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非编码sRNA对细菌适应不同环境压力的调控作用
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作者 刘欢 寇家豪 +4 位作者 刘青 赵洁 王江威 刘俊杰 赵燕妮 《微生物学通报》 北大核心 2026年第3期1176-1187,共12页
细菌在复杂多变的环境中生存,需要快速响应温度、p H、渗透压、金属离子浓度等不同环境压力。近年来,非编码小RNA(small RNA,sRNA)被广泛认为是细菌环境适应性调控的关键因子。sRNA的长度通常为40-500 nt,在细菌中普遍存在。它们通常通... 细菌在复杂多变的环境中生存,需要快速响应温度、p H、渗透压、金属离子浓度等不同环境压力。近年来,非编码小RNA(small RNA,sRNA)被广泛认为是细菌环境适应性调控的关键因子。sRNA的长度通常为40-500 nt,在细菌中普遍存在。它们通常通过碱基互补配对与靶标mRNA相互作用,调控其稳定性或翻译效率,在转录后水平快速实现对外界环境变化的适应。本文综述了sRNA在细菌适应不同环境条件变化中的调控作用的研究进展,对于揭示细菌如何在多变环境中维持生存和致病性机理具有重要意义。 展开更多
关键词 非编码sRNA 环境压力 细菌
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淡水鱼养殖场主要病原菌耐药性及全基因组特征研究
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作者 刘海燕 林枞 +1 位作者 陶未来 张安云 《四川大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第2期457-465,共9页
为揭示淡水鱼重要病原菌的流行、耐药、毒力特征及系统发育关系,本研究采用分离培养和全基因组测序技术,对四川省乐山和眉山市13个淡水鱼养殖场的病鱼样本中分离的重要病原菌进行了系统研究。通过细菌培养法对病原菌进行分离鉴定,采用K-... 为揭示淡水鱼重要病原菌的流行、耐药、毒力特征及系统发育关系,本研究采用分离培养和全基因组测序技术,对四川省乐山和眉山市13个淡水鱼养殖场的病鱼样本中分离的重要病原菌进行了系统研究。通过细菌培养法对病原菌进行分离鉴定,采用K-B纸片扩散法测定其对抗菌药物的敏感性,结合全基因组测序技术分析其耐药基因、毒力因子、多位点序列分型及系统发育关系。结果表明,共鉴定出52株气单胞菌、3株邻单胞菌、5株爱德华氏菌和4株弧菌;病原菌对亚胺培南、复方新诺明和诺氟沙星的耐药性较高,分别达到78.13%、46.88%和45.31%,此外,42.19%的病原菌表现出多重耐药性;在64株病原菌基因组中发现14种一级风险耐药基因(ARGs)和7种二级风险ARGs,气单胞菌中注释到266种毒力因子,弧菌中注释到97种毒力因子;多基因位点序列分型(MLST)分析揭示了淡水鱼养殖场中病原菌的多样性,基于病原菌核心基因SNP构建系统发育树显示,来自不同养殖场的相同序列类型(ST)菌株聚集于同一分支,提示不同养殖场之间可能存在克隆传播和交叉污染的情况。本研究揭示了淡水鱼病原菌耐药性问题的严重性,并指出了克隆传播和交叉感染的可能,作为科学防控提供依据。 展开更多
关键词 淡水鱼养殖场 病原菌 耐药性 交叉感染
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群体感应相关调控子对副溶血弧菌磷酸二酯酶GepA的表达调控
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作者 刘超 李雪 +3 位作者 罗茜 张义全 张苗苗 陆仁飞 《微生物学报》 北大核心 2026年第3期1167-1177,共11页
【目的】研究群体感应系统(quorum sensing,QS)相关调控子AphA、ToxR和QsvR对副溶血弧菌磷酸二酯酶GepA编码基因gepA表达的调控关系。【方法】提取野生株(wild type,WT)和aphA、toxR、qsvR突变株的总RNA,通过实时定量PCR(quantitative r... 【目的】研究群体感应系统(quorum sensing,QS)相关调控子AphA、ToxR和QsvR对副溶血弧菌磷酸二酯酶GepA编码基因gepA表达的调控关系。【方法】提取野生株(wild type,WT)和aphA、toxR、qsvR突变株的总RNA,通过实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)初步分析QS相关调控子对gepA的转录影响;将gepA上游调控区DNA序列克隆入pBBRlux质粒无启动子区的表达生物冷光基因luxCDABE上游,并将lux重组质粒分别导入WT和突变株中,采用lux报告基因融合实验进一步研究QS相关调控子对gepA的调控作用;采用引物延伸(primer extension)法定位gepA的转录起始位点和核心启动子区,并根据引物延伸产物丰度判断QS相关调控子对gepA的调控关系;将gepA的调控区DNA序列克隆入pHRP309质粒中β-半乳糖苷酶基因上游获得LacZ重组质粒,将LacZ重组质粒分别转化入含有pBAD33或pBAD33-qsvR的大肠杆菌EC100λpir中,采用LacZ报告基因融合实验研究在异体宿主中QS相关调控子对gepA转录的调控方式;PCR扩增gepA上游调控区DNA序列,同时表达并纯化QS相关调控子的His重组蛋白,采用凝胶阻滞实验(electrophoresis mobility shift assay,EMSA)研究QS相关调控子是否直接调控gepA的表达。【结果】低密度条件下,qPCR结果显示ΔaphA和ΔtoxR中gepA的转录水平明显低于WT,表明AphA和ToxR激活gepA的转录;lux报告基因融合实验显示,ΔaphA和ΔtoxR中gepA的启动子区转录活性明显低于WT,进一步表明AphA和ToxR促进gepA的转录;引物延伸结果显示,gepA的转录起始位点位于起始密码子ATG上游第30 bp的A,且其转录活性受到AphA的激活;EMSA结果显示,His-AphA和His-ToxR均不能与gepA的调控区DNA序列结合。高密度条件下,qPCR和引物延伸实验结果均显示QsvR抑制gepA的转录;EMSA实验结果显示,His-QsvR直接结合在gepA的启动子区DNA序列上;双质粒报告基因融合实验显示,QsvR可以抑制EC100λpir中gepA的启动子区转录活性。【结论】AphA和ToxR间接激活,而QsvR直接抑制gepA的转录。因此,gepA在低密度条件下转录水平较高,高密度时转录水平明显下降。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 群体感应系统 GepA 转录调控
