目的慢性肾病的进展与肾脏空间免疫微环境的紊乱密切相关,本研究旨在利用成像质谱流式技术(imaging mass cytometry,IMC),开发出一套解析慢性肾病免疫微环境的实验和分析体系,以用于全景式解析慢性肾病肾脏组织的单细胞空间免疫微环境...目的慢性肾病的进展与肾脏空间免疫微环境的紊乱密切相关,本研究旨在利用成像质谱流式技术(imaging mass cytometry,IMC),开发出一套解析慢性肾病免疫微环境的实验和分析体系,以用于全景式解析慢性肾病肾脏组织的单细胞空间免疫微环境。方法(1)筛选针对肾脏结构单元、基质细胞和免疫细胞的抗原标志物,构建质谱流式成像抗体组合,金属标记的抗体均通过免疫组织化学实验完成抗体特异性验证;(2)选取2例输尿管癌旁的正常肾脏活检组织、2例糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)和2例免疫球蛋白A肾病(IgA nephropathy,IgAN)患者的肾穿刺活检组织,利用上述抗体进行染色孵育,通过Hyperion成像系统完成图形数据采集;(3)整合Ilastik与CellProfiler技术建立针对肾组织的单细胞分割流程,结合手动圈门与Phenograph无监督聚类算法完成细胞身份注释;(4)建立细胞间的空间邻近关系,利用置换检验对随机分布模型进行模拟,解析组织细胞与免疫细胞之间的空间关系;(5)采用k近邻(k-nearest neighbors,kNN)算法进行空间聚类,通过细胞邻域(cellular neighborhoods,CNs)划分出肾脏组织的空间功能单元,进而分析这些功能单元的免疫学特征和比例。结果(1)构建并优化出了1个37色的抗体组合,抗体均显示出高特异性和低背景噪声,该抗体组合可精准识别肾脏的结构细胞,基质细胞和浸润的免疫细胞;(2)通过Hyperion成像系统获得正常与2种慢性肾病的肾组织高维成像图片;(3)通过单细胞拆分流程系统绘制了21种肾脏组织细胞和17种免疫细胞的人类肾脏高分辨率单细胞图谱,鉴定出了CD15^(+)巨噬细胞、GzmK^(+)CD4^(+)效应T细胞等免疫细胞以及3种新型的双阳性肾小管细胞,展现了DN与IgAN肾病组织中浸润免疫细胞的差异性;(4)建立了单细胞的空间互作分析方法,展现了慢性肾病组织中免疫细胞空间互作网络,发现肌成纤维细胞作为连接组织损伤与免疫细胞浸润的关键空间枢纽;(5)通过空间邻域分析可以将肾脏结构划分为肾小球区、近端小管区、髓袢升支区、血管和纤维化区与免疫细胞富集区等9个功能单元。病变组织中正常功能结构区域占比下降,而纤维化与免疫富集区比例显著上升。其中免疫细胞富集区普遍与各功能区域保持紧密共定位,而血管和纤维化区主要与收集管区和髓袢升支区相邻。结论本研究成功开发了一套适用于肾脏组织成像的IMC方法学体系。该体系能高分辨率全景展现免疫细胞在慢性肾脏组织中的空间分布,解析了免疫细胞与组织细胞空间互作和局部免疫微环境特征。本技术将推动基于空间特征的肾脏病精准诊断和靶向治疗策略开发。展开更多
目的:探讨尿毒症血液透析患者预感性悲伤与自我表露、恐惧疾病进展的相关性及影响因素。方法:前瞻性选取2023年3月至2025年1月在盐城市亭湖区人民医院接受治疗的187例尿毒症血液透析患者作为研究对象。收集尿毒症血液透析患者的一般资...目的:探讨尿毒症血液透析患者预感性悲伤与自我表露、恐惧疾病进展的相关性及影响因素。方法:前瞻性选取2023年3月至2025年1月在盐城市亭湖区人民医院接受治疗的187例尿毒症血液透析患者作为研究对象。收集尿毒症血液透析患者的一般资料。采用预感性悲伤量表(Anticipatory Grief Scale,AGS)、中文版痛苦自我表露指数量表(Distress Disclosure Index Scale,DDI)、恐惧疾病进展简化量表(Fear of Progression Questionnaire-short Form,FOP-Q-SF)评估尿毒症血液透析患者预感性悲伤、自我表露、恐惧疾病进展。采用Pearson关性分析尿毒症血液透析患者预感性悲伤与自我表露、恐惧疾病进展的相关性。采用多因素Logistic回归分析尿毒症血液透析患者预感性悲伤的影响因素。结果:尿毒症血液透析患者AGS评分、DDI评分、FOP-Q-SF评分得分情况分别为(89.26±8.17)分、(31.28±5.69)分、(36.72±5.92)分。Pearson相关性分析结果显示,尿毒症血液透析患者AGS评分与DDI评分呈负相关,与FOP-Q-SF评分呈正相关(P<0.05)。单因素分析结果显示,尿毒症血液透析患者AGS评分与性别、年龄、文化程度、透析时间、家庭人均月收入、性格自我评定类型、主要照顾者有关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示性别为女、文化程度小学及其以下、透析时间>5年、家庭人均月收入<3000元、性格自我评定类型为内向为尿毒症血液透析患者预感性悲伤的影响因素(P<0.05)。结论:尿毒症血液透析患者预感性悲伤与痛苦自我表露呈负相关、与恐惧疾病进展呈正相关,且性别为女、文化程度小学及其以下、透析时间>5年、家庭人均月收入<3000元、性格自我评定类型为内向为尿毒症血液透析患者预感性悲伤的影响因素。展开更多
文摘目的:探讨尿毒症血液透析患者预感性悲伤与自我表露、恐惧疾病进展的相关性及影响因素。方法:前瞻性选取2023年3月至2025年1月在盐城市亭湖区人民医院接受治疗的187例尿毒症血液透析患者作为研究对象。收集尿毒症血液透析患者的一般资料。采用预感性悲伤量表(Anticipatory Grief Scale,AGS)、中文版痛苦自我表露指数量表(Distress Disclosure Index Scale,DDI)、恐惧疾病进展简化量表(Fear of Progression Questionnaire-short Form,FOP-Q-SF)评估尿毒症血液透析患者预感性悲伤、自我表露、恐惧疾病进展。采用Pearson关性分析尿毒症血液透析患者预感性悲伤与自我表露、恐惧疾病进展的相关性。采用多因素Logistic回归分析尿毒症血液透析患者预感性悲伤的影响因素。结果:尿毒症血液透析患者AGS评分、DDI评分、FOP-Q-SF评分得分情况分别为(89.26±8.17)分、(31.28±5.69)分、(36.72±5.92)分。Pearson相关性分析结果显示,尿毒症血液透析患者AGS评分与DDI评分呈负相关,与FOP-Q-SF评分呈正相关(P<0.05)。单因素分析结果显示,尿毒症血液透析患者AGS评分与性别、年龄、文化程度、透析时间、家庭人均月收入、性格自我评定类型、主要照顾者有关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示性别为女、文化程度小学及其以下、透析时间>5年、家庭人均月收入<3000元、性格自我评定类型为内向为尿毒症血液透析患者预感性悲伤的影响因素(P<0.05)。结论:尿毒症血液透析患者预感性悲伤与痛苦自我表露呈负相关、与恐惧疾病进展呈正相关,且性别为女、文化程度小学及其以下、透析时间>5年、家庭人均月收入<3000元、性格自我评定类型为内向为尿毒症血液透析患者预感性悲伤的影响因素。
