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蚊虫抗菌肽的演化特征及其在唾液腺中的表达模式分析
1
作者 吴晋渝 曹智萌 +7 位作者 张世燕 闫恒宇 付文博 周操 CHAKRABORTY Amrita 陈斌 何正波 何树林 《昆虫学报》 北大核心 2025年第11期1521-1533,共13页
【目的】本研究旨在结合蚊虫抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)的演化特征及其在唾液腺中的表达模式,分析其在进化过程中的适应性变化。【方法】从VectorBase中检索10种蚊虫[4种属于库蚊亚科(Culicinae),6种属于按蚊亚科(Anophelina... 【目的】本研究旨在结合蚊虫抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)的演化特征及其在唾液腺中的表达模式,分析其在进化过程中的适应性变化。【方法】从VectorBase中检索10种蚊虫[4种属于库蚊亚科(Culicinae),6种属于按蚊亚科(Anophelinae)]的基因组和4类AMP(gambicin,attacin,cecropin和defensin)基因,完善蚊虫AMP基因库,利用最大似然法构建AMP系统发树;基于这些AMP的系统发育树利用Notung v2.9.1.5研究基因重复和基因缺失,利用MCScanx分析AMP基因共线性。使用HyPhy v2.5.62分析每个AMP基因的选择压力。利用公开数据库中唾液腺转录组数据,系统分析了这些AMP基因在唾液腺中的表达模式。【结果】不同蚊虫种AMP基因种类和数量存在明显差异。系统发育分析表明,AMP基因根据其分类学来源(库蚊亚科和按蚊亚科)在系统发育树上聚类,表明其氨基酸序列具有保守性,这一结果也得到了选择压力测试的支持。蚊虫的抗菌肽基因在进化过程中经历了多次的基因复制和丢失可能与宿主取食行为的变化有关。共线性分析结果表明,大多数蚊虫的AMP基因位于共线性区块内,进一步支持了AMP基因在蚊虫中的保守性。结合AMP基因在唾液腺中的表达模式、进化以及选择压力,推测cecropin的一个分支可能获得了新的功能。【结论】本研究揭示了蚊虫AMP基因的适应性,表明其与宿主选择和病原体感染密切相关。蚊虫AMP的进化特征和表达模式增强了其生存策略,并突显了其作为疾病传播能力关键因素的作用。这些发现为蚊虫免疫系统的分子适应性及其在病原体传播中的作用提供了新的见解。 展开更多
关键词 蚊虫 唾液腺 抗菌肽 基因复制 基因缺失 适应性进化
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Triton X-114萃取法去除脑膜炎球菌荚膜多糖中的内毒素 被引量：16
2
作者 王雪薇 王建华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期438-441,共4页
目的采用Triton X-114萃取法去除A群脑膜炎球菌荚膜多糖中的内毒素。方法1% Triton X-114与多糖溶液在0℃混合均匀,分别加热至25、37和56℃,观察分层情况。离心后收集上层水相,对其中残余萃取剂Triton X-114进行去除方法的选择。比较多... 目的采用Triton X-114萃取法去除A群脑膜炎球菌荚膜多糖中的内毒素。方法1% Triton X-114与多糖溶液在0℃混合均匀,分别加热至25、37和56℃,观察分层情况。离心后收集上层水相,对其中残余萃取剂Triton X-114进行去除方法的选择。比较多糖浓度对萃取的影响及二次萃取的效果,并对终产物进行全面检定。对W135群和Y群脑膜炎球菌多糖进行萃取效果比较。结果最终选择56℃10min作为升温条件,3000r/min离心10min后,上清中多糖的内毒率含量均减少85%以上,多糖回收率不低于80%。残余的Triton X-114选择透析法去除。多糖浓度越低,越易于萃取。二次萃取多糖回收率大于85%。内毒素含量可降低至0.706EU/μg多糖。经检测,终产物多糖的相对分子质量未发生改变,免疫原性与萃取前差异无显著意义,异常毒性、多糖及内毒素含量合格。蛋白含量稍有增加,核酸含量降低。W135群和Y群脑膜炎球菌多糖的萃取结果与A群多糖相似。结论Triton X-114萃取法可以用于去除脑膜炎球菌多糖中的内毒素。 展开更多
关键词 脑膜炎球菌 荚膜多糖 内毒素 萃取 TRITON X-114
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7种鳞翅目昆虫细胞系染色体分析 被引量：3