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拟杆菌遗传操作工具箱:从传统方法到合成生物学前沿 被引量:1
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作者 陈玲嫣 李伟勋 +2 位作者 逄欣欣 高翔 焦绪瑶 《生物技术通报》 北大核心 2026年第2期51-64,共14页
拟杆菌属(Bacteroides)作为人体肠道微生物组中极为丰富且功能重要的共生菌群,在营养代谢、免疫调节及疾病发生中发挥着关键作用。然而,由于该属细菌具有严格厌氧生长的特性及活跃的限制-修饰系统等内在因素,长期以来,针对其的研究面临... 拟杆菌属(Bacteroides)作为人体肠道微生物组中极为丰富且功能重要的共生菌群,在营养代谢、免疫调节及疾病发生中发挥着关键作用。然而,由于该属细菌具有严格厌氧生长的特性及活跃的限制-修饰系统等内在因素,长期以来,针对其的研究面临遗传工具稀缺、操作效率低下等技术瓶颈。本文系统回顾了拟杆菌遗传操作工具箱的发展历程,总结了这些工具在功能基因验证、代谢途径解析及活菌疗法开发等方面的具体应用。文章首先概述了拟杆菌遗传操作所需的基本元件;继而介绍了靶向已知基因的编辑方法,包括同源重组、CRISPR-Cas系统以及基因回补表达系统等;进而阐述了全基因组范围内筛选新功能基因的策略,如转座子诱变等;结合具体案例,分析了这些技术在解析拟杆菌致病机制与代谢调控网络等方面的应用;最后对当前面临的挑战进行展望,指出多位点编辑、群落水平操作等未来发展方向。本综述旨在为研究人员提供一套系统而实用的遗传操作策略,以推动拟杆菌功能机制的深入研究及其在合成生物学领域的应用拓展。 展开更多
关键词 拟杆菌 人类肠道共生菌 遗传操作 基因编辑
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C_(2)H_(2)型转录因子AflAZF1在黄曲霉生长发育与毒素合成调控中的作用
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作者 林竑翊 李明智 +3 位作者 郭慧华 袁军 汪世华 王秀娜 《菌物学报》 北大核心 2026年第2期135-148,共14页
C_(2)H_(2)型转录因子AZF1在真菌中具有调控生长发育、次级代谢及致病等多种生物学功能,但其在黄曲霉中的作用尚不明确。同源序列比对发现,AFLA_054800编码的蛋白与里氏木霉中的AZF1蛋白具有50%的同源性,将其命名为AflAZF1。本研究发现,... C_(2)H_(2)型转录因子AZF1在真菌中具有调控生长发育、次级代谢及致病等多种生物学功能,但其在黄曲霉中的作用尚不明确。同源序列比对发现,AFLA_054800编码的蛋白与里氏木霉中的AZF1蛋白具有50%的同源性,将其命名为AflAZF1。本研究发现,AflAZF1基因缺失菌株(ΔAflAZF1)的菌落大小与野生型无明显差异,但分生孢子产量显著下降,且无法形成菌核。同时,ΔAflAZF1菌株的黄曲霉毒素AFB1产量明显升高。在以葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、蔗糖和木糖为碳源时,ΔAflAZF1菌株的产孢能力相较于野生型显著下降,但在乳糖和甘油中显著上升。此外,在pH 5和pH 11条件下,ΔAflAZF1菌株的分生孢子数量显著少于野生型。研究结果表明,AflAZF1能够调控分生孢子和菌核的形成及AFB_(1)的生物合成,还通过影响产孢能力调节对不同碳源的利用和对极端pH条件的适应性。这一发现揭示了AflAZF1在黄曲霉生长发育与毒素合成中的关键作用,为防治黄曲霉污染及制定新型生物防控策略提供了理论依据。 展开更多
关键词 Aspergillus flavus 锌指蛋白 黄曲霉毒素 生长发育 碳源 酸碱
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皮氏不动杆菌LSQ 3对贝莱斯芽孢杆菌LSQ 19成膜能力的影响及其基因组特性分析
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作者 杨小宇 王志刚 +1 位作者 徐伟慧 旦真阿旺 《微生物学报》 北大核心 2026年第2期753-769,共17页
【目的】探究菌株皮氏不动杆菌(Acinetobacter pittii)LSQ 3对贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)LSQ 19成膜能力的影响,以及菌株LSQ 3的基因组特性。【方法】采用结晶紫染色法、细胞表面特性分析、苯酚硫酸法、XTT还原法和扫描电镜(s... 【目的】探究菌株皮氏不动杆菌(Acinetobacter pittii)LSQ 3对贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)LSQ 19成膜能力的影响,以及菌株LSQ 3的基因组特性。【方法】采用结晶紫染色法、细胞表面特性分析、苯酚硫酸法、XTT还原法和扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察等方法分析LSQ 3无细胞上清液(cell-free supernatant,CFS)对LSQ 19成膜能力的影响;采用全基因组学测序明确菌株LSQ 3的分类学地位,并通过全基因组数据预测其次级代谢产物基因簇。【结果】菌株LSQ 3的CFS显著抑制LSQ 19的生物膜形成,10μL菌液/190μL CFS混合确定为最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。