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淡水鱼养殖场主要病原菌耐药性及全基因组特征研究
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作者 刘海燕 林枞 +1 位作者 陶未来 张安云 《四川大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第2期457-465,共9页
为揭示淡水鱼重要病原菌的流行、耐药、毒力特征及系统发育关系,本研究采用分离培养和全基因组测序技术,对四川省乐山和眉山市13个淡水鱼养殖场的病鱼样本中分离的重要病原菌进行了系统研究。通过细菌培养法对病原菌进行分离鉴定,采用K-... 为揭示淡水鱼重要病原菌的流行、耐药、毒力特征及系统发育关系,本研究采用分离培养和全基因组测序技术,对四川省乐山和眉山市13个淡水鱼养殖场的病鱼样本中分离的重要病原菌进行了系统研究。通过细菌培养法对病原菌进行分离鉴定,采用K-B纸片扩散法测定其对抗菌药物的敏感性,结合全基因组测序技术分析其耐药基因、毒力因子、多位点序列分型及系统发育关系。结果表明,共鉴定出52株气单胞菌、3株邻单胞菌、5株爱德华氏菌和4株弧菌;病原菌对亚胺培南、复方新诺明和诺氟沙星的耐药性较高,分别达到78.13%、46.88%和45.31%,此外,42.19%的病原菌表现出多重耐药性;在64株病原菌基因组中发现14种一级风险耐药基因(ARGs)和7种二级风险ARGs,气单胞菌中注释到266种毒力因子,弧菌中注释到97种毒力因子;多基因位点序列分型(MLST)分析揭示了淡水鱼养殖场中病原菌的多样性,基于病原菌核心基因SNP构建系统发育树显示,来自不同养殖场的相同序列类型(ST)菌株聚集于同一分支,提示不同养殖场之间可能存在克隆传播和交叉污染的情况。本研究揭示了淡水鱼病原菌耐药性问题的严重性,并指出了克隆传播和交叉感染的可能,作为科学防控提供依据。 展开更多
关键词 淡水鱼养殖场 病原菌 耐药性 交叉感染
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皮氏不动杆菌LSQ 3对贝莱斯芽孢杆菌LSQ 19成膜能力的影响及其基因组特性分析
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作者 杨小宇 王志刚 +1 位作者 徐伟慧 旦真阿旺 《微生物学报》 北大核心 2026年第2期753-769,共17页
【目的】探究菌株皮氏不动杆菌(Acinetobacter pittii)LSQ 3对贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)LSQ 19成膜能力的影响,以及菌株LSQ 3的基因组特性。【方法】采用结晶紫染色法、细胞表面特性分析、苯酚硫酸法、XTT还原法和扫描电镜(s... 【目的】探究菌株皮氏不动杆菌(Acinetobacter pittii)LSQ 3对贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)LSQ 19成膜能力的影响,以及菌株LSQ 3的基因组特性。【方法】采用结晶紫染色法、细胞表面特性分析、苯酚硫酸法、XTT还原法和扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察等方法分析LSQ 3无细胞上清液(cell-free supernatant,CFS)对LSQ 19成膜能力的影响;采用全基因组学测序明确菌株LSQ 3的分类学地位,并通过全基因组数据预测其次级代谢产物基因簇。【结果】菌株LSQ 3的CFS显著抑制LSQ 19的生物膜形成,10μL菌液/190μL CFS混合确定为最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。与对照组相比,经菌株LSQ 3的CFS处理(MIC)后LSQ 19细胞的表面疏水性、黏附力、胞外聚合物(extracellular polymeric substances,EPS)产率和生物膜代谢活性均显著降低;自聚集能力与对照组相比显著升高。扫描电镜观察表明,在MIC条件下菌株LSQ 19在玻璃表面未形成生物膜。经全基因组学鉴定,菌株LSQ 3为Acinetobacter pittii,其基因组大小为3939365 bp,G+C含量为38.82%,含有3601个DNA编码序列。其基因组中存在多个与生物膜合成相关的基因及毒力因子。通过antiSMASH分析发,菌株LSQ 3的基因组中含有7种次级代谢物的生物合成基因簇。【结论】A.pittii LSQ 3的无细胞上清液可抑制B.velezensis LSQ 19生物膜的形成,本研究从生物膜的角度为合成菌群的构建提供了理论依据和参考。 展开更多
关键词 皮氏不动杆菌LSQ 3 贝莱斯芽孢杆菌LSQ 19 全基因组测序 无细胞上清液 生物膜形成
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基于比较基因组学对新疆不同地域人源长双歧杆菌长亚种的遗传差异分析
