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人骨髓间充质干细胞体外培养扩增及向心肌细胞诱导分化的实验研究 被引量：10
1
作者 邓方阁 张秀英 +1 位作者 曲丽梅 李玉林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期123-126,共4页
目的:培养人骨髓间充质干细胞(Human mesenchymal stem cell,hMSCs),探讨hMSCs体外向心肌细胞(Cardio-myocytes,CM)定向诱导分化的实验研究。方法:取人的骨髓血,用Percoll(1.073g/ml)密度梯度离心及贴壁筛选结合的方法体外培养扩增hMSCs... 目的:培养人骨髓间充质干细胞(Human mesenchymal stem cell,hMSCs),探讨hMSCs体外向心肌细胞(Cardio-myocytes,CM)定向诱导分化的实验研究。方法:取人的骨髓血,用Percoll(1.073g/ml)密度梯度离心及贴壁筛选结合的方法体外培养扩增hMSCs,并进行流式细胞仪分析鉴定其免疫学表型,以未加一抗只加二抗的hMSCs作为平行对照组。选用生长良好、纯度达到95%的P5代hMSCs,用不同诱导浓度的5-氮杂胞苷(5-Azacytidine)1、5、10和20μmol/L进行诱导,对诱导后的细胞进行心肌特异性标志TroponinⅠ及Desmin的免疫组化鉴定。结果:体外分离纯化培养扩增出hMSCs,其CD44阳性率平均为93.26%±2.48%,与平行对照组(3.42%±1.09%)相比有明显差异(P<0.01)。经5和10μmol/L5-Aza诱导分化的hMSCs表达心肌特异性标记TroponinⅠ、Desmin;10μmol/L5-Aza诱导分化的hMSCs阳性率明显高于5μmol/L组;在20μmol/L组中,诱导后超过50%的细胞脱落死亡。结论:hMSCs可体外分离培养扩增,并具有向心肌细胞分化的潜能,5-Aza最佳诱导浓度为10μmol/L。 展开更多
关键词 骨髓 人骨髓间充质干细胞(hMSCs) 5-氮杂胞苷(5-Azacytidine) 心肌细胞(CM)
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人骨髓间充质干细胞体外定向诱导成骨细胞的研究 被引量：7
2
作者 李家锋 万美容 +4 位作者 刘小云 管海虹 万延俊 贺文鹏 张扬 《口腔医学》 CAS 2010年第8期481-484,共4页
目的为建立一种简便有效的下颌骨缺损修复治疗的新方法——利用体外分离纯化人骨髓间充质干细胞(marrowstromal cells,MSCs),诱导向成骨细胞转化后再用于临床。方法 Ficoll密度梯度离心后贴壁培养法,分离纯化MSCs体外培养,经连续传代培... 目的为建立一种简便有效的下颌骨缺损修复治疗的新方法——利用体外分离纯化人骨髓间充质干细胞(marrowstromal cells,MSCs),诱导向成骨细胞转化后再用于临床。方法 Ficoll密度梯度离心后贴壁培养法,分离纯化MSCs体外培养,经连续传代培养,加入10-7mol/L地塞米松,10-2mol/Lβ-甘油酸钠,500 ug/L的维生素C诱导液。结果 MSCs诱导后细胞形态向成骨细胞转化,经RT-PCR、流式细胞仪、细胞碱性磷酸酶活性、细胞糖原染色鉴定为成骨细胞。结论 hMSCs经定向诱导显示成骨细胞特性,为临床下颌骨缺损组织工程修复提供种子细胞。 展开更多
关键词 下颌骨缺损 诱导 间充质干细胞 成骨细胞
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成人骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的研究 被引量：8
3
作者 赛音其木格 侯相麟 +1 位作者 赵丽 李宁 《临床血液学杂志》 CAS 2005年第4期200-203,共4页
目的:通过成人骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)体外定向诱导为成骨细胞,探讨理想而有临床实用价值的成人骨髓MSC体外诱导培养体系。方法:体外分离、扩增成人骨髓MSC,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达。采用基础诱导培养液... 目的:通过成人骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)体外定向诱导为成骨细胞,探讨理想而有临床实用价值的成人骨髓MSC体外诱导培养体系。方法:体外分离、扩增成人骨髓MSC,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达。采用基础诱导培养液[地塞米松、β-甘油磷酸钠、L-抗坏血酸加不同浓度的重组人转化生长因子-β1(recombinanthumantransforminggrowthfactor-beta1,rhTGF-β1)]诱导成人骨髓MSC体外分化为成骨细胞。利用倒置光学显微镜、透射电镜、四甲基偶氮唑盐(MTT)比色、碱性磷酸酶(ALP)染色、ALP活性测定等方法研究成人骨髓MSC增殖和分化情况。结果:成人骨髓MSC的增殖和分化作用和rhTGF-β1有剂量依赖关系,低浓度时促进增殖,高浓度抑制增殖,5μg/L浓度达到高峰,其浓度升高促进MSC分化。结论:含有rhTGF-β15μg/L的基础诱导培养液是理想且有临床实用价值的成人骨髓间充质干细胞体外诱导为成骨细胞的培养体系。 展开更多
关键词 成人 骨髓 间充质干细胞 成骨细胞
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大鼠骨髓基质细胞促进自体骨形成的实验研究 被引量：1
4
作者 王芳 杨关鑫 赵玉红 《口腔医学》 CAS 2013年第6期371-375,共5页