与对照组相比,经菌株LSQ 3的CFS处理(MIC)后LSQ 19细胞的表面疏水性、黏附力、胞外聚合物(extracellular polymeric substances,EPS)产率和生物膜代谢活性均显著降低;自聚集能力与对照组相比显著升高。扫描电镜观察表明,在MIC条件下菌株LSQ 19在玻璃表面未形成生物膜。经全基因组学鉴定,菌株LSQ 3为Acinetobacter pittii,其基因组大小为3939365 bp,G+C含量为38.82%,含有3601个DNA编码序列。其基因组中存在多个与生物膜合成相关的基因及毒力因子。通过antiSMASH分析发,菌株LSQ 3的基因组中含有7种次级代谢物的生物合成基因簇。【结论】A.pittii LSQ 3的无细胞上清液可抑制B.velezensis LSQ 19生物膜的形成,本研究从生物膜的角度为合成菌群的构建提供了理论依据和参考。 展开更多
关键词 皮氏不动杆菌LSQ 3 贝莱斯芽孢杆菌LSQ 19 全基因组测序 无细胞上清液 生物膜形成
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基于比较基因组学对新疆不同地域人源长双歧杆菌长亚种的遗传差异分析
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作者 张慧敏 张雪玲 +1 位作者 孙海龙 倪永清 《微生物学报》 北大核心 2026年第1期301-321,共21页
【目的】以新疆不同地域、不同人群来源的长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum subsp.longum)为研究对象,解析肠道专性共栖细菌在宿主人群中的系统发育和基因组多样性,为针对不同人群开发个性化功能益生菌提供理论依据。【方法】... 【目的】以新疆不同地域、不同人群来源的长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum subsp.longum)为研究对象,解析肠道专性共栖细菌在宿主人群中的系统发育和基因组多样性,为针对不同人群开发个性化功能益生菌提供理论依据。【方法】从地理跨度较大的新疆喀什、伊犁的维吾尔族和哈萨克族母婴人群中分离出136株B.longum subsp.longum,并通过公共数据库整合来自国内其他地域人群的菌株进行比较基因组分析。【结果】B.longum subsp.longum基因组的平均大小、G+C含量、编码序列数量分别为2.38 Mb、59.91%、2160个。基于核心基因构建的系统发育树显示,来自新疆的所有菌株在系统发育树上属于4个进化支(clade),来自同一民族、不同地域人群的菌株其系统发育呈现不同的进化支,地理上更相近、不同人群来源的菌株存在一定程度的重叠。对更大地理范围(全中国)的分析显示,B.longum subsp.longum菌株呈现明显的东西部地理来源聚集特征和协同进化现象。基于附属基因和碳水化合物代谢功能基因的分析显示,来源于同一系统发育进化支的同一民族、不同地域人群菌株的功能基因谱丰度也差异较大;碳水化合物水解酶家族GH13(α-淀粉酶)和GH43(β-木糖苷酶)等在喀什地区菌株基因组中更为丰富;相反,地理上相近、即使来自不同民族人群的菌株,其基因组中蛋白质直系同源簇(cluster of orthologous groups of proteins,COG)功能基因谱、碳水化合物水解酶关联基因家族谱更相似。【结论】新疆不同地域人群来源的B.longum subsp.longum菌株系统发育呈现明显的地理和民族分布特征以及功能基因分布特征,地理尺度范围越大,菌株的地理分布特征越明显。需要基于更大范围菌株基因组的大数据进一步验证人群的地理分布尺度与菌株协同进化和特异性的关系。 展开更多
关键词 长双歧杆菌长亚种 比较基因组学 碳水化合物活性酶
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基于转录组学解析黑曲霉柠檬酸/苹果酸合成代谢机制
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作者 蔺旭刚 苏佳 +4 位作者 柴庆江 刘贵玉 相胜昌 王德培 薛鲜丽 《微生物学报》 北大核心 2026年第2期830-849,共20页
【目的】黑曲霉在pH≤5.0的条件下柠檬酸是主要代谢物,而在pH 6.0时L-苹果酸成为主要代谢物。通过转录组学分析代谢途径中关键基因的差异性,探究2种有机酸的生物合成机制。【方法】分别选取柠檬酸和L-苹果酸发酵过程48 h和72 h的菌体进... 【目的】黑曲霉在pH≤5.0的条件下柠檬酸是主要代谢物,而在pH 6.0时L-苹果酸成为主要代谢物。通过转录组学分析代谢途径中关键基因的差异性,探究2种有机酸的生物合成机制。【方法】分别选取柠檬酸和L-苹果酸发酵过程48 h和72 h的菌体进行转录组学分析。【结果】转录组比较分析(72 h vs.48 h)发现,GO富集分析结果显示合成柠檬酸的相关上调基因集中于碳水化合物代谢过程,而合成L-苹果酸的相关上调基因集中于离子转运过程。酸性蛋白水解酶ANI_1_62014(曲霉菌素II)和ANI_1_654124(天冬氨酸蛋白酶曲pepA)在柠檬酸合成过程中呈现极高的转录水平,而合成脂肪酸链的关键基因ANI_1_2494074[3-氧酰基-(酰基载体蛋白)合酶]和ANI_1_2488074(生物合成脂肪酸合酶亚基β)在L-苹果酸合成途径中呈现极高的转录水平;锌簇类转录因子[Zn(II)2 Cys6 transcription factor]在L-苹果酸合成过程中的转录水平更高;bZIP家族中的HacA、AP-1和AtfA在柠檬酸合成过程中呈现更高的转录水平,以应对环境低pH的抗逆性;与L-苹果酸发酵过程相比,柠檬酸发酵过程中ANI_1_66114(己糖激酶)、ANI_1_2950014(柠檬酸合酶)和ANI_1_478154(柠檬酸转运蛋白)或ANI_1_3136024(异柠檬酸脱氢酶)分别呈现较高或较低的转录水平。高效的糖酵解、柠檬酸合成和柠檬酸转运能力以及低异柠檬酸脱氢酶水平是柠檬酸大量生成的关键因素。在L-苹果酸发酵过程中,胞质ANI_1_440184(丙酮酸羧化酶)、胞质ANI_1_12134(苹果酸脱氢酶)、ANI_1_914104(异柠檬酸裂解酶)和ANI_1_2040144(苹果酸转运蛋白)呈现较高的转录水平,表明胞质rTCA途径和乙醛酸羧化途径是L-苹果酸合成的主要途径。【结论】本研究通过分析整合转录组数据,推测了生成柠檬酸和L-苹果酸的关键差异代谢通路,并筛选出显著差异表达的核心基因、转录因子及潜在转运蛋白。这些结果为解析柠檬酸与L-苹果酸合成的调控机制提供了重要线索和理论依据。 展开更多