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作者 张慧敏 张雪玲 +1 位作者 孙海龙 倪永清 《微生物学报》 北大核心 2026年第1期301-321,共21页
【目的】以新疆不同地域、不同人群来源的长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum subsp.longum)为研究对象,解析肠道专性共栖细菌在宿主人群中的系统发育和基因组多样性,为针对不同人群开发个性化功能益生菌提供理论依据。【方法】... 【目的】以新疆不同地域、不同人群来源的长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum subsp.longum)为研究对象,解析肠道专性共栖细菌在宿主人群中的系统发育和基因组多样性,为针对不同人群开发个性化功能益生菌提供理论依据。【方法】从地理跨度较大的新疆喀什、伊犁的维吾尔族和哈萨克族母婴人群中分离出136株B.longum subsp.longum,并通过公共数据库整合来自国内其他地域人群的菌株进行比较基因组分析。【结果】B.longum subsp.longum基因组的平均大小、G+C含量、编码序列数量分别为2.38 Mb、59.91%、2160个。基于核心基因构建的系统发育树显示,来自新疆的所有菌株在系统发育树上属于4个进化支(clade),来自同一民族、不同地域人群的菌株其系统发育呈现不同的进化支,地理上更相近、不同人群来源的菌株存在一定程度的重叠。对更大地理范围(全中国)的分析显示,B.longum subsp.longum菌株呈现明显的东西部地理来源聚集特征和协同进化现象。基于附属基因和碳水化合物代谢功能基因的分析显示,来源于同一系统发育进化支的同一民族、不同地域人群菌株的功能基因谱丰度也差异较大;碳水化合物水解酶家族GH13(α-淀粉酶)和GH43(β-木糖苷酶)等在喀什地区菌株基因组中更为丰富;相反,地理上相近、即使来自不同民族人群的菌株,其基因组中蛋白质直系同源簇(cluster of orthologous groups of proteins,COG)功能基因谱、碳水化合物水解酶关联基因家族谱更相似。【结论】新疆不同地域人群来源的B.longum subsp.longum菌株系统发育呈现明显的地理和民族分布特征以及功能基因分布特征,地理尺度范围越大,菌株的地理分布特征越明显。需要基于更大范围菌株基因组的大数据进一步验证人群的地理分布尺度与菌株协同进化和特异性的关系。 展开更多
关键词 长双歧杆菌长亚种 比较基因组学 碳水化合物活性酶
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基于转录组学解析黑曲霉柠檬酸/苹果酸合成代谢机制
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作者 蔺旭刚 苏佳 +4 位作者 柴庆江 刘贵玉 相胜昌 王德培 薛鲜丽 《微生物学报》 北大核心 2026年第2期830-849,共20页
【目的】黑曲霉在pH≤5.0的条件下柠檬酸是主要代谢物,而在pH 6.0时L-苹果酸成为主要代谢物。通过转录组学分析代谢途径中关键基因的差异性,探究2种有机酸的生物合成机制。【方法】分别选取柠檬酸和L-苹果酸发酵过程48 h和72 h的菌体进... 【目的】黑曲霉在pH≤5.0的条件下柠檬酸是主要代谢物,而在pH 6.0时L-苹果酸成为主要代谢物。通过转录组学分析代谢途径中关键基因的差异性,探究2种有机酸的生物合成机制。【方法】分别选取柠檬酸和L-苹果酸发酵过程48 h和72 h的菌体进行转录组学分析。【结果】转录组比较分析(72 h vs.48 h)发现,GO富集分析结果显示合成柠檬酸的相关上调基因集中于碳水化合物代谢过程,而合成L-苹果酸的相关上调基因集中于离子转运过程。酸性蛋白水解酶ANI_1_62014(曲霉菌素II)和ANI_1_654124(天冬氨酸蛋白酶曲pepA)在柠檬酸合成过程中呈现极高的转录水平,而合成脂肪酸链的关键基因ANI_1_2494074[3-氧酰基-(酰基载体蛋白)合酶]和ANI_1_2488074(生物合成脂肪酸合酶亚基β)在L-苹果酸合成途径中呈现极高的转录水平;锌簇类转录因子[Zn(II)2 Cys6 transcription factor]在L-苹果酸合成过程中的转录水平更高;bZIP家族中的HacA、AP-1和AtfA在柠檬酸合成过程中呈现更高的转录水平,以应对环境低pH的抗逆性;与L-苹果酸发酵过程相比,柠檬酸发酵过程中ANI_1_66114(己糖激酶)、ANI_1_2950014(柠檬酸合酶)和ANI_1_478154(柠檬酸转运蛋白)或ANI_1_3136024(异柠檬酸脱氢酶)分别呈现较高或较低的转录水平。高效的糖酵解、柠檬酸合成和柠檬酸转运能力以及低异柠檬酸脱氢酶水平是柠檬酸大量生成的关键因素。在L-苹果酸发酵过程中,胞质ANI_1_440184(丙酮酸羧化酶)、胞质ANI_1_12134(苹果酸脱氢酶)、ANI_1_914104(异柠檬酸裂解酶)和ANI_1_2040144(苹果酸转运蛋白)呈现较高的转录水平,表明胞质rTCA途径和乙醛酸羧化途径是L-苹果酸合成的主要途径。【结论】本研究通过分析整合转录组数据,推测了生成柠檬酸和L-苹果酸的关键差异代谢通路,并筛选出显著差异表达的核心基因、转录因子及潜在转运蛋白。这些结果为解析柠檬酸与L-苹果酸合成的调控机制提供了重要线索和理论依据。 展开更多