3
作者 张欣 冯颖 +2 位作者 丁伟峰 马涛 马艳 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2008年第4期493-499,共7页
采用直接法制备传代细胞染色体标本、常规G iem sa染色、显微镜下计数中期分裂相染色体数目的方法对7种鳞翅目昆虫细胞系进行了染色体分析,得出了各种细胞系染色体分析所需要的秋水仙素浓度与处理时间以及低渗浓度和处理时间的范围;7种... 采用直接法制备传代细胞染色体标本、常规G iem sa染色、显微镜下计数中期分裂相染色体数目的方法对7种鳞翅目昆虫细胞系进行了染色体分析,得出了各种细胞系染色体分析所需要的秋水仙素浓度与处理时间以及低渗浓度和处理时间的范围;7种鳞翅目细胞系染色体均表现出典型的鳞翅目昆虫传代细胞的核型特征:染色体数目众多,异倍化严重,多为弥散型的着丝粒的短杆状、颗粒状、点状或圆球状。 展开更多
关键词 鳞翅目 细胞系 染色体 核型 异倍化
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代谢工程改造大肠杆菌利用脂肪酸合成己二酸 被引量：2
4
作者 李洋 闫亚楠 +4 位作者 赵春雷 郭亮 高聪 刘立明 陈修来 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期16-28,共13页
己二酸作为生产尼龙、化纤和工程塑料等聚合物的单体,在食品、医药、塑料和化工行业具有广泛的应用。目前,己二酸的生物合成主要利用可食用原料,碳原子损失较多,造成己二酸产率较低。为解决上述问题,设计和重构以脂肪酸为原料的己二酸... 己二酸作为生产尼龙、化纤和工程塑料等聚合物的单体,在食品、医药、塑料和化工行业具有广泛的应用。目前,己二酸的生物合成主要利用可食用原料,碳原子损失较多,造成己二酸产率较低。为解决上述问题,设计和重构以脂肪酸为原料的己二酸合成新路径,提高己二酸的理论得率;其次,强化本源的β-氧化路径和引入异源的ω-氧化路径;增强细胞对脂肪酸的利用能力;再次,借助系统代谢工程策略,进一步优化己二酸合成路径。最后,经发酵条件优化,最优工程菌Escherichia coli AA0304能够产生1.32 g/L己二酸。上述研究结果为利用废弃脂肪酸类化合物生产高价值化学品奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 代谢工程 β-氧化路径 ω-氧化路径 棕榈酸 大肠杆菌 己二酸
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菜青虫细胞体外诱导产生抗菌肽初报 被引量：1
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作者 乔媛媛 姚汉超 +4 位作者 李波清 甘小红 刘丽君 彭建新 洪华珠 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2007年第4期592-596,共5页
利用灭活的大肠杆菌诱导昆虫离体细胞Pr-49和Tn-5B1细胞,对诱导产物进行抑菌试验,结果显示形成了明显的抑菌圈,Tricine-SDS-PAGE分析,Pr-49细胞诱导后多出了1条分子量约7 000新的蛋白带,而且至少有3条加强蛋白带.诱导Tn-5B1细胞发现多出... 利用灭活的大肠杆菌诱导昆虫离体细胞Pr-49和Tn-5B1细胞,对诱导产物进行抑菌试验,结果显示形成了明显的抑菌圈,Tricine-SDS-PAGE分析,Pr-49细胞诱导后多出了1条分子量约7 000新的蛋白带,而且至少有3条加强蛋白带.诱导Tn-5B1细胞发现多出2条蛋白带,其中1条分子量为已证实的7 691,通过直接取浓缩上清诱导物对比浓缩上清和细胞混合物的电泳分析,新的蛋白条带为分泌型物质.初步断定离体培养的Pr-49细胞和Tn-5B1细胞经灭活的大肠杆菌诱导分泌了具有抗菌活性的物质. 展开更多
关键词 离体细胞 转瓶 抗菌肽 抑菌圈 Tricine-SDS-PAGE
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东亚钳蝎昆虫毒素BmKIT的cDNA序列分析 被引量：8
6
作者 梁爱华 李晓玲 +2 位作者 苏智广 王伟 孙毅 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第6期12-15,共4页