目的研究自体骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)体外诱导扩增与仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架材料(nano chitosan sodium collagen scaffold,NCSCS)复合修复骨缺损的可行性。方法分离纯化Wistar大鼠BMSCs,诱导BM-SCs向成骨... 目的研究自体骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)体外诱导扩增与仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架材料(nano chitosan sodium collagen scaffold,NCSCS)复合修复骨缺损的可行性。方法分离纯化Wistar大鼠BMSCs,诱导BM-SCs向成骨细胞(osteoblast,OB)转化,经碱性磷酸酶、茜素红组织化学染色鉴定,将BMSCs复合仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架材料(nano chitosan sodium collagen scaffold,NCSCS)进行扫描电镜观察。制作Wistar大鼠胫骨骨缺损模型,缺损处NCSCS-BMSCs复合物移植后观察骨缺损修复成骨情况。结果扫描电镜下BMSCs细胞在仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架材料上大面积生长。BMSCs复合仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架材料植入2周后,材料周围可见大量纤维组织,并可见成骨细胞和少量新生的骨样基质,新生骨对照组和实验组比较差异显著(P<0.01);植入6周后,可见到材料与新生骨之间相互混杂,中有纤维相间隔,和原有骨界面尚清晰可辨认,材料部分降解,对照组和实验组比较新生骨有统计学差异(P<0.05);植入12周后,材料几乎降解完全,和天然骨组织界面可见新骨形成,对照组和实验组比较新骨形成无统计学差异(P>0.05)。材料降解在各时间段对照组和实验组比较差别不显著(P>0.05)。结论 BMSCs介导NCSCS修复骨缺损优于单纯的NCSCS修复骨缺损,尤以早期效果为好。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架 骨缺损 大鼠
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阿米福汀对甲氨蝶呤诱导细胞凋亡的保护作用 被引量：1
5
作者 李欣 金润铭 黄仕龙 《临床血液学杂志》 CAS 2007年第4期237-238,共2页
目的：研究体外培养条件下阿米福汀对甲氨蝶呤诱导正常骨髓单个核细胞凋亡的影响，探讨阿米福汀对甲氨蝶呤导致骨髓抑制的保护作用。方法：将24例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿分离骨髓单个核细胞，分为空白对照组、甲氨蝶呤组、... 目的：研究体外培养条件下阿米福汀对甲氨蝶呤诱导正常骨髓单个核细胞凋亡的影响，探讨阿米福汀对甲氨蝶呤导致骨髓抑制的保护作用。方法：将24例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿分离骨髓单个核细胞，分为空白对照组、甲氨蝶呤组、阿米福汀组、阿米福汀加甲氨蝶呤组，在不同时间点采用形态学观察法，DNA琼脂糖凝胶电泳，流式细胞术检测细胞凋亡的情况。结果：培养8、12、24、48h，甲氨蝶呤组均可见大量的凋亡细胞，阿米福汀加甲氨蝶呤组凋亡细胞明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：阿米福汀能抑制甲氨蝶呤诱导的正常骨髓单个核细胞凋亡，减少坏死。 展开更多
关键词 阿米福汀 甲氨蝶呤 骨髓 细胞凋亡
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(±) Bay K8644提高衰老大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化能力的研究
6
作者 王斯 周翠平 王敬君 《河北医药》 CAS 2015年第18期2738-2741,共4页
目的探讨(±)Bay K8644对衰老的大鼠(24 m)来源的骨髓间充质干细胞(Aging bone marrow stromal cells,Aging-BMSCs)的骨向分化能力的影响。方法通过全骨髓贴壁培养法获得大鼠BMSCs,使用β-半乳糖苷酶染色方法鉴定细胞的衰老状态,随... 目的探讨(±)Bay K8644对衰老的大鼠(24 m)来源的骨髓间充质干细胞(Aging bone marrow stromal cells,Aging-BMSCs)的骨向分化能力的影响。方法通过全骨髓贴壁培养法获得大鼠BMSCs,使用β-半乳糖苷酶染色方法鉴定细胞的衰老状态,随后应用(±)Bay K8644对细胞进行干预。以干性标志物Nanog为靶点,通过实时定量PCR筛选出(±)Bay K8644作用的最佳浓度,随后对细胞进行成骨分化诱导,并检测细胞在药物干预下的骨向分化能力的改变。在诱导第14天后对成骨分化标志酶碱性磷酸酶进行染色及活性测定、第21天后进行茜素红染色。结果(±)Bay K8644明显的降低了Aging-BMSCs细胞内β-半乳糖苷酶的含量(P<0.05),同时干细胞的干性标记物Nanog的表达明显提升(P<0.05)。对细胞进行成骨分化诱导后,成骨分化标志基因表达上调,ALP、茜素红染色的结果提示实验组骨向分化水平明显较对照组提升(P<0.05)。结论 (±)Bay K8644能够明显改善衰老骨髓间充质干细胞的衰老状态,并使其骨向分化的能力得到提升。 展开更多
关键词 (±)Bay K8644 衰老 成骨分化 小分子化合物
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