关键词 黑曲霉 柠檬酸 L-苹果酸 转录组 差异基因
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基于转录组分析紫色红曲霉全局性转录调控因子McrA的功能
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作者 潘妍妍 杨季学 +2 位作者 于宗训 胡佳燕 蒋冬花 《微生物学报》 北大核心 2026年第1期284-300,共17页
红曲霉作为传统发酵食用菌因其丰富的次级代谢产物广泛应用于酿酒、食品着色剂和药品等行业。McrA是在构巢曲霉(Aspergillus nidulans)中发现的全局性转录调控因子,具有调控丝状真菌生长发育和次级代谢的作用。前期,实验室已找到并克隆... 红曲霉作为传统发酵食用菌因其丰富的次级代谢产物广泛应用于酿酒、食品着色剂和药品等行业。McrA是在构巢曲霉(Aspergillus nidulans)中发现的全局性转录调控因子,具有调控丝状真菌生长发育和次级代谢的作用。前期,实验室已找到并克隆了紫色红曲霉(Monascus purpureus)中的mcrA基因。【目的】基于转录组分析ΔmcrA和trpC:mcrA差异表达基因,探究mcrA基因的功能。【方法】利用同源重组的方法构建ΔmcrA和trpC:mcrA菌株,观察其在不同培养基上的菌落和显微形态,测定红曲色素和桔霉素产量,并进行转录组测序分析差异表达基因涉及的代谢通路。【结果】敲除株ΔmcrA的红曲色素和桔霉素产量下降。转录组测序结果显示,ΔmcrA菌株有111个基因上调,47个基因下调。ΔmcrA菌株差异基因涉及的代谢通路主要有糖酵解、丙酮酸代谢、脂肪酸合成、酪氨酸代谢等。trpC:mcrA菌株有1199个基因上调,867个基因下调。trpC:mcrA差异基因涉及的代谢通路主要有色氨酸代谢、蔗糖和淀粉代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、脂肪酸降解等。【结论】McrA作为全局性转录调控因子,敲除和过表达会影响糖类、脂质、氨基酸相关代谢通路,进而影响次级代谢产物产量。 展开更多
关键词 紫色红曲霉 全局性转录调控因子McrA 次级代谢产物 调控基因
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可编程反义寡聚物介导的基因沉默-用于噬菌体功能基因组研究
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作者 李钧豪 李淑艳 《生理科学进展》 北大核心 2026年第1期100-100,共1页
噬菌体具有广泛的遗传和表型多样性。在噬菌体与宿主互作中,有哪些基因参与并对这些基因进行定位与表征,是理解噬菌体特性、挖掘其应用价值的关键。最近,Gerovac等在《Nature》上发表了可用于噬菌体功能基因组研究、可编程的外源递送反... 噬菌体具有广泛的遗传和表型多样性。在噬菌体与宿主互作中,有哪些基因参与并对这些基因进行定位与表征,是理解噬菌体特性、挖掘其应用价值的关键。最近,Gerovac等在《Nature》上发表了可用于噬菌体功能基因组研究、可编程的外源递送反义寡聚物(antisense oligomers,ASOs)的文章,作者通过该方法系统地靶向抑制噬菌体mRNA的翻译,并结合表型、转录组和蛋白质组分析,发现了ΦKZ噬菌体中调控复制周期的新的蛋白质,其中包括一个保守的RNA酶H样蛋白-ΦKZ155蛋白(也称为Nlp2),它在ΦKZ噬菌体基因组扩增前的一个关键决策点发挥作用。 展开更多
关键词 反义寡聚物 功能基因组 RNA酶H样蛋白 基因沉默
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圈养野生动物源产气荚膜梭菌分离株的MLST分型及毒力基因分析
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作者 徐春忠 徐锋 王建 《野生动物学报》 北大核心 2025年第3期674-680,共7页
为了解上海地区动物园流行的产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的ST型,探讨其可能的遗传进化关系和潜在致病性,通过细菌基因组框架图测序对10株产气荚膜梭菌进行回顾性研究,对菌株MLST分型和致病性进行分析。结果显示:10株菌均为A... 为了解上海地区动物园流行的产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的ST型,探讨其可能的遗传进化关系和潜在致病性,通过细菌基因组框架图测序对10株产气荚膜梭菌进行回顾性研究,对菌株MLST分型和致病性进行分析。结果显示:10株菌均为A型产气荚膜梭菌,分属于6个新的ST型,并携带有大量的毒力基因,包括plc(α毒素)、pfoA(θ毒素)等16种主要的毒力因子,以及hlyⅢ、hlyB等22种可能来源于其他菌属的毒力基因。研究发现,动物园的产气荚膜梭菌以A型为主,但存在遗传多样性、宿主多样性等特点,同时携带大量的毒力因子对人和动物均存在较大的风险。 展开更多