关键词 黑曲霉 柠檬酸 L-苹果酸 转录组 差异基因
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红树林沉积物氟耐受细菌多样性分析及高耐氟细菌筛选
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作者 黄媛林 梁敏 杨登峰 《广西科学》 北大核心 2026年第1期125-132,共8页
为获得能耐受高浓度氟离子的微生物,本研究以海南东寨港国家级自然保护区的沉积物为研究对象,分析沉积物中氟耐受细菌的多样性,并筛选出高耐氟细菌。系统发育分析结果表明,沉积物中共分离得到22种氟耐受细菌,隶属于3门5纲9目12科18属,... 为获得能耐受高浓度氟离子的微生物,本研究以海南东寨港国家级自然保护区的沉积物为研究对象,分析沉积物中氟耐受细菌的多样性,并筛选出高耐氟细菌。系统发育分析结果表明,沉积物中共分离得到22种氟耐受细菌,隶属于3门5纲9目12科18属,沉积物中的氟耐受细菌多样性丰富。高耐氟细菌筛选结果表明,14株细菌耐受50 mmol/L NaF,其中有5株细菌耐受200 mmol/L NaF,分布于4个属并来源于不同样品,说明海南东寨港国家级自然保护区不同地域间沉积物中均具有高耐氟细菌。通过氟胁迫条件下的生长曲线监测,筛选获得一株在200 mmol/L NaF浓度下仍能良好生长的细菌,经鉴定命名为Agrobacterium salinitolerans 3223。特异性引物PCR扩增和蛋白电泳结果显示,菌株Agrobacterium salinitolerans 3223携带氟耐受基因crcB,且在氟离子诱导下表达出新的蛋白条带。综上,海南东寨港红树林沉积物蕴含着丰富的氟耐受细菌,菌株Agrobacterium salinitolerans 3223具有良好的高耐氟能力,其氟耐受机制及是否存在含氟代谢产物有待进一步研究。 展开更多
关键词 红树林沉积物 氟耐受 细菌 多样性 crcB
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AfsR-AfsS双组分系统调控链霉菌抗生素合成的研究进展
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作者 薛梓鑫 杜春梅 《科学通报》 北大核心 2026年第10期2245-2255,共11页
链霉菌抗生素的生物合成受到不同环境背景下的复杂监管网络的调控.其中, AfsR-AfsS双组分系统(twocomponent system, TCS)位于相对较高的调控层级并起关键调控作用.然而,在自然生境中AfsR-AfsS TCS在链霉菌全局调控网络中的重要性、及... 链霉菌抗生素的生物合成受到不同环境背景下的复杂监管网络的调控.其中, AfsR-AfsS双组分系统(twocomponent system, TCS)位于相对较高的调控层级并起关键调控作用.然而,在自然生境中AfsR-AfsS TCS在链霉菌全局调控网络中的重要性、及其与其他相关调控系统之间协同作用的分子机制尚未得到充分探讨,而其在不同链霉菌物种之间调控模式和效力的显著差异性和多样性暗示了当前认知的局限性.本文介绍了AfsR和AfsS的结构域构成,强调具有DNA结合域的AfsR可以直接或通过与AfsS形成蛋白质复合体靶向包括afsS在内的多基因的表达,AfsS由于缺乏DNA结合域,其调控机制还不清楚.同时总结了其上游感受器AfsK、调节器KbpA和信号分子S-腺苷甲硫氨酸的级联调控模式,概述了其与调控磷代谢的PhoR-PhoP TCS以及控制形态发育的全局转录调控因子Bld之间的串扰,归纳了以AfsR-AfsS TCS为核心的级联系统通过感知环境信号影响天蓝色链霉菌、除虫链霉菌、始旋链霉菌、洛蒙德链霉菌中特定抗生素合成的机制.本文强调了AfsR-AfsS TCS在链霉菌抗生素合成调控网络中的核心地位和种间调控差异,为靶向提高抗生素产量和开发新型抗生素,以及深度解析AfsR-AfsS与相关信号系统协同应对环境变化的动态响应机制提供理论依据. 展开更多
关键词 链霉菌 双组分系统 AfsR-AfsS 抗生素 调控机制
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基于转录组分析紫色红曲霉全局性转录调控因子McrA的功能
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作者 潘妍妍 杨季学 +2 位作者 于宗训 胡佳燕 蒋冬花 《微生物学报》 北大核心 2026年第1期284-300,共17页
红曲霉作为传统发酵食用菌因其丰富的次级代谢产物广泛应用于酿酒、食品着色剂和药品等行业。McrA是在构巢曲霉(Aspergillus nidulans)中发现的全局性转录调控因子,具有调控丝状真菌生长发育和次级代谢的作用。前期,实验室已找到并克隆... 红曲霉作为传统发酵食用菌因其丰富的次级代谢产物广泛应用于酿酒、食品着色剂和药品等行业。McrA是在构巢曲霉(Aspergillus nidulans)中发现的全局性转录调控因子,具有调控丝状真菌生长发育和次级代谢的作用。前期,实验室已找到并克隆了紫色红曲霉(Monascus purpureus)中的mcrA基因。【目的】基于转录组分析ΔmcrA和trpC:mcrA差异表达基因,探究mcrA基因的功能。【方法】利用同源重组的方法构建ΔmcrA和trpC:mcrA菌株,观察其在不同培养基上的菌落和显微形态,测定红曲色素和桔霉素产量,并进行转录组测序分析差异表达基因涉及的代谢通路。【结果】敲除株ΔmcrA的红曲色素和桔霉素产量下降。转录组测序结果显示,ΔmcrA菌株有111个基因上调,47个基因下调。ΔmcrA菌株差异基因涉及的代谢通路主要有糖酵解、丙酮酸代谢、脂肪酸合成、酪氨酸代谢等。trpC:mcrA菌株有1199个基因上调,867个基因下调。trpC:mcrA差异基因涉及的代谢通路主要有色氨酸代谢、蔗糖和淀粉代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、脂肪酸降解等。【结论】McrA作为全局性转录调控因子,敲除和过表达会影响糖类、脂质、氨基酸相关代谢通路,进而影响次级代谢产物产量。 展开更多
