[目的]建立一种新的优化的小鼠中脑黑质取材方法,用于检测帕金森病(Parkinson′s disease, PD)小鼠黑质区域的细胞和分子改变。[方法] 2月龄C57BL/6J小鼠随机分为传统组织定位取材组和脑片定位取材组,取黑质组织,通过Western blotting和...[目的]建立一种新的优化的小鼠中脑黑质取材方法,用于检测帕金森病(Parkinson′s disease, PD)小鼠黑质区域的细胞和分子改变。[方法] 2月龄C57BL/6J小鼠随机分为传统组织定位取材组和脑片定位取材组,取黑质组织,通过Western blotting和qPCR方法检测两种取材方法黑质中酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase, TH)的含量。随后通过向小鼠黑质立体定位注射AAV-α-synuclein病毒载体建立PD模型组,脑片定位取材方法获取黑质,应用RNA测序和qPCR检测该取材方法能否有效反应PD相关基因的改变。[结果]脑片定位取材组1~6片脑片中,4号脑片TH蛋白含量显著高于组织定位取材组5.98倍(24.03±1.823 vs 4.018±3.675)及1号、2号、6号脑片(1;3.841±4.333;2.23±1.494);富集3、4、5号脑片提取RNA,其Th基因表达水平高于组织定位取材组2.3倍(2.303±0.4162 vs 1)及1、2、6号脑片富集组4.04倍(2.303±0.4162 vs 0.5746±0.0812)。在PD小鼠模型中富集3、4、5号脑片,转录组测序结果提示,多巴胺神经元相关基因下调,免疫功能相关基因上调,qPCR验证了PD模型黑质中Th和Aldh1a7表达水平显著下降(0.9018±0.138 vs 0.2854±0.09;1.031±0.3262 vs 0.1703±0.07989),CD180和Ddx60表达水平显著增加(1.008±0.1556 vs 4.597±1.586;1.007±0.1417 vs 12.94±2.776)。[结论]相较于组织定位取材方法,脑片定位取材能够更准确的提取到黑质组织,并且能够有效捕捉到多巴胺能神经元的丢失情况以及PD相关基因的改变,对于检测PD动物模型中的细胞和分子变化的精准性具有重要意义。展开更多
背景:近年来随着生物医学的快速发展,脑衰老和外泌体的研究受到越来越多的关注,但目前还没有文献对该领域进行文献计量学分析。目的:客观分析近15年国内外关于脑衰老和外泌体的相关文献,总结梳理该领域的研究现状、热点和发展趋势。方法...背景:近年来随着生物医学的快速发展,脑衰老和外泌体的研究受到越来越多的关注,但目前还没有文献对该领域进行文献计量学分析。目的:客观分析近15年国内外关于脑衰老和外泌体的相关文献,总结梳理该领域的研究现状、热点和发展趋势。方法:以Web of Science的核心数据库为检索平台,下载了从建库至2022-12-28发表的有关脑衰老和外泌体的文献,使用CiteSpace 6.1.R6可视化软件从国家、机构、作者、关键词、共被引文献等方面对数据进行分析。结果与结论:共纳入1045篇研究文献,国内外关于脑衰老和外泌体研究的发文量呈逐年增长趋势,美国以发文量429篇居于首位,中国以发文量277篇位居第二。美国路易斯安那州立大学以发文量16篇位居第一。路易斯安那州立大学的Lukiw,Walter J教授是发文量最大的作者,麻省理工学院Bartel DP教授是被引用最多的作者。产量最高的期刊是《International Journal of Molecular Sciences》。阿尔茨海默病、microRNA、基因表达、细胞外囊泡、外泌体、氧化应激和生物标志物等是最相关的术语。根据对热门话题的研究,生物标志物已成为一个新的研究热点。以上结果表明,近15年来脑衰老和外泌体的研究呈逐渐上升趋势,研究方向由最初探究与脑衰老相关的中枢神经系统疾病miRNA的表达,已逐渐转向为寻找能成为识别和诊断神经退行性疾病的生物标志物,基于外泌体miRNA的方法已经成为中枢神经系统疾病有希望的治疗策略。展开更多
文摘[目的]建立一种新的优化的小鼠中脑黑质取材方法,用于检测帕金森病(Parkinson′s disease, PD)小鼠黑质区域的细胞和分子改变。[方法] 2月龄C57BL/6J小鼠随机分为传统组织定位取材组和脑片定位取材组,取黑质组织,通过Western blotting和qPCR方法检测两种取材方法黑质中酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase, TH)的含量。随后通过向小鼠黑质立体定位注射AAV-α-synuclein病毒载体建立PD模型组,脑片定位取材方法获取黑质,应用RNA测序和qPCR检测该取材方法能否有效反应PD相关基因的改变。[结果]脑片定位取材组1~6片脑片中,4号脑片TH蛋白含量显著高于组织定位取材组5.98倍(24.03±1.823 vs 4.018±3.675)及1号、2号、6号脑片(1;3.841±4.333;2.23±1.494);富集3、4、5号脑片提取RNA,其Th基因表达水平高于组织定位取材组2.3倍(2.303±0.4162 vs 1)及1、2、6号脑片富集组4.04倍(2.303±0.4162 vs 0.5746±0.0812)。在PD小鼠模型中富集3、4、5号脑片,转录组测序结果提示,多巴胺神经元相关基因下调,免疫功能相关基因上调,qPCR验证了PD模型黑质中Th和Aldh1a7表达水平显著下降(0.9018±0.138 vs 0.2854±0.09;1.031±0.3262 vs 0.1703±0.07989),CD180和Ddx60表达水平显著增加(1.008±0.1556 vs 4.597±1.586;1.007±0.1417 vs 12.94±2.776)。[结论]相较于组织定位取材方法,脑片定位取材能够更准确的提取到黑质组织,并且能够有效捕捉到多巴胺能神经元的丢失情况以及PD相关基因的改变,对于检测PD动物模型中的细胞和分子变化的精准性具有重要意义。
文摘背景:近年来随着生物医学的快速发展,脑衰老和外泌体的研究受到越来越多的关注,但目前还没有文献对该领域进行文献计量学分析。目的:客观分析近15年国内外关于脑衰老和外泌体的相关文献,总结梳理该领域的研究现状、热点和发展趋势。方法:以Web of Science的核心数据库为检索平台,下载了从建库至2022-12-28发表的有关脑衰老和外泌体的文献,使用CiteSpace 6.1.R6可视化软件从国家、机构、作者、关键词、共被引文献等方面对数据进行分析。结果与结论:共纳入1045篇研究文献,国内外关于脑衰老和外泌体研究的发文量呈逐年增长趋势,美国以发文量429篇居于首位,中国以发文量277篇位居第二。美国路易斯安那州立大学以发文量16篇位居第一。路易斯安那州立大学的Lukiw,Walter J教授是发文量最大的作者,麻省理工学院Bartel DP教授是被引用最多的作者。产量最高的期刊是《International Journal of Molecular Sciences》。阿尔茨海默病、microRNA、基因表达、细胞外囊泡、外泌体、氧化应激和生物标志物等是最相关的术语。根据对热门话题的研究,生物标志物已成为一个新的研究热点。以上结果表明,近15年来脑衰老和外泌体的研究呈逐渐上升趋势,研究方向由最初探究与脑衰老相关的中枢神经系统疾病miRNA的表达,已逐渐转向为寻找能成为识别和诊断神经退行性疾病的生物标志物,基于外泌体miRNA的方法已经成为中枢神经系统疾病有希望的治疗策略。