关键词 动物园 产气荚膜梭菌 多位点序列分型 致病性
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弧菌基因组中抗噬菌体防御系统的构成与分布特征分析
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作者 徐雪峰 金兴坤 +1 位作者 史燕 赵哲 《遗传》 北大核心 2025年第9期1057-1068,共12页
细菌与其病毒(噬菌体)的长期共同演化推动了抗噬菌体防御系统的多样化发展。弧菌属细菌作为海洋生态系统的重要成员,具有庞大且复杂的基因组。为揭示弧菌属成员基因组中抗噬菌体防御系统的构成及分布特征,本研究从GTDB、NCBI数据库中收... 细菌与其病毒(噬菌体)的长期共同演化推动了抗噬菌体防御系统的多样化发展。弧菌属细菌作为海洋生态系统的重要成员,具有庞大且复杂的基因组。为揭示弧菌属成员基因组中抗噬菌体防御系统的构成及分布特征,本研究从GTDB、NCBI数据库中收集了242个弧菌属代表性基因组,利用Defense Finder等生物信息学工具对其编码的抗噬菌体防御系统进行分析,共鉴定出108种不同的抗噬菌体防御系统,包括GAPS系统、dGTPase系统、RM系统等。不同弧菌菌株的防御能力存在显著差异:5个菌株编码超过20种防御系统,显示出较高的防御潜力;超过30个菌株仅编码5种或更少的防御系统;特别是在‘Vibrio katoptron’中未发现任何已知的防御系统。不同弧菌分支的防御系统多样性也存在差异,其中Cholerae分支的防御系统多样性(防御熵)最高。此外,对这些防御系统的组成、结构及功能机制进行了深入分析。弧菌属细菌拥有复杂多样的抗噬菌体防御系统,但许多系统的具体功能尚未明确。由于弧菌基因组的复杂性,未来仍有许多潜在的防御系统有待发现。本研究系统揭示了弧菌属防御系统的基因组结构特征,为深入探索弧菌与噬菌体的相互作用及其演化动态提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 弧菌 噬菌体 抗噬菌体防御系统 微生物相互作用 生物信息学分析
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转录组分析凝结芽孢杆菌二次生长调控因素
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作者 陈琛 刘慧贤 +3 位作者 魏丽雅 黄亚男 陈雄 王志 《工业微生物》 2025年第6期140-148,共9页
为研究凝结芽孢杆菌HB发酵二次生长的调控因素,文章基于转录组水平分析了HB在30 L发酵罐培养对数期(9 h)与稳定期(17 h)的代谢差异。结果表明,该菌稳定期氧化应激和能量代谢基因spxH、katA、bsh、poxB、grx、ahpC、recA、dps、cyd A、n... 为研究凝结芽孢杆菌HB发酵二次生长的调控因素,文章基于转录组水平分析了HB在30 L发酵罐培养对数期(9 h)与稳定期(17 h)的代谢差异。结果表明,该菌稳定期氧化应激和能量代谢基因spxH、katA、bsh、poxB、grx、ahpC、recA、dps、cyd A、namA下调2.85~33.36倍;乙醛酸循环基因ace A、ace B分别上调6.14、3.07倍;三羧酸循环(TCA)关键酶基因ic d、acnA分别下调2.14、2.21倍。同时,磷酸转运基因pstB1、pstB2、pstA、pstC、pstS在稳定期上调48.84~290.02倍;磷壁酸合成基因tag F、tag A、tag B下调5.70~104.69倍;脯氨酸转运和分解代谢基因opuCA、putB、roc A上调2.71~3.42倍。脂肪酸β-氧化基因dhaS、acdh、fadA、mmg A稳定期上调2.01~37.79倍。RT-qPCR对关键基因表达差异进行了验证,发现dps、putB、pstS和acsA上调2.8~5.9倍;ac n A、cydA和tag A基因下调6.6~62.7倍,与转录组差异分析一致。这表明,细胞通过氧化应激途径、脂肪酸代谢途径、乙醛酸循环、脯氨酸转运和代谢途径、磷转运代谢途径的适应性调控支撑自身二次生长。研究结果为凝结芽孢杆菌工业化生产提供了理论支撑。 展开更多
关键词 凝结芽孢杆菌 细胞生长 代谢 转录组 RT-QPCR
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急性氨影响副溶血弧菌的基因表达谱