关键词 紫色红曲霉 全局性转录调控因子McrA 次级代谢产物 调控基因
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转录因子PdTP1在指状青霉中调控α-松油醇合成及菌株生长的分子机制
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作者 黄佳琳 张婷 +6 位作者 王子轩 张佳月 王婧玥 安康 程慧如 王静文 张璐璐 《现代食品科技》 北大核心 2026年第3期64-74,共11页
为了完善Zn_(2)Cys_(6)型转录因子PdTP1的调控网络,该研究通过转录组测序技术筛选与指状青霉(Penicillium digitatum)DSM 62840生物转化柠檬烯生成α-松油醇及调控菌株生长相关的基因,挖掘相关通路。该研究通过对野生型菌株DSM 62840和P... 为了完善Zn_(2)Cys_(6)型转录因子PdTP1的调控网络,该研究通过转录组测序技术筛选与指状青霉(Penicillium digitatum)DSM 62840生物转化柠檬烯生成α-松油醇及调控菌株生长相关的基因,挖掘相关通路。该研究通过对野生型菌株DSM 62840和PdTP1沉默菌株进行转录组测序来探究差异表达基因的主要代谢途径及生物学功能,并结合荧光定量PCR验证转录组测序结果的可靠性。结果表明,共鉴定到差异表达基因1221个,其中上调基因499个,下调基因722个,GO和KEGG分析显示这些差异表达基因显著富集在糖、氨基酸、脂肪酸等物质的代谢与合成过程中。其中,一些与萜类代谢或合成、真菌生长以及应激响应相关基因的表达明显受到PdTP1的调控,表明这些基因可能在参与柠檬烯生物转化生成α-松油醇、调控指状青霉生长中发挥重要作用。荧光定量PCR的实验结果也证实了转录组的可靠性。综上,该研究通过研究PdTP1调控基因转录水平上的变化,完善了其转录调控网络,进一步为阐明转录因子PdTP1在调控α-松油醇合成及菌株生长中的分子机制提供依据。 展开更多
关键词 转录因子PdTP1 Α-松油醇 菌株生长 转录组 基因
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Fitness and resistance mechanism of Fusarium pseudograminearum mutants resistant to fludioxonil
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作者 TIAN Yingming CHEN Yawei +3 位作者 DUAN Xiaoxin ZHENG Wei XU Jianqiang HOU Ying 《农药学学报》 北大核心 2026年第2期277-291,244,共16页
Fusarium crown rot(FCR),predominantly caused by Fusarium pseudograminearum,has been listed as a Category Ⅱ disease in six provinces of China,posing a significant threat to wheat production.The phenylpyrrole fungicide... Fusarium crown rot(FCR),predominantly caused by Fusarium pseudograminearum,has been listed as a Category Ⅱ disease in six provinces of China,posing a significant threat to wheat production.The phenylpyrrole fungicide fludioxonil is a key agent for FCR control.Previous studies indicated that resistance to fludioxonil in F.pseudograminearum is primarily associated with altered expression levels of the FpOS1 gene,which encodes a hybrid histidine kinase.However,the roles of mutations in other FpOS genes and the molecular interactions between FpOS proteins and fludioxonil remain elusive.To address these gaps,we generated 16 fludioxonil-resistant mutants with heritable resistance traits by in vitro selection of four sensitive F.pseudograminearum isolates.These mutants exhibited high resistance levels,with resistance factors(RF)ranging from 633.73 to 8617.07.Compared to their parental isolates,the resistant mutants showed significantly reduced mycelial growth rate,sporulation capacity,and pathogenicity.They were also more sensitive to ionic,osmotic,and