CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9)基因编辑技术可以对特定基因进行改造,从而实现目标性状的定向改良,在作物遗传改良中具有良好的应用前景。而基于雄性不育系...CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9)基因编辑技术可以对特定基因进行改造,从而实现目标性状的定向改良,在作物遗传改良中具有良好的应用前景。而基于雄性不育系建立的杂交水稻育种体系是水稻杂种优势利用的重要途径,编辑水稻雄性不育基因能够定向创制新的雄性不育种质,有助于丰富杂交水稻不育系遗传资源,更好地利用水稻杂种优势。综述了CRISPR/Cas9基因编辑技术创制水稻雄性不育系的研究进展,展望了基因编辑水稻雄性不育系未来研究方向,以期为杂交水稻育种技术的创新与发展提供参考。展开更多
为探讨病毒如何利用宿主细胞自噬机制进行复制和传播提供研究模型,本研究利用CRISPR/Cas9系统构建ATG5基因敲除细胞系。首先针对非洲绿猴肾细胞(Vero)的ATG5基因设计靶向sgRNA序列,并将其连接到慢病毒载体中,包装得到重组慢病毒,用其感...为探讨病毒如何利用宿主细胞自噬机制进行复制和传播提供研究模型,本研究利用CRISPR/Cas9系统构建ATG5基因敲除细胞系。首先针对非洲绿猴肾细胞(Vero)的ATG5基因设计靶向sgRNA序列,并将其连接到慢病毒载体中,包装得到重组慢病毒,用其感染Vero-SN细胞,经过筛选得到ATG5基因敲除的亚克隆细胞系。利用TCID_(50)和Western-blot技术检测小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)分别在Vero-SN细胞和ATG5基因敲除细胞系中的复制能力。结果表明,本研究成功建立了VeroSN-ATG5KO细胞系,且抑制细胞自噬不利于病毒复制。该基因敲除细胞系的建立为后续探究病毒与自噬蛋白的相互作用及分子机制提供了试验材料。展开更多
文摘CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9)基因编辑技术可以对特定基因进行改造,从而实现目标性状的定向改良,在作物遗传改良中具有良好的应用前景。而基于雄性不育系建立的杂交水稻育种体系是水稻杂种优势利用的重要途径,编辑水稻雄性不育基因能够定向创制新的雄性不育种质,有助于丰富杂交水稻不育系遗传资源,更好地利用水稻杂种优势。综述了CRISPR/Cas9基因编辑技术创制水稻雄性不育系的研究进展,展望了基因编辑水稻雄性不育系未来研究方向,以期为杂交水稻育种技术的创新与发展提供参考。
文摘为探讨病毒如何利用宿主细胞自噬机制进行复制和传播提供研究模型,本研究利用CRISPR/Cas9系统构建ATG5基因敲除细胞系。首先针对非洲绿猴肾细胞(Vero)的ATG5基因设计靶向sgRNA序列,并将其连接到慢病毒载体中,包装得到重组慢病毒,用其感染Vero-SN细胞,经过筛选得到ATG5基因敲除的亚克隆细胞系。利用TCID_(50)和Western-blot技术检测小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)分别在Vero-SN细胞和ATG5基因敲除细胞系中的复制能力。结果表明,本研究成功建立了VeroSN-ATG5KO细胞系,且抑制细胞自噬不利于病毒复制。该基因敲除细胞系的建立为后续探究病毒与自噬蛋白的相互作用及分子机制提供了试验材料。