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作者 王健 罗茜 +2 位作者 李雪 张义全 陆仁飞 《南通大学学报(医学版)》 2025年第4期362-369,共8页
目的:探究急性氨对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)基因表达和功能表型的影响。方法:以未添加NH4Cl的培养条件为对照组,添加了终质量浓度为71.68 mg/L NH4Cl(模拟急性氨)的培养条件为实验组,采用RNA-seq技术检测VP的基因表达情... 目的:探究急性氨对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)基因表达和功能表型的影响。方法:以未添加NH4Cl的培养条件为对照组,添加了终质量浓度为71.68 mg/L NH4Cl(模拟急性氨)的培养条件为实验组,采用RNA-seq技术检测VP的基因表达情况。同时,采用结晶紫染色、动力表型检测以及环二鸟苷酸(cyclic diguanylate,c-di-GMP)含量测定等一系列表型实验,分析急性氨对VP功能表型的影响。结果:急性氨共导致661个基因的转录水平发生显著改变,包括379个下调基因和282个上调基因,这些基因主要集中于细胞代谢通路,特别是与氨基酸转运与代谢、能量产生与转换密切相关的基因。此外,急性氨还对一些生物膜形成相关基因、c-di-GMP代谢相关基因、鞭毛基因以及一些关键毒力因子基因的转录发挥调控作用。然而,对于这些基因所对应的功能表型,急性氨却未表现出调控作用。结论:急性氨能够引发VP中大量基因的转录,尤其是代谢相关的基因,但它对生物膜形成、ci-di-GMP代谢以及运动性等功能表型无调控作用。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 急性氨 RNA-SEQ 基因表达 功能表型
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微生物细胞代谢与环境适应调控研究进展 被引量:3
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作者 刘源 胡贵鹏 +3 位作者 李晓敏 刘佳 高聪 刘立明 《生物工程学报》 北大核心 2025年第3期1133-1151,共19页
感应代谢与环境变化并做出自适应调控是细胞生命活动的关键。近年来,随着合成生物学技术的进步,越来越多的细胞感知代谢和环境差异的机制被揭示,同时相关应用也日益广泛。然而,目前缺乏关于细胞代谢与环境适应调控的研究的系统性综述。... 感应代谢与环境变化并做出自适应调控是细胞生命活动的关键。近年来,随着合成生物学技术的进步,越来越多的细胞感知代谢和环境差异的机制被揭示,同时相关应用也日益广泛。然而,目前缺乏关于细胞代谢与环境适应调控的研究的系统性综述。本文介绍了细胞感知代谢和环境差异的关键跨膜蛋白及感应蛋白;总结了细胞在应对胞内外代谢差异时的天然自适应调控机制;从动态调控、理性代谢工程改造和适应性进化这3个方面探讨了基于细胞自适应调控的应用场景,并展望未来的发展方向。本文不仅为细胞感知代谢和环境变化的机制研究提供了系统性视角,还为合成生物学领域的进一步创新应用奠定了理论基础。随着未来技术的不断发展,深入理解细胞自适应调控机制有望推动新型生物制造平台的开发与应用。 展开更多
关键词 细胞 感应 代谢 环境 自适应调控
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高产单宁酶黑曲霉菌株的常温常压等离子体诱变选育及发酵工艺研究 被引量:2
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作者 马东旭 李忠辉 +3 位作者 张子恒 王昕 龚大春 石小涛 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第12期115-122,共8页
单宁酶是水解单宁物质的生物催化剂,被广泛应用于食品、饮料、医药行业。黑曲霉作为生产单宁酶的重要微生物,需要通过菌种选育和发酵工艺优化进一步提升产酶量,以满足日益增长的应用需求。结果表明,初始菌株黑曲霉(Aspergillus niger)L... 单宁酶是水解单宁物质的生物催化剂,被广泛应用于食品、饮料、医药行业。黑曲霉作为生产单宁酶的重要微生物,需要通过菌种选育和发酵工艺优化进一步提升产酶量,以满足日益增长的应用需求。结果表明,初始菌株黑曲霉(Aspergillus niger)LH进行常温常压等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)诱变的最佳条件为孢子浓度3×10^(6) CFU/mL、诱变功率100 W、气量10 L/min、间距2 mm、诱变时间240 s。经平板显色初步筛选得到49株诱变菌,并通过摇瓶发酵复筛,得到产酶稳定的突变株LH2301,其单宁酶的酶活力达到2.292 U/mL,比出发菌株提高了2.27倍,具有良好的遗传稳定性。通过正交试验得到最优培养条件为5 g/L葡萄糖,21 g/L酵母浸粉,初始pH 4.0,接种量为3.5%,单宁酸质量浓度为20 g/L,酶活力水平可提升至6.105 U/mL。对诱变株所产单宁酶进行了初步表征,其分子质量为90 kDa,当温度处于40~50℃,pH值为3.0~5.0时,该酶展示出良好的催化活性;该酶的最适温度为50℃,最适pH值为4.0,金属离子Ca^(2+)、K^(+)、Al^(3+)对其酶活力有促进作用。该研究丰富了单宁酶的微生物菌种资源,为单宁酶的工业化应用研究提供了基础。 展开更多