oxidative stresses and displayed compromised cell wall and membrane integrity.Fludioxonil demonstrated no cross-resistance with tebuconazole or pydiflumetofen;however,it exhibited weak positive crossresistance to pyraclostrobin and moderate positive cross-resistance to iprodione.Fludioxonil treatment significantly promoted glycerol synthesis and inhibited deoxynivalenol(DON)production in parental isolates,whereas these regulatory effects were markedly attenuated in the resistant mutants.Mutation analysis identified mutation sites in FpOS1,FpOS4,and FpOS5 genes,with a lower mutation frequency in FpOS1 and no mutations detected in FpOS2.Molecular docking indicated that amino acid substitutions in FpOS4 and FpOS5 significantly reduced the binding affinity of fludioxonil to these target proteins.In conclusion,F.pseudograminearum poses a moderate risk of resistance to fludioxonil.Point mutations in FpOS4 and FpOS5 genes emerge as key molecular drivers of resistance,likely by diminishing the binding affinity between the fungicide and its proteins.This study clarifies the molecular basis of fludioxonil resistance in F.pseudograminearum and provides a scientific rationale for the judicious use of this fungicide in managing FCR. 展开更多
关键词 Fusarium pseudograminearum fludioxonil resistant mutant survival fitness resistant mechanism
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可编程反义寡聚物介导的基因沉默-用于噬菌体功能基因组研究
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作者 李钧豪 李淑艳 《生理科学进展》 北大核心 2026年第1期100-100,共1页
噬菌体具有广泛的遗传和表型多样性。在噬菌体与宿主互作中,有哪些基因参与并对这些基因进行定位与表征,是理解噬菌体特性、挖掘其应用价值的关键。最近,Gerovac等在《Nature》上发表了可用于噬菌体功能基因组研究、可编程的外源递送反... 噬菌体具有广泛的遗传和表型多样性。在噬菌体与宿主互作中,有哪些基因参与并对这些基因进行定位与表征,是理解噬菌体特性、挖掘其应用价值的关键。最近,Gerovac等在《Nature》上发表了可用于噬菌体功能基因组研究、可编程的外源递送反义寡聚物(antisense oligomers,ASOs)的文章,作者通过该方法系统地靶向抑制噬菌体mRNA的翻译,并结合表型、转录组和蛋白质组分析,发现了ΦKZ噬菌体中调控复制周期的新的蛋白质,其中包括一个保守的RNA酶H样蛋白-ΦKZ155蛋白(也称为Nlp2),它在ΦKZ噬菌体基因组扩增前的一个关键决策点发挥作用。 展开更多
关键词 反义寡聚物 功能基因组 RNA酶H样蛋白 基因沉默
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Regulatory mechanisms and adaptive functions of small RNAs in extremophilic microorganisms
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作者 JIANG Wanning DUAN Zedong +4 位作者 LAI Tingyi ZHANG Siqi YU Yong DING Haitao LIAO Li 《Advances in Polar Science》 2026年第1期35-42,共8页
Small RNAs(sRNAs)are important non-coding RNAs that usually play crucial roles in gene expression at the post-transcriptional level.The sRNAs have mostly been investigated in model microorganisms such as Escherichia c... Small RNAs(sRNAs)are important non-coding RNAs that usually play crucial roles in gene expression at the post-transcriptional level.The sRNAs have mostly been investigated in model microorganisms such as Escherichia coli and some