6页
目的分析2013年珠海市手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD)患者中,肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)的分子流行病学特征。方法采集珠海市2013年HFMD临床诊断病例粪便标本215份,选取其中Real time RT-PCR检测E... 目的分析2013年珠海市手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD)患者中,肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)的分子流行病学特征。方法采集珠海市2013年HFMD临床诊断病例粪便标本215份,选取其中Real time RT-PCR检测EV71病毒核酸阳性的18份和Cox A16病毒核酸阳性的8份标本,进行VP4区基因扩增,并进行核苷酸序列和遗传进化关系分析。结果 16份EV71扩增测序成功,与C4a基因亚型代表株具有最高的核苷酸序列同源性(95.2%-99.5%)和氨基酸同源性(91.3%-100%);5份Cox A16扩增测序成功,有2份与B2a亚型代表株具有最高的核苷酸序列同源性(98.6%-99.0%)和氨基酸同源性(97.1%-98.5%),3份与B2b亚型代表株具有最高的核苷酸序列同源性(96.6%-97.1%)和氨基酸同源性(100%)。结论 2013年珠海市流行的EV71属于C4a基因亚型,Cox A16为B2a和B2b两种基因亚型。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A组16型 基因型
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