关键词 黑曲霉 单宁酶 常温常压等离子体诱变 发酵 酶学性质
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sigW与rsiW失活对沙福芽孢杆菌ST7耐锰能力的影响 被引量:1
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作者 方争林 王嘉福 +1 位作者 冉雪琴 牛熙 《微生物学通报》 北大核心 2025年第3期1323-1336,共14页
【背景】前期转录组学研究提示RNA聚合酶σ因子W(sigma factor W,SigW)和反σ因子W(anti-sigma factor W,RsiW)可能参与沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)锰胁迫应激途径。【目的】研究sigW和rsiW基因缺失对沙福芽孢杆菌ST7的运动能力、... 【背景】前期转录组学研究提示RNA聚合酶σ因子W(sigma factor W,SigW)和反σ因子W(anti-sigma factor W,RsiW)可能参与沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)锰胁迫应激途径。【目的】研究sigW和rsiW基因缺失对沙福芽孢杆菌ST7的运动能力、生物膜形成能力和锰氧化能力的影响。【方法】以沙福芽孢杆菌ST7为研究对象,使用同源重组敲除技术构建沙福芽孢杆菌ST7的sigW和rsiW缺失突变株,检测野生株与突变株在运动能力、生物膜形成能力和锰氧化能力方面的差异,比较鞭毛形成相关基因的表达变化。【结果】在非锰胁迫培养条件下sigW和rsiW基因缺失对ST7突变株的生长无明显影响;锰胁迫培养条件下sigW和rsiW基因缺失迟滞突变株的生长。相较于野生株,sigW突变株的运动能力和锰氧化能力减弱,生物膜形成能力增强;rsiW突变株的运动能力减弱,生物膜形成能力和锰氧化能力增强。并且sigW和rsiW突变株中与鞭毛合成相关基因flim、flgd、flii的表达量下降。【结论】sigW和rsiW基因可促进沙福芽孢杆菌的鞭毛合成和运动能力,促进细菌的生长,共同调控菌株的锰氧化能力。 展开更多
关键词 沙福芽孢杆菌 sigW和rsiW基因敲除 鞭毛 运动性 生物膜 锰氧化
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一株高产γ-氨基丁酸短乳杆菌TCCC13007全基因组测序及比较基因组分析 被引量:1
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作者 苗昊翔 张颖 +1 位作者 郭世鹏 张健 《生物技术通报》 北大核心 2025年第11期166-176,共11页
【目的】从东北酸白菜中筛选出一株高产γ-氨基丁酸(GABA)的短乳杆菌TCCC13007,对其开展全基因组测序组装工作,解析该菌株的全基因组序列信息,并进行比较基因组分析,旨在探究菌株TCCC13007高产GABA的分子机理。【方法】运用二代Illumina... 【目的】从东北酸白菜中筛选出一株高产γ-氨基丁酸(GABA)的短乳杆菌TCCC13007,对其开展全基因组测序组装工作,解析该菌株的全基因组序列信息,并进行比较基因组分析,旨在探究菌株TCCC13007高产GABA的分子机理。【方法】运用二代Illumina HiSeq技术测序,在PacBio平台完成三代测序,并结合二、三代测序数据校正结果,对菌株TCCC13007实施全基因组测序,并进行基因预测、功能注释以及比较基因组学分析。【结果】TCCC13007的基因组总长度为2.58 Mb,GC含量为45.72%,包含2581个编码基因。比较基因组分析结果显示,TCCC13007与低产GABA菌株YSJ3的亲缘关系最为接近,二者的共线性关系良好,但也存在少量的插入、倒位和易位等基因重排现象。与YSJ3相比,TCCC13007的gadA基因在基因组中的位置发生了明显的迁移,同时GadR蛋白序列的第104位突变为甘氨酸,另外该菌株中存在308个特异基因。这些特异基因可能在增强谷氨酸前体供应、维持激活谷氨酸脱羧酶(GAD)所需的酸性胞内环境、优化跨膜转运系统、辅因子与能量供应以及调控网络等方面协同发挥作用,从而使TCCC13007具备较高的GABA合成能力。【结论】全基因组测序和比较基因组学分析表明,菌株TCCC13007高产GABA特性并非依赖于基因组的显著扩张,而可能归因于更为精细和高效的基因组合及其调控网络。 展开更多
关键词 Γ-氨基丁酸 短乳杆菌 全基因组测序 基因功能注释 比较基因组学