pathogens.Nevertheless,microbial sRNAs from extreme environments such as the polar regions and deep sea have recently been discovered and analyzed for their unique roles in stress response,metabolic regulation and adaptation to extreme environments.These sRNAs fine-tune gene expression during oxidative and radiation stress,and modulate temperature and osmotic pressure responses.Representative sRNAs and their functions in thermophilic,psychrophilic,halophilic and radiation-tolerant bacteria are summarized in this review.Despite challenges in sample collection,RNA isolation,and functional annotation,the study of sRNAs in extreme environments provides opportunities for discovering novel regulatory mechanisms,applying them to biotechnology,and advancing our understanding of evolutionary adaptations.Looking ahead,high-throughput sequencing,synthetic biology,and multi-omics integration will bring new breakthroughs in discovering novel sRNAs and their functions and regulatory mechanisms.Such advancements are poised to enable comprehensive characterization of sRNA-mediated regulatory networks in extremophiles and unlock their biotechnological potential through mechanism-driven applications. 展开更多
关键词 small RNAs extremophilic microorganisms regulatory mechanisms adaptive functions
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圈养野生动物源产气荚膜梭菌分离株的MLST分型及毒力基因分析
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作者 徐春忠 徐锋 王建 《野生动物学报》 北大核心 2025年第3期674-680,共7页
为了解上海地区动物园流行的产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的ST型,探讨其可能的遗传进化关系和潜在致病性,通过细菌基因组框架图测序对10株产气荚膜梭菌进行回顾性研究,对菌株MLST分型和致病性进行分析。结果显示:10株菌均为A... 为了解上海地区动物园流行的产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的ST型,探讨其可能的遗传进化关系和潜在致病性,通过细菌基因组框架图测序对10株产气荚膜梭菌进行回顾性研究,对菌株MLST分型和致病性进行分析。结果显示:10株菌均为A型产气荚膜梭菌,分属于6个新的ST型,并携带有大量的毒力基因,包括plc(α毒素)、pfoA(θ毒素)等16种主要的毒力因子,以及hlyⅢ、hlyB等22种可能来源于其他菌属的毒力基因。研究发现,动物园的产气荚膜梭菌以A型为主,但存在遗传多样性、宿主多样性等特点,同时携带大量的毒力因子对人和动物均存在较大的风险。 展开更多
关键词 动物园 产气荚膜梭菌 多位点序列分型 致病性
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弧菌基因组中抗噬菌体防御系统的构成与分布特征分析
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作者 徐雪峰 金兴坤 +1 位作者 史燕 赵哲 《遗传》 北大核心 2025年第9期1057-1068,共12页
细菌与其病毒(噬菌体)的长期共同演化推动了抗噬菌体防御系统的多样化发展。弧菌属细菌作为海洋生态系统的重要成员,具有庞大且复杂的基因组。为揭示弧菌属成员基因组中抗噬菌体防御系统的构成及分布特征,本研究从GTDB、NCBI数据库中收... 细菌与其病毒(噬菌体)的长期共同演化推动了抗噬菌体防御系统的多样化发展。弧菌属细菌作为海洋生态系统的重要成员,具有庞大且复杂的基因组。为揭示弧菌属成员基因组中抗噬菌体防御系统的构成及分布特征,本研究从GTDB、NCBI数据库中收集了242个弧菌属代表性基因组,利用Defense Finder等生物信息学工具对其编码的抗噬菌体防御系统进行分析,共鉴定出108种不同的抗噬菌体防御系统,包括GAPS系统、dGTPase系统、RM系统等。不同弧菌菌株的防御能力存在显著差异:5个菌株编码超过20种防御系统,显示出较高的防御潜力;超过30个菌株仅编码5种或更少的防御系统;特别是在‘Vibrio katoptron’中未发现任何已知的防御系统。不同弧菌分支的防御系统多样性也存在差异,其中Cholerae分支的防御系统多样性(防御熵)最高。此外,对这些防御系统的组成、结构及功能机制进行了深入分析。弧菌属细菌拥有复杂多样的抗噬菌体防御系统,但许多系统的具体功能尚未明确。由于弧菌基因组的复杂性,未来仍有许多潜在的防御系统有待发现。本研究系统揭示了弧菌属防御系统的基因组结构特征,为深入探索弧菌与噬菌体的相互作用及其演化动态提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 弧菌 噬菌体 抗噬菌体防御系统 微生物相互作用 生物信息学分析
