α-葡萄糖苷酶是治疗糖尿病与肥胖症的关键靶标酶,抑制其活性可有效实现治疗作用。为高效发掘天然产物中靶向α-葡萄糖苷酶的抑制剂,该研究采用磁性纳米颗粒与α-葡萄糖苷酶结合的策略,选择性捕获潜在生物活性化合物,并利用超高效液相色...α-葡萄糖苷酶是治疗糖尿病与肥胖症的关键靶标酶,抑制其活性可有效实现治疗作用。为高效发掘天然产物中靶向α-葡萄糖苷酶的抑制剂,该研究采用磁性纳米颗粒与α-葡萄糖苷酶结合的策略,选择性捕获潜在生物活性化合物,并利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole-time-of-flight tandem mass spectrometry,UHPLC-Q-TOF/MS)对捕获成分进行快速鉴定。通过单因素试验确定,当戊二醛体积分数为15%、α-葡萄糖苷酶浓度为7 U/mL、固定反应时间为4 h时,固定化酶的相对活性达最大值。基于优化后的固定化酶体系,经UHPLC-Q-TOF/MS鉴定从青钱柳(Cyclocarya paliurus)提取物中筛选出14种化合物,其中10种活性成分对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,各活性化合物和阿卡波糖IC_(50)值如下:异绿原酸A(870.3μg/mL)、杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷(123.9μg/mL)、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷(587.2μg/mL)、槲皮苷(320.9μg/mL)、杨梅素(25.7μg/mL)、金丝桃苷(394.1μg/mL)、阿福豆苷(272.7μg/mL)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(524.9μg/mL)、山柰酚(21.6μg/mL)、槲皮素(31.0μg/mL)和阿卡波糖(0.62μg/mL)。结果表明,固定化酶技术在药用植物潜在治疗化合物的高效发掘中具有重要应用前景。展开更多
目的建立金匮要略经典活血化瘀方剂(桂枝茯苓丸、桃核承气汤)的多指标成分定性定量分析方法,系统解析其化学成分特征。方法采用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/M...目的建立金匮要略经典活血化瘀方剂(桂枝茯苓丸、桃核承气汤)的多指标成分定性定量分析方法,系统解析其化学成分特征。方法采用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS),结合化学对照品比对,对两首方剂的水提物进行成分分离与鉴定;并通过单因素实验优化提取条件(乙醇浓度、料液比、提取时间),最终建立同时测定10种标志性成分(芍药苷、丹皮酚、桃仁苷、大黄素、大黄酚、芒硝、桂皮醛、茯苓酸、甘草酸铵、阿魏酸)的UPLC-MS/MS定量方法,进行方法学验证(专属性、线性、精密度、稳定性、加样回收率)。结果优化的提取条件为70%乙醇、料液比1:20(g/mL)、回流提取1.5 h;建立的UPLC-MS/MS方法在30 min内完成10种成分分离,相关系数(r2)≥0.999,相对标准偏差(relative standard deviation,RSDs)≤1.8%,稳定性RSDs≤2.5%,加样回收率96.2%~103.5%(RSDs≤2.1%);桂枝茯苓丸中芍药苷(12.34±0.56)mg/g、丹皮酚(8.72±0.31)mg/g含量较高,桃核承气汤中大黄素(5.67±0.28)mg/g、大黄酚(3.89±0.17)mg/g占主导,两方成分差异与组方配伍密切相关。结论所建方法准确、高效,可系统表征金匮要略活血化瘀方剂的化学成分,为其质量评价及临床应用提供科学依据。展开更多
文摘α-葡萄糖苷酶是治疗糖尿病与肥胖症的关键靶标酶,抑制其活性可有效实现治疗作用。为高效发掘天然产物中靶向α-葡萄糖苷酶的抑制剂,该研究采用磁性纳米颗粒与α-葡萄糖苷酶结合的策略,选择性捕获潜在生物活性化合物,并利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole-time-of-flight tandem mass spectrometry,UHPLC-Q-TOF/MS)对捕获成分进行快速鉴定。通过单因素试验确定,当戊二醛体积分数为15%、α-葡萄糖苷酶浓度为7 U/mL、固定反应时间为4 h时,固定化酶的相对活性达最大值。基于优化后的固定化酶体系,经UHPLC-Q-TOF/MS鉴定从青钱柳(Cyclocarya paliurus)提取物中筛选出14种化合物,其中10种活性成分对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,各活性化合物和阿卡波糖IC_(50)值如下:异绿原酸A(870.3μg/mL)、杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷(123.9μg/mL)、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷(587.2μg/mL)、槲皮苷(320.9μg/mL)、杨梅素(25.7μg/mL)、金丝桃苷(394.1μg/mL)、阿福豆苷(272.7μg/mL)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(524.9μg/mL)、山柰酚(21.6μg/mL)、槲皮素(31.0μg/mL)和阿卡波糖(0.62μg/mL)。结果表明,固定化酶技术在药用植物潜在治疗化合物的高效发掘中具有重要应用前景。
文摘目的建立金匮要略经典活血化瘀方剂(桂枝茯苓丸、桃核承气汤)的多指标成分定性定量分析方法,系统解析其化学成分特征。方法采用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS),结合化学对照品比对,对两首方剂的水提物进行成分分离与鉴定;并通过单因素实验优化提取条件(乙醇浓度、料液比、提取时间),最终建立同时测定10种标志性成分(芍药苷、丹皮酚、桃仁苷、大黄素、大黄酚、芒硝、桂皮醛、茯苓酸、甘草酸铵、阿魏酸)的UPLC-MS/MS定量方法,进行方法学验证(专属性、线性、精密度、稳定性、加样回收率)。结果优化的提取条件为70%乙醇、料液比1:20(g/mL)、回流提取1.5 h;建立的UPLC-MS/MS方法在30 min内完成10种成分分离,相关系数(r2)≥0.999,相对标准偏差(relative standard deviation,RSDs)≤1.8%,稳定性RSDs≤2.5%,加样回收率96.2%~103.5%(RSDs≤2.1%);桂枝茯苓丸中芍药苷(12.34±0.56)mg/g、丹皮酚(8.72±0.31)mg/g含量较高,桃核承气汤中大黄素(5.67±0.28)mg/g、大黄酚(3.89±0.17)mg/g占主导,两方成分差异与组方配伍密切相关。结论所建方法准确、高效,可系统表征金匮要略活血化瘀方剂的化学成分,为其质量评价及临床应用提供科学依据。