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灵芝漆酶基因家族的克隆及其在不同发育阶段的表达分析 被引量:1
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作者 刘冬梅 刁文彤 +2 位作者 孙雪言 亓希武 梁呈元 《微生物学杂志》 北大核心 2025年第1期34-42,共9页
为了明确漆酶基因在灵芝生长发育过程中的作用,克隆了灵芝的15个漆酶基因,并对其进行了生物信息学分析,采用qRT-PCR检测了15个漆酶基因在灵芝不同发育阶段的表达水平。结果表明这些漆酶基因的核苷酸序列长度在1814~2570个碱基对之间,含... 为了明确漆酶基因在灵芝生长发育过程中的作用,克隆了灵芝的15个漆酶基因,并对其进行了生物信息学分析,采用qRT-PCR检测了15个漆酶基因在灵芝不同发育阶段的表达水平。结果表明这些漆酶基因的核苷酸序列长度在1814~2570个碱基对之间,含有4~12个内含子,编码517~628个氨基酸;除Glac14外,其余漆酶基因均含有信号肽;15个漆酶的二级结构均以无规则卷曲和延伸链为主;所有灵芝漆酶均含有Cu-oxidase、Cu-oxidase_2和Cu-oxidase_3保守结构域;Gllac1、Gllac8和Gllac10在菌丝阶段高表达,表明它们在营养生长阶段发挥重要作用;Gllac2、Gllac4、Gllac5、Gllac6、Gllac7、Gllac9、Gllac12和Gllac13在成熟子实体阶段高表达,表明它们可能与子实体的分化和成熟有关;Gllac3、Gllac11、Gllac14和Gllac15在整个发育阶段均有表达,但差异不显著,表明它们可能在灵芝整个发育阶段均发挥作用。本研究为进一步阐明漆酶基因在灵芝生长发育阶段的作用及开发应用漆酶提供参考。 展开更多
关键词 灵芝 漆酶 基因克隆 子实体发育 表达水平
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微生物插入序列的多样性及其与功能基因的共现 被引量:1
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作者 钟文婧 苏建强 +1 位作者 李虎 周艳艳 《中国环境科学》 北大核心 2025年第4期2314-2322,共9页
基于ISfinder数据库,结合文献检索,对5812种插入序列(IS)的多样性及其与功能基因的共现关系进行了系统分析.研究表明,不同IS家族(IS family)在宿主中的分布以及与功能基因的共现特征存在差异.DDE转座酶类型IS占据主导地位,IS5和IS3家族... 基于ISfinder数据库,结合文献检索,对5812种插入序列(IS)的多样性及其与功能基因的共现关系进行了系统分析.研究表明,不同IS家族(IS family)在宿主中的分布以及与功能基因的共现特征存在差异.DDE转座酶类型IS占据主导地位,IS5和IS3家族涵盖的IS种类最多,而ISH6最少.IS广泛存在于细菌和古菌中,多个IS家族具有宿主特异性,仅发现于细菌或古菌.进一步分析发现IS与多种功能基因(如抗生素抗性、重金属抗性、应激抗性等)共现,显示出它们在环境适应和微生物抗性基因传播中的重要作用.部分IS具有与多种功能基因共现的特性,展现了更广泛的生态适应性;而另一些IS的共现基因则功能相对专一.实验验证IS在基因传播和宿主适应中的机制是未来研究重点.这不仅有助于理解微生物如何适应环境变化、应对选择压力,还能为抗生素抗性、病原体传播等公共卫生问题提供理论基础,从而为发展新的防控策略和生物技术应用奠定基础. 展开更多
关键词 插入序列 ISfinder数据库 多样性 功能基因 共现
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常压室温等离子体结合高通量筛选技术在微生物育种方面的研究进展 被引量:3
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作者 康竞艺 艾奕伶 +1 位作者 刘秀霞 白仲虎 《微生物学通报》 北大核心 2025年第1期78-89,共12页
常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)是一种新型诱变技术,具有诱变速度快、诱变条件温和、环境友好等特点。由于ARTP诱变的突变体具有高突变频率和良好的遗传稳定性,因此在微生物育种领域应用广泛。本文综... 常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)是一种新型诱变技术,具有诱变速度快、诱变条件温和、环境友好等特点。由于ARTP诱变的突变体具有高突变频率和良好的遗传稳定性,因此在微生物育种领域应用广泛。本文综述了近年来ARTP诱变技术在微生物育种中取得的进展、诱变后突变菌株的筛选策略和ARTP诱导微生物发生突变的机制,并对ARTP目前在微生物诱变育种中存在的问题进行讨论。 展开更多
关键词 ARTP 微生物育种 高通量筛选 突变机制