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转录组分析凝结芽孢杆菌二次生长调控因素
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作者 陈琛 刘慧贤 +3 位作者 魏丽雅 黄亚男 陈雄 王志 《工业微生物》 2025年第6期140-148,共9页
为研究凝结芽孢杆菌HB发酵二次生长的调控因素,文章基于转录组水平分析了HB在30 L发酵罐培养对数期(9 h)与稳定期(17 h)的代谢差异。结果表明,该菌稳定期氧化应激和能量代谢基因spxH、katA、bsh、poxB、grx、ahpC、recA、dps、cyd A、n... 为研究凝结芽孢杆菌HB发酵二次生长的调控因素,文章基于转录组水平分析了HB在30 L发酵罐培养对数期(9 h)与稳定期(17 h)的代谢差异。结果表明,该菌稳定期氧化应激和能量代谢基因spxH、katA、bsh、poxB、grx、ahpC、recA、dps、cyd A、namA下调2.85~33.36倍;乙醛酸循环基因ace A、ace B分别上调6.14、3.07倍;三羧酸循环(TCA)关键酶基因ic d、acnA分别下调2.14、2.21倍。同时,磷酸转运基因pstB1、pstB2、pstA、pstC、pstS在稳定期上调48.84~290.02倍;磷壁酸合成基因tag F、tag A、tag B下调5.70~104.69倍;脯氨酸转运和分解代谢基因opuCA、putB、roc A上调2.71~3.42倍。脂肪酸β-氧化基因dhaS、acdh、fadA、mmg A稳定期上调2.01~37.79倍。RT-qPCR对关键基因表达差异进行了验证,发现dps、putB、pstS和acsA上调2.8~5.9倍;ac n A、cydA和tag A基因下调6.6~62.7倍,与转录组差异分析一致。这表明,细胞通过氧化应激途径、脂肪酸代谢途径、乙醛酸循环、脯氨酸转运和代谢途径、磷转运代谢途径的适应性调控支撑自身二次生长。研究结果为凝结芽孢杆菌工业化生产提供了理论支撑。 展开更多
关键词 凝结芽孢杆菌 细胞生长 代谢 转录组 RT-QPCR
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急性氨影响副溶血弧菌的基因表达谱
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作者 王健 罗茜 +2 位作者 李雪 张义全 陆仁飞 《南通大学学报(医学版)》 2025年第4期362-369,共8页
目的:探究急性氨对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)基因表达和功能表型的影响。方法:以未添加NH4Cl的培养条件为对照组,添加了终质量浓度为71.68 mg/L NH4Cl(模拟急性氨)的培养条件为实验组,采用RNA-seq技术检测VP的基因表达情... 目的:探究急性氨对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)基因表达和功能表型的影响。方法:以未添加NH4Cl的培养条件为对照组,添加了终质量浓度为71.68 mg/L NH4Cl(模拟急性氨)的培养条件为实验组,采用RNA-seq技术检测VP的基因表达情况。同时,采用结晶紫染色、动力表型检测以及环二鸟苷酸(cyclic diguanylate,c-di-GMP)含量测定等一系列表型实验,分析急性氨对VP功能表型的影响。结果:急性氨共导致661个基因的转录水平发生显著改变,包括379个下调基因和282个上调基因,这些基因主要集中于细胞代谢通路,特别是与氨基酸转运与代谢、能量产生与转换密切相关的基因。此外,急性氨还对一些生物膜形成相关基因、c-di-GMP代谢相关基因、鞭毛基因以及一些关键毒力因子基因的转录发挥调控作用。然而,对于这些基因所对应的功能表型,急性氨却未表现出调控作用。结论:急性氨能够引发VP中大量基因的转录,尤其是代谢相关的基因,但它对生物膜形成、ci-di-GMP代谢以及运动性等功能表型无调控作用。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 急性氨 RNA-SEQ 基因表达 功能表型
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微生物细胞代谢与环境适应调控研究进展 被引量:4
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作者 刘源 胡贵鹏 +3 位作者 李晓敏 刘佳 高聪 刘立明 《生物工程学报》 北大核心 2025年第3期1133-1151,共19页
感应代谢与环境变化并做出自适应调控是细胞生命活动的关键。近年来,随着合成生物学技术的进步,越来越多的细胞感知代谢和环境差异的机制被揭示,同时相关应用也日益广泛。然而,目前缺乏关于细胞代谢与环境适应调控的研究的系统性综述。... 感应代谢与环境变化并做出自适应调控是细胞生命活动的关键。近年来,随着合成生物学技术的进步,越来越多的细胞感知代谢和环境差异的机制被揭示,同时相关应用也日益广泛。然而,目前缺乏关于细胞代谢与环境适应调控的研究的系统性综述。本文介绍了细胞感知代谢和环境差异的关键跨膜蛋白及感应蛋白;总结了细胞在应对胞内外代谢差异时的天然自适应调控机制;从动态调控、理性代谢工程改造和适应性进化这3个方面探讨了基于细胞自适应调控的应用场景,并展望未来的发展方向。本文不仅为细胞感知代谢和环境变化的机制研究提供了系统性视角,还为合成生物学领域的进一步创新应用奠定了理论基础。随着未来技术的不断发展,深入理解细胞自适应调控机制有望推动新型生物制造平台的开发与应用。 展开更多
关键词 细胞 感应 代谢 环境 自适应调控
原文传递
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