利用ＲＴ－ＰＣＲ方法从东亚钳蝎（ＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉＫａｒｓｃｈ，ＢｍＫ）的尾腺总ＲＮＡ中扩增出挛缩型昆虫毒素ＢｍＫＩＴ的ｃＤＮＡ，并对其核苷酸序列进行了分析。将含该基因的重组分泌型表达质粒ｐＥｘＳｅｃＩ－Ｂ... 利用ＲＴ－ＰＣＲ方法从东亚钳蝎（ＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉＫａｒｓｃｈ，ＢｍＫ）的尾腺总ＲＮＡ中扩增出挛缩型昆虫毒素ＢｍＫＩＴ的ｃＤＮＡ，并对其核苷酸序列进行了分析。将含该基因的重组分泌型表达质粒ｐＥｘＳｅｃＩ－ＢｍＫＩＴ转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３），表达出分泌型的融合蛋白。 展开更多
关键词 东亚钳蝎 昆虫毒素 基因克隆 CDNA 核苷酸序列
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微小亚历山大藻投喂量与菲律宾蛤仔对麻痹性贝毒累积、转化和排出的动态关系 被引量：3
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作者 焦玥 田华 +1 位作者 王宗灵 高春蕾 《海洋科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期216-223,共8页
选用高毒性微小亚历山大藻台湾株和菲律宾蛤仔为研究对象,研究了不同毒藻投喂量对贝类累积和排出麻痹性贝毒(PSP)的影响。实验分为累积和排出2个部分,累积实验设计了4个投喂梯度(A组:2.0×107cell/d、B组:7.0×107cell/d、C组:1... 选用高毒性微小亚历山大藻台湾株和菲律宾蛤仔为研究对象,研究了不同毒藻投喂量对贝类累积和排出麻痹性贝毒(PSP)的影响。实验分为累积和排出2个部分,累积实验设计了4个投喂梯度(A组:2.0×107cell/d、B组:7.0×107cell/d、C组:1.1×108cell/d和D组:2.0×108cell/d),在排出毒素阶段,每实验组又分成投喂无毒饵料藻组和饥饿组并进行比较。结果显示不同投喂梯度组间PSP毒素累积存在明显差异。随着毒藻投喂量的增加,PSP毒性增加,但毒素累积率下降,这说明在一定范围内毒藻投喂量的大小对蛤仔的毒素累积有影响。A组、B组、C组的最高累积量依次为6.5,82.9,113.9μgSTXeq/100g,D组达到本实验的最高累积量154.1μgSTXeq/(100g),但累积率却随着投喂量的增加而递减,分别为1.79%,0.92%,0.42%和0.39%。停止投喂毒藻后蛤仔体内的PSP毒性迅速下降,在排出阶段,对投喂饵料组和饥饿组的比较结果用单因素方差分析(ANOVA)得出P<0.05,结果差异显著,饥饿组的毒性均高于投喂饵料藻组,说明投喂无毒饵料有助于菲律宾蛤仔体内的毒素排出。其中D饵料组和饥饿组间排出速率差异最明显,饵料组的排出速率为13.2μgSTXeq/(100g.d),饥饿组的仅为8.3μgSTXeq/(100g.d),因此将菲律宾蛤仔归属于快速排毒者。 展开更多
关键词 麻痹性贝毒(PSP) 菲律宾蛤仔 累积 排出 转化
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大腹园蛛对小鼠的急毒和亚急毒作用 被引量：2
8
作者 韩旭 费虹天 +4 位作者 姜明明 董笑赢 郑菲 陶冶 费瑞 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期124-127,共4页
按我国《食品安全性毒理学评价程序和方法》的要求,采用健康昆明小鼠,以灌胃染毒方法进行了大腹园蛛急性毒性、最大耐受剂量和亚急性毒性实验.结果表明:大腹园蛛粉对小鼠的半数致死量大于15g/kg.根据国际卫生组织的标准判定,该大腹园蛛... 按我国《食品安全性毒理学评价程序和方法》的要求,采用健康昆明小鼠,以灌胃染毒方法进行了大腹园蛛急性毒性、最大耐受剂量和亚急性毒性实验.结果表明:大腹园蛛粉对小鼠的半数致死量大于15g/kg.根据国际卫生组织的标准判定,该大腹园蛛的毒性分级为无毒.亚急毒实验显示,大腹园蛛组与对照组相比,体重和脏器系数变化及血液和生化指标均无明显差异,表明大腹园蛛粉属于无毒物质,这为大腹园蛛的活性开发奠定了基础. 展开更多
关键词 大腹园蛛 急毒 亚急毒
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