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根癌农杆菌介导的不产孢紫杉木霉遗传转化体系的建立 被引量:1
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作者 杨颖 万玉 +4 位作者 宋月祺 杨溢 李文浩 刘浩 谢周杰 《生物工程学报》 北大核心 2025年第12期4865-4874,共10页
木霉菌素是一种兼具抗真菌、植物生长调节及抗肿瘤活性的倍半萜类化合物,在医药与农业领域展现出广阔的应用前景。紫杉木霉是从南方红豆杉中分离出的高效木霉菌素生产菌,具有独特的不产生分生孢子的表型,制约了其遗传转化和改造。为了... 木霉菌素是一种兼具抗真菌、植物生长调节及抗肿瘤活性的倍半萜类化合物,在医药与农业领域展现出广阔的应用前景。紫杉木霉是从南方红豆杉中分离出的高效木霉菌素生产菌,具有独特的不产生分生孢子的表型,制约了其遗传转化和改造。为了克服这一遗传操作障碍,实现对该菌株的定向改造,本研究基于建立产孢丝状真菌遗传转化体系的成熟经验,建立了适用于不产孢紫杉木霉的农杆菌介导转化体系。通过系统优化菌丝体预处理(机械研磨法)、侵染时间及共培养条件等关键参数,成功实现了根癌农杆菌对紫杉木霉的高效转化。利用该技术平台,靶向木霉菌素生物合成途径中的关键酶基因——乙酰转移酶基因(tri3),构建了tri3过表达菌株,发现其木霉菌素产量达到1.17 g/L,较出发菌株提升33.3%。本研究所建立的转化体系不仅为紫杉木霉的代谢通路改造及高产菌株培育提供了可靠的技术手段,也为工业上其他不产孢丝状真菌的遗传操作开辟了新路径。 展开更多
关键词 紫杉木霉 木霉菌素 根癌农杆菌 不产孢丝状真菌
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硫酸二乙酯诱变选育乳酸菌菌株的研究 被引量:8
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作者 罗红霞 陈志刚 +3 位作者 孙玉清 马长路 句荣辉 赵磊 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2009年第10期20-23,共4页
为改进酸奶的储藏质量,延长货架期,从酸奶发酵剂入手研究了硫酸二乙酯(DES)诱变乳酸菌的参数,以期选育出抗酸奶后酸化的菌株,从而延长酸奶的保质期。在前期预试验的基础上采用均匀设计试验方案,确定DES浓度、诱变时间、诱变温度的最佳... 为改进酸奶的储藏质量,延长货架期,从酸奶发酵剂入手研究了硫酸二乙酯(DES)诱变乳酸菌的参数,以期选育出抗酸奶后酸化的菌株,从而延长酸奶的保质期。在前期预试验的基础上采用均匀设计试验方案,确定DES浓度、诱变时间、诱变温度的最佳工艺参数。结果表明:影响致死率的因素大小顺序:DES浓度>诱变温度>诱变时间;DES诱变的最佳条件:DES质量分数为0.7%,诱变时间为30min,诱变温度为37℃。筛选得到的突变菌株N01#,在37℃贮藏时产乳酸量与出发菌株一样,而在10℃贮藏时,产乳酸量明显减少;贮藏期与对照相比延长了3d。物性指标(硬度、弹性、黏附性)测定显示良好。 展开更多
关键词 酸奶 乳酸菌 后酸化 DES诱变
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响应第二信使分子环状二核苷酸的细菌核糖开关研究进展
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作者 刘政言 宋馨 +3 位作者 王光强 夏永军 艾连中 熊智强 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第20期378-385,共8页
第二信使分子在细菌响应外界环境变化的信号传导过程中发挥重要作用。环状二核苷酸(cyclic dinucleotides,CDG)是一类新发现的第二信使分子包括环二鸟苷酸(cyclic diguanosine monophosphate,c-di-GMP)和环二腺苷酸(cyclic diadenosine ... 第二信使分子在细菌响应外界环境变化的信号传导过程中发挥重要作用。环状二核苷酸(cyclic dinucleotides,CDG)是一类新发现的第二信使分子包括环二鸟苷酸(cyclic diguanosine monophosphate,c-di-GMP)和环二腺苷酸(cyclic diadenosine monophosphate,c-di-AMP),调控细菌细胞壁代谢、钾离子稳态、生物膜形成和DNA修复等生理功能。为理解CDG分子调控机制,该文综述了响应CDG的核糖开关结构及其调控机制,通过系统分析CDG核糖开关对基因表达的调控作用,旨在深化对信号转导机制的理解,以期为第二信使分子介导的信号网络调控研究提供借鉴。 展开更多
关键词 核糖开关 第二信使分子 环状二核苷酸 环二鸟苷酸 环二腺苷